Ao del Centenario de Machu Picchu para el Mundo UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA FACULTAD DE INGENIERIA INDUSTRIAL ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA

AGROINDUSTRIAL E INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

MANEJO POSTCOSECHA DE PRODUCTOS AGROINDUSTRIALES

Docente: Ing. Nelly Leyva Povis

Alumnos: Bayona Ipanaqu Raquel de los Milagros Delgado Mechato Emilly Ariana Garca Valladolid Alberto Palacios Pariatn Dafne Virginia Tema: El Revestimiento de las Frutas Ctricas (Murcott tangor) con Quitosano de Bajo Peso Molecular, aumenta la Calidad Poscosecha y la Vida de Anaquel.

Piura, Julio de 2011

Food Chemistry 100 (2007) 11601164

Coating citrus (Murcott tangor) fruit with low molecular weight chitosan increases postharvest quality and shelf life
Po-Jung Chien a, Fuu Sheu b, Hung-Ren Lin

Department of Food Science, Yuanpei University of Science and Technology, No. 306, Yuanpei Street, Hsinchu 30051, Taiwan, ROC
a

Department of Horticulture, College of Agriculture and Bioresources, National Taiwan University, Taipei 10673, Taiwan, ROC
b

Received 7 February 2005; received in revised form 5 October 2005; accepted 5 October 2005

Traduccin al espaol: Bayona Ipanaqu Garca Valladolid Delgado Mechato Palacios Pariatn

Universidad Nacional de Piura. FII - E.P de Ing. Agroindustrial e Industrias Alimentarias. Piura-Per, 2011

El Revestimiento de las Frutas Ctricas (Murcott tangor) con Quitosano de Bajo Peso Molecular, aumenta la Calidad Poscosecha y la Vida de Anaquel

RESUMEN En este estudio se investiga los efectos del recubrimiento con quitosano de bajo peso molecular (LMWC, Pm = 15 kDa) y quitosano de alto peso molecular (HMWC, Mw = 357 kDa) sobre la decadencia de Murcott tangor y el mantenimiento de su calidad. Una capa de 0,1% LMWC frena el deterioro de Murcott tangor almacenadas a 15 C en relacin con una muestra de control, tambin se reduce la caries en un 20% en comparacin con la TBZ fungicida. Una concentracin de 0,2% LMWC fue ms eficaz para el control del crecimiento de hongos en los ctricos causados por Penicillium digitatum y Penicillium italicum, esta concentracin exhiben actividad antifngica eficaz. El recubrimiento con LMWC proporciona una mejora en la firmeza, acidez, acido ascrbico y el contenido de agua de Murcott tangor almacenada a 15 C durante 56 das. En consecuencia, Murcott tangor recubierto con LMWC mostr mayor resistencia a antifngicos que al ser tratado con TBZ, adems la calidad se mantiene durante ms tiempo.

1. INTRODUCCIN 'Murcott' tangor (Mandarina Miel, Citrus spp.; Mandarna x Citrus sinensis, hibrido naranja dulce) es una fruta subtropical de alto valor comercial en el mercado internacin de la fruta, y que comnmente se consume en fresco en Asia. Tiene una pulpa muy jugosa, dulce y un poco cida en sabor. Sin embargo, la fruta puede enfermarse fcilmente por la putrefaccin del pednculo, moho azul, el moho verde, encogimiento de la piel, el aceite de manchas, quemaduras, o pudricin acuosa, por lo tanto su sabor se pierde durante el almacenamiento postcosecha (Porat et al., 2000). El almacenamiento de Murcott tangor en bolsas de polietileno, cubriendo cada fruta con cera, y el tratamiento con fungicida tiabendazol (TBZ) han sido reportados a extender la vida tildel producto. Los ctricos tienen un pH bajo, alto contenido de humedad y nutrientes, as que son muy susceptibles al ataque de hongos patgenos, lo que provoca descomposicin, y produccin de micotoxinas, por lo tanto los hace inaptos para el consumo (Tripathi y Dubey, 2004). Penicillium digitatum es el agente patgeno postcosecha ms perjudicial de los ctricos (Porat et al., 2000), e infecta la fruta a travs de microlesiones generadas en el flavedo durante la cosecha y procesamiento. Sin embargo, hoy en da, los consumidores de todo el mundo demandan

alimentos de alta calidad, sin conservantes qumicos, lo que conduce a un mayor esfuerzo en el descubrimiento de nuevos antimicrobianos naturales. En consecuencia, han sido investigados los efectos fungistticos del quitosano (Galed, Ferna'ndez-Valle, Mart'nez, y Heras, 2004). Quitosano, que es un polisacrido catinico con un alto peso molecular y un polmero lineal que se compone de b-1 ,4 - glucosamina (GlcN) vinvulada con diversas cantidades de residuos de GlcN N-acetilado, se obtiene normalmente por la desacetilacin alcalina de quitina extrada a partir de una fuente abundante de los exoesqueletos de los crustceos o las paredes celulares de algunos microorganismos y hongos (Hirano, Ohe, y uno, 1976). El quitosano es soluble en cidos orgnicos diluidos, y en teora podra ser usado como conservante para el recubrimiento de frutas. El recubrimiento es no txico y seguro (Hirano et al, 1990.), y presenta una actividad antifngica frente a diversos hongos (Allan y Hadwiger, 1979; El Ghaouth, Arul, Grenier, y Asselin, 1992). Se sabe que un recubrimiento de quitosano tienen el potencial de prolongar la vida til de almacenamiento y control de la decadencia de las fresas, tomates, melocotones, peras, kiwis, manzanas y otras frutas, como lo examin: Du, Gemma, y Iwahori (1997), El Ghaouth, Arul, Ponnamapalam, y Boulet (1991), El Ghaouth, Ponnamapalam, Castaiglne y Arul (1992), Hiplito, El Ghaouth, Wilson y Wisniewski (2000), Jiang y Li (2001), Zhang y Quantick (1997 ). Recubrimiento de frutas y verduras con quitosano ayuda al almacenamiento a largo plazo de los alimentos (El Ghaouth et al., 1992), porque una pelcula de quitosano proporciona un tipo de paquetes activos, donde los preservativos son liberados de la pelcula depositada sobre la superficie de los alimentos y estos inhiben el crecimiento de hongos. Taiwan es el principal productor asitico de los ctricos, como naranjas y los limones. Ctricos y otras frutas pueden ser almacenados por largos perodos de tiempo una vez que han sido recubiertos con quitosano, ya que este biopolmero disminuye las tasas de respiracin, inhibe el desarrollo de hongos y retrasa la maduracin mediante la supresin de la evolucin de etileno y dixido de carbono (Du et al., 1997). El efecto del peso molecular del quitosano sobre las propiedades fsicas de las membranas ha sido reportado. Quitosanos de bajo peso molecular (LMWC) tienen una permeabilidad mayor que la de quitosanos de alto peso molecular (HMWC) (Chen y Hwa, 1996). Hace relativamente poco tiempo,

con un promedio de LMWC en el rango de 5000-20,000 Da de peso molecular, se demostr que se presentan actividades biolgicas superiores de quitosano (Muzzarelli y Muzzarelli, 2002). Jeon, Park y Kim (2001) reportaron que LMWC tuvo la mayor actividad bactericida a bacterias patgenas. Tambin se ha demostrado que LMWC modula la resistencia de plantas a las enfermedades (Vasyukova et al., 2001). Tanes asi que la informacin sobre el mantenimiento de la calidad de los ctricos con LMWC es carente. El objetivo de este trabajo fue evaluar el potencial de un recubrimiento LMWC como un agente antifngico, en relacin a la de los fungicidas tiabendazol (TBZ), en el control de la caries se extiende la vida de postcosecha y el mantenimiento de la calidad de la fruta Murcott tangor durante el almacenamiento. La vida til de almacenamiento de los ctricos en condiciones industriales y de mercado por lo tanto se puede mejorar. 2. MATERIALES Y MTODOS 2.1. Fruits La fruta Murcott tangor madura fue utilizada en el experimento; las muestras fueron cultivadas en Shihkang, Taichung, Taiwan, y llevadas al laboratorio inmediatamente despus de la cosecha. Fueron seleccionados por su uniformidad, tamao, color y forma, y por estar libre de daos e infecciones por hongos. 2.2. Quitosano y Reactivos HMWC (Mw = 357 39 kDa) y LMWC (Mw = 15,1 0,2 kDa) con 96,2% de N-desacetilacin se obtuvieron de VA & G Bioscience Inc. (Taoyuan, Taiwan). Dos muestras de quitosano se usaron en forma de polvo y preparadas a partir de conchas de cangrejo. Todos los dems productos qumicos se obtuvieron de fuentes comerciales y fueron de grado analtico. 2.3. Soluciones de Recubrimiento de Quitosano Para preparar 1 l de soluciones de quitosano a concentraciones de 0.05%, 0.1% o 0.2%; se dispersaron 0.5, 1 y 2 g de quitosano en 900 ml de agua destilada a la cual se aadi 50 ml de cido actico glacial para disolver el quitosano. El pH de la solucin se ajust a pH 5.0 con NaOH 0.1 M y la solucin se complet hasta 1l. Una solucin de cido sin quitosano, pH 5.0 se utiliz como control. Todos los tratamientos y los

controles contienen 0.1% de Tween 80 (Sigma Chemical Co, St Louis, MO, EE.UU.) para mejorar la humectabilidad. 2.4. Microorganismos Penicillium digitatum y Penicillium italicum fueron aisladas de ctricos infectados y mantenidos en agar papa dextrosa (PDA). Botrydiplodia lecanidion y Botrytis cinrea fueron adquiridos de la Coleccin de Recursos Biolgicos y Centro de Investigacin (Centro Regional) de la Repblica de China. Una suspensin de esporas se obtuvieron por el crecimiento de 2 semanas de edad de los cultivos de P. digitatum, P. italicum, B lecanidion B. y B. cinerea con agua destilada estril que contena 0.1% (v / v) de Tween 80. Las esporas se contaron con un hemocitmetro, y las concentraciones de esporas de los agentes patgenos se ajustaron con agua destilada estril agua para obtener 105 esporas por ml de P. digitatum, P. italicum, B. lecanidion y B. cinerea. 2.5. Control de la caries Los frutos fueron tratados con 0.1% de TBZ (tiabendazol) por s solo, un 0.05%, 0.1% y 0,2% de quitosano por si solo; luego se secaron durante 3 horas despus de la inmersin. Cada fruta se coloca en su propia bolsa de polietileno para evaluar la efectividad del quitosano sobre la decadencia, y compararla con la eficacia del tratamiento TBZ. El fruto fue distribuido al azar en grupos de 120. Cada tratamiento se realiz por triplicado. Los frutos fueron almacenados durante 9 semanas en un 95% de humedad relativa a 15 C para la evaluacin. Los frutos fueron examinados regularmente para detectar el moho y ser considerados como infectados si una lesin visible se observara. Los resultados se expresaron como porcentaje de la fruta infectada. 2.6. Determinacin de la prdida de peso y contenido de humedad Tres replicas de 120 frutos fueron utilizados para cada tratamiento. Cada siete das, una muestra de 10 frutos fue retirada de cada tratamiento para su posterior evaluacin. Los frutos fueron pesados regularmente para determinar la prdida de peso. La humedad se determin por el mtodo de la AOAC (1984). 2.7. Determinacin de la firmeza de la pulpa Las propiedades de la firmeza de la fruta se determinaron mediante un analizador de textura (SMS: TA-XT i), se us un cuchillo Stanley

configurado. La calibracin de la sonda fue de 30 mm. Despus de pelada la fruta, se determin el punto medio de firmeza. 2.8. Medicin de la cantidad de slidos solubles, acidez y cido ascrbico La fruta se sumerge en la solucin de quitosano y TBZ, envasados en bolsas de polietileno y se almacena a 15 C, como se describi anteriormente. El fruto de control fue sumergido en una solucin de cido sin quitosano a pH 5,0. Tres grupos idnticos de 120 frutos fueron utilizados para cada tratamiento. Despus de cada siete das de almacenamiento, una muestra de 10 frutos se retir de cada grupo y la cantidad de slidos solubles, acidez y contenido de cido ascrbico de la pulpa de la fruta fueron analizados. Pulpa (100 g) de 10 frutos se homogeneiz en un molino y luego se centrifug a 3500 rpm (Du-Pont, modelo Sorvall RC-5C) durante 20 minutos para eliminar las semillas y orujos. El sobrenadante se recogi para analizar la cantidad de slidos solubles, utilizando un refractmetro manual (ATAGO, modelo N1). La acidez se calcul segn lo determinado por titulacin con NaOH 0.1 M, y el contenido de cido ascrbico se calcul segn el gasto de 2,6diclorofenolindofenol en la titulacin (AOAC, 1984). 2.9. Control del crecimiento de hongos con LMWC La inhibicin por LMWC y quitosano de P. digitatum, P. italicum, B. lecanidion y Botrytis cinerea se determinaron en caldo de Papa Dextrosa (APD) a 25 C. LMWC y el quitosano se prepararon como se describi anteriormente y se agrega a APD para obtener la concentraciones de 0.05, 0.1 y 0.2% (w / v). Se agreg 100 ml del preparado de APD en frascos Erlenmyer de 250 ml previamente esterilizados en autoclave a 121 C durante 15 min. Cada matraz se inocul con 1 ml de la suspensin de esporas a una concentracin de 103 esporas/ml. Despus de 5 das de incubacin a 25 C, se determin la propagacin del micelio de los organismos de prueba. Los ctricos fueron daados por puncin con una sonda de acero inoxidable con una punta que era de 2 mm de largo y 1 mm de ancho (El Ghaouth, Smilanick, y Wilson, 2000). Frutos heridos fueron tratados con una suspensin de clulas del molde, que contienan 0% 0.1% de LMWC, 0.1% HMWC, agua estril o 0.1% TBZ. Posteriormente, las heridas eran reto-inoculados con una suspensin de esporas de P. italicum, P. italicum, B. lecanidion o B. cinerea. Los diversos tratamientos, incluyendo el inculo, se aplicaron con un rociador de mano, aproximadamente 0.5 ml se aplic a cada fruta. Cada tratamiento se aplic a los grupos de tres ejemplares de 120 frutos, cada uno de los cuales se almacenaron durante

14 das a alta humedad (95% de humedad relativa) en bandejas de plstico cerrada a 25 C, luego se evalu el porcentaje de frutos en descomposicin que presentaban lesiones (El Ghaouth et al., 2000). 2.10. Anlisis Estadstico Los datos de los experimentos repetidos fueron analizados para determinar si las diferencias fueron estadsticamente significativas. Se hicieron tres anlisis de cada muestra y cada experimento se llev a cabo por triplicado (n = 3). Los resultados se expresan como media DE (desviacin estndar). Comparaciones estadsticas se realizaron mediante un anlisis de varianza (ANOVA), seguido por una prueba de comparaciones mltiples de Dunnett. Las diferencias se consideraron significativas cuando los valores de p (valor calculado estadsticamente) fueron inferiores a 0.05. 3. RESULTADOS 3.1. Efecto del recubrimiento LMWC sobre la decadencia Una comparacin entre la descomposicin de los frutas tratados con TBZ y las frutas tratadas con quitosano (Fig. 1) indican que las caries en los ctricos recubiertos con quitosano slo y sumergido en TBZ slo, se redujo significativamente (p <0,05). Sin embargo, el 0.1% de LMWC inhibe la descomposicin de los ctricos en ms del 20%, en comparacin con la que se trata con TBZ. El control con TBZ no difiri significativamente de la fruta tratada con 0.1% de HMWC, de acuerdo con la prueba de rango mltiple de Duncan.

Fig. 1. Cambios en el porcentaje de la decadencia de los ctricos recubiertos con un 0,1% de LMWC, 0.1 HMWC% y 0.1% de TBZ y el control durante el almacenamiento a 15 C.

3.2. Efecto del recubrimiento de LMWC en la prdida de peso En la Fig. 2. se presenta la prdida de peso de la fruta cuando se almacena a 15 C. Las prdidas de peso de ambos controles de frutos tratados con TBZ y los frutos tratados con quitosano aument de forma continua (p <0,05). La prdida de peso asociada con el tratamiento de LMWC 0.1% fue ms lento que el del control tratado con TBZ. Sin embargo, el control tratado con TBZ no difiri significativamente de la fruta tratada con 0.1% de HMWC (p> 0.05).

Fig. 2. Cambios en el porcentaje de prdida de peso de los frutos ctricos recubiertos con un 0.1% de LMWC, 0.1 HMWC% y 0.1% de TBZ y el control durante el almacenamiento a 15 C. 3.3. Efecto de dos quitosanos sobre el crecimiento de hongos En las heridas de fruta, los dos quitosanos fueron ms eficaces en la inhibicin de la tasa de crecimiento de P. digitatum, P. italicum, B.lecanidion y B. cinerea a la observada en el control tratado con TBZ (Tabla 1). El LMWC efectivamente inhibi el crecimiento de P. digitatum, P. italicum, B. lecanidion y B. cinerea, su eficacia aumenta con la concentracin. En frutas ctricas, el quitosano afecta adversamente la actividad biolgica de P. digitatum, P. italicum, B.lecanidion y B. cinerea (Tabla 1). En contraste, el LMWC fue ms eficaz en el control postcosecha de la descomposicin de ctricos que HMWC (p <0,05).

Tabla 1. Efecto del LMWC sobre la decadencia de los ctricos causada por Penicillium digitatum, Penicillium italicum, Botrydiplodia lecanidion y Botrytis cinrea.

Las concentraciones de esporas de P. digitatum, P. italicum, B. lecanidion y B. cinerea fueron 105 conidias / ml. 2 Las medias son un promedio de ms de tres ensayos. Cada ensayo incluy el tratamiento de tres grupos idnticos de ctricos con 120 muestras. La descomposicin se evalu despus de 14 das de almacenamiento a 25 C. 3 Los valores seguidos por la misma letra no difieren significativamente en p> 0.05, de acuerdo con la prueba de rango mltiple de Duncan.
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3.4. Efecto del recubrimiento con LMWC sobre la calidad de la fruta El recubrimiento con LMWC influye beneficiosamente sobre la firmeza, contenido de slidos solubles, acidez, contenido de cido ascrbico y el agua de los ctricos despus de 56 das de almacenamiento a 15 C (Tabla 2). Adems, la creciente concentracin de LMWC result en un incremento en la firmeza y el contenido de agua (Tabla 2), pero no influyen significativamente en el contenido total de slidos solubles, la acidez y el contenido de cido ascrbico despus de tres tratamientos con 0.05%, 0.1% y 0.2 % de quitosano. En el control del fruto tratado con TBZ y el fruto tratado con HMWC no se present una calidad mucho mayor de acuerdo con la prueba de rango mltiple de Duncan.

Tabla 2. Efecto del recubrimiento de LMWC sobre los atributos de calidad postcosecha de frutos Murcott tangor despus de 56 das de almacenamiento a 15 C1, 2 C1, 2

Las medias son valores promedio de tres ensayos. Cada ensayo contiene tres repeticiones de 120 frutos Murcott tangor. 2 Los valores dentro de una columna con la misma letra no son significativamente diferentes (p> 0,05).
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4. DISCUSIN El quitosano se ha reportado para retrasar la maduracin de las fresas, tomates, manzanas, peras, melocotn, lichi, naranja y limn (Du et al, 1997;. El Ghaouth et al, 1991;. El Ghaouth y Ponnamapalam et al, 1992;. Ippolito et al, 2000;. Jiang y Li, 2001; No, Park, Lee, y Meyers, 2002; Zhang y Quantick, 1997). Este estudio mostr que el LMWC influye beneficiosamente sobre los ctricos ('Murcott' tangor) despus de la cosecha de la fruta. El recubrimiento con LMWC retrasa la maduracin, la prdida de agua y la descomposicin (Fig. 1). La firmeza de la fruta, el contenido de slidos solubles, la acidez, el contenido de cido ascrbico (Tabla 2) y el peso fresco (Fig. 2) no ha cambiado. Despus de la cosecha la retencin de agua evita el deterioro rpido por marchitamiento. Sin embargo, antes del marchitamiento se hace evidente, que la prdida de agua despus de la cosecha tambin puede alterar el metabolismo y, en algunos casos, acelerar la maduracin de la fruta (Burdon, Dori, Lomaniec, Marinansky, y Pesis, 1994). Por lo tanto, la reduccin de la prdida de agua de la fruta durante el almacenamiento o la maduracin

ayuda a mantener la calidad de la fruta. Los experimentos demostraron que la creciente concentracin LMWC promueve la firmeza y la retencin del contenido de agua. Se ha demostrado que el quitosano es capaz de inhibir el crecimiento de algunos hongos (El Ghaouth et al., 2000). En este estudio, se utilizaron frutas por inmersin en agua para evaluar la eficacia del LMWC en el control de la decadencia y compararla entre el control con HMWC y el tratamiento de TBZ. Los resultados muestran que, en cierta medida, la aplicacin del recubrimiento de LMWC retras la aceleracin de la decadencia de la Murcott tangor almacenada, lo que indica que la capa de LMWC redujo el crecimiento de patgenos, de alguna manera (Fig. 1). Adems, LMWC mostr una mayor actividad antifngica que TBZ (Fig. 1), y notablemente inhibe el crecimiento de P. digitatum, P. italicum, B. lecanidion y B. cinerea, tal como se presentan en la Tabla 1. Este estudio demostr que el quitosano de bajo peso molecular (LMWC) tena el potencial de mantener las cualidades poscosecha de las frutas ctricas y prolongar su vida til de almacenamiento. Este hecho puede ser til como parte de una estrategia para reducir la prdida de peso causada por agentes patgenos que son resistentes a los fungicidas poscosecha que se utilizan actualmente. En conclusin, el mantenimiento de la calidad y la extensin de vida til de los ctricos mediante el recubrimiento con LMWC demostrado en este estudio, sugiere que la aplicacin de la capa de quitosano se debe considerar para su uso durante el almacenamiento comercial y de marketing. Sin embargo, las pruebas ms amplias de almacenamiento de post-cosecha deben llevarse a cabo para determinar la viabilidad de utilizar un recubrimiento de LMWC a escala comercial.

Agradecimientos Los autores agradecen al Consejo Nacional de Ciencia de la Repblica de China, Taiwan (Contrato N 91-2316 Consejo de Seguridad Nacional - B264-004-CC3) y VA & G Bioscience Inc. por su apoyo en esta investigacin.

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