PONTIFCIA UNIVERSIDADE CATLICA DO PARAN ESCOLA POLITCNICA CURSO DE ENGENHARIA QUMICA

EDUARDO ROBERTO MORITZ GISELE MELNECHENKO LARISSA MARIANE LANGA TAMARA ENGEL DOS SANTOS

SEPARAO DE CORANTES POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

CURITIBA 2012

EDUARDO ROBERTO MORITZ GISELE MELNECHENKO LARISSA MARIANE LANGA TAMARA ENGEL DOS SANTOS

SEPARAO DE CORANTES POR CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA Relatrio tcnico apresentado disciplina Qumica Orgnica II do Curso de Graduao em Engenharia Qumica da Pontifcia Universidade Catlica do Paran como forma parcial de avaliao referente a 1a Parcial. Orientador: Prof. Slvio Miro Franchi

CURITIBA 2012

SUMRIO INTRODUO..............................................................................................................3 OBJETIVOS..................................................................................................................8 RESULTADOS E DISCUSSO....................................................................................9 CONCLUSES...........................................................................................................10 REFERNCIAS...........................................................................................................11

INTRODUO A cromatografia uma tcnica fsico-qumica de separao dos componentes de uma mistura, por meio da distribuio desses componentes em duas fases: a estacionria e a mvel, que percorre sobre a estacionria. Estas duas fases trabalham em conjunto. Durante a passagem da fase mvel sobre a estacionria, os componentes se dividem de modo com que cada um deles fica retido na fase estacionria de acordo com a sua afinidade. O sucesso da separao cromatogrfica depende do mtodo de deteco. Substncias coloridas so, claro, visveis como manchas distintas ao fim da corrida. Uma das maiores vantagens da TLC a grande variedade de reagentes de deteco usados, os quais podem ser mais ou menos seletivos. Quando o reagente dissolvido no solvente adequado aplicado na placa, produz-se uma mancha colorida in situ. O reagente pode ser classificado como no especfico se produzir manchas coloridas com uma variedade de compostos, ou especficas se for somente reativo com compostos contendo um grupo funcional particular. A cromatografia classificada pelo tipo de sistema, fase e pela separao. Ainda so subdividos de acordo com a sua classificao: O Sistema Cromatogrfico - Coluna: Cromatografia lquida; Cromatografia gasosa; Cromatografia supercrtica. - Planar: Cromatografia em camada delgada; Centrfuga; Cromatografia em papel. Fase Mvel - Utilizando um Gs: Cromatografia gasosa; Cromatografia gasosa de alta resoluo;

- Utilizando um Lquido: Cromatografia lquida clssica; Cromatografia lquida de alta eficincia; - Utilizando um Gs Pressurizado: Cromatografia supercrtica. Fase Estacionria - Lquida; - Slida; - Qumicamente ligadas. Separao - Adsoro; - Partio; - Troca Inica; - Afinidade.

1.1 PRINCIPAIS TCNICAS CROMATOGRAFICAS As principais tcnicas de cromatografia so: Adsoro: As separaes ocorrem atravs de interaces electrostticas e foras de Van Der Waals entre a fase estacionria (slido) e os componentes a separar da fase mvel (lquido ou gs). A natureza da fase estacionria pode ser de diversos materiais como: slica gel, alumina ou celulose. Este ltimo mtodo baseiase nas atraes eletrostticas ou dipolares da superfcie da fase estacionria pelas molculas da substncia a separar. Partio: Basea-se nas diferenas de solubilidade dos componentes na fase estacionria (lquido) e na fase mvel (lquido). A fase estagionria um lquido aquoso que contm uma substncia insolvel, hidratada e inerte, como exemplo a

slica, atravs da qual corre a fase mvel. Esta fase consistente num solvente no miscvel como o lquido da fase estacionria. As diferentes substncias a separar deslocam-se para baixa com velocidades diferentes. Troca de ons: baseia-se na diferena de polaridade entre as substncias que permutam com ons da fase estacinaria para a fase mvel. A afinidade entre os ons da fase mvel e o suporte pode ser controlada por alterao do pH e pela fora inica do eluente, ou seja, da fase mvel. Afinidade: baseia-se em uma ligao molecular especfica e reversvel entre o soluto e um ligante imvel na fase estacinaria. utilizada, especificamente, para separar produtos biolgicos, como exemplo: anticorpos e substractos. 1.2 CORANTES Sudan III: um corante azico lisocrmico, ou seja, solvel em gorduras. obitdo atravs da diazotao do amarelo de anilina. Utilizado para colorao de triglicerdios em sees fixadas, e algumas protenas ligadas a lipdios e lipoprotenas em sees montadas em parafina. Em indstrias aplicado para colorir substncias apolares como gorduras, graxas, leos e ceras, vrios derivados de hidrocarbonetos e emulses de acrlicos. Tem a aparncia de cristais castanhoavermelhados e uma absoro mxima a 507(304) nm. A figura 1 apresenta sua formula estrutral e seu nome segunda a IUPAC.

Figura 1: Corante Sudan III 1-((4-(phenyldiazenyl)phenyl)diazenyl)naphthalen-2-ol

Amarelo Manteiga: conhecido tambm como Amarelo de Metila uma substncia txica e a temperatura ambiente um slido castanho com odor tnue. Pode ser produzido pela copulao da anilina na forma de sal diaznio com N,Ndimetilanilina. A figura 2 apresenta a frmula estrutural e seu nome segundo a IUPAC.

Figura 2: Corante Amarelo Manteiga p-Dimethylaminoazobenzene

1.3 FATOR DE RETANO (RF) Um dos aspectos mais importantes da cromatografia o movimento relativo de um composto em relao frente do solvente uma propriedade caracterstica e reprodutvel. Nas cromatografias em papel e em camada delgada este movimento apresenta um valor de Rf (Rate of Flow). O clculo Rf (frmula 1) realizado pela razo entre a distncia percorrida por cada amostra pela distancia percorrida pelo solvente.

Rf =

Distncia percorrida pela amostra (ds) Distancia percorrida pelo solvente (dm)

Frmula 1: Frmula do Fator de Retano

Figura 3: esquema de clculo de Rf em uma placa cromatogrfica.

Em condies constantes de temperatura, umidade e solventes, o Rf serve para caracterizar e identificar substncias. A medida feita entre a linha de base (ponto de aplicao da amostra) at o centro da mancha em estudo. O valor obtido comparado aos tabelados na literatura, podendo servir para identificar determinado composto.

OBJETIVOS 2.1 OBJETIVO GERAL Separar uma mistura de trs corantes por cromatografia em camada delgada e analisar os resultados da separao cromatogrfica. 2.2 OBJETIVOS ESPECFICOS Os objetivos especficos do trabalho so: Separar uma mistura de trs corantes por cromatografia em camada delgada; Conhecer o mtodo de separao e anlise por cromatografia em camada delgada. Analisar os resultados da separao cromatogrfica, relacionando a polaridade das amostras com a fase mvel e a fase estacionria; Estabelecer a ordem crescente de polaridade dos corantes analisados;

RESULTADOS E DISCUSSO No quadro abaixo esto relacionados os dados de cada placa: FASE ESTACIONRIA Gel de Slica Gel de Slica Gel de Slica Gel de Slica Rf PARA BANDA AMARELA (cm) 0,63 0 0,8 1 Rf PARA BANDA VERMELHA (cm) 0,5 0 0,68 1

PLACA I II III IV

FASE MVEL Tolueno Ciclo Hexano Cloroformio Acetato de Etila

Tabela 1: Valores da cada placa utilizada no experimento.

Pode-se fazer uma anlise do comportamento de cada banda para cada solvente a partir da interao entre fase mvel e fase estacionria. Na placa I, o corante amarelo manteiga interagiu mais com a fase mvel. A interao pode ter ocorrido devido a semelhana de polaridade, j que o corante amarelo manteiga polar e, apesar, do tolueno ter baixa polaridade. Na placa II, no houve nenhuma interao entre os corantes e a fase mvel. O ciclo hexano tem uma baixa polaridade, por isso no houve interao com o corante vermelho sudan II, que apolar. Na placa III, o corante amarelo manteiga interagiu mais com a fase mvel. O fato da fase mvel, nesse caso, clorofrmio, ser altamente polar atraiu o corante amarelo manteiga, tambm polar. Na placa IV, os dois corantes interagiram bem com a fase mvel. O acetato por ser o solvente mais polar do grupo, atrai com fora o corante amarelo manteiga.

(I)

(II)

(III)

(IV)

Figura 4: Ilustrao do resultado obtido no experimento.

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CONCLUSES A cromatografia em camada delgada (TLC) foi a metodologia escolhida e desenvolvida neste estudo para a determinao dos resduos. As vantagens desse mtodo so a simplicidade, a instrumentao de baixo custo e a versatilidade, apresentando-se, portanto, adequado execuo de determinaes em srie. Alm disso, a TLC pode ser usada quando as possibilidades de aplicao de outros mtodos so limitadas pelas propriedades da amostra, como por exemplo, substncias termolbeis, baixa volatilidade ou presena de quantidades considerveis de impurezas dificultando a anlise (resinas, pigmentos, etc.). importante dizer que quanto mais a banda corre, mais interage com a fase mvel. Compostos semelhantes tendem a dissolver semelhantes, ou seja, polar dissolver polar e apolar dissolve apolar. Quando uma substncia polar e a outra apolar, no h tendncia para solubilizao. Pela anlise realizada no experimento chegou-se a concluso, quanto polaridade da amostra, que o corante Vermelho Sudan III uma substncia apolar e o corante Amarelo Mandeiga polar. Foi constatado tambm que o clorofrmio, foi o solvente que mais demorou a atingir o front. Por outro lado, com os solventes ciclo hexano e acetato de etila, no foi possvel diferenciar os corantes em uma mistura dos dois.

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REFERNCIAS VOGEL, A. I. Qumica Orgnica Anlise Orgnica Qualitativa. 3 ed. Ao livro tcnico, v. 3, Rio de janeiro, 1988. SOLOMONS, T.W.G.; FRYHLE, G.B. Qumica orgnica. 8. Ed. Rio de Janeiro: LTC, v.1, 2005.

GONALVES, D.; WAL, E.; ALMEIDA,R.R.; experimental;So Paulo: McGraw-Hill, 1988.

Qumica

orgnica

SIGMA-ALDRICH. Disponvel em < www.sigmaaldrich.com> acessado em 13 de setembro.

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ANEXO MEMORIAL DE CLCULO A determinao do fator de reteno foi obtida pela relao abaixo:

Rf= dc de
Frmula 1: Fator de reteno

Onde dc a distncia percorrida pela mancha e de a distncia percorrida pelo eluente. A de foi igual em todo o experimento, 6 cm. Placa I (tolueno) - dc (amarelo) = 3,8 cm dc (vermelho) = 3,0 cm Rf( amarelo) = 3,8/6 = 0,63 Rf (vermelho) = 3/6 = 0,5 Placa II (Ciclo hexano) - dc (amarelo) = 0 dc (vermelho) = 0 Rf( amarelo) = 0 Rf (vermelho) = 0 Placa III (Cloroformio) - dc (amarelo) = 4,8 cm dc (vermelho) = 4,1 cm Rf( amarelo) = 4,8/6 = 0,8 Rf (vermelho) = 4,1/6 = 0,68 Placa IV (Acetato de elita) - dc (amarelo) = 6 cm dc (vermelho) = 6 cm Rf( amarelo) = 6/6 = 1 Rf (vermelho) = 6/6 = 1