AO DE LA DE LA INTEGRACIN NACIONAL Y EL RECONOMIENTO DE NUESTRA DIVERSIDAD

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

CURSO: CICLO: PROFESOR: QUMICA ORGNICA 2012- II TEFILO CHIRE

INFORME N5

Cromatografia
Grupo: B*
Horario: LUNES 11:00am a 1:00pm

ESTUDIANTES:
APELLIDOS Y NOMBRE: CDIGO CARRERA

Dvila Vilca Christian Vargas Pradinett Randall Tolentino Caroly

20120165 20120180

Meteorologa Meteorologa

LA MOLINA 2012

INTRODUCCIN La cromatografa es una tcnica que permite la separacin de los componentes de una mezcla debido a la influencia de dos efectos contrapuestos. a) Retencin. Efecto producido sobre los componentes de la mezcla por una fase estacionaria, que puede ser un slido o un lquido anclado a un soporte slido. b) Desplazamiento. Efecto ejercido sobre los componentes de la mezcla por una fase mvil, que puede ser un lquido o un gas. El fenmeno de migracin de los componentes de una mezcla a lo largo de la fase estacionaria, impulsados por la fase mvil, recibe el nombre de elucin. La mezcla a separar se deposita sobre la fase estacionara, mientras que la mvil atraviesa el sistema desplazando a los componentes de la mezcla a distinta velocidad, dependiendo de la magnitud de sus interacciones relativas con ambas fases. Las dos fases se eligen de forma que los componentes de la muestra se distribuyan de modo distinto entre la fase mvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente con el flujo de la fase mvil; por el contrario los componentes que se unen dbilmente a la fase estacionaria, se mueven con rapidez. Como consecuencia de la distinta movilidad, los componentes de la muestra se separan en bandas o zonas discretas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.

CROMATOGRAFA La cromatografa es un mtodo fsico o de separacin para la caracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin en todas las ramas de la ciencia y la fsica. Es un conjunto de tcnicas basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Las tcnicas cromatogrficas1 son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase mvil que consiste en un fluido (gas, lquido o fluido supercrtico) que arrastra a la muestra a travs de una fase estacionaria que se trata de un slido o un lquido fijado en un slido. Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Despus de que los componentes hayan pasado por la fase estacionaria, separndose, pasan por un detector que genera una seal que puede depender de la concentracin y del tipo de compuesto. Diferencias sutiles en el coeficiente de particin de los compuestos da como resultado una retencin diferencial sobre la fase estacionaria y por tanto una separacin efectiva en funcin de los tiempos de retencin de cada componente de la mezcla. La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no se excluyen mutuamente:

Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas sntesis). Medir la proporcin de los componentes de la mezcla (finalidad analtica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeas.

TIPOS DE CROMATOGRAFA. Dependiendo de la naturaleza de la fase estacionaria y de la fase mvil se pueden distinguir distintos tipos de cromatografa a) b) c) d) Cromatografa slido-lquido. La fase estacionaria es un slido y la mvil un lquido. Cromatografa lquido-lquido. La fase estacionaria es un lquido anclado a un soporte slido. Cromatografa lquido-gas. La fase estacionaria es un lquido no voltil impregnado en un slido y la fase mvil es un gas. Cromatografa slido-gas. La fase estacionaria es un slido y la mvil un gas.

Segn el tipo de interaccin que se establece entre los componentes de la mezcla y la fase mvil y estacionaria podemos distinguir entre. a) Cromatografa de adsorcin. La fase estacionaria es un slido polar capaz de adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo polar. Cromatografa de particin. La separacin se basa en las diferencias de solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y mvil, que son ambas lquidas. Cromatografa de intercambio inico. La fase estacionaria es un slido que lleva anclados grupos funcionales ionizables cuya carga se puede intercambiar por aquellos iones presentes en la fase mvil.

b)

c)

CROMATOGRAFA DE ADSORCIN La adsorcin es la propiedad que tienen ciertos slidos de aumentar la concentracin en su superficie de otras sustancias. La separacin se debe a las diferencias de adsorcin de los componentes de una mezcla sobre la fase estacionaria. La fase estacionaria ha de ser un slido polar de gran superficie (adsorbente). La fase mvil puede ser un gas o un lquido dando lugar a la cromatografa gas-slido (CGS) o lquido-slido (CLS). El grado de adsorcin vara segn la naturaleza y superficie especfica de los adsorbentes y naturaleza de los solutos. Los enlaces entre molculas adsorbidas y el adsorbente han de ser dbiles para que su fijacin sea reversible, las uniones son debidas a fuerzas intermoleculares (interacciones dipolo-dipolo o puentes de hidrgeno). Como regla general, las polaridades del adsorbente y de los solutos han de ser opuestas. CROMATOGRAFA LQUIDO-SLIDO (CLS). La fase estacionaria est constituida por un slido polar poroso y que esta finamente granulado. La superficie especfica contiene centros polares aptos para la adsorcin de las molculas polares presentes en la fase mvil. Al disminuir el tamao de las partculas, el nmero de centros activos por unida es mayor, y la capacidad de adsorcin se incrementa. El adsorbente ms utilizado es gel de slice aunque tambin se emplea almina activada. En el caso del gel de slice la interaccin se establece entre los grupos Si-OH y Si-O-Si, y los grupos funcionales polares de los compuestos orgnicos. La fase mvil est constituida por un disolvente en el que los componentes de la mezcla deben ser al menos parcialmente solubles. La velocidad de elucin de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase mvil y se puede utilizar un gradiente de polaridad aumentando con el tiempo la proporcin del disolvente ms polar. PRPEDADES DE LOS DISOLVENTES MS COMUNES
Disolvente Formula Qumica Punto de ebullicin Constante dielectrica Densidad

Disolventes no polares Hexano Benceno CH3-(CH2)4-CH3 C6H6 69 C 80 C 2,0 2,3 0,655 g/ml 0,879 g/ml

Tolueno ter dietlico Cloroformo Acetato de etilo

C6H5-CH3 CH3CH2-O-CH2-CH3 CHCl3 CH3-C(=O)-O-CH2-CH3

111 C 35 C 61 C 77 C

2,4 4,3 4,8 6,0

0,867 g/ml 0,713 g/ml 1,498 g/ml 0,894 g/ml

Disolventes polares aprticos 1,4-Dioxano Tetrahidrofurano (THF) Diclorometano (DCM) Acetona Acetonitrilo (MeCN) Dimetilformamida (DMF) Dimetil sulfxido (DMSO) CH2-CH2-O-CH2-CH2-O CH2-CH2-O-CH2-CH2 CH2Cl2 CH3-C(=O)-CH3 CH3-CN H-C(=O)N(CH3)2 CH3-S(=O)-CH3 101 C 66 C 40 C 56 C 82 C 153 C 189 C 2,3 7,5 9,1 21 37 38 47 1,033 g/ml 0,886 g/ml 1,326 g/ml 0,786 g/ml 0,786 g/ml 0,944 g/ml 1,092 g/ml

Disolventes polares prticos cido actico n-Butanol Isopropanol (IPA) n-Propanol Etanol Metanol cido frmico Agua CH3-C(=O)OH CH3-CH2-CH2-CH2-OH CH3-CH(-OH)-CH3 CH3-CH2-CH2-OH CH3-CH2-OH CH3-OH H-C(=O)OH H-O-H 118 C 118 C 82 C 97 C 79 C 65 C 100 C 100 C 6,2 18 18 20 24 33 58 82 1,049 g/ml 0,810 g/ml 0,785 g/ml 0,803 g/ml 0,789 g/ml 0,791 g/ml 1,21 g/ml 1,000 g/ml

La retencin se realiza en base a la competencia que se establece entre el soluto a separar (S) y las molculas de la fase mvil (M) por adsorberse a los centros activos polares (X) de la fase estacionaria. As las molculas de soluto se

adsorben a los centros activos de la fase estacionaria y van siendo desplazados por las molculas polares presentes en la fase mvil. Los tiempos de retencin y la selectividad en la separacin dependern de la polaridad de los compuestos a separar (S), la naturaleza del adsorbente (X) y la naturaleza de los disolventes que componen la fase mvil (M). CROMATOGRAFA EN CAPA FINA. La cromatografa en capa fina se basa en la preparacin de una capa, uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede ser de vidrio, aluminio u otro soporte. La fase mvil es lquida y la fase estacionaria consiste en un slido. La fase estacionaria ser un componente polar y el eluyente ser por lo general menos polar que la fase estacionaria, de forma que los componentes que se desplacen con mayor velocidad sern los menos polares. La mezcla a analizar se deposita a una pequea distancia del borde inferior de la placa y se introduce en una cubeta que contiene la fase mvil, queasciende a lo largo de la placa por capilaridad, desplazando a los componentesde la mezcla a diferentes velocidades, lo que provoca su separacin. Cuando el frente del disolvente se encuentra prximo al extremo superior de la placa esta se saca y se visualiza. La relacin entre la distancia recorrida por un compuesto y por el disolvente desde el origen se conoce como Rf (rate factor).

La bsqueda del eluyente requiere probar con varios disolventes de diferente polaridad o con mezclas. Para compuestos poco polares, que se desplazan con mucha facilidad, se debe utilizar un disolvente apolar como el hexano y en el caso de compuestos de polaridad media, mezclas de hexano y acetato de etilo. La mayora de las placas de cromatografa llevan un indicador fluorescente que permite la visualizacin de los componentes activos a la luz ultravioleta (254 nm). En el caso de componentes que no absorban a la luz ultravioleta, la visualizacin requiere utilizar un agente revelador. El revelador reacciona con los productos proporcionando productos coloreados. CROMATOGRAFA PREPARATIVA EN PLACA. La cromatografa preparativa se lleva a cabo en placas de gel de slice de 1-2 mm de espesor sobre un soporte de vidrio. Se utiliza para la separacin y aislamiento de los componentes de una mezcla en cantidades comprendidas entre 100-200 mg. En la superficie del adsorbente (gel de slice), mediante una pipeta Pasteur, se traza una lnea continua con la muestra disuelta y se introduce la placa en posicin vertical en una cubeta. Durante la elucin debe permanecer tapada para evitar la evaporacin del disolvente. Una vez se han separado los productos que componen la muestra, se marca con una cuchilla el contorno del compuesto a aislar y con ayuda de una esptula se desprende del soporte de vidrio el gel de slice con el compuesto adsorbido. Una vez transferido a un erlenmeyer se aade un disolvente en el cual sea soluble el producto, se filtra el gel de slice y una vez eliminado el disolvente tenemos el producto puro.

CROMATOGRAFA EN COLUMNA. Es el mtodo ms utilizado para la separacin de compuestos orgnico a escala preparativa. La fase estacionaria se deposita en el interior de una columna de vidrio que termina con una placa porosa que impide su paso y en un estrechamiento con una llave. La mezcla se deposita sobre la parte superior de la fase estacionaria mientras que la fase mvil atraviesa el sistema. Los compuestos van saliendo por separado de la columna y se recogen en fracciones, los ms polares quedan ms retenidos y para que salgan generalmente hace falta aumentar la polaridad del disolvente. El tiempo necesario para eluir un compuesto de la columna se llama tiempo de retencin. El adsorbente ms utilizado para cromatografa de columna es gel de slice, aunque tambin se puede emplear almina y florisil. La elucin de la cromatografa puede realizarse por gravedad o mediante presin (Flash chromatography), la diferencia en ambos casos est en el tamao de las partculas de gel de slice (0,063-0,200nm, slice de columna, 0,040-0,063nm, slice flash). Debido a que la disminucin del tamao de las partculas de adsorbente conduce a una separacin ms eficaz, la cromatografa a media presin (flash) proporciona mejores resultados, adems de ser ms rpida. Las variables que ms influyen en la eficacia de la separacin en cromatografa de columna y utilizando gel de slice como adsorbente son las siguientes; a) Dimetro de la columna y cantidad de gel de slice. La altura del adsorbente est relacionada con la diferencia de Rf de los componentes de la mezcla. El dimetro de la columna con la cantidad de producto a separar. b) Eleccin del disolvente. El disolvente tienen que conducir a una buena separacin de los componentes de la mezcla en capa fina, utilizndose en muchos casos mezclas de disolventes y se realiza una elucin en gradiente. Una de las mezclas ms utilizadas es hexano/acetato de etilo.

CROMATOGRAFA EN PAPEL. Es la ms sencilla de las tcnicas, pero slo nos dar resultados cualitativos. Est casi en desuso. El mtodo se basa en un mecanismo de reparto, y consiste en depositar una pequea cantidad de muestra en el extremo de una tira de papel de filtro, que se deja evaporar. Luego se introduce la tira en una cubeta que contenga el disolvente, de manera que ste fluya por la tira por capilaridad. Cuando el disolvente deja de ascender o ha llegado al extremo, se retira el papel y seca. Si el disolvente elegido fue adecuado y las sustancias tienen color propio se vern las manchas de distinto color separadas. Cuando los componentes no tienen color propio el papel se somete a procesos de revelado. Hay varios factores de los cuales depende una cromatografa eficaz: la eleccin del disolvente y la del papel de filtro.

CROMATOGRAFA DE PARTICIN. La cromatografa lquido-lquido, tambin llamada de particin se caracteriza por emplear una fase estacionaria lquida, anclada a un soporte slido, y una fase mvil tambin lquida. El soporte slido por lo general es gel de slice, sobre cuya superficie se ha anclado una fase lquida con la incorporacin de una cadena hidrocarbonada larga, mediante la transformacin de los grupos silanol (Si-OH) de la gel de slice en grupos siloxano (Si-O-Si-R), lo que proporciona una fase lquida estacionaria trmicamente estable y difcil de hidrolizar en condiciones normales.

La polaridad de la fase estacionaria puede modificarse en funcin de la naturaleza de las cadenas hidrocarbonadas introducidas en la gel de slice, lo que permite disponer de fases estacionarias con selectividad diferente. La separacin en la cromatografa lquido-lquido se basa en la diferencia de solubilidad de los componentes de la mezcla entre las dos fases lquida o en las diferentes interacciones de los componentes de la mezcla con los grupos funcionales presentes en la cadena enlazada al gel de slice. En funcin de la polaridad de la fase lquida estacionaria, se distingue entre: a) Cromatografa en fase normal. La fase estacionaria est constituida por un lquido de carcter polar. Como fase mvil se emplean mezclas de disolventes apolares (hexano, pentano), con disolventes polares (cloroformo, diclorometano, T.H.F., etanol, metanol o acetonitrilo). Se utiliza para la separacin de compuestos muy polares que quedaran demasiado retenidos en una cromatografa slido-lquido. En este tipo de cromatografa el orden

b)

de elucin est gobernado por interacciones de tipo polar: los solutos ms polares quedan ms retenidos, igual que en la cromatografa de adsorcin. Cromatografa en fase reversa. La fase estacionaria est constituida por un lquido de carcter apolar. Como fase mvil se emplean mezclas de agua con disolventes polares miscibles, como metanol o acetonitrilo siendo la fase mvil ms polar que la fase estacionaria. Se emplea para la separacin de mezclas de compuestos de polaridad baja, que se retienen muy poco en una cromatografa slido-lquido, y para la separacin de compuestos de una misma serie homloga. La retencin se explica en base a una adsorcin preferencial del disolvente menos polar de la fase mvil a la superficie de las cadenas apolares que constituyen la fase estacionaria, de manera que se establece un mecanismo complejo que supone una combinacin de equilibrios de solubilidad (particin) de la mezcla que se cromatografa entre la fase lquida adsorbida a la fase estacionaria y la fase mvil. La separacin ocurre como consecuencia de las diferencias en la superficie apolar de los componentes de la muestra, los compuestos menos polares sern ms solubles en la fase estacionaria que los ms polares. Por tanto, al contrario que en la fase normal, los compuestos ms polares estarn menos retenidos que los menos polares. Los tiempos de retencin disminuyen cuando menor sea la proporcin de agua, cuando menos polar sea el disolvente empleado. CROMATOGRAFA DE INTERCAMBIO INICO.

La cromatografa de intercambio inico (cromatografa inica) es un proceso que permite la separacin de iones y molculas polares basadas en las propiedades de carga de las molculas. Puede ser usada en casi cualquier tipo de molcula cargada, incluyendo grandes protenas, pequeos nucletidos y aminocidos. La solucin que se inyecta es usualmente llamada muestra y los componentes separados individualmente son llamados analitos. Es usada a menudo en purificacin de protenas, anlisis de agua o control de calidad. La fase estacionaria (resina de intercambio) muestra en la superficie grupos funcionales inicos que interactan con iones de carga opuesta. Este tipo de cromatografa se subdivide a su vez en la cromatografa de intercambio catinico y cromatografa de intercambio aninico:

La cromatografa de intercambio catinico retiene cationes cargados positivamente debido a que la fase estacionaria muestra un grupo funcinal cargado negativamente (SO3-, CO2-). Las resinas cuyo grupo funcional activo es un sulfonato (SO3-) se consideran resinas intercambiadoras cidas fuertes, mientras que aqullas cuyo grupo funcional activo es un in carboxilato (CO2-) se consideran resinas cidas dbiles. R-A-H++ M++ B- R-A-M++ H++ BLa cromatografa de intercambio de aniones retiene aniones usando grupos funcionales cargados positivamente, como un catin de amonio cuaternario (R4N+). R4-N+L-+ M++ B- R4-N+B-+ L-+ M+ Este tipo de cromatografa se basa en el equilibrio de intercambio inico entre una fase slida que contiene grupos sulfnicos o carboxlicos (para la separacin de cationes) o grupos amino cuaternarios, ternarios o secundarios (para la separacin de aniones) y los iones presentes en la fase mvil. Por ejemplo, para la separacin de cationes se puede utilizar una resina de cido dbil donde se producir el siguiente equilibrio: R-CO2H + M+ R-CO2M + H+ En este caso, el catin M+ puede ser eluido de la columna por un cido fuerte en una concentracin capaz de desplazar el equilibrio representado en la ecuacin anterior hacia la izquierda. El desarrollo de esta tcnica al estado de cromatografa de alta resolucin, llamada cromatografa inica, fue posible a partir de la dcada del 70 cuando se desarrollaron recubrimientos que contienen los materiales tpicos para el intercambio (grupos sulfnicos para cromatografa catinica y grupos aminos cuaternario para cromatografa aninica). Estos recubrimientos se depositan sobre pequeas esferas de slice, vidrio o de algn polmero que son capaces de soportar las altas presiones comnmente utilizadas en cromatografa lquida de alta resolucin.

DISCUSIN

RESULTADOS

CUESTIONARIO (1) 1. Cul es la principal utilidad de la cromatografa en columna? La utilidad de la cromatografa en columna se basa en el anlisis, la separacin o purificacin de sustancias o mezcla de stas a travs de ciertas tcnicas y mtodos muy eficientes usados en los actuales laboratorios de qumica. 2. Qu fenmenos fijos intervienen en una columna cromatogrfica que utilice Silicagel como fase fija? Los fenmenos fsicos presentes son la adsorcin y desorcin, el primero consiste en que las molculas de una sustancia (adsorbato) se adhieren en la superficie de un slido finamente dividido (adsorbente, Silica Gel) y el segundo es la separacin de las molculas adsorbidas en la superficie del solido. 3. C u l e s s o n l a s p r i n c i p a l e s d i f e r e n c i a s e n t r e u n H PC L y u n a c o l u m n a cromatogrfica simple? Las principales diferencias derivan en que las columnas de HPCL el solvente o fase mvil circula con gran dificultad (por su empaquetamiento mucho mas compacto), por lo que debe ser impulsado a alta presin (mediante bombas de alta presin) y las columnas suelen estar construidas en materiales muy fuertes como el acero inoxidable. Adems, para lograr la mxima eficiencia de los solventes usados en HPCL deben tener un mayor grado de pureza y el eluato al salir de la columna pasa a travs de un detector para monitorear la presencia del material. 4. Cul es el factor que hace que la HPCL sea mucho mas eficiente que una columna cromatogrfica simple?

La mayor eficiencia de esta tcnica se debe a que la fase estacionaria esta formada de partculas esfricas muy pequeas y de tamao uniforme. Usndose micro esferas con un tamao de 5 a 10 micrones. 5. Estamos operando una columna cromatogrfica usando como adsorbente Silica gel y casi todos los compuestos se han eluido, excepto un compuesto que no es eluido con este solvente Qu cambios introducira para poder eluirlo? Se tiene que cambiar de adsorbente generalmente la mezcla de dos o tres adsorbentes de distinta polaridad resultan ms eficientes que absorbentes puros. 6. Cmo es posible trabajar con unas sustancias incoloras en una columna cromatogrfica, si no es posible localizar las sustancias dentro de una columna? Se realiza el anlisis del eluato por cromatografa en capa fina o sobre papel. Como este proceso es largo suele recibirse el eluato en muchos matraces o tubos de ensayo de volmenes similares, anotndose en cada uno un nmero o cogidos q ue i n di q ue s u o r den d e s a l i d a d e l a co l u m na (u ti l i z a ndo un c o l e cto r d e fracciones el proceso se vuelve casi automtico). Luego se juntan las fracciones que tienen igual o similar contenido y se elimina o recupera el solvente (por destilacin o usando un rota vapor) obtenindose el residuo de cada fraccin. Posteriormente se pueden aplicar otros procesos de purificacin (cristalizacin, destilacin, etc.) o de identificacin de sustancias (puntos de ebullicin, espectro IR, etc. 7. Qu tipo de cromatografa utilizara para eliminar las sales minerales que estn contaminando una muestra de cafena? Cromatografa en capa fina

8. Qu es un colector de fracciones y cul es su principal utilidad? La cromatografa en columna consta de tres etapas: llenado de columna, aplicacin de muestras y elusin. Durante la elusin se procura que las primeras porciones del solvente sirvan para lavar las paredes de la columna y que toda la muestra sea adsorbida por la fase fija. Cuando se hace un anlisis generalmente por cromatografa en capa fina o sobre papel, este suele ser un proceso muy lento y suele recibir el solvente en muchos matraces que indican su orden de salida de la columna. Es en esta parte que se usa el colector de fracciones para llevar el proceso de forma automtica aprovechando la mayor cantidad de tiempo posible. 9. Q u d i f e r e n c i a s e n c u e n t r a s e n t r e l a c r o m a t o g r a f a d e g a s e s y l a cromatografa de columna? Criterio Fase fija Fase mvil Fenmeno fsico predominante y estado fsico de las fases involucradas Complejidad relativa Eficiencia relativa Costo relativo Automatizacin Cromatografa de columna liquido solido Adsorcin y particin Cromatografa de gases Liquido Gaseoso Particin

simple menor barato Casi automtica

Complejo Mayor Costoso Automtica

10. Qu son Resinas de Intercambio inico y cul es su utilidad? Las resinas sintticas de intercambio inico consisten en una matriz polimrica reticulada por la accin de un agente entrecruzante y derivatizada con grupos inorgnicos que actan como grupos funcionales. Son los materiales ms habituales en las aplicaciones de intercambio inico en la industria.

CUESTIONARIO (2) 1. Qu se entiende por RX? Cuando el desplazamiento del soluto es muy pequeo respecto al del disolvente y es necesario pasar mucha fase mvil para que se desarrolle el cromatograma, es preferible medir la distancia recorrida por el soluto frente a otra sustancia tomada como referencia. En este caso el factor se denomina RX

2. Cules son las diferencias entre la cromatografa en capa fina y la de papel? La diferencia es el soporte donde se hace la separacin cromatogrfica. La de papel, como su nombre indica es un papel, donde ponemos el forma lquida los compuestos que queremos separar y luego lo metemos en una cmara (cubeta de desarrollo) de vidrio, con una atmosfera de un disolvente o mezcla de ellos que, una vez acabado el desarrollo (el lquido sube por el papel separando los compuestos) y los revelamos (hacemos visibles los compuestos tindolos con un espray fluorescente o aplicacin de cidos) nos muestras los componentes separados a distintas alturas del papel (coeficiente Rf). En la de capa fina, el soporte es una placa de vidrio o aluminico con una "fina capa" de producto slido adherido a la misma. El proceso es el mismo que el papel, pero la ventaja es que como aplicamos un producto para crear la capa, este puede ser el que ms nos interese. El ms comn es la slice. 3. Cite algunas aplicaciones de la cromatografa en su especialidad Las aplicaciones prcticas de la cromatografa se encuentran por ejemplo en la produccin, donde se usa la cromatografa para la limpieza y aislamiento

de sustancias. Por otro lado, en la analtica qumica se usa la cromatografa para separar mezclas en compuestos homogneos. La cromatografa juega un papel importante en muchos sectores, como la qumica orgnica, la bioqumica, la qumica inorgnica, la qumica ambiental y la qumica alimenticia. 4. Interprete los valores de Rf 0.05 y 0.98 5. Introducir algn cambio cuando se tiene un Rf de 0.05 Por qu? 6. Explique algn mtodo para localizar las bandas de adsorcin cuando se trabaja con sustancias incoloras en una columna Aunque los compuestos incoloros pueden formar bandas bien definidas en una columna de adsorcin cromatografica se necesita la utilizacin de mtodos especiales para la localizacin de las bandas de los productos adsorbidos y para poder separarlos convenientemente. Para la localizacin de las bandas de los productos adsorbidos se emplea generalmente una lmpara ultravioleta. 7. Qu es la electroforesis y cual es su principal aplicacin en los compuestos biolgicos? El ADN, propio de cada individuo, se encuentra en todas las clulas de nuestro cuerpo y se puede obtener fcilmente de las clulas de la mucosa del interior de nuestra boca. La electroforesis es una tcnica de laboratorio para la separacin de molculas en funcin de dos factores: carga y masa. Al aplicar una corriente elctrica, un electrodo repele las molculas de igual carga, mientras que el polo opuesto atrae esas molculas. Por otra parte, acta la fuerza debida a la friccin: las molculas ms pesadas avanzan ms lentamente.

BIBLIOGRAFA Galagovsky Kurman, Lydia Raquel, Qumica Orgnica: fundamentos tericoprcticos para el laboratorio. Buenos Aires.1995,5ta .ed. 245p.(manuales) Wade, L.G.(1993) Qumica AMERICANA,S.A. Mxico. Orgnica. Ed. PRENTICE HALL HISPANO

Solomons,T.W. Quimica Organica. Ed. LIMUSA. Mexico. 2000 P. Cueva, J. Leon, A. Fukusaki. Manual de laboratorio de qumica orgnica. Segunda edicin. Juan Gutemberg, 2010. Pp 25-30. McMurray, Jhon. Quimica Organica. Ed. IBEROAMERICA. Mexico. 1994