Antigenul

Definitia antigenului I :
Ag este orice substanta de origine exo/endogena capabila:
a) sa activeze limfocitele Ag specifice
b) sa interactioneze specific cu receptorii Ag solubili (anticorpii) si/sau Ag membranari (limfocitele)
Originea antigenului:
Exogene:
- bacteriene - prezente in diversele subcomponente ale bacteriilor. Ele pot fi:
- capsulare
- membranare (endotoxinele sursele de endotoxine mai ales bacteriile gram - , ele sunt elemente
constitutive ale membranei bacteriene , NU sunt substante secretate , sunt substante de natura
lipopolizaharidica = LPS. In general endotoxinele au o serie de efecte patogene: starea febrila foarte
intensa, hipotensiune, stare de colaps, stare de soc. Pot duce si la aparitia unui sindrom de coagulare
intravasculara diseminata. Ele declanseaza raspunsuri imune umorale sau celulare)
- flagelare (flagelinele)
- cele din pili/fimbrii
- exotoxinele sunt produse si de gram si de gram + si sunt substante secretate/exocitate de bacteriile
producatoare. Ca natura ele sunt substante polipeptidice. Sunt importante pentru ca pot declansa
raspunsuri imune si au si efecte patogene: citopat (moartea celulei pe care actioneaza), citotoxic
(inhibitor al celulelor somatice)
- parazitare
- somatice
* externe (invelisul parazitar)
* interne (organitele parazitare)
- secretii polipeptidice
- alergene polenurile, componente alimentare (capsuni, ciocolata, e.t.c.), substante medicamentoase, praful de
casa
- substante de origine industriala


Endogene:
- autoantigenele - orice organism normal produce in mod continuu cantitati mari de autoantigene, dar la
normali sunt limitate sau sechestrate de catre o serie de bariere morfofunctionale care impiedica contactul
sistemului imunitar cu aceste autoantigene NU apar raspunsuri fata de acestea. Patologic, ca urmare a
deteriorarii (distrugerii barierelor morfofunctionale) e posibil contactul autoantigenelor cu diversele elemente
ale sistemului imunitar raspunsuri imune autoreactive boli autoimune
- tumorale/canceroase orice organism normal elaboreaza celule tumorale (cca. 200 250 / 24 h). Acestea sunt
insa recunoscute de catre sistemul imunitar dupa prezenta Ag. specifice. Aceasta recunoastere conduce la
distrugerea lor, procesul = supraveghere imunologica antitumorala.
- virale marea majoritate a virusurilor isi includ propriul genom in genomul celulei gazde ulterior
componentele virale se sintetizeaza ca niste componente proprii organismului
Proprietatile antigenului:
Ag. sunt substante capabile sa activeze limfocitele Ag-specifice

Limfocitele Ag-specifice = limfocite T sau B care prezinta pe suprafata lor receptori antigenici, in constitutia carora
exista un situs combinativ pentru Ag., capabil sa interactioneze cu Ag inductor. Interactiunea e posibila datorita
faptului ca situsul are o conformatie complementara celei a Ag inductor activarea limfocitelor Ag-specifice cu
generarea unui raspuns imun.
1. Umoral: actiunea limfocitelor B Ac
2. Celular: actiunea limfocitelor Tc citokine imunogene
Ag e o substanta capabila sa activeze limfocitele Ag-specifice si sa declanseze raspunsuri imune.
Declansarea RI e un process conditionat. Ea depinde de tipul de limfocit imunoregulator (LIR) activat in etapa initiala
a Ri
LIR pot fi :
Limfocite TH ele au proprietatea fie de a activa limfocitele B (RIU) sau Tc (RIC). Toate Ag

Limfocite TS inhibitie selectiva a RI pe care l-am fi asteptat. Ele au proprietatea de a inhiba fie
limfoccite B (inhibitia RIU) fie limfocitele Tc (inhibitie RIC). Antigene capabile sa actioneze pe
TS = tolerogene.
ocitelor:
1. sunt absente (in vitro, pe medii acelulare, plasma substanta straina Ag, e recunoscuta de Ac din
plasma totusi: Reactie de precipitare (Ag substanta straina), sau Reactie de aglutinare (Ag e
particular)).
2. limfocitele Ag-specifice sunt prezente, dar desi realizeaza recunoasterea Ag, ele nu pot fi activate
(limfocitele recunosc o categorie aparte de Ag haptenele)

Definitia antigenului II :
Ag este orice substanta de origine exo / endogena care are proprietatea de a interactiona specific cu receptorii Ag
solubili (ac) si / sau receptorii prezenti pe membrane limfocitelor, indiferent daca recunoasterea limfocitara a Ag se
soldeaza sau NU cu activarea limfocitelor, cu declansarea unui raspuns imun
Ag pot avea 1 din 4 proprietati posibile:
1. toate Ag interactioneaza cu receptori Ag solubili sau membrane SPECIFICITATE
2. unele Ag pot interactiona cu receptorii antigenici limfocitari, dar ele NU sunt capabile sa activeze limfocitele Ag
specifice ( haptenele)
3. Ag pot interactiona cu receptorii limfocitari, pot activa limfocitele Ag specifice, dar NU declanseaza rapunsuri
imune (tolerogene)
4. exista Ag care interactioneaza cu receptorii limfocitari, activeaza limfocitele Ag-specifice si au si proprietati de a
declansa raspunsuri imune (imunogene) IMUNOGENITATE
Ag au 2 proprietati importante: - specificitate
- imunogenitate




I. SPECIFICITATE
- proprietate a tuturor Ag
II. IMUNOGENITATE
- proprietate a majoritatii Ag, exista Ag incapabile sa declanseze raspuns imun (haptene) sau care au proprietatea de a
inhiba activitatea RI (tolerogene)
Aceasta definitie se aplica NUMAI Ag, NU si superantigenelor.
Superantigenele
- NU au SPECIFICITATE
- de regula ele AU IMUNOGENITATE

Natura antigenului:
Ag este o substanta, o structura elementara (o substanta foarte simpla sau un mic fragment dintr-o substanta cu
structura complexa un peptid dintr-un polipeptid). Aceasta structura elementara are un comportament Ag doar daca
ea interactioneaza specific cu receptorii Ag, fie solubili, fie membranari in structura Ag nativ distingem 2
componente distincte:

1. structura elementara ce poate fi recunoscuta de receptorii Ag (solubili/ membranari) = determinanti
Ag
2. Restul moleculei de Ag care NU e receptor direct de receptorii Ag, insa are rol de sustinere a
determinantului Ag. acesta = purtator sau carrier

I. SPECIFICITATEA
= proprietate obligatorie a Ag ce consta in capacitatea acestuia de a interactiona specific NUMAI cu situsul
complementar pentru Ag al unui receptor Ag unic (anticorp sau receptor limfocitar)
- receptorii Ag: membranari TCR (T Cell Receptor)
BCR (B Cell Receptor)
- situsul combinativ din receptori = portiunea direct raspunzatoare de recunoasterea Ag. Acesta este constituit din 2
lanturi polipeptidice cu structura foarte complexa. Din asamblarea lor rezulta o unitate de dimensiuni mici ce
permite acomodarea Ag de recunoscut. In compozitia fiecarui lant polipeptidic intra 2 componente mai
importante:
a.) paratop = singura portiune din situsul combinativ pentru Ag care are contacte directe cu Ag inductor. De
regula el e situat in interiorul situsului combinativ pentru Ag.
- paratopul e format din 3 portiuni mai importante:
1. initiala, la capetele aminoterminale ale lanturilor (primii 90-100 aa). Ea este sintetizata dupa codul unei
gene ce face parte din aproximativ cateva sute de gene de variabilitate
2. a doua portiune: <5 aa care este elaborata dupa codul unei gene ce face parte din cateva zeci de gene de
diversitate
3. a treia portiune e mai distal de capatul aminoterminal, formata din <10 aa, elaborata dupa codul unei
gene ce face parte din mai putin de 10 gene de jonctiune
- sinteza unui paratop se face prin recombinarea acestor 3 gene => per lant de paratop pot rezulta 10E4 variante de
lanturi ale situsului combinative pentru Ag. Per 2 lanturi => 10E8 tipuri diferite de situsuri combinative pentru
Ag.
- toate limfocitele T sau B care apartin unei singure clone limfocitare prezinta receptori antigenici ce contin in
structura lor acelasi tip unic de situs combinativ (au in genom acelasi tip de recombinaze)
- o singura clona de limfocite T/B poate recunoaste un singur tip distinct de determinant Ag (recunoasterea
determinantului Ag este clonotipic specifica)
=> reactia Ag-Ac = reactie cu specificitate absoluta la nivel de determinant Ag
b.) zona scheletala = portiunea situata la exteriorul situsului combinativ pentru Ag si care formeaza peretii
cavitatii. Ea NU e implicata in recunoasterea Ag.



II. IMUNOGENICITATEA
= capacitatea de a declansa RI
- are 3 faze:
1. Selectia clonala
- selectia de catre Ag dintr-un repertoriu preexistent de limfocite doar pe acelea care sunt Ag specifice
- limfocitele B au situsuri combinative diferite
- limfocitul b) din schema il va recunoaste
- el se numeste limfocit Ag-specific
- limfocitele a.),b.),c.) din schema NU sunt limfocite individuale, ci reprezentantii unor familii de limfocite (clone
limfocitare)
- toate limfocitele apartinand aceleiasi clone prezinta pe suprafata lor acelasi tip specific de receptor
- selectie clonala = recunoasterea Ag de catre limfocite NU poate fi realizata decat daca limfocitul Ag specific se
afla in stare de repaus (G0 a ciclului mitotic)
2. Activarea clonala si transformarea blastica
= consta in activarea metabolica a limfocitelor Ag specifice
- ca urmare a activarii, celula trece din faza G0 (repaus) in interfaza (G1-S/G2)
- ajunsa in interfaza, ea se transforma morphologic in limfoblast
3. Expansiunea clonala
- limfocitele activate incep sa se divida
- prin diviziuni mitotice successive => cresterea numarului de limfocite per clona activate, de aceea etapa se
numeste expansiune clonala
- clonele produc Ac Ag specifici. Ei prezinta situsuri combinative pentru Ag, capabile sa recunoasca Ag inductor.




NU TOATE AG AU AMBELE PROPRIETATI!
2 grupe de Ag:
1. IMUNOGENELE (antigene complete), care, in functie de mecanismul de declansare a RI se impart in 2 subtipuri:
a.) timoindependente (rar intalnite). Ele sunt Ag capabile sa declanseze NUMAI RIU. Ca urmare a stimularii directe a
limfocitelor B, fara a fi necesara prezenta limfocitelor T. Surse: unele bacterii
b.) timodependente (majoritare). Ele pot declansa fie RIU, fie RIC care insa au la baza o cooperare celulara in cadrul
careia e absolut necesara si prezenta si activarea limfocitelor T (in special TH). Ele reprezinta cel putin 95% din
totalul de Ag.
- biochimic, ele pot fi: proteine/glicoproteine, oligozaharide, fosfolipide, ac. nucleici sau alte substante
- la cooperarea ce sta la baza raspunsului participa urmatoarele categorii de celule:
- Ag timodependente sunt captate de APC
- In APC Ag sunt prelucrate/procesate si micile fragmente ce rezulta ulterior sunt expuse pe suprafata APC in
complex cu moleculele MHC
- Aceste fragmente = epitopi
- Epitopii sunt recunoscuti de TH care fie informeaza LB => RIU, fie TC => RIC

Conditiile de imunogenitate ale Ag timodependente:

1. Ag trebuie sa fie o substanta non-self. Proteinele sunt percepute ca non-self daca provin din si patrund in organisme
diferite genetic/filogenetic intre ele.
2. Aceste Ag sa aiba GM mare sau foarte mare.
3. Sa aiba structura complexa (mai complexa cu cat continutul de aa e mai mare)
4. Substanta trebuie sa fie degradabila/procesabila in APC (ca sa rezulte epitopi)
5. Raspunsul fata de Ag timodependent e conditionat genetic. El depinde de tipul de gene zise IR (IR = imune response).
Ele sunt gene MHC, respectiv HLA

2. HAPTENELE (antigenele incomplete)
- au o singura proprietate specificitatea;
- au GM mica sau foarte mica
- structura simpla
- pot interactiona cu receptor antigenic, dar ele singure NU pot declansa RI decat daca sunt cuplate natural sau artificial cu
macromolecule imunogene, numite purtatori (carrier)
=> haptenele au specificitate, dar NU pot declansa raspunsuri imune nu prezinta imunogenitate.

- imunogenele pot asigura conditia minima necesara activarii limfocitare (cross-linkarea interreceptoriala = legare
laterala a receptorilor antigenici), haptenele NU.



- in urma recunoasterii Ag apar semnale activatoare transmise spre interiorul celulei. Ele sunt miniaturale si se
exercita la distanta foarte mare unele de altele. Teoretic ele ar putea active limfocitul daca toti receptorii ar fi
activati intr-o arie restransa. Haptenele NU se pot aduna spontan intr-o arie restransa.
- cross-linkarea e foarte probabil de realizat in cazul imunogenelor. Partea carrier a Ag timoindependente poarta
determinanti Ag identici intre ei. Punerea in contact cu un limfocit B => recunoasterea Ag si o concentrare a
cuplurilor Ag-receptor intr-o arie restransa (cross-linkare). Apar stimuli miniaturali foarte apropiati => se
insumeaza => activarea limfocitului B cu generaea RIU. Cross-linkarea e realizata de partea carrier. In cazul Ag
timodependente: ele sunt formate din 2 parti, 1 carrier, cu structura simpla si GM mica, si la fiecare parte carrier
se asociaza o singura haptena. In timpul cooperarii dintre celule, limfocitul B recunoaste Ag dupa partea
haptenica. Limfocitul TH recunoaste Ag NUMAI dupa partea carrier. In cazul limfocitelor B => adunarea
cuplurilor Ag-receptor intr-o arie restransa. Cross-linkarea e realizata de limfocitul TH.

- toate Ag complete au o parte carrier si una haptenica. Partea haptenica e responsabila de proprietatea de
specificitate de raspuns (are la baza selectia clonala) si de reactie (Ac rezultanti reactioneaza cu partea
haptenica)
- ambele componente (carrier haptena) sunt responsabile de imunogenitate
partea haptenica e responsabila de specificitatea de raspuns si de reactie
Notiunea alternativa pentru haptena = determinant antigenic
Determinanti Ag = subcomponente ale moleculei de Ag nativ care din punct de vedere structural pot fi impartiti in 2
categorii:
a.)determinanti Ag liniari (secventiali)
- constituiti din 8-15 aa dispusi in succesiune unul dupa altul in structura lantului peptidic

- structuri amfipatice (formati din amestec de aa hidrofili si hidrofobi)
- pozitionati in interiorul moleculei de Ag, ei fiind eliberati NUMAI ca urmare a procesarii Ag inactive in APC
- sunt recunoscuti specific NUMAI de catre limfocitele T
b.)determinanti Ag conformationali
- constituiti din 8-15 aa dispusi in portiuni diferite ale lanturilor polipeptidice si sunt adusi in apropiere prin buclarea
moleculei de Ag native
- sunt structuri numai hidrofile (aa hidrofili)
- sunt pozitionati la suprafata moleculei de Ag nativ, in portiunea de maxima flexibilitate a Ag nativ
- de regula ei sunt recunoscuti NUMAI de limfocitele B si Ac elaborati de ele


Celule prezentatoare de antigen (APC)


Definitie = celule ce joac un rol esenial n iniierea n organele limfoide secundare (ggl limfatici, splin) a unor
rspunsuri imune, fie umorale, fie celulare fa de Ag timodependente.

Ag timodependente
- particip doar n iniierea rspunsurilor imune
- rspunsurile imune se desfoar doar n organele limfoide secundare
- condiia de baz n declanarea rspunsurilor imune const n stimularea de ctre Ag inductor a limfocitelor
efectorii
-
limfocite efectorii: Limfocite B, Limfocite T
c
- activarea limfocitelor efectorii NU se realizeaz niciodat per primam, ci activarea lor se realizeaz prin
parcurgerea a mai multe etape => rspunsurile imune ce apar sunt procese multifazice



Etapele de principiu ale rspunsurilor imune fa de Ag timodependente
- Acumularea intravascular a Ag declanatoare
- ele se pot acumula n diverse esuturi
- ele pot proveni din surs extern (Ag exogene) dac strbat barierele dintre mediu i organism (. cutanat, epiteliu
digestiv, epiteliu respirator)
- sau din surs endogen (eliberate ca urmare a generrii unor procese autoimune, Ag tumorale care se pot acumula
ca urmare a eliberrii lor de ctre celulele tumorale Ag eliberate la distan foarte mare de esutul int, ele sunt
lansate n circulaie i ulterior pot difuza extravascular cu acumulare n esuturi i organe)
- limfocitele efectoare pot fi localizate: - n circulaie
- n organele limfoide, unde sunt prezente majoritatea clonelor de L
B
i
L
T
- Ag NU poate activa limfocitele circulante
- L
B
circulante NU pot fi activate pentru c obinuit ele NU difuzeaz extravascular
- L
Tc
pot trece extravascular, dar NUMAI n condiii speciale (dac ele sunt celule cu memorie imunologic)
- Ag pot activa limfocitele din organele limfoide (ggl, splin). Ele ajung acolo ca urmare a faptului c sunt preluate
i transportate acolo de APC

- Transportul Ag declanatoare de la nivelul esuturilor ctre organele limfoide de ctre APC
- APC se localizeaz n organele limfoide i aici ncep s prezinte pe membrana lor Ag transportat pn la acest
nivel

- Prezentarea Ag


- Cooperarea dintre APC i - L
B
=> RIU
- L
Tc
=> RIC

- Activarea limfocitelor efectorii n cadrul cooperrii celulare

APC
- n funcie de profilul lor funcional se mpart n dou categorii:
c) APC profesionale
d) Macrofagele
e) Celule dendritice
f) Limfocite B
g) APC ocazionale
h) Neutrofilele
i) Celulele endoteliale
j) Unele celule epidermice


1. APC profesionale
Macrofagele
- celule produse de mduva hematogen, ce lanseaz n circulaia sistemic elemente tinere sub form de monocite
- acestea, dup un foarte scurt tranzit intracirculator (24-36h), trec n diverse esuturi i organe, fiind atrase sub
aciunea unor factori chemotactici
- n final => macrofage care devin macrofage activate
- ajunse n stadiul de macrofag activat pot ndeplini funcia de APC
- funcia de APC trece obligatoriu prin 5 etape:
1) Captarea Ag declanatoare
- macrofagele capteaz de regul NUMAI Ag corpusculare (bacterii, virusuri, mici parazii). NU
captez Ag solubile. Macrofagele capteaz Ag corpusculare aflate n 2 stri: opsonizate (mai frecvent)
i neopsonizate.
- captarea e un proces mediat receptorial



Opsoninele = factori imunologici solubili care nvelesc sau tapeteaz Ag corpusculare i favorizeaz captarea Ag
de APC
Exist 2 opsonine de importan:
- C
3b
a complementului (fragment rezultat din activarea factorului C
3
al complementului). Ea e pus n
libertate n urma funcionrii continue a cii alterne a complementului. C
3b
are ca particularitate faptul c
se ataeaz de orice membran NON-SELF => depunerea ei pe suprafaa bacteriei. Macrofagele capteaz
foarte uor aceste bacterii pentru c dispun pe suprafaa lor de receptori ce pot angaja legturi cu
componenta C
3b
a complementului (C
R
)
- IgG se depun pe suprafaa bacteriilor ca urmare a recunoaterii determinantului Ag de suprafa. IgG
angajeaz legturi cu ei prin intermediul captului F
ab
al IgG. Astfel IgG proemin n lichidul interstiial
prin captul F
c
. Macrofagele pot angaja foarte uor aceste legturi prin F
c
al IgG (au receptori pt F
c
al IgG
= receptori F
c
R)
Mai putin eficient pot fi captate i Ag neopsonizate ca urmare a faptului c macrofagele au
receptori pe suprafa capabili s recunoasc unele oligozaharide prezente n peretele Ag (fucozil,
manozil). Aceti receptori se numesc F/M-R.
Cei mai importani receptori sunt C
R
si

F
c
R (receptori opsoninici)
- captarea e un proces imunologic specific. Macrofagele, prin receptorii de suprafa NU vin niciodat n
contact direct cu determinanii Ag de suprafa ai bacteriilor => proces imunologic specific.
2) Endocitarea Ag captate
- se realizeaz ca urmare a emiterii de pseudopode i constituirea unor vacuole

- e un proces nalt consumator de energie
3) Prelucrare/procesare Ag endocitate, mai ales n compartimentul lizozomal
- aici se realizez fragmentarea Ag nativ, scindarea lui cu generare a numeroase fragmente ce poar
denumirea de epitopi
- din mai muli epitopi, macrofagele realizeaz selecia epitopilor imunodominani (cei mai capabili de
declanarea unui rspuns imun)
4) Conservarea unei mici pri din epitopii imunodominani n anumite subsectoare ale
macrofagului
- ea e important pentru c din cantitatea conservat ulterior macrofagul va elibera mici cantiti de
epitopi, ceea ce conduce la ntreinerea n timp a rspunsului imun
5) Cuplarea majoritii epitopilor imunodominani n moleculele MHC => n final complexe
MHC-epitopi i prezentarea Ag
- complexele MHC-epitopi sunt prezentate pe membrana macrofagelor
- prezentarea se realizez n cuplu cu moleculele MHC I, MHC II
- epitopii sunt prezentai ctre Limfocitele T
H
. Ele cunosc doar epitopii care sunt prezentai n complex cu
MHC II
- din totalul macrofagelor:
- periferice 75% pot sintetiza MHC II
- splenice 50% pot sintetiza MHC II
- hepatice 25% pot sintetiza MHC II
- dac macrofagele elaboreaz i MHC I i MHC II => ele sunt implicate n generarea unor rspunsuri
imune
- dac ele produc doar MHC I NU sunt implicate n generarea de rspunsuri imune, ele particip n reacii
inflamatorii
- cele mai importante etape pentru funcia de APC sunt prima i a cincea
- funcia de APC e condiionat de receptorii de suprafa i de producerea de MHC II
Funcia de ansamblu a macrofagelor
- transportul Ag tisulare prin limfaticele aferente ctre ariile timodependente (populate de Limfocitele T
H
) ale
organelor limfoide secundare. Aceste arii sunt reprezentate de zona paracortical n ggl limfatici i de PALS
intern n splin (PALS = stratul limfoid periarterial intern)



Celulele dendritice
- celule produse de mduva hematogen ce au ca principal caracteristic morfologic faptul c n condiii de
repaus prezint prelungiri citoplasmatice sau pseudopode
- pseudopodele au 3 caracteristici:
- sunt numeroase sau foarte numeroase
- sunt fine, efilate
- sunt lungi, depesc de 4 5 ori diametrul celulei propriu-zise
- seamn morfologic cu celulele dendritice din SNC
- ndeplinesc funcie de APC pentru c:
- n general dispun de receptori de captare (C
R
, F
c
R)
- n general ele elaboreaz molecule MHC
- ele NU reprezint o clas omogen, ci una foarte heterogen att morfologic, ct i funcional
- se disting 6 clase distincte, mprite n 3 clase mai mari (vezi tabel)
- Nelimfoide
3. CD Langerhans
- distribuite n esutul cutanat (limita dermo epidermic) unde formeaz un strat celular aproape continuu;
submucoasa bucal; submucoasa tractului digestiv; submucoasa i mucoasa colului uterin

- aspect atipic dendritic. Ele sunt celule stelate (prezint pseudopode puine i groase)
- ele dispun de receptori C
R
, F
c
R din abunden, ns NU elaboreaz MHC II
-
funcia lor: transport Ag de la nivelul . cutanat sau alte locaii ctre ariile timodependente ale organelor limfoide
secundare. Prezint Ag ctre LT
H
4. CD Interstiiale
- ele sunt distribuite ubicuitar la nivelul interstiiilor celulare
- au aspect morfologic atipic dendritic (sunt stelate)
- seamn cu CD Langerhans. Prezint receptori opsoninici, dar NU elaboreaz MHC II
- ele transport Ag tisulare ctre ariile timodependente ale organelor limfoide secundare
- Limfoide
3. CD Interdigitate
- sunt distribuite NUMAI n ariile timodependente ale organelor limfoide secundare
- sunt celule tipic dendritice
- ele sunt cele mai mari productoare de MHC II, ns NU au receptori de captare Ag (C
R
, F
c
R)
4. CD Foliculare
- pentru c sunt prezente n foliculii limfoizi (aglomerri de limfocite B). Ele sunt n zone bursodependente:
cortexul ganglionar, respectiv PALS extern a splinei
- expun pe suprafaa lor n cantiti enorme receptori de captare (C
R
, F
c
R). NU elaboreaz MHC II
- joac un rol important n concentrarea n zone bursodependente a Ag declanatoare, ceea ce favorizeaz
recunoaterea Ag de Limfocitele B. Ele au o funcie de filtru celular
- Circulante
5. CD Sangvine
- prezente NUMAI n circulaie, dar n numr mic (sub 0,1% din totalul PMN)
- NU dispun de nici una din categoriile de molecule prezente pe suprafa
6. CD Vluroase
- celule aplatizate care prezint pe flancuri oscilaii sau ondulaii ale membranei
- sunt prezente NUMAI n limf
- NU dispun de nici un fel de receptori i nici NU elaboreaz molecule de MHC II


CD CR F
c
R MCH II
Nelimfoide
(intratisulare)
CD Langerhans +++ +++
CD Interstiiale +++ +++
Limfoide CD Interdigitate +++++
CD Foliculare +++++ +++++
Circulante CD Sangvine
CD Vluroase



Se consider c aceste 6 tipuri de celule NU reprezint entiti morfologice n sine, ci toate provin dintr-o singur
celul progenitoare, care n funcie de ariile pe care le traverseaz, i modific aspectul morfologic, de aceea
discutm despre traficul i filiaia celulei dendritice.
Mduva osoas lanseaz celule dendritice n circulaie, apoi ele trec n esuturi i organe.
De asemenea din circulaie trec n ggl locoregionali. Se consider c parenchimul ggl prezint la exterior o zon
cortex bursodependent, iar la interior o zon paracortex timodependent.
n splin ajung prin arteriola central. n jurul ei se afl pulpa alb. Ea e populat de leucocite. n jurul pulpei albe
se afl pulpa roie. Pulpa alb e alctuit din 3 manoane concentrice:
1. PALS intern (timodependent)
2. PALS extern (bursodependent)
3. Zona marginal
Iniial sunt produse CDS, care sunt ovalare. Ele pot urma 2 traficuri:
1. traficul intratisular
a. esut cutanat
- aici i modific aspectul morfologic (devin stelate) = CD Langerhans
- ele prezint pe suprafa receptori de captare Ag (C
R
, F
c
R) prin care pot capta diverse Ag
- apoi se activeaz i ncep s migreze, transportnd Ag
- ele iau calea limfaticelor aferente ctre ggl locoregionali
- n limf ele i modific aspectul n CD Vluroase i ptrund n ggl locoregionali, unde se stabilesc NUMAI n
paracortex
- aici i modific aspectul n celule tipic dendritice (CD Interdigitate). Ele produc MHC II prin care prezint Ag
ctre T
H
, care se inclaveaz printre prelungirile lor => activare T
H
cu declanarea rspunsului imun
b. organe somatice
- aici i modific aspectul i devin stelate (CD Interstiiale)
- funcie de captare Ag (prezint C
R
, F
c
R)
- ele se activeaz i pot urma 2 tipuri de traficuri:


n ggl locoregionali, unde ele se transform n CD Interdigitate

calea antidromic i reintr n circulaie, se transform din nou n CD Sangvine. Sub aceast
form ptrund n splin, lund calea arteriolei centrale i se fixeaz n PALS intern, unde se
transform morfologic n CD Interdigitate i prezint Ag ctre LT
H
2. traficul limfoid
- CD Sangvine pot ptrunde direct n organele limfoide
n ggl, unde se opresc n cortex, lund aspectul de CD Foliculare
n splin, prin arteriola central i se fixeaz n PALS extern, unde devin CD Foliculare

Limfocitele B
- pot funciona ca APC pentru c prezint pe suprafaa lor receptori de captare Ag (C
R
, F
c
R i BCR)
- BCR capteaz Ag solubile
- n anumite etape L
B
pot elabora i expune molecule MHC II

Moleculele prezentatoare de Ag (MHC I i MHC II)

1. MHC I

- distribuite ubicuitar, pe membrana tuturor celulelor, cu excepia eritrocitelor i a trombocitelor
- sunt heterodimeri, formai din 2 lanuri diferite, dar asociate ntre ele, orientate cu capetele N-terminale n afara
celulei i cele C-terminale n interior. Ele se noteaz cu i .
e un lan mare, cu GM de aproximativ 40-45 kda,
are GM de aproximativ 12 kda (
2
microglobulin)
- lanul
- foarte lung, NU este liniar
- el e constituit din 3 bucle (domenii), tiate prin puni sulfurice intracatenare
- buclele sunt formate din 100-110 aa
- cele 3 domenii se noteaz cu
1
,
2
,
3

-
1,

2
sunt constituite din secvene de aa variabile sau extrem de variabile (domenii polimorfe). Ele sunt
poziionate fa n fa i constituie o cavitate de dimensiuni mici = situs de prezentare a Ag
-
3
au o structur constant pe toate celulele unui individ. E considerat un Ag self
- la acest lan se asociaz lanul
- lanul
- poziionat extracelular
- realizeaz legturi covalente cu
3

- are structur constant la toi indivizii aceleiai specii

Funciile MHC I:
- prezentarea Ag endogene
- responsabile prin
3
de declanarea reaciilor de respingere a grefelor de esuturi i organe
- cooperarea dintre APC, pe suprafaa crora se poate afl, i LT
c
sau LT
S
. n timpul cooperrii dintre ele se
angajeaz legturi prin MHC I cu un contraligand prezent pe membrana LT
c
i LT
S
(el se numete CD8).
Angajeaz legturi cu domeniul
3
.













2. MHC II

- distribuite restrns (pe membranele celulelor participante la rspunsurile imune: APC, L
B
sau L
T
)
- sunt heterodimeri, formai din 2 lanuri cu GM apropiat
GM 32-34 kda
GM 27-28 kda
- lanurile sunt organizate n bucle sau domenii. Pe fiecare lan exist 2 domenii (
1
,
2
,
1
,
2
), dinspre captul N-
terminal spre cel C-terminal.
-
1
,
1
au structur variabil sau hipervariabil (domenii polimorfe). Ele sunt poziionate fa n fa, se onduleaz
=> o cavitate = situs prezentator de Ag
-
2
,
2
sunt domenii monomorfe


Funciile MHC II:
- prezentarea Ag exogene (provenite prin fagocitare)
- pot avea o contribuie la declanarea unor reacii de respingere a grefelor (
2
)
- cooperare APC i LT
H
=> legturi ntre MHC II i un contraligand prezent tipic pe T
H
(CD4) => legturi CD4-
2






Mecanismele prezentrii selective a Ag de ctre moleculele MHC



1. MHC I
- prezint Ag endogene (provenite din citoplasma APC). La origine ele sunt proteine citoplasmatice ce pot fi
autoantigene, Ag tumorale, Ag rezultate din metabolizarea bacteriilor cu habitat intracelular, din diverse categorii
de virusuri ce colonizeaz citoplasma
- proteinele trebuiesc prelucrate => un compartiment enzimatic (proteozomi = materiale enzimatice non-
lizozomale, constituite din uniti sub form de inel 4 la exterior i la interior). au rol imunoreglator, iar
sunt uniti enzimatice ce conin diverse tipuri de endopeptidaze
mici fragmente peptidice = epitopi. Ei vor fi translatai din citoplasm n RER, unde se elaboreaz moleculele
MHC I
- translarea NU se face prin difuziune, ci prin sisteme transportoare ce se numesc TAP
1
/
2
(transportorul asociat
prezentrii Ag)
- proteozomii sunt ancorai la TAP prin intermediul unor proteine de legtur LMP (low mass proteins) i sunt 2
varieti: LMP-2 (2 kda) i LMP-7 (7 kda)
-
epitopii sunt ncrcai pe MHC I, care sunt eliberai iniial ca lanuri individuale (I i I). Ele se asociaz =>
molecule MHC I (dar lanurile NU au afinitate mare ntre ele). Ele sunt solidarizate ca urmare a asocierii unor
chaperine (CALNEXINA). nc NU e capabil s fixeze epitopii. Cea de-a doua chaperin i d capacitatea
aceasta. Ea induce modificri conformaionale n , soldate prin deschiderea larg a situsului pentru prezentarea
Ag (CALRETICULINA) CR5 permite ataarea complexului la sistemul TAP (crete afinitatea I pentru
tapsin, care leag MHC I la sistemul TAP) => epitopii sunt ncrcai i complexul MHC I e adus la suprafa, iar
epitopii vor fi recunoscui de LT
c
sau LT
S.

2. MHC II
- 2 lanuri II i II, aflate n RER. La ele se asociaz lanul IIi(inhibitor). Prin captul N-terminal el obtureaz
situsul pentru prezentarea Ag al acestor molecule => epitopii NU pot fi ncrcai pe MHC II. Cnd se cupleaz
sunt translate n endozomi.
- n endozomi: lanul IIi: se ndeprteaz captul C-terminal, el rmnnd ataat prin captul N terminal (CLIP
peptidul inhibitor divizat prin clivaj)
- lanul CLIP e ndeprtat => situsul prezentator de Ag devine liber => moleculele pot fixa epitopii rezultai prin
calea endocitar (fagocitoz)
- la ncrcare moleculele sunt aduse la suprafa i epitopii prezentai vor fi recunoscui doar de LT
H



Populaiile limfocitare i markerii lor de suprafa


- din totalul celulelor seriei albe, limfocitele reprezint cam 25-40%, ceea ce corespunde unei valori absolute de
1500-4000 de limfocite pe mm
3

- din punct de vedere morfologic, se mpart n:
1. Limfocite mici
- aproximativ 80-85% din totalul limfocitelor periferice
- diametru 6-9 m
- raport nucleu/citoplasma supraunitar
- subvarieti:
a. limfocite T
b. limfocite B
2. Limfocite mari
- 10-15% din totalul limfocitelor periferice
- diametru 10-16m
- prezint ciplasm foarte abundent ce nconjoar de jur mprejur nucleul
- n citoplasm sunt prezente din abunden granulaii azurofile uor de evideniat n microscopia optic
- se numesc LGL (Large Granular Limphocytes)
- ea include celulele NK implicate n imunitatea natural i RIC


1. Limfocitele mici
- difereneierea LT/LB NU poate fi fcut niciodat pe baza unor criterii morfologice
- diferene din punct de vedere electronomicroscopic
- diferenierea se face rapid i eficient pe baza unui test funcional: testul Rozetrii (foarte vechi, const n punerea
n contact a limfocitelor raportate anterior prin tehnici de gradient cu eritrocite de oaie; singurele care angajeaz
legturi cu acestea i formeaz conglomerate celulare sunt LT)


- LB NU sunt celule rozetante
- LT prezint pe suprafa lor un receptor tipic de adeziune intercelular (CD2). El NU exist pe suprafaa LB
- LT NU reprezint o populaie celular omogen, ci este foarte heterogen din punct de vedere funcional
- avem 4 subvarieti de LT:
a. TH
b. TC
c. TS
d. TCS (contrasupresoare)
- diferenierea dintre ele NU poate fi fcut pe baza criteriilor morfologice i nici pe baza testului rozetrii pentru c
toate rozeteaz la fel
- diferenierea dintre ele se face prin evidenierea markerilor de suprafa
- pe TH se afl un marker diferit de TC, TS, TCS
- markerii pot fi identificai cu ajutorul unei tehnici flaucitometrie (citometrie n flux). Ea se bazeaz pe utilizarea
Ac monoclonali (artificiali, cu nalt specificitate, marcai fluorescent i recunosc tipic NUMAI 1 marker)
- conteaz de fapt merkerii de suprafa, NU forma limfocitelor
Limfocitele T
Caractere generale

- reprezint populaia limfocitar majoritar prezent n sngele periferic (68-80% din totalul limfocitelor
periferice)
- sunt celule cu durat de via lung sau foarte lung (ani, yeci de ani, ct o via de om)
- celule intens recirculante (ele patruleaz continuu n ntreg organismul n cutarea Ag pentru care sunt
programate genetic)
I. Receptorii de suprafa ai LT
- expun pe suprafaa lor 3 categorii de receptori:
1. Receptori de recunoatere Ag
a. Complexul TCR-CD3
- rol n recunoaterea Ag (epitopilor)
b. Coreceptori: CD4 sau CD8 (recunoaterea moleculelor prezentatoare ale epitopilor CD4 MHC
II
CD8 MHC I
Din a. i b. => recunosc simultan att Ag prezentat ct i moleculele prezentatoare ale acestora = recunoaterea
Ag asociativ (reprezint i principala cale de activare metabolic a LT)
2. Receptori cu rol accesor n activarea LT:
o CD28
o CD45
3. Receptori de adeziune intercelular
- permite stabilirea de contacte LT alte tipuri de celule
o CD2
o LFA1 (CD11A/CD18)
- CD = titulatura de catalog a receptorilor prezeni la suprafaa limfocitelor. CD urmat de un numr = un singur
receptor prezent la suprafaa LT. s-a recurs la aceast titulatur, pentru a se nlocui titulaturile mai vechi,
descriptive. Unele se mai pstreaz (LFA1 antigen asociat funciei leucocitare; VLA antigen cu apariie foarte
trzie, el apare dupa ce LT au fost activate, deci apar foarte trziu; ICAM molecule de adeziune intercelulara)
- CD = cluster of designation
= class du differention
= clas de difereniere


1. Receptori de recunoatere Ag
Caracteristicile recunoaterii Ag realizat de LT
i. LT recunosc Ag NUMAI dup structura lor primar (secvena de aa). Recunosc n mod tipic doar
Ag hidrofili
ii. LT recunosc NUMAI Ag prezentat pe suprafaa APC n complex cu molec MHC (LT, spre
deosebire de LB NU recunosc niciodat Ag solubile)
iii. Recunoaterea realizat de LT e prin definiie o recunoatere asociativ
a. Complexul TCR-CD3
- pe suprafaa LT aflate n repaus exist n jur de 60000 de asemenea complexe


- TCR (receptorul celulei T pentru Ag)
- heterodimer constituit din 2 lanuri transmembranare ( i ) orientate cu capetele N-terminale afar i
cele C-terminale n interiorul LT

- lanurile sunt elaborate dup codul unor gene diferite: Cz 14, Cz 7
- n segmentul extracelular i se asociaz ntre ele prin puni disulfurice


- membrana LT strbtut de lanuri separ 3 segmente n cele 2 lanuri

a. segmentul extracelular
- lanurile NU sunt liniare, ci adopt o configuraie imunoglobin-like (sunt organizate n bucle sau domenii
situate simetric)
- pe cele 2 lanuri exist cte 2 domenii, fiind de principiu formate din 100-110 aa
- domeniile N-terminale sunt constituite din secvene de aa variabile/hipervariabile. Ele se noteaz cu V i
V
- V i V se asociaz ntre ele i constituie o cavitate de dimensiuni mici = situs combinativ pentru Ag
(SCAg)
- celelalte 2 domenii sunt constituite din secvene de aa constante ca structur pe majoritatea limfocitelor.
Se noteaz cu C i C
- dintre cele 2 perechi de domenii, cele mai importante din punct de vedere funcional sunt cele variabile.
Ele formeaz SCAg i pentru aceasta ele sunt responsabile de recunoaterea Ag
- dei V i V sunt implicate n recunoaterea Ag, ele NU angajeaz niciodat contacte cu Ag prin
ntreaga lor secven de aa, ci realizeaz contacte cu Ag care sunt punctiforme, realizate prin intermediul
unor mici secvene de aa (8-15) rezultate n urma plicaturrii V i V. Aceste segmente sunt situate n
vrful plicaturilor i protruzioneaz adnc n cavitate, realiznd legturi cu Ag prin potrivire de form sau
complementaritate => ele se numesc CDR (regiuni determinante ale complementaritii)
- domeniile variabile V, V
- circular prin plicaturare
- plicaturile exist prin intermediul celor 3 puni disulfurice intradomeniu
- secvenele din vrful plicaturilor sunt doar ele responsabile de contactul cu Ag (8-15 aa). Ele se numesc
CDR
- pe fiecare domeniu exist 3 CDR. Ele constituie paratopul
- restul secvenelor = zona scheletal (FR framework regions)
- recunoaterea Ag se face prin stabilirea de contacte difereniate ntre CDR i complexul MHC epitop
- LT recunosc doar Ag care sunt prezentate pe suprafaa APC
- APC expun prin moleculele MHC un epitop
- CDR1 CDR2 angajeaz legturi NUMAI cu moleculele MHC, recunoscnd din acestea doar domeniile
polimorfe (MHC I
1
,
2,
MHC II
1,

1
)
- CDR3 sunt singurele care asigur legturi cu epitopul prezentat
e recunoscut att epitopul, ct i prezentatorul acestuia, deci se realizeaz o recunoatere Ag asociativ
intrareceptorial (1 receptor 2 molecule recunoscute)
- domeniile constante C, C
- poriunea din segmentul extracelular al TCR ntre domeniile intern i membranar = zona balama
- n aceast poriune (ZB) lanurile i se asociaz ntre ele prin puni disulfurice => heterodimerul
- ea e poriunea din TCR dotat cu maximum de flexibilitate. n jurul ZB TCR execut n mod continuu
micri de baleiere, care favorizeaz recunoaterea Ag (contactul cu complexul MHC epitop prezentat
pe suprafaa APC)
b. segmentul transmembranar
- constituit din 22-25 aa
c. segmentul intracitoplasmatic
- este extrem de scurt 5-12 aa
Funciile TCR
- realizeaz recunoaterea Ag
- genereaz semnale activatoare care apar secundar recunoaterii Ag

- NU poate realiza transmisia sau transducia semnalelor ctre sistemele enzimatice din profunzime. Ea se
realizez prin a doua component a complexului TCR-CD3, adic prin CD3


- CD3
- complex pentameric, format din 5 lanuri:
- 3 lanuri scurte i groase care prezint segmente intracitoplasmatice destul de reduse (notate , , ). Au
GM de aproximativ 21-25kda i sunt elaborate dup gene prezente pe cromozomul 11
- la cele 3 lanuri scurte i groase se asociaz 2 lanuri foarte lungi i efilate care cel mai frecvent sunt
identice ntre ele (notate , au GM de 16kda, fiind elaborate dup codul unor gene aflate pe cromozomul
1)
- cele 5 lanuri se asociaz ntre ele prin puni disulfurice i se asociaz la TCR
complexul heptameric TCR-CD3
- CD3 trimite semnalele activatoare ctre lanurile , ele avnd acces la sistemele enzimatice de profunzime
- CD3 fixeaz localizarea membranar a unor enzime foarte importante pentru activarea metabolic a LT.
Ea se face la nivelul unor secvene mici de aa prezente n poriunea intracitoplasmatic a tuturor lanurilor
CD3 se numesc ITAM (motive activator imunoregulatorii tirozinice)
b. Coreceptori
- CD4
- coreceptor de recunoatere Ag
- GM 60kda
- elaborat dup codul unor gene prezente pe Cz 12
- distribuia: CD4 e distribuit tipic pe suprafaa TH
- el e considerat marker definitoriu pentru TH
- TH = LT CD4+


- e o glicoprotein transmembranar orientat cu captul N-terminal afar, C-terminal nuntru
- exist 3 segmente:
a. segmentul extracelular
- organizat n bucle sau domenii
- 4 bucle diferite ntre ele (D
1
D
2
D
3
D
4
)
- E implicat n recunoaterea moleculelor prezentatoare de Ag
- Contactele se stabilesc cnd LT coopereaz n vederea recunoaterii Ag cu APC, care expun MHC cu
epitop
- Receptorul recunoate NUMAI moleculele MHC II, contactndu-l prin D
1
, NUMAI domeniul monomorf
al moleculei MHC II
2

b. segmentul transmembranar
c. segmentul intracitoplasmatic
- este foarte lung
- prin el contribuie esenial la activarea TH
- CD4 se afl n contact fizic cu o enzim (proteintirozinkinaz PTK1). Varietatea tipic pentru TH e
PTK p56
lck

- p56 proteina 56kda
- lck titulatura protooncogenei responsabil de sinteza acestei proteinkinaze (kinaz caracteristic
leucocitelor)
- CD8
- glicoprotein transmembranar heterodimeric: 1 lan i unul
- orientat cu capetele N-terminale afar i cele C-terminale la interior
- elaborat dup codul unor gene de pe Cz 2

- particularitate: n segmentul extracelular prezint cte un domeniu
- domeniile sunt poziionate simetric => conformaie Ig-like
- segmentele intracitoplasmatice sunt foarte lungi
- CD8 e prezent pe suprafaa TC i TS (LT CD8+)
- funcii realizate diferit prin segmetul extracelular i cel intracitoplasmatic
- segmentul extracelular: cooperarea ntre TC/TS i APC (cooperarea se face cu ocazie prezentrii i
recunoaterii Ag. n timpul cooperrii CD8 recunoate specific NUMAI moleculele MHC I, angajnd
legturi NUMAI cu domeniul monomorf al MHC I
3
). Are rol important n activarea TC/TS
- segmentul intracitoplasmatic: se afl n contact cu aceeai PTK p56
lck


Cei 4 receptori (TCR, CD3, CD4, CD8) realizeaz recunoaterea Ag asociativ.
- recunoaterea e dublu asociativ:

o recunoatere Ag asociativ intrareceptorial (realizat de TCR)
o recunoatere Ag asociativ interreceptorial (recunosc moleculele prezentatoare)
stabilirea unui numr mare de contacte intre moleculele prezentatoare i cele prezentate
LT leg. cu MHC (5) prin TCR i CD4/CD8
cu Epi (2) prin TCR
DAR ele se realizeaz DOAR cnd e recunoscut epitopul
- moleculele MHC de regul sunt molecule prezentate NUMAI pe membranele celulare => LT recunosc
NUMAI Ag membranare
- Ag membranare pot fi de 3 tipuri:
1) Ag prezentate
2) Ag constitutive
3) Ag ataate
- LT NU recunosc niciodat Ag ataate (Ac) i Ag constitutive (Ac/NK)
- LT recunosc DOAR Ag prezentate n complex cu MHC
recunoaterea Ag de LT este o recunoatere MHC restrictiv


2. Receptori cu rol accesor n activarea LT
- CD28
- glicoprotein transmembranar homodimeric
- GM 45kda
- distribuie: prezent NUMAI pe suprafaa TH/TC i niciodat pe TS
- segmentul extracelular: cte o bucl pe domeniu
- segmentul intracitoplasmatic: lung sau foarte lung
- funcie: favorizeaz net cooperarea dintre TH/TC i APC
- n timpul cooperrii se stabilesc legturi ntre CD28 i un contraligand (CD80) prezent NUMAI pe
suprafaa APC profesionale => semnale activatoare care se trimit ctre profunzime, ele contnd enorm
pentru maturarea funcional a TH/TC
- TH produce diverse tipuri de IL
- TC produce CK
- CD45
- glicoprotein transmembranar
- GM 100-200kda
- pe suprafaa tuturor celulelor de origine hematogen (excepie eritrocitele i trombocitele)

- pe suprafaa LT e extrem de bine reprezentat (ocup 10% din suprafaa lor membranar)
- NU exist ca receptor izolat
- El se ataeaz prin puni disulfurice la lanul al CD3 => CD45 e activat ntotdeauna ca urmare a
stimulrii Ag
- Funcie enzimatic, e o fosfataz (PTP) care mpreun cu PTK formeaz un cuplu funcional extrem de
important

3. Receptorii de adeziune intercelular
- foarte importani printre altele n cooperarea prin contact ntre LT i APC
= cooperare cognitiv

- CD2
- receptor panT (pe toate LT) i pe suprafaa celulelor NK
- glicoprotein transmembranar
- are GM 50kda
- segmentul extracelular prezint 2 domenii
- segmentul intracitoplasmatic este foarte lung
- funcii: segmentul extracelular stabilirea de contacte cu un contraligand prezent pe APC (LFA3[CD58])
contacte prin complementaritate
segmentul intracitoplasmatic pregtirea activrii LT, se afl n contact fizic cu o enzim PLC
(fosfolipaza C)
- cnd se stabilesc contacte CD2-LFA3, CD2 sufer modificri conformaionale ce permit translocarea
PLC de la nivelul citoplasmei la nivelul membranei
- LT naive = limfocite care n existena lor NU au ntlnit niciodat Ag pentru care au fost programate
genetic s l recunoasc
- cuplul de adeziune CD2-LFA3 = cuplul de adeziune de linia nti (primele legturi dintre APC i LT se
stabilesc prin acest cuplu). Afinitatea reciproc CD2-LFA3 e extrem de mare
- LFA1
- prezent pe LT, LB, NK
- 2 lanuri (CD11a) i (CD18)
- segmentul extracelular 2 domenii (imagine de Ig-like)
- segmentul intracitoplasmatic foarte lung
- funcie: segmentul extracelular stabilirea de contacte cu un contraligant prezent pe suprafaa APC (din
categoria ICAM)
- prezent pe suprafaa LT, n mod particular pe suprafaa LT cu memorie (au ntlnit de nenumrate ori Ag
pentru care sunt programate s l recunoasc)
- cuplul de adeziune LFA1-ICAM = cuplul de linie a doua (legturile se stabilesc mai trziu i sunt
instabile o perioad de timp)

Rolul receptorilor
- stabilirea de contacte APC-LT pe arii ntinse ale membranelor
- aceste cupluri de adeziune favorizeaza net prezentarea i recunoaterea Ag pentru c MHC+Epi i TCR
NU sunt poziionate fa n fa. Astfel ele au timp s pluteasc pe membran i s vin n contact unul cu
altul




LT CD3 CD4 CD8 CD28
TH + + - +
TC + - + +
TS + - + -

Mecanismele activrii LT

Activarea LT, care reprezint momentul central al majoritii rspunsurilor imune fa de Ag timodependente NU
se realizeaz n orice ipostaz, ci doar dac sunt strict ndeplinite anumite condiii ce sunt diferite in vivo/in vitro.
Condiii in vivo
- LT sunt activate NUMAI de Ag timodependente
- Activarea LT se realizeaz strict n organele limfoide secundare (ganglioni, splin), doar n conditiile unei
cooperri celulare la care este absolut necesar prezena i activarea APC

- Ag timodependente native NU pot stimula direct LT pentru c LT NU dispun pe membrana lor de receptori de captare
Ag.
- LT NU expun receptori pentru complement si IgG
- Exist alte celule (APC) care prezint pe mebrana lor din abunden receptori de captare Ag. Ele le capteaz,
endociteaz, scindeaz => epitopi. Unii sunt ulterior prezentai n complex cu moleculele MHC. Ei sunt apoi recunoscui
de LT prin TCR+CD3
- Cooperarea i activarea care rezult pentru a conduce la un rspuns imun eficient trebuie s fie bidirecional
(APC i LT trebuie s se stimuleze reciproc una pe cealalt)
Distingem n cadrul cooperrii 2 tipuri de activare:
- activarea anterograd
k) se desfoar dinspre APC spre LT i la finele ei se realizeaz activarea LT. Se numete activare anterograd
pentru c ea se exercit n acelai sens cu prezentarea i respectiv recunoaterea antigenic
l) prin transmiterea unor semnale ctre LT pe 2 ci principale:
i. primul semnal e transmis pe calea principal (TCR CD3). El ia natere ca urmare a
recunoaterii de LT a epitopului prezentat. El are 2 roluri foarte importante:

- conduce la activarea metabolic a LT
- contribuie la declanarea diviziunii mitotice a LT => crete numrul de limfocite T
per clon activat => 2 modificri clonale: activarea clonal i expansiunea
clonal
ii. cale accesorie: implic activarea receptorului CD28 prezent pe suprafaa LT. El e activat dac
angajeaz legturi cu un contraligand prezent pe APC proliferate (CD80). n CD28 => semnale
transmise ctre limfocit. Ele:
- contribuie la activarea diviziunii mitotice a LT
- contribuie la maturarea funcional a LT
- contribuie la maturarea funcional a clonei
5. clona sufer 3 modificri foarte avantajoase:
- activare
- expansiune
- maturare
Cu o asemenea clon => va declana un RI eficient


- activarea retrograd
3. dinspre LT deja activate ctre APC
4. la finele ei => activarea total, definitiv, maxim a APC
5. ea se exercit n sens opus prezentrii i recunoaterii Ag
6. se realizeaz prin eliberarea de ctre LT activate a unor IL cu rol activator pentru APC (IFN, IL-4). Ele
stimuleaz producia i expresia pe membrana APC a moleculelor MHC II (n special) => creterea
prezentabilitii Ag => activarea suplimentar a LT
7. LT activate suplimentar activeaz suplimentar APC, etc
8. Ele se activeaz reciproc pn n momentul n care este atins i depit valoarea prag a declanrii RI
9. Valoarea prag a declanrii RI = atingerea i depirea cnd clona sufer cele 3
modificri: e activat, expansionat i maturat

Activarea anterograd
10. trece ntotdeauna prin 2 etape:
- Etapa Ag nespecific a activrii LT
11. n cursul ei se realizeaz legtura ntre membranele APC i LT prin cuplurile de adeziune intercelulare
12. primele legturi se realizez pe seama cuplului de adeziune de linia I (CD2 pe LT i LFA-3 CD58 pe APC).
Aceste legturi sunt stabile pentru lungi perioade de timp. Numrul lor este imens de la bun nceput (sute de mii
de asemenea legturi)
13. apoi se stabilesc legturi de linia a II-a, ntre LFA-1 (pe LT) i ICAM. Ele apar mai trziu datorit faptului c cei
2 liganzi au o afinitate n general mic. Ele sunt instabile i iniial numrul lor este mic.



14. Funciile acestei etape:
i. Prin formarea cuplurilor de adeziune membranar APC i LT vin n contact intim pe suprafee
foarte mari
ii. Conteaz pentru pregtirea activrii LT. n momentul n care se stabilesc legturi CD2 LFA-3,
PLC, care n cazul LT e poziionat mai interior, vine n contact cu CD2 => migreaz la
suprafa, unde poate fi activat
15. ea are loc permanent. Legturile NU au loc NUMAI n situaia n care APC prezint un Ag, dar el NU a fost nc
recunoscut. Ea are loc i n situaia n care APC NU expune epitopi (moleculele MHC ale APC sunt goale)
16. faptul c LT stabilesc contacte continue cu APC => LT controleaz permanent APC dac expun sau NU Ag =>
supraveghere imunologic
- Etapa Ag specific a activrii LT
17. e ocazionat de prezentarea i recunoaterea Ag
18. epitopii sunt recunoscui de TCR
19. la TCR se asociaz laurile CD3 , i i la ele se asocialz cel mai frecvent 2 lanuri lungi, identice ntre ele,
lanurile . Apoi se mai asociaz, tot prin puni disulfurice, CD45
20. 2 coreceptori:
i. CD4, dac e TH
ii. CD8, dac e TC/TS
21. CD4/CD8 se afl n citoplasm n contact cu o enzim, PTK (varietatea p56 LCK). n centrul catalitic exist o
timozin, n poziia 505, cu rol reglator pentru PTK
22. Activarea LT e rezultatul declanrii n succesiune a 2 categorii de stimuli:
7. Apare pe calea CD4/CD8. El e generat n momentul n care CD4/CD8 angajeaz legturi cu domeniul
monomorf al moleculei MHC => stimul ce se transmite prin CD4/CD8, el fiind un stimul inhibitor. El se
transmite prin segmentul intracitoplasmatic al CD4/CD8 ctre PTK. Primind stimulul, PTK sufer modificri
conformaionale => exteriorizarea Tyr din poziia 505. Exteriorizat, ea se autofosforileaz spontan, ceea ce
duce la inhibiia TOTAL a PTK. Inhibiia are rolul unui mecanism de protecie, prin care este mpiedicat
activarea LT n situaia n care APC NU prezint nici un epitop (moleculele MHC sunt goale). Dac NU ar
exista, LT ar reaciona fa de MHC i ar exista anse ca LT s distrug APC. Dac MHC NU sunt vide,
atunci e declanat un al 2-lea semnal
8. apare pe calea TCR CD3. El e un semnal activator i se transmite din lan n lan de la TCR prin toate
lanurile CD3. atinge lanurile => urmeaz 2 ci: una scurat (a) i una lung (b)

9. de la lanurile ctre CD45. cd 45 se activeaz i ncepe s funcioneze ca o PTP (fosfataz). CD45
preia (P) de pe Tyr din poziia 505 => o defosforilare a PTK p56
lck
. Acum ea se activeaz. Ea
fosforileaz enzime => activarea metabolismului intermediar al LT. n al doilea rnd, ea fosforileaz
secvenele ITAM. Fosforilndu-le, ele se activeaz i devin capabile s fosforileze alte enzime
(kinaze). Cea mai important e kinaza ZAP-70. ea se fixeaz de lanurile (ZAP = Protein asociat
lanurilor , are GM de 70 kda). Stimulii sunt trimii pe calea b.
10. De-a lungul lanurilor i n final au acces la ZAP-70, care tocmai s-a fixat. ZAP-70 se activeaz i
fosforileaz prelund fosfatul de pe CD45 i l trimite la PLC, care fiind fosforilat, se activeaz. n
mare, activarea declaneaz cascada fosfatidil-inozitolilor. PLC hidrolizeaz PIP2 (fosfatidil inozitol
disfosfat) => Inozitol trifosfat (IP3) i diacilglicerol (DAG)
IP3
23. substan hidrosolubil
24. difuzeaz n ntreaga citoplasm, pn ajunge la nivelul REN, care prezint receptori specifici pentru IP3 =>
activarea REN cu eliberarea masiv n citoplasm a Ca
2+
(hipercalciie). Efectul ei foarte important e acela ca Ca
2+

activeaz calcinemina (o fosfataz calmodulin dependent). Ea influeneaz indirect anumite funcii nucleare. Ea
exercit aceste efecte printr-un factor transcripional = NF-AT (factor nuclear al LT activate). NF-AT e un factor
polipeptidic prezent n mod continuu n citoplasma LT, dar atta timp ct LT se afl n repaus NF-AT e inactiv
pentru c e fosforilat. Activarea NF-AT se face prin defosforilalrea sa sub aciunea calcineminei. Defosforilat,
NF-AT trece n nucleu i aici activeaz marea majoritate a genelor pentru IL => o sintez crescut de IL =>
naturarea LT
DAG
25. substan liposolubil
26. NU difuzeaz n citoplasm, ci rmne la nivelul membranei
27. Aici DAG activeaz o kinaz (PKC). Ea, indirect, poate activa anumite funcii nucleare prin intermediul unui
factor transcripional (NF-KB = factorul nuclear pentru lanurile uoare K ale Ig a LB)
28. NF-KB a fost evideniat acum 20 de ani, n cazul LB mielomatoase
29. NF-KB factor polipeptidic prezent n mod continuu n citoplasma LT. Cnd sunt n stare de repaus NF-KB e
inactiv, fiind cuplat cu un inhibitor proteic. Activarea se realizeaz sub aciunea PKC, care fosforileaz inhibitorul
=> desprinderea lui de pe NF-KB. NF-KB devine liber i poate trece n nucleu. Activeaz marea majoritate a
genelor pt IL sau CK i n mod cu totul special activeaz foarte intens 2 gene: gena pentru IL-2 ct i gena pentru
receptorul IL-2
30. LT devine productor de IL-2 i are i cu ce s o recepteze => se activeaz cu prpria IL-2 => o activare autocrin
cu IL-2 => activarea metabolismului i maturarea LT
Stimularea diviziunii mitotice
31. rezultatul transmiterii unor semnale pe 2 ci: TCR-CD3 i calea CD28
32. factorul cel mai implicat n stimularea mitozelor e MPF (mitosis promoting factor)
33. MPF-ul e un heterodimer format din 2 molecule de ciclin B, asociate la o component kinazic, reprezentat de
P34
cdc
(cell division cycles). Activarea se realizeaz prin cuplarea unor fosforilri i defosforilri
34. Defosforilarea sub aciunea CD45, care defosforileaz ciclinele B => ele se desprind de pe kinaz
35. n paralel kinaza e activat prin defosforilare de o alt PTK, reprezentat de P60
src
(sarcoma cells). P60
src
se
fixeaz de lanurile scurte ale CD3
36. Odat activat MPF sunt activate kinazele ciclin dependente CDK care acioneaz n punctele de restricie ale
ciclului mitotic situat ntre faza G2 i faza M => aceste celule au toate ansele sa ptrund n mitoz
37. n faza G2 ajung ca urmare a transmiterii unor semnale pe calea CD28. ele apar cnd CD28 angajeaz legturi cu
CD80 => semnale activatoare n CD28 ce se transmit la o kinaz asociat la CD28 i care se numete fosfatidil
inozitol 3 kinaza (PI3K). Ea activeaz cascada MAP kinazelor (proteinkinazele asociate mitozelor). MAPK
stimuleaz kinazele ciclindependente responsabile de trecerea celulelor din faza G1 i S a diviziunii mitotice
(punctul 2 de restricie) => celulele ajung n faza M
Consecinele morfofuncionale ale activrii LT
38. Activate, LT i modific att aspectul mologic, ct i funcia
39. LT n stare de repaus
40. Activat antigenic, trece din faza G0 n faza G1, apoi faza S n faza G2

41. LT din G1-S-G2 se afl n interfaz
42. Ele devin mai mari, cu aspect neregulat i prezint o citoplasm foarte abundent
43. n citoplasm crete numrul de mitocondrii => activarea metabolic a LT; crete RER => produc IL, CK; se
modific i expresia fenotipic: expresia de TCR pe suprafaa lor (capacitate mai mare de a recunoate Ag
prezentate), crete expresia de LFA-1 (crete capacitatea de aderare a LT la APC)
44. n faza M marea majoritate a limfocitelor rezultate n urma diviziunilor devin LT efectorii (TH, producnd IL sau
TC, producnd CK)
45. O mic parte rmn n rezerv = LT cu memorie. Ele NU mai revin niciodat n faza G0 a ciclului mitotic, ci
rmn ntr-o etap intermediar, ntre G0 i G1. Ele rmn n stare preactivat. La un nou contact cu Ag, acestea
vor rspunde foarte rapid.

Limfocitele B

Caractere generale
46. aproximativ 15-20% din totalul limfocitelor circulante
47. distribuite primar n ariile bursodependente ale organelor limfoide
48. celule puin recirculante
49. au durat de via n general scurt (luni de zile)
Receptori de suprafa
50. 3 categorii:
3. Receptori de recunoatere Ag
4. Receptori cu rol accesor n activare (CD45, CD25 sau IL-2R)
5. Receptori de adeziune intercelular (LFA-1)
Receptori de recunoatere Ag
6. recunoaterea Ag se realizeaz printr-un complex receptorial, format din 2 componente:
7. BCR (Ig transmembranare IgM form monomeric, IGD, IgG, IgA, IgE). El e format din
asocierea a 2 perechi de lanuri ( 2 grele H orientate cu capetele C-terminale n citoplasm).

Prin capetele C-terminale se afl n legtur cu o PTK. Lanurile uoare (L) sunt poziionate
extramembranar

- aceste lanuri la capetele N-terminale se vor asocia ntre ele i formeaz 2 caviti = situsuri
combinative pentru Ag (SCAg), prin care pot fi recunoscui determianii Ag conformaionali prezeni
la suprafaa Ag nativ.
- dei are 2 SCAg, ele sunt identice ntre ele => e recunoscut 1 singur determinant Ag => BCR e
receptor monospecific
Funciile BCR:
1. recunoaterea Ag
8. recunoate de regul Ag native aflate n stare solubil
9. n cazul LB NU e necesar niciodat prezentarea Ag. Ele singure pot s-si capteze Ag prin BCR la care se
asociaz receptorul de captare CR i FcR
2. generarea unor stimuli activatori
10. acetia NU pot fi trimii de BCR, de aceea se asociaz nc 2 lanuri cu funcie de transducie a semnalului
activator (Ig i Ig)
11. De fapt ele sunt lanuri unice care n segmentul extracelular prezint cte un domeniu poziionat excentric
12. Actualmente Ig = CD79a i Ig = CD79b
13. Ele se asociaz la BCR prin puni disulfurice, ca i la CD45
14. CR i FcR
Activarea LB
15. mult mai complex dect activarea LT
16. activarea se datoreaz trnsmiterii semnalelor activatoare pe 2 ci:
- scurt
- de la BCR la PTK
- activndu-se, PTK preia (P) din citoplasm i l trimite ctre diferite substrate (segmentele
intracitoplasmatice ale Ig i Ig, care sufer modificri conformaionale ce permit trecerea unor semnale
activatoare pe calea lung
- lung
- la CD45, care se activeaz i preia (P) de pe Ig i Ig i l trimite la PLC => activarea PLC i
declanarea cascadei fosfatidil-inoyitolilor
Consecinele morfofuncionale ale activrii LB
- LB se transform i morfologic, dar mai ales funcional

- LB trec din faza G0 n faza G1, apoi din S n G2
- Ele trec n interfaz, unde devin nite limfoblati B, care sunt mari i cu aspect neregulat i prezint o citoplasm
foarte abundent ce nconjoar nucleul
- n citoplasm gsim mitocondrii abundente i RER
- Pe membran crete expresia de LFA-1 i expresia de MHC II!!! Ele devin nite APC!!!
- n faza M ncep s se divid. Cea mai mare parte devin plasmocite (produc Ac). O mic parte rmne n rezerv
sub form de LB cu memorie (rmn ntr-o etap ntre G0 i G1). La un nou contact ele vor aciona mai repede
(memorie scurt pentru c LB mor repede)


Organizarea sistemului imun

Distingem 2 componente:
componenta central
componenta periferic

Componenta central

- reprezint sectoarele de repartiie primar a tuturor clonelor limfocitare
- reprezint sectorul tranzitat n mod continuu de APC
- reprezint sectorul n care poate avea loc cooperarea APC limfocite
- reprezint sectorul n care limfocitele pot fi i activate
2. Splina
- 2 zone: pulpa roie (fr funcie imunologic) i pulpa alb (funcie imunologic)
- Pulpa alb: dispus sub forma a 3 manoane, dispuse n jurul unei arteriole centrale
- Primul manon (PALS intern) zon timodependent, populat de LT dispuse omogen

- Al 2-lea manon (PALS extern) zon bursodependent, populat de LB prezente n aglomerri celulare =
foliculi limfoizi
- A 3-a = zona marginata, populat mai ales de Mcf
- Funcii
- Genereaz RI fa de Ag circulante, fa de care pot apare RIU, care se desfoar integral n
splin, sau RIC, care sunt doar iniiate n splin i se desfoar n esutul Ag
Etapele desfurrii RIU intrasplenice
- declanate de Ag circulante care pot fi prezente n circulaie ca Ag solubil sau Ag transportat
- Ag ajunge sub ambele forme n pulpa alb
1. Ag solubil
- mai repede ajunge sub form de Ag solubil i ptrunde n toate cele 3 zone, declannd RI doar n zona bursodependent
(Mcf NU au capacitatea de a capta Ag solubile, LT NU pot capta Ag)
- Ag e recunoscut de LB, ele se activeaz i se transform n limfoblati B. Dup activare celula ncepe s se ndeprteze
de contactul antigenic, rmnnd n PALS extern
2. Ag transportat de CDS
- CDS se afl n PALS intern, unde se transform n IDC
- prezint Ag LT prezente aici
- dac Ag e recunoscut, LT se activeaz i se transform n limfoblati T. Dup un anumit interval de timp, celula se
desprindede la locul cooperrii i migreaz, ns migrarea e foarte pronunat i de regul limfoblatii T ajung n PALS
extern, unde vin n contact cu limfoblatii B i ncep s coopereze
- consecine: activarea complet a limfoblatilor B, care se transform n plasmocite. Dup un interval de timp ele
migreaz i la distan mare de cooperare => Ac ce sunt eliberai
3. Ganglionii limfatici
- 3 zone n parechim:
-
NU sunt stimulate => foliculi lifoizi primari
-
-
- Funcii:
- Locul generrii unor RI fa de Ag tisulare => 2 rspunsuri:
- RIU integral n ggl
- RIC doar iniiat n ggl, n rest se desfoar n esutul Ag
Etapele intraganglionare ale RIU:
- declanat ca urmare a drenrii prin limfaticele aferente a unor Ag tisulare. Ele stimuleaz LB din foliculi, care i
modific aspectul, devenind foliculi limfoizi secundari (au dimensiuni mari, enorme i avanseaz ctre Pc).
Modificrile se datoreaz faptului c LB stimulate se activeaz i se divid, iar pe de alt parte migreaz.
- Foliculul are 3 zone:
- Subcapsular (cap) format din LB mici (neactivate)
- Central, format din puine LB (zona clar). Ele sunt LB mici. Sunt puine pt c LB stimulate au migrat
de aici i au trecut n paracortical

- Zona dens, format din limfoblati (Pc). Limfoblatii din Pc rmn n contact cu LT de aici i
coopereaz => se transform n plasmocite, care migreaz, ajungnd cel mai frecvent n medular, unde
elibereaz Ac.

RIU

La baza RIU declanat fa de Ag timodependente st o cooperare celular la care particip de principiu 3 tipuri
celulare:
1. APC
2. L cu rol imunoreglator ( LTH amplific RI, LTS diminu RI)
3. L cu rol efector (LB)
- Ag timodependente sunt preluate de APC, internalizate i scindate cu generarea unui numr de epitopi
- Epitopii sunt prezeni pe membrana APC n complex cu diverse molecule de MHC orientate ctre TH, care amplific
RI
- Alii sunt prezentai ctre TS, care diminu RI
- TH ulterior coopereaz cu LB care se activeaz i se transform in plasmocite (produc Ac)
- Condiia fundamental a cooperrii: e ntotdeauna bidirecional (se realizeaz 2 tipuri de secvene de cooperare)
1. secvena de activare (efectorie)
- corespunde RIU propriu-zis
- cuprinde toate influienele activatoare exercitate dinspre APC ctre LB => activarea LB
- presupun participarea doar a 3 categorii de celule din cele 4 (APC, TH, LB)
- Funciile de principiu:
o Selecia clonal a LB/LT (selecia TH se realizeaz de ctre epitopii prezeni pe membrana APC, selecia LB
e realizat de Ag timodependent nativ)
o Activarea clonal
o Expansiunea clonal
o E generat o cantitate adecvat de Ac pentru neutralizarea/ndeprtarea/distrugerea Ag declanator


2. secvena de retrocontrol
- Funcia de principiu:
o Limitarea intensitii RIU la un minim necesar unei aprri imune eficiente
- Are valoarea unui mecanism de protecie prin care sunt evitate 2 efecte defavorabile care ar putea rezulta din orice
RIU:
Evit expansiunea necontrolat/exagerat a clonelor TH/LB Ag specifice
Este evitat generarea unor cantiti exagerate de APC
- acest control e activat de celule TS. Ele produc i elaboreaz factori inhibitori de natur proteic (TSF factor T
supresor). Ei inhib n primul rnd LB, ulterior TH i n cele din urm APC participante
- la normal ntre 1 i 2 e un echilibru funcional foarte fin care asigur homeostazia RIU

Rspunul imun umoral
Principiul cooperrii celulare care st la baza RIU
- cele 3 tipuri de celule NU coopereaz niciodat per primam (ele NU au aceeai locaie n organism)
- APC sunt intratisular
- TH sunt n ariile timodependente ale organelor limfoide
- LB sunt n ariile bursodependente ale organelor limfoide
- Ele coopereaz n etape succesive, ca urmare a migrrii acestor celule, ele trecnd dintr-o arie n alta

- Ele ncep s migreze cnd se activeaz
- APC secundar captrii Ag nativ se activeaz i dup un interval de timp trec din esuturi n ariile timo-dependente.
Ele transport Ag de la esuturi la TH
- TH stimulate antigenic se activeaz i dup un interval de timp trec n aria bursodependent nvecinat. Ele cep s
oopereze cu LB rezultnd activarea LB care n final produc Ac
a. Cooprerarea APC + TH
b. Cooperarea TH + LB
- RIU e declanat ca urmare a ptrunderii intratisulare a diverselor Ag intratisulare (Ag complete)
- Ag sunt captate de APC. NU toate APC capteaz, ci doar APC non- (orice APC, excepie LB => doar Mcf sau
celulele dedritice)
- APC se activeaz i apoi ncep migreze, trecnd din esuturi n ariile timodependente ale organelor limfoide,
transportnd Ag, urmnd s-l prezinte ctre TH
- Prezentarea se face prin intermediul MHC II, Ag fiind prezentat ctre TH, orientat ctre TH prin partea carrier (TH e
capabil s recunoasc doar partea carrier a Ag). Recunoaterea se face prin TCR => celulele ncep s coopereze
(cooperare cognitiv). Ea e ocazionat de recunoaterea i prezentarea Ag.
- Aceast cooperare e completat ntotdeauna de o a doua cooperare, NON-cognitiv. Ea se realizeaz ca urmare a
eliberrii de ctre APC a unor IL, cea mai important fiind IL-1. Ea stimuleaz suplimentar TH (NON-cognitiv
pentru c se realizeaz prin aceeai IL-1 indiferent de ce tip de Ag e prezentat.
- La finele acestei duble cooperri => activarea TH, care e parial
- Activate, TH, dup un interval de timp, ncep s se desprind de la contactul cu APC i migreaz din aria
timodependent n aria bursodependent nvecinat. Pe msura migrrii se transform morfologic, devenind
limfoblast TH
- n aria bursodependent ateapt LB
- LB sunt activate ntr-o etap ulterioar direct de ctre Ag nativ care e antrenat n circulaia limfatic/sangvin i el
ajunge ca substan solubil n ariile bursodependente. Aici e recunoscut de ctre LB prezente obinuit n ariile
bursodependente. LB de regul recunosc NUMAI partea haptenic => activarea parial a LB. Dup un interval de
timp LB se deprteaz de contactul Ag i ncep s migreze, rmnnd n aria bursodependent respectiv
- Pe msur ce migreaz, ea se transform n limfoblast B
- Cele 2 categorii de limfoblati vin n contact
- Cooperarea e ocazionat iniial de prezena i recunoaterea Ag
- Celula care prezint Ag e doar limfoblastul B, care capt funcie de APC (expune pe membranele sale MHC II). El
prezint Ag ctre TH (limfoblast), orientnd Ag cu partea carrier ctre limfoblastul TH. Ea e recunoscut de TCR =>
cooperare cognitiv
- Sensul de cooperare e limfoblast B limfoblast TH => activarea total a limfoblastului TH
- Devenii total activai, limfoblatii TH produc cantiti mari de IL (IL-4, IL-5, etc) => o cooperare NON-cognitiv.
Sensul ei e de la limfoblastul TH ctre limfoblastul B. Rezultatul const n activarea total a limfoblastului B
- Rezultatul activrii totale: limfoblastul B se transform n plasmocite, care dup urma formrii ncep s migreze i la
distan pun n libertate Ac specifici, capabili s recunoasc Ag (dup partea haptenic)
Precizri:
- dintre cele 2 categorii de limfocite, primele care particip n RIU sunt doar LT pentru c ele sunt celule intens
recirculante
LB particip trziu pentru c sunt celule puin recirculante
- n cadrul RIU, de-a lungul su, sunt implicate toate categoriile de APC (iniial NON-B, apoi B)
- Ag e necunoscut in toto (partea haptenic de LB, iar cea carrier de LT)
a. Cooperarea APC NON-B i Limfocitele TH
- obligatoriu n ariile timodependente ale oarganelor limfoide
- ea trece prin mai multe etape:
Cooperarea cognitiv
- se stabilesc ntre APC NON-B i LT diverse contacte
- iniial contacte Ag nespecifice
- contactele sunt realizate prin cuplurile de adeziune intercelulare. Primele prin cuplurile de linia I CD2 prezent pe
suprafaa LTH i respectiv LFA-3 (CD58) prezente pe APC. Aceste legturi sunt stabile i extrem de numeroase
(cteva sute de mii de asemenea cupluri ntre cele 2 celule)

- apoi i prin cuplurile de linia a II-a LFA-1 (pe TH) i ICAM (de pe APC). Acestea apar mai trziu pentru c
afinitatea reciproc a acestor receptori deocamdat e mic => legturi puin stabile i puin numeroase
- ele sunt importante pentru c favorizeaz constituirea de contacte Ag specifice (ntre complex MHC II Epi TCR
CD3)
- prin ancorarea celulelor e posibil ca moleculele MHC II Epi i TCR CD3 s ajung fa n fa prin micarea lor
de-a lungul membranei => prezentarea i recunoaterea Ag => declanare de stimuli activatori prin TCR ctre
profunzimea LTH => debutul activrii TH
- activarea nseamn intensificarea fosforilrilor. Printre substanele fosforilate e i lanul al LFA-1. Fosforilndu-se
sufer modificri conformaionale destul de importante, crescnd exploziv afinitatea LFA-1 pentru ICAM => legturi
LFA-1 ICAM devin i stabile i foarte numeroase
Cooperarea NON-cognitiv
- exercitat prin IL-1 eliberat de APC
IL-1
- substan polipeptidic cu GM de 17kda
- elaborat dup codul unei gene de pe Cz. 2
- tipuri de IL-1:
o IL-1
o IL-1
IL-1
- este produs de APC, dar e complet exocitat n mediul extracelular
- NU are funcie imunologic, ea e de fapt un mediator proinflamator
IL-1
- au funcie imunologic
- e produs de APC, dar niciodat exocitat complet, ci expus pe membrana APC
- ea se numete IL-1 membranar (mIL-1)
- NU e expus la ntmplare, ci tipic e expus NUMAI pe versantul APC de la nivelul fantei dintre 2 celule. Astfel se
evit activarea ntmpltoare a altor TH aflate de jur-mprejur (ar exista riscul s fie declanate la ntmplare diverse
alte tipuri de RI)
- stimuleaz TH pentru c e recunoscut de receptori specifici pentru IL-1 (IL-1 R) => declanarea de stimuli activatori
ctre profunzimea citoplasmei TH, care au mai multe efecte:
o contribuie esenial la declanarea diviziunii mitotice a TH
o stimuleaz 2 gene: gena pentru IL-2 i gena pentru receptorul pentru IL-2
TH capt o dubl proprietate: produce IL-2 i avnd i receptor specific se poate autoactiva n sens autocrin
Rezulatele stimulrii:
1. TH se activeaz metabolic foarte intens
2. TH ncep s se divid
3. TH ncep s se matureze funcional (ncep s se transforme n diverse clase de limfocite TH)
Clasele de limfocite TH
- NU sunt celule preformate, ci ele se formeaz extemporaneu n timpul cooperrii celulare
Caracteristici:
Morfologice
- sunt limfocite mici
- au acelai fenotip de suprafa (CD4+, CD28+)
- se difereniaz ntre ele n clase doar n funcie de tipurile de IL elaborate
1. THp
- limfocite TH imature (naive)
- ele conin n genomul lor toate genele necesare sintezei de IL, dar, cu excepia genei pentru IL-2 restul sunt inhibate
sau supresate
- cnd sunt stimulate Ag ele pot rspunde printr-o producie de IL-2

- THp = helper productoare
- Ca urmare a prelungirii n timp a cooperrii celulalre, ncet ele se matureaz suplimentar, devenind TH0
2. TH0
- n urma prelungirii stimulrii Ag
- desupresia marii majoriti a genelor pentru IL
- ncep s produc cantiti foarte mici din toate tipurile de IL (IL-2, IL-3, TNF, IFN- / IL-4, IL-5, IL-6 .... IL-10)
- aceste mici cantiti de IL NU folosesc la nimic
- din TH0 se constituie ulterior, ca urmare a prelungirii cooperrii celulare, forme finite de TH
3. TH1
- celule foarte mari productoare de IL-2, IL-3, TNF, IFN-
- de regul amplific/stimulez RIC
4. TH2
- produc cantiti mari de IL-4, IL-5, IL-6 .... IL-10
- amplific/stimuleaz RIU
Transformarea TH0-TH1-TH2 se realizeaz depinznd de condiiile de cooperare celular
- prezena/absena de LB: Dac la cooperarea celular n nici o etap NU perticip LB => TH0 se transform
obligatoriu NUMAI n TH1
Dac la cooperare sunt prezente LB => TH0 se transform obligatoriu n TH2
- transformarea depinde foarte mult de mecanismul de excludere reciproc. Excluderea reciproc se realizeaz prin IL
produse de cele 2 tipuri de celule
o TH1 inhib formarea de TH2 mai ales ca urmare a eliberrii de IFN-, care are efect distructiv pentru TH2
o TH2 inhib formarea TH1 n special prin IL-10, care are efect distructiv pe TH1
- la normal rspunsul fa de unul i acelai Ag se realizeaz ori prin RIU ori prin RIC; la normal NU exist rspunsuri
mixte
- unele IL sunt implicate n controlul RIU
IL-2
- surse: THp, TH1, auxiliar TH0
- ele elibereaz IL-2 doar dac sunt complet activate (stimulate i cognitiv i NON-cognitiv)
- producia de IL-2 e stimulat de IL-1 i IL-6
- aciune autocrin
- aciune paracrin (IL-2 produs de o celul activat activeaz alte celule: LB, NK)
- ambele aciuni sunt rezultatul stimulrii de ctre IL-2 a receptorului pentru aceasta (IL-2 R = CD25)
CD25
- heterotrimer (, , )
- i au segmente extracelulare foarte lungi
- la capetele N-terminal al , se asociaz i constituie situsul de legare al IL-2
- lanul e foarte lung
- ca urmare a stimulrii CD25 de IL-2 apar semnale activatoare pe , , transmise ctre prfunzime doar prin lanul
- e n contact cu o proteinkinaz care primind semnalelel fosforileaz intens i direct PLC => declanarea fosfatidil-
inozitolilor (elibernd IP3 i DAG) => stimularea prin IL-2 e o stimulare TCR-like
- IL-2 activeaz diverse rspunsuri, n funcie de celula productoare:
THp => stimuleaz RIU primare (la primul contact cu Ag)
TH1 => stimuleaz RIC
IL-4
- stimuleaz RIU secundare (apar la al n-lea contact cu acelai Ag)
- surs: TH2
- stimuleaz RIU pentru c are efecte:
stimuleaz producerea medular de LB
stimuleaz producia i expansiunea pe membranele APC a moleculelor MHC II
inhib producia de ctre LB a Ac de tip IgM, favoriznd producerea Ac de tip IgG pentru c ea
activeaz un mecanism genetic mecanismul de SWITCH sau mecanismul de comutare izotipic

IL-5
- surs: TH2
- stimuleaz de predilecie RIU de la nivelul mucoaselor
- Efecte:
Stimuleaz producia medular e LB i eozinofile
Inhib producia de ctre LB a Ac de tip IgM, favoriznd producia Ac de tip IgA (activeaz
mecanismul de SWITCH)
b. Cooperarea limfoblati TH limfoblati B
- are loc n ariile bursodependente ale organelor limfoide
- vin n contact limfoblastul TH cu limfoblastul B i ncep s coopereze, mai nti cognitiv
- n cooperarea cognitiv se stabilesc contacte Ag specifice i Ag nespecifice
- contactele Ag specifice sunt ocazionate de prezentarea i recunoaterea anitgenic (pezentat NUMAI de limfoblastul
B i recunoscut de limfoblastul TH)
- limfoblastul B poate produce i expune molecule MHC II, orientnd Ag cu partea carrier ctre limfoblastul TH. Ea e
recunoscut de TCR-CD3 => stimuli activatori pe calea TCR ce se soldeaz cu stimularea genelor pentru IL =>
limfoblastul TH produce i elibereaz diverse IL
- contactele Ag nespecifice CD40 (pe limfoblastul B) CD40R (pe limfoblastul TH) => declanarea de stimuli
acivatori pe calea CD40 ce conduc la activarea genelor pentru receptorii IL => pe suprafaa limfoblatilor B apar
diferite categorii de receptori pentru IL => celulele ncep s coopereze NON-cognitiv
- prin cooperarea NON-cognitiv => activarea toatl a limfoblatilor B care se transform n plasmocite (celule
productoare de Ac)
- se produc Ac diferii, n funcie de tipul de IL stimulatoare, respectiv n funcie de tipul de limfoblast TH
- exist 3 situaii:
o limfoblastul B stimulat de IL-2 (THp) => Ac de tip IgM
o limfoblastul B stimulat de IL-4 (TH2) => Ac de tip IgG
o limfoblastul B stimulat de IL-5 (TH2) => Ac de tip IgA


Imunoglobulinele (anticorpii)


- Ig sunt glicoproteine prezente n plasm, lichidele extracelulare, i secreii i sunt molecule dotate cu proprieti
de Ac, adic au capacitatea de a se combina specific i sunt responsabile de recunoaterea Ag inductor
(declanator) al RI.
- Ac - sunt implicai n finalizarea RIU
- sunt implicai n iniierea RIC (funcie de opsonine)

Structura de principiu a Ac
- indiferent de clas, Ac sunt constituii din asocierea a 2 perechi de lanuri
- forma monomeric e format din asocierea unei perechi de lanuri grele (DH) i una de lanuri uoare (DL)

1. DH
- lungi, constituite din numr mare de aa => au greutate molecular foarte mare
- se asociaz ntre ele prin puni disulfurice

2. DL
- scurte, constituite din numr mic de aa => au greutate molecular mic
- ele sunt asociate la lanurile DH prin puni disulfurice

Dei sunt diferite ntre ele, cele 2 perechi de lanuri au caracteristici comune:
- sunt paralele ntre ele (NU e un paralelism liniar, ci unul helicoidal sau spiralar; fiecare lan se nfoar n jurul celui
cu care se asociaz prin puni disulfurice. DL execut o hemispir 180
o
n jurul DH la care se asociaz; DH se
spiraleaz reciproc unul n jurul celuilalt. Aceast asociere face ca ele s aib o configuraie globuloas)
- sunt unidirecionate (orientate cu capetele N-terminale n aceeai direcie)
- n alctuirea acestor lanuri intr 2 categorii de secvene:
a.) secvenele variabile ale lanurilor grele i uoare, constituite din primii 110 aa, la capetele N-terminale
(V). Sunt poziionate n oglind => se asociaz ntre ele i constituie cte o mic cavitate ce poart denumirea de situs
combinativ pentru Ag (SCAg), n care e recunoscut cte 1 determinant antigenic conformaional, situat la exteriorul Ag
nativ. Cele 2 situsuri sunt identice din p.d.v. structural => prin ambele situsuri e recunoscut ntotdeauna un singur Ag
conformaional => Ac sunt structuri de recunoatere monospecifice.
b.) secvenele constante sunt poziionate ctre captul C-terminale al lanurilor. Ele sunt responsabile de
unele efecte biologice ale Ac (activarea cascadei complementului pe calea clasic, fixarea Ac pe suprafaa micro i
macrofagelor, pasajul transplacentar al Ac de la mam la ft). Cele ale lanurilor uoare au aproape aceeai structur n
cadrul tuturor claselor de Ig = secvene publice. Cele ale lanurilor grele au aceeai structur doar n cadrul unei singure
clase (un singur izotip) => 5 clase de Ig.








IgG

- Ac prototipici
Caracteristici generale
- se afl n concetraiile cele mai mari n raport cu celelalte clase (variaz ntre 1000-1500 mg/dl). Ei formeaz 75%
din totalul Ac din organism
- sunt Ac distribuii n cote egale ntre sectorul intravascular i cel extravascular (n lichidele interstiiale, respectiv
intratisular)

- sunt Ac cu durata de via cea mai mare (variind ntre 3-4 sptmni). Excepie fac IgG
3
, care au o durat de via
scurt (5-7 zile)
Structura
- sunt Ac forme monomere
- lanurile grele (DH)
- sunt formate din aproximativ 450 aa
- sunt lungi sau foarte lungi (pn la 130 )
- au GM mare, 45-46 kda
- excepie IgG
3
, care au lanuri grele formate din mult mai muli aa i au GM
mai mare
- NU sunt lanuri liniare, ci sunt organizate n bucle sau domenii, fiecare
domeniu fiind alctuit din aproximativ 110 aa, domenii ce apar ca urmare a
existenei unor puni disulfurice intracatenare
- pe fiecare lan DH exist 4 domenii cu particulariti structurale i
funcionale diferite
- primul domeniu e situat mereu pe exterior
- apoi domeniul 2 e poziionat spre interior
- apoi lanul greu trece de partea opus i avem domeniile 3 i 4
- domeniile N-terminale sunt constituite din secvene de aa variabile sau
hipervariabile = VH
- celelalte domenii sunt toate constante = CH
1
, CH
2
, CH
3

- poriunea situat ntre CH
1
i

CH
2
= zon balama. Ea e important pentru
c reprezint poriunea din lanurile grele dotat cu cea maximum de flexibilitate,
favoriznd net contactul Ac cu determinani Ag conformaionali de la suprafaa
Ag nativ. n zona de balama lanurile grele se asociaz ntre eleprin puni disulfurice; n funcie de
numrul acestora i repartiia lor distingem 4 subclase sau 4 izotipuri de Ac de tip IgG:
- IgG
I
exist 2 puni disulfurice, situate ntre punctul de intersecie i CH
2

- IgG
II
exist 4 puni disulfurice, situate 2 cte 2 de o parte i de alta a punctului de
intersecie
- IgG
III
exist 15 puni disulfurice, situate ntre punctul de intersecie i CH
2

- IgG
IV
exist 2 puni disulfurice, situate fiecare de o parte i de alta a punctului de
intersecie
- n funcie de numrul de puni disulfurice, se condiioneaz, printre altele,
i durata de via a acestor Ac. Obinuit, ntre durata de via i numrul de puni
disulfurice exist o relaie de invers proporionalitate. Pe msur ce numrul de puni e
mai mare pot suferi atacul enzimelor sau radicalilor liberi de O eliberai de factorii
proceselor inflamatorii.
- lanurile uoare (DL)
- alctuite din aproximativ 215 aa

- au o lungime de aproximativ 60 de
- GM aproximativ 20-22 kda
- organizate n bucle sau domenii, 2 pe fiecare lan uor
- primul domeniu e situat n interiorul moleculei
- cel de-al doilea e orientat spre exterior, lanurile uoare se spiraleaz n jurul
celor grele
- domeniul N-terminal e constituit din aa variabili i hipervariabili = VL
- cellalt domeniu e constant sau aproape constant = CL
- se cunosc 2 tipuri de lanuri uoare:
- K 2/3 din totalul lanurilor uoare
- 1/3 din totalul lanurilor uoare
2 fragmente: Fab (de legare a Ag)
Fc (constant, cristalizabil)
Funciile i structura Fab al IgG
- rol foarte important n recunoaterea Ag
- prin el pot recunoate orice tip de Ag nativ (Ag solubil, jucnd rol important n eliminarea lor sub form de
complexe imune de ctre micro sau macrofage)
- prin el pot recunoate Ag corpusculare (IgG funcioneaz ca opsonine i favorizeaz endocitarea Ag de ctre
macrofage)
- recunoaterea antigenic e realizat prin situsul combinativ pt Ag (SCAg)
Structura i funcia SCAg
- o cavitate de dimensiuni reduse (30-10-6 ) rezultat n urma plicaturrii VH-VL, care permite att
acomodarea Ag, ct i angajarea de legturi cu acesta prin potrivire de form sau complementaritate
- plicaturarea ce st la baza SCAg e rezultatul existenei unor puni disulfurice intradomeniu
- n cadrul fiecrui domeniu exist 3 puni ce creeaz 3 plicaturi
- n cadrul SCAg distingem 2 categorii de secvene: secvenele de aa ce particip la realizarea recunoaterii
Ag (ele sunt constituite din 8-15 aa i sunt situate la nivelul vrfului intern al plicaturii. Ele realizeaz
contactul cu Ag prin potrivire de form (complementaritate) = regiuni determinante ale
complementaritii CDR adic CDR
1
, CDR
2
, CDR
3
)
- secvenele Fr (framework region) nu sunt implicate direct n stabilirea contactului cu Ag, ele sunt pereii
cavitii
- cele mai importante in funcia Ac sunt regiunile CDR
- cele 6 CDR formeaz paratopul (substructura din SCAg care este direct responsabil de angajarea unor
legturi specifice cu Ag inductor)
- caracteristica fundamental a paratopului e specificitatea legturii Ag-Ac. Ea ine de: natura aa care intr
n constituia CDR, numrul aa prezeni n CDR i poziionarea n spaiu a plicaturilor (a celor 6 CDR),
dependent de zona Fr
- plicaturarea VH, VL poate avea 2 efecte distincte:
- favorizeaz net recunoaterea Ag
- poate n unele situaii s transforme SCAg n determinani Ag
conformaionali, pentru c prin asocierea CDR se pot constitui secvene de aa
ce pot fi ori rar ntlnite n organism, ori chiar unice, nemaintlnite n organism. Ele se
pot comporta ca structuri antigenice = idiotopi = componenta Ag a oricrui SCAg

- idiotopii pot fi interni, externi sau micti
- totalitatea idiotopilor = idiotip (specificitatea Ag a oricrui SCAg) => SCAg poate avea 2 caliti aparent
contrarii
- el e o structur de recunoatere Ag
- poate fi o structur Ag n sine. Idiotopii sunt structuri intens
imunogene => RI fa de un Ag NU e unic, ci un rspuns repetitiv,
ntreinut de cateva ori. Rspunsul se repet pn cnd se formeaz Ac antiidiotip,
numii copia intern a Ag.
Copia intern a antigenului
- RIU are ca rezultat Ac care prezint SCAg complementare Ag inductor
- e posibil ca aceti Ac s prezinte n SCAg idiotopi. Ei se vor comporta ca noi structuri Ag rezultnd declanarea
unui alt RIU specific, caracterizat prin generarea de Ac specifici, ce prezint un SCAg complementar al generaiai
anterioare. Ac nou formai sunt Ac antiidiotip. SCAg al Ac antiidiotip seamn conformaional cu conformaia
spaial a Ag inductor = imaginea intern a Ag (ea limiteaz RIU)
Funciile i structura Fc al IgG
CH
2
- rol n declanarea cascadei complementului pe calea clasic
- realizeaz funcia printr-o secven de aproximativ 600 aa capabili s
angajeze legturi cu o component a complementului (C1q) => se
declaneaz cale clasic. Nu are loc spontan, ci doar dup ce Ag a fost recunoscut ca
Ag specific
- ca urmare a recunoaterii Ag apar modificri conformaionale n lanul H, care
se transmit din aproape n aproape n sens ortodromic (N-C) care contribuie la
exteriorizarea secvenei de aa capabil s lege componenta C1q a complementului
CH
3
- rol n fixarea Ac de membrana macro i microfagelor
- Ac sunt importani n medierea fagocitrii (sunt Ag corpusculare)
- fixarea IgG pe micro i macrofage se face NU prin contact direct, ci prin receptori: FcR
- exist 3 categorii de receptori FcR
I
CD 64
FcR
II
CD 32
FcR
III
CD 16
FcR
1
- receptori de nalt afinitate pt IgG (fixeaz cu aviditate IgG, dar selectiv. Ei
fixeaz n special IgG
1
i IgG
3
, mai puin IgG
2
i deloc IgG
4

- distribuii pe membrana macrofagelor, suprafaa neutrofilelor i pe celulele
K (Killer)
- 2 componente: una receptorial (glicoprotein transmembranar ce prezint
n segmentul extracelular 2 bucle, segment intracitoplasmatic foarte scurt) i o
component de transducie a semnalului activator (2 lanuri identice ntre ele cu lanuri
receptoriale foarte lungi = lanuri
(segmente intracitoplasmatice foarte lungi)

- el e capabil s fixeze Ag corpusculare opsonizate prin IgG. Fixarea se face prin
legturi din domeniul N-terminal al componentei receptoriale i domeniul CH
3
al IgG
=> semnale activatoare ce se transmit ctre poriunea intracitoplasmatic
NUMAI prin lanurile
- funcia lui:
- Macrofage fagocitare/endocitare a Ag corpusculare opsonizate prin IgG
- NK captarea Ag corpusculare opsonizate prin IgG. Endocitarea nu e posibil de obicei (diametrul redus
al celulelor NK) rezultnd activarea lor i n final eliberarea unor mediatori distructivi: enzime, radicali
liberi de O, perforine. Distrug Ag corpusculare extracelular i fragmentele pot fi endocitate (procesul =
ADCC citotoxicitate celular anticorp dependent)

FcR
2
- joas afinitate pentru IgG, neselectiv
- pe suprafaa monocitelor, macrofagelor, pe membrana granulocitelor i la
nivelul sinciiotrofoblastului
- o singur component care ndeplinete funcia de receptor i transductor
- glicoprotein transmembranar care n poriunea extracelular prezint 2
bucle (domenii) i dispune de un segment intracitoplasmatic foarte lung
- funcie:
- pe macrofage endocitarea Ag corpusculare opsonizate prin IgG
- pe granulocite mediaz ADCC
- n sinciiotrofoblast joac rol important n pasajul transmembranar al IgG de la mam la ft
FcR
3
- joas afinitate pentru IgG
- NUMAI pe suprafaa celulelor K i NK
- receptor definitoriu: celulele k i NK = celule CD16+
- 2 componente distincte: receptor (structur Ig like), transductor
- receptorul are cte 2 domenii extracitoplasmatice i un segment
intracitoplasmatic foarte lung
- transductor: lanuri lungi
- funcie:
- mediaz ADCC
Particulariti funcionale ale subclaselor de IgG
IgG
1

- subclas major, 900mg/dl
- sunt buni activatori de complement
- sunt Ac responsabili de imunizarea pasiv a nou-nscutului (trec uor prin placent)
IgG
2

- clas minoritar, 30mg/dl

- sunt slabi activatori de complement
IgG
3

- concentraie de 100mg/dl
- sunt mai buni activatori de complement dect IgG
2

IgG
4

- concentraii mici, 50mg/dl
- NU sunt activatori de complement
Ac de tip IgG sunt caracteristici pentru RIU secundare (apar dup cel de-al doilea contact cu acelai antigen)

IgM
Caractere generale
- concentraii de 120-130mg/dl
- durat de via scurt (7-10 zile)
- sunt forme pentamerice, formai din 5 monomeri asociai printr-o pies de jonciune cu GM de 900 kda. Lanurile
grele de IgM sunt mai lungi. Ele conin 5 domenii (1 variabil i 4 constante)
Funcii
- o prim linie de aprare antibacterian i antiviral
- acioneaz ca Ac aglutinani
- dintre toate categoriile de Ac sunt cei mai activatori de complement pentru c dispun de 2 domenii activatoare de
complement (CH
2
i CH
3
) i sunt forme pentamerice, nu monomerice ca IgG (dispun de 20 de situsuri activatoare
de complement i NU doar de 2)
- sunt caracteristice pentru RIU primare

Clasificarea RIU
1. Primare
2. Secundare

1. Primare
- se formeaz Ac NUMAI IgM pentru c la primul contact cu Ag la cooperarea cu APC particip doar LT
H
p, care
produc i elibereaz IL-2 care NU activeaz mecanismul de SWITCH (comutare izotipic)
- concentraia de IgM e moderat crescut pentru c la primul contact cu Ag particip clone limfocitare TH i B
neexpansionate
- durata hiper IgM e limitat n timp pentru c Ac IgM au durat scurt de via (conin un numr mare de puni
disulfurice) i pentru c la primul contact cu Ag NU exist nc clone T/B cu memorie
2. Secundare
- se formeaz Ac NUMAI IgG pentru c la al n-lea contact (contacte repetitive) cu acelai Ag la cooperarea cu APC
particip LT
H
2 care produc IL-4 care e capabil s activeze mecanismul de SWITCH, producia de IgM fiind
inhibat
- concentraiile de IgG sunt mari sau foarte mari pentru c la contacte repetitive cu acelai Ag particip clone T sau
B deja expansionate ca urmare a contactelor Ag precedente
- durata hiper IgG e prelungit n timp (3 4 sptmni) pentru c IgG au o durat de via lung i pentru c
particip clone T/B cu memorie imunologoic




Retrocontrol RIU

Definiie:
Cuprinde totalitatea influienelor inhibitorii rezultate n urma stimulrii/aciunii limfocitelor TS ce au drept scop inhibiia
cooperrii dintre limfoblatii B i limfoblatii TH Ag specifici i limitarea sau frnarea RIU n curs de desfurare.
- retrocontrolul RIU se bazeaz pe aciunea TS

Limfocitele Ts
- NU se cunosc foarte bine toate categoriile TS (5 6 clase)
a) TS Ag specifice
- din punct de vedere fenotipic sunt celule CD8+ i CD28-
- recunosc NUMAI Ag expuse pe membrane APC n complex cu moleculele MHC I
- elaboreaz anumii factori inhibitori a cror prezen e dovedit,dar NU se tie structura lor
- au o funcie inhibitorie mai general (pot inhiba fie RIU, fie RIC)
b) TS idiotip specifice
- fenotipic sunt celule foarte heterogene: aproximativ 35 40% din ele sunt celule CD4+, 60-65% sunt celule
CD8+
- se numesc idiotip specifice pentru c ele recunosc prin receptorul lor de suprafa partea Ag a unor receptori Ag
(idiotip)
- elaboreaz anumii factori inhibitori, numii TSF, ce rezult din solubilizarea/eliberarea receptorilor lor Ag de
supraf
Structura receptorului Ag de suprafa a TS idiotip specifice
- receptorul Ag are structur total difeit de TCR
- e un complex format din 3 piese distincte:
1. Receptorul Ag prpriu-zis
- are structur Ig-like
- NU e un receptor transmembranar
2. E ataat prin puni disulfurice la o molecul MHC II (varietatea E). i ea e plasat n afara membranei celulare
3. Molecula MHC II E e ataat indirect la membran printr-o pies de jonciune (glicoprotein transmembranar)
- cnd e stimulat Ag receptorul se activeaz (NU se tie cum) i n urma activrii => eliberarea componentei
extramembranare (MHC II E i receptorul Ag, care devine un receptor liber. n aceast calitate el e receptor Ag n
continuare i are funcie inhibitorie de TSF => inhib RIU)
Clasificarea TS idiotip specifice
- 3 categorii de limfocite:
1. TS inductorii
- CD4+
- Funcie de a inhiba LB Ag specifice
2. TS transductorii
- CD8+

- Funcie de a inhiba cele 2 categorii de limfoblati ce particip la RIU (limfoblast B i TH Ag specific)
3. TS efectorii
- CD8+
- Funcie de a inhiba LB Ag specifice
Caractere commune:
- NU acioneaz NICIODAT independent unele de altele
- Ele se stimuleaz reciproc n etape successive:
a. primele stimulate sunt TSi
b. TSi activate stimuleaz TSt
c. TSt activate stimulez TSe
ele formeaz cascada T supresoare
- ele sunt activate de structuri Ag diferite:
TSi sunt activate de partea haptenic a Ag, concurnd cu LB
TSt i TSe sunt activate de idiotopii unor TSF => ele sunt singurele idiotop specifice
- cascada T supresoare se activeaz n general trziu, mult dup apariia primelor cantiti de Ac
- funcia general a cascade T supresoare const n inhibiia secvenei de activare a RIU
Cooperarea APC-NON B i LTH (n ariile timodependente)
- APC expun pe suprafaa lor n complex cu MHC II (varietatea A) Ag inductor (format dintr-o parte haptenic i
una carrier)
- Carrierul e recunoscut de TCR de pe TH => cooperarea cognitiv
- Rezultat: activarea TH i migrarea lor, trecnd din aria timodependent n aria bursodependent, unde se
transform n limfoblati TH
- Aici ei ateapt limfoblatii B cu care ar urma s coopereze
- Cascada T supresoare e activat ca urmare a elaborrii de ctre aceleai APC de molecule de MHC II E. prin
intermediul lor acelai Ag e prezentat ctre limfocitele TS, prin partea sa haptenic. Partea haptenic e
recunoscut de TSi. Ca urmare a recunoaterii, se activeaz TSi i pune n libertate recptorul Ag de suprafa
(TSF1)
TSF1
- aciune inhibitorie: TSF1 difuzeaz larg n ntreg organismul, pn cnd ajunge la focarul Ag. Aici TSF1
recunoate partea haptenic a Ag. n urma recunoaterii se constituie n focarul Ag complexe TSF1 Ag.
Constituirea lor echivaleaz cu blocarea Ag = diminuarea cantitii de Ag liber disponibil pentru stimularea LB
=> de butul inhibiiei RIU
- aciune activatoare: TSF1 n SCAg prezint idiotopi, mai ales idiotopi interni => el se comport ca o nou
structur Ag care va activa morfologic TS din cascad. Activarea TSt care prezint pe suprafaa lor receptori
complementari pentru TSF1. Rezultat: activarea TSt ce pune n libertate receptorii de suprafa (TSF). TSF2 din
punct de vedere structural e identic cu partea haptenic a Ag inductor, ns difer n restul moleculei (are alt
parte carrier). TSF2 exercit 2 efecte contrare:
TSF 2
- aciune inhibitoare: difuzeaz larg n tot organismul, pn ajunge n ariile bursodependente. Aici TSF2 e
recunoscut de ctre LB n calitate de Ag (confund Ag cu TSF2). LB preia TSF2 i se activeaz i se transform
n limfoblast B. n acest stadiu, prin intermediul MHC II expune TSF2 ctre limfoblatii TH, prezentnd TSF2
prin partea carrier. De data aceasta limfoblastului TH i este prezentat o alt parte carrier dect cea pe care o
recunoate => cele 2 categorii de limfoblati NU pot coopera => n final limfoblastul B NU se mai activeaz
TOTAL => limfoblastul B NU se mai poate transforma n plasmocit => e sistat complet producerea de Ac
- aciune activatoare: ca nou structur Ag activeaz o nou categorie de TS din cascad: TSe, care prezint i ele
receptori complementari pentru TSF2. Rezultat: elibereaz recptorul de suprafa TSF3
TSF3
- identic cu TSF1 la partea receptorial (Situsul de recunoatere pentru Ag), ns difer n rest (partea carrier).
Difuzeaz i el larg i ajunge n focarul Ag, unde ca i TSF1 blocheaz Ag => LB NU mai pot fi activate


Particulariti funcionale ale celor 2 secvene ale RIU
1) cele 2 secvene sunt mult decalate n timp (NICIODAT NU se desfoar simultan). Decalarea ine de
faptul c APC NON-B elaboreaz n 2 etape diferite cele 2 categorii de molecule MHC II: prima e MHC
II A => RIU, iar dup un interval de timp ndelungat MHC II E => Retrocontruol RIU
2) cele 2 secvene sunt echilibrate funcional:
- sunt activate de ctre una i aceeai APC NON-B, care ns prezint cantiti echivalente de Ag n cele 2 secvene
- la stimularea realizat de APC NON-B rspunde un numr echivalent de TH i de TSi (ambele sunt CD4+)
- ntre cantitatea de Ag utilizat n declanarea RIU i cantitatea de TSF2 rezultat din retrocontrolul RIU exist un
raport de echivalen. TSF2 e identic cu Ag inductor la partea haptenic, diferind de Ag la partea carrier => TSF2
= copia intern a Ag cu efect frenator

Ag n cadrul RIU e utilizat n 2 ipostaze:
1. original = declanarea RIU
2. copie = frenarea RIU (retrocintrolul RIU)


Sistemul complement

= un sistem multienzimatic format din 25-30 de componente care n cadrul RIU joac rolul unui mecanism efector auxiliar
ce ndeplinete 2 funcii majore:
a. definitivarea aciunii Ac pe Ag
b. realizarea unei recunoateri imunologice nespecifice a structurilor non-self care de regul sunt Ag
- cele 2 funcii pot fi exercitate separat sau simultan
A. Definitivarea aciunii Ac pe Ag
- unica funcie a Ac const n recunoaterea Ag, fr ns ca acetia s aib efect decisiv asupra Ag
- prin efect decisiv nelegem: distrugerea Ag (mecanism obligator necesar pentru Ag corpusculate: bacterii,
virusuri, parazii) i ndeprtarea Ag (mecanism eficient n cazul Ag solubile: proteine, glicoproteine,
oligozaharide)
1) Distrugerea Ag corpusculate
- bacteria prezint pe suprafaa ei determinai Ag conformaionali
- ea e recunoscut de ctre Ig prezente n lichidele interstiiale (IgG)
- Ac recunosc determinanii de suprafa i se depun pe suprafaa bacteriilor, realiznd opsonizarea acestora
- bacteria poate tri foarte bine cu orice cantitate de Ac pe ea
- efect decisiv = aciunea complementului. Ac recunosc determinanii Ag de supraf prin catul lor Fab => apar
modificri conformaionale n lanurile H de IgG ce conduc la exetriorizarea situsului activator de complement
plasat la nivelul domeniului CH2. prin aciunea lui => exetriorizarea unei secvene de aa capabil s activeze
subunitatea C1q a complementului. Odat activat, C1q => declanarea cascadei complementului pe calea clasic
i n final => formarea MAC (complex de atac al membranelor). Acesta se organizeaz sub forma unor structuri
tubuliforme ce se inser multiplu n membrana bacterian i creeaz largi comunicri ntre mediul intracelular i
extracelular. Rezultat: alterarea grav, ireversibil a gradientelor ionice de o parte i de alta a membranei bacteriei
=> hidratarea supracaut a acestei particule => se rupe mebrana cu liza osmotic a acestei particule
2. Ideprtarea Ag
- Ag solubile declaneaz RIU traduse prin formarea de Ac
- Ac difuzeaz larg n ntreg organismul pn cnd ajung i n focarul Ag. Aici are loc recunoaterea Ag, iar
rezultatul recunoaterii e formarea de complexe imune Ag-Ac
- La normal acestea au ca particularitate faptul c se organizeaz sub form de reele

- Ele se ncarc rapid cu diveri factori solubili, mai ales C3b a complementului. Aceasta provine din funcionarea
permanent a cii alterne. Dup activare cu C3b, complexele imune pot fi ndeprtate (endocitate de Mcf
rezidente n esuturi ele prezint CR pe suprafa i pot angaja legturi cu C3b). complexele imune sunt n final
distruse intramacrofagic, odat cu acestea fiind distruse i Ag prinse n ele. Dac complexele imune se formeaz
intracirculator, dup ce au fost saturate cu C3b sunt ataate pe suprafaa eritrocitelor, care i ele prezint receptori
pentru complement. Apoi sunt transporatte de acestea pn la SRE (sistemul reticulo-endotelial). Aici complexele
imune sunt preluate de Mcf rezidente obinuit aici => endocitarea i distrugerea complexelor imune, inclusiv Ag
din structura lor
B. Recunoaterea imunologic nespecific a structurilor non-self
- in de proprietatea C3b a complementului de a se depozita obligatoriu pe membranele celulare
- C3b odat generat NU rmne NICIODAT n faz fluid, ci se depoziteaz pe membranele celulalre, dac
acestea sunt acceptoare de complement
- NU accept depozitarea complementului membranele self pentru c sunt protejate anticomplement
- Membranele non-self NU sunt protejate, ele permind depozitarea C3b
- Ca urmae a funciei permanente a cii alterne => continuu cantiti mici de C3b
- C3b NU rmne n faz fluid, ci se depoziteaz pe mebranele celulalre
- Membranele self NU accept complement (au receptori ce mpiedic ataarea C3b)
- Membranele non-self accept C3b ( NU au recptori ce mpiedic ataarea C3b) => un strat de molecule de C3b
(opsonizarea prin C3b a membranelor non-self)
- Structura non-self = structur Ag
=> recunoatere imunologic nespecific (depozitarea se realizeaz pe orice membran, indiferent de specificitatea Ag
propriu-zis)

A i B pot fi coroborate
- n cadrul aceluiai RIU
- complementul intervine n etapa de iniiere i finalizare a RIU
- NICIODAT NU particip n etapa de desfurare
a. n etapa de iniiere
- prin opsonizare favorizeaz net captarea de ctre APC a Ag corpusculare. Odat captate => activarea APC,
cooperarea cu TH, cooperarea cu LB, etc. la finele cooperrii => formarea de Ag specifici care recunosc Ag
corpusculate dup determinatul Ag de suprafa. n acest moment final intervine din nou complementul
b. Ax activeaz C1q => declanarea cascadei complementului pe calea clasic, cu formarea MAC => liza
osmotic a bacteriilor
Caracterele funcionale ale sistemului complement
1. Funcioneaz pe principiul cascadei
- majoritatea factorilor complementului sunt prezeni n circulaie sub form de zimogeni (enzime inactive)
- dca un zimogen e activat => generarea enzimei, care la rndul ei activeaz alt zimogen, etc
2. Activarea zimogenului n enzim
- activarea se realizeaz prin proteoliz limitat, n urma ei => 2 fragmente cu structur i funcie diferite
- zimogenul X e activat => 2 fragmente: unul mic, Xa i unul mare Xb
- Xa rmne n faz fluid, n lichidul interstiial. Unde exercit efecte proinflamatorii
- De cele mai multe ori, Xb sunt fragmente enzimatice. Ele NU rmn NICIODAT n faz fluid, ci se depun pe
mebranele celulare acceptoare de complement (non-self)
3. Reaciile enzimatice ale complementului se desfoar NUMAI pe mebranele celulare i ca urmare a parcurgerii
mai multor etape se constiutie n final complexe enzimatice multifactoriale
- Xb activeaz pe zimogenul Y, pe care l cliveaz => Ya i Yb care se depune pe membranele celulare (NU la
tmplare, ci n contact cu perecedentul) => un complex bimolecular pe membrana celular (XbYb)


4. Continuitatea reaciilor pe suprafaa membranelor celulare e asigurat i de comutarea specificitii de substrat a
unora din enzimele depoziate
- n contact cu fragmentele depozitate (Yb), enzima Xb sufer modificri conformaionale care conduc la
modificarea specificitii de substrat => Xb NU mai acionez asupra zimogenului Y, ci pe unul nou (Z), pe care l
cliveaz n 2 fragmente: Za i Zb care se ataeaz la complex => complexe trimoleculare (XbYbZb)
- o enzim si poate modifica specificitatea de substrat o singur dat

Organizarea de ansamblu a sistemului complement
- asemntoare cu sistemul coagulrii (2 ci cu o parte comun)
A. Partea comun
- evenimentul central e reprezentat de conversia C3 n C3b
- conversia se face sub aciunea C3 converatzelor (4)
- C3 convertazele rezult din activarea unor ci diferite:
1. calea clasic a complementului
- declanat n urma recunoaterii imunologice specifice
- structurile Ag sunt recunoscute prin Ac => activarea C3 convertazei
2. calea altern a complementului
- funcionez permanent la un nivel de intensitate sczut
- ea se poate amplifica ca urmare a opsonizrii membranelor non-self (nvelirea prin C3b) => o serie de etape ce
duc la activarea C3 convertazei => activarea C3 n C3b, care la rdul sa activeaz factorii din faza terminal (C5,
C6, C7, C8, C9) => MAC => liza osmotic a membranelor non-self

Calea clasic a complementului
- implic participarea unor factori notai cu C
C1
- complex trimolecular:
a. C1q
- unitate de recunoatere a complexelor imune (Ag-Ac)
- se afl n concentraii mici (70g la ml)
- structur:
- 6 subuniti identice ntre ele, asociate 2 cte 2, cu formarea a 3 uniti tot identice ntre ele
- Fiecare subunitate are o parte lung i une globuloas
- Cele 2 subuniti sun asociate ntre ele prin puni disulfurice
- Fiecare subunitate e format din asamblarea a 3 lanuri: A, B, C
- Lanurile A, B, C n poriunea N-terminal (liniar) adopt o conformaie colagen-like (formeaz un triplu helix),
iar ctre captul C-terminal ele adopt o conformaie globuloas
- Funcii:
Poriunea globuloas e direct rspunztoare de recunoaterea complexelor imune membranare. Recunoaterea se
face ca urmare a exteriorizrii secvenelor activatoare de complement (60aa) prezente n structura Ig. Aceste secvene
sunt situate la nivelul CH2 (IgG) sau CH2+CH3 (IgM). Ea e exteriorizat dup ce Ig a recunoscut Ag i atunci apar
modificri conformaionale n lanurile H ce se transmit pn la domeniile respective i contribuie la exteriorizarea
secvenei activatoare de complement. Secvena e recunoscut prin complementaritate de o secven prezent n
poriunea globuloas a C1q => legturi complexe imune C1q. C1q sufer i el modificri conformaionale n fiecare
subunitate ce se transmit antidromic (C-terminal N-terminal). Rezultatul modificrilor: exetriorizarea unor secvene
de aa prezente n poriunea liniar a fiecrei subuniti de C1q. Ea poate ataa C1r, care se activeaz i fixeaz C1s,
care se activeaz => s-a constituit complexul trimolecular C1qC1rC1s

b. C1r
c. C1s
- cliveaz n 2 etape succesive faciunile C4 i C2 => cascada complementului pe calea clasic.



C3

- considerat a fi componenta central a complementului pentru c:
1. scioneaz pe 2 ci
2. n raprt de ali factori, se afl n concetraiile cele mai mari (0,5 1,5 mg/ml)
Structura i funcia C3
- heterodimer cu GM = 280kDa
- 2 lanuri:
a. (mai mare, GM 110kDa)
b. (mai mic, GM 70kDa)
- ele sunt asociate prin puni disulfurice => heterodimeri
- sunt lanuri bidirecionale (N-terminal, C-terminal n direcii opuse = antiparalele)
a. lanul
-prezint ctre captul C-teerminal un buzunar hidrofob care realizeaz o internalizare relativ a unei grupri tiol-
esterice (relativ internalizat pentru dechiderea acestui buzunar e destul de larg)
b. lanul
- la lanul se asociaz prin puni disulfurice la captul N-terminal
- el prezint la captul lui N-terminal o secven de aa capabil s ataeze C5
Mecanismele activrii C3
- pe 2 ci distincte:
1. enzimatic permite funcia C3 n ambele ci
2. non-enzimatic funcia C3 strict din calea altern a complementului

1. Enzimatic
- se realizeaz prin clivarea C3 sub aciunea unor enzime nuite C3 convertaze. Ele pot fi generate att pe calea
clasic, ct i pe calea altern. Ele cliveaz doar lanul C3 undev ctre captul N-terminal, n afara punii
disulfurice, care e mereu conservat
- ca urmare a lizrii => eliberarea captului N-terminal al lanului , acest mic fragment rezultat = C3a
- C3a:
- Rmne NUMAI n faz fluid
- Local C3a exercit efecte de anafilotoxin n sensul c are aciune proinflamatorie sau proflogistic (vasodilataie
local, creterea permeabilitii capilare, efect clonotacic pentru leucocite)
- retul de factor = C3b
C3b:
- fragment mare
- NU rmne NICIODAT n faz fluid, ci se depoziteaz pe suprafaa membranelor non-self
- Depozitarea C3b pe membranele non-self se realizeaz prin intermediul punii tiol-esterice, efect al unei
succesiuni de evenimente:

Ca urmare a secretrii , sufer modificri conformaionale ce se transmit din aproape n aproape n
direcie ortodromic
n final ajung la buzunarul hidrofob, pe care l relaxeaz
n urma relaxrii => aducerea la suprafa a gruprii tiol-esterice
Gruparea tiol-esteric e o grupare electronofil (e acceptoare de electroni) => ea poate angaja legturi cu
unele grupri nucleofile (donare de electroni) prezente n structura membranelor (gruparea OH din structura
glucidelor sau NH2 din structura proteinelor membranare) => depozitarea C3b pe membranele non-self
- Depozitarea C3b se soldeaz cu opsonizarea celulei non-self i recunoaterea imunologic nespecific a structurii
non-self
- Rezultatul de ansamblu al depozitrii sunt modificri conformaionale de ansamblu n C3b => modificri ce se
transmit de la la i n final ele contribuie la exteriorizarea secvenei de aa capabil s fixeze/ataeze
componenta C5 a complementului => C3b are funcie de cofactor
2. Non-enzimatic
- ine de particularitatea buzunarului hidrofob ce prezint o deschidere larg care permite ptrunderea lent, n
cantiti mici i n permanen a moleculelor de ap
- ptrunderea moleculelor de ap se soldeaz cu ruperea legturii tiol-esterice cu formarea de grupri COOH i SH
=> ruperea non-enzimatic a gruprii tiol-esterice => modificri conformaionale n ce se transmit n direcie
antidromic
- rezultatul modificrilor conformaionale: exteriorizarea unei secvene de aa capabil s fixeze componenta B a
complementului (factor alctivator al cii alterne a complementului) => acum se declaneaz cascada
complementului pe calea altern, ce funcioneaz permanent, cu o intensitate mic
C4
- activeaz strict pe calea clasic a complementului
- se afl n concentraii medii (400 500 g/ml)
- e un heterotrimer (GM = 200kDa)
Structur:
a. (GM 90kDa)
b. (GM 80kDa)
c. (GM 30kDa)
- cele 3 lanuri sunt ancorate ntre ele prin puni disulfurice i toate sunt unidirecionate
a.
- seamn foarte mult cu al C3
- prezint ctre captul C-terminal un buzunar hidrofob care realizeaz o internalizare strict a unei legturi tiol-
esterice
- e strict internalizat pentru c deschiderea buzunarului e foarte mic => moleculele de ap NU au acces n
buzunarul hidrofob (factorul C4 NU acioneaz pe calea altern)
- la se asociaz prin puni disulfurice
b.
- blocant structural al C4
- e un fel de ax n jurul cruia se nfoar celelalte 2
c.
- se asociaz la prin puni disulfurice
- prezint ctre captul C-terminal o secven de aa capabil s fixeze componenta C2 a complementului
Activarea C4
- NUMAI enzimatic
- Enzima activatoare e subcomponent a complexului C1 (C1s)
- C1s cliveaz DOAR lanul , undeva foarte aproape de captul N-terminal, cu ruperea punii disulfurice
-




Hipersensibilitatea III

-este in RIU secundar, anormal / patologic caracterizat prin generarea unor cantitati excesive de complexe imune (CI)
libere care activand intens cascada complementului pe calea clasica duc la generarea unor leziuni tisulare inflamatorii
Acestea sunt de 2 tipuri - localizate,daca Ag declansator patrunde direct intratisular si CI se formeaza local
- multifocale, daca Ag patrunde direct in circulatie si CI se formeaza intravascular si doar
ulterior acestea se depoziteaza in diverse tesuturi si organe
HS. III cuprinde 2 etape - generarea CI libere
- generarea leziunilor tisulare inflamatorii acute
1.Generarea CI
- HS III e o boala prin CI pentru ca generarea de CI e tipica pt. HS III
HSIII = CI; reciproca e falsa
Formarea de CI nu reprezinta un element patologic in sine intrucat generarea acestora insoteste in realitate evolutia
oricarui RIU, indiferent daca acesta este normal sau patologic
RIU normal - se formeaza cantitati mici de CI
- CI sunt de dimensiuni mari
- au intotdeauna efect protector, contribuie la indepartarea Ag
RIU patologic - se formeaza cantitati mari de CI
- CI sunt de dimensiuni reduse
- sunt lipsite de efect de protectie, au efect patogen (induc leziuni tisulare)
Generarea CI la normal
- la normal formarea de CI reprezinta o etapa intermediara si obligatorie a oricarui RIU in cadrul careia CI nou formate
marcheaza aparitia primelor cantitati de Ac si contribuie la epurarea/indepartarea Ag declansatoare
- aceasta etapa apare in derularea oricarui RIU normal si reprezinta momentul central al dinamicii Ag si Ac in organism =
totalitatea modificarilor cantitative si calitative suferite in timp (pe masura ce RI se desfasoara) de catre Ag care reprezinta
elementul declansator al RIU si respectiv Ac care reprezinta elementul rezultant al RIU




- in prima etapa a curbei disparitiei Ag scaderea concentratiei se datoreaza captarii Ag de catre APC care preiau acest Ag
si intr-o a-II-a etapa si datorita transportului Ag de catre APC catre ganglionii locoregionali unde il prezinta catre LTH
care coopereaza cu LB
- in ganglioni in final LB se activeaza si produc Ac care sunt lansati in circulatie si ajung si in tesutul antigenic -> debutul
RIU
- primele cantitati de Ac apar intr-un moment in care Ag e prezent din abundenta in organism; concentratia Ac creste
progresiv pana ajunge la o valoare maxima
- Ac formeaza cu Ag compexe imune; CI se formeaza in timpul hasurat pe desen
- CI nu raman ca atare, ele sunt ulterior captate de macrofagele din sistemul reticuloendotelial (din ganglioni,splina etc.) -
> internalizarea CI si in final CI sunt distruse mai ales in compartimentul lizozomal; prin distrugerea CI rezulta si
distrugerea Ag si asa se ajunge la momentul Ag = 0
CI - formarea lor atesta realizarea recunoasterii imunologic specifice a Ag inductor
- joaca rol important in epurarea Ag inductor
- atesta eficienta RI
- in timp, Ag si Ac se afla sub 2 forme distincte- Ag initial se afla in organism ca substanta iar ulterior sub forma de
CI; Ac exista si ei sub 2 forme - initial - CI
- ulterior - Ac ca atare
Exista un interval de timp in care nici Ag, nici Ac nu exista ca atare, ci doar sub forma de CI. Acest interval in care nici
Ag, nici Ac nu sunt dozabili = hiatus imunologic ce corespunde cu momentul formarii CI.
Hiatusul imunologic exista si la normal si in conditii patologice:
- la normal - are durata scurta
- evolueaza cu generarea unor cantitati mici de CI

- nu evolueaza cu un consum de complement
- dozarea C3 e normala
- patologic - durata lunga
- evolueaza cu generarea unor cantitati mari de CI
- concentratia factorului C3 e scazuta pt. ca se realizeaza un consum de complement

Factorii de care depinde formarea CI:
m) aparitia primelor cantitati de Ac poate fi marcata prin intervalul Agi Aci (initierea raspunsului prin Ac)
n) timpul de contact Ac-Ag ce corespunde intervalului Aci Ag 0

Agi > Aci
Aci > Ag 0
_________________(+)
Agi -------------> Ag 0
=> formarea de CI atat calitativ cat si cantitativ depinde de cantitatea si calitatea stimularii Ag
Fazele curbei disparitiei Ag din organism:
- scaderea concentratiei Ag din organism trece prin 3 faze distincte:




faza de difuziune respectiv de diluie a Ag
- consta intr-o scadere pronunat a cantitii de Ag

- dureaz puin (minute), echivalent timpului de recirculare a sangelui n organism
- scade pt ca Ag administrat intravenos difuzeaza extravascular si in lichidul interstitial se dilueaza in intreg LEC
- faza 1 nu are functie imunologica
faza de clearance macrofagic a Ag
- scadere putin pronuntata a concentratiei de Ag
- dureaza 12 14 zile
- se numeste asa pt. ca Ag e preluat de diversele macrofage
- capacitatea de preluare a Ag de macrofage are 2 caracteristici: e mica/f. mica si e constanta in timp
- unghiul (format din panta fazei 2 si orizontala) are cel mult 3 grade
= gradul stimularii antigenice
Macrofagele prezinta Ag catre TH ce vor coopera cu LB.In partea a-II-a a fazei 2 debuteaza RIU. Din acest
moment incepe sa creasca concentratia Ac care are 2 caracteristici - e mare/f.mare
- e aproximativ constanta de la moment la moment

Producerea Ac poate fi cuantificata prin valoarea unghiului (45 60 grade).
- corespunde cu gradul raspunsului prin Ac
- e >> => la normal raspunsul prin Ac e excesiv,in raport de gradul stimularii Ag; la normal se elaboreaza o
cantitate de Ac cu mult mai mare decat ar fi strict necesar pt. simpla recunoastere a Ag aceasta se datoreaza
pt. ca in cadrul cooperarii LB incep sa se multiplice-> cresterea nr. LB per clona activata -> expansiune
clonala -> producere excesiva de Ac
Ac care se produc recunosc Ag -> formarea de CI la care participa un exces de Ac -> se organizeaza sub forma de
retele si pot fixa f. usor C3b generata continuu pe calea alterna. CI se formeaza intravascular -> CI pot fi f. usor fixate pe
suprafata eritrocitelor pt. ca prezinta receptori CR care angajeaza legaturi cu C3b.
CI adsorbite pe eritrocite sunt ulterior transportate catre SRE (sist. reticulo-endotelial) in special din splina unde
sunt endocitate de macrofage -> CI sunt distruse intramacrofagic ->se formeaza a-III-a faza

faza de clearance imun a Ag (se numeste asa pt. ca Ag nu e indepartat ca atare, ci sub forma de CI)
- scadere abrupta a concentratiei Ag
- dureaza putin si ajunge la momentul Ag 0
La normal se formeaza doar cantitati f. mici de CI pt ca:
- la normal RIU e declansat obisnuit de cantitati reduse de Ag
- la normal timpul de contact e foarte redus prin productia excesiva de Ac care fixeaza f. rapid
intreaga cantitate de Ag;

=> la normal CI are 4 caracteristici:
- cantitati scazute de CI
- CI nu sunt niciodata libere, sunt adsorbite pe suprafata unor celule
- au efect protector, contribuie esential la epurarea Ag din organism
- nu au efecte defavorabile pt. ca nu sunt libere

In conditii patologice CI - se formeaza in cantitati excesive
- sunt libere
- sunt lipsite de efect de protectie
- se insotesc de aparitia unor leziuni tisulare inflamatorii acute ce pot fi de 2 tipuri -
localizate,daca Ag patrund direct intratisular in organisme hiperimunizate, cu generarea unor cantitati mari de CI ce
depasesc capacitatea macrofagelor locale de a le indeparta; ex: reactia Arthus
- multifocale daca Ag patrunde direct in circulatia sistemica cu generarea de CI in cantitati
excesive ce depasesc capacitatea macrofagelor din SRE de a le indeparta, ele depozitande-se ulterior in diverse tesuturi si
organe; ex: RAA, boli autoimune




IMUNOLOGIE CURS I

I. INTRODUCERE
A. Definiie
B. Imunitate nnscut
C. Imunitate dobndit
II. ORGANELE LIMFATICE
A. Centrale
a) Mduva osoas i ficatul

b) Timusul
B. Periferice
a) Ganglionul limfatic
b) Splina
c) Alte esuturi limfatice (GALT, BALT, SALT)
III. CELULELE IMUNE
A. Limfocitele
a) T
b) B
c) Celulele killer
B. Celule prezentatoare de Ag
a) Sistemul mononuclear-fagocitic
b) Celulele dendritice, alte celule
C. Celule efectoare
IV. IMUNOGLOBULINELE
V. SISTEMUL COMPLEMENTULUI

I. INTRODUCERE

Imunitatea reprezint capacitatea organismului de a se apra n faa agresiunii agenilor externi
(termenul i are originea n limba latin, unde immunitas nseamn "ferit de"). Pentru a putea ndeplini
aceast proprietate, organismul trebuie s recunoasc structurile proprii, considerate "self" i s le
deosebeasc de cele strine, denumite "nonself", reprezentate n principal de microorganisme,
macromolecule, dar i de celule tumorale sau esuturi transplantate.
Mecanismele de aprare ale organismului pot fi mprite n dou mari categorii: nnscute i
dobndite, care interacioneaz ntre ele.
Imunitatea nnscut (nespecific) este prezent la toi indivizii normali, fiind prima barier n calea
agresiunilor externe. Modul su de aciune este nespecific, acelai indiferent de natura agentului strin.
Mecanismele imunitii nnscute se comport identic i n cazul unei reexpuneri, nefiind dotate cu memorie
imunologic.

n aceast categorie sunt incluse: barierele mecanice (reprezentate de tegumente i mucoase -
gastrointestinal, a tractului respirator i a celui urogenital), produii de secreie (mucusul, secreia gastric
acid, enzimele digestive, lizozimul din lacrimi i mucusul respirator, secreia glandelor sebacee, secreia acid
vaginal, ph-ul urinar, etc.), unele proteine din snge (sistemul complementului, reactanii de faz acut,
citokinele) i sistemul mononuclear fagocitic (care include neutrofilele i monocitele din snge i macrofagele
din esuturi). La acestea se adaug alte mecanisme care contribuie la epurarea agenilor exogeni, cum ar fi:
clearence-ul muco-ciliar, tusea, strnutul, vrsturile, peristaltice intestinal. Inflamaia reprezint, de
asemenea, un mijloc important de aprare nespecific, macrofagele i limfocitele polimorfonucleare (PMN)
fiind atrase la locul infeciei de produii eliberai de organismele infectante i esuturile necrozante.
Cnd mijloacele de aprare nespecifice sunt depite, agentul ptrunde i se dezvolt n esuturile
gazdei, producnd intrarea n aciune a unui sistem de aprare specific, mult mai eficace.
Imunitatea dobndit (specific) se dezvolt pe msur ce organismul interacioneaz cu diferii
ageni externi, interaciune ce poart numele de eveniment imunizant. La o nou expunere la agentul
respectiv, organismul va reaciona cu mai mult promptitudine, celulele implicate n acest proces fiind dotate
cu memorie imunologic.
Imunitatea dobndit poate fi natural (ctigat n mod pasiv prin transfer transplacentar, sau n mod
activ prin contactul cu antigenul) i artificial (care la rndul ei poate fi obinut pasiv prin seroterapie sau
activ prin vaccinare).
Totalitatea organelor, celulelor i moleculelor implicate n apariia imunitii dobndite alctuiesc
sistemul imun.

II. ORGANELE LIMFATICE

A. ORGANELE LIMFATICE PRIMARE sunt organele n care are loc diferenierea i maturarea
limfocitelor. Sunt considerate organe limfatice primare mduva osoas i ficatul, responsabile de diferenierea
limfocitelor B i timusul, sediul de difereniere al limfocitelor T.
1. Mduva osoas i ficatul:
Mduva osoas conine esutul hematopoetic i reprezint locul de origine al tuturor celulelorsanguine
la adult. Ea include i precursorii celulelor limfatice, seria limfoid reprezentnd 5-15%.
Diferenierea celulei stem n elemente limfoide se face n trepte succesive, fenomenul fiind
independent de existena stimulrii antigenice, mduva osoas neavnd de altfel ci aferente i modaliti de
captare i prelucrare a antigenului. Proliferarea i maturarea precursorilor celulari din mduva osoas se face
sub influena unor citokine numite factori de stimulare ai coloniilor (colony-stimulating factors). Ei sunt
sintetizai de celule medulare stromale i de macrofagele din mduv i creeaz un mediu local favorabil

hematopoezei. Mduva osoas mai conine i un procent variabil (ntre 5 i 15%) de plasmocite, formate la
nivelul organelor limfatice periferice ca o consecin a stimulrii limfocitelor B de ctre Ag.
Mduva osoas reprezint locul unde se desfoar post-natal diferenierea limfocitelor numite B. La
om, prenatal, acest proces se desfoar n ficat, n timp ce la psri el are loc ntr-un organ limfo-epitelial
numit "bursa lui Fabricius". De aici a provenit de altfel iniial i denumirea acestor limfocite -B-
bursodependente. Ulterior, cnd s-a vzut c procesul se desfoar la om n mduv "bone marrow",
denumirea acestui tip de limfocite s-a consolidat. De menionat c limfocite provenind din mduv populeaz
i timusul (mai ales corticala) unde se pot diferenia n limfocite T.
Ficatul reprezint doar sediul primar, precoce de hematopoez, fiind locul prenatal de difereniere i
maturare a limfocitelor B. La adult, doar n unele circumstane patologice (cum ar fi policitemia vera) ficatul i
reia funcia hematoformatoare.
2. Timusul:
Timusul este un organ limfoepitelial care apare devreme n embriogenez, crete n perioada
intrauterin i atinge o dezvoltare complet la natere, pentru ca dup pubertate s sufere un proces de
involuie, probabil indus hormonal prin corticoizi i androgeni.
Situat n mediastinul anterior, timusul este format din 2 lobi, acoperii de o capsul fibroas, fiecare lob
este organizat n lobuli, separai ntre ei prin trabecule de esut conjunctiv. Lobulii la rndul lor, prezint o
zon periferic (corticala) i o zon central (medulara).
n cortical se gsesc predominent celule limfocitare mari, imature care i au originea n mduva
osoas (n perioada adult), caracterizate printr-o vie activitate de multiplicare. Pe msur ce migreaz spre
medular prolifereaz i sufer un proces de maturaie.
n medular se gsesc predominent celule epiteliale reticulare ce contin n citoplasm granulaii bogate
n hormoni timici, unele celule fiind aglomerate n grupuri constituind corpii Hassall; tot n medular se gsesc
limfocite mici, mature, asemntoare celor din sngele periferic.
n esen, participare timusului la meninerea homeostaziei imune privete dou aspecte
fundamentale:
a. realizeaz maturaia precursorilor limfocitari T;
b. asigur distribuia limfocitelor T ctre anumite arii ale organelor limfatice periferice, numite zone
timodependente. Aceste zone sunt: zonele paracorticale ale ganglionilor limfatici i zonele periarteriolare din
pulpa alb a splinei. Acest lucru este realizat graie unor receptori de tip "homing" pe care limfocitele T i
achiziioneaz pe tot parcursul lor intratimic.
Formarea limfocitelor T mature este rezultatul unui ir complex de etape de proliferare, difereniere i
maturare, care implic exprimarea la suprafaa celulelor a unor receptori eseniali n recunoaterea
antigenelor (TCR, CD4, CD8), n activarea metabolic limfocitar (CD28, CD45) sau n adeziunea intercelular ca
(CD2, LFA1 etc.). Proliferarea este controlat de citokinele eliberate local, iar diferenierea apare n urma

contactului limfocitelor cu celulele stromei timusului, contact ce asigur generarea unor celule
imunocompetente i departajarea funcional pe liniile helper, citotoxic, supresoare i contrasupresoare.
ns, dup ce limfocitele T exprim pe suprafaa lor aceti receptori, marea majoritate mor in situ prin
apoptoz = moarte celular programat. Acestea reprezint aa numitul contingent distrus, distrugerea lui
mpiedicnd apariia procesului de autoimunitate. Puinele limfocite rmase viabile (contingentul posttimic),
trec n circulaie dup un pasaj prin medular. Distrucia celular prin apoptoz i nu prin necroz nu las s
ptrund n mediul extracelular diversele debriuri celulare care ar putea declana un rspuns local inflamator,
protejnd astfel structura i funcia acestui organ. n plus, celulele apoptotice exprim pe suprafaa lor
receptori care permit recunoaterea i ingestia lor de ctre macrofage i epurarea lor rapid.

B. ORGANELE LIMFATICE PERIFERICE reprezint sediul unde se iniiaz i se desfoar rspunsul
imun. n aceast categorie sunt incluse att organe capsulate ca splina i ganglionii limfatici, ct i esuturile
limfoide difuze, asociate tubului digestiv (notat GALT - Gut Associated Lymphoid Tissue), cilor respiratorii
(BALT - Branchial Associated Lymphoid Tissue) sau esutului cutanat (SALT - Skin Associated Lymphoid Tissue).
1. Splina este cel mai mare organ limfatic; ea este delimitat la exterior de o capsul ce conine fibre
musculare netede, din care se desprind trabecule ce ptrund n parenchim i compartimenteaz organul. n
parenchimul splenic se disting dou sectoare, diferite att ca structur ct i ca funcie:
-pulpa roie situat la periferia lobulilor, alctuit predominent din macrofage cu rol n fagocitarea
hematiilor senescente i care aparine sistemului mononuclear-fagocitic;
-pulpa alb situat n jurul arteriolei centrale care conine esut limfoid numit PALS - Peiarteriolar
Lymphoid Sheath); acesta la rndul ei are 2 zone, una strinc periarteriolar, ce conine n special limfocite T i
formeaz (cum spuneam mai devreme) zona timodependent a splinei i alta la periferia PALS ce conine
aproape exclusiv limfocite B, organizate sub form de foliculi - zona timoindependent. Aceti foliculi pot fi
primari sau secundari, formai din celule B activate antigenic, caz n care poart denumirea de centrii
germinativi.
ntre pulpa roie i cea alb, la periferia foliculilor limfatici, se gsesc sinusurile marginale, unde exist
att limfocite T ct i B, precum i magrofage i celule dendritice, absolut necesare (cum vom vedea n
continuare) pentru cooperarea celular din cadrul rspunsului imun.
Funcia imunologic a splinei se exprim n special n generarea unor rspunsuri imune fa de Ag
aflate n circulaia sistemic.
Rolul important pe care l joac splina n aprarea antiinfecioas este demonstrat de faptul c la
bolnavii splenectomizai apar infecii severe, mai ales cu germeni incapsulai (ca pneumococii i
meningococci).
2. Ganglionul limfatic constituie un adevrat filtru situat pe traiectul cilor limfatice. El este de
asemenea delimitat de o capsul fibroas ce trimite spre interior septuri fibroase incomplete. Histologic, la
nivelul ganglionului limfatic se disting trei zone:

- zona cortical - situat la periferie, alctuit din limfocite B aranjate sub form de foliculi primari sau
secundari (centrii germinativi), cu o structur asemntoare omonimilor lor din PALS. Foliculii constituie zona
timoindependent sau bursodependent.
- zona paracortical - situat sub cea cortical conine predominant limfocite T (din acest motiv
purtnd denumirea de zon timodependent), precum i un mare numr de macrofage.
- zona medular - situat parahilar i alctuit din vase sanguine, sinusuri limfatice, limfocite B, T,
plasmocite macrofage i celule dendritice.
Dup stimularea antigenic, limfocitele T i B migreaz unele spre altele, pierzndu-i aceast repartiie
anatomic. Limfocitele T activate prsesc ganglionul limfatic i ptrund n circulaia sistemic, iar limfocitele B
activate migreaz spre centrii germinativi unde sintetizeaz anticorpi.
O atenie special este acordat segmentului vascular denumit venul postcapilar situat
paracortical, ale crei celule endoteliale sunt cilindrice i nalte i poart denumirea de High Endothelial
Venules - HEV. Aceast zon cu celule cilindrice este locul de trecere al limfocitelor din circulaia sanguin n
ganglion. Ele au pe suprafaa lor molecule de adeziune numai pentru limfocite, fiind neutre fa de alte celule
circulante.
3. Alte esuturi limfatice
Zone de esut limfatic exist n submucoasa unor poriuni din tractul digestiv (GALT) sau respirator
(BALT), precum i din tegument (SALT). n unele teritorii aceste colecii sunt suficient de mari pentru a fi
individualizate. Astfel, la nivelul tubului digestiv exist n jurul faringelui inelul limfatic al lui Waldayer, compus
din amigdalele faringiene, palatine, linguale, iar la nivelul ileonului se gsesc plcile Peyer. Acestor structuri li
se asociaz apendicele. Colecii similare de esut limfatic se gsesc i la nivelul arborelui bronic (mai ales la
bifurcaia bronhiilor mijloci sau la jonciunea bronho-alveolar) i n tegument.
Importana acestui sistem imun rezid nu numai din faptul c el reprezint un mijloc eficient de
aprare la nivelul principalelor pori de intrare ale organismului, controlnd contactul cu o multitudine de Ag
cu poart de intrare digestiv, respiratorie i cutanat, ci i din faptul c ele sunt organe limfopoetice
importante i pot fi, la adult, surse de limfocite B sau T.

III. CELULELE SISTEMULUI IMUN

Celulele sistemului imun sunt: limfocitele, celulele prezentatoare de Ag (CPA) i celulele efectoare

A. LIMFOCITELE


Limfocitele reprezint componentul celular major al sistemului imun. Ele constituie o categorie de
celule ce grupeaz mai multe populaii celulare similare morfologic, dar diferite din punct de vedere
funcional. Limfocitele provin din organele limfatice primare (timus, mduva osoas i, n perioada
intrauterin, ficatul). O parte din aceste celule trec n circulaia periferic i migreaz ctre organele limfatice
periferice. Restul rmn pentru o perioad n circulaia general ca limfocite circulante unde totalizeaz
aproximativ 25% din elementele figurate albe. ntre cele dou sectoare exist o recirculaie permanet,
asigurnd o supraveghere imun competent i continu folosind un numr relativ mic de celule. Recirculaia
i migraia limfocitelor este reglat de moleculele de adeziune de pe suprafaa lor, ce corespund unor alte
molecule de adeziune de pe suprafaa celulelor endoteliale sau matricei extracelulare, precum i de
chemokinele secretate de la nivel tisular.
Durata de via a limfocitelor n sngele periferic variaz ntre 1 i 300 de zile, existnd i populaii
limfocitare care au o durat de via lung, de luni sau chiar ani, ele recirculnd n permanen ntre cele dou
sectoare ca celule cu memorie.
Limfocitele sunt singurele celule din organism capabile s recunoasc specific diferii determinani
antigenici, fiind astfel responsabile de dou dintre proprietile fundamentale ale rspunsului imun,
specificitate i memorie.
Din punct de vedere morfologic, limfocitele naive, care nu au fost stimulate antigenic, au un diametru
cuprins ntre 8 i 10 um, un nucleu mare, cu heterocromatin dens i citoplasm puin, ce conine un numr
redus de mitocondrii, lizozomi i ribozomi, aflate n stare de repaus sau n faza G
0
a ciclului celular. Dup
contactul cu Ag, celulele intr n faza G
1
a ciclului celular i i schimb caracteristicile morfologice (cresc n
dimensiune, ajungnd la un diametru de 10 -12 um, citoplasma e mai bine reprezentat i conine mai multe
organite celulare).
Marea heterogenitate funcional a limfocitelor este legat de expresia anumitor receptori de
suprafa. Unii dintre aceti receptori sunt exprimai numai n anumite stadii de difereniere sau activare, pe
perioade scurte de timp, pe cnd alii sunt permaneni i caracteristici diverselor linii celulare limfocitare.
Dup mai multe denumiri utilizate pentru a desemna aceti receptori, s-a stabilit utilizarea indicativului CD (de
la cluster of differentation), n prezent cunoscndu-se aproximativ 250 CD.
1. Limfocitele T
La adultul sntos celulele T reprezint 60-80% din totalul limfocitelor, cea mai mare parte avnd o
durat de via lung, fiind celule intens recirculate. La microscopia optic diferenierea dintre limfocitele T i
B este practic imposibil. Prin prezena pe suprafaa lor a unor receptori caracteristici, este posibil ns
identificarea lor. Care sunt acetia?
1. Receptorii limfocitului T, notai TCR (T cell receptor). Acetia au proprietatea fundamental de a
recunoate i a lega Ag. Sunt transmembranari i au o structur asemntoare poriunii Fab a moleculei de Ig,
fiind alctuii din 2 lanuri diferite de polipeptide, legate ntre ele prin puni disulfidice. Se cunosc 2 tipuri de
TCR: TCR1, primul care apare n timpul vieii intrauterine, compus din 2 lanuri i o i TCR2 prezent pe
suprafaa a 95% din limfocitele T, alctuit din lanuri polipeptidice notate o i |. Ambele tipuri de receptori au

un domeniu variabil, n poriunea NH2-terminal, i unele constante. Aceti receptori sunt legai de membrana
limfocitelor T prin intermediul unui alt grup de 5 lanuri polipeptidice notate CD3 i care au rolul de a
transmite semnalul activator n interiorul celulei, formndu-se astfel un complex TCR-CD3 care are
proprietatea de a se lega att de Ag cu care vine n contact celula, ct i de moleculele Ag de
histocompatibilitate.
Astfel, limfocitele T nu recunosc Ag native solubile (recunoscute de limfocitele B i Ac) ci numai pe
acelea cuplate cu MHC, fiind vorba de o recunoatere asociativ.
2. CD2 - unul dintre primii markeri de suprafa, prin care celula fixeaz n jurul ei un numr de
eritrocite de oaie cu formarea unor rozete (metoda este nc folosit pentru pentru identificarea i separarea
limfocitelor T). E prezent pe toate tipurile de limfocite T i pe NK. Are rol n aderarea limfocitelor T la APC sau
celulele int (prin legarea de contraligandul su LFA3) i rol accesor n activarea celular.
3. CD4 glicoprotein de suprafa situat predominent pe suprafaa celulelor Thelper (definitorie
pentru aceast clas de celule). CD4 reprezint receptorul T pentru moleculele MHC de tip II. Stabilirea
legturii ntre limfocitul T CD4+ i APC prin intermediul moleculei de MHC II contribuie esenial la
recunoaterea Ag.
4. CD8 tot de natur glicoproteic, distribuit pe membrana limfocitelor T supresoare, contrasupresoare
i citotoxice. CD8 interacioneaz cu moleculele MHC I.
5. CD5 se gsesc pe toate limfocitele T i pe un subset de limfocite B.
6. CD28 prezent pe 95% dintre limfocitele T CD4+ i 50% din cele CD8+ are rol n activarea celular,
precum i rol de molecul de adeziune.
7. MHC I i II
8. Receptori limfocitari T cu funcie n adeziunea celular
Indiferent de particulariti, funciile efectorii ale diverselor celule imune implic n mod obligatoriu
adeziunea intercelular, proces cruia i se acord n ultima vreme o atenie tot mai mare. Adeziunea celular
este implicat att n funciile efectorii imune ct i n repartiia specific a diverselor tipuri de limfocite n
anumite arii ale sistemului imun. Principalii receptori limfocitari implicai n aderarea intercelular LFA (Ag
asociat funciei limfocitare), VLA , CD2 i CD4 pentru limfocitele Th i CD8 pentru limfocilele Tc. Astfel,
moleculele de adeziune au rol n:
-respingerea forelor electrostatice de respingere dintre 2 celule
-realizarea unui contact prelungit ntre celulele care urmeaz s coopereze
-favorizarea recunoaterii Ag
-rol accesor n activarea celular.

Clasificarea limfocitelor T se face dup funcia pe care o ndeplinesc, precum i dup tipul markerilor de
suprafa. Se deosebesc aslfel mai multe tipuri de celule T, cele mai importante fiind:
a. Limfocitele T ajuttoare sau helper
- sunt CD4+ i recunosc Ag specifice asociate cu Ag HLA II.
- unele limfocite Th colaboreaz cu limfocitele B i macrofagele n inducerea rspunsului imun umoral,
iar altele colaboreaz cu alte celule T la producerea limfocitelor Tc intervenind n rspunsul imun celular.
- exist 5 subtipuri, 2 fiind mai bine cunoscute: Th1 care intervin n rspunsul imun celular prin
stimularea dezvoltrii limfocitelor Tc, creterea activitii macrofagice. Limfocitele Th2 care intervin n
procesele atopice, coordonnd secreia de IgE, IgA i IgG1, induc proliferarea eozinofilelor i a mastocitelor.
Ele i exercit aciune prin sinteza unor proteine numite citokine. Astfel, diferenierea lor nu se face pe criterii
fenotipice ci n funcie de setul de IL pe care l elaboreaz. De ex. LTh1 elaboreaz: IL-2, IL-3, IFN-, limfotoxin,
TNF-o i |. LTh2 sintetizeaz: IL-4, IL-5, IL-6. ntre cele 2 subtipuri exist inter-relaii stimulatoare i inhibitoare.
IFN- (secretat de Th1) deprim maturarea Th2 cu consecine funcionale. Th2 (prin IL-10) suprim producia
de Th1 acionnd ca o celul supresoare.
b. Limfocite T supresoare
- sunt limfocite reglatoare care diminu att rspunsul imun umoral ct i pe cel celular
- majoritatea sunt celule CD8+
- formarea lor din din precursori este urmarea contactului cu Ag, fr implicarea MHC.
- recunosc determinanii Ag, elaboreaz factori supresori solubili cu funcie de contrareceptori blocani
- la rndul lor sunt supuse controlului inhibitor al limfocitelor T contrasupresoare.
- prin stimulare Ts de ctre Ag proprii (self) este prevenit procesul de autoimunitate.
c. Limfocitele T citotoxice
- sunt responsabile de citotoxicitatea mediat celular; ea este implicat n aprarea antiviral,
antitumoral i respingerea grefelor.
- provoac liza celulelor care poart pe suprafaa lor Ag
- au determinani antigenici de tip CD8+ i mai puin CD4+
- pentru ca Ag s fie recunoscut de ctre limfocitele Tc, el trebuie s fie asociat cu Ag MHC I, similar
celui al limfocitelor Tc. Acest fenomen poart numele de restricie HLA.
d. Limfocite T inductoare
- sunt CD4+, i recunosc Ag asociat cu MHC II

- stimuleaz activitatea altor limfocite T (helper, suppresor, citotoxice)
e. Limfocitele T cu memorie
- sunt formate n timpul rspunsului imun primar, sunt CD4+
-au o via lung, de peste 40 ani, dar perioada lor activ este de numai 10-15 ani.
Se poate astfel observa c limfocitele T joac un rol esenial n reglarea rspunsului imun, justificnd
afirmaia potrivit creia "Limfocitul T este dirijorul orchestrei imunologice"
2. Limfocitele B
Limfocitele B reprezint 5-15% din totalul limfocitelor circulante; au o durat de via scurt (cteva
zile). Ele sunt precursorii celulelor care sintetizeaz Ac, plasmocitele. n diferenierea lor se disting 2 etape:
-una independent de Ag, care se desfoar la om, cum am vzut, prenatal n ficat i apoi n MO
(trecnd prin mai multe etape celule pre-B, caracterizate prin prezena n citoplasm a lanurilor u, celule B
imature ce prezint pe suprafa molecule de IgM). Pn la contactul cu Ag, limfocitele B sunt considerate
inocente, virgine. Contactul cu Ag schimb tipul receptorilor.
-etap dependent de Ag, cnd n urma ntlnirii cu acesta sufer un proces de transformare i
proliferare, amplificat i de IL secretate de limfocitele Th, i devin plasmocite, capabile s sintetizeze Ac.
Pe suprafaa limfocitelor B se gsesc mai multe tipuri de receptori:
1. receptori specifici pentru Ag, cu structur Ig, fixai de membrana limfocitar prin captul Fc i lsnd
liber extremitatea de cuplare cu Ag, Fab. Se mai numesc BCR (B cell receptor). Pot funciona ca receptori IgM,
IgD i mai puin celelalte clase de Ig. Aceti receptori sunt distribuii neomogen, dar datorit proprietilor
fluide ale membranei celulare ei sufer o rearanjare i redistribuie permanet.
2. receptori pentru complement
3. Ag MHC I i II
4. CD5 (limfocitele BCD5+ se caracterizeazprintr-o mare capacitate de a produce IL-10), CD10 sunt
prezeni numai pe celulele B imature i pe celulele maligne ale bolnavilor cu LLA, cnd poart denumirea de de
Ag cALLA)
5. receptori cu rol n adeziunea celular (LFA1) i alii.
3. Celule natural killer (NK)
Celulele NK reprezint un subset de limfocite care au capacitatea de a omor celule infectate i celule
care i-au pierdut moleculele MHC I. De asemenea, celulele NK stimuleaz macrofagele s distrug microbii
fagocitai. Termenul de natural killer provine de la faptul c aceste celule i exercit funcia citotoxic fr a
necesita o activarea prealabil. De asemenea, spre deosebire de limfocitele Tc, celulele NK nu i recunosc

specific inta, similitudinea ntre Ag MHC de pe cele 2 tipuri de celule nefiind necesar. Activitate lor nu este
deci supus fenomenului de restriciei HLA.
D.p.d.v. morfologic, aceste celule aparin unei clase de limfocite numite limfocite mari granulare,
deoarece au numeroase granule citoplasmatice. Ele sunt limfocite care nu prezint markeri celulari
caracteristici limfocitelor T sau B. Au ns markeri de suprafa care le contureaz identitatea, cum ar fi CD56,
cu rol de molecul de adeziune. Sunt prezente de la natere, nefiind induse de agresiuni imune. Se formeaz
din precursori medulari i se gsesc n sngele periferic i splin, i n numr mic, n interstiiul pulmonar,
mucoasa intestinal i ficat. Ganglionul limfatic, plcile Peyer, amigdalele i timusul nu au astfel de celule.
De asemenea sunt lipsite de receptori convenionali pentru Ag (TCR, BCR). Recunoaterea se realizeaz
prin intermediul NK-R (receptorul celulei NK) care are dou componente: un receptor activator care se leag
de un ligand (NK-L) prezent pe suprafaa tuturor celulelor nucleate din organism i un receptor inhibitor care
se leag de moleculele MHC I, care sunt de asemenea exprimate pe majoritatea celulelor normale ale
organismului. Cnd ambele tipuri de receptori sunt angajai, influena receptorilor inhibitori este dominant i
celulele NK nu sunt activate, fiind inpiedicat astfel distrugerea celulelor normale. n condiii patologice, are
loc o scdere a expresiei moleculelor MHC I de pe membran (m.a. n cancer, celule infectate viral), astfel nct
receptorul inhibitor nu mai este angajat. Astfel, celulele NK trec din starea normal de inhibiie ntr-o stare
activat i omoar celulele int.
Efectul lor citolitic este determinat de un bogat arsenal litic coninut n granulele lor citoplasmatice, ca
i n cazul limfocitelor T citotoxice. O astfel se molecul este perforina, care este eliberat de celulele NK dup
contactul cu celula int. Ea se ataeaz de membrana celular i formeaz canale transmembranare prin care
ptrund enzime numite granzime care induc apoptoza celulei int. Complementul nu intervine n liza celular
determinat de acest tip de celule. Merit ns menionat similitudinea structural i funcional care exist
ntre perforin i componentul 9 al sistemului complementului.
Celulele NK au pe suprafaa lor i receptori pentru poriunea Fc a IgG (FcRIII-CD16). Acest lucru
explic proprietatea lor fundamental de citotoxicitate fa de celule care au fixat pe suprafaa lor Ac specifici
i de care se leag prin intermediul acestor receptori. Acest fenomen poart denumirea de citotoxicitate
mediat de Ac, la realizarea lui nefiind necesar participarea complementului.
Activitatea celulelor NK este stimulat de citokine ca: IL-15, IL-12, IFN.

B. CELULE PREZENTATOARE DE AG

Celulele prezentatoare de Ag (CPA) sunt celule specializate n capturarea Ag, prezentarea lui
limfocitelor i declanarea unor semnale care favorizeaz activarea limfocitelor.
Exist 2 categorii de CPA:
a. "profesionale": macrofagele, celulele dendritice i LB

b. "ocazionale": PMN (m.a. neutrofilele), celulele endoteliale.
1. Macrofagele
Sistemul mononuclear fagocitic sau sistemul monocit/macrofag sau reticulo-endotelial reunete celule
(monocitul i macrofagul) care au origine medular comun, precum i caractere histologice (sunt celule
mononucleare) funcionale (capacitate de fagocitoz) similare. Rolul lor fundamental este aprarea mpotriva
bacteriilor intracelulare i a fungilor. Au origine n seria monocitar a sistemului hematopoetic; precursorii lor
sunt monoblastul-promonocitul-monocitul,
Monocitele reprezint 1-8% din leucocite, au un T1/2 de 8-72 ore, dup care prsesc torentul
circulator i migreaz tisular, difereniindu-se n macrofage. Ele au un diametru de 10 15 um, un nucleu mare
i o citoplasm bogat n lizozomi, vacuole i filamente de citoschelet. Procesul de difereniere presupune:
creterea dimensiunilor celulare, amplificarea aparatului mitocondrial i lizozomal, dezvoltarea proprietilor
de fagocitoz i sintez, apariia unor receptori pe suprafaa celulei.
Macrofagele tisulare sunt heterogene, avnd morfologie, funcii i capacitti metabolice diferite, n
funcie de esutul cruia i aparin. Macrofagul este o celul cu diametru de 10-25u, cu nucleu mare, cu multe
granule lizozomale i vacuole n citoplasm. Ele au cptat denumiri specifice, n funcie de locul de reziden:
Mf din esutul conjunctiv se numesc histiocite, cele din ficat - celule Kupffer, cele din esutul nervos - celule
microgliale, cele din plmn - macrofage alveolare, cele din os - osteoclaste, cele din articulaii - sinoviocite A,
etc.
Activarea macrofagelor nu este un proces specific, ca n cazul limfocitelor. El poate fi realizat sub
influena multor stimuli nespecifici: citokine (IFN- este cel mai puternic activator al macrofagului), contactul
cu Ag, substane mitogene, etc. Durata de via a macrofagului este de cteva luni.
Celulele sistemului monocit-macrofagic sunt implicate att n aprarea nespecific ct i n cea
specific. n imunitatea nespecific aceste celule fagociteaz unele Ag i sintetizeaz unele citokine care
stimuleaz alte celule. n rspunsul imun, celule monocit-macrofagice au un rol deosebit de important i
complex, att n etapa iniial a rspunsului imun cnd au funcia de CPA ct i etapa final, ca celule efectorii.
Ele au pe suprafaa lor numeroi receptori, dintre care cei mai importani sunt:
- receptori imuni:
1.- receptorii pentru fragmentul Fc al moleculele de Ig
2.- receptori pentru complement
3. receptori de adeziune celulara (LFA- antigenul asociat funciei leucocitare)
- receptori neimuni: (ei au rol n recunoaterea celulelor senescente, eritrocitelor heterologe,
bacteriilor, fungilor, paraziilor)
1.- pentru glicoproteine din structura peretelui bacterian,
2.- pentru proteine denaturate

3.- pentru hidrocarburi i glicoproteine care se termin n fructoz i manoz
4.- pentru fibronectin
5.- pt. unii hormoni,
6.- pt. Ag tumorale.
De asemenea, macrofagul are o capacitate secretorie mare, aceast celul putnd elabora peste 50-
100 de produi, dintre care menionm: enzime litice (elastaze, colagenaze, etc.), componente ale
complementului (C1-C5, properdina), pirogeni endogeni, factori care influeneaz diferenierea celular (de
ex. colony-stimulating factor, factori de angiogenez), factori citotoxici, citokine (IFN, IL, TNF-o), unii factori de
coagulare (V,VII, IX, X, protrombina, tromboplastina), radicali activi ai oxigenului.
2. Celulele dendritice
Celulele dendritice reprezint o populaie leucocitar particular, caracterizat morfologic de prezena
unor prelungiri citoplasmatice, iar funcional prin capacitatea de a prezenta antigenul (sunt celule
prezentatoare de antigen profesioniste) i o extraordinar capacitate de a stimula limfocitele T native i de a
iniia un rspuns imun.
Celulele dendritice au origine i pot ndeplini rolul de CPA, datorit prezenei pe suprafa a
moleculelor MHC II i a receptorilor pentru Ag. Ele au capacitatea de a capta Ag i de a-l transporta la nivelul
organelor limfatice periferice. Dup sediul lor pot fi mprite astfel:
a. cele din organele nelimfatice:
-celulele Langerhans care se gsesc n special n tegument (formeaz o reea n stratul bazal i n epiteliul
scuamos), dar i la nivelul mucoasei bucale, faringe, col uterin. Pe suprafaa lor au molecule HLA II, receptori
pentru complement i pentru Fc. Ele pot fixa astfel complexele imune. Sunt implicate mai ales n
hipersensibilitatea cutanat de contact.
-celule interstiiale situate n plmn, tractul digestiv, cord, ficat, rinichi
b. cele din organele limfatice:
-celulele interdigitale - se gsesc n zonele limfatice bogate n limfocite T, cu care coopereaz (zonele
paracorticale ale ggl. limfatic, pulpa alb a splinei).
-celulele foliculare - se gsesc n foliculii limfatici din corticala ganglionilor limfatici i pulpa alb a splinei, adic
zone bogate n limfocite B. Multitudinea de arborizaii le permite un contact intim cu limfocitele B, ele
prezentnd acestora Ag ca atare, nedegradat sau n complexe imune, ntr-un proces independent de MHC.

C. CELULELE EFECTOARE


Limfocitele stimulate antigenic se transform n celule efectoare, al cror rol esenial este acela de a
elimina Ag. n aceast categorie sunt incluse: limfocitele T helper, limfocitele T citotoxice i plasmocitele.
Limfocitele T helper activate exprim receptori de suprafa i secret numeroi produi care le permit s
interacioneze cu alte celule. Limfocitele T citotoxice activate dezvolt granule care conin proteine capabile s
omoare celulele infectate viral sau celulele tumorale. Limfocitele B stimulate antigenic se transform n celule
capabile s sintetizeze imunoglobuline, numite plasmocite. Morfologia acestora este diferit: nuclei deni,
citoplasm abundent, cu reticul endoplamatic bine reprezentat (acesta fiind sediul de sintez al
imunoglobulinelor) i complex Golgi perinuclear cu rolul de a converti imunoglubulinele n forma final sub
care sunt sintetizate.

IV. IMUNOGLOBULINELE sau ANTICORPII

Imunoglobulinele (Ig) reprezint o familie de glicoproteine care au proprietatea de a reaciona n mod
specific cu Ag a crui recunoatere de ctre sistemul imun a condus la sinteza lor, motiv pentru care li s-a
conferit denumirea de Ac. Ele sunt sintetizate de limfocitele B fie asociate membranei celulare unde joac
rolul de receptori, fie sub form seric. Ig reprezint aprox. 20% din proteinele plasmatice i migraz n cea
mai mare parte n zona electroforetic gamma. n afar de ser, o cantitate variabil de Ig se gsesc n lichidele
extravasculare, secreiile exocrine i esutul limfatic, dar nu depesc bariera hemato-encefalic.
Structura general a unei Ig
n alctuirea Ig, proporia glucidic reprezint doar 4-18%, restul fiind polipeptide. Fiecare molecul de
Ig este alctuit din cel puin o unitate monomeric de baz. O asemenea unitate monomeric conine 4
lanuri polipeptidice, a cror coeziune este realizat prin puni disulfidice. Aceste puni sunt dispuse att ntre
lanuri (intercatenare) ct i n interiorul aceluiai lan polipeptidic (intracatenare) i sunt eseniale pentru
configuraia tridimensional a moleculei. Forma este cea a unui Y.
Cele 4 lanuri sunt reprezentate de 2 lanuri grele notate cu H (de la heavy=greu) cu o greutate
molecular de 55 75 kD i 2 lanuri uoare notate L (de la light=uor) a cror greutate molecular este de
aproximativ 24 kD. Aezarea lor este simetric. fiecare lan polipeptidic are o extremitate aminoterminal,
denumit poriune variabil (V) i un capt carboxi-terminal denumit poriune constatnt. Prin apropierea
regiunilor variabile se realizeaz o structur tridimensional numit situs combinativ sau paratop, care
interacioneaz cu epitopul Ag specific. n afara acestora se mai descriu i nite regiuni numite hipervariabile
sau CDR (complementarity Determining Region), caracterizate printr-o compoziie foarte variabil de amino-
acizi, situate att pe lanutile H ct i pe cele L. Numrul situsurilor combinative determin valena
anticorpilor. de ex. el este 2 pentru IgG i 10 pentru IgM.
Att lanurile H ct i cele L nu sunt liniare, ci au o dispoziie buclat, ca urmare a legturilor disulfidice
intracatenare. Regiunile buclate astfel create poart denumirea de domenii. Lanurile L au 2 domenii (unul n
zona variabil i unul n cea constant). Lanurile H au un domeniu n zona variabil i 4-5 n cea constant.

Poriunea dintre primele 2 domenii ale regiunii constante ale lanurilor H poart denumirea de zona
balamalei (hinge region) datorit frexibilitii moleculei la acest nivel, ceea ce i confer un rol important n
angajarrea legturii dintre Ag i Ac.
Molecula de Ig se poate cliva sub aciunea unor enzime proteolitice n mai multe fragmente. Astfel,
papaina cliveaz monomerul n 3 poriuni aproximativ egale:
- 2 fragmente identice Fab (de la Ag binding) care conine lanul L n intregime i jumtatea amino-
terminal a lanului H. Domeniul variabil al lanului H i primul su domeniu constant formeaz fragmentul Fd.
Funcia fragmenului Fab este de a recunoate i de a se lega cu Ag.
- 1 fragment Fc (de la c=cristalizabil) care este alctuit n exclusivitate din jumtatea carboxi-terminal
a lanului greu. Acest fragment are cteva roluri importante: se leag de componentul C1q al sistemului
complementului i declaneaz calea clasic de activare a acestuia i interacioneaz cu receptorul Fc de pe
suprafaa mai multor celule (PMN, macrofage, limfocite), influenndu-le metabolismul. Ac care se fot fixa pe
aceti receptori fr ca n prealabil s fie cuplai cu Ag se numesc citofili (exemplu calsic este dat de IgE care se
fixeaz pe suprafaa mastocitelor sau bazofilelor prin extremitatea lor Fc, lsnd libere capetele Fab pentru a
se lega cu Ag). Aceti receptori sunt denumii dup tipul lanului greu al moleculei de Ig de care se leag.
De ex. receptorul Fc pentru IgG se numete FcR (receptor). Exist 3 tipuri de FcR: I, II, III:
-FcRI are o mare afinitate pentru IgG, mai ales IgG1 i 3. Prezena lui pe membrana monocitelor,
macrofagelor i neutrofilelor mediaz fagocitarea Ag particulare, proces reprezentativ pentru ceea ce
reprezint citotoxicitatea intracelular. Sunt implicai n declanarea RI i n reacia inflamatorie.
-FcRII fixeaz toate tipurile de IgG, dar mai ales CI. Are o mare rspndire i joac rol n epurarea CI.
-FcRIII au afinitate mic pentru IgG. Se gsesc pe macrofage, PMN dar i pe celulele NK, fiind
importani n citotoxicitatea extracelular.
Pepsina descompune molecula de Ig ntr-un fragment mare denumit F(ab)2 care conine cele 2
fragmente Fab i regiunea balamalei i cteva peptide scurte. Spre deosebire de Fab, acesta conine 2 situsuri
de legare cu Ag i poate produce aglutinarea Ag.
Lanurile grele sunt de 5 tipuri, notate cu o, , u, o i c, n funcie de compoziia amino-acizilor din
poriunea carboxi-terminal, tipul de lan greu stnd la baza clasificrii celor 5 tipuri de Ig.
Lanurile uoare se clasific n dou tipuri notate cu k i , diferite ntre ele prin structura poriunii
carboxi-terminale. O molecul de Ig nu poate conine dect un singur tip de lan uor.
n afara lanurilor H i L se mai descriu i lanurile J, care sunt glicoproteine scurte ce leag ntre ele mai
multe uniti monomerice, formnd astfel structuri polimerice de Ig (cum sunt IgA sau IgM). Ele se leag de
poriunea carboxi-terminal a lanurilor H.
Componenta glucidic a Ig se fixeaz pe regiunea constant a lanului H. Ea este necesar pstrrii
configuraiei funcionale a regiunii Fc.

Tipurile de Ig
Dup tipul de lan H, Ig se clasific n 5 tipuri, cu structuri i proprieti diferite, pe care, foarte pe scurt,
le vom trece n revist n continuare:
1. IgG
- reprezint clasa dominant din serul uman, adic 75% din totalul Ig
- au cea mai mare durat de via (3 sptmni).
- d.p.d.v. structural IgG este un monomer, alctuit din 2 lanuri H de tip i 2 lanuri uoare care pot fi
de tip k sau . Lanurile H sunt mprite n 4 subtipuri notate 1, 2 , 3 i 4, care definesc cele 4 subtipuri de
IgG: IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4.
- d.p.d.v. funcional IgG au o importan deosebit, Ac rspunsului imun secundar aparinnd n cea
mai mare parte acestei clase.
- au o distribuie egal n sectorul intra- i extravascular
- IgG este singura Ig care poate traversa placenta, asigurnd protecia n primele luni dup natere
- IgG1 i IgG3 se pot lega de componentul C1q al sistemului complementului, determinnd iniierea
activrii acestuia pe calea clasic. Activarea complementului de ctre IgG impune participarea a minimum 2
molecule de Ac.
- IgG au de asemenea funcii antitoxice i de opsonizare
2. IgA
- structural se aseamn cu molecula de IgG, coninnd 2 lanuri grele, dar de tip o, i 2 lanuri L k sau
.
- se cunosc 2 tipuri de IgA: IgA1 (majoritar) i IgA2.
- spre deosebire de cellalte tipuri de IgG, IgA sunt prezente att n ser ct i n diferite secreii.
- din acest p.d.v se descriu: IgA serice cu o structur monomeric, (doar < de 10% fiind formate din
asamblarea a 2, 3 sau 4 monomeri), predominant de tip IgA1 i IgA secretorie care este de tip IgA2. Acest tip se
gsete n secreiile digestive, saliv, secreiile lacrimale, bronice, colostru, laptele matern. IgAs se prezint n
general sub forma unui dimer, reunit cu ajutorul unui lan polipeptidic J i un nou polipeptid, numit
component secretorie, ce se ataeaz de lanul H o. Componenta secretorie este sintetizat de celulele
epiteliale. Rolul su este acela de a conferi IgA rezisten fa de aciunea enzimelor proteolitice din secreii.
Limitnd ptrunderea Ag n submucoase, IgA au rol n imunitatea local.
3. IgM

- este cea mai mare Ig, fiind alctuit din 5 monomeri identici unii ntre ei prin lanuri J i legturi
disulfidice la nivelul fragmentelor Fc.
- lanul H este de tip u, iar cele L sunt fie k fie
- este principala Ig a rspunsului imun primar
- are cea mai puternic aciune de activare a cii clasice a complementului, o singur molecul de Ig M
fiind suficeint pentru a fixa C1q.
-se poate sintetiza i local, forma secretorie posednd ca i IgA o component suplimentar.
4. IgD
- reprezint < de 1% din Ig serice
- este un monomer, n care lanul H este de tip o
- semnificaia lor fiziologic nu este deplin elucidat, dar s-a dovedit c IgD, ca i IgM au rolul de
receptor pnetu Ag la suprafaa membranei limfocitului B.
4. IgE
- se mai numesc i reagine
- au cel mai scrut timp de mjumtire (2-3 zile)
- sunt monomeri, lanul H este de tip c
- se fixeaz prin fragmentul lor Fc de receptorii specifici de pe membrana bazofilelor circulante i
mastocitelor tisulare, putnd declana astfel un rspuns de tip reaginic
- concentraia lor plasmatic crete n caz de infecii parazitare, fungice, virale.

SISTEMUL COMPLEMENTULUI

Sistemul complementului reprezint un complex de proteine serice ce conine 25-30 de componente
(aflate n mod normal n stare inactiv) care ndeplinesc un rol important n aprarea organismului i n
procesul inflamator. El face parte din mijloacele de aprare nespecific ale organismului. Activarea
componentelor sale se face succesiv, "n cascad". n urma activrii rezult o ntreag gam compui biologic
activi, care au capacitatea de a activa celule cu rol efector att n imunitate ct i n inflamaie.
Principalele funcii ale complementului sunt:
Inflamatoare:
Activare PMN, Mf

Marginatia si diapedeza PMN
Chemotaxie
Degranularea mastocitelor
Cresterea permeabilitatii vasculare
Contractia mm. neted
Eliminarea CI
Funcia citotoxic - n stadiile finale ale activrii sale celulele int sunt lizate. El este implicat n liza
multor celule cum ar fi: hematii, limfocite, bacterii, virusuri cu capside lipoproteice.
Neutralizare virala
Opsonizare - complementul activat se leag de Ag sau complexe imune, favorizndu-le aderena i
fagocitoza.
Privind aceste funcii ne putem da seama c acest sistem particip att n aprarea specific ct i n
cea nespecific, rolul lui fundamental fiind acela de a corobora cele dou tipuri de mecanisme, crescnd
eficiena intrinsec a fiecruia dintre ele.
Ficatul este principalul sediu al sintezei proteinelor ce alctuiesc acest sistem, dei macrofagele tisulare
i fibroblatii pot sintetiza i ei unele componente.
Activarea componentelor complementului se face pe trei ci: calea clasic, calea altern i calea
lectinelor.
Calea clasic
Elementul iniial este complexul imun Ag-Ac sau un Ag situat pe membrana celular. Activarea se
realizeaz prin legarea componentului C1 de fragmentul Fc al moleculei de Ig. Calea clasic mai poate fi
activat direct de unele virusuri i endotoxine. C1 este un complex trimolecular ale crui componente sunt
notate C1q, C1r i C1s, a cror activare se face n aceast ordine.
C1s activeaz C4, o molecul de C1s putnd cliva mai multe molecule de C4, ceea ce duce la
amplificarea procesului. C4 este descompus n 2 componente: C4a i C4b. C4a este o substan numit
anafilatoxin care are urmtoarele proprieti: stimuleaz degranularea mastocitelor, elibereaz aminelor
vasoactive din mastocit i bazofil, produce contracia muchiului neted, crete permeabilitatea vascular,
elibereaz amine vasoactive din granulocite.
C4b se leag de urmtorul component ce ntr n joc, C2. C2 este clivat sub aciune C1s n 2
componente: C2a (o proteaz) i C2b. C2b rmne legat de C4b formnd un complex enzimatic numit C3-
convertaza, care determin clivarea componentului C3.
C3 este clivat astfel n C3a (i ea o anafilatoxin) i C3b, un component major al sistemului
complementului. El se leag de C4bC2b formnd un complex trimolecular numit C5-convertaza. Tot C3b are
capacitatea de a declana calea altern de activare.
n plus, C3b i C4b favorizeaz aderena imun i fagocitoza, pentru c pe suprafaa unor celule ca
limfocitele, hematiile, celule fagocitare exist receptori specifici pentru aceste componente ale
complementului.
Calea altern sau properdinic

Aceast cale poate fi declanat att imunologic (IgA, IgG) ct i neimunologic (componente
bacteriene, parazitare, unele enzime). n acest proces intervin mai muli factori, cu origini variate notai B, D,
H, I.
C3b protejat de Ag declanant se leag de factorul B, care, sub aciunea factorului D este clivat n 2
componente: Ba (cu efect chemotactic pentru neutrofiele) i Bb care rmne legat de C3b, formnd complexul
C3bBb, care reprezint pt. calea altern C3-convertaza. El are deci capacitatea de a cliva C3, genernd o
cantitate sporit de C3b. Astfe, de o singur molecula de Bb se leag mai multe molecule de C3b, formnd un
nou complex numit C5-convertaza cii alterne.
Ultimele secvene de activare sunt comune pentru ambele ci. C5-convertaza cliveaz C5 n C5a
(anafilatoxin, elibereaz SRS-A din mastocite i factor chemotactic) i C5b. C5b se leag succesiv de C6, C7, C8
i C9, formnd complexul C5b6789 numit complexul de atac al membranei (MAC). El are asemnri
structurale cu perforina (molecul eliberat de celulele NK), avnd ca i aceasta, proprietatea de a leza
membranele celulare, inducnd astfel liza celulei.
Activitatea biologic a complementului este controlat de mai multe elemente: viaa efemer a unor
componente activate, proteine serice cu rol de a modula i limita activarea unor componente.



IMUNOLOGIE CURS 2

I. ANTIGENELE
II. RSPUNSUL IMUN
A. Recunoaterea, prelucrarea i
prezentarea Ag
B. Rspunsul imun umoral

C. Rspunsul imun celular
III. REACIILE IMUNE
A. Generaliti
B. Reacia anafilactic
C. Reacia citotoxic
D. Reacia prin complexe imune
E. Reacia mediat celular




I. ANTIGENELE

Antigenul este o substan, cel mai adesea strin organismului, capabil ca n momentul ptrunderii
sale n organism, s declaneze un rspuns imun (umoral sau celular) i s reacioneze specific cu produii
acestui rspuns imun (limfocite T sensibilizate sau Ig).
Se impun ns cteva meniunii fa de aceast definiie:
- imunogenul este o substan capabil doar de a declana un rspuns imun
- exist unele Ag care, n anumite condiii legate de calea de ptrundere sau concentraie, pot induce
inhibiia, supresia rspunsului imun ateptat, prin stimularea mecanismelor supresoare. Acestea se
numesc Ag tolerogene.
- nu toate Ag sunt exogene. Exist i Ag endogene, cum ar fi autoantigenele (structuri proprii devenite
non-self) sau Ag tumorale.
Poriunea din Ag care interacioneaz cu Ac (mai exact cu paratopul acestora) sau cu receptorii
limfocitelor T poart denumirea de determinant antigenic sau epitop. El este de fapt un subcomponent al
macromoleculei antigenice. Acesta poate avea o structur liniar (recunoscui numai de limfocitele T) sau
aminoacizii pot veni n contact fr ca pe lanul polipeptidic s fie alturai - epitop conformaional-
(recunoscui de limfocitele B). Epitopul poate fi situat la suprafaa moleculei de Ag sau se poate gsi n

interiorul acesteia, mai ales n structurile moleculare complexe, caz n care se poate exprima numai dup
degradarea parial i deplisarea restului moleculei de Ag. O molecul de Ag poate avea mai muli
determinani antigenici, fiecare dintre acetia putnd induce sinteza unui Ac, proprietate numit plurivalen.
Caracteristicile fundamentale ale Ag sunt imunogenicitatea, specificitatea i adjuvanticitatea.
A. Imunogenicitatea
Pentru ca o substan s fie imunogen ea trebuie s ndeplineasc urmtoarele condiii:
1. s fie strin organismului - cu ct ntre organismul gazd i cel cu ale crui molecule nteracioneaz
sunt mai diferite filogenetic, cu att acestea din urm sunt mai imunogene. Exist nsi excepii n care
substane strine organismului nu sunt antigenice, iar altele proprii pot deveni antigenice n anumite condiii
(aceast situaie este substratul bolilor autoimune).
2. s aib o greutate molecular mare - n general molecule < de 5-10 kdaltoni nu sunt imunogene. i
n aceast privin exist ns excepii.
3. s aib o structur chimic complex - o molecul complex, cu un numr mare de determinani
antigenici, este mai imunogen. Cu excepia lipidelor pure, toate macromoleculele sunt imunogene.
Proteinele, mai ales cele bogate n aa aromatici, au cel mai puternic potenial imunogen.
4. s fie digerabile - pt. a induce un rspuns imun, Ag trebuie s fie prelucrate de unele celule (m.a.
macrofagele). cele care nu pot fi digerate de echipamentul enzimatic al acestora nu sunt imunogene.
5. s fie accesibil spaial - pentru a putea permite contactul cu paratopul
6. s aib o remanen mare n organul gazd - remanen legat de starea de solubilitate. Cu ct o
substan este mai insolubil, cu att este mai antigenic.
B. Specificitatea
Este calitatea de a induce un rspuns imun strict specific fa de stimulul declanator.
C. Adjuvanticitatea
Este capacitatea de alipire a moleculelor de Ag de celulele prelucrante. Ea este mai mare la Ag
prezente sub form de particule dect la cele existente n soluie. Aceast proprietate poate fi amplificat prin
folosirea adjuvanilor, care, n plus, protejeaz Ag de o degradare rapid, prelungindu-i astfel remanena.
Clasificarea Ag
Antigenele pot fi clasificate n funcie de criterii structurale, chimice sau de relaia gazd-Ag.
A. Antigene complete i incomplete
Pentru ca un Ag s fie considerat complet el trebuie s ndeplineas ntocmai cerinele impuse de
definiie (s induc un rspuns imun i s reacioneze cu produii acestuia).

Exist ns molecule care datorit dimensiunilor mici, nu pot induce un rspuns imun dect dac se
asociaz cu un suport constituit din structuri proteice sau tisulare ce poart denimirea de carrier, dar pot
interaciona cu produii rspunsului imun. Asemenea molecule se numesc haptene sau Ag incomplete. Ele nu
au imunogenicitate (nu pot declana singure un rspuns imun), dar au specificitate (reacioneaz cu Ac
specifici). Carrier-ul este responsabil de imunogenicitate, haptena este responsabil de specificitate.
B. Clasificarea chimic
Din acest p.d.v. Ag pot fi:
1. Proteine - cele mai antigenice structuri
2. Glucide - n general slab antigenice, moleculele ramificate (de ex. polizaharidele din structura unor
bacterii) pot fi ns puternic antigenice
3. Lipide - de asemenea slab antigenice n general. Unele ns, cum ar fi cardiolipinele, pot fi antigenice
i au semnificaie n unele boli.
C. Relaia gazd-antigen
Din acest p.d.v. se deosebesc mai multe situaii:
1. Antigene heretogene, heterologe sau xenoantigene sunt Ag care se gsesc la specii diferite.
2. Antigene heterogenetice sau heterofile sunt Ag prezente la specii diferite filogenetic, dar care au
structuri analoage (au n comun unul sau mai muli epitopi). Din aceast cauz pot reaciona cu acelai Ac
specific (corespunztor epitopului comun) dnd reacii ncruciate.
Ac heterofili pot avea o importan mare n practic. De exemplu: treponema pallidum are un epitop
numit cardiolipin, care se gsete i n miocard. Detectarea Ac anticardiolipin st la baza cunoscutei reacii
numit VDRL de diagnosticare a infeciei cu treponema pallidum. ~n unele boli auto imune, i ex. cel mai
elocvent l constituie LES, pot apare Ac anticardiolipin, ceea ce determin apariia unor reacii VDRL fals +.
3. Antigene alogeneice sau aloantigene sunt Ag caracteristice unei specii, dar care difer ntre indivizii
din interiorul speciei respective. Ele confer specificitate de specie.
Din aceast categorie fac parte antigenele de histocompatibilitate (HLA), cu rol decisiv n rspunsul
imun. Ele au cptat o deosebit importan odat cu dezvoltarea transplantelor. De asemenea, s-a observat
c unele grupe HLA prezint o mare susceptibilitate la o anumit boal, de unde s-a nscut ideea unei
predispoziii genetice. Cel mai celebru exemplu n acest sens din literatur este cel al SA i al AgHLA-B27, 95%
dintre bolnavii cu SA fiind HLA-B27+.
Pe suprafaa celulelor organismului exist proteine structurale care-i confer acestuia o identitate
anume. Aceste proteine structurale, caracteristice fiecrui individ, au primit denumirea de Ag de
histocompatibilitate. Au o structur glicoproteic, se gsesc pe suprafaa tuturor celulelor din organism, dar cu
o densitate diferit, n funcie de tipul celulei i de expunerea la diferite substane activatoare. Densitatea lor
variaz n timp. Cele mai multe se gsesc pe celulele splenice i trombocite, apoi, n ordine descresctoare, pe

celulele din piele, pulmon, rinichi, ficat, cord, celula endotelial cornean. Cele mai puine se gsesc n creier.
Hematiile nu au astfel de antigene pe suprafa.
Sinteza lor este codificat de nite gene situate pe braul scurt al cromozomului 6, teritoriu care a fost
numit complex major de histocompatibilitate (MHC). Proteinele a cror sintez o determin au fost denumite
la om HLA (de la Human Lymphocyte Antigens, deoarece primele celule pe care au fost descrise au fost
leucocitele). Zona este alctuit din 4 loci, notai A, C, B, D. Fiecare locus, i implicit fiecare protein
sintetizat, se gsete n numeroase variante structurale (alele) care au fost marcate cu cifre. Genele MHC se
caracterizeaz printr-un mare polimorfism, unele dintre ele avnd peste 250 de alele. Fiecare individ prezint
o jumtate din Ag HLA motenite de la tat i o jumtate de la mam. n timp s-a convenit ca gene i protein
a crei sintez o determin s poarte aceeai notaie.
Tot n acest regiune se gsesc i genele care sintetizeaz componentele complementului 2, 4 i
factorul B, TNF o i |, unele enzime.
ntre cele dou clase de molecule MHC exist similitudini structurale.
Moleculele MHC de clasa I se gsesc pe suprafaa tuturor celulelor din organism, cu excepia
hematiilor, dar densitatea lor difer n funcie de tipul de celul. Sunt molecule foarte antigenice. n structura
lor intr un lan greu transmembranar o cu 3 domenii (1,2 cu structur extrem de variabil - domenii
polimorfe-, 3 alctuit dintr-o secven identic pentru toate celulele din organismul respectiv -domeniu
monomorf-) i unul uor numit |2 microglobulin (identic la indivizii aceleiai specii) legate ntre ele prin
legturi necovalente.
Au rol n:
- prezentarea pe membrana APC i a celulelor somatice a Ag endogene (Ag sintetizate de celule infectate
viral sau cu germeni cu habitat intracelular, Ag tumorale, autoAg).
- rejetul de gref
- cooperarea cu limfocitele Tc (n rspunsul imun se leag de CD8 de pe limfocitele T)
INF-o i | le amplific sinteza i expresia pe membran.
Moleculele MHC de clasa II sunt exprimate numai pe celulele care particip la rspunsul imun (limfocite
B i T, monocite/macrofage, celule dendritice, unele celule endoteliale, enterocite vilozitare, celule epiteliale
ale cilor respiratorii, etc.). i ele sunt formate din 2 lanuri polipeptidice transmembranare, cu structur
imunoglobulinic, legate necovalent. Cele 2 lanuri numite o i |, sunt la rndul lor alctuite din 2 domenii.
Domeniile o1 i |1 (NH2-terminale sunt variabile -domenii polimorfe-, iar cele o2 i |2 sunt constante -
domenii monomorfe-).
Au rol n:
- prezentarea pe membrana APC a Ag exogene, provenite m.a. din fagocitarea bacteriilor
- coopereaz cu limfocitele Th, leagndu-se de moleculele CD4
- rol minor n rejetul de gref.
Sinteza i expresia lor membranar este stimulat de INF-, IL-4, IL-13, TNF-o i |.

4. Antigene singeneice sunt Ag ce aparin indivizilor identici din punct de vedere genetic (gemeni
monozigoi).
5. Autoantigenele sunt Ag gsite la acelai individ, considerate self, care n condiii normale nu
determin un rspuns imun.
Exist o categorie particular de Ag numite superantigenele. Acestea, spre deosebire de Ag obinuite,
nu sunt fagocitate i prelucrate de macrofage. Ele au capacitatea de a se fixa direct pe moleculele de pe
suprafaa celulelor. Astfel, ele se fixeaz pe moleculele HLA II de pe macrofag i de lanul | al TCR de pe
limfocitul Th. n acest fel sunt activate mai multe limfocite dect n mod obinuit. n cazul stimulrii imune prin
superantigene, eliberarea de citokine este abundent, acest lucru genernd un tablou clinic sever, asemntor
celui din ocul septic. Stimularea imun prin superantigene este nespecific i nu produce secreie de Ig sau
limfocite sensibilizate. n categoria superantigenelor se numr unele toxine bacteriene i unele proteine
retrovirale.
Destinul Ag odat ptruns n organism este influenat de mai muli factori: calea de ptrundere,
solubilitatea sa, dimensiune, capacitatea organismului receptor de a-l elimina sau distruge. Primul contact este
cel cu mecanismele imunitii nscute (bariere mecanice, produi de secreie, PMN, etc). Majoritatea
substanelor exogene sunt astfel eliminate.
- cnd Ag ajunge direct n snge, este transportat n splin, unde vine n contact cu CPA i limfocitele locale
i declaneaz rspunsul imun.
- cnd Ag ptrunde pe cale cutanat sau subcutanat, este captat de celulele Langerhans i este transportat
n ganglionul limfatic de drenaj. Aici se desfoar rspunsul imun, iar produii acestuia (Ac sau limfocitele
sensibilizate) ajung n snge via canalul toracic,
- cnd Ag ptrunde pe calea mucoaselor respiratorie sau digestiv, rspunsul imun se desfoar n esului
limfatic local. Ac acioneaz local, iar limfocitele B i T migreaz spre alte locuri de reziden.
n concluzie, Ag care reuesc s depeasc barierele nespecifice, activeaz sistemul imun declannd
rspunsul imun.

RSPUNSUL IMUN

Rspunsul imun reprezint totalitatea fenomenelor prin care organismul recunoate i neutralizeaz
structurile agresoare.
Contactul dintre Ag i celula care-l recunoate este urmat de un proces de multiplicare i difereniere a
acesteia, ce are drept rezultat sinteza de Ac specifici (rspuns imun umoral) sau apariia limfocitelot T
sensibilizate (rspuns imun celular). Efectele acestui prim contact poart numele de rspuns imun primar.
Rspunsul imun primar are urmtoarele proprieti fundamentale:

1. xenofobie - capacitatea de a diferenia constituenii proprii (care alctuiesc selful) de molecule
sau celule strine organismului respectiv (denumite non-self). Aceast proprietate, denumit i toleran fa
de self, mpiedic dezvoltarea rspunsului imun fa de Ag proprii.
2. specializare mecanismele rspunsului imun sunt distincte i diferite n funcie de natura
agentului agresor, maximizndu-i astfel eficacitatea.
3. specificitate - fiecrui tip de deteminant antigenic i corespunde o singur celul de
recunoatere.
4. memorie - capacitatea de a declana un rspuns imun mai precoce, mai intens i mai eficace n
cazul rentlnirii cu un Ag cu care organismul a fost n prealabil imunizat. Acesta poart numele de rspuns
imun secundar.
5. auto-limitare orice rspuns imun normal se desfoar pe o anumit perioad de timp dup
stimularea antigenic, dup eliminarea Ag, sistemul imun revenind la starea iniial. Acest proces poart
numele de homeostazie imun.


n desfurarea rspunsului imun (indiferent c este umoral sau celular) exist mai multe etape:
- preluarea, prelucrarea i prezentarea Ag
- recunoaterea Ag
- activarea limfocitelor
- faza efectoare i eliminarea Ag
- declinul rspunsului imun (restabilirea homeostaziei)
- meninerea memoriei Ag
Celulele cu rol imunoreglator sunt:
- limfocitele Th - amplific rspunsul imun
- limfocitele Ts - limiteaz intensitatea rspunsului imun
- limfocitele Tcs - realizeaz echilibrul funcional ntre Th i Ts.
Celulele cu rol efector sunt:
- limfocitele B - responsabile de rspunsul imun umoral
- limfocitele Tc responsabile de rspunsul imun celular
Prima etap este ns comun: prelucrarea, prezentarea i recunoaterea Ag.

A. PRELUAREA, PRELUCRAREA I PREZENTAREA AG

n acest proces, rolul principal revine CPA, care au rol n declanarea, ntreinerea i controlul
rspunsului imun.


1. Macrofagul capteaz (prin endocitoz Ag particulate i prin pinocitoz cele solubile) i fagociteaz
nespecific Ag nativ, indiferent sub ce form s-ar afla acesta - protein izolat, virus, bacterie, etc.
2. n urma degradrilor proteolitice ce au loc n CPA sub aciunea enzimelor lizozomale, Ag este
transformat n fragmente mai mici, polipeptide cu 20-30 de aminoacizi, cu eliberarea epitopului, care devine
astfel foarte uor accesibil.
3. Tot n CPA, Ag este asociat cu molecule MHC, pentru a putea fi exprimat pe suprafaa celulei.
Asocierea Ag-MHc este un proces complex. Tipul de molecule MHC cu care Ag va fi cuplat depinde de
natura i originea Ag.
Astfel, Ag exogene, care sunt captate de CPA prin endocitoza, se asociaz cu molecule MHC II, proces
ce are loc la nivelul endozomilor.
Ag endogene, cum ar fi proteinele virale sintetizate chiar de celula infectat, se asociaz cu molecule
MHC I, asamblarea avnd loc la nivelul reticului endoplasmatic rugos.
Poriunea din Ag care este cuplat cu moleculele MHC se numete agretop, iar cea care se va lega n
continuare cu TCR, epitop.
Astfel cuplat, Ag este expus la suprafaa APC n vederea recunoaterii sale de ctre limfocitele T
efectoare.

B. RECUNOATEREA AG

Complexul Ag-MHC este prezentat limfocitului T, la nivelul TCR. TCR recepioneaz epitopul cu o
secven numit paratop. Hipervariabilitatea structural a paratopului permite recunoaterea oricrui tip de
Ag.
Limfocitele T recunosc epitopul Ag doar asociat cu molecule MHC pe suprafaa CPA. Limfocitele Th
CD4+ reconosc Ag asociat cu molecule MHC II, iar limfocitele Tc CD8+ recunosc Ag asociat cu molecule MHC I.
Acest fenomen poart numele de recunoatere MHC-restrictiv.

C. ACTIVAREA LIMFOCITAR


n existena lor, limfocitele T i B, mai devreme sau mai trziu, vin n contact cu diverse Ag i trec din
starea de repaus n care se aflau n cea de celule activate, devenind capabile s realizeze ntreaga gam de
funcii efectorii pe care le implic un rspuns imun.
Activarea limfocitelor este i ea un proces extrem de complex, care se realizeaz prin mai multe ci ce
acioneaz simultan:
recunoaterea Ag-specific, ntre epitopul Ag i paratopul TCR (Ag-TCR). Aceast legtur are o
afinitate destul de mic. Ea trebuie amplificat de alte legturi:
recunoaterea tipului de MHC prin receptorii CD4/CD8. Pentru ca aceast recunoatere s se
produc este necesar ca ambele tipuri de celule s aib acelai fel de molecule MHC.
activarea unor receptori limfocitari cu rol de molecule de adeziune (de ex. CD2- de pe membrana
limfocitului T - LFA3(CD58) - de pe membrana CPA; LFA1 de pe membrana limfocitului T - ICAM de
pe membrana CPA), care faciliteaz interaciunea fizic ntre CPA i limfocitul T.
prin eliberare de citokinele.
Citokinele sunt proteine sau fragmente peptidice, fr activitate enzimatic, ce asigur transmiterea de
informaii ntre diferite celule. Principalele citokine implicate n aceast etap a rspunsului imun sunt:
- IL-1:
o sintetizat de macrofagele stimulate antigenic
o stimuleaz proliferarea limfocitelor Th care au recunoscut deja complexul Ag-MHC
o stimuleaz proliferarea limfocitelor B
o stimuleaz producia de IL-2 de ctre limfocitele Th, precum i expresia receptorilor pentru IL-2
de pa suprafaa multor cellule
- IL-2 (sintetizat de limfocitele Th, stimuleaz proliferarea limfocitelor T, B, macrofagelor i NK)
- TNF-o
- IFN-.
Principalul stimul fiziologic care declaneaz ns activarea limfocitelor T este recunoaterea Ag, cu
formarea unui complex alctuit din Ag (mai exact epitopul su), moleculele MHC i TCR, n a crui structur
este inclus i CD3. Realizarea acestui complex la suprafaa limfocitului T matur conduce la activarea n
interiorul celulei a 2 ci de mesageri secunzi, fapt ce determin n final transformarea limfocitului ntr-o celul
activat.
Dup stimulare, LT exprim gene care anterior nu erau active i sintetizeaz numeroi produi:
citokine, receptori pentru citokine i alte proteine implicate n transcripia genetic i diviziunea celular.
Activarea limfocitar are n principal 2 consecine importante:
- stimularea proliferrii celulare, -expansiune clonal- cu formarea unei clone celulare cu reactivitate
Ag-specific
- declanarea mecanismelor efectorii: producie de limfokine, eliberarea mediatorilor citotoxici, etc.
Limfocitele Th1 elibereaz IL-2, IFN-, TNF-o i activeaz macrofage i celule K i NK, iar Th2 secret IL-4, IL-5
care activeaz limfocitele B. Limfocitele Tc elibereaz i ele citokine i perforin.

RSPUNSUL IMUN UMORAL


Esena rspunsului imun de tip umoral este secreia de Ig (Ac) specifici ca urmare a stimulrii
antigenice a liniei limfocitare B.
Limfocitul Th odat activat are funcie de celul inductoare a rspunsului imun celular, iar limfocitul B
pe acela de celul efectoare.
- Limfocitul Th prezint fragmentul antigenic limfocitului B.
- La stabilirea acestei legturi intercelulare contribuie i moleculele de adeziune. Limfocitele Th activate
exprim CD40L, care se leag de CD40 de pe suprafaa limfocitelor B.
- Stimularea limfocitelor B necesit ns i alte mecanisme auxiliare, care impun intervenia citokinelor.
Limfocitele Th elibereaz mai multe citokine, care poart denumirea generic de limfokine. IL-2 este cea mai
important limfokin secretat de limfocitul Th sensibilizat antigenic. Ea are efecte multiple:
si stimuleaz propria secreie (efect autocrin)
activeaz metabolic limfocitele B aflate n contact
activeaz i alte celule ca: limfocitele T, NK, macrofage
i exercit efectul prin intermediul receptorului pt. IL-2
Alte limfokine sunt: IL-4 care
crete producia medular de limfocite B
favorizeaz conversia progenitorilor n limfocite B mature
crete expresia MHC II de pe membrana limfocitelor B
stimuleaz sinteza de Ig
Efecte asemntoare au i IL-5 i IL-6.
- Ag se fixeaz de receptorii specifici membranari, care au o structur aproximativ identic cu cea a Ig
care vor fi sintetizate. Receptorii limfocitelor B sunt Ig, cel mai frecvent IgM i IgD. Astfel, concomitent cu
activarea prin intermediul limfocitelor Th, are loc i o fixare direct a Ag pe suprafaa limfocitelor B. Aceast
fixare este urmat de endocitoza complexului Ag-receptor. Fragmentele peptidice obinute din degradarea
intracelular a Ag sunt cuplate cu MHC II i expuse pe suprafaa limfocitului B. Acest complex (MHCII-Ag)
expus pe suprafaa limfocitului B servete drept semnal de recunoatere pentru limfocitul Th specific, care a
fost deja activat de CPA. Acest proces (activarea direct a limfocitului B de ctre Ag) nu reprezint totui un
stimul suficient pentru a declana sinteza de Ac.
- Astfel, se stabilete o relaie funcional complex ntre aceste 3 celule: APC, Th i limfocitul B:
macrofagul i limfocitul B capteaz i prelucreaz Ag, ambele celule activeaz Th, care la rndul su activeaz
limfocitul B, determinndu-i transformarea n plasmocit. Limfocitele B i T activate migreaz unele spre altele
i interacioneaz la marginea foliculilor din organele limfatice periferice.
- Activarea limfocitelor B produce stimularea diviziunilor celulare i diferenierea n plasmocite.
Plasmocitele capt caracteristici structurale (de ex. reticul endoplasmatic rugos foarte bine reprezentat) care
le fac capabile s-i ndeplineasc rolul, acela de a secreta Ac.

- Rspunsul imun care apare dup o prim expunere a unui organism la Ag se numete rspuns imun
primar. El are mai multe faze:
- faza latent, 1-2 sptmni de la expunere
- faza exponenial n care concentraia seric de Ac crete
- faza de echilibru (steady state) n care producia i dispariia Ac sunt echilibrate
- faza de declin n care rspunsul imun se stinge i producia de Ac nceteaz n cteva
sptmni.
- Ac sunt iniial de tip IgM, iar apoi nivelul acestora scade i apar Ac din clasa IgG.
Rspunsul imun secundar se produce cnd acelai Ag se administreaz dup un interval de timp.
Aceast proprietate este posibil datorit faptului c n timpul desfurrii procesului de difereniere, se
desprinde un grup de celule care nu continu maturarea i multiplicarea spre celule efectoare, ci rmn ntr-o
etap timpurie de evoluie (n faza G1 a ciclului mitotic). Rolul lor este acela de a pstra amintirea Ag, chiar
dup totala sa eliminare, de aceea poart numele de celule cu memorie. Ele exprim pe suprafa receptori
diferii de cei ai limfocitelor naive sau ai celor recent activate, au un numr sporit de molecule de adeziune,
ceea ce le favorizeaz migrarea la locul unde se afl Ag. Aceste limfocite B cu memorie poart pe suprafa lor
receptori, n special de tip IgG cu mare afinitate pentru Ag. O nou stimulare antigenic produce proliferarea i
diferenierea n plasmocite a unora dintre celulele B cu memorie. Ac specifici apar mai precoce, au o mai mare
afinitate pt. Ag, nivelul lor seric crete mai rapid, iar secreia este mai prelungit. Aparin clasei IgG. Acest
rspuns imun presupune cooperarea intercelular ntre limfocitele T i B, fr ajutorul altor celule.
Aa cum s-a vzut, RIU parcurge 2 secvene n sens contrar i cu funcii diferite:
1. secvena activatoare (efectoare) = totalitatea aciunilor de cooperare celular exercitate dinspre APC
ctre LB, activarea LB, transformare lor n plasmocite i sinteza de Ig
2. secvena inhibitoare (de retrocontrol) = totalitatea fenomenelor de cooperare celular exercitate n
sens invers, ctre APC, avnd rolul de a limita intensitatea RIU la un minim necesar unei aprri imunologice
eficiente i evitarea proliferrii necontrolate a clonelor Ag specifice, cu sintez excesiv de Ac.
n mod normal exist un echilibru dinamic foarte fin ntre cele 2 secvene, numit homeostazia RIU.
Majoritatea Ag naturale, n special proteinele, necesit intervenia limfocitelor T pentru a determina un
rspuns imun umoral, de aceea se numesc Ag timodependente. Exist i Ag timoindependente, Ag care nu
necesit intervenia limfocitelor Th. n aceast categorie se nscriu Ag care posed epitopi repetitivi i se
fixeaz direct pe receptorii celulari, cum ar fi polizaharide bacteriene, dextranul, aminoacizi levogiri. Astfel de
Ag sunt nglobate prin endocitoz n celulele parenchimaotase ale unor organe (mai ales ficatul)unde persist
mult timp i de unde sunt eliberai continuu n cantiti mici. Aceste substane avnd determinani antigenici
dispui repetitiv i liniar se fixeaz rapid i ferm pe receptorii celulari. n acest tip de proces nu se selecteaz
celule cu memorie, nu exist rspuns imun secundar, secreia este exclusiv de tip IgM, i dureaz luni de zile.
Acest efect prelungit se explic i prin faptul c odat format complexul Ag-Ac este fagocitat i digerat.

Celulele fagocitare nu pot digera dect Ac, elibernd Ag odat cu moartea celulei. Ag se va reinsera ntr-un
nou ciclu.
Dup sinteza Ig, acestea se cupleaz cu Ag formnd complexele imune.
n cazul n care Ag este solubil, molecular, se formeaz complexe imune circulante care sunt epurate de
sistemul monocit/macrofag.
n cazul n care Ag face parte dintr-o membran celular, Ac se fixeax pe celul. Cuplarea ulterioar a
complementului duce la liza celulei sau la eliminarea celulei prin fagocitoz de ctre sistemul mononuclear-
fagocitic.
Epurarea complexelor imune este influenat de mai muli factori:
1. dimensiunea complexului - cele mari sunt rapid epurate de SRH, cele mici, precipit puin i nu produc
leziuni tisulare. Cele de dimensiuni medii scap epurrii, persist n circulaie i produc leziuni tisulare.
Mrimea CI este, la rndul ei determinat de raportul Ag/Ac, Gm, afinitatea pentru Ag. Cnd Ag sunt
monovalente, CI sunt mici i nu se formeaz precipitat. Ac multivaleni ca IgM formeaz CI mari. Cele care
fixeaz complementul sunt de asemenea mai mari. Dac n ser exist FR, acetia se pot fixa de Ig, crete
dimensiunea CI i le pot transforma din CI solubile n insolubile. Dac Ig au o mare afinitate pentru Ag, CI
sunt mai stabile i i pot amplifica mrimea prin adiie de complement sau FR.
2. raportul Ag/Ac - aceste lucruri sunt observate n vitro cu ajutorul unei curbe a precipitrii. Zona iniial
conine puin Ac i mult Ag. CI sunt mici i se formeaz puin precipitat. Adaosul progresiv de Ag face ca
mai multe molecule de Ac s fie angajate n reacie. CI sunt mai mari, cantitatea de precipitat crescnd
progresiv pe msur ce se adaug Ag. La un moment dat sunt interesate toate moleculele de Ag i Ac.
Atunci se formeaz o reea insolubil, cu maximum de precipitat, numit zon de echivalen. Un aport
suplimentar de Ag duce la micorarea CI i la reducerea reelei. Cantitatea de precipitat scade, pentru ca n
zona excesului de Ag, complexele s se redizolve i precipitatul aproape s dispar.
3. prezena pe suprafaa PMN i macrofagelor a receptorilor Fc - cu ajutorul acestora, CI sunt recunoscute i
fagocitate rapid. Cuplarea complementului pe receptorii si specifici de pe aceste celule este o modalitate
suplimentar de fixare. Cu ct CI sunt mai mari prin cuplare cu complementul sau cu FR, cu att sunt mai
aderente de celulele amintite i sunt mai repede epurate din circulaie.
4. funcia SRE - aa cum am menionat pe celulele acestui sistem exist receptori pentru Fc. Defecte calitative
sau cantitative ale acestor receptori duc la persistena circulatorie a CI.
5. rolul hematiilor - transportul CI care au fixat complementul este asigurat de hematii, care au receptori
pentru C3b. Detaarea CI are loc n special n ficat i splin. Dac numrul acestor receptori scade,
capacitatea de transport i implicit de eliminare scade.
6. factori reologice - CI persistente n circulaie se pot depune n peretele vascular n zonele de turbulen
(bifurcaii arteriale, angulaii), n locurile unde permeabilitatea vascular este crescut (datorit eliberrii
de amine vasoactive), sau dac Ag loc este cationic, n membrane bazale anionice, cum este membrana
bazal glomerular. Tot n acest loc se depun i CI mari, dac persist n circulaie.

RSPUNSUL IMUN CELULAR

Rspunsul imun celular este implicat n:

eliminarea celulelor infectate cu microorganisme cu habitat intracelular (virui, micobacterii, etc.)
aprarea antitumoral
rejecia grefelor.
n funcie de natura receptoruli implicat n recunoaterea Ag expus pe suprafaa celulei int, se pot
distinge 2 categorii mari de celule implicate n acest tip de rspuns imun: limfocitele Tc i celulele citotoxice
MHC-nespecifice (NK i K). Ag care declaneaz acest rspuns imun sunt timodependente.
Desfurarea rspunsului imun celular este complex i poate fi n sens dublu, celulele participante
nfluenndu-se reciproc i realiznd o bun cooperare celular.
1. Ag sunt expuse pe suprafaa celulelor int. Ele pot fi recunoscute de limfocitele Tc CD8+, dar acest
lucru nu este suficient pentru a determina activarea acestora. Pentru a putea induce activarea limfocitelor Tc
(CD8+) Ag trebuie s fie prezentat n asociere cu molecule MHC I. La acest proces contribuie i moleculele de
adeziune (CD8, CD2, LFA-1 de pe limfocit, MHC I, LFA-3, ICAM-1 de pe celula int).
2. O parte din Ag este preluat de macrofag sau celulele dendritice, care joac, ca i n cazul rspunsului
imun umoral, n aceast etap, rol de CPA.
3. Ag este apoi prezenta limfocitelor Th, dup ce este asociat moleculelor MHC II. Observm c n acest
caz fenomenul restrictiei MHC apare la 2 nivele, fiind numit fenomenul dublei recunoateri.
4. Limfocitele Th elibereaz IL-2 care activeaz intens limfocitele Tc.
5. Limfocitele Tc activate recunosc epitopul legat de MHC I de pe suprafaa celulelor int, elibereaz
citotoxine care n final conduc la distrugerea celulei. Apoi limfocitul Tc se desprinde de pe celula int i trece
la o nou celul. Se consider c un limfocit poate produce liza unui numr de circa 20 de celule int.
6. Tot limfocitele Th elibereaz INF- care are urmtoarele efecte:
stimuleaz fagocitoza
stimuleaz expresia moleculelor de adeziune, care permite un contact mai bun ntre celulele efectoare i
cu celula int
stimuleaz expresia moleculelor MHC II i a receptorilor Fc favoriznd astfel prelucrarea i prezentarea Ag
stimuleaz eliberarea de IL-1
n concluzie, comut funcia macrofagului din APC n celul efectoare, care ajut la distrugerea celulei
int.
Dup aproximativ 5 zile de la primul contact cu Ag apar n snge celulele T cu memorie care sunt
supuse unui proces de recirculaie continu. Ele nsmneaz continuu esutul limfatic, conferindu-i memorie
imun specific. Un nou contact cu Ag induce proliferarea i diferenierea celulelor cu memorie spre celule
efectoare, producnd un rspuns imun n cteva ore.
Un tip particular de citotoxicitate, care nu impune restricie MHC (este MHC-nespecific) este cea
legat de celulele NK. Aceste celule au pe suprafaa lorl, ca i PMN i macrofagele, FcRIII (CD16). Moleculele
de Ig care sunt intermediari n acest tip de reacie sunt IgG1 i IgG3. Celula int este acoperit de aceti Ac.
Reacia are loc fr participarea complementului.

Att limfocitele Tc ct i celulele NK, K realizeaz o citotoxicitate extracelular, liza celular efectundu-
se nu prin fagocitoz ci prin intermediul unor mediatori eliberai de aceste celule.

REACIILE IMUNE

n unele situaii ns, rspunsul imun este inadecvat, exagerat, pierzndu-i rolul protectiv i devenind
nociv pentru organismul gazd. Ansamblul fenomenolor rezultate din perturbarea proceselor imune, cu
apariia unui rspuns imun capabil s produc leziuni organismului gazd, poart denumirea de reacie imun.
Pentru realizarea reaciei imune, organismul face apel la o serie de factori nespecifici celulari i/sau serici.
Aciunea lor este complex i intricat, ei contribuind major la dezvoltarea inflamaiei locale, urmarea reaciei
imune.
Reaciile imune, prin caracterul lor sistemic, pot determina leziuni la nivelul tuturor aparatelor i
sistemelor organismului, iar cnd reacia este foarte intens poate produce chiar moartea individului.
~n funcie de mecanismul lor de producere, reaciile imune au fost mprite de Gell i Coombs n patru
tipuri principale:
- tipul I sau reacia anafilactic - contactul Ag-Ac este urmat de eliberarea de substane biologic active
ce acioneaz predominent pe muchuil neted i vase
- tipul II sau reacia citotoxic - Ac lezeac direct celula alterndu-i structura sau funcia i
predispunnd-o la liz sau fagocitoz
- tipul III sau reacia prin complexe imune - depunerea tisular a CI i fixarea complementului
determin atragerea PMN i declanarea procesului inflamator
- tipul IV sau hipersensibilitatea tardiv - apare prin exagerarea rspunsului imun celular.
Roitt descrie i tipul V de reacie imun, asemntor cu tipul II, dar n care Ac fixai pe celul nu o
distrug ci i modific numai funcia.

1. REACIA ANAFILACTIC (tipul I)

Reacia imun de tipul I este numit reacie anafilactic sau de hipersensibilitate imediat.
Ag care induc aceast reacie se numesc alergene i pot fi: proteine heterologe (hormoni, enzime,
veninul unor insecte), polen, produse de la animale (pene, peri, descuamri tegumentare, praful de cas,
alergene alimentare, ageni terapeutici, etc. Marea majoritate a indivizilor nu reacioneaz la aceste Ag.

Aceast reacie imun este determinat de o hiperproducie de IgE condiionat genetic. Exist o predispoziie
genetic la dezvoltarea unei astfel de reacii, care a fost numit atopie.
Ig implicate n acest tip de reacie sunt n principal de tip IgE i se numesc reagine. Ele sunt secretate
de plasmocitele situate ndeosebi la nivelul mucoasei tractului respirator i digestiv. Reglarea produciei de IgE
este sub controlul limfocitelor Th. Th2 produc IL-4 care comut producia de IgM spre IgE, iar Th1 produc IFN-
care blocheaz efectul IL-4.
Odat formate i secretate, IgE se fixeaz numai pe membrana mastocitelor i bazofilelor (Ac citofili).
Spre deosebire de situaiile obinuite cnd Ac se fixeaz prin extremitatea lor Fab, n cazul IgE, moleculele se
ataeaz de membrana mastocitului i bazofilului prin captul Fc, lsnd liber extremitatea Fab pentru a se
putea cupla cu Ag specific.
O nou expunere la Ag va determina unirea acestuia cu Ac si specifici existeni pe suprafaa
mastocitelor i bazofilelor, cu formarea de complexe imune. Prin aceast unire se produce stimularea celor 2
tipuri de celule care vor descrca n mediu multitudinea de mediatori chimici pe care le conin.
Formarea CI pe suprafaa mastocitelor sau bazofilelor declaneaz 2 procese paralele: degranularea
celular cu eliberarea mediatorilor preformai (histamina, serotonina, factori chemotactici pentru neutrofile i
eozinofile, proteaze) i sinteza de novo a unor mediatori, n membrana celular pornind de la acidul arahidonic
(PG, LT i tromboxani).
Teritoriile int n reacia anafilactic sunt esuturile care conin cea mai mare cantitate de mastocite:
pulmonul, endoteliul vascular, tractul gastro-intestinal. Manifestrile clinice variaz n funcie de localizare,
circumstanele de apariie, intensitate. Histamina determin contracia musculaturii netede (bronhospasm),
creterea permeabilitii capilare, creterea secreiei nazale. Serotonina este implicat n contracia
musculaturii netede.

2. REACIA CITOTOXIC (tipul II)

Substratul acestui tip de reacie este reprezentat de citotoxicitatea produs prin Ac.
Acest tip de reacie poate fi iniiat printr-unul dintre urmtoarele mecanisme:
- fixarea Ac se face pe un determinant antigenic ncorporat n structura membranei
- Ag sau o hapten se leag de membrana celular, iar Ac specific se leag ulterior de acesta.
Indiferent de modalitatea de iniiere, liza tisular se realizeaz apoi printr-una din urmtoarele ci:
activarea sistemului C, fagocitarea celulelor int cu sau fr activarea C, liza celulelor prin fenomenul de
citotoxicitate mediat celular anticorp-dependent.

Ac implicai n sunt de tip IgG sau IgM. Celulele int cel mai frecvent interesate sunt elementele
figurate ale sngelui, celulele endoteliului vascular, iar dintre organe, rinichiul.
n funcie de celula int, acest tip de reacie poate mbrca multe aspecte clinice: hematologice
(accidente hemolitice posttransfuzionale, incompatibilitate materno-fetal, anemii hemolitice induse de
medicamente sau aprute n cadrul unor boli ca LLC, LES), granulocitopenia din LES, purpura trombopenic
idiopatic (cnd apar Ac antitrombocitari), sindromul Goodpasture, miastenia gravis etc.
Exist unele situaii n care cuplarea unui Ag specific pe oc celul, nu determin liza acesteia, ci produce
fie deprimarea, fie stimularea funciei celulei respective. Aceast situaie este privit de unii cercettori (Roitt)
ca un tip independent de reacie imun, denumit tipul V, n timp ce alii o consoder doar o variant a tipului
II.

3. REACIA PRIN COMPLEXE IMUNE (tipul IV)

Acest tip de reacie imun este determinat de prezena complexelor imune Ag-Ac la nivelul esuturilor.
CI se pot forma local sau pot fi depuse n esuturi din torentul sanguin, ca urmare a lipsei lor de eliminare din
circulaie de ctre sistemul monocit-macrofag. n ambele cazuri (de formare local sau de depunere tisular)
prezena lor declaneaz evenimente inflamatorii a cror succesiune este identic.
Ag implicate n acest proces pot fi extrem de variate: endogene (structuri proprii devenite non-self: Ag
nucleare, Ag tubulare renale) sau endogene (reprezentate de un numr mare de structuri microbiene sau
virale). Ac implicai trebuie s aib proprietatea de a activa complementul i vor aparine deci claselor IgG i
IgM.
Mecanismul este iniiat de formarea complexelor imune Ag-Ac solubile. Pentru ca acestea s apar
este nevoie de un uor exces de Ag. CI mari, care au fixat i fracii de c sunt cu uurin epurate. CI mici sunt
cele care sunt implicate n producerea leziunilor, deoarece scap mecanismelor de epurare. CI penetreaz
ulterior endoteliul vascular i se depun la nivelul membranei bazale vasculare. Din activarea C (produs n
urma formrii CI), rezult fragmentele C3a, C4a i C5a, care sunt, aa cum am artat anterior, anafilatoxine. Ele
au capacitatea de a crete permebilitatea endoteliului vascular. C5a este de asemenea un factor chemotactic
pentru neutrofile, favoriznd migrarea acestora la locul unde s-au depus CI. Neutrofilele infiltreaz zona i
elibereaz enzimele lizozomale pe care le conin ducnd astfel la distrugerea structurii i compromiterea
funciei esutului respectiv. La proces mai contribuie i trombocitele care interacioneaz cu CI prin receptorul
Fc de pe membrana lor. ~n urma acestei interaciuni, trombocitele sufer un proces de agregare, cu formarea
de microtrombi, ceea ce compromite suplimentar irigaia esutului respectiv. Tot trombocitele alturi de
bazofile, elibereaz amine vaso-active (care cresc permeabilitatea vascular) i un factor de cretere celular.
D.p.d.v. clinic, acest tip de reacie poate mbrca multe aspecte: fenomenul Arthus, boala serului,
vasculite, glomerulonefrita acut poststreptococic i mai ales LES, PR.


4. REACIA MEDIAT CELULAR (tipul IV)

Reacia imun mediat celular se refer la o stare de imunizare accentuat, determinat de Ag care
antreneaz un rspuns imun celular.
Rolul central n acest tip de reacie este indeplinit de limfocitul T sensibilizat i de citokinele elaborate
de acesta n urma interaciunii cu Ag. Nici Ac i nici C nu sunt implicai.
Reacia mediat celular cuprinde 2 aspecte: hipersensibilitatea tardiv i rspunsul celular citotoxic,
fiecare realizat de un alt tip de limfocite T sensibilizate. Amndou sunt reacii tardive, manifestrile clinice
aprnd la cteva zile de la expunerea la Ag.
a. Hipersensibilitatea ntrziat
Limfocitele efectoare responsabile de acest proces sunt notate Tdth (delayed-type hypersensitivity) i
acioneaz prin intermediul altor celule (de ex. macrofage) pe care le stimuleaz i care sunt cele care produc
direct leziunile tisulare. Tdth au pe suprafa determinani antigenici de tip CD4+.
Procesul presupune iniierea procesului impune, preluarea i prelucrarea Ag i apoi prezentarea
acestuia limfocitelor Tdth, care fiind CD4+ interacioneaz doar cu celule ce au pe suprafaa lor molecule MHC
II. Celulele care prezint Ag n acest caz limfocitelor Tdth sunt celulele dendritice, care au pe suprafa
molecule MHC II.
Dup aceast interaciune, limfocitele Tdth CD4+ secret limfokine: IFN-, MIF (Macrophage-Inhibiting
Factor, care inhib migrarea Mf), MAF (Macrophage-Activating Factor, care amplific activitatea
antibacterian i citolitic a Mf), MCF (Macrophage Chemotactic Factor, care stimuleaz infiltrarea cu
macrofage), IL-2, TNF-| (limfotoxina). Dintre acestea, cel mai important este IFN- care ndeplinete
numeroase funcii:
inhib replicarea viral
crete expresia moleculelor MHC de pe suprafaa celulelor, inclusiv a macrofagelor, favoriznd prezentarea
Ag limfocitelor Tdth
crete expresia receptorilor Fc de pe macrofage
stimuleaz activitatea fagocitar a macrofagelor
favorizeaz activitatea celulelor NK
Macrofagele activate secret la rndul lor, o multitudine de produi biologic activi: citokine (IL-1, IL-6,
TNF-o), proteaze, enzime lizozomale. IL-1 i IL6 activeaz i stimuleaz alte limfocite i macrofage, induc febr,
cresc concentraia seric a reactanilor de faz acut i a unor fraciuni de complement, contribuind la
inflamaia acut. ~n plus, IL-1 crete adezivitatea celular.
Limfocitele circulante sunt de asemenea atrase i activate de ctre limfokinele elaborate de limfocitele
Tdth n urma interaciunii cu Ag. ~n macrofagele activate crete producia de metabolii activi ai O i de
enzime lizozomale, fapt ce sporete capacitatea antibacterian a celulei, dar contribuie la inflamaie. ~n timpul

procesului de activare celular se observ o stimulare reciproc ntre macrofag i limfocite, realizat prin
intermediul citokinelor. Toate acestea contribuie la leziunile tisulare.
Exemple clinice clasice ale hipersensibilitii tardive sunt: dermatita de contact, reacia la tuberculin,
reacia granulomatoas.
b. Citotoxicitatea mediat celular
Este realizat prin intermediul limfocitelor Tc. Acestea i excercit aciunea n 2 moduri: prin secreie
de IFN- i prin distrugerea direct a celulelor int, reprezentate de celulele infectate viral, celule tumorale,
grefe, celule pe care le identific antigenic. Ele elibereaz citotoxine din granulele citoplasmatice, proteaze,
limfotixin. Ele se deosebesc de cele implicate n hipersensibilitatea tardiv pentru c n acest din urm caz,
limfocitele Tdth acioneaz indirect, prin celule intermediare pe care le recruteaz i activeaz. Se consider c
n mecanismul de aciune al limfocitelor Tc intervine i elaborarea sau activarea unei endonucleaze care
fragmenteaz DNA-ul celulei int.
Un caz de citotoxicitate este cel al celulelor K, care avnd receptori Fc pentru Ig, realizeaz acest lucru
prin intermediul Ac. Citotoxicitarea dezvoltat de celulele NK este pur celular, fr intervenia Ac.
Reacia imun de tip IV are multe corespondente clinice: citoliza din hepatita epidemic, expulzia de
gref.





CURS 1
GENERALITI DESPRE RSPUNSUL IMUN


Pentru asigurarea supravieuirii principalele probleme ale unui organism viu sunt :
- Asigurarea hranei, oxigenului i apei
- Eliminarea produilor de catabolism
- Meninerea homeostaziei mediului intern
- Aprarea contra agresiunilor interne i externe

Aprarea este :

- Nespecific : barierele anatomice (tegumente, mucoase), secretiile exocrine (lacrimi, saliva, suc
gastric), inflamaia, reacia febril, hemostaza, SRIS (RSPA)
- Specific = rspunsul imun

Imunitatea furnizeaz capacitatea de aprare a organismului fa de :
- Agresorii externi de natur biologic : bacterii, virusuri, parazii, fungi, celule strine
(transplant)
- Propriile molecule sau celule modificate (ex. celule neoplazice)

Sistemul imun este un complex de celule, molecule (Ac) i structuri care se afl distribuite :
- n organe anatomice : splin, timus, gg limfatici
- Difuz n tot organismul :
- la porile de intrare a antigenelor in tegumente i mucoase (bucal, respiratorie,
digestiv, genital)
- n interstiiul organelor interne : ficat, plmni, rinichi
- n sistemul circulator : snge i limf
- n cavitile seroase : pleur, peritoneu, pericard
- n SNC

Imunologia studiaz :
- Structurile moleculare i celulare implicate n aprarea specific
- Mecanismele de aciune ale sistemului imun
- Mecanismele de reglare ale sistemului imun
- Patologia sistemului imun

Problema fundamental a sistemului imun este recunoaterea structurilor self (proprii) i
non-self. Structura non-self este orice molecul sau celul care este recunoscut de sistemul imun
c strin i este eliminat prin mijloacele aprrii imune
Alterrile mecanismelor de recunoatere duc la patologii diverse :
- Prin defect nnscut sau dobndit sistemul imun nu recunoate un agresor ca non-self, ceea ce
duce la infecii foarte grave (ex. SIDA)
- Celulele neoplazice pot s scape controlului imun, producnd cancerul

- Sistemul imun recunoate ca non-self celule sau molecule self normale i le distruge, producnd
bolile autoimune

Mecanismele aprrii imune la mamifere se grupeaz n :
- rspunsul imun umoral (RIU)
- rspunsul imun celular (RIC)

Prezentm separat cele dou tipuri de RI din motive didactice. n realitate RIU i RIC sunt
intricate. n ambele tipuri de RI locul central l au limfocitele :
- LB n RIU
- LTC n RIC.

Limfocitele fac recunoatere specific a Ag pentru c au pe suprafa receptori cu structuri
complexe, asemntori cu Ig (Ac) care recunosc specific Ag. Un tip de receptori recunoate un
singur Ag.
Organismul vine n contact n timpul vieii cu milioane de Ag diferite, aa c trebuie s avem
n organism limfocite care s aib pe suprafa o varietate la fel de mare de receptori. Practic n
organism exist o infinitate de subpopulaii limfocitare (numrul estimat este de zeci de milioane)
care difer prin structura receptorilor de recunoatere a Ag.
Diferenierea clonelor de limfocite se face prin reorganizarea (translocatia) aleatorie a
genelor care codific structura proteic a receptorilor pentru Ag.

O subpopulaie de limfocite are pe suprafa acelai tip de receptor pentru Ag (BCR sau TCR)
i deci recunoate acelai Ag. Aceast subpopulaie sau familie rezult dintr-o singur celul
mam i se numete clon de limfocite. O clon de limfocite cuprinde un numr foarte mare de
limfocite identice.
Celulele mam (precursorii LB i LT) se formeaz n mduva hematogen. Ele sunt imature.
LB se matureaz tot n mduv, pe cnd LT se matureaz n timus.
n mod normal clonele de LB i LT care ataca structurile self sunt distruse. Dac aceste clone
rmn active ele dau patologia autoimun.


RIU

- RIU se produce prin intermediul imunoglobulinelor (Ac) care recunosc Ag.
- Ac sunt glicoproteine specializate n recunoaterea moleculelor non-self.
- Moleculele de recunoatere a Ag se gsesc sub dou forme : circulante (Ac) sau fixate pe
suprafaa LB (BCR)
- Ac sunt produi de LB stimulate, care se transform n plasmocite.
- O clon de plasmocite produce un singur tip de Ac.
- Dup contactul cu Ag crete titrul Ac specifici pentru Ag declanator.
- n organism se formeaz complexe Ag-Ac (complexe imune) care ajut la eliminarea Ag prin
fagocitarea lui (n special de MF i de PMN) sau prin declanarea cascadei complementului.
- RIU este ndreptat n principal contra bacteriilor i toxinelor bacteriene.

RIC

- Celulele efectoare sunt n principal LTC (citotoxice).
- LTC au pe suprafa receptori specifici pentru Ag numii TCR.
- LTC recunosc celulele non-self :
- celule ale organismului (singenice) care au devenit non-self : canceroase sau infectate
cu virusuri / bacterii intracelulare
- celule strine (alogenice) = aduse prin transplant / gref
- LTC ader de celulele antigenice prin receptori i secret substane care distrug aceste celule.
- Tot n cadrul RIC acioneaz o clas de limfocite non-B non-T numite NK (natural killer) care
recunosc nespecific i distrug celulele neoplazice.

Celulele fagocitare

Celulele fagocitare (n special MF, mai puin PMN) au roluri importante n RI
- prezint Ag spre LB i LT = au funcie de APC (antigen presenting cells)
- secret factori solubili (interleukine - IL) care stimuleaz LB i LT
- fagociteaz complexele imune
- au efect citotoxic direct (de distrugere) fa de celule acoperite cu Ac i fa de celule
neoplazice


Dinamica RI

Intensitatea RIU se evalueaz mai uor, prin dozarea Ac specifici. Evaluarea RIC se face mai
greu.
Intensitatea RI depinde de faptul dac organismul este la primul contact cu Ag respectiv sau
a mai venit n contact cu acesta n trecut.
- RI primar este rspunsul organismului la primul contact cu un Ag. Poate fi RIU sau RIC, n
funcie de natura Ag. El are o anumit laten, o intensitate sczut i dureaz puin.
- RI secundar apare la al 2-lea... - al n contact cu acelai Ag. RI secundar apare mult mai rapid, are
intensitate mare i dureaz mult. Organismul are memorie imunologic. Memoria imunologic
este un element fundamental al imunitii i apare de exemplu dup o boal infecioas vindecat
sau dup vaccinare.
Intensitatea RI este variabil de la un individ la altul i la acelai organism n funcie de Ag .
Variabilitatea mare a RI se explic prin :
- Variabilitatea structural foarte mare a Ag
- Cile diferite de intrare n organism a Ag
- Cantitatea de Ag
- Caracterele genetice ale sistemului imun pentru fiecare organism in parte

Caracteristicile fundamentale ale RI sunt :
- Capacitatea de discriminare ntre self i non-self
- Capacitatea de discriminare ntre Ag diferite
- Memoria imunologic

Hematopoieza liniei limfoide

Pentru hematopoieza LB, micromediul specific este mduva hematogen. Pentru LT, acest
rol este jucat de timus.
IL au rol de stimuli inductori pentru difereniere i maturare. IL sunt produse de o mare
varietate de celule din micromediul hematopoietic : MF, LT, mastocite, celulele endoteliale,
fibroblati, osteoblati.


IL4,IL7 IL2,IL3,IL4,IL5,IL6
PRE-B LB PLASMOCIT


CFC-LB+LT
cel.stem limfoid IL1,IL2,IL4,IL6 LT CD4
+
IL7 IL2,IL4,IL7
PRO-T PRE-T LT
IL5,IL6 LT CD8
+

?
NK


n mduv i n timus, care reprezint organele limfoide primare sau centrale, se produce
diferenierea de la celulele precursoare pn la stadiul de limfocit naiv, numit i virgin sau de
repaus. Fenomenul este antigen-independent. Limfocitul naiv este imunocompetent, dar nu a fost
stimulat niciodata de Ag.
Limfocitele sunt eliberate n circulaie i migreaz n organele limfoide secundare sau
periferice : ganglionii limfatici, splina, amigdalele, esutul limfoid asociat mucoaselor (MALT). Acolo
se produce stimularea antigenic. Limfocitele se activeaz, se produce expansiunea clonal i
limfocitele devin funcionale.
La adult, n orice moment dat, majoritatea limfocitelor (aproximativ 98%) se gsesc n
organele limfoide i n esuturi, n timp ce numai 2% se afl n circulaia sanguin.

Limfocitele T


Celulele precursoare ale LT migreaz din mduva hematogen spre corticala timusului.
Procesul ncepe n viaa intrauterin i continu la adult.
n diferenierea i maturarea LT se disting dou etape, care se produc succesiv n timus i n
organele limfoide periferice.

n timus LT se difereniaza n LT CD4
+
i LT CD8
+
. Tot acolo sunt distruse clonele de LT
autoreactive care pot produce fenomene autoimune:
- Prin selecia pozitiv, precursorii de LT ai cror TCR reacioneaz cu moleculele MHC self sunt
distruse prin apoptoz.
- Prin selecia negativ, precursorii de LT ai cror TCR recunosc Ag self sunt de asemenea
distruse.
LT rezultate sunt imunocompetente, adic au dou caractere :
- LT recunosc Ag non-self numai dac acestea le sunt prezentate n complex cu moleculele MHC (I
sau II).
- LT au toleran imun fa de Ag proprii.

LT care ies din timus n snge se numesc LT mature de repaus, naive sau virgine. LT virgine
ajung n zonele timodependente din organele limfoide periferice:
- paracorticala ganglionilor limfatici
- PALS intern din pulpa alb a splinei.
n organele limfoide periferice se produce stimularea antigenic a LT. LT activate au aspectul
de limfoblast sau imunoblast T. Imunoblatii T prolifereaz intens pe parcursul a 5-10 cicluri
mitotice. Celulele care rezult sunt LT mici, complet maturate. Ele pot lua dou direcii evolutive :
- Majoritatea alctuiesc compartimentul LT efectoare, cu funcii citotoxice.
- Altele devin LT de memorie imun. Memoria imun reprezint rspunsul imun foarte rapid i
intens al unor limfocite la un nou contact cu agenii patogeni ntlnii anterior. LT de memorie
patruleaz permanent n ntreg organismul.







Limfocitele B

Precursorii LB provin din celula stem limfoid. n cursul proliferrii lor se rearanjeaz prin
translocaie aleatorie genele care codific regiunile variabile ale lanurilor BCR.
Urmtoarea etap este cea de LB virgin sau de repaus. LB virgine nu se mai divid. n aceast
etap LB se matureaz n mduv. Pe suprafata lor apar receptorii BCR.
LB virgine trec apoi din circulaia sanguin n ariile bursodependente din organele limfoide
periferice :
- corticala extern a ganglionilor limfatici
- PALS extern din pulpa alb a splinei

n organele limfoide periferice LB vin n contact cu Ag specifice si se matureaza. Aceast
maturare cuprinde trei procese :
- Recunoaterea antigenului
- Activarea LB
- Diferenierea terminal
Recunoaterea antigenului se face prin receptorii BCR. LB pot s recunoasc antigene sub
form nativ sau antigene prezentate de celulele APC, n complex cu moleculele MHC II.
Activarea este un fenomen complex declanat prin legarea antigenelor de BCR. APC
elibereaz IL1 care stimuleaz LTH, care la rndul lor produc factorii de proliferare IL2 i IL4. LB
intr n ciclul de diviziune i produc 5-15 generaii de LB fiice. LB activate se difereniaz n dou
tipuri de celule : LB efectorii (plasmocitele) i LB de memorie.
- Plasmocitele sunt LB efectorii. Ele au via scurt i sintetizeaz cantiti mari de anticorpi
specifici.
- LB de memorie recircul prin snge i esuturi. La un nou contact cu acelai antigen ele produc
un RIU extrem de rapid i intens, cu IgG. Acesta este un RIU secundar. Populaia de LB de
memorie pentru un anumit antigen este activ pe perioade lungi, uneori toat viaa. Nu se tie
dac LB de memorie au via lung sau dac ele se produc printr-un proces de recrutare
celular permanent.


Celulele NK

Limfocitele din populaia NK nu au antigene de suprafa. Nu li se cunoate cu precizie
originea. Se presupun dou variante :
- NK constituie o fraciune imatur a LT.
- NK provin direct din progenitorul limfocitar comun, celula CFC-LB+LT.


ANTIGENUL

Orice RI apare dup contactul organismului cu un Ag. Ag este o substan recunoscut ca
non-self de ctre sistemul imun al organismului. Ag este orice substan de origine endogen sau
exogen care poate s declanseze un RI.
- Ag solubile sunt molecule recunoscute c non-self. De obicei Ag solubile sunt proteine cu
greutate molecular mare, peste 10 kDa. Uneori Ag solubile sunt polizaharide, acizi nucleici,
glicolipide.
- Ag corpusculate sunt structuri non-self mai complexe : virusuri, bacterii, protozoare, celule
strine, celule infectate, celule neoplazice. De fapt Ag corpusculate sunt formate dintr-un
numr foarte mare de molecule antigenice. Dintre ele, cele mai importante pentru
recunoaterea i distrugerea Ag corpusculat sunt Ag de suprafa.

RI nu apare obligatoriu dup un contact cu un Ag :
- Ag care induc RI se numesc imunogene
- Ag care inhib RI se numesc tolerogene. Exist fenomenul de toleran imunologic.

Originea Ag

Majoritatea Ag sunt exogene : bacterii, parazii, unele substane chimice industriale,
alergenele (ex. polen, praf din cas, alergene alimentare).
Exist i Ag endogene :
- autoAg sunt Ag proprii care n mod normal sunt sechestrate (ascunse, izolate) prin bariere
anatomice sau funcionale. n mod normal autoAg nu vin n contact cu sistemul imun i nu

produc RI. n conditii patologice se produce desechestrarea Ag, autoAg vin n contact cu
sistemul imun i se produce un RI fa de structurile self. Aceste RI autoreactive produc boli
autoimune.
- neoAg sunt produse de celulele neoplazice (canceroase). Ele au rol n aprarea antitumoral.
Orice organism normal produce un numr mic de celule canceroase, care sunt distruse de
sistemul imun. Aceast aprare este eficient pn la o limit, dup care apar tumorile.
- Ag virale : se consider c Ag virale sunt endogene pentru c virusurile includ genomul n
genomul gazdei. Celula gazd sintetizeaz proteinele virale pe aceleai ci metabolice ca
proteinele proprii.

Proprietile de baz ale Ag

- imunogenitatea = proprietatea Ag de a declana RIU sau RIC
- specificitatea sau antigenitatea = proprietatea Ag de a se combina specific cu moleculele de
recunoatere Ac i receptorii de membran
Imunogenitatea
Imunogenitatea este proprietatea unui Ag de a declana RI. Declanarea RI se face n 3 etape
succesive :
- Selecia clonal = selecia dintre toate clonele limfocitare numai a limfocitelor Ag-specifice, care
exprim pe membrana lor receptori care recunosc Ag. Dup ce intr n organism, Ag este
transportat la organele limfoide periferice : gg limfatici i splin. Acolo Ag este prezentat spre
un numr foarte mare de LTH i LB, din clone diferite. Ag este recunoscut doar de limfocitele
Ag-specifice, care au pe suprafa receptorii care se potrivesc cu Ag, pe principiul cheie-broasc.
- Activarea clonal = clona de limfocite se activeaz metabolic.
- Proliferarea sau expansiunea clonei activate = LB se divid prin mitoze, crete foarte mult nr.
limfocitelor identice.

Antigenitatea sau specificitatea
Antigenitatea sau specificitatea este proprietatea Ag de a reaciona specific numai cu
receptorii antigenici fabricai special pentru el.
Receptorii pentru Ag pot fi solubili (Ac) sau membranari (BCR sau TCR).

S-a observat c nu toate Ag au ambele proprieti. Ele pot fi :
- complete = au ambele proprieti
- incomplete = au doar specificitate


Ag complete sau imunogene

Ag complete au imunogenitate i specificitate. Ag complete sunt majoritatea Ag din natur,
n special cele cu structur proteic. Ele declaneaz RI prin mecanisme diferite, cu sau fr
participarea LTH. Din acest punct de vedere Ag complete se mpart n :
- Ag timodependente sunt majoritatea. Ele declaneaz RIU sau RIC prin cooperare celular cu
participarea obligatorie a LTH.
- Ag timoindependente sunt mai rare, n structura unor bacterii (ex flagelina i LPS =
lipopolizaharide bacteriene). Aceste Ag au dimensiuni foarte mari. Nu este nevoie de cooperare
celular cu LT. Ele pot declana numai RIU, prin stimularea direct a LB.

Ag incomplete sau haptenele

Haptenele au numai specificitate. Ele reacioneaz specific cu receptorii Ag-specifici (Ac anti-
hapten), dac acetia exist.
Haptenele nu au imunogenitate din cauz c ele au greutate molecular foarte mic i singure
nu pot declana un RI. Haptenele pot declana RI doar dac se cupleaz cu macromolecule
imunogene numite purttor sau carrier.

Haptenele nu pot s declaneze RI pentru c :
- LB au pe suprafa receptorii BCR asezai difuz, pe toat suprafaa celulei. Aceti receptori sunt
identici, au acelai tip de situs combinativ (de recunoatere a Ag).
- i haptenele sunt recunoscute de receptorii membranari BCR, dar LB nu se activeaz deoarece
stimulii activatori sunt de intensitate slab, ei se produc la mare distan unul de altul, pe toat
suprafaa LB. Stimulii trebuie s se concentreze ca s produc activarea LB.

Ag complete pot realiza concentrarea haptenelor pe o zon mic :
- Ag timoindependente (n special bacteriene) au un carrier cu greutate molecular mare. De el
se leag multe grupri haptenice identice, care pot activa direct LB.

- Ag timodependente au un carrier cu greutate molecular mai mic, de care se leag haptena.
Aceste Ag au nevoie de LTH, care recunosc partea carrier i prezint Ag cu partea haptenic
spre receptorii LB. LTH prezint haptenele concentrat, pe o zon mic de pe suprafaa LB.
De fapt i Ag complete sunt formate din dou componente : hapten + carrier, cu funcii
diferite n RI :
- Ansamblul carrier + hapten d imunogenitatea.
- Haptena d specificitatea Ag. n funcie de hapten se face selecia clonal. Din acest motiv
haptena se mai numete determinant antigenic sau epitop.

Determinanii antigenici i epitopii

Determinanii antigenici sunt fragmentele din molecula de Ag care dau specificitatea. Ag
este o macromolecul cu suprafaa neregulat. O molecul de Ac nu acoper toat suprafaa Ag, ci
doar o mic parte. Cele dou suprafee sunt complementare din punct de vedere al conformaiei
n spaiu i al structurii chimice. Regiunea din Ag care se combin cu Ac (sau cu receptorul de
membran) se numete determinant antigenic sau epitop.

O macromolecul de Ag are mai muli determinani antigenici, care sunt de obicei diferii,
sau mai rar identici (Ag cu structur repetitiv). Numrul de determinani antigenici reprezint
valena Ag. Un Ag polivalent induce sinteza mai multor tipuri de Ac, fiecare specific pentru un
determinant antigenic. De obicei un Ag induce un RI policlonal. Epitopul sau determinantul
antigenic este o regiune din Ag care determin sinteza Ac de un singur tip (monoclonali).

Regiunea din Ac care se combin cu epitopul se numete paratop sau situs combinativ sau
regiune de complementaritate.

Dup structur determinanii antigenici sau epitopii pot fi liniari sau conformaionali.

Determinanii antigenici liniari (secveniali)
- Sunt caracterizai prin structura primar, adic prin succesiunea aminoacizilor n lanul proteic
sau a monozaharidelor n glicoproteine.

- Sunt recunoscuti doar de receptorii TCR de pe suprafaa LT.
- Sunt aezai n interiorul moleculei de Ag. Ei sunt expui la exteriorul moleculei numai dup
procesarea Ag nativ, prin aciunea enzimelor proteolitice ale APC. Pentru recunoaterea
epitopilor liniari de ctre LT este obligatorie prelucrarea i prezentarea lor de ctre APC.

Determinanii antigenici conformaionali (tridimensionali sau spaiali)
- Sunt formai din mai multe lanuri de aminoacizi sau monozaharide situate n regiuni diferite ale
lanului proteic sau glicoproteic, sau chiar pe dou lanuri diferite.
- Lanurile sunt aduse n apropiere prin puni disulfurice sau legturi necovalente, intra- sau
intercatenare. Aceste puni fac bucle n molecula de Ag.
- Sunt recunoscui de receptorii LB (BCR) i de Ac.
- Sunt aezai la suprafaa moleculelor de Ag, de aceea nu este obligatorie procesarea i
prezentarea lor de ctre APC.
- Recunoaterea epitopilor conformaionali se face prin complementaritate, pe principiul cheie-
broasc.

Clasificarea funcional a determinanilor antigenici

Determinanii antigenici efectori
Determinanii efectori stabilesc tipul de RI : RIU sau RIC. Ei sunt de dou tipuri : B i T
- Determinanii de tip B sunt recunoscui de LB i produc RIU.
- Determinanii de tip C sunt recunoscui de LTC i produc RIC.
De obicei n Ag purificate exist determinani de tip B sau C, de aceea un Ag produce numai
RIU sau RIC.

Determinanii antigenici modulatori sau imunoreglatori
Determinanii modulatori stabilesc intensitatea RI : mai puternic sau mai slab. Ei sunt de
dou tipuri : H i S
- Determinanii de tip H sunt recunoscui de LTH care coopereaza mai departe cu LB sau LTC. Ei
stimuleaz RIU sau RIC. Ag care contin determinani de tip H sunt imunogene, adic induc un RI
puternic
- Determinanii de tip S sunt recunoscui de LTS, care inhib RI. Ag care conin predominent
determinani de tip S sunt tolerogene, adic induc un RI slab sau inhib RI.


2. CELULELE AUXILIARE


Celulele auxiliare sunt ansamblul celulelor implicate n rspunsul imun, n afar de limfocite. Celulele auxiliare
reprezint o populaie heterogen i ndeplinesc funcii pe ambele ramuri ale rspunsului imun : aferent i eferent.

Ramura aferent reprezint ansamblul proceselor de transmitere a informaiei care se produc din momentul
apariiei Ag n organism i recunoaterea lui ca non-self, pn la activarea complet a limfocitelor efectoare : LB i LTC.
Pe calea aferent, celulele auxiliare ndeplinesc funcii importante n :
- Captarea i fagocitarea Ag
- Prelucrarea i fragmentarea Ag
- Prezentarea epitopilor pe membran, n complex cu moleculele MHC II
- Secreia de citokine care activeaz limfocitele

Ramura eferent reprezint ansamblul proceselor prin care sunt degradate i eliminate Ag
solubile i corpusculate :
- Captarea i fagocitarea complexelor imune
- Distrugerea celulelor int acoperite de anticorpi
- Degradarea resturilor celulelor distruse
- Secreia de citokine i ali mediatori proflogistici

Celulele auxiliare pot fi :
- Celule cu rol de APC, care se mai numesc i APC profesioniste : macrofagele, celulele dendritice,
LB
- Celule fr rol de APC : PMN circulante (neutrofilele, eozinofilele, bazofilele) i mastocitele
- APC ocazionale, adic celule care n anumite condiii de stimulare pot avea funcie de APC :
neutrofilele, celulele endoteliale, celulele epiteliale

APC sunt singurele celule care vin n contact cu Ag timodependente sub form nativ. APC
prelucreaz aceste antigene i prezint limfocitelor fragmente din ele.


APC au trei funcii : declaneaz, ntrein i particip la reglarea intensitii rspunsului imun.
Pentru ndeplinirea acestor funcii, APC coopereaz cu :
- Limfocitele imunoreglatoare, care controleaza intensitatea rspunsului imun : LTH, LTS, LTCS
- Limfocitele efectorii : LB (implicate n RIU) i LTC (implicate n RIC)

MACROFAGELE

Macrofagele (MF) provin din monocite, care se gsesc n snge, n esuturi i n cavitile
naturale ale organismului. Monocitele se formeaz n mduva hematogen dintr-un precursor
comun cu PMN.
Din punct de vedere funcional monocitele sunt celule imature, n tranzit prin snge de la
locul de origine mduva hematogen, spre esuturi. Ele reprezint ntre 1 i 9% din totalul
leucocitelor sanguine.

Monocitele rmn n circulaie aproximativ 3 zile, dup care sunt activate la contactul cu
anumite substane, ader de endoteliu, trec n interstiiu prin diapedez i se localizeaz n diverse
esuturi i organe. Extravazarea este ireversibil. Raportul estimat dintre MF tisulare i monocitele
sanguine este de 400/1.
Monocitele ader de endoteliu datorit unor molecule de adeziune de pe suprafa.
Aderarea se face numai pe anumite zone ale endoteliului, situate n vecintatea unui focar imun.
Celulele APC din focarul imun, respectiv MF i celulele dendritice, elibereaz o serie de citokine
IL-1, TNF o i IFN care stimuleaz celulele endoteliale din vecintate. Acea zon de endoteliu
modificat se numete PEV (Plane Endotelial Vessel endoteliu vascular plat). Celulele endoteliale
din zona PEV exprim pe suprafa anumii receptori de adezivitate pentru monocite i limfocite :
ICAM, VCAM, adezine. n esuturi monocitele stimulate se deplaseaz sub aciunea unor factori
chemotactici.

Sub aciunea unor citokine produse de limfocite, mai ales IFN i IL-2, monocitele se
matureaz, transformndu-se morfologic i funcional n MF rezidente i apoi n MF activate. MF
activate sunt capabile sa realizeze funcia de APC. MF tisulare au o durat de via de cteva luni.

Transformarea monocitelor n MF presupune schimbri importante :
- Dimensiunea celulelor crete de 5-10 ori, astfel c MF au diametre de 25-50 microni.
- Intracelular crete numrul i dimensiunea mitocondriilor i lizozomilor, iar aparatul Golgi se
dezvolt.
- Celulele devin multinucleate prin fuzionare sau prin endomitoz.
- Citoplasma emite numeroase pseudopode, care dau la microscopul electronic un aspect de
meduz cu prelungiri fine i dantelate.
MF sunt prezente difuz n organism, la nivelul esutului conjunctiv i n apropierea
membranei bazale a vaselor sanguine mici. Ele se afl n numr mare n zonele unde exist un aflux
important de antigene : plmni, ficat, splin i ganglionii limfatici.
Pe lng MF din esuturi exist i MF libere n cavitile seroase : MF peritoneale, pleurale i
sinoviale. n anumite esuturi i organe se gsesc forme particulare de MF, prezentate n tabelul 1.
Monocitele i MF se pot deplasa prin chemotactism, adic migreaz direcionat spre diveri
stimuli chemotactici, prezentai n tabelul 2.

Tabelul 1. Forme particulare de macrofage

esutul Forma particular a MF
- esutul osos
- articulaiile
- alveolele pulmonare
- lobulii hepatici
- SNC
- rinichii
- osteoclastele
- sinoviocitele
- MF alveolare
- celulele Kuppfer
- microglia
- celulele mezangiale

Tabelul 2. Factorii chemotactici pentru monocite i macrofage

- Fragmente i produse bacteriene
- Fraciuni activate ale complementului, mai ales C5a
- Factori chemotactici eliberai de LT la contactul cu Ag
- Factori chemotactici eliberai de neutrofile

- Factori chemotactici eliberai de celulele tumorale


MF au funcii complexe, fiind implicate n aprarea nespecific i specific. Funciile MF
deriv din capacitile lor specifice :
- Capacitate fagocitar mai mare dect a neutrofilelor
- Capacitate de difereniere a structurilor self de cele non-self
- Capacitate de difereniere a structurilor self normale de structurile self senescente i self
neoplazice

Rolul MF n cadrul aprrii nespecifice

MF au pe suprafa numeroi receptori pentru diveri liganzi :
- Receptorii Fc R pentru IgG din complexele imune solubile i pentru IgG care au opsonizat
bacteriile
- Receptorii CR1 pentru C3b din complexele imune solubile i pentru C3b care au opsonizat
nespecific bacteriile
- Receptori pentru membrana bacteriilor i a levurilor
- Receptori pentru o-2-macroglobulin, care formeaz complexe cu enzime cum ar fi trombina i
plasmina sau cu alte proteine pe care le transport spre MF
- Receptori pentru glicocalixul celulelor self alterate

MF se activeaz si fagociteaz liganzii respectivi sub forma unor vezicule numite fagozomi,
care se unesc cu lizozomii i formeaz fagolizozomii, n care substanele endocitate sunt degradate
de enzimele lizozomale, n principal hidrolaze i proteaze.

Prin substanele exocitate (enzime i radicali de oxigen), MF activate au aciune intens
citotoxic asupra unor antigene corpusculate care nu pot fi fagocitate i pe care MF neactivate nu
pot s le distrug :
- Celule tumorale
- Bacterii : Lysteria monocytogenes, Mycobacterii
- Levuri : Candida
- Protozoare : Trypanosoma, Leishmania, Toxoplasma


Pe lng Ag corpusculate sunt afectate i celulele normale din vecintate, care se apr parial
prin mecanisme protectoare, n special contra radicalilor de oxigen (catalaz, glutation-peroxidaz).
n focarul imunologic se produce un grad de distrugere tisular. Distrugerea excesiv a celulelor
normale din vecintate caracterizeaz hipersensibilitatea de tip IV ntrziat.

Rolul MF n cadrul rspunsului imun

MF particip la rspunsul imun datorit funciei lor de APC profesioniste. n funcia de APC,
MF parcurg o serie de etape :
- Captarea Ag
- Fagocitoza Ag
- Prelucrarea Ag
- Conservarea epitopilor
- Prezentarea epitopilor

Captarea Ag

MF capteaz n special Ag corpusculate : bacterii, virusuri, parazii mici, fragmente de celule
self devenite antigenice. Captarea este un proces imunologic nespecific, adic se face la fel,
indiferent de structura Ag. Captarea Ag se face prin receptorii membranari CR i Fc R.

Ag corpusculate se afl sub dou forme : opsonizate sau neopsonizate. MF capteaz n
special Ag opsonizate, adic acoperite cu molecule solubile cu rol de opsonine : C3b sau IgG.
- Moleculele de C3b se gsesc permanent n lichidele interstiiale. C3b se produce continuu, n
cantiti mici, pe calea altern a complementului. Moleculele C3b se depoziteaz pe toate
suprafeele non-self, indiferent de specificitatea antigenic a acestora. Dup opsonizarea Ag
corpusculate cu C3b, acestea sunt captate de MF care au pe suprafa receptori pentru C3b,
numii CR (CR1 i CR3).
- IgG se gsesc n cantiti mari n lichidele interstiiale i n snge. Moleculele de IgG recunosc
determinanii antigenici de pe suprafaa bacteriilor, de care se leag prin fragmentul Fab. MF
capteaz bacteriile opsonizate pentru c au pe suprafa receptori pentru fragmentul Fc al IgG,
numii Fc R.


MF pot s capteze, cu eficien sczut, i bacterii neopsonizate, prin receptori care
recunosc oligozaharidele din membrana bacterian (fucoz i manoz).

Endocitarea Ag sau fagocitoza

Endocitarea este un proces complex care se face prin emiterea de pseudopode mobilizate
printr-un sistem contractil acto-miozinic. Pseudopodele se unesc nglobnd Ag corpusculat ntr-o
vacuol numit fagozom.

Prelucrarea Ag endocitate

Dup fagocitarea Ag corpusculat receptorii membranari sunt reutilizai.
Fagozomul se unete cu lizozomii din citoplasma MF, rezultnd o vezicul numit
fagolizozom sau endozom. Ag nativ endocitat este fragmentat de enzimele din lizozomi, n special
de proteaze i hidrolaze. Problema este degradarea limitat a Ag. Dac nu este degradat, sau dac
este degradat complet, Ag nu poate fi prezentat spre LT. De exemplu neutrofilele fagociteaz Ag,
dar l degradeaz complet.
Din fragmentele rezultate este ales fragmentul cel mai imunogen, care se numete epitop.

Conservarea epitopului

n MF se conserv o cantitate mic din epitopi, care sunt eliberai progresiv n urmtoarele
zile. Conservarea are rol n ntreinerea rspunsului imun mai mult timp i n generarea unui
rspuns imun mai intens printr-o stimulare mai puternic i prelungit a limfocitelor.

Prezentarea epitopului

Epitopul selectat este cuplat cu moleculele MHC II i este expus pe membrana MF. Prin
expunerea cuplului MHC II-epitop se face prezentarea epitopului spre alte celule cu rol imun, n
special spre LTH.


Toate MF din organism au funcie de celule fagocitare, dar numai o parte pot s sintetizeze
MHC II. MF care nu sintetizeaz MHC II nu particip la rspunsul imun.
Rolul imun al MF este complex :
- Iniial MF capteaz i prelucreaz Ag corpusculate.
- MF transport Ag spre ariile timo-dependente, adic populate cu LT, ale organelor limfoide
periferice : paracorticala ganglionilor limfatici i PALS intern a splinei.
- n final MF prezint n aceste arii epitopii spre LTH.

CELULELE DENDRITICE

Celulele dendritice sunt specializate n prezentarea Ag. Ele se caracterizeaz printr-o
structur arborescent, cu un corp celular cu puin citoplasm perinuclear i numeroase
prelungiri ramificate care ptrund printre celulele din jur. Aceste pseudopode au un aspect
asemntor cu dendritele neuronilor :
- Sunt foarte multe, de ordinul sutelor pe o celul
- Sunt foarte subiri i lungi, depind de 4-5 ori diametrul celulei
Datorit lungimii lor, pseudopodele celulelor dendritice permit supravegherea unor spaii
ntinse de esut cu ajutorul unui numr relativ mic de celule.

Celulele dendritice au rol de APC pentru c pot s capteze i s prezinte Ag. Ele au pe
suprafa principalii receptori implicai n funcia de APC : CR, Fc R i pot s sintetizeze moleculele
MHC II. Celulele dendritice ndeplinesc n cadrul rspunsului imun urmtoarele funcii :
- Capteaz Ag de la porile de intrare.
- Transport Ag spre organele limfoide secundare - ganglionii limfatici i splin.
- Prezint n organele limfoide secundare Ag spre LB i LT.

Toate celulele dendritice se produc n mduva hematogen i apoi trec n snge. Din
snge majoritatea intr n esuturi i organe, la porile de intrare a Ag. Acestea sunt celulele
Langerhans i celulele dendritice interstiiale. Un numr mai mic dintre celulele dendritice intr
direct n organele limfoide secundare, n regiunile cu LB aezate n foliculi limfoizi. Acestea sunt
celulele dendritice foliculare.


Celulele Langerhans

Celulele dendritice din tegumente i submucoase se numesc celule Langerhans. Ele sunt
aezate la porile de intrare ale Ag n organism :
- n special subcutanat, n strat aproape continuu n stratul spinos al epidermului.
- La nivelul submucoaselor bucal, faringian, bronic, digestiv, a colului uterin.
Rolul celulelor Langerhans este de captare a Ag opsonizate, de aceea au receptorii de
suprafa CR i Fc R. Celulele Langerhans nu prezint antigene, de aceea nu sintetizeaz
moleculele MHC II.
Dup ce celulele Langerhans capteaz Ag din esutul subcutanat i submucos, ele trec n
limf i se transform n celule cu vluri, care au numai rol de transport al Ag, aa c ele nu au pe
suprafa nici receptori pentru Ag, nici molecule MHC II.
Celulele cu vluri ajung n ganglionii limfatici, n zonele populate cu LTH. Acolo ele se
transform n celule dendritice interdigitate, care prezint Ag spre sute de LTH, cu ajutorul
moleculelor MHC II.

Celulele dendritice interstiiale

Acestea se gsesc n interstiiul organelor nelimfoide : ficat, rinichi, plmn, cord. Ele
capteaz Ag, de aceea au receptorii de suprafa CR i Fc R.
Celulele dendritice interstiiale nu prezint Ag, de aceea nu sintetizeaz moleculele MHC II.
Dup ce celulele dendritice interstiiale capteaz Ag, ele trec n snge i se transform n celule
dendritice sanguine. Ele ajung n pulpa alb a splinei, unde se transform n celule dendritice
interdigitate i prezint Ag spre LTH.

Celulele dendritice foliculare

O mic parte din celulele dendritice produse de mduva hematogen intr direct n organele
limfoide secundare, respectiv n ganglionii limfatici i pulpa alb a splinei, n zonele populate cu LB.

Celulele dendritice foliculare capteaz i concentreaz Ag solubile, pe care le prezint spre
LB care sunt grupate sub form de foliculi limfoizi.
Celulele dendritice foliculare au pe suprafa un numr mare de receptori FcR i CR. Ele
prezint prelungiri filiforme acoperite cu antigene, care n 2-3 zile devin moniliforme, apoi se
fragmenteaz n iccosomi (immune complexes coated bodies). Iccosomii sunt particule mici de
citoplasm nvelite cu antigene. LB capteaz iccosomii, prelucreaz Ag i le prezint apoi spre LTH,
pe moleculele MHC II. n aceast etap LB au funcie de APC.

LIMFOCITELE B

LB stimulate antigenic pot s aib funcie de APC pentru c :
- Au pe suprafa receptorii de captare a Ag : CR, Fc R, BCR.
- Produc MHC II.

Captarea Ag de ctre LB are urmtoarele caractere :
- LB capteaz numai Ag solubile, adic proteine simple.
- Captarea Ag este n principal imunologic specific. Ea se face cu receptorii BCR care recunosc determinanii antigenici
conformaionali din Ag solubile.
- ntr-o msur mai mic la captarea Ag particip i receptorii CR i Fc R, astfel c LB fac i
captare imunologic nespecific.

NEUTROFILELE

Neutrofilele se nasc n mduva hematogen, din celula su comun pentru monocite i
granulocite. Din seria granulocitar se difereniaz neutrofilele (peste 90%), eozinofilele i
bazofilele.
Neutrofilele triesc sub 24 h, chiar dac nu extravazeaz spre un focar inflamator. Cam
jumtate din ele se deplaseaz lent, rostogolindu-se pe endoteliu.
n zonele cu procese inflamatorii neutrofilele extravazeaz prin diapedez i sunt atrase prin
chemotactism. Factorii chemotactici sunt :
- Produii bacterieni

- Anafilatoxinele
- IL-8

Neutrofilele posed receptori Fc R i CR. Ele fagociteaz :
- Complexe imune formate din antigene, anticorpi i fraciunea C3b
- Bacterii opsonizate
- Mai puin celule mici, de exemplu hematii
Dac capacitatea lor de fagocitoz este depit, neutrofilele deverseaz n exterior
enzimele lizozomale i radicalii de oxigen producnd leziuni tisulare.

MOLECULELE PREZENTATOARE ALE EPITOPILOR

Moleculele cu ajutorul crora APC prezint epitopii sunt de fapt Ag de histocompatibilitate
din sistemul HLA, numite MHC (major histocompatibility complex), cu structur asemntoare
imunoglobulinelor.
Moleculele MHC au o structur antigenic proprie pentru fiecare organism. Ele sunt un fel
de carte de vizit pentru fiecare celul a organismului. Singurele organisme cu molecule MHC
identice sunt gemenii univitelini i aa-numitele animale consangvinizate sau de linie pur
(inbred), care au genomul identic. Din acest motiv grefele ntre gemenii univitelini se numesc
izogrefe i sunt acceptate perfect de donor.

MHC I

Moleculele MHC I se gsesc pe membranele tuturor celulelor din organism, cu excepia
hematiilor. Ele sunt fabricate n reticulul endoplasmic.
Moleculele MHC I sunt formate din dou lanuri : o i |

Lanul o este mai greu i are urmtoarea structur :
- Un segment scurt intracitoplasmatic
- Un segment transmembranar hidrofob

- Un segment lung extracelular, cu trei bucle (domenii) formate prin puni disulfurice. Fiecare
domeniu are cam 100 de aminoacizi. Domeniile o1 i o2 sunt aezate la exterior. Ele au
structur variabil i se numesc domeniile polimorfe, adic variaz de la celul la celul. Ele sunt
aezate fa n fa i formeaz mpreun o cavitate numit situsul combinativ pentru Ag.
Acesta prezint antigenele endogene. Domeniul o3 se afl lng membran. El este identic
pentru toate celulele din organism, de aceea se numete domeniul constant sau monomorf.
Domeniul o3 este specific pentru fiecare organism.

Lanul | (|-2-microglobulina) are o greutate molecular mic i este legat de domeniul o3.
Lanul | este constant pentru toi indivizii unei specii.
Domeniul o3 i lanul | au o structur Ig-like, n timp ce domeniile o1 i o2 au o structur n
foaie pliant (|-sheet).

Moleculele MHC I au funcii n cooperarea celular, prezentarea Ag i rejetul grefelor :
- Cnd celula somatic respectiv coopereaz cu LTC sau LTS, aceste limfocite recunosc mai nti
domeniul o3.
- MHC I prezint Ag endogene, adic Ag care provin din citoplasma celulei : Ag virale i Ag
canceroase.
- MHC I au rol n rejectia grefelor : domeniul o3 monomorf de pe celula self este recunoscut de
receptorul CD8 al LTC. Dac celula este non-self, CD8 nu recunoate domeniul o3 i celula este
distrus.

MHC II

Moleculele MHC II se gsesc numai pe membranele celulelor cu rol de APC. Ele se
sintetizeaz n reticulul endoplasmic.
Moleculele MHC II sunt formate din dou lanuri, o (mai greu) i | (mai uor). Lanurile au
structur Ig-like. Fiecare dintre cele dou lanuri are :
- Un segment scurt intracitoplasmatic
- Un segment transmembranar hidrofob
- Un segment lung extracelular, care are dou domenii formate prin puni disulfurice. Fiecare
domeniu are cam 100 de aminoacizi. Cele dou domenii sunt aezate pereche. Domeniile o1 i
|1 sunt aezate la exterior. Ele au structur variabil i se numesc domeniile polimorfe, adic
variaz de la celul la celul. Ele sunt aezate fa n fa i formeaz mpreun o cavitate

numit situsul combinativ pentru Ag. Structural domeniile o1 i |1 seamn cu domeniile o1 i
o2 ale MHC I. Situsul combinativ prezint Ag exogene. Domeniile o2 i |2 sunt identice pentru
toate celulele din organism i reprezint domeniile monomorfe ale MHC II.
Moleculele MHC II au funcii n cooperarea celular i n prezentarea epitopilor :
- MHC II sunt foarte importante pentru cooperarea celular a APC cu LTH, mai ales domeniul o2
care este recunoscut de receptorul CD4 al LTH.
- MHC II prezint spre LTH epitopii Ag exogene, care au fost captate i prelucrate de APC.
- MHC II au importan minor n reacia de respingere a grefei, prin domeniul o2.

Mecanismele prezentrii Ag pe moleculele MHC

Moleculele MHC prezint fragmentele peptidice i polizaharidice antigenice spre LT. LT pot
s recunoasc numai Ag prezentate de MHC.
Ambele tipuri de MHC sunt sintetizate n acelai sector celular, reticulul endoplasmic rugos, dar ele prezint
difereniat Ag pentru c se cupleaz cu epitopii n regiuni diferite ale celulei.

MHC I

Moleculele MHC I primesc n situsul combinativ fragmente polipeptidice care rezult prin
degradarea intracitoplasmatic a Ag endogene : Ag virale i moleculele proprii modificate, de
exemplu neoantigenele.
Ag se asociaz cu situsul combinativ al MHC I n reticulul endoplasmic, n momentul formrii moleculei MHC I.
Molecula MHC I nu se mai desface, astfel c Ag endogen rmne sechestrat definitiv n molecula MHC I.

MHC II

Moleculele MHC II primesc i elibereaz uor Ag exogene. Sinteza MHC II se face n reticulul
endoplasmic, dar ncrcarea cu Ag exogene se face n fagolizozomi (endozomi). MHC II sunt

recirculate ntre fagolizozomi i suprafaa celulei APC. La fiecare recirculare ele primesc un nou
fragment antigenic.

Clasificarea Ag n endogene i exogene strict dup origine este incorect. Corect Ag se
clasific astfel, indiferent de origine :
- Ag endogene sunt toate Ag care se cupleaz cu moleculele MHC I n reticulul endoplasmic.
- Ag exogene sunt toate Ag (indiferent de origine) care se cupleaz cu moleculele MHC II n
fagolizozomi.

CURSUL 3. LIMFOCITELE


Limfocitele sunt principalele celule implicate n rspunsul imun. Din punct de vedere
histologic ele fac parte din esutul limfoid.
esutul limfoid cuprinde organele limfoide centrale i periferice. Organele limfoide centrale
sunt mduva hematogen i timusul. Mduva hematogen este sursa tuturor limfocitelor care
populeaz esuturile limfoide. Organele limfoide periferice sunt :
- Splina
- Ganglionii limfatici
- esutul limfoid asociat mucoaselor MALT (mucous associated lymphoid tissue)
- esutul limfoid de la nivel cutanat SALT (skin associated lymphoid tissue).

Populaiile limfocitare

Limfocitele reprezint 20-40% din totalul leucocitelor, sau n cifre absolute ntre 1500-
3000/mmc, n medie 2500/mmc. Limfocitele apar la microscopul optic, pe frotiul colorat
policromatic (Giemsa sau Wright), cu dou morfologii : limfocite mici i mari.

Limfocitele tipice sunt cele mici. Aceast categorie cuprinde limfocitele T (LT) i limfocitele B
(LB). Limfocitele mici reprezint peste 95% din totalul limfocitelor i au urmtoarele caractere :
- Au diametrul de 6-10 microni.
- Au un nucleu ovoid sau reniform, care ocup cam 90% din suprafaa celulei i prezint
cromatin nuclear dens.

- Perinuclear apare un inel de citoplasm colorat albastru deschis.
- Citoplasma conine organite celulare i 5-15 granulaii azurofile.
- n citoplasm se detecteaz o serie de enzime : fosforilaze, hidrolaze acide, enzime
mitocondriale. Citoplasma nu conine peroxidaze, enzime caracteristice pentru monocite i
granulocite.

Limfocitele mari, numite i large granular lymphocytes sau LGL, reprezint cam 3% din
totalul limfocitelor. Din aceast clas cele mai importante sunt celulele NK (natural killer), cu rol
n imunitatea denumit nnscut sau nespecific, ndreptat contra celulelor infectate viral i
tumorale, n cadrul RIC. Alturi de NK, grupul LGL cuprinde celulele K, NK-like i LAK (lymphokine-
activated killer). Limfocitele mari au urmtoarele caractere comune :
- Au diametrul de 10-15 microni.
- Au mai mult citoplasm, care conine granulaii dense.
Limfocitele mici se mpart funcional n LB i LT. Aceste dou tipuri de limfocite nu se pot
diferenia morfologic, prin microscopie optic, ci funcional, prin testele de rozetare :
- Dac se pun n contact limfocitele cu hematii de oaie sau berbec, numai LT se leag de aceste
hematii, adic rozeteaz. La microscop se vizualizeaz mici conglomerate celulare formate
dintr-un LT central nconjurat de o coroan de hematii de oaie, care se numesc rozete E.
- Dac se pun n contact limfocitele cu hematii de oarece, numai LB se leag de aceste hematii,
producndu-se rozete M.

LIMFOCITELE T

Limfocitele T (LT) reprezint funcional o populaie celular heterogen. Clasele de LT
seamn morfologic i toate rozeteaz cu hematiile de oaie. Ele se difereniaz numai prin
receptorii sau markerii de suprafa, care se evideniaz cu anticorpi monoclonali. Receptorii sau
markerii de suprafa sunt notai cu CD (clas de difereniere sau cluster of differentiation). n
funcie de prezena lor selectiv pe diferitele subgrupuri limfocitare, markerii sunt de mai multe
categorii :
- Markerii panantigenici sunt comuni pentru toate subtipurile limfocitare din grupele B i T,
indiferent de etapa de maturare.
- Markerii de maturare se sintetizeaz i sunt represai succesiv, n timpul ontogeniei
limfocitare, adic pe parcursul maturrii de la precursorii medulari spre formele adulte.
- Markerii de activare se exprim numai pe limfocitele activate n cursul rspunsului imun.

n funcie de markerii de suprafa, LT se mpart n patru subclase :

- LTH helper
- LTS supresor
- LTCS contrasupresor
- LTC citotoxic

Toate subclasele de LT posed o serie de caractere comune :
- LT reprezint populaia majoritar dintre limfocitele mici din periferie, respectiv ntre 55-75%
din limfocitele mici sanguine, 100% din populaia limfocitar a timusului i circa 25% din
limfocitele din mduva hematogen.
- LT au via lung, de ani sau zeci de ani.
- LT sunt celule intens recirculante, adic se deplaseaz continuu ntre organele limfoide
secundare i esuturi, n cutarea antigenelor pentru care sunt programate.
- LT rozeteaz cu hematiile de oaie.

Receptorii de suprafa ai LT mature

LT care prsesc timusul se numesc de repaus , naive sau virgine , pentru c ele
nu au venit nc n contact cu antigenul corespunztor. Receptorii lor de suprafa sunt de trei
categorii (tabelul 3) :
- Receptorii de recunoatere a epitopului reprezint principala cale de activare a LT. Acest grup
cuprinde complexul TCR-CD3 i coreceptorii CD4 i CD8. Complexul TCR-CD3 recunoate
epitopul i este prezent pe toate subtipurile de LT. CD4 i CD8 sunt coreceptori care recunosc
moleculele MHC aezate pe APC sau pe celulele somatice. Moleculele MHC prezint epitopul.
CD4 recunoate MHC II, iar CD8 recunoate MHC I. Pentru c simultan sunt recunoscute
antigenele i moleculele MHC, spunem c recunoaterea antigenic realizat de LT este
asociativ.
- Receptorii cu rol accesor n activarea LT sunt CD28 i CD45.
- Receptorii cu rol n adeziunea intercelular permit LT s adere intim de alte celule : APC,
celule somatice, celule int. Receptorii de adeziune ai LT sunt CD2 i LFA1.

I. Receptorii cu rol n recunoaterea epitopului

Recunoaterea epitopului de ctre LT are cteva caracteristici generale :
- LT recunosc un epitop ca non-self dup structura liniar sau primar.

- LT recunosc epitopii numai dac acetia sunt prezentai n complex cu moleculele
prezentatoare MHC, de pe membranele APC sau a celulelor somatice. Spre deosebire de
receptorii BCR cu structur de imunoglobuline de pe suprafaa LB, receptorii TCR-CD3 nu pot
recunoate antigenele native, ci numai fragmentele peptidice prelucrate de celulele APC.
- Recunoaterea epitopului este obligatoriu asociativ, adic LT recunosc simultan epitopul i
molecula MHC. Prezentarea epitopului se poate produce numai ntre celule care aparin
aceluiai organism, n condiii de restricie de histocompatibilitate.
Moleculele MHC sunt expuse numai pe membranele celulare. Din acest motiv LT pot s
recunoasc numai antigenele membranare. Antigenele prezentate pe membrane pot fi :
- Antigene expuse pe moleculele MHC.
- Antigene constitutive, adic structuri proteice ale membranei.
- Antigene ataate accidental de membran, de exemplu haptene.
LT recunosc numai antigenele expuse n complex cu moleculele MHC self. LT realizeaz o
recunoatere antigenic MHC-dependent.


TCR

Molecula TCR (T-cell receptor) este format din dou lanuri :
- Receptorul TCR2 este format din lanurile o i |, fiind prezent la 95% dintre LT.
- Receptorul TCR1 este format din lanurile i o, fiind prezent la 5% dintre LT, mai ales pe LT
din tegumente i mucoase.
Lanurile care compun TCR au structur Ig-like :
- Lanurile o i seamn cu lanurile L ale imunoglobulinelor.
- Lanurile | i o seamn cu lanurile H ale imunoglobulinelor.
Fiecare lan are un segment intracitoplasmatic foarte scurt, un segment transmembranar,
un segment de legtur i cte dou domenii extracelulare, de cte 100 de aminoacizi, aezate
fa n fa :
- Domeniile dinspre exterior sunt variabile i se noteaz cu V.
- Domeniile dinspre membran sunt constante i se noteaz cu C.
Regiunea dintre buclele constante C i inseria pe membrana limfocitar a lanurilor TCR se
numete zona balama a TCR. Ea d mobilitatea TCR, foarte important pentru recunoaterea
antigenelor. Moleculele TCR sunt mobile n toate planurile, fcnd micri de baleiere. n zona
balama lanurile o i |. respectiv i o, se asociaz prin puni disulfurice.


Cele dou domenii variabile se asociaz i formeaz o cavitate numit situsul de recunoatere
pentru antigen, sau paratop, asemntor cu paratopul imunoglobulinelor. Genele care codific
domeniile variabile ale TCR seamn structural cu genele domeniilor variabile ale
imunoglobulinelor, iar variabililitatea este de asemenea obinut prin procese de recombinare
genic. Situsurile de recunoatere nu se leag de molecula de antigen pe toat lungimea. De fapt
contactele sunt punctiforme, prin 6 secvene scurte de aminoacizi care proemin n interiorul
situsului combinativ, cte trei secvene pe fiecare domeniu V. Aceste secvene scurte se numesc
CDR (complementarity determining regions) i sunt hipervariabile.
- CDR1 i CDR2 se leag cu domeniile polimorfe ale MHC (o1 + o2 ale MHC I i o1 + |1 n cazul
MHC II).
- CDR3 se leaga de epitop, avnd structuri complementare.

Funciile receptorilor TCR sunt :
- TCR recunosc antigenul.
- TCR declaneaz stimulii activatori pentru LT. Dupa ce buclele V o i V | recunosc complexul
MHC-epitop, apar n TCR modificri conformaionale i se produc stimuli activatori care sunt
transmii n citoplasma LT.
TCR nu poate s transmit singur semnalul activator pentru c TCR are un segment
intracitoplasmatic foarte scurt, iar enzimele care activeaz LT sunt aezate profund n citoplasma
LT. De aceea transducia semnalului se face prin intermediul receptorului CD3.

CD3

CD3 este un receptor membranar cu structur complex, aezat lng receptorul TCR. CD3
face transducia semnalului activator primit de TCR spre interiorul LT.
CD3 este format din cinci lanuri scurte : gama (), delta (o), epsilon (c), eta (n), zeta (.).
Domeniul intracitoplasmatic al lanului zeta are funcie de PTK (proteinkinaz). Aceast enzim
fosforileaz n prezena ATP unele proteine i le modific activitatea.
Toate cele 7 lanuri din complexul TCR-CD3 (dou ale TCR i cinci ale CD3) se asociaz prin
puni disulfurice sau prin legturi necovalente. Ele formeaz un complex unitar care transmite
stimulul activator n interiorul LT.


CD4

CD4 este un coreceptor care particip la recunoaterea antigenic asociativ.
CD4 este receptorul de suprafa sau markerul caracteristic pentru LTH.
CD4 are un segment intracitoplasmatic, un segment transmembranar i un segment
extracelular. Segmentul extracelular al CD4 are trei domenii sau bucle de mrime diferit. Prin
bucla exterioar N-terminal, CD4 se leag de domeniul monomorf al MHC II, care este domeniul
o 2.
Segmentul intracitoplasmatic al CD4 este foarte lung. El particip la activarea metabolic a
LTH, prin activarea unor enzime intracelulare.
CD4 este i receptorul de care se ataeaz virusul HIV.

CD8

CD8 este un coreceptor care participa la recunoaterea antigenic asociativ. El se gsete
mai ales pe LTC, dar i pe LTS i LTCS. CD8 este marker definitoriu pentru LTC.
CD8 are dou lanuri, o i |. Fiecare dintre lanuri are un segment intracitoplasmatic, un
segment transmembranar i un segment extracelular. Cele dou segmente extracelulare au cte un
domeniu. Cele dou domenii se asociaz i au un aspect Ig-like. Ele particip la cooperarea dintre
LTC sau LTS i APC. n timpul cooperrii, segmentul extracelular al CD8 se leag de domeniul
monomorf al MHC I, care este o 3.
Segmentul intracitoplasmatic al CD8 este foarte lung. El particip la activarea metabolic a
LTC i LTS, prin activarea unor enzime intracelulare.

II. Receptorii cu rol accesor

CD28

CD28 se gsete pe LTH i pe LTC, care mpreun reprezint cam 80% din LT circulante.
CD28 nu se gsete pe LTS.

CD28 are o structur de tip Ig-like, cu un segment intracitoplasmatic lung, un segment
transmembranar i un segment extracelular care are un domeniu.
- Prin domeniul extracelular, CD28 se leag cu un contrareceptor de pe APC, notat CD80.
- Prin segmentul intracelular lung, CD28 activeaz mesagerii secunzi proteici din LTH sau LTC
care induc producia de citokine.

CD45

CD45 se gsete pe toate clasele de LT i de aceea se mai numete LCA (antigenul comun
leucocitar). El este legat prin puni disulfurice de lanurile zeta ale CD3.
CD45 activat devine o enzim transmembranar numit PTP (protein-tirozin-fosfataz).
PTP mpreun cu PTK sunt principalele enzime implicate n activarea LT. Ele formeaz un cuplu
funcional care controleaz durata i intensitatea activrii limfocitare prin stabilirea echilibrului
dintre fosforilrile i defosforilrile celulare.

III. Receptorii de adeziune intercelular

Aceti receptori permit stabilirea de contacte ntre LT i APC sau celulele somatice i
permit cooperarea dintre ele. Principalii receptori implicai n aderarea LT sunt : LFA1, CD2, VLA.

LFA1

LFA1 sau antigenul asociat funciei limfocitare face parte din familia integrinelor.
Integrinele sunt receptori celulari care permit aderarea de endoteliu, de proteinele matricei
extracelulare i de alte celule (APC, celulele int).
LFA1 este prezent pe membrana LT, LB, MO, MF, PMN. El este un heterodimer format
dintr-un lan o (CD11a) cu greutate molecular de 180 kDa i un lan | (CD18) cu greutate
molecular de 95 kDa. LFA1 se leag de ICAM (intercellular adhesion mollecule) prin segmentul
extracelular, care are dou bucle cu structur Ig-like.
Exist dou tipuri de ICAM :

- ICAM 1 se afl pe suprafaa tuturor celulelor din organism.
- ICAM 2 se afl n special pe celulele endoteliale.
Aderarea intercelular mediat de LFA1 este inductibil, adic ea este stimulat de
recunoaterea antigenului i legarea lui la complexul TCR-CD3. Recunoaterea antigenului
declaneaz n LT cascada fosfatidil-inozitol, care n final duce la eliberarea ionilor de calciu din
reticulul endoplasmic i la activarea proteinkinazei C (PKC), care prin fosforilare activeaz
receptorul LFA1. Dac stimularea antigenic nu se produce, activitatea PKC este inhibat,
receptorul LFA1 devine inactiv i LT se desprinde de celula cu care era n contact. Acest fenomen
permite ca LT s vin n contact succesiv cu o multitudine de celule somatice sau APC, n cutarea
antigenului.
LFA1 are rol i n extravazarea i migrarea intratisular a LT. LFA1 ader de liganzii ICAM1, a
cror expresie este mult crescut pe celulele endoteliale din focarele inflamatorii.

VLA

Receptorii VLA fac parte din familia integrinelor. Moleculele VLA1 i 2 sunt caracteristice
pentru LT. VLA sunt molecule de adeziune la endoteliu (VLA4) i la proteinele din matricea
extracelular. Ele dau LT posibilitatea s se deplaseze prin esuturi i s se concentreze
intratisular n zona unde se gsesc antigenele.

CD2

Receptorul CD2 se mai numete LFA2. CD2 face parte din superfamilia imunoglobulinelor i
se gsete pe membrana tuturor LT i pe NK. CD2 are un segment intracitoplasmatic, un segment
transmembranar i un segment extracelular. CD2 este i receptorul LT pentru hematiile de oaie.
- Prin segmentul extracelular, CD2 se leag de receptorul LFA3 de pe APC sau de pe celulele
somatice.
- Prin segmentul intracitoplasmatic, CD2 stimuleaz PLC (fosfolipaza C). Dup stimulare, PLC
declaneaz cascada fosfatidil-inozitol.

Moleculele de aderare au o serie de funcii eseniale pentru rspunsul imun :

- Prin aceste molecule LT stabilesc permanent contacte cu APC sau cu celulele somatice pe care
le controleaz dac prezint sau nu antigene. Contactele sunt antigen-independente, adic se
fac indiferent dac APC sau celula somatic prezint sau nu antigene pe suprafa. Cuplurile
de adeziune LFA1-ICAM1 i CD2-LFA3 au rol n aceast etap iniial a recunoaterii
antigenice.
- Receptorii de adeziune nu particip direct la recunoaterea epitopilor, dar au un rol esenial n
recunoatere pentru c realizeaz un contact intim ntre LT i APC. Contactul se face pe
suprafee mari de membran i dureaz mult, favoriznd contactul moleculelor MHC i TCR,
care sunt aezate n locuri diferite pe membrane i pentru a se ntlni fac micri de difuzie
lateral.
- Cuplurile de adeziune se desfac dup recunoaterea antigenelor, sau dac celula APC sau
somatic nu prezint antigene. n acest fel LT i continu circuitul prin organism, adic se face
recircularea LT.
- Receptorul CD2 are rol i n activarea metabolic a LT. Rolul activator al CD2 este indispensabil
mai ales cnd concentraia de epitopi prezentai spre TCR este sczut, astfel c numai
recunoaterea epitopilor de ctre TCR-CD3 nu este suficient pentru activarea LT.


LIMFOCITELE B

LB reprezint 15-30% din totalul limfocitelor mici circulante. Ele au o serie de caractere
generale :
- LB au durata de via scurt, de cteva sptmni.
- LB sunt celule puin recirculante, ele sunt cantonate n ariile burso-dependente din organele
limfoide secundare - ganglionii limfatici i splina.

Denumirea de limfocite B vine de la bursa lui Fabricius , care este un organ limfoid la
psri, n care se matureaz LB formate n mduva hematogen. La mamifere s-a stabilit c nu
exist un echivalent al bursei lui Fabricius, ci LB se matureaz tot n mduva hematogen.

Receptorii de suprafa ai LB sunt de trei categorii :
- Receptorii cu rol n recunoaterea antigenelor i n activarea LB : BCR
- Receptorii de adeziune intercelular : LFA1
- Receptorii cu rol accesor n activare : CD45, CD25


Recunoaterea antigenelor de ctre LB are unele caractere :
- LB recunosc epitopii dupa structura lor conformaional, spaial sau tridimensional.
- LB recunosc antigene solubile native, adic neprelucrate de APC, spre deosebire de LT. Pentru
LB nu este necesar prezentarea antigenelor pe moleculele MHC.

BCR

Receptorul principal de recunoatere a antigenelor este BCR (B-cell receptor). BCR este o
molecul de imunoglobulin monomeric transmembranar, cel mai frecvent monomer de IgM
sau IgD.
BCR are urmtoarea structur :
- Dou lanuri grele H, transmembranare, care au un segment extracelular, un segment
transmembranar hidrofob i un scurt segment intracitoplasmatic.
- Dou lanuri uoare L, strict extracelulare.
Spre exterior, la captul N-terminal, lanurile H i L au bucle variabile V care se asociaz i
formeaz dou situsuri combinative identice pentru determinantul antigenic expus la suprafaa
antigenului nativ.
Dup recunoaterea antigenului, BCR particip la activarea LB. Lanurile H ale BCR sunt
asociate cu doi receptori numii Ig o i Ig |, care au acelai rol ca CD3 la LT, adic fac transducia
semnalului activator spre interiorul LB.
Semnalul se transmite de la BCR la Ig o si Ig | i mai departe la CD45 care se activeaz i
devine PTP. n continuare CD45 declaneaz cascada fosfatidil-inozitolilor care activeaz o serie de
factori nucleari care induc n final
proliferarea LB din clona activat i transformarea lor n plasmocite, adic celule productoare de
imunoglobuline.

PLASMOCITELE

Plasmocitele apar prin activarea LB i diferenierea lor terminal n urma stimulrii
antigenice i de ctre LTH. Procesul de difereniere implic modificri morfologice i
imunofenotipice. LB trec prin stadiile succesive de : imunoblast B, plasmoblast, pre-plasmocit i
plasmocit. Pe parcurs celulele pierd antigenele LB de repaus i de activare. Apar noi markeri de
suprafa, de exemplu CD38 i CD71 cu rol n proliferare.
Diferenele morfologice i structurale ale plasmocitelor fa de LB exprim funcia lor de
sintez i de secreie a imunoglobulinelor, care asigur RIU. Caracterele morfologice ale
plasmocitelor sunt :
- Plasmocitele sunt ovale i au diametrul de 7-25 microni.

- Nucleul este sferoidal, cu zone dense de heterocromatin orientat n spie de roat .
- Citoplasma este abundent i intens bazofil, datorit coninutului mare de ARN. Caracteristic
citoplasma conine reticul endoplasmic rugos abundent, cu muli ribosomi implicai n sinteza
imunoglobulinelor.

CURSUL 4. DESFURAREA RSPUNSULUI IMUN UMORAL


Rspunsul imun umoral (RIU) pentru antigenele timodependente se produce printr-o
cooperare celular la care particip patru tipuri de celule : APC, LTH, LTS, LB. Cooperarea celular
este bidirecional i cuprinde dou secvene ntre care exist un echilibru funcional foarte fin
care asigur homeostazia RIU :
- Secvena de activare sau efectorie
- Secvena de retrocontrol sau inhibitorie

Secvena de activare sau efectorie cuprinde toate influenele dinspre APC spre LB. Ea are
trei efecte :
- Selecia i activarea clonelor de LB i LT antigen-specifice.
- Expansiunea clonal a limfocitelor antigen-specifice.
- Producia unei cantiti adecvate de imunoglobuline pentru neutralizarea i distrugerea
antigenelor.

Secvena de retrocontrol sau inhibitorie cuprinde toate influenele n sens invers, de la LB
spre APC, prin care sunt inhibate APC, LTH i LB. Secvena de retrocontrol limiteaz intensitatea
RIU la un minim necesar pentru o aprare eficient. Controlul rspunsului imun se realizeaz prin
LTS, prin citokine cu rol inhibitor, prin producia de anticorpi care inhib plasmocitele i prin alte
mecanisme.

ACTIVAREA LIMFOCITELOR T


LT de repaus sau virgine se localizeaz n zonele timodependente din organele limfoide
periferice : paracorticala ganglionilor limfatici i PALS intern din pulpa alb a splinei. La acest
nivel se produce stimularea antigenic a LT, care devin LT efectoare.
Activarea LT reprezint un proces esenial n cadrul rspunsului imun fa de antigenele
timodependente. Activarea se face prin cooperare cu APC care preiau, prelucreaz i prezint
antigenele. LT nu au receptori pentru captarea antigenelor native. Cooperarea cu APC este
bidirecional :
- Stimularea LT de ctre APC reprezint cooperarea anterograd, care duce la activarea
metabolic a LT.
- LT stimulate produc o serie de citokine, cum sunt IL-4 i IFN . care stimuleaz la rndul lor
celulele APC, realiznd cooperarea retrograd.
Activarea retrograd a APC are dou efecte :
- Pe membrana APC crete expresia MHC II i astfel crete capacitatea de prezentare a
antigenelor spre LT.
- Dac MF cu rol de APC sunt infectate cu germeni cu habitat intracelular, IFN
produs de LTH stimuleaz mecanismele bactericide ale MF, iar acestea reuesc s distrug
germenii intracelulari.

Iniial se produce o activare incomplet a LT, pe calea complexului TCR-CD3, i prin
moleculele CD2. Activarea complet se face pe calea CD28 : dup legarea CD28 cu CD80, care
este contraligandul de pe APC, LT se activeaz complet i produc citokine cu efect de stimulare a
celulelor implicate n rspunsul imun, n cazul LTH, sau cu rol citotoxic n cazul LTC.

Pe suprafaa LT activate apare CD25 (receptorul pentru IL-2).
LT activate au aspectul de limfoblast T. Limfoblatii T sunt celule mai mari, ovale, cu
nucleul mai mare i citoplasm mai mult, cu multe mitocondrii i reticul endoplasmic rugos
dezvoltat. Ei prolifereaz intens n 5-10 cicluri mitotice, din care rezult LT mici, complet
maturate. Ele pot lua dou direcii evolutive :
- Majoritatea devin LT efectoare, cu funcii de LTH sau de LTC.
- Altele devin LT de memorie imun sau preactivate. LT de memorie au capacitatea de a
rspunde foarte rapid i intens la un nou contact cu agenii patogeni ntlnii anterior.


Activarea LT prin cooperarea anterograd are dou etape : antigen-independent i
antigen-dependent :
- Etapa antigen-independent ncepe cnd se fac primele contacte dintre APC i LT prin
cuplurile de adeziune CD2-LFA3 i LFA1-ICAM. ntlnirile dintre APC i LT sunt favorizate de
faptul c LT sunt celule intens recirculante. Etapa antigen-independent se produce
permanent, indiferent dac APC prezint sau nu antigene.
- Etapa antigen-dependent se produce cnd MHC prezint un epitop. La ea particip :
complexul TCR-CD3, CD45 i coreceptorii CD4 (de pe LTH) sau CD8 (de pe LTC).
Semnalul se transmite prin complexul de receptori TCR-CD3 la CD45, care are activitate de
PTP. Aceasta activeaz PTK. Enzima PTK fosforileaz o serie de enzime din citoplasma LT
i se produce activarea metabolic a LT, pe calea cascadei fosfatidil-inozitol.

Subclasele de LTH

LTH se difereniaz n timpul cooperrii cu APC n mai multe subclase.
Subclasele de LTH au ca elemente comune morfologia i markerii de suprafa. Ele au funcii
diferite n rspunsul imun i se difereniaz prin citokinele pe care le produc.

LTHp (primitiv) este un LTH nedifereniat, primitiv, la primul contact cu antigenul. El
produce cantiti mari de IL-2, care stimuleaz RIU primar.

LTHo (zero) sau LTH nedifereniat precoce (early undifferentiated) este un LTH pe cale de maturare. Dac este stimulat
antigenic, LTHo se transform ntr-o form matur : LTH1 sau LTH2. LTHo se difereniaz dintr-un LTHp dup o stimulare
antigenic de scurt durat, de 2-3 zile. n LTHo se activeaz toate genele pentru citokine, de aceea LTHo produce o varietate de
citokine, dar n cantiti mici, ineficiente pentru RIU sau RIC.

LTH1 i LTH2 sunt LTH mature. Ele se difereniaz din LTHo dup o stimulare antigenic de
durat mai lung.
- LTH1 stimuleaz RIC. LTH1 produc : IL-2 , IL-3, IFN , TNF. Pentru LTH1 este caracteristic
producia de IFN , care stimuleaz aprarea n cazul infeciilor virale i cu microorganisme
care triesc n MF.
- LTH2 stimuleaz RIU secundar. LTH2 produc : IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10.

Cea mai mare parte dintre LTH1 i LTH2 sunt utilizate n rspunsul imun. O parte mai mic
devin LTH de memorie. Ele exprim pe membran un numr mare de receptori i au o capacitate
mare de producie de citokine, de aceea rspund foarte rapid la un nou contact cu antigenul.
LTH1 i LTH2 stimuleaz retrograd APC.

ACTIVAREA LIMFOCITELOR B

LB virgine eliberate din mduva hematogen trec n circulaia sanguin i apoi n ariile
bursodependente din organele limfoide periferice :
- Corticala extern a ganglionilor limfatici
- PALS extern din pulpa alb a splinei

Cnd LB vin n contact cu antigenele specifice, n organele limfoide periferice, se produce
maturarea LB, care cuprinde trei procese :
- Recunoaterea antigenului
- Activarea LB
- Diferenierea terminal n plasmocite sau LB de memorie
Recunoaterea antigenului se face prin receptorul BCR. LB pot s recunoasc antigenele
simple (solubile) sub form nativ, captate i concentrate de ctre celulele dendritice foliculare,
sau antigenele mai complexe degradate i prezentate de celulele APC, n complex cu moleculele
MHC II.
Activarea este un fenomen complex declanat prin legarea antigenelor de BCR. Dup
recunoaterea antigenului, BCR trimite semnale activatorii prin lanurile H spre segmentul
intracitoplasmatic al Ig o i Ig | i apoi semnalul se transmite spre CD45. CD45 se activeaz, ia
funcie de PTP. Aceasta activeaz PTK. Enzima PTK fosforileaz mai multe enzime din citoplasma
LB i se produce activarea metabolic a LB, pe calea cascadei fosfatidil-inozitol.
Limfoblatii B sunt celule mari, ovale, cu nucleul mai mare i citoplasm mai mult, cu
multe mitocondrii i RER dezvoltat. Pe membran limfoblatii B exprim cantiti mari de LFA1 i
de MHC II, de aceea limfoblatii B pot s funcioneze ca APC. Plasmocitele sunt LB efectorii. Ele
au via scurt i sintetizeaz cantiti mari de anticorpi specifici.
LB de memorie produc un RIU secundar, extrem de rapid i intens, cu IgG. LB de memorie
pentru un anumit antigen sunt active pe perioade lungi, uneori toat viaa. Nu se tie dac LB de

memorie au via lung sau dac ele se produc printr-un proces de recrutare celular
permanent.

Dup ce LB capteaz antigenul i sunt stimulate, ele ndeplinesc dou funcii n etape
succesive :
- Cnd sunt n stadiul de limfoblast B, ele funcioneaz ca APC.
- Apoi limfoblatii B i comut funcia din APC n plasmocit, sub influena IL-2, IL-4 sau IL-5.
Dac limfoblastul B a fost activat prin IL-2, el va produce Ig M. Dac stimularea se face prin
IL-4, apare o producie de Ig G (sau Ig E, la persoanele alergice). Dac stimularea se face prin IL-5,
limfoblatii vor produce Ig A.

PRINCIPALELE CITOKINE IMPLICATE N RSPUNSUL IMUN

Citokinele sunt polipeptide cu activitate biologic intens. Ele intervin n hematopoiez,
aprarea nespecific (inflamaie, reacia febril) i specific (RIU i RIC).
Clasele de citokine definite n prezent sunt :
- Interleukinele IL
- Factorii stimulatori ai coloniilor CSF
- Factorii de necroz tumoral TNF
- Interferonii IFN inhib sinteza acizilor nucleici n celulele int, avnd rol antiviral i
antitumoral.

Interleukinele

IL-1 este produs de MF i fibroblati. Efectele ei sunt :
- Stimuleaz proliferarea LT i LB activate.
- Induce producia de citokine de ctre MF.
- Induce apariia pe endoteliu a moleculelor de adeziune pentru PMN i limfocite.
- Induce febr i sinteza hepatic a proteinelor de faz acut.
- Stimuleaz osteoclatii care produc resorbie osoas.


IL-2 este produs de LTH. Efectele ei se exercit prin receptorul membranar CD25, numit i
IL-2 R. Aciunile IL-2 sunt :
- IL-2 produs de LTH1 stimuleaz RIC.
- IL-2 produs de LTHp i LTHo stimuleaz RIU primar, care apare la primul contact cu antigenul
i se caracterizeaz prin producia de IgM.

IL-4 este produs de LTH2. IL-4 stimuleaz RIU secundar, care apare dup contacte
repetate cu antigenul, prin mai multe aciuni :
- Stimuleaz producia i maturaia medular a LB.
- Crete funcia de APC a limfoblastului B.
- Activeaz mecanismul de comutare izotipic a produciei de imunoglobuline a plasmocitului,
adic inhib producia de IgM caracteristice RIU primar i stimuleaz producia de IgG
caracteristice RIU secundar.
- Are un rol important n bolile alergice : la alergici ea stimuleaz producia de IgE i expresia
receptorului pentru IgE (CD23) pe LB i pe eozinofile.

IL-5 este produs n special de LTH2. IL-5 stimuleaz RIU de la nivelul mucoaselor bronic
i intestinal prin activarea mecanismului de comutare (switch) a produciei de imunoglobuline a
plasmocitului, adic inhib producia de IgM caracteristice RIU primar i stimuleaz producia de
IgA caracteristice RIU de la nivelul mucoaselor.

IL-6 este produs de LTH2 i MF. IL-6 are mai multe aciuni :
- Stimuleaz RIU prin stimularea produciei medulare a LB i a activrii lor.
- Are efect antiinflamator pentru c stimuleaz sinteza hepatic de proteine de faz acut, cum
sunt : o 1-antitripsina, o 2-macroglobulina, o 1-antiplasmina.

CARACTERISTICILE RIU PRIMAR SI SECUNDAR

RIU primar este declanat de primul contact cu un anumit antigen. LB virgine sunt
recrutate n organele limfoide periferice i se nmulesc n foliculii limfatici, n aa-numiii centri
germinativi primari, care sunt activi cam trei sptmni. RIU primar are o serie de caracteristici :

- Producie de IgM, pentru c la primul contact cu antigenul, APC coopereaz cu LTHp care
produc IL-2. IL-2 stimuleaz producia de IgM. IL-2 nu are efect de comutare izotipic, adic de
oprire a produciei de IgM i nlocuire cu IgG.
- Laten de 4-5 zile de la contactul antigenic pn la decelarea anticorpilor specifici.
- IgM au o afinitate sczut de legare a antigenului.
- Titrurile de IgM sunt mici sau moderate, pentru c la primul contact cu antigenul, APC
coopereaz doar cu LTHp i cu LB care nu au avut timp s se divid i s formeze o clon
puternic. De aceea cantitatea de anticorpi produi este destul de mic comparativ cu RIU
secundar.
- Durata titrului crescut de IgM este mic, pn la 30 de zile, pentru c viaa IgM este scurt (7-
10 zile), clonele de LB nu sunt expansionate i nu exist LB de memorie.

RIU secundar apare la al doilea contact cu un anumit antigen i continu la urmtoarele
contacte. Dup contactul cu antigenul, RIU secundar ncepe mult mai rapid dect RIU primar (n
2-3 zile), iar panta de cretere a titrului de anticorpi este foarte abrupt. Se formeaz LB de
memorie. Cooperarea celular i proliferarea clonal se produc n centrii germinativi din foliculii
limfatici secundari. Dup ndeprtarea din organism a antigenului, n circulaie rmn doar
anticorpii, cu titrul mult mai mare decat al anticorpilor din RIU primar.
Anticorpii sunt IgG cu titru mare care persist mult, timp de mai muli ani. Frecvent acetia
confer protecie pentru toat viaa fa de antigenul corespunztor, ca n cazul anticorpilor
antirujeolici, antirubeolici i cei contra toxinei eritrogene a streptococului.
RIU secundar are o serie de caracteristici :
- Producie de IgG, pentru c la cooperarea cu APC particip LTH2 care produc IL-4. IL-4 are
efect pe mecanismul de comutare izotipic, adic inhib sinteza de IgM i favorizeaz sinteza
de IgG (sau IgE, la alergici).
- Titrul de IgG este mult crescut fa de titrul IgM, pentru c la cooperarea cu APC particip
LTH2 mature i numeroase, care stimuleaz intens clona expansionat de LB.
- Durata titrului protectiv de imunoglobuline din RIU secundar este mult mai mare dect n RIU
primar, datorit n principal LTH i LB de memorie.
- Afinitatea anticorpilor pentru antigen este mult mai mare dect n RIU primar.

DESFURAREA RIU N ORGANELE LIMFOIDE SECUNDARE

Sistemul imun are un compartiment central, reprezentat de organele limfoide primare i
unul periferic, reprezentat de organele limfoide secundare.

- LB i LT mature sunt produse de organele limfoide primare sau compartimentul central -
mduva hematogen i timusul.
- Activarea LB i LT se produce n organele limfoide secundare - compartimentul periferic.
Compartimentul periferic cuprinde esutul limfoid capsular i esutul limfoid necapsular
sau difuz, aezat la porile de intrare :
- esutul limfoid capsular cuprinde splina i ganglionii limfatici.
- esutul limfoid necapsular (sau difuz) este format din : GALT (gut associated lymphoid tissue),
BALT (bronchial associated lymphoid tissue) i SALT (skin associated lymphoid tissue). La
rndul lor, GALT i BALT formeaz MALT (mucosal associated lymphoid tissue).
n ganglionii limfatici sunt prezentate antigenele drenate din esuturi. n splin sunt
prezentate antigenele provenite din circulaia sanguin, la nivelul MALT sunt prezentate
antigenele de la nivelul mucoaselor, iar la nivelul SALT sunt prezentate antigenele care ptrund
prin piele.

n snge proporia LB i LT difer fa de organele limfoide :
- n snge LT reprezint 70-80% dintre limfocite, LB reprezint 15-25%, iar restul sunt limfocite
nonB-nonT.
- n organele limfoide exist LB i LT n proporii aproape egale.

Ganglionii limfatici i RIU

Ganglionii limfatici sunt aezai n punctele de confluen a vaselor limfatice. Ei sunt
formai din parenchim nvelit ntr-o capsul conjunctiv, sunt ovali i au diametrul sub 3 cm. n
tot parenchimul ganglionar se gsesc diseminate APC : MF i celule dendritice. Fiecare ganglion
are o reea de arteriole, capilare i venule. Capilarele i venulele au un tip particular de endoteliu
HEV (high endotelial venule), care este implicat n trecerea limfocitelor din snge n esutul
limfoid ganglionar.
Parenchimul este mprit n trei zone : cortexul superficial, cortexul profund i medulara.
- Cortexul superficial, sau zona B-dependent, conine LB aezate n foliculi limfoizi primari
(nainte de stimularea antigenic) sau secundari (dup stimularea antigenic). Antigenele
ajung n cortexul superficial prin limfaticele aferente. n jurul foliculilor limfoizi sunt celule
dendritice foliculare care capteaz, concentreaz i prezint antigenele spre LB. n cortexul
superficial se iniiaz RIU.

- Cortexul profund sau paracorticala, numit i zona T-dependent, conine LT aezate uniform.
n paracortical se iniiaz RIC.
- Medulara are o celularitate mixt : LB, LT, plasmocite. n medular migreaz LB stimulate, care
se transform n plasmocite i secret anticorpi. Anticorpii prsesc ganglionul limfatic prin
vasul limfatic eferent care iese prin hilul ganglionului.

Ganglionii limfatici particip la rspunsul imun fa de antigenele drenate prin vasele
limfatice din teritoriile din apropiere. RIU se produce integral n ganglionii limfatici, de la
prezentarea antigenelor pn la producia de anticorpi care sunt eliberai n snge.

Splina i RIU

Splina ndeplinete mai multe roluri, fiind un organ limfoid secundar i un organ de control
i rezerv pentru snge. Splina este format din parenchim i o capsul care trimite spre interior
septuri fibroase. Parenchimul se mparte n pulpa alb i pulpa roie.
Pulpa roie este format din sinusuri venoase i cordoane splenice care conin elemente
figurate. Ea nu are funcie imun. n pulpa roie este verificat calitatea elementelor figurate i a
plasmei. Sngele este filtrat printre celulele endoteliale din sinusurile venoase. Hematiile
mbtrnite sau anormale sunt reinute i fagocitate de ctre MF locale, care recupereaz fierul
din ele.

Pulpa alb are straturi de celule cu rol imun aezate n dou zone concentrice n jurul unei
arteriole centrale : PALS (stratul limfoid periarteriolar) i zona marginal.
Zona periarteriolar PALS are la rndul ei dou sectoare :
- PALS intern conine LT care vin n contact cu celule dendritice interdigitate.
- PALS extern, cu LB aezate n foliculi primari, care conin LB nestimulate antigenic (virgine)
sau foliculi secundari cu centru germinativ, formai din LB care au fost stimulate antigenic. n
jurul foliculilor sunt dispuse celule dendritice foliculare.
Zona marginal este dispus ntre PALS extern i pulpa roie i conine LB i LT.
Limfocitele B i T activate pot s ias din PALS prin capilarele din zona marginal.


Pulpa alb este implicat n RIU sau RIC declanate de antigenele care ajung la splin pe
cale sanguin. Splina nu are circulaie limfatic. RIU se produce n ntregime n splin, de la
prezentarea antigenelor pn la producia de anticorpi care sunt eliberai n snge.

CONTROLUL RSPUNSULUI IMUN

Pentru c sistemul imun are o mare capacitate de distrugere, care poate fi ndreptat
accidental contra propriului organism, exist multiple sisteme de control i de modulare a
rspunsului imun.

Mecanismele de inhibiie evit un RIU excesiv, care poate s duc la :
- Proliferarea necontrolat a LB sau LT antigen-specifice, cu apariia unor boli limfoproliferative
(cancere ale limfocitelor), de exemplu leucemiile limfocitare sau mielomul multiplu
(plasmocitomul).
- Producia de anticorpi n exces, cu generarea unor reacii autoimune sau de hipersensibilitate.

Controlul rspunsului imun prin supresia clonal

Distrugerea clonelor de LT autoreactive se face n timus, n perioada perinatal. Acest
proces se numete tolerana nnscut central.
n perioada perinatal ajung n timus precursorii de origine medular. n timus se produc
maturaia, proliferarea i diferenierea clonelor de LT, urmat de emigrarea lor spre organele i
esuturile limfoide secundare. Tolerana fa de structurile self se instaleaz n medulara lobulilor
timici. LT trebuie s fie tolerante fa de moleculele MHC proprii i fa de antigenele self.

Fenomenul prin care se induce tolerana fa de moleculele MHC proprii se numete
selecia pozitiv a LT imature. Ea se face prin prezentarea spre LT imature a moleculelor MHC
self. Selecia pozitiv cuprinde trei posibiliti :
- Sunt distruse LT care nu recunosc MHC.
- Sunt distruse LT care recunosc MHC i reacioneaz fa de ele.

- Sunt conservate LT care recunosc MHC, dar nu reacioneaz fa de ele.

Fenomenul prin care se induce tolerana fa de antigenele proprii se numete selecia
negativ a LT imature. Spre LT imature se prezint o mare varietate de antigene self. Antigenele
sunt prezentate pe MF, n complex cu molecule MHC self. LT imature care reacioneaz cu
autoantigenele se activeaz i n citoplasma lor se activeaz o endonucleaz care fragmenteaz
ADN celular. Procesul se numete apoptoz sau moartea programat a celulei.

Controlul nervos i hormonal al rspunsului imun

Axul hipotalamo-hipofizo-corticosuprarenalian are un efect supresor asupra rspunsului
imun, prin eliberarea glucocorticoizilor. De aceea condiiile de stress (inconfort termic, zgomot,
epuizare fizic, suprasolicitri psihice) scad capacitatea de aprare imun.

Controlul rspunsului imun prin sistemul LTS

LTS antigen-specifice recunosc determinanii antigenici de tip S din antigene i elibereaz
nite factori supresori care inhib RIU i RIC.

LTS idiotip-specifice produc factori supresori (TSF) care inhib RIU. Rceptorii pentru atigen
ai LTS idiotip-specifice au o structur diferit de restul LT. Ei cuprind o structur extracelular Ig-
like care se poate elibera, devenind o molecul solubil numit TSF (factor T supresor).
La inhibiia RIU particip trei tipuri de LTS idiotip-specifice care se activeaz una pe alta,
succesiv, realiznd cascada T supresoare :
- LTS inductorii recunosc epitopii prezentai pe APC. Ele elibereaz TSF1 care inhib LTH i
stimuleaz LTS transductorii.
- LTS transductorii elibereaz TSF2 care inhib LB i stimuleaz LTS efectorii.
- LTS efectorii elibereaz TSF3 care inhib prezentarea antigenului de ctre APC spre LTH.


CURSUL 5. IMUNOGLOBULINELE


Anticorpii sau Ig sunt produsul final al RIU. Ig sunt glicoproteine prezente n plasm, lichidul
interstiial i secreii. Ele au activitate de anticorpi, adic au capacitatea s recunoasc i s se combine
specific cu Ag. Fiecare anticorp recunoate specific un anumit determinant antigenic sau epitop, de
care se leag cu o poriune care are structura complementar cu a epitopului. Aceast poriune se
numete paratop, situs de legare sau situs combinativ.

Structura de principiu a Ig

Toate Ig au o structur asemntoare, reprezentat de o unitate tetracatenar. Planul de
organizare al domeniilor Ig se regsete n multe alte proteine, de exemplu la unii receptori de
suprafa. Proteinele care conin cel puin un domeniu imunoglo-bulinic constituie superfamilia Ig.

Ca model se analizeaz molecula de IgG1, care este format din patru lanuri :
- Dou lanuri grele H (heavy) identice ntre ele, lungi, asociate prin puni disulfurice, cu greutatea
molecular de circa 50 kDa. Lanurile H au n structur cte o component oligozaharidic.
- Dou lanuri uoare L (light) identice ntre ele, legate de lanurile H prin puni disulfurice, cu
greutatea molecular de circa 25 kDa.
Lanurile H i L sunt paralele i orientate cu captul N-terminal n aceeai direcie. Fiecare
lan H sau L are dou pri :
- Partea variabil este format din primii 100 de aminoacizi dinspre capatul N-terminal. Acest
domeniu are secvene de aminoacizi foarte variabile, care difer ntre clonele de anticorpi.
Domeniul variabil se noteaz cu V. VH se asociaz cu VL i formeaz situsul combinativ pentru
Ag. Fiecare monomer de Ig are dou situsuri combinative identice ntre ele, care recunosc
acelai epitop. Captul variabil al lanurilor H i L face recunoaterea Ag.
- Partea constant este format din restul lanului, spre captul C-terminal. Secvenele de
aminoacizi sunt relativ constante pentru fiecare clas de anticorpi. Domeniile constante se
noteaz cu C. Mai importante sunt domeniile constante C din lanurile H (CH), care sunt
responsabile de aciunile biologice ale Ig.


Domeniile Ig au o structur caracteristic rezultat prin plisarea ordonat a lanului
polipeptidic. Rezult dou structuri | suprapuse (structuri n foaie pliant sau |-sheet). Pliurile
sunt fixate prin puni disulfurice.

n funcie de clasa din care fac parte, Ig au mai multe aciuni biologice :
- Activeaz cascada complementului pe calea clasic.
- Se ataeaz de membranele unor celule prin receptori specifici. Cnd moleculele de Ig fixate de
membrane recunosc Ag, ele stimuleaz anumite funcii celulare. Tendina moleculelor de Ig de
a se ataa de suprafaa unor celule se numete citofilie.
- Traverseaz placenta.

n organism se sintetizeaz o varietate extrem de mare de molecule de Ig, estimate la circa
10
6
variante posibile. Variabilitatea structural se realizeaz printr-un proces de recombinare a
genelor care codific lanurile de Ig, n special regiunile variabile. n cursul diferenierii limfocitelor
B acioneaz o enzim specific numit recombinaza, care reunete aciunile de endonucleaz i
ligaz. Recombinaza elimin unele fragmente din genele V
k
, V

i V
H
i aduce n proximitate dou
fragmente de gen, care se asociaz aleator.

n funcie de partea constant a lanurilor H s-au descris la mamifere i la om cinci clase de Ig :
IgG, IgM, IgA, IgE, IgD.

Caracterele claselor de Ig

Clasa Greutatea
molecular
Concentraia
seric
% din
Ig serice
Funciile
majore
Activarea com-
plementului
IgG 150 000 Da 8-16 mg/ml 80% Aprarea antiviral,
antibacterian i
contra toxinelor
bacteriene n snge i
interstiiu
++
IgA 320 000 Da 1,4-4 mg/ml 13% Aprarea mucoaselor -

(forma dimeric)
IgM 900 000 Da 0,5-2 mg/ml 6% Ac aglutinani i
lizani contra bacteriilor
+++
IgD 185 000 Da sub 0,04 mg/ml sub 1% Funcie de BCR -
IgE 200 000 Da 17-450 ng/ml 0,002% Aprarea antiparazitar
Rol n anafilaxie
-

IG G

IgG reprezint peste 75% din totalul Ig circulante. Ele se gsesc n concentraie foarte mare
n plasm, ntre 8-16 g/l i sunt distribuite egal n interstiiu i n lichidul intravascular. Toate
subclasele de IgG trec transplacentar i realizeaz imunizarea pasiv umoral a nou-nscuilor n
primele luni de via.
Moleculele de IgG au greutatea molecular de circa 150 kDa. Ele au n general o durat de
via lung, de circa 3-4 sptmni. Excepie fac moleculele din subclasa IgG3, care triesc mai
puin de o sptmn (5-7 zile).
Toate subtipurile de IgG sunt caracteristice pentru RIU secundar, care apare la al 2,3,.. n
contact cu Ag. Sinteza lor este indus de IL-4, produs de LTH2.
Structura IgG

Lanurile H

Lanurile H sunt formate din circa 450 de aminoacizi i au o greutate molecular de 50 kDa.
n funcie de structura domeniilor constante din lanurile H se deosebesc patru subclase de IgG.
Lanurile H se noteaz 1-4 i ele caracterizeaz subtipurile de IgG 1-4. Lanurile 3 ale IgG 3 sunt
mai lungi i mai grele dect lanurile din celelalte subclase de IgG.
Lanurile H nu sunt liniare, ele au structuri spaiale secundare i teriare formate prin puni
disulfurice. Aceste structuri formeaz bucle sau domenii dispuse n dublu strat |-sheet. Un
domeniu are aproximativ 100 de aminoacizi.

Fiecare lan H are patru domenii : trei constante i unul variabil.
- Domeniul amino-terminal are secvene de aminoacizi foarte variabile, se numete VH (variabil
heavy) i particip la formarea situsului combinativ pentru Ag.
- Celelalte trei bucle sunt constante i se denumesc CH (constant heavy). Ele se noteaz dinspre
captul N-terminal cu CH1, CH2, CH3.

Zona de intersecie dintre cele dou lanuri H situat ntre CH1 i CH2 se numete zona
balama (hinge), pentru c este foarte flexibil. Datorit flexibilitii din zona balama, fragmentele
Fab au micri de baleiere i pot da moleculei IgG forma de T sau de Y. Mobilitatea favorizeaz
cutarea i recunoaterea Ag. n zona balama cele dou lanuri H se leag prin puni disulfurice.
Numrul acestor puni variaz ntre subclasele de IgG :
- IgG 1 are 2 puni disulfurice.
- IgG 2 are 4 puni disulfurice.
- IgG 3 are 11 puni disulfurice.
- IgG 4 are 2 puni disulfurice.
Durata de via a moleculelor de Ig depinde de numrul de puni disulfurice din zona balama
: cu ct sunt mai multe puni crete sensibilitatea moleculei la aciunea unor enzime sau radicali
liberi (ageni oxidani), iar molecula de Ig are viaa mai scurt. Din acest motiv moleculele de IgG 3
au viaa cea mai scurt, de 5-7 zile.

Lanurile L

Lanurile L sunt formate din circa 215 aminoacizi i au o greutate molecular de 25 kDa.
Fiecare lan L cuprinde dou bucle cu structur de dublu strat | :
- Domeniul VL este variabil i se afl la capatul amino-terminal.
- Domeniul CL este constant.
Pentru toate tipurile de Ig exist dou tipuri de lanuri L care difer puin la nivelul
domeniului CL. ntr-o molecul de Ig ambele lanuri L sunt de acelai tip.
- Lanurile L de tip k (kapa) sunt cele mai multe. Ele intr n structura a 2/3 dintre moleculele de
IgG.
- Lanurile L de tip (lambda) se regsesc la 1/3 dintre moleculele de IgG.


Fragmentele Fab i Fc

Din punct de vedere funcional o molecul de IgG are dou fragmente :
- Fab se gsete spre partea variabil, spre captul N-terminal.
- Fc se gsete spre partea constant, spre captul C-terminal.
Prin tratarea unei molecule de anticorp cu o enzim proteolitic numit papain,
monomerul de Ig se separ n dou fragmente Fab i un fragment Fc.

Fragmentul Ag-binding (Fab)

Poriunea de Ig format din lanul L unit cu domeniile corespunztoare din lanul H (bucla
VH i bucla CH1) se numete Fab (fragment Ag-binding, de legare a Ag). O molecul de IgG are
dou fragmente Fab. Fab cuprinde la captul N-terminal situsul combinativ pentru Ag sau
paratopul. Fab are funcia de recunoatere a Ag.
Ig recunosc Ag dup structura tridimensional sau spaial, pentru c recunosc
determinanii antigenici conformaionali.
Toate tipurile de Ig recunosc dou categorii de Ag :
- Ag solubile sau native, adic polizaharide sau molecule proteice.
- Determinanii antigenici de pe suprafaa Ag corpusculate : bacterii, virusuri, parazii, celule
singenice transformate n Ag (tumorale, infectate viral) sau celule alogenice (provenite prin
transplant).

Fragmentul cristalizabil (Fc)

Fragmentul cristalizabil (numit eronat fragmentul constant) este format din domeniile celor
dou lanuri H situate de la zona balama spre captul C-terminal. n cazul IgG, Fc cuprinde buclele
CH2 i CH3.
Fc este responsabil de funciile biologice ale moleculei de IgG :
- IgG activeaz complementul pe calea clasic. Activarea se face dup ce molecula de IgG a
recunoscut determinantul antigenic. Se exteriorizeaz o secven de aminoacizi de pe CH2, care
activeaz componenta C1q a complementului.

- IgG se pot lega prin domeniul CH3 de membrana unor celule care au receptori FcR. Dup ce s-
au ataat de aceti receptori, moleculele IgG stimuleaz unele funcii celulare : fagocitoza,
secreia unor factori toxici.
- Tot prin domeniul CH3, IgG se leag de receptorii FcR de pe celulele trofoblas-tului placentar.
Ele trec transplacentar, furniznd imunitatea pasiv la nou-nscut.

Situsul combinativ

Situsul combinativ pentru Ag este o cavitate mic format prin plicaturarea domeniilor VH i
VL. Plicaturarea se face prin puni disulfurice, sub form de dublu strat |. Ag intr n aceast
cavitate i angajeaz legturi cu domeniile V prin comple-mentaritate, pe principiul cheie-broasc.
Contactele cu Ag nu se fac pe toat lungimea domeniilor V. Secvenele de aminoacizi care
stabilesc legturi cu Ag sunt reunite sub denumirea de CDR. Restul secvenelor de aminoacizi, care
nu stabilesc legturi cu Ag, formeaz regiunea suport FR.

CDR

n lungimea fiecrui lan polipeptidic a domeniilor VH i VL sunt cte trei mici segmente
formate din 5-10 aminoacizi. Variabilitatea lor este foarte mare, mai mare dect variabilitatea din
restul domeniului. Ele se numesc regiuni hipervariabile sau CDR (complementarity determining
regions).
CDR sunt aezate la distane mari una fa de alta pe parcursul secvenei primare de
aminoacizi a domeniilor VH i VL, dar ele sunt aduse una lng alta prin plicaturare. Structura
spaial a situsului combinativ este foarte important. Dac se separ lanurile H i L, fiecare dintre
domeniile VH i VL pierde capacitatea de recunoatere a Ag. Structura spaial a CDR este
meninut de regiunea schelet a situsului combinativ.
CDR realizeaz contactele cu epitopii. Aceste contacte sunt punctiforme. CDR sunt aezate n
vrful unor plicaturi care intr n interiorul situsului combinativ. Secvenele de aminoacizi din CDR
sunt complementare cu structura epitopilor.
Totalitatea celor ase segmente CDR formeaz paratopul sau situsul de legare pentru Ag. El
recunoate epitopul. Paratopul d specificitatea legturii Ag-anticorp. Specificitatea recunoaterii
antigenice depinde de :
- Structura primar a CDR, adic felul i numrul aminoacizilor.

- Structura secundar a CDR, adic aezarea lor n spaiu.

FR

Regiunea suport sau schelet, denumit FR (framework region) cuprinde restul secvenelor
de aminoacizi din domeniile VH i VL care nu se leag cu Ag, dar care formeaz pereii situsului
combinativ. FR nu particip la contactul cu Ag, dar aeaz optim n spaiu CDR prin plicaturarea
buclelor VH i VL. Plicaturarea VH i VL contribuie la specificitatea situsului combinativ.

Plicaturarea transform domeniile VH i VL n structuri antigenice, mai precis n
determinani antigenici conformaionali : vrfurile buclelor se unesc i astfel unii aminoacizi ajung
n vecintate. Peptidele nou formate se comport ca Ag, numite idiotipi. Idiotipii declaneaz
sinteza unor anticorpi anti-idiotip.

De fapt situsul combinativ pentru Ag are dou funcii contrare :
- Este o structur de recunoatere a Ag.
- Este concomitent i o structur antigenic n sine, declannd un RIU.
Consecina este c de cte ori ptrund Ag n organism, se formeaz anticorpi, care devin Ag.
Ei determin un al doilea RIU, cu anticorpi anti-idiotip (anticorpi anti-anticorp). Un RIU declaneaz
alte RIU n cascad.
Aceti anticorpi anti-idiotip au rol n reglarea RIU, prn activarea cascadei LT supresoare. n
bolile autoimune anticorpii anti-idiotip au rol agravant.

Receptorii Fc R

Exist trei tipuri de FcR : I, II i III (CD64, 32 i 16). Toate tipurile au un segment extracelular
format din domenii Ig-like. Ele fixeaz IgG la nivelul domeniului CH3.
FcR sunt implicai n principal n legarea complexelor imune care conin IgG de suprafaa
celulelor fagocitare (PMN, monocite, MF) i a celulelor implicate n RIC (LTC, NK). Legarea IgG
stimuleaz dou funcii ale acestor celule :
- Fagocitoza complexelor imune, solubile sau care conin Ag corpusculate mici.

- ADCC, adic citotoxicitatea celular anticorp-dependent, care reprezint liza Ag corpusculate
voluminoase fr fagocitarea lor :
Celulele fagocitare deverseaz n exterior enzimele lizozomale i radicalii de oxigen.
LTC i NK distrug celulele int prin eliberarea perforinei, a granzimelor i prin
declanarea apoptozei.
Fc RII se gsete i pe trofoblastele placentare. El particip i la transportul transplacentar
al IgG, care asigur imunitatea pasiv la ft i la nou-nscut.

Particulariti funcionale ale subclaselor de IgG

IgG 1

IgG 1 se gsesc n cantitatea cea mai mare, reprezentnd cam 66% din totalul moleculelor
de IgG. Ele activeaz moderat complementul pe calea clasic. IgG 1 traverseaz uor placenta i
contribuie major la imunitatea pasiv a nou-nscutului.
IgG 1 sunt anticorpii cei mai eficace pentru aprarea antibacterian :
- Lizeaz germenii prin activarea cascadei complementului.
- Au funcie de opsonine, favoriznd fagocitoza germenilor de ctre celulele fagocitare care au pe
suprafa receptori Fc R.
- Neutralizeaz exotoxinele bacteriene.
IgG 2

IgG 2 reprezint cam 25% din totalul moleculelor de IgG. Ele activeaz slab complementul i
dintre toate subclasele de IgG strbat cel mai greu placenta.

IgG 3


IgG 3 reprezint cam 7% din totalul moleculelor de IgG. Ele au lanurile H mai lungi, iar
acestea sunt unite n zona balama prin 11 puni disulfurice, sensibile la aciunea enzimelor i
radicalilor liberi din lichidul extracelular. De aceea IgG 3 au viaa scurt, sub o sptmn.
Dintre toate subclasele de IgG, IgG 3 activeaz cel mai intens complementul pe calea clasic.

IgG 4

IgG 4 reprezint cam 5% din totalul moleculelor de IgG. Ele nu activeaz complementul pe
calea clasic. IgG 4 sunt anticorpi citofili, adic dup sintez nu rmn n lichidele organismului. Ei
se fixeaz pe membrana unor celule (mastocite i bazofile), la fel ca IgE. Dac mai trziu IgG 4 au
contact cu Ag, induc activarea mastocitelor i bazofilelor, care elibereaz mediatori ai inflamaiei
(histamin, PAF), producnd o reacie de tip alergic.

IgM

IgM se gsesc n plasm n concentraie de circa 1 g/l, au durata de via de 10 zile i au
greutatea molecular de circa 900 kDa. Din cauza greutii moleculare
mari, IgM nu traverseaz placenta.
Moleculele de IgM se gsesc n organism sub form de monomeri sau de pentameri :
- Sub form de monomer IgM sunt prezente pe suprafaa LB, avnd funcie de BCR.
- IgM serice sunt pentameri. Fiecare din cele cinci subuniti seamn cu o molecul de IgG,
format din dou lanuri H i dou lanuri L. Monomerii de IgM sunt unii la captul -COOH prin
puni disulfurice i printr-o pies de jonctiune (lanul J) care este o glicoprotein sintetizat de
plasmocitele care sintetizeaz IgM.
Fiecare lan H are cinci domenii, unul variabil i patru constante.
IgM particip la aprarea contra virusurilor i n special contra bacteriilor. Ei sunt anticorpi
aglutinani pentru c au 10 situsuri combinative identice, dintre care sunt utilizate cinci, astfel c o
molecul de IgM poate s fac puni ntre dou Ag corpusculate.

IgM este clasa cea mai activatoare de complement pe calea clasic, pentru c moleculele de
IgM sunt pentameri, deci o molecul de IgM are n total cinci situsuri de activare a
complementului. De aceea IgM sunt anticorpi citolitici.
IgM sunt anticorpii caracteristici pentru RIU primar. Sinteza lor este stimulat de IL-2,
produs de LTHp. Ei sunt primii anticorpi aprui att filogenetic n evoluia vertebratelor, ct i
ontogenetic, la nou-nscut. O mare parte din anticorpii naturali ai grupelor sanguine, factorii
reumatoizi din poliartrita reumatoid i aglutininele la rece din anemiile hemolitice autoimune sunt
IgM.

IgA

IgA sunt responsabile de aprarea imun la nivelul mucoaselor. IgA se gsesc egal distribuite
n circulaie, n interstiiu i n secreii, sub dou forme : serice i secretorii.
IgA sunt sintetizate n cadrul RIU secundar. Sinteza lor este favorizat de IL-5, produs de
LTH2.

IgA serice sau circulante

IgA serice se gsesc ntr-o concentraie de 1-4 g/l, reprezentnd ntre 5-25% din totalul Ig
serice. Dintre moleculele de IgA serice, 90% sunt monomeri i 10% sunt polimeri formai din dou,
trei sau patru molecule reunite printr-o pies J analog cu piesa J din structura IgM.
IgA serice au urmtoarele caracteristici :
- Au o greutate molecular de 160 kDa.
- Triesc 10-12 zile.
- Au rol n aprarea antiviral i antibacterian.
- Nu activeaz complementul.
- Nu traverseaz placenta.

IgA secretorii

IgA secretorii (IgAs) sunt dimeri. Cele dou molecule sunt unite cu o pies de jonciune J i
cu o pies secretorie care protejeaz molecula IgAs de enzimele din secreiile digestive.

IgAs sunt prezente n secreiile digestive, bronice, n lacrimi, saliv i n laptele matern.
50% din IgAs provin din IgA serice dimerice iar 50% sunt produse de plasmocitele din GALT i
BALT.
IgAs sunt exocitate activ prin celulele epiteliale. Toate celulele epiteliale produc piesa
secretorie, care este expus pe membran la polul sanguin al celulei i se leag de dimerii de IgA.
Dimerii de IgA sunt endocitai ca vezicule de pinocitoz i sunt ferii de aciunea enzimelor
intracelulare. n lumenul digestiv sau bronic moleculele dimerice de IgAs sunt exocitate. Piesa
secretorie are o structur care rezist la aciunea enzimelor proteolitice.
n lumen IgAs sunt libere n secreii sau se aeaz n monostrat la polul luminal al celulelor
epiteliale, formnd o barier antiviral i antibacterian la nivelul mucoaselor. De asemenea ele
opresc substanele alergene exogene.
Deficitul congenital de IgAs duce la infecii frecvente digestive i respiratorii la copil. n
deficienele de IgA, acestea sunt parial nlocuite cu IgM, care au capacitatea de a lega piesa
secretorie.
IgAs din colostru i din laptele matern sunt sintetizate de plasmocitele migrate spre glanda
mamar spre finalul sarcinii i n cursul alptatului. Aceste IgAs ajung n tractul digestiv al copilului
ca microvezicule care se afl n citoplasma PMN i monocitelor din laptele matern. Cnd PMN i
monocitele ajung n contact cu flora intestinal a copilului, ele elibereaz IgAs care se fixeaz pe
epiteliul digestiv.

IgD

IgD seamn structural cu IgG, dar au o zon balama mai lung i foarte sensibil la aciunea
hidrolazelor. Din acest motiv durata de via a IgD este de numai 6 zile i IgD se izoleaz greu n
stare pur. IgD au greutatea molecular de 185 kDa. Concentraia seric a IgD este foarte sczut,
de circa 0,03 mg/ml.
Monomerii de IgD se gsesc pe suprafaa LB, avnd funcie de BCR, n special la ft i la nou-
nscut. S-a descris activitate de anticorp a IgD serice fa de unele Ag : penicilina, proteinele din
lapte, insulina, Ag tiroidiene.

IG E


IgE sunt formate dintr-o singur unitate tetracatenar. Lanul greu c este format din cinci
domenii, unul variabil i patru constante. Fragmentul Fc cuprinde trei domenii constante. Molecula
de IgE nu are o zon balama i din aceast cauz ea este foarte rigid.
IgE sunt anticorpi citofili, adic dup ce sunt sintetizai nu rmn n lichidul extracelular, ci se
ataeaz prin receptori specifici pe suprafaa mastocitelor i bazofilelor.
IgE se afl la indivizii normali n concentraii serice extrem de sczute, de ordinul ng/ml. Ele
sunt implicate n aprarea antiparazitar. Dup fixarea pe suprafaa paraziilor, IgE sunt
recunoscute de eozinofile, care distrug paraziii. Concentraia IgE crete mult n alergii i n bolile
parazitare.

CURSUL 6. SISTEMUL COMPLEMENT


Definiia i funciile sistemului complement

Complementul este un sistem multienzimatic format din aproximativ 20 de componente,
care particip la RIU. El are rol de mecanism efector auxiliar, fcnd legtura dintre aprarea
nespecific (inflamaia) i aprarea specific (imun).
Sistemul complement are funcii n inflamaie i n RI :
- prin anafilatoxine (C3a i C5a) are efect intens proflogistic : stimuleaz degranularea
mastocitelor i bazofilelor, cu eliberarea histaminei i au efect intens chemotactic asupra PMN
- prin C3b, produs permanent pe calea alternativ, realizeaz opsonizarea, adic recunoaterea
imunologic nespecific a unor structuri non-self.
- este sistem efector, adic particip la distrugerea i eliminarea Ag, n 2 moduri :
- ajut fagocitoza - pentru Ag solubile.
- produce liza osmotic - pentru Ag corpusculate : hematii, trombocite, bacterii.
n realitate funciile de recunoatere nespecific i de liz osmotic a Ag corpusculate
acioneaz succesiv.


Fagocitoza complexelor imune
n cadrul RIU se formeaz Ac care se combin cu Ag solubile i formeaz complexe imune.
Complexele trebuie eliminate din organism prin fagocitoz, de ctre MF i neutrofile. Fiziologic
complexele imune se produc cu exces de Ac i formeaz reele. n ochiurile lor se prinde C3b,
produs continuu pe calea altern a C. Fixarea covalent a moleculelor C3b mpiedic legarea
fragmentelor Fc ale Ig i formarea unor agregate mari i insolubile. Complexele imune formate au
dimensiuni relativ mici.
- dac complexele imune sunt n esuturi, ele sunt captate de MF care au receptori CR1 pentru
C3b.
- dac complexele imune sunt n circulaie, ele sunt captate de hematii, care au pe suprafa
receptori CR1. Acestea transport complexele imune pn la la MF din splin i ganglionii
limfatici, care le fagociteaz.

Liza osmotic a Ag corpusculate
Ac specifici (IgG sau IgM) opsonizeaz Ag corpusculate, de exemplu bacterii.
Ataarea Ac nu are efect de distrugere a bacteriei. Distrugerea se produce prin aciunea
complementului.
Dup recunoaterea Ag, n molecula de Ac (IgG sau IgM) apar modificri conformaionale. Se
exteriorizeaz situsul activator pentru complement de pe fragmentul Fc (CH2 sau CH3), care
activeaz calea clasic a complementului.
Prin activarea cii clasice se formeaz complexul enzimatic MAC (membranary attack complex),
tubuliform. El se depune pe suprafaa Ag corpusculate i perforeaz membrana. Ag se
hiperhidrateaz (intr ap i Na) i este distrus prin liz osmotic.

De fapt sistemul complement particip la prima i la ultima etap a RIU fa de Ag
corpusculate :
- prima etap a recunoaterii Ag este opsonizarea membranelor non-self, prin depozitarea pe
suprafa a componentei C3b format continuu pe calea altern.
- bacteriile opsonizate sunt captate de APC, care coopereaz cu LTH. n final LB se activeaz i se
transform n plasmocite care produc Ac specifici. Ac se fixeaz pe membranele non-self i
activeaz complementul pe calea clasic, cu formarea MAC i perforarea membranelor
bacteriene.

Calea altern acioneaz n prima etap a RIU (opsonizarea), favoriznd captarea Ag de ctre
MF. Calea clasic acioneaz n ultima etap : distrugerea Ag corpusculat prin liz osmotic.

Caracterele sistemului complement

Cele mai importante caractere de funcionare a sistemului complement sunt :
- sistemul complement funcioneaz pe principiul cascadei : n mediile lichide fiecare factor al
complementului este sub form de enzim inactiv (proenzim sau zimogen). Cnd zimogenul
se activeaz, enzima activ acioneaz pe alt zimogen, etc. Activarea merge n paralel cu
amplificarea procesului. O molecul de C1 activat duce la activarea a mii de molecule C3.
- zimogenul se activeaz prin procese de proteoliz limitat. Zimogenul se desface n 2 fragmente
: mic (a) i mare (b).
- reaciile sistemului complement se desfoar pe membrana celulei int : frag-mentul mic a
rmne n faza fluid, dar fragmentele b nou formate se depoziteaz pe membrana non-self.
Prin depuneri succesive pe suprafaa membranei se formeaz complexe enzimatice
macromoleculare.

Schema de activare a cascadei complementului

Evenimentul central al activrii cascadei complementului este conversia componentei C3 n
fragmentele C3a i C3b. Conversia se face prin proteoliza limitat sub aciunea enzimei C3-
convertaza. Aceasta poate fi sintetizat pe calea altern sau pe calea clasic. Ea are structuri
diferite pe cele 2 ci.
Pe ambele ci, C3b activeaz factorii din secvena terminal : C5b, C6, C7, C8, C9. Se
formeaz un complex multienzimatic numit MAC (complexul de atac al membranei), cu structur
tubular, care perforeaz membrana Ag corpusculat.

Calea clasic funcioneaza intermitent, numai atunci cnd n mediul intern apar complexe
imune membranare, adic Ac ataai de membrana Ag corpusculate.

Calea altern funcioneaz permanent, la un nivel bazal sczut. Ea produce continuu mici
cantiti de C3b. Dac n mediul intern apar Ag corpusculate (bacterii, virui), se declaneaz

ansa de amplificare a cascadei complementului pe calea altern i se ajunge tot la complexul
MAC.

Factorii din calea clasic a C

C1
C1 acioneaz doar pe calea clasic. El este un complex trimolecular format din C1q, C1r i
C1s. Activarea C1q,r,s se face dup ce Ig au recunoscut Ag membranare.
- C1q este unitatea de recunoatere pentru complexele imune. Ea este format din 6 lanuri
identice, care l captul C-terminal au o form globular i se deschid ca un buchet n spaiu.
ntre ramurile buchetului sunt aezate : C1-inh, un factor care mpiedic activarea spontan a
C1r i C1s, precum i complexul C1r-C1s. Dup legarea de Ig, C1q elimin C1-inh i activeaz C1r.
- C1r este o serinesteraz. Ea activeaz C1s.
- C1s este o serinesteraz. Ea cliveaz 2 factori ai cascadei complementului, n ordine C4 i C2.

C2
C2 acioneaz doar pe calea clasic i are 1 lan peptidic. ub aciunea C1s, C2 se desface n
C2a i C2b.
- C2a rmne solubil i are efecte proinflamatorii.
- C2b se leag de membrana celulei int indirect, prin C4b.

C3
C3 este componenta central din sistemul complement. Ea este activat de C3-convertazele
din calea clasic i altern. intre toate componentele, C3 se gsete n concentraiile serice cele
mai mari (1 mg/ml).
C3 este un heterodimer din 2 lanuri : alfa (mai mare) i beta (mai mic), fixate prin legturi
disulfurice. Lanul alfa are un mic buzunar hidrofob n care este relativ internalizat o grupare tiol-
esteric, electronofil, care se leag de membranele celulare.
C3 convertaza scindeaz lanul alfa n 2 fragmente inegale :

- fragmentul mai mic, dinspre captul N-terminal, devine C3a sau anafilatoxina. C3a rmne n
faza lichid i are aciuni proinflamatorii : vasodilataie, creterea permeabilitii,
chemotactism. Aciunile se exercit direct i prin activarea mastocitelor i bazofilelor.

- fragmentul mare din lanul alfa rmne cu lanul beta i formeaz componenta C3b, care are
tendina permanent de ataare la membranele celulare sau la complexele imune. n C3b se
exteriorizeaz gruparea tiol-esteric. Ea este electronofil i se leag cu gruprile -OH i -NH2
de pe membranele celulare. Astfel se produce recunoaterea imunologic nespecific a Ag
corpusculate i opsonizarea lor. Depozitarea C3b pe suprafaa Ag corpusculate este esenial
pentru funcia ambelor ci ale complementului, clasic i altern.

Depozitarea C3b pe membrane se poate face n 2 moduri :
- dac C3b se depoziteaz ntr-un strat, se produce opsonizarea, care favorizeaz fagocitoza Ag
corpusculat de ctre celulele cu receptori CR (MF, neutrofil).
- dac C3b se depune n complex cu C3-convertaza, se produce un complex trimolecular C4b2b3b
care reprezint C5-convertaza, care mai departe activeaz MAC.

Gruparea tiol-esteric este important i pentru funcionarea cii alterne. Gruparea este
incomplet internalizat i poate fi disociat lent de moleculele de ap. Cnd gruparea tiol esteric
se disociaz, pe lanul alfa se exteriorizeaz un situs combinativ care fixeaz factorul B al cii
alternative a complementului. Complexul C3 hidratat-B activeaz n continuare calea alternativ,
pn la producerea de molecule C3b sau pn la generarea MAC. Calea alternativ a
complementului funcioneaz permanent, la un nivel bazal sczut.

C4
C4 se activeaz doar pe calea clasic, prin aciunea C1s, care desface C4 n 2 fragmente :
- C4a este mai mic, rmne n faza lichid i are efecte proinflamatorii.
- C4b este mai mare, se leag de membrana celulei int printr-o grupare tiol-esteric. Ea se
leag de gruparile -OH, -NH2 de pe membrana celulei int.

C5
Sub aciunea C5-convertazei se produce clivarea C5 n 2 fragmente :

- C5a cu rol proinflamator (anafilatoxina)
- C5b care face parte din MAC

C6, C7
C6 i C7 sunt beta2 globuline formate din 1 lan. C7 are funcie de detergent, legndu-se de
fosfolipidele membranare.

C8
C8 este o gama-globulin format din 3 lanuri, cu funcie de polimeraz a C9.

C9
Structura C9 seamn cu cea a perforinelor din granulaiile LTC. n stare inactiv C9 circul
sub form unor molecule hidrofile. Sub aciunea C8 acestea se leag ntre ele prin puni de Ca, cte
3-12 molecule. Moleculele C9 devin amfipatice, adic au regiuni hidrofile i hidrofobe. Ele C9
formeaz structuri tubuliforme care perforeaz membrana celulei int i produc liza osmotic a
celulei.
MAC este format din C5b, C6, C7, C8 i C9, dar componenta activ este C9.

Activarea cascadei complementului pe calea clasic

Activarea cascadei complementului are 3 etape importante :
- generarea C3 convertazei
- generarea C5 convertazei
- generarea MAC

Generarea C3 convertazei
Calea clasic a complementului se declaneaz n prezena complexelor imune pe diverse
membrane ale Ag corpusculate.

Cei mai puternici activatori ai cii clasice sunt n ordine : IgM / IgG 3 / IgG 1. IgG 2 i IgG 4
sunt slab activatoare ale complementului.
Mecanism :
- IgG fac recunoatere Ag-specific prin Fab. n moleculele de Ig se produc modificri
conformaionale care se transmit la Fc, unde se exteriorizeaz secvena de aa activatoare a
complementului.
- Secvena activatoare este recunoscut de C1q, care se leag prin poriunea globuloas. De C1q
se leag C1r care activeaz C1s.
- C1s cliveaz 2 componente, n ordine :
- C4 n C4a i C4b,
- C2 n C2a i C2b.
- C4a i C2a rmn n faza fluid, au efect proflogistic slab.
- C4b se depoziteaz pe membrana celular lng complexele imune. El se leag de membran
prin gruparea tiol esteric.
- C2b se leag de C4b fixat pe membran. Se formeaz complexul C4bC2b, care este C3-
convertaza cii clasice. n aceasta, C2b este enzima iar C4b este cofactor.

Generarea C5 convertazei
- C3 convertaza (de fapt C2b) cliveaz C3 n C3a i C3b. Se desprinde fragmentul mic C3a
(anafilatoxina) care rmne solubil i are efecte proflogistice : vasodila-taie, creterea
permeabilitii capilare, efecte chemotactice.
- C3b se leag de membrane prin gruparea tiol-esteric, lng complexul C4b2b.
- Se formeaz complexul C4b2b3b, care este C5-convertaza cii clasice. Partea enzimatic este
C3b.
- C3b acioneaz pe C5 i l descompune n C5a i C5b.
- C5a rmne solubil. Ea este o anafilatoxin cu aceleai efecte ca C3a, dar mai puternic.
- C5b contribuie la formarea MAC.

Generarea MAC
- C5b se combin n mediile lichide extracelulare cu C6 i C7. Se formeaz un complex
trimolecular puternic chemoatractant pentru fagocite.
- C7 are aciune de detergent, care fixeaz complexul C5b67 de membrana celulei int.
- C7 activeaz C8, care se fixeaz de membran i devine polimeraz.

- C8 polimerizeaz moleculele C9, care se organizeaz n structuri tubulare i perforeaz
membrana celular, producnd liza osmotic a Ag corpusculat.

Cascada complementului se declaneaz pe calea clasic prin activarea IgG sau IgM. Aceti
Ac sunt denumii citotoxici pentru c au citotoxicitate, adic lizeaz celula de care s-au fixat prin
activarea cascadei complementului pe calea clasic.
CURSUL 7. RSPUNSUL IMUN CELULAR


RIC are rol de aprare n trei condiii patologice :
- eliminarea celulelor infectate cu microorganisme cu dezvoltare intracelular : virusuri, bacterii
(mycobacterii, Listeria, Brucella, Legionella).
- supravegherea i distrugerea celulelor canceroase.
- rejecia grefelor.

RIC este implicat n recunoaterea i distrugerea :
- celulelor singenice devenite Ag : celulele infectate sau neoplazice;
- celulelor alogenice aprute prin gref sau transplant.

Recunoaterea i distrugerea celulelor antigenice se face prin dou tipuri de celule: LTC (LT
citotoxice) i celulele NK (natural killer). Acestea recunosc celulele non-self prin mecanisme
diferite, dar le distrug printr-un mecanism comun, numit citotoxicitate extracelular sau
citotoxicitate mediat celular.
La contactul cu celula int, LTC i NK elibereaz nite mediatori care :
- lezeaz membranele celulelor non-self, ducnd la liza osmotic a celulelor.
- altereaz nucleul celulelor int, producnd apoptoza lor.

Mecanismele de recunoatere n RIC

LTC
LTC fac recunoatere imunologic specific : LTC recunosc celula int dup Ag expuse pe
membran. Un anumit Ag este recunoscut doar de TCR exprimate de clona LTC corespunztoare.
Fiecare Ag este recunoscut de o clon specific de LTC. Diversitatea Ag este foarte mare, de
ordinul milioanelor, astfel c i recunoaterea se face prin milioane de clone diferite de LTC.

Spre deosebire de NK, LTC sunt diversificate clonal. Fiecare clon de LTC se definete prin
receptorii TCR de suprafa.
Ag sunt endogene, expuse pe MHC I. Recunoaterea este asociativ, MHC I dependent. La
ea particip complexul TCR-CD3 i coreceptorul CD8.

NK
Celulele NK sunt o populaie de celule identice, nedivizat n clone diferite. Ele fac o recunoatere
imunologic nespecific, MHC I independent. Celulele NK recunosc celulele int n 3 moduri :
- prin molecule cu structur de lectine
- prin receptorii FcR III, cu care NK fac o recunoatere imunologic nespecific mediat prin IgG,
care duce la ADCC
- prin receptorii NK-R
LTC

LTC sunt cea mai important clas de celule implicate n RIC, pentru c ele pot s recunoasc o mare
varietate de Ag. Exist o foarte mare diversitate de clone de LTC. LTC au pe suprafa 3 tipuri de receptori :
- de recunoatere a Ag
- cu rol accesor
- cu rol n adeziunea intercelular

Receptorii cu rol n recunoaterea Ag
Receptorii de recunoatere a Ag fac recunoatere asociativ.Aceti receptori reprezint
principala cale de activare a LTC, care se produce dup recunoaterea Ag. Ei realizeaz o activare
parial, pentru c recunoaterea Ag nu este un stimul suficient pentru ca LTC s distrug celula
int. Distrugerea celulei int se produce cnd activarea LTC este finalizat de IL2, eliberat de
LTH1.

TCR recunoate Ag i MHC I, prin cele 3 perechi de CDR :
- CDR 1 i 2 se leag de domeniile polimorfe ale MHC I : alfa 1 i alfa 2.
- CDR 3 se leag de Ag prezentat.

Cnd exist legturi la toate cele 3 CDR se produc modificri conformaionale n TCR care se transmit n
interiorul celulei prin CD3.
CD8 recunoate domeniul monomorf (constanat) alfa 3 al MHC I.

Receptorii cu rol accesor n activarea metabolic
Receptorii cu rol accesor sunt : CD25, CD28 i CD45.
- CD25 este receptorul pentru IL2 produs de LTH1. CD25 apare numai pe membrana LTC care s-a
legat de celula int.
- prin segmentul intracelular lung, CD28 activeaz mesagerii secunzi proteici din LTC care induc
producia de citokine.
- CD45 este legat de lanul zeta al CD3 i are funcie de PTP.

Receptorii cu rol n adeziunea intercelular
Receptorii de adeziune au o importan deosebit pentru funcia LTC. Aceti receptori dau
LTC posibilitatea contactului cu celula non-self, care presupune 3 etape :
- adeziunea LTC de endoteliul din zona de esut unde se afl celulele int. Legarea de endoteliu
permite diapedeza.
- deplasarea LTC prin esut spre celulele int.
- adeziunea LTC de celulele int.



Adeziunea de endoteliu
Pe parcursul circuitului n organism, LTC ader de endoteliu n dou zone :
- LTC naive ader de endoteliul de tip HEV din gg limfatici i de endoteliul arteriolelor din pulpa
alb a splinei. La acele niveluri LTC trec din vase n esutul limfoid pentru ca s preia informaia
antigenic i s se activeze.
- LTC cu memorie sau activate trebuie s ajung din circulaie n esuturile unde se afl celulele
int. n zonele respective endoteliul se modific sub aciunea citokinelor (IL1, TNF alfa i IFN
gama) produse de MF i de celulele dendritice activate din focar. Endoteliul devine de tip HEV i
exprim o serie de molecule cu rol de adeziune


Adeziunea de proteinele matricei extracelulare
Adeziunea de proteinele matricei extracelulare se realizeaz printr-o clas de receptori numi
VLA, care reprezint o subfamilie din marea familie a integrinelor.
Integrinele sunt molecule de adeziune care faciliteaz contactele intercelulare i adeziunea celulelor
de componentele matricei extracelulare, asigurnd astfel deplasarea celulelor prin esuturi. Integrinele
sunt implicate n :
- migrarea tisular a celulelor n perioada embriogenezei
- metastazarea tumorilor
- procesele de vindecare a leziunilor tisulare
- procesele trombotice
- funcionarea LTH i LTC
Integrinele sunt formate din 2 lanuri, alfa i beta. Toate moleculele VLA au lanul beta de tip
1, de aceea ele se numesc beta1-integrine. Denumirea de VLA (very late antigen) vine de la faptul
c moleculele VLA1 i VLA2 apar pe suprafaa LT dup un interval mai lung de la activarea in vitro a
celulei, de 2-4 sptmni.
Moleculele VLA1 i 2 sunt caracteristice pentru LT. VLA ader la proteinele din matricea extracelular, dnd LTC
posibilitatea s se deplaseze prin esuturi i s se concentreze intratisular acolo unde sunt celulele non-self.

Adeziunea de celulele int
LTC ader de celulele int i dup aceea recunosc structura Ag prezentate pe acestea.
Contactul iniial este Ag-independent. Adeziunea depete forele electro-statice de respingere
dintre celule i aduce membranele celulare n contact intim, permind contactul direct dintre
complexul TCR-CD3 de pe LTC i complexul Ag-MHC de pe celula int.
Adeziunea se face prin receptorii CD2 i LFA1.
- CD2 se leag cu LFA3
- LFA1 se leag cu ICAM1



Traficul i homingul LT

Limfocitele circul permanent prin organism. Ele strbat sngele, limfa, ganglionii limfatici, splina i
esuturile non-limfoide. Aceste circuite reprezint traficul limfocitelor. Pe parcursul traficului prin organism, limfocitele
stagneaz n anumite zone. Procesul prin care limfocitele sunt atrase specific i stagneaz la nivelul anumitor esuturi,
mai precis n ariile de prezentare a Ag i n esuturile unde exist procese inflamatorii, se numete homing .

Dintre toate limfocitele, LT sunt cele care sunt recirculate mai intens n cutarea Ag. Ag tisulare sunt
drenate i prezentate spre LT n ganglionii limfatici. Ag sanguine sunt prezentate n splin, iar Ag de la nivelul mucoaselor
sunt prezentate spre LT la nivelul MALT.
- LT naive ajung n ganglionii limfatici prin vasele limfatice aferente. LT au pe suprafa o serie de
molecule numite generic homing receptors , adic molecule care induc ptrunderea LT n
anumite esuturi. n ganglioni LT ader de un tip particular de endoteliu care se gsete n
venulele postcapilare, numit HEV (high-walled endothelium). Pe suprafaa HEV se gsesc nite
molecule de adeziune specifice care favorizeaz ptrunderea selectiv a LT n parenchimul
ganglionar, n corticala intern. Acolo se produce prezentarea epitopilor spre LT.
- LT activate ies din ganglionii limfatici prin vasele limfatice eferente. Limfaticele eferente din
principalele grupuri ganglionare se vars n canalul toracic, care se vars la rndul lui n vena
brahiocefalic stng. Astfel limfocitele ajung n circulaia sanguin.
- Un alt loc de activare a LT este splina. Din snge LT pot s intre n pulpa alb a splinei traversnd
pereii arteriolelor centrale. Dup prezentarea epitopilor la nivelul PALS interne, LT prsesc
splina prin capilarele sinusoide ale pulpei roii i de aici prin vena splenic.
- LT activate la nivelul ganglionilor limfatici sau al splinei ajung apoi n esuturile unde exist
procese inflamatorii. Endoteliul din zonele respective este de tip HEV. LT ader de endoteliu
prin intermediul receptorilor VLA4 i LFA1. n esuturi, LTC distrug celulele devenite non-self.
LTC sunt asistate n acest proces de ctre LTH activate (LTH 1) i de ctre MF locale.

RIC se declaneaz n organele limfoide secundare - splin i gg limfatici, pentru c la acel
nivel sunt prezentate Ag spre LTH i LTC. Locul de desfurare a RIU este strict intratisular, pentru
c LT Ag-specifice se acumuleaz n esutul unde exist Ag. La nivel tisular LTC se activeaz
complet, prolifereaz, coopereaz cu LTH1 i distrug Ag declanator.




Recunoaterea celulei int de ctre LTC

LTC recunosc specific celulele int, pentru c acestea prezint pe suprafa Ag cuplate cu moleculele
MHC I. Normal celulele organismului prezint diverse fragmente polipeptidice rezultate din proteinele celulare

degradate n cursul procesului de regenerare fiziologic sau din proteinele cu structur defectuoas, pe care celula le
distruge. Asamblarea MHC I cu aceste fragmente se face n RER, iar dup aceea complexul rezultat este expus pe
membran. Celulele sistemului imun, n special LT, nu reacioneaz fa de fragmentele peptidice self, deoarece nc din
timpul maturaiei intratimice au fost distruse clonele de LT care recunosc autoAg.

Celula infectat viral sau care a devenit neoplazic prezint pe suprafa n complex cu moleculele MHC I
diverse Ag virale sau neoplazice, fa de care LTC reacioneaz.
Fragmentele din primele celule int distruse de LTC sunt fagocitate de MF, care devin APC i
prezint polipeptidele non-self pe suprafa n complex cu moleculele MHC II. Sunt stimulate LTH
care se difereniaz n LTH1. Aceste celule secret IL2 i stimuleaz astfel chemotactismul,
proliferarea i activarea de noi LTC. LTC au pe suprafa CD25, receptorul pentru IL2.

NK

NK fac parte din grupul mai numeros al limfocitelor mari, numite i non-B non-T. Limfocitele
non-B non-T au morfologie de LGL (large granular lymphocytes). NK au mai mult citoplasm dect
limfocitele mici i pe frotiu n citoplasm se vizualizeaz granulaii azurofile. La microscopul
electronic granulaiile sunt electronodense.

NK au rol n aa-numita imunitate nnscut sau nespecific. Ele intervin n primele
momente ale unei infecii virale i elimin o parte dintre celulele self infectate. n acest mod ele
ofer organismului rgazul pentru proliferarea clonelor de LB i LT Ag-specifice, care vor eradica
infecia. De asemenea, celulele NK recunosc i distrug celulele tumorale. Recunoatererea celulei
int este imunologic nespecific.

NK prezint pe suprafa cele 3 tipuri de receptori :
- receptorii de adeziune intercelular sunt CD2 i LFA1
- receptorii cu rol n activarea NK sunt : CD25 (receptor pentru IL2) i receptori pentru IFN

- receptorii pentru recunoaterea celulei int



Recunoaterea celulei int de ctre NK

NK recunosc celula int nespecific, prin mai multe mecanisme :
- recunoaterea nespecific mediat prin IgG : NK prezint pe suprafa receptori Fc R, prin care
recunosc i distrug celulele opsonizate cu IgG.
- recunoaterea prin receptori de tip lectinic : pe suprafaa celulelor infectate viral apar structuri
glicoproteice cu greutate molecular mare. Aceste structuri sunt recunoscute prin receptori cu
structur lectinic de pe membrana NK.
- recunoaterea direct prin NK-R : se presupune c pe suprafaa NK se afl receptori NK-R care
recunosc o structur prezent fiziologic pe membrana tuturor celulelor somatice din organism.
La celulele sntoase aceste structuri int sunt mascate de moleculele MHC I. Probabil c la
celulele infectate viral sau malignizate scade expresia membranar a MHC I i se demasc
ligandul membranar pentru NK, care se ataeaz de celule i le distruge.

Distrugerea celulei int prin citotoxicitatea extracelular

LTC i NK realizeaz liza celulei int prin mecanisme asemntoare, prin eliberarea unor
mediatori care produc leziuni ale membranei i apoptoz. Mediatorii sunt coninui n granulaiile
vizibile n LTC activate i n NK. Cei mai importani mediatori citotoxici sunt : perforina,
limfotoxina, granzimele i TNF.

Perforina
Perforina sau citolizina are o structur polipeptidic asemntoare cu componenta C9 a sistemului
complement. Perforina este eliberat ca monomeri la contactul LTC sau NK cu celula int. Monomerii polimerizeaz sub
aciunea ionilor de Ca i formeaz structuri tubuliforme care perforeaz membrana celulei int i o permeabilizeaz
pentru ap i ioni, producnd liz osmotic.


Granzimele
Granulele conin i o familie de serinproteaze numite granzime. Dintre acestea s-au
individualizat unele enzime cu funcie citotoxic, numite fragmentine.

Leziunile nucleare
n celula int se activeaz o endonucleaz Ca-dependent care fragmenteaz ADN n uniti
de 200 kbaze. Lezarea ADN se produce n punctele de trecere dintre nucleozomi, acolo unde
catena de ADN este vulnerabil. Procesul se numeste apoptoz sau moartea programat a celulei.
Endonucleaza este stimulat de o serie de citokine :
- unele IL secretate de limfocite
- TNF alfa produs de LTC i de MF activate
- TNF beta produs de LTH
1
, LTC i NK
ELEMENTE DE FIZIOPATOLOGIE I IMUNOPATOLOGIE A ESUTURILOR BUCODENTARE

Patologia infecioas a cavitii bucale

La nivelul cavitii bucale i n esuturile vecine se pot produce o serie de procese
patologice, n special de natur infecioas.

Anginele acute

Anginele acute sunt inflamaii de etiologie infecioas care intereseaz inelul limfatic
Waldeyer, orofaringele, lueta, stlpii amigdalieni i vlul palatin. Anginele sunt produse de
germeni patogeni :
- Bacterii - streptococi, stafilococi, pneumococi, meningococi, asociaie fuzo-spirilar, bacili
gram negativi
- Virusuri - rinovirusuri, coronavirusuri, adenovirusuri, herpes simplex, virusuri gripale i
paragripale, virus Epstein-Barr, HIV, Coxackie, citomegalic

Majoritatea anginelor sunt localizate, dar uneori acestea se pot extinde loco-regional n
sfera ORL sau pot avea efecte toxice la distan, prin exotoxinele produse de unele bacterii, de
exemplu :
- Corynebacterium diphteriae produce exotoxina difteric; aceasta ptrunde n circulaie i are o
mare afinitate pentru miocard, rinichi i esutul nervos, producnd leziuni degenerative i
toxice.
- Unele tulpini de streptococ |hemolitic din grupa A produc toxina eritrogen (sau pirogen),
responsabil de erupia febril din scarlatin i de unele complicaii : artrit, miocardit,
hepatit.
Anginele acute se pot prelungi, transformndu-se n infecii cronice de focar.

Stomatitele

Stomatitele sunt inflamaii ale cavitii bucale, care intereseaz mucoasa jugal, gingival i
vlul palatin. Toate stomatitele sunt infecioase, de la nceput sau printr-o suprainfecie rapid. Cel
mai frecvent stomatitele sunt produse de germenii din flora normal a cavitii bucale.

ncepnd de la natere, cavitatea bucal este colonizat de o mare varietate de
microorganisme. Majoritatea lor sunt comensuale, dar ele pot deveni patogene n cazul unei aprri
deficitare a gazdei. Bacteriile prezente n mod obinuit n cavitatea bucal sunt prezentate n tabel.
n flora bucal rezidenial predomin bacteriile anaerobe. Peste 80% din flor este reprezentat de
bacterii din genurile : Streptococcus, Peptostreptococcus, Veillonella, Lactobacillus,
Corynebacterium, Actinomyces.

Tabel. Flora saprofit a cavitii bucale

Bacterii aerobe - coci gram pozitivi : Streptococcus mutans, S.
salivarius, S. sanguis, S. mitior, Stafilococcus
- coci gram negativi : Branhamella, Moraxella
- bacili gram pozitivi : Lactobacillus, Corynebacterium
- bacili gram negativi : enterobacteriacee E. coli,
Klebsiella, Proteus
Bacterii anaerobe - coci gram pozitivi : Peptostreptococcus
- coci gram negativi : Veillonella
- bacili gram pozitivi : Actinomyces, Eubacterium,
Leptotrichia
- bacili gram negativi : Fusobacterium, Bacteroides,

Campylobacter
Spirochete Treponema


Extrema varietate a florei bucale face dificil studiul bacteriologic al stomatitelor. Schematic
se pot diferenia dou tipuri de stomatite :
- Stomatite produse prin virulena germenilor patogeni
- Stomatite prin autoinfecie, datorate n principal scderii mijloacelor de aprare a organismului,
secundar unor cauze locale sau generale

Stomatitele mbrac diverse forme clinice :
- Gingivita reprezint inflamaia acut sau cronic a gingiei, iniiat printr-o iritaie local
urmat de invazia microbian. Flora predominent este cea subgingival, care cuprinde mai
ales bacili gram negativi anaerobi din genul Bacteroides. Gingivita ulcero-necrozant acut sau
boala Vincent este produs de o asociaie fuzospirilar.
- Stomatita herpetic este frecvent la copiii mici i este produs de virusul Herpes simplex de
tip 1.
- Stomatita cu Candida albicans apare dup tratamente antibiotice prelungite.
- Stomatitele ulcero-necrotice i gangrenoase apar la pacienii imunodeprimai. Ele sunt
produse de asociaii de bacterii aerobe i anaerobe : stafilococi, streptococi, clostridium,
asociaie fuzospirilar.
- Stomatita ulcero-aftoas este frecvent recurent, nsoete infeciile dentare cronice i se
datoreaz unui mecanism autoimun, deoarece s-au gsit LT sensibilizate i anticorpi dirijai
contra unor antigene din mucoasa bucal.



Parotiditele

Parotiditele sunt un grup heterogen de afeciuni care intereseaz glandele salivare, n
special parotidele.
- Dintre parotiditele virale cea mai frecvent este parotidita urlian (oreionul), care apare la
copii i tineri, este produs de virusul urlian (Paramyxovirus parotidis) i se caracterizeaz prin
inflamaia uni sau bilateral a parotidelor, cu aspect clinic de tumefacie dureroas, pstoas
la palpare. Glandele prezint edem inflamator i infiltrat limfo-plasmocitar abundent.

- Parotiditele bacteriene apar la pacienii n vrst, cu boli sistemice care scad i aprarea
local. Un factor favorizant important este scderea fluxului salivar. Cei mai frecveni ageni
etiologici sunt : stafilococul auriu, streptococul, pneumococul, E. coli.
- Unele boli autoimune se nsoesc de parotidit : boala Mikulicz, sindromul Sjogren,
sarcoidoza, lupusul eritematos, sclerodermia, boala mixt de colagen (boala Sharp).
- Unele boli metabolice - diabetul zaharat, ciroza hepatic, obezitatea, subnutriia, acromegalia
- i alcoolismul cronic pot evolua cu hipertrofie parotidian.
- n 20-30% din cazurile de infecie HIV la copil apare o parotidit cronic hipertrofic. Aceasta
este uneori primul semn clinic al SIDA.

Infeciile odontogene

Infeciile odontogene sunt : cariile dentare, pulpitele, parodontitele marginale,
parodontitele apicale, gingivita, infeciile spaiului fascial profund. Aceste infecii se pot complica
:
- Pot s metastazeze pe cale hematogen, cu nsmnarea valvelor cardiace pe fond de
valvulopatie, a protezelor vasculare i articulare.
- Se pot extinde spre regiuni nvecinate : retrofaringian, spre craniu, mediastin, aparatul
respirator, producnd complicaii grave : tromboz de sinus cavernos, tromboflebit jugular
supurat, sinuzit maxilar, osteomielit, abcese intracraniene.
Flora implicat este polimicrobian i provine de obicei din flora oral normal.

Caria dentar

Caria dentar este boala cea mai rspndit n populaia uman. n epoca modern caria a
cptat proporii epidemice, datorit dietei bogate n glucide rafinate. n rile dezvoltate
prevalena cariilor depete 90%, aceasta crescnd i n rile n curs de dezvoltare.
n producerea cariilor intervin mai muli factori :
- Prezena bacteriilor cariogenice, capabile s produc acizi care scad pH-ul bucal i dizolv
smalul dentar.
- Glucidele provenite din diet, care favorizeaz dezvoltarea bacteriilor, colonizarea plcii
dentare i care pot fi metabolizate n acid lactic.
- Rspunsul imun contra bacteriilor cariogenice.
Bacteriile cariogenice au o serie de caractere comune :

- Colonizeaz suprafaa dentar.
- Scad pH la valori apropiate de 4,1 prin producia de acid lactic din glucide.
- Produc carii la animalele de experien germ-free.
Cariile dentare apar prin aciunea zaharolitic a bacteriilor din placa dentar, mai ales a
Streptococcus mutans, asupra carbohidrailor alimentari. Substanele acide produse duc la
demineralizarea i distrugerea esutului dur dentar.

Teoriile referitoare la caria dentar

Nu exist o teorie unitar care s explice formarea i evoluia procesului carios. Prezentm
n continuare principalele teorii referitoare la caria dentar.

A. Teoriile externe

Teoria chimico-parazitar propus de Miller : prin brea creat de acizi prin procesul de
demineralizare a smalului ptrund microbi din cavitatea bucal (de exemplu lactobacili). Aceast
teorie nu poate explica :
- Echilibrul ntre demineralizare i remineralizare la nivelul esuturilor dentare dure
- Apariia brusc de carii multiple
- Apariia cariilor simultane pe omologi
- Recidiva de carie dup tratament corect
- Cariile generalizate care apar dup lezarea simpaticului cervical

Teoria proteolitic : n zonele de smal mai bogate n substan organic acioneaz
microorganisme proteolitice. Ulterior survine aciunea microorganismelor acidogene. Teoria este
supus urmtoarelor critici :
- Pigmentul galben-brun care se observ pe pereii cavitii carioase nu este constituit numai
din produi de proteoliz ci i din produi de degradare ai glicogenului.
- n cavitatea carioas n dentin proteoliza colagenului pare a fi precedat de procesele de
demineralizare.
- Procesele carioase nu urmeaz zonele mai bogate n substan organic ale smalului, ci
evolueaz independent de acestea.
- Inocularea experimental de flor proteolitic nu modific evoluia cariei.


Teoria chelaiunii : produii de degradare a proteinelor, rezultai n urma aciunii enzimelor
proteolitice secretate de microorganisme, au capacitatea de a chela calciul pe care-l extrag din
smal. Substane cu proprieti chelatoare pot rezulta prin proteoliz nu numai de la nivelul
smalului, ci i din saliv i alimenate. Chelarea este un proces care poate avea loc la orice pH.
Acestei teorii i sunt aduse urmtoarele contraargumente :
- Chelatorii din saliv i mai ales cei din placa bacterian au aciune prefernial pentru calciul
din placa bacterian i saliv, mai mult dect pentru calciul din smal.
- Chelatorii pot elibera calciu n situaia unui pH sczut i pot prelua excesul de ioni de hidrogen,
avnd deci aciune antiacid, protectoare.
- Dac se incubeaz in vitro dinte i saliv la pH=8 nu se produc carii.

Cele trei teorii de mai sus fac parte din grupul teoriilor externe, deoarece evideniaz rolul
unor factori externi n producerea cariei. Spre deosebire de ele exist un numr de teorii interne
care accentueaz implicarea unor factori proprii ai organismului n cariogenez.

B. Teoriile interne

Teoria organotrop : consider dintele ca fiind o membran semipermeabil care dirijeaz
schimburile hidroelectrolitice ntre saliv i mediul pulpar. Teoria susine c ar exista un factor de
reconstrucie care mpiedic pierderea fosfatului de calciu din smal. Conform acestei teorii caria
apare prin demineralizare i proteoliz doar cnd se perturb echilibrul schimburilor saliv-dinte-
pulp.

Teoria enzimatic : efectul demineralizant este determinat n principal de activarea
fosfatazei alcaline; activarea enzimei se produce datorit inversrii raportului fluor/magneziu
atunci cnd exist n organism stri patologice generale sau leziuni ale SNC. Aceast teorie ar
explica i evoluia demineralizrii mai nti n dentin i apoi spre smal.

Teoria neurodistrofic : datorit tulburrilor aprute la nivelul centrilor nervoi se produce
distrofia odontoblatilor cu dezechilibre locale care duc la creterea concentraiei de magneziu,
pierderea de calciu i grupri fosfat, scderea concentraiei locale a aminoacizilor. Distrofia

odontoblatilor ar fi perceput ca o sensibilitate la cald i dulce care precede apariia cavitii
carioase. Exist autori care numesc caria necroz neurodistrofic.

Teoria reflex : exist un dezechilibru osmotic care duce la apariia de gradiente osmotice
i cureni osmotici care produc dezintegrarea smalului i preluarea substanelor eliberate n
circulaia general.

Teoria biochimic : excesul de glucide alimentare consum pentru metabolizare vitamina
B1. Lipsa acestei vitamine duce la acumularea de acizi cu efect demineralizant. Aceast teorie a
fost infirmat de un test efectuat pe un grup de subieci cu alimentaie srac n vitamina B1.

Teoria discolagenozei : exist tulburri de formare a colagenului care duc la
depolimerizarea precoce a acestor fibre cu apariia cariei n dentin.

Teoriile interne pe ansamblu nu pot explica :
- Rezultatele obinute n urma tratamentului corect i a profilaxiei
- Apariia cariei la dini devitali
- Apariia cu predilecie a cariei n zonele retentive (sub punctul de contact)
- Apariia cariei la pacieni care consum exagerat glucoz, dar care au i igien bucal
deficitar

Din cele prezentate putem concluziona c factorul microbian are un rol esenial n
producerea cariei. Testele efectuate pe animale gnotobiotice confirm acest fapt. Animalele
gnotobiotice sunt crescute n condiii de asepsie riguroas i chiar dac primesc o alimentaie
bogat n glucide nu dezvolt procese carioase.

Putem sintetiza evoluia atacului microbian asupra esuturilor dure dentare. Iniial are loc
o demineralizare a smalului cu ptrunderea microorganismelor n dentin. La limita smal-
dentin se formeaz o zon bogat n lichid fisular i microorganisme. Aceste procese au loc
nainte de apariia dentinei ramolite (ne aflm imediat dup stadiul de pat alb cretoas).
Deja din aceast etap se produc dezechilibre osmotice ntre zona lichidian din procesul carios

(n care se gsesc microorganisme ce secret enzime i toxine) i mediul pulpar, teritorii separate
de canaliculele dentinare care conin limf dentinar. Datorit diferenei de presiune osmotic la
nivelul acestor canalicule se produc modificri ale odontoblatilor care se gsesc la captul
dinspre pulp al canaliculelor dentinare, fiind primele celule din pulp care vin n contact cu
agenii agresori. Odontoblatii sunt n legtur cu fibre nervoase din nervii alveolari. Exist i
terminaii nervoase libere n canaliculele dentinare. Aceast structur explic :
- Reacia pulpei fa de agresor prin hiperemie i depunerea de dentin secundar de reacie cu
retracia palisadei de odontoblati i micorarea de volum a camerei pulpare.
- Durerea care apare mai ales cnd n procesul carios apar substane hiperosmotice (dulce) sau
variaii de temperatur (mai ales rece).

n urma progresiei procesului carios cavitatea se umple cu dentin alterat (ramolit), care
este un spaiu de multiplicare microbian colonizat mai ales de lactobacili. Din acest moment
exist urmtoarele posibiliti de evoluie :
1. Pulpita acut : caria evolueaz rapid i deschide camera pulpar, n situaia n care
depunerea dentinei secundare de reacie este mai lent dect avansarea cariei.
2. Caria produce hiperemie pulpar mai ales prin aciunea exo- (i endo-) toxinelor
microbiene care pot ptrunde prin canaliculele dentinare, dei camera pulpar nu este propriu-
zis deschis. Procesul poate evolua apoi ca o pulpit seroas sau, dac se produc deschideri
microscopice ale camerei pulpare, se produce o pulpit purulent caracterizat de prezena
microorganismelor n pulp.
3. Dac dentina secundar de reacie se depune ntr-un ritm crescut, caria este aparent
staionar deoarece se pstreaz distana dintre tavanul camerei pulpare i frontul de avansare
al cariei. Dentina depus este iniial scleroas, permeabil la toxinele bacteriene. Sub aciunea
fosofoforinei secretat de odontoblati se produce mineralizarea cu formarea de hidroxiapatit,
lund natere dentina secundar de reacie care este mult mai puin permeabil fa de toxinele
microbiene. Fenomenul poate rmne staionar mult timp, dar :
- Camera pulpar se micoreaz.
- Pulpa este suprasolicitat i pierde celule crescnd numrul de fibre.
- Puseele inflamatorii afecteaz i vasele care se ngroa, scznd lumenul acestora i crescnd
presiunea, ceea ce produce un grad de edem i se declaneaz i formarea unui infiltrat
inflamator cronic, mediat i prin prezena toxinelor microbiene care trec n pulp prin stratul
de dentin scleroas nainte ca aceasta s se mineralizeze.

- Pe fondul general de atrofie pulpar se instaleaz pulpita cronic nchis (proces de atrofie
lent pulpar) care evolueaz spre necrozarea pulpei i apoi spre infectarea pulpei necrozate
i deschiderea camerei pulpare (gangren).
4. Deschiderea camerei pulpare cu producerea unei pulpite cronice deschise.

n cazurile de pulpit cronic datorit scderei reactivitii pulpare simptomele sunt mult
mai reduse, chiar absente, n contrast cu fenomenele de pulpit acut.

Implicarea Streptococcus mutans n producerea cariilor

Cele mai importante bacterii cariogene sunt : Streptococcus mutans, S. sanguis,
Lactobacillus acidophilus, L. casei, Actinomyces viscosus. Dintre ele, S. mutans are capacitatea cea
mai mare de a produce carii la animalele de experien.

S. mutans este un coc gram pozitiv, aerob, facultativ anaerob, nehemolitic i acidogenic. El
produce polizaharide intracelulare i extracelulare. El este implicat n cariogenez pentru c
satisface postulatele lui R. Koch referitoare la germenul cauzal al unei boli infecioase :
- S. mutans este prezent n placa bacterian a dinilor cariai i n general nu este prezent n
absena cariilor.
- S. mutans poate fi cultivat n cultur pur.
- Infectarea oarecilor de laborator germ-free i a hamsterilor normali cu S. mutans induce
apariia cariilor.
- Dup producerea cariilor la animalele de experien, S. mutans poate fi izolat din leziunea
carioas i poate fi cultivat n cultur pur.
- La pacienii cu carii s-au determinat niveluri crescute ale anticorpilor anti-S. mutans.

Prin tehnici de precipitare i de imunofluorescen s-au separat apte serotipuri ale S.
mutans, notate de la a la g. Antigenul de serotip este un polizaharid din peretele bacterian. Peste
70% din tulpinile de S. mutans izolate la om aparin serotipului c, iar urmtorul ca frecven este
serotipul d.

nveliul S. mutans este format din peretele bacterian sub care se afl membrana
plasmatic. Matricea peretelui bacterian este format dintr-o reea de peptidoglicani care conin
glucide N-acetil aminate, acid N-acetilmuramic i diverse peptide.
Rspunsul imun declanat de S. mutans este ndreptat n principal contra antigenelor de
suprafa. Cele mai importante antigene de suprafa sunt de natur proteic. Dintre ele
menionm glucozil-transferaza (sau dextran-sucraza), o enzim care transform sucroza n
dextran, care este un polimer al glucozei. Din acest motiv, n prezena sucrozei bacteria este
nconjurat de cantiti mari de dextran (sau glucan). S. mutans sintetizeaz mai ales o variant
de dextran insolubil, numit mutan. Se presupune c dextranul insolubil produs de S. mutans
intervine n adeziunea bacteriei de suprafaa dentar. Spre deosebire de S. mutans, S. sanguis
are un tip de glucozil-transferaz care induce sinteza n principal a dextranului solubil n ap.
Probabil diferena de solubilitate a dextranului produs explic importana mai mare pe care o are
S. mutans n formarea plcii bacteriene i a cariilor.
Din extractele celulare au mai fost izolate alte patru antigene proteice majore, denumite
antigenele streptococice I, II, I/II i III. Antigenul I/II este format prin unirea antigenelor I i II ntr-
o singur molecul. Se presupune c antigenul streptococic de suprafa SA I/II este implicat n
aderena S. mutans de suprafaa dentar.
Experimental imunizarea animalelor de experien contra glucozil-transferazei i
antigenelor proteice a protejat animalele contra cariilor.

n citoplasma S. mutans s-a gsit amilopectin. Acesta este un polizaharid sintetizat din
carbohidraii exogeni i stocat ca surs de energie. Cnd lipsesc glucidele din mediul extern,
bacteria catabolizeaz amilopectina pn la acid lactic, ceea ce explic producia de acid care
continu n placa bacterian i n absena consumului de glucide.
Acidul lactic provine n principal din catabolizarea glucozei din alimente. Cea mai
important surs de glucoz este sucroza. S. mutans i alte bacterii din placa dentar conin o
enzim numit invertaza, care descompune prin hidroliz sucroza n glucoz i fructoz.
Streptococii metabolizeaz glucoza pe calea ciclului Embden-Meyerhof, din care rezult acizi
organici, n special acid lactic.
Experimental, la 2-3 minute dup introducerea n gur a unei soluii care conine glucoz
sau sucroz, pH-ul din placa dentar scade de la 6,5 la 5. Se consider c decalcifierea smalului
dentar ncepe la un pH de 5,5.


Rspunsul imun contra Streptococcus mutans

n ceea ce privete mijloacele de aprare nespecific din saliv - lizozim, lactoferin,
peroxidaze, etc - nu s-au descoperit diferene semnificative ntre pacienii cu un numr mare de
carii i cei cu un numr sczut de carii. n schimb la pacienii cu multe carii s-a gsit un nivel al IgA
secretorii din saliv semnificativ mai sczut fa de pacienii cu carii puine.
Studiul IgAs specifice contra S. mutans a artat, paradoxal, c titrul lor nu este mai mare la
pacienii cu puine carii. Din contr, titrul acestor anticorpi crete odat cu numrul leziunilor
carioase, ca un martor al patologiei cumulative.
Experimental s-au produs IgAs salivare contra S. mutans prin ingerarea zilnic a unor
capsule care conineau cantiti standard de germeni. Titrul acestor anticorpi a sczut rapid, ceea
ce a sugerat c rspunsului imun la nivelul mucoaselor, spre deosebire de rspunsul imun
sistemic, i lipsete memoria imunologic.
Este posibil ca IgAs s acioneze protectiv prin inhibarea aderenei bacteriene la smalul
dentar. Eficiena acestui mecanism este dovedit prin frecvena mic a cariilor pe suprafeele
expuse ale dinilor, acolo unde IgAs salivare ajung cu mare uurin. n schimb IgAs salivare ajung
cu dificultate n locurile unde apar de obicei cariile, cum este zona de colet.

Laptele matern este o surs de leucocite i anticorpi pentru sugari. Laptele conine IgAs,
factorii sistemului complement, PMN i MF funcionale, care fagociteaz i distrug bacteriile. Este
cunoscut c sugarii hrnii natural sunt mai puin susceptibili la infecii dect cei hrnii cu lapte
praf. Este de presupus c laptele matern conine i IgAs contra S. mutans, care ar putea influena
colonizarea cavitii bucale cu aceast bacterie.

n serul copiilor i adulilor s-au gsit IgG, IgM i IgA contra unei varieti de antigene ale S.
mutans, n special contra glucozil-transferazei i antigenului proteic I/II. Titrul anticorpilor a fost
crescut la pacienii cu carii numeroase i netratate. Studiile prospective au artat c apariia de
noi carii se nsoete de o cretere uoar a IgG i IgM serice contra S. mutans.
Anticorpii serici, mai ales din clasa IgG, sunt transportai n cavitatea bucal prin
intermediul lichidului gingival. Acolo IgG specifice opsonizeaz S. mutans i favorizeaz fagocitoza

germenilor de ctre neutrofile i MF, care capteaz complexele imune prin intermediul
receptorilor de suprafa Fc gama R. Germenii sunt opsonizai i nespecific, de ctre moleculele
C3b, care favorizeaz fagocitoza prin legarea de receptorii CR de pe suprafaa MF.

Insuccesul aprrii imune naturale contra cariilor

Dei s-a demonstrat prezena RIU contra S. mutans, acest rspuns imun este n marea
majoritate a cazurilor ineficient. Insuccesul aprrii imune naturale este demonstrat de faptul c
peste 90% din populaia rilor dezvoltate prezint carii.
O explicaie ar fi faptul c antigenele S. mutans sunt slab imunogene i nu stimuleaz
intens LTH. Trebuie s inem cont i de faptul c germenul nu ptrunde n esuturi n numr
mare, ci este n principal localizat pe suprafeele dentare i de aceea nu produce o stimulare
antigenic intens.
Se presupune c un numr de germeni sunt nghiii i c ei determin un RIU la nivelul
GALT. Limfocitele sensibilizate migreaz prin snge i se localizeaz n glandele salivare, unde se
transform n plasmocite i produc IgAs contra S. mutans. De vreme ce titrul IgAs anti-S. mutans
crete odat cu numrul cariilor, este probabil c imunoglobulinele nu au un efect protector anti-
carii, ci reflect doar importana colonizrii cu S. mutans.
Este posibil ca numrul mic de indivizi care nu prezint deloc carii s dezvolte un RIU
protector contra S. mutans.

Inflamaiile pulpei dentare

Particularitile structurale ale pulpei dentare

Cele mai importante particulariti structurale ale pulpei dentare sunt :
1. Dispunerea odontoblatilor n palisad cu prelungiri n canaliculele dentinare. Cnd un
odontoblast este lezat, acesta secret substane proinflamatoare (citokine) i se produce i o
afectare a vecinilor si.
2. Prezena n zona pulpar central a unui numr crescut de celule mezenchimale
primitive care se pot diferenia n : odontoblati, macrofage, fibroblati.
3. Vascularizaia pulpar are o serie de caractere particulare :

- Diametrul arterelor crete brusc dup trecerea prin orificiul apical, de aceea orice cretere de
presiune intrapulpar poate afecta ntoarcerea venoas prin obstruarea venelor la nivel
apical. Dac se formeaz infiltrat inflamator cu edem sngele arterial ptrunde n pulp
datorit presiunii arteriale mai mari, dar sngele venos nu mai poate prsi pulpa (apexul
acioneaz ca un garou) rezultnd agravarea edemului pn la un nivel de presiune
intrapulpar comparabil cu presiunea n arteriolele nutriente ale pulpei. Apariia i
accentuarea edemului este cauzat i de producerea de microtrombi venoi datorat
ectaziilor venoase n care circulaia este turbionar.
- Prezena de arteriole retrodirecionate i de cisterne vasculare care funcioneaz ca vase de
expansiune (tampon) fa de creterile brute de presiune. Aceste structuri vasculare sunt
eficiente numai n cazul creterilor moderate de presiune pe durate de timp limitate. Dac
presiunea se menine crescut mult timp apare edemul i cisternele vasculare se ectaziaz
devenind factori protrombotici din cauza stazei sanguine.
- Vasele capilare nu se termin n zona pulpar central ci se continu cu reeaua vascular
subodontoblastic din care pornesc capilare care ptrund n palisad. De aceea fenomenele
vasculare intereseaz toat pulpa.
4. Inervaia. La nivel apical s-au decelat aproximativ 2500 de axoni. Fibrele pulpare sunt de
dou tipuri :
- Fibre de tip A sau , mielinice care transmit rapid senzaiile dureroase, durerea fiind bine
definit, localizat (durerea rapid).
- Fibre de tip C, amielinice, sunt fibrele simpatice perivasculare care transmit
impulsurile cu viteze mai mici, iar senzaiile dureroase sunt percepute difuz (durerea lent).
n cadrul distruciilor pulpare, primele fibre lezate sunt fibrele A, de aceea, att timp ct
pacientul reacioneaz la variaii termice brute, semnificaia este de persisten a fibrelor A,
deci un stadiu incipient al afectrii pulpare. Dac durerea apare dup o perioad de laten
aceasta arat distrucia fibrelor A, rspunsul dureros fiind declanat doar de fibrele C, fapt ce
atest un proces pulpar mai avansat. Fibrele A au i particularitatea de a rspunde mai rapid i
mai puternic la stimularea la cald atunci cnd exist inflamaie pulpar.
Fibrele nervoase pulpare au pe lng funcia senzitiv i un rol efector prin secreia unor
substane vasoactive. Fibrele C secret substana P, care alturi de neurokinina A determin
vasodilataie i creterea permeabilitii vasculare. Dac fibrele C sunt anesteziate n scop
terapeutic (xilin), debitul pulpar scade la 33%, fenomen deosebit de util mai ales n inflamaiile
pulpare reversibile (n care procesul inflamator i hipoxia local nu au produs modificri care s
de peasc capacitatea de regenerare a pulpei).


Modul de aciune al unor ageni agresori asupra pulpei dentare

Temperaturile nalte produc vasodilataie cu staz, iar microtrombozele consecutive
circulaiei turbionare din vasele dilatate amplific staza i edemul. De asemenea la temperaturi
nalte coaguleaz proteinele inclusiv cele din plasm.
Temperaturile sczute (ap rece, ngheat) nu au efect nociv asupra pulpei, dar produc o
senzaie dureroas evideniat la dinii sntoi i care se explic prin contracia limfei dentinare.
Temperaturile foarte sczute (testele de vitalitate cu freoni sau cu zpad carbonic) produc o vasoconstricie
brusc, apoi vasodilataie paralitic. Vasodilataia paralitic se datoreaz acidozei, produs prin acumularea de ioni
de hidrogen ca urmare a activitii musculare intense a muchiilor vasoconstrictori, dar i prin glicoliza anaerob
indus de hipoxie. Ionii de hidrogen provenii n special din acidul lactic i piruvic se fixeaz pe proteinele reglatoare
ale contraciei musculare (tropomiozin) i blocheaz contactul ntre acestea i ionii de calciu, ceea ce duce la
paralizia musculaturii respective. Vasoconstricia paralitic produce staz i microtromboze care blocheaz
circulaia venoas la nivel apical, toate acestea ducnd n final la apariia edemului pulpar.

Variaiile brute de temperatur cald-rece, ntlnite mai ales n timpul alimentaiei, produc
mai multe fenomene :
- Fisurarea smalului
- Dehiscene i percolare marginal la nivelul obturaiilor coronare
- Epuizarea metabolic a esutului pulpar cu scderea rezistenei fa de agresiuni
Acelai efect de epuizare metabolic au i fracturile nepenetrante, dar cu traiect foarte aproape
de camera pulpar, deoarece n aceste cazuri se stimuleaz depunerea n cantitate mare de dentin
secundar de reacie ntr-o perioad scurt de timp.
Microtraumele permanente produc compresii repetate ale fasciculului vasculo-nervos la
apex cu stimularea att a filetelor nervoase ct i cu apariia stazei n teritoriul pulpar.
Substanele chimice folosite n practica stomatologic pot fi duntoare pulpei dac au un
pH sczut, care favorizeaz demineralizarea smalului sau dentinei, crend condiii pentru atacul
microbian.
Se presupune c exist i o aciune toxic direct a unor substane chimice difuzate prin
canaliculele dentinare asupra vaselor pulpare.


Edemul de la nivelul pulpei dentare

Presiunea hidrostatic n pulpa dentar este de 10 mm Hg n condiii normale. Valoarea
este comparabil cu cea a altor lichide din organism aflate n spaii puin sau deloc extensibile,
cum ar fi LCR, unde presiunea este de 5-14 mm Hg.
S-a constatat c n inflamaiile reversibile presiunea hidrostatic crete la 13 mm Hg, iar n
cele ireversibile se poate ajunge chiar i la 35 mm Hg. Aceast evoluie sugereaz existena unor
mecanisme antiedem care acioneaz n fazele reversibile ale inflamaiei. Atunci cnd aceste
mecanisme sunt depite se produc inflamaii ireversibile.
Mecanismele antiedem din pulpa dentar sunt urmtoarele :
- Manoanele perivasculare alctuite din MPZ (proteoglicani) se opun vasodilataiei, datorit
consistenei elastice cu rol de contenie. Prin acest mecanism presiunea pulpar nu crete de
la nceput n bloc, ci crete circumferenial cuprinznd nti doar zonele vecine procesului
carios. Strangularea ntregii circulaii pulpare apare trziu, cnd presiunea hidrostatic atinge
valori foarte mari.
- Faptul c pulpa dentar se gsete ntr-un spaiu inextensibil constituie per se un factor
antiedem deoarece are loc o cretere rapid de presiune care mpiedic acumularea unor
cantiti mari de lichide extravazate. Acest mecanism, dei limiteaz volumul edemului, nu
limiteaz i presiunea intrapulpar i deci nu are un rol protector, deoarece odat cu creterea
presiunii se produc staz i hipoxie cu leziuni celulare ireversibile.
- La creterile uoare de presiune este favorizat preluarea edemului n vasele limfatice,
mpreun cu substanele proteice extravazate sau substanele denaturate de origine tisular.
De asemenea este favorizat absorbia apei n capilarele vecine procesului inflamator, care
sunt nc funcionale n prima faz, cnd inflamaia nu a cuprins pulpa n ntregime.
Trebuie remarcat faptul c exist o distincie funcional ntre pulpa coronar i cea
radicular. Dac inflamaia a depit stadiul de reversibilitate la nivelul pulpei coronare, aceasta
este compromis, dei pulpa radicular poate s nu fie afectat ireversibil. Situaia descris
corespunde pulpitelor pariale - purulente sau seroase, dup cum microorganismele se gsesc
sau nu n pulpa afectat.

Cauzele i factorii care produc edemul pulpar

Edemul pulpei dentare recunoate aceleai cauze ca i n alte esuturi :
- Vasodilataie i staz accentuat de microtrombi.

- Creterea permeabilitii capilare cu exodul proteinelor plasmatice n esut.
- Scderea presiunii coloidosmotice plasmatice n vasele pulpare ca urmre a exodului proteic,
dar i a distruciei proteinelor n cazul temperaturii crescute.

Modificrile locale care duc la apariia edemului inflamator pulpar sunt rezultatul aciunii
concomitente a urmtorilor factori :
- Nervos : neuropeptidele (substana P, neurokinina A) secretate de fibrele nervoase lezate,
care au efect vasodilatator i de cretere a permeabilitii capilare.
- Umoral : mediatorii plasmatici ai inflamaiei (factorii C3a i C5a ai complementului i sistemul
kininelor) care se asociaz i cu factorul XII declannd procesul de coagulare local cu rol n
formarea barierei imunofibrinoleucocitare.
- Vascular : vasodilataie i staz.
- Celular : substane proinflamatorii secretate de :
- Celulele inflamatorii : PMN, limfocite, MF
- Celulele lezate - odontoblati
- Celulele i bacteriile distruse din care rezult endotoxine bacteriene i enzime lizozomale,
acestea din urm fiind anihilate de antiproteazele secretate de ficat atunci cnd ajung la
nivel hepatic concentraii mari de interleukine provenite din focarul inflamator. Aceste
antiproteaze fac parte din grupul proteinelor de faz acut.

Necroza pulpar

Necroza pulpar este un termen care definete mortificarea pulpei dentare care apare :
- Ca o evoluie a unei pulpite cronice nchise.
- n urma aciunii unor factori aparent banali traumatisme minime, variaii de temperatur,
tratamentul unei carii profunde dar care acioneaz pe fondul unor tulburri ale dinamicii
vasculare pulpare (de exemplu sindromul Reynaud, hipotensiune sistemic, unele viroze ca
gripa) sau ale permeabilitii capilare pulpare (de exemplu diabetul zaharat, uremia,
avitaminozele A i C).
- Prin aciunea aminelor biogene endogene care apar n urma vicierii din diferite cauze a
metabolismului local pulpar.
- Prin aciunea unor factori externi :
- Traumatisme
- Diferene de temperatur
- O serie de ageni chimici utilizai n stomatologie


Traumatismele afectez pachetul vascular pulpar la nivelul apexului i produc o dilacerare
a esutului parapulpar cu eliberare de amine toxice; dac microtraumatismele sunt repetate i de
intensitate mic se produce scderea debitului sangvin pulpar;
Diferenele de temperatur : creterea temperaturii determin la valori mici (t=5C n
pulp) vasodilataie cu edem, iar la valori mari (t=75C n pulp, n timpul lefuirii de bonturi
vitale fr rcire) precipitarea proteinelor plasmatice cu necrozarea rapid a pulpei. Scderea
temperaturii (sub 0C n pulp) determin vasoconstricie, apoi vasodilataie paralitic cu edem.
Agenii chimici folosii de medicul stomatolog, acioneaz prin mai multe mecanisme :
- Precipitare proteic la utilizarea de : fenol, acid tricloracetic, azotat de argint.
- Paralizia musculaturii netede vasculare i blocarea respiraiei celulare la utilizarea arsenicului.
- Variaii de pH, lezarea membranei celulare, depolimerizarea colagenului, n cazul utilizrii de
acizi i baze.

Odat declanat, necrobioza pulpei dentare este un proces ireversibil, care continu pn
la mortificarea total a organului pulpar.
Necroza pulpar poate evolua n trei moduri :
1. Rmne n aceast stare o anume perioad de timp.
2. Fracturarea dintelui, prin scderea rezistenei mecanice datorit distruciei scheletului proteic
din smal i a fibrelor din canalele dentinare.
3. Infectarea pulpei necrozate cu germeni provenii din :
- Cavitatea bucal
- Pungi paradontale care comunic cu camera pulpar prin canale radiculare laterale
- Circulaia general, n bacteriemii
- Focare de vecintate, din care microbii ptrund prin orificiul apical
Infectarea masiv a pulpei i deschiderea camerei pulpare corespund gangrenei pulpare.
Gangrena poate fi urmarea unui proces de necroz sau poate urma unei pulpite seroase sau
purulente.

Parodontopatiile. Imunobiologia plcii dentare bacteriene

Factorii etiologici ai paradontopatiilor sunt compleci, dar placa bacterian dentar (PBD)
este unanim recunoscut ca un element esenial.

Cavitatea bucal este colonizat cu bacterii, ncepnd din primele ore dup natere :
- Flora din prima zi este dominat de Streptococcus salivarius.
- Ali germeni care colonizeaz foarte rapid cavitatea bucal sunt : Veillonella alcalescens,
lactobacilii, Candida albicans.
- n primele luni de via apar Actinomyces i ali anaerobi.
- Streptococcus sanguis i S. mutans apar dup erupia dinilor deciduali.
Echilibrul ecologic al florei bucale depinde de factorii nutriionali. S-a demonstrat c
aderena S. mutans la suprafaa dentar crete n prezena excesului alimentar de zahr.

PBD apare prin acumularea i aderarea ferm pe suprafaa dinilor a unui mare numr de
bacterii i agregate bacteriene. PBD reprezint o agregare bacterian aderent ferm pe suprafaa
dinilor, care nu poate fi ndeprtat prin simpla cltire a gurii sau printr-un jet de ap. La
formarea PBD particip specii bacteriene diferite, ntre care sunt relaii complexe de
comensualism, competiie sau antagonism. Aceste relaii condiioneaz natura i proprietile
PBD.
n afara plcii bacteriene, pe suprafaa dinilor exist depozite de materie de culoare alb,
neaderente, care se pot desprinde mecanic. Depozitele sunt compuse n principal din bacterii,
leucocite i celule descuamate din epiteliul bucal.
Se tie c cele dou tipuri de depozite de pe suprafaa dentar depozitele aderente
(placa dentar) i depozitele neaderente contribuie prin mecanisme diferite la apariia cariilor
i a parodontopatiilor.

Placa dentar se poate forma n orice zon a suprafeei dentare, dar cele mai importante
zone sunt :
- Placa supragingival, mai ales de la nivelul zonei marginale, din apropierea jonciunii dento-
gingivale
- Placa subgingival asociat suprafeei dentare, care acoper suprafaa rdcinii dentare
- Placa subgingival asociat epiteliului anului gingival
Bacteriile din zonele enumerate sunt greu de ndeprtat mecanic. n practic este cunoscut
c paradontopatiile i cariile afecteaz cu precdere aceste zone.


Bacteriile din PBD au efecte locale nocive prin mai muli factori. Cei mai importani sunt :
- Endotoxinele bacteriilor gram negative, care sunt de fapt LPZ din peretele bacterian care se
elibereaz cnd bacteriile sunt lizate. Endotoxinele stimuleaz inflamaia local prin activarea
complementului, a MF i au efect citotoxic asupra fibroblatilor i a epiteliului gingival.
- Enzimele bacteriene, de exemplu colagenazele care distrug fibrele de colagen i hialuronidaza
care lizeaz proteinele din matricea extracelular, crescnd permeabilitatea epiteliului
joncional.
- Stimularea eliberrii de enzime din fagocitele atrase prin chemotactism.
- Produii de metabolism bacterian cu efect toxic tisular : acid butiric, amine, amoniac, hidrogen
sulfurat.
- Produii de metabolism bacterian cu efect de decalcifiere dentar, mai ales acidul lactic
produs de S. mutans.

Formarea plcii dentare supragingivale ncepe la circa o or dup periaj, prin aderarea
bacteriilor aerobe la suprafaa dinilor, pe o pelicul de glicoproteine salivare i carbohidrai.
Primele bacterii care ader sunt cocii i bacilii gram pozitivi, n principal S. sanguis. Bacteriile
aerobe formeaz colonii care se dezvolt frecvent ca nite coloane perpendiculare pe suprafaa
dentar. Ele creeaz condiii pentru dezvoltarea ulterioar a florei anaerobe, reprezentat mai
ales de Veillonella, Actinomyces i Fusobacterium. Apare o flor bacterian complex i foarte
abundent. ntr-un mg de PBD se gsesc aproximativ 25 x 10
6
bacterii aerobe i 46 x 10
6
bacterii
anaerobe, iar n lipsa igienei orale se pot acumula la nivelul dinilor pn la 50 mg de plac
bacterian.

Structura i componentele funcionale ale PBD

Structura PBD cuprinde :
- Agregate bacteriene
- Celule fagocitare, mai ales PMN
- Produi de metabolism bacterian
- Celule epiteliale descuamate
- Proteine salivare i serice
La formarea i meninerea PBD concur mai muli factori, dintre care cei mai importani
sunt :

- Relaiile de comensualism dintre bacteriile aerobe i anaerobe, de exemplu acidul lactic
rezultat din metabolismul S. mutans este utilizat de Veillonella alcalescens.
- Glucidele provenite din alimente.

Placa dentar are trei componente funcionale :
- Microorganisme cu potenial cariogenic, dintre care cele mai importante sunt S. mutans,
Lactobacillus acidophilus i Actinomyces viscosus.
- Microorganisme care pot s induc paradontopatii, cum sunt : Bacteroides gingivalis, B.
intermedius, Actinobacillus actinomycetemcomitans, Actinomyces viscosus, Capnocytophaga,
Eikenella, Veillonella alcalescens, fuzobacterii i spirochete.
- Factori cu efect adjuvant sau supresor asupra rspunsului imun. Cei mai importani factori
adjuvani sunt LPZ bacteriilor gram negative, levanul sintetizat de Actinomyces viscosus i
dextranii sintetizai de S. mutans i S. sanguis. Aceste substane sunt mitogeni policlonali
pentru LB. LPZ bacteriene stimuleaz eliberarea IL-1 din MF. n anumite condiii, factorii
enumerai precum i acidul lipoteichoic pot avea efect imunosupresor.

Efectele antigenelor din PBD

Pentru a genera un rspuns imun sau pentru a produce leziuni tisulare, bacteriile sau
produii lor de metabolism trebuie s treac de bariera epitelial acolo unde aceasta este mai
permeabil, la nivelul epiteliului joncional dento-gingival. Epiteliul joncional are spaii
intercelulare care permit trecerea antigenelor cu mas molecular sub 70 000 Da i este
impermeabil pentru moleculele mai mari. Endotoxinele bacteriene trec prin epiteliul joncional.
Antigenele din placa bacterian care ptrund prin epiteliul gingival ajung n esutul
conjunctiv al gingiei, iar de aici sunt transportate pe cale sanguin i limfatic, ajungnd la
organele limfoide secundare ganglionii limfatici i splina. De aceea antigenele bacteriene din
PBD, spre deosebire de alte antigene din cavitatea bucal, induc att un rspuns imun local, ct i
unul sistemic.

Antigenele din placa dentar activeaz sistemele de aprare specific i nespecific :
- n placa dentar se afl n principal antigene timo-dependente (de exemplu glicoproteinele de
suprafa ale streptococilor) i mai puine antigene timo-independente (de exemplu LPZ
bacteriilor gram negative). Antigenele timo-independente stimuleaz direct LB, pe cnd cele
timo-dependente stimuleaz simultan LTH i LB, inducnd diverse RIU cu producie de IgM,

IgG i IgA care se regsesc n circulaie. La subiecii sntoi s-au regsit n circulaie anticorpi
dirijai contra majoritii microorganismelor din flora bucal. S-a constatat c rspunsul cu IgG
serice contra Bacteroides gingivalis crete la pacienii cu parodontit.
- Unele antigene activeaz i LTC, declannd fenomene de citotoxicitate.
- Cascada complementului se activeaz pe calea clasic, dup ce bacteriile sunt opsonizate de
IgG. Unele componente ale PBD, n special LPZ bacteriene, declaneaz i calea altern a
complementului. Unele bacterii gram pozitive (S. mutans, S. sanguis, Actinomyces viscosus)
induc activarea cascadei complementului pe ambele ci. Se elibereaz anafilatoxinele C3a i
C5a care induc eliberarea histaminei din mastocite, care crete permeabilitatea vascular. De
asemenea anafilatoxinele au efect chemotactic i induc agregare plachetar, cu formare de
microtrombi. Microtrombii au efect favorabil prin oprirea diseminrii bacteriene, dar i efect
defavorabil prin hipoxia tisular. C3a are n plus efect citotoxic asupra fibroblatilor, afectnd
astfel integritatea membranei parodontale. C3b opsonizeaz bacteriile i stimuleaz
fagocitoza. Pe ambele ci de activare a complementului se produce complexul de atac MAC,
care induce liza bacterian. Unii factori ai cascadei complementului stimuleaz sinteza PG E1,
care induce resorbia osului alveolar.
- Principalii factori chemotactici pentru fagocite sunt C3a, C5a i LPZ bacteriene. Antigenele
bacteriene i produii lor de metabolism stimuleaz celulele fagocitare. Neutrofilele i MF
activate distrug bacteriile prin fagocitoz, dar au i efecte distructive asupra esuturilor
adiacente focarelor inflamatorii prin eliberarea de enzime lizozomale, n special hidrolaze i de
radicali liberi de oxigen. MF elibereaz i o colagenaz cu efect destructiv local.

Placa bacterian induce formarea unui infiltrat gingival cu PMN i cu mononucleare.
Celulele imuno-competente sunt recrutate i prolifereaz n infiltratul gingival i n ganglionii
limfatici din vecintate. Celulele imuno-competente elibereaz o serie de mediatori solubili care
stimuleaz mecanismele de aprare.
MF elibereaz IL-1. LTH sunt iniial stimulate de antigenele prezentate de APC i apoi sunt
co-stimulate de IL1 produs de MF. LTH activate produc IL-2 i IL-4, care sunt implicate n RIU i n
RIC.

Unii dintre mediatori au efecte negative :
- LB activate elibereaz factorul activator al osteoclastelor (OAF) care este probabil implicat n
resorbia osului alveolar.
- LT elibereaz MIF (factorul inhibitor al migrrii MF), care imobilizeaz MF n zona cu limfocite
activate. MF activate elibereaz enzime i radicali de oxigen, care contribuie la leziunile
tisulare locale.

- LT elibereaz limfotoxina (TNF |) care are un efect toxic asupra fibroblatilor gingivali, care
sintetizeaz colagenul membranei parodontale.

Imunologia i stadiile bolii parodontale

Placa bacterian declaneaz inflamaia la nivelul gingiei. Deoarece PBD este prezent
ubicuitar n populaie, nseamn c majoritatea pacienilor au un grad de gingivit. Trecerea de la
gingivita cronic la procesele distructive ale parodontitei se face de obicei odat cu vrsta, n ani
sau decade. Progresiv se produc o serie de fenomene : distrugerea ligamentului parodontal,
resorbia osului alveolar, apariia pungilor parodontale, mobilitatea i migrarea dinilor, iar n
final pierderea lor.
Se admite c bacteriile din placa dentar declaneaz reacia inflamatorie local, dar n
evoluia spre inflamaia cronic gingival i spre procesele de parodontit destructiv este
probabil implicat i aprarea imun a gazdei.

n privina rolului etiologic al bacteriilor din PBD n declanarea bolii parodontale s-au
conturat dou ipoteze :
- Este implicat populaia bacterian mixt, nespecific.
- Sunt implicate numai anumite microorganisme.
Studiile ultimilor ani arat c n placa bacterian a oamenilor i a maimuelor cu boal
parodontal predomin bacilul gram negativ Bacteroides gingivalis, redenumit actual
Porphyromonas gingivalis. De asemenea, la tinerii cu un tip rapid progresiv de parodontit de tip
adult s-a evideniat Actinobacillus actinomycetemcomitans.
Odat cu acumularea PBD, populaia bacterian se modific. Iniial ea este format din
coci gram pozitivi, dar progresiv aceasta este nlocuit cu o populaie complex care cuprinde
spirochete, vibrioni i coci gram negativi. Se pare c microorganismele direct responsabile de
boala parodontal sunt Bacteroides gingivalis, B. intermedius, Actinobacillus
actinomycetemcomitans, Capnocytophaga i spirochetele.
Conform observaiilor histopatologice i prin microscopie electronic permit clasificarea
gingivitei cronice i a bolii parodontale n patru stadii : iniial, precoce, de leziuni constituite i de
leziuni avansate. Se pot stabili relaiile dintre modificrile locale imunopatologice i rspunsul
imun sistemic.


Leziunile iniiale

Deoarece cavitatea bucal conine fiziologic o bogat populaie bacterian, care induce o
migrare permanent de leucocite prin epiteliul joncional mpreun cu lichidul gingival, este dificil
de stabilit limita dintre celulele inflamatorii prezente n mod normal n esutul gingival i
infiltratul inflamator patologic.
- Rapid dup acumularea plcii bacteriene, n 2-4 zile, apare un rspuns inflamator acut
localizat n anul dento-gingival, la nivelul epiteliului joncional i n esutul conjunctiv
subepitelial. Local se produce vasodilataie i crete permeabilitatea capilar. Exudatul
inflamator conine IgG, complement, fibrin i numeroase PMN atrase de factorii chemotactici
din placa bacterian.
- Rspunsul imun sistemic se manifest prin apariia n circulaie de imunoglobuline contra
bacteriilor din PBD. IgG extravazeaz n saliv, formeaz complexe imune i opsonizeaz
bacteriile, declannd cascada complementului pe calea clasic. Se produc anafilatoxinele,
care favorizeaz inflamaia gingival.

Leziunile precoce

n 4-7 zile de la acumularea plcii bacteriene, infiltratul inflamator acut este nlocuit cu un
infiltrat dens de tip cronic, n care predomin limfocitele. Acest tip de infiltrat se gsete frecvent
i n gingia sntoas, fr modificri macroscopice, cnd se acumuleaz PBD.
- Infiltratul inflamator gingival intereseaz zona adiacent anului dento-gingival. El este
format n principal din limfocite, care reprezint cam 75% din celule. Limfocitele sunt n
majoritate LT. Restul celulelor sunt plasmocite i MF. Fibroblatii din vecintatea limfocitelor
prezint modificri degenerative i se observ liza focal a fibrelor de colagen din esutul
conjunctiv subepitelial. Procesul exudativ local se amplific. Exudarea de lichid gingival i
leucocite atinge o valoare maxim la 6-12 zile dup apariia semnelor clinice de gingivit.
- Rspunsul imun sistemic este implicat prin migrarea limfocitelor provenite din snge la
nivelul focarului inflamator din gingie. Probabil c limfocitele migrate elibereaz mediatori ca
factorul de inhibare a migrrii leucocitelor, care favorizeaz acumularea local de leucocite,
proliferarea i activarea limfocitelor.

Leziunile constituite


Leziunile constituite apar n 2-3 sptmni de la acumularea plcii bacteriene. Ele se
caracterizeaz prin infiltratul n care predomin plasmocitele, care provin n parte din LB
stimulate local de antigenele din PBD. Meninerea leziunilor n acest stadiu, uneori pentru
perioade de mai muli ani, semnific eficacitatea mecanismelor de aprare.
- Infiltratul inflamator intereseaz numai esutul din apropierea anului dento-gingival, dar
spre deosebire de stadiul precedent apar aglomerri de plasmocite n profunzimea esutului
gingival, printre vasele sanguine i fibrele de colagen. Cele mai multe plasmocite produc IgG.
n infiltrat se gsesc rare LT. Epiteliul joncional i gingival prolifereaz spre esutul conjunctiv,
n timp ce fibrele de colagen sunt distruse. anul dento-gingival se adncete, iar la nivelul
epiteliului joncional se pot forma pungi parodontale.
- La nivelul rspunsului imun sistemic se observ c dup 14-21 de zile de la acumularea PBD,
antigenele din plac induc o proliferare intens a limfocitelor T i B. Proliferarea LB este
stimulat n mare parte de ctre mitogenii policlonali provenii din PBD : LPZ, dextrani, levan.
Focarele inflamatorii gingivale persist perioade lungi de timp, ani sau decade i ele sunt
permanent alimentate cu limfocite din sngele periferic. n acest stadiu crete titrul IgAs
salivare, ct i titrul seric al IgG, IgA i IgM contra antigenelor din placa bacterian.

Leziunile avansate

Transformarea leziunilor constituite n leziuni avansate se face cnd reacia local de
aprare este nlocuit cu o reacie imunopatologic destructiv. Nu se cunosc factorii care induc
progresia bolii parodontale. Sunt incriminate fie modificri ale rspunsului imun al gazdei, fie o
serie de microorganisme : Bacteroides gingivalis, Actinobacillus actinomycetemcomitans i unele
spirochete.
- Manifestarea clinic local este parodontita, caracterizat prin formarea de pungi, ulceraii ale
epiteliului pungilor, distrugerea fibrelor de colagen care formeaz ligamentele parodontale i
resorbia osului alveolar. Dintele devine mobil i n final este pierdut. Inflamaia cronic
nsoit de fibroza reparatorie se ntinde spre apical i lateral. Infiltratul inflamator este dens i
conine plasmocite, limfocite i MF. Bariera epitelial dintre placa bacterian i esutul
parodontal este distrus, ceea ce permite ptrunderea spre esutul conjunctiv al gingiei a
antigenelor bacteriene i a produilor de metabolism. Acest stadiu se caracterizeaz prin
distrugerea ireversibil a ligamentului parodontal i a osului alveolar, nsoite de formarea
progresiv de pungi parodontale. Lichidul gingival de la aceti pacieni conine numeroase
PMN, precum i concentraii mari de IgG, IgA, IgM i complement.
- n privina rspunsului imun sistemic, se pare c la producerea leziunilor avansate contribuie
mecanisme imunopatologice complexe. Sunt implicate toate tipurile de reacii de
hipersensibilitate, dar nu se cunoate exact ponderea fiecruia.

REACIILE DE HIPERSENSIBILITATE

La persoanele normale RIU i RIC au valoare de mecanism de protecie. Ele particip la aprarea
antiviral, antibacterian, antiparazitar i contra tumorilor.
RI normal nu are efecte nefavorabile pentru organism.

Reaciile de hipersensibilitate (HS) sunt reacii imune patologice, care nu au deloc efect de
protecie asupra organismului. Ele produc de obicei leziuni tisulare severe prin declanarea unor
procese inflamatorii acute sau cronice.

Caracteristicile RI normal

RI normal trebuie s ndeplineasc o serie de condiii care se refer la RIU, la RIC i la ambele
tipuri de RI.

Caracterele RIU normal

- RIU se face printr-o clas adecvat de Ig : IgM n RIU primar, IgG n RIU secundar, IgA n RIU la
nivelul mucoaselor.
- concentraiile de Ac sunt adecvate fa de cantitatea de Ag. Nu apar sinteze excesive de Ig fa
de strictul necesar.
- n timpul RIU nu se produc mari cantiti de complexe imune circulante.
- n mod normal n organism exist autoanticorpi n concentraii foarte mici.

Caracterele RIC normal

- Ag sunt prezentate numai de MHC I (n cazul Ag endogene) sau MHC II (n cazul Ag exogene, pe
APC). Ag nu sunt expuse direct pe membranele celulelor somatice.
- celulele imunocompetente (APC, limfocite) nu sunt infectate cu microorganisme cu habitat
intracelular (de exemplu : virusul HIV, BK).


Caracterele comune pentru ambele tipuri de RI normal

- RI este strict localizat, adic este limitat strict la locul unde exist Ag :
- la poarta de intrare n organism pentru Ag exogene
- n esuturile unde se gsete Ag pentru Ag endogene
- intensitatea RI este strict controlat prin echilibrul funcional dintre LTH i LTS.
- RI nu se nsoete de leziuni tisulare. Dac se produc leziuni, acestea sunt minime i se vindec
rapid.

Caracteristicile RI patologic

RI patologice nu au efect de protecie a organismului. Ele produc leziuni tisulare importante i
disfuncii ale organelor i sistemelor, ducnd uneori la moartea organismului.
RI patologice sunt :
- reaciile de hipersensibilitate
- sindroamele de imunodeficien
- bolile autoimune
- limfoproliferrile

n RI patologice apare fie un exces, fie un deficit de funcie a RI :
- n HS I apare o hiperproducie patologic de IgE.
- n HS I, III i n bolile autoimune apar sinteze excesive de Ac.
- n HS III se produc mari cantiti de CIC.
- n HS II Ag sunt expuse direct pe membranele celulelor somatice.
- n HS IV i n SIDA celulele imunocompetente sunt infectate cu bacterii intra-celulare sau cu
virusul HIV.
- n HS I i III RI patologic este sistemic.
- n HS i n bolile autoimune echilibrul funcional ntre LTH i LTS se rupe n favoarea LTH.
- n HS i n bolile autoimune apar leziuni tisulare importante.
- n imunodeficienele umorale apare o secreie sczut de Ac.
- n sindroamele limfoproliferative apar proliferri anormale a unor clone limfoplasmocitare,
nsoite uneori de o sintez excesiv de Ac, alteori de imunodeficiene.

Clasificarea reaciilor de HS dup Gell i Coombs


- HS de tip I sau anafilactic apare prin sinteza n exces a unei clase anormale de Ig, mai precis a
IgE.
- HS de tip II sau citotoxic se datoreaz prezentrii anormale a Ag pe membra-nele celulelor
self non-APC. Fa de aceste Ag se produc Ac citotoxici din clasele IgM i IgG care distrug
celulele int.
- HS de tip III sau prin complexe imune se caracterizeaz prin hiperproducia de complexe
imune circulante (CIC) sau la nivel tisular.
- HS de tip IV sau ntrziat este de fapt un RIC cu o intensitate anormal de mare, care produce
leziuni tisulare importante.

HS de tip I, II i III se mai numesc HS imediate pentru c manifestarile clinice apar rapid dup
contactul cu Ag declanant. Ele au mediaie umoral, adic sunt RIU patologice.
HS de tip IV se numete HS ntrziat, pentru c manifestarile clinice apar mai trziu i dureaz mai
mult. Ea are mediaie celular, este un RIC patologic.
Toate tipurile de HS se nsoesc de leziuni tisulare severe, produse prin procese inflamatorii :
- inflamaii acute pentru HS I, II, III
- inflamaie cronic pentru HS IV

HIPERSENSIBILITATEA DE TIP I SAU ANAFILAXIA

HS de tip I este un RIU patologic declanat la contactul organismului cu Ag din mediul ambiant fa
de care populaia normal nu reacioneaz.
La nceputul secolului, medicii au descoperit sensibilitatea unor persoane la substane cunoscute
ca inofensive. Au numit acest fenomen anafilaxie, ca antonim al profilaxiei, care nseamn
prevenie sau protecie fa de boal.
Ag care pot s produc alergii se numesc alergene. Ele au cteva caractere comune :
- sunt foarte frecvente n natur.
- sunt Ag complete timodependente.
- pot s induc sinteza de IgE la indivizii atopici.
Alergenele sunt larg rspndite n mediu. Ele devin tot mai variate odat cu sintezele industriale de
noi substane i cu nivelul n cretere al polurii.

n tabel sunt prezentate cele mai importante alergene.
Alergene respiratorii
- polen
- spori ai unor microorganisme
- praful din cas care conine resturi de acarieni
- pr sau particule n suspensie din secreii de animale
Alergene digestive
- lapte
- ou
- pete
- ciocolat
- cpuni
Alergene tegumentare
- pr de animale
- unguente, cosmetice, deodorante
- antiseptice
Alergene parenterale
- seruri heterologe, vaccinuri
- antibiotice
- hormoni
- veninuri

RI anormal se datoreaz unei hiperproducii de IgE determinat genetic. Ea apare mai ales la
pacienii cu fenotipul HLA A2. Predispoziia acestor pacieni la alergii se numete teren atopic.

La producerea HS I particip 3 elemente :
- alergenul, care este de fapt un Ag banal, frecvent n natur, la care populaia normal rspunde
cu un RIU asimptomatic.
- celulele efectoare, care sunt mastocitele i bazofilele pacientului, care sunt normale.

- IgE sintetizate n exces. De fapt sinteza n exces a IgE este singurul element patologic. Ea este
determinat genetic.

IgE

Molecula de IgE are o structur foarte asemntoare cu molecula de IgG. Ea este format din 2
lanuri uoare L i 2 lanuri grele H, mai lungi i mai grele dect ale IgG.
Fiziologic concentraia seric a IgE este foarte sczut.
Concentraia seric a IgE crete foarte mult n anumite condiii patologice :
- bolile alergice : astmul bronic extrinsec sau alergic, rinita alergica, febra de fn, dermatita
alergic.
- bolile parazitare.
- unele boli maligne : mielomul malign cu IgE, boala Hodgkin.

Durata de via a IgE circulante este sczut, de circa 2,5 zile. Pentru moleculele de IgE care s-au
fixat pe suprafaa mastocitelor i a bazofilelor rata de catabolizare scade foarte mult, astfel c
durata lor de via este de luni sau chiar de ani.

IgE au o serie de particulariti funcionale :
- IgE au un rol fiziologic n aprarea antiparazitar i antifungic.
- IgE sunt Ac citofili, adic dup sintez nu rmn n lichidele extracelulare (plas-m i lichid
interstiial), ci se fixeaz de membranele mastocitelor i bazofilelor prin receptorii Fc epsilon
R1.

Dac molecula de IgE legat prin fragmentul Fc de Fc epsilon R1 vine n contact cu Ag specific, se
produce activarea mastocitului sau bazofilului cu eliberarea media-torilor inflamaiei.

Schema desfaurrii HS I


HS I are 2 etape importante : contactul antigenic sensibilizant i contactul antigenic declanator.

Contactul sensibilizant
Contactul sensibilizant este primul contact cu alergenul. Acest prim contact este clinic
asimptomatic.
La primul contact Ag sunt recunoscute de sistemul imun, care rspunde printr-o producie normal
de IgM rapid nlocuit cu sinteza de IgE.

IgE sunt Ac citofili. Ei se fixeaz rapid pe membranele unor celule, n special pe bazofilele circulante
i pe mastocitele tisulare. Mastocitele se gsesc n numr mare n tegumente i mucoasele
digestiv i respiratorie. Mastocitele i bazofilele sunt celulele efectorii ale HS I. Ele au pe suprafa
receptori de mare afinitate pentru IgE, notai Fc epsilon R1.

Contactul declanator
Contactul declanator are loc dup un interval de timp suficient ca s permit sinteza IgE i
depozitarea moleculelor de IgE pe suprafaa bazofilelor i mastocitelor.
Acest contact are manifestri clinice.

La contactul declanator, alergenul este recunoscut de fragmentul Fab al IgE fixate n prima etap
pe membranele mastocitelor i bazofilelor cu captul Fc. Activarea celular se face dac cel puin 2
molecule de IgE alturate s-au legat cu alergenul.
Receptorii Fc epsilon R1 au domenii intracitoplasmatice care induc activarea adenil-ciclazei i a
fosfolipazei C, care determin n final contracia microfilamentelor i microtubulilor intracelulari,
fuzionarea granulaiilor cu membrana i degranularea mastocitelor i bazofilelor.
n esutul respectiv se elibereaz trei categorii de mediatori : primari, secundari i teriari.

Mediatorii primari
Mediatorii primari (preformai sau de ordinul I) se gsesc ca atare n granulaii. Ei sunt responsabili
de efectele imediate ale degranulrii. Dintre ei cel mai important este histamina.

Efectele histaminei depind de locul n care se elibereaz :
- eliberarea la nivel cutanat sau tisular, histamina produce vasodilataie i creterea
permeabilitii capilare. Astfel ea induce leziunile papulo-eritematoase cutanate sau particip la
formarea exudatului inflamator.
- la nivel bronic histamina produce bronhoconstricie, hipersecreie de mucus i edem al
mucoasei bronice. Prin aceste efecte, histamina iniiaz criza de astm bronic.
- la nivel digestiv histamina induce contracii intestinale dureroase i edemul mucoasei.
- eliberat n circulaie, histamina produce vasoplegie, cu hipotensiune i instalarea ocului
anafilactic.
Alturi de histamin se elibereaz o serie de mediatori chemotactici i de proteaze :
- NCF-A este un tetrapeptid chemotactic pentru neutrofile.
- ECF-Aeste un tetrapeptid chemotactic pentru eozinofile.
- tripsina i chemotripsina activeaz cascada complementului i degradeaz proteinele din
matricea extracelular. Prin lezarea membranelor bazale ale capilarelor ele cresc
permeabilitatea capilar i favorizeaz exudaia i edemul inflamator.
- kalicreina activeaz kininogenii n kinine, de exemplu bradikinina cu aciune intens
proflogistic : produce vasodilataie, crete permeabilitatea capilar, activeaz plasminogenul i
are efect dolorigen.

Mediatorii secundari
Mediatorii secundari (neoformai sau de ordinul II) sunt sintetizai de novo n mastocit sau n
bazofil, prin degradarea fosfolipidelor de membran i a acidului arahidonic. Ei sunt : PAF, PG, LT,
TX. Aceti mediatori intr n aciune ceva mai lent, dar efectele lor sunt mai persistente.
Mediatorii secundari au o serie de efecte comune :
- PAF, PG D2 i SRSA produc vasodilataie i cresc permeabilitatea capilar. SRSA este un amestec
format din LTC4, LTD4, LTE4.
- PAF i TX A2 activeaz agregarea plachetar.
- PAF, PG F2 alfa, TX A2, LT B4 i SRSA au efect bronhoconstrictor.
- LT B4 i PAF au efect chemotactic n special pentru neutrofile.

Mediatorii teriari
Mediatorii teriari (de ordinul III) sunt eliberai de celulele atrase n zon : eozino-file, neutrofile,
MF, limfocite, trombocite. Ei sunt polipeptide, glicoproteine i fosfolipide care acioneaz n
urmtoarele 1-2 zile, realiznd aa-numita reacie de faz trzie.

- eozinofilele produc MBP (proteina bazic major), cu efecte citotoxice mai ales asupra
epiteliului bronic.
- trombocitele produc mult TGF beta (factorul de transformare i cretere), care este chemotactic
pentru fibroblati.
- neutrofilele i MF elibereaz enzime (n special hidrolaze acide i proteaze) i radicali de oxigen,
care amplific leziunile tisulare.
- MF i limfocitele produc IL (n special IL1), TNF alfa i factori de cretere (FGF, TGF beta) care
stimuleaz inflamaia i reaciile de reparaie.

Formele clinice ale HS I

Se estimeaz c circa 10% din populaie sufer ntr-o msur mai mare sau mai mic de alergii la :
polen, fecale i resturi de acarieni care intr n compoziia prafului de cas, pr de animale, etc.
Manifestrile clinice depind de calea de intrare a alergenelor n organism :
- Dac alergenul vine n contact cu epiteliul cilor respiratorii superioare se produc rinita
alergic sau febra de fn.
- Dac alergenul ptrunde la nivelul epiteliului bronic se produce accesul de astm bronic
extrinsec sau alergic.
- Dac alergenul ptrunde la nivelul epiteliului digestiv se produce o gastro-enteropatie
atopic, manifestat prin vrsturi i diaree.
- Dac alergenul ptrunde la nivelul esut cutanat se produce o dermatit alergic sub form de
urticarie sau de eczem atopic.
- Dac alergenul ptrunde direct n snge se produce cea mai sever manifestare, ocul
anafilactic.

n funcie de zona n care are loc contactul cu alergenul, formele clinice ale HS I sunt locale sau
generale.
Formele locale apar ca sindroame alergice care intereseaz un organ int. Manifestrile locale
dureaz ct timp organismul este expus la alergen. Simptomatologia dispare n cel mult 24 h de la
ncetarea expunerii. Principalul mediator este histamina, de aceea se utilizeaz medicamentele
antihistaminice. n cazurile mai severe se apeleaz la preparate cortizonice, cunoscut fiind efectul
lor antiflogistic foarte intens.
Forma general sau sistemic este reprezentat de ocul anafilactic, care prin gravitatea
tulburrilor hemodinamice poate s pun viaa n pericol.


Urticaria
Urticaria reprezint o erupie de tip eritematopapulos, intens pruriginoas, cu caracter tranzitor.
Manifestrile clinice apar n principal prin creterea permeabilitii capilare i prin vasodilataia
produse de eliberarea mediatorilor din mastocite (histamina).
Urticaria este cea mai frecvent manifestare a HS I la nivel cutanat. Ea apare n urma contactului
tegumentar cu medicamente sau substane chimice cu rol de alergen. Formele clinice sunt diverse.
Erupia poate fi doar eritematoas, se poate manifesta ca dermografism, sau cu micropapule.

Eczema atopic
Eczema atopic poate fi acut sau cronic. Formele acute se caracterizeaz printr-o erupie
eritematopapuloas sau veziculoas pruriginoas. n formele cronice apar lichenificri, care au ca
substrat histologic hiperplazia keratinocitelor i hiperkera-toza.
Eczema atopic apare ca o reacie la alergenele din praful de cas.
n focarele lezionale se observ numeroase celule Langerhans, MF, eozinofile, LTH i mastocite.


Rinita alergic
Rinita alergic este o inflamaie aseptic a mucoasei nazale i a conjunctivelor oculare. Ea apare n
urma contactului mucoasei cu alergene din aer.
Degranularea mastocitelor locale elibereaz mediatorii care prin creterea permeabilitii capilare
i prin vasodilataie produc : rinoree apoas, obstrucie nazal, lcrimare, eventual nsoite de
manifestri alergice cutanate.
Probele de laborator evideniaz creterea IgE, teste cutanate i teste de provocare pozitive la
alergenele respective, eozinofilie, numeroase eozinofile n secreia nazal.

Febra de fn

Febra de fn este o varietate de rinit alergic sezonier, pentru c ea este indus de polenul
prezent n zonele cu vegetaie abundent, n principal primvara i vara.
Manifestrile clinice sunt tot rinoree apoas, obstrucie nazal, hiperlcrimare. La copii febra de
fn se poate complica cu otite sau sinuzite.
Probele de laborator evideniaz creterea titrului IgE, eozinofilie, numeroase eozinofile n secreia
nazal, teste cutanate pozitive la polen.

Alergiile alimentare
La nivelul intestinului se poate produce sensibilizarea la proteine din albuul de ou, din laptele de
vac, la aditivi alimentari cum sunt sulfiii sau la cpuni.
Contactul alergenelor cu IgE de pe mastocitele din mucoasa intestinal produce diaree i vrsturi.
De asemenea, eliberarea mediatorilor inflamaiei poate s creasc permeabilitatea mucoasei
intestinale, astfel c alergenele pot trece n circulaie. Alergenele pot ajunge la distan i pot s
produc reacii anafilactice la nivel pulmonar (criz de astm) sau tegumentar (urticarie, eczem
atopic). De aceea consumul de cpuni poate determina urticarie, iar consumul de ou poate
produce accese de astm la pacienii sensibilizai. n acest context, mucoasa intestinal sensibilizat
este considerat o poart de intrare a alergenelor.

Astmul bronic alergic
Astmul bronic se poate defini ca o ngustare difuz a bronhiilor, reversibil spontan sau sub
tratament, datorat unei hiperreactiviti a pacientului la diveri stimuli.
Boala se caracterizeaz prin crize paroxistice de dispnee expiratorie nsoit de manifestri clinice
tipice : anxietate, senzaie de opresiune toracic, wheezing, cianoz. Crizele au debut brusc,
dureaz mai multe ore, iar la finalul crizelor bolnavul tuete i expectoreaz o sput vscoas cu
perle de mucus.

Clasificarea utilizat n prezent cuprinde :
- Astmul bronic extrinsec sau alergic declanat la contactul cu alergenul.
- Astmul bronic nealergic declanat de o serie de factori : diveri ageni infecioi, efortul fizic,
praful sau fumul, stimulii psihici negativi, refluxul gastro-esofagian.

- Astmul bronic ocupaional sau profesional, determinat de o serie de iritani fizici sau chimici :
gaze industriale, substane chimice cu molecul mic.

Modificrile caracteristice de la nivelul bronhiilor i bronhiolelor n timpul crizelor de astm sunt :
- Bronhospasmul
- Edemul mucoasei bronice
- Hipersecreia de mucus vscos i aderent

Contactul la nivelul mucoasei bronice cu alergenele inhalate duce la degranularea mastocitelor.
Mastocitele se gsesc n lumenul bronhiilor, n epiteliul bronic i sub membrana bazal.
Mediatorii eliberai de mastocitele intraluminale deschid jonciunile strnse dintre celulele
epiteliale, favoriznd ptrunderea alergenelor spre mastocitele subiacente.
Mastocitele elibereaz o serie de mediatori ai inflamaiei care produc n principal
bronhoconstricie i au efect chemotactic :
- Mediatorii preformai se elibereaz rapid. Ei sunt responsabili de manifestrile din primele 2-3
ore ale crizei de astm.
- Mediatorii neoformai intr n aciune mai lent, la circa 10 ore de la debutul crizei de astm.

ocul anafilactic
ocul anafilactic este forma general a HS I, o reacie anafilactic sistemic. Aceasta apare cnd
alergenul ptrunde n circulaie n titru mare. Severitatea manifestrilor depinde de cantitatea de
alergen i de severitatea alergizrii, adic de cantitatea de IgE fixat pe mastocite i pe bazofile.
Eliberarea mediatorilor, n primul rnd a histaminei, din bazofile i din mastocitele periarteriolare
induce vasodilataie generalizat, cu hipotensiune arterial care poate ajunge la colaps.
Hipotensiunea duce la hipoirigaie tisular, n special cerebral, nsoit de semne neurologice :
ameeal, confuzie, pierderea contienei, com. Se pot asocia semne digestive (vrsturi, diaree)
i respiratorii (spasm laringian, bronhospasm). n lipsa tratamentului prompt, n primul rnd
vasoconstrictor, ocul anafilactic poate produce moartea.


HIPERSENSIBILITATEA DE TIP II - CITOTOXIC


HS II are ca efect distrugerea mediat prin Ac a unor celule din organism.
HS II este un tip de HS imediat care se datoreaz prezenei anormale a unor Ag pe membrana celulelor somatice non-
APC. Fa de aceste Ag se produc Ac citotoxici care realizeaz distrugerea celulei int.

Mecanismul HS II

Ac fixai pe membranele celulare sunt de tip IgG sau IgM. Ei se numesc Ac citotoxici pentru c
declaneaz citoliza prin 2 mecanisme :
- declanarea cascadei complementului pe calea clasic i generarea unei reacii inflamatorii
acute.
- citotoxicitatea celular Ac-dependent sau ADCC.

Declanarea cascadei complementului

Cascada complementului se activeaz pe calea clasic, dup recunoaterea Ag membranare de
ctre Ac de tip IgG sau IgM, care se ataeaz de membrane.
Recunoaterea Ag de ctre Ac este recunoatere imunologic specific.
Pe moleculele de Ig se exteriorizeaza situsul activator al complementului i prin reacii succesive se
produce C3-convertaza cii clasice. Ea desface C3 n C3a i C3b.
C3a este o anafilatoxin. Ea rmne solubil i particip la inflamaia acut local.
Moleculele de C3b formate pot avea 2 roluri :
- o parte opsonizeaz celula int, care va fi recunoscut de monocitele i de MF rezidente, prin
receptorii CR. Monocitele i MF se activeaz i induc fenomene inflamatorii, fagocitoz i ADCC.
- o alt parte din C3b se combin cu complexul C4b2b i formeaz C5-convertaza. Ea descompune
C5 n C5a i C5b. C5a este o anafilatoxin cu efecte intens proinflamatorii. C5b particip la
formarea MAC, care duce la liza osmotic a celulei int.

Celulele anucleate, de exemplu eritrocitele i plachetele, sunt lizate rapid prin activarea cascadei
complementului pe calea clasic . Acestea neavnd nucleu, nu fac sinteze proteice, deci nu au

posibilitatea reparaiei membranei i nu rezist la liza osmotic. Celulele nucleate cu sinteze
proteice intense rezist la liza osmotic. Acestea din urm sunt distruse prin ADCC.

Anafilatoxinele C3a i C5a au 2 efecte proflogistice :
- stimuleaza receptorii specifici ai mastocitelor i bazofilelor, care se degranuleaz i elibereaz
numeroi mediatori.
- au efect chemotactic.

ADCC

ADCC este un proces prin care celulele int sunt distruse de celulele proinflamatorii recrutate n
focar : NK, MF, neutrofile.
ADCC parcurge 3 etape :
- recunoaterea imunologic nespecific
- activarea metabolic a celulelor inflamatorii
- eliberarea mediatorilor citotoxici
Recunoaterea celulei int se face prin receptorii FC gama R de pe fagocite i NK. Aceti receptori
fixeaz Ig ataate n prima etap pe membrana celulei int.
Celulele fagocitare elibereaz radicali liberi de oxigen, proteaze i hidrolaze lizozomale care lezeaz
membrana celulei int. Celulele NK elibereaz perforina. Celula int este distrus prin liz
osmotic.
Dup citoliz, resturile mai mari ale celulelor int sunt fagocitate de MF, iar cele mai mici de
neutrofile.

Formele clinice ale HS II

Ac citotoxici se produc dup o aloimunizare sau dup o autoimunizare.
- Prin aloimunizare se produc Ac printr-un RIU fa de celule sau esuturi strine. Exemplele
curente sunt aloimunizarea posttransfuzional, feto-matern i post-transplant.

- Prin autoimunizare se produc Ac printr-un RIU fa de propriile celule sau esuturi, prin ruperea
toleranei fa de structurile self. Aceste fenomene se produc n cadrul bolilor autoimune :
anemiile hemolitice autoimune, lupusul eritematos sistemic, purpura trombocitopenic
idiopatic, sindromul Goodpasture, tiroidita Hashimoto.
Ac citotoxici pot s apar i dup administrarea unor medicamente care au rol de hapten i se
ataeaz pe celulele organismului, ducnd la distrugerea lor, cum se ntmpl n trombocitopeniile
medicamentoase.

Aloimunizarea posttransfuzional

Aloimunizarea posttransfuzional se produce prin transfuzie de la donor la primitor a unei mase
eritrocitare de grup sanguin incompatibil, cu alte specificiti antigenice eritrocitare.
De fapt n organism exist n mod natural Ac dirijai mpotriva Ag de grup sanguin ABO
neexprimate pe hematiile proprii, astfel c reaciile citotoxice apar la prima transfuzie de grup
sanguin incompatibil. Dup transfuzie, titrul Ac anti-A sau anti-B crete foarte mult.

Sistemul ABO a fost primul descoperit i rmne cel mai important deoarece este un sistem
complet, adic n mod natural i fr nici o imunizare prealabil la acelai individ exist Ag din
sistemul ABO i Ac anti-ABO. Ag i Ac coexist la un individ respectnd 2 condiii :
- nu se sintetizeaz Ac fa de Ag prezente pe hematii.
- se sintetizeaz Ac fa de grupul sanguin care nu exist pe hematii.
Ac anti-ABO se numesc aglutinine, pentru c ei produc aglutinarea hematiilor.

Ac specifici de grup ABO - aglutininele

Sinteza Ac anti-A i anti-B se face astfel nct s se pstreze tolerana fa de propriile celule. Se
ndeplinesc 2 condiii :
- nu se sintetizeaz Ac fa de Ag proprii.
- se sintetizeaz Ac fa de determinanii antigenici care nu exist pe hematii.
Cele patru situaii posibile sunt prezentate n tabel.


Grupa sanguin Ag de suprafa Aglutinine Observaii
O H Ac anti-A i
anti-B
donator universal
A A Ac anti-B
B B Ac anti-A
AB AB - primitor universal

Individul de grup 0 este donator universal pentru c nu exist Ag imunogene pe hematii.
Individul de grup AB este primitor universal pentru c nu are Ac (aglutinine) n plasm.

Dup modul de apariie, aglutininele sunt de 2 feluri : de tip natural i de tip imun.
- Ac de tip natural sunt IgM sau IgA. Ei sunt produi permanent, n lipsa unei stimulri antigenice
cunoscute, au titru mic i nu traverseaz placenta.
- Ac de tip imun sunt IgG. Ei sunt produi consecutiv unei stimulri antigenice cunoscute
(aloimunizare sau heteroimunizare) i au iniial un titru foarte mare, care scade progresiv.
Aceti Ac de tip imun traverseaz placenta. De aceea la o gravid donator universal
periculos care are un ft de grup A sau B apare o incompatibilitate materno-fetal,
aglutininele ajung n circulaia fetal i produc boala hemolitic a nou-nscutului, cu aceleai
urmri ca imunizarea feto-matern n sistemul Rh.

Reacia citotoxic posttransfuzional apare n special la bolnavii transfuzai cu snge incompatibil.
Aglutininele primitorului opsonizeaz i aglutineaz hematiile transfuzate.
Consecinele sunt multiple :
- hematiile opsonizate sunt distruse de MF din splin. Se produce o anemie hemolitic sever.
- pe suprafaa hematiilor se activeaz cascada complementului. Din hematiile lizate intravascular
se elibereaz mari cantiti de tromboplastin care poate s declaneze sindromul de CIVD.
- prin activarea cascadei complementului se elibereaza anafilatoxinele C3a i C5a, care activeaz
mastocitele i bazofilele. Mediatorii eliberai, n special histamina, induc vasodilataie
generalizat, cu hipotensiune, chiar colaps.
- agregatele de hematii pot s oblitereze lumenul vaselor mici.

- rinichiul este afectat n mod special, prin hipoperfuzie, blocarea microcirculaiei renale cu
hematii aglutinate, declanarea CIVD. Pacienii pot deceda prin IRA.

Aloimunizarea feto-matern

Descoperirea factorului Rh a explicat boala hemolitic a nou-nscutului i accidentele
posttransfuzionale la persoane compatibile n sistemul ABO.
Ag Rh difer prin expresivitate i prin imunogenitate. Factorul D este cel mai puternic exprimat i
cel mai imunogen. n funcie de el, 85% dintre indivizi sunt Rh pozitivi.
Ag Rh sunt distribuite n organism numai pe hematii.

Sistemul Rh este incomplet, pentru c n organism exist doar Ag, nu exist n mod natural Ac
corespunzatori.
Ac anti-Rh sunt de tip imun. Cei mai importani sunt Ac anti-D. Ei apar prin aloimunizare, n 2
cazuri :
- dup o transfuzie incompatibil, adic snge D transfuzat la pacient d. O nou transfuzie
incompatibil poate determina un accident posttransfuzional.
- dup o sarcin incompatibil, adic gravid d cu ft D. n timpul travaliului un mic numr de
hematii fetale trec n circulaia matern i produc aloimunizarea n 5-7% din cazuri.

Ac anti-Rh sunt de tip IgG. Ei au titru mare, persist toat viaa i au un potenial citotoxic mare,
pentru c nu sufer adsorbie tisular, ci se fixeaz numai pe eritrocite.
Dac femeia imunizat anti-D are o nou sarcin cu ft D, se produce boala hemolitic a nou-
nscutului. Ac anti-D vor traversa placenta i vor produce hemoliza imun a eritrocitelor fetale.
Opsonizarea hematiilor fetale de ctre Ac materni produce :
- hemoliza intravascular prin activarea sistemului complement.
- captarea i liza hematiilor n MF din splina fetal.
Consecinele sunt grave :
- anemia fetala sever stimuleaz secreia de eritropoietin. Aceasta duce la proliferarea seriei
roii. Eritroblatii trec n sngele periferic, producnd eritroblastoza fetal. Eritroblatii fetali au
capacitate sczut de transport de oxigen pentru c sunt ncrcai cu HbF.

- hipoxia tisular induce multiple disfuncii organice, inclusiv insuficien hepatic cu
hipoalbuminemie. Edemele generalizate prin scderea presiunii coloid-osmotice duc la aa-
numitul hidrops fetal.
- crete foarte mult bilirubina indirect sau neconjugat, din cauza hemolizei intense i a
incapacitii de conjugare a bilirubinei la nivel hepatic datorat imaturitii enzimei UDP-
glucuronil-transferaz. Bilirubina neconjugat este liposolubil. Ea se depune n SNC, mai ales n
nucleii bazali, producnd icterul nuclear cu moarte in utero sau retard mental.

La gravidele neimunizate, Rh negative cu ft Rh pozitiv, se administreaz preventiv nainte de
natere Ac anti-Rh, mai precis Ac anti-D, pentru a distruge nainte de aloimunizarea mamei
hematiile fetale care ptrund accidental n circulaia matern.

HIPERSENSIBILITATEA DE TIP III

HS III este un tip de RIU secundar anormal, caracterizat prin generarea unor cantiti excesive de
complexe imune care se depun n esuturi. Complexele imune se pot forma iniial n circulaie, sau
se formeaz de la nceput la nivelul unui esut.
n RIU normal complexele imune circulante sunt epurate prin fagocitoz.
n HS III complexele imune activeaz complementul pe calea clasic i produc leziuni tisulare de tip
inflamator acut.
Leziunile tisulare pot fi de 2 tipuri :
- localizate dac Ag declanator ptrunde direct intratisular.
- generalizate sau multifocale dac Ag intr direct n circulaie, se formeaz CIC (complexe
imune circulante) i acestea se depun ulterior intratisular.

Complexele imune n exces apar n RIU induse de trei grupe de Ag :
- Ag eliberate de microorganisme n cursul unor infecii persistente, de exemplu : infecii cu
streptococi, cu stafilococi, unele viroze ca mononucleoza infecioas sau hepatitele cronice
virale, unele parazitoze ;
- autoantigenele care produc bolile autoimune, care sunt eliberate permanent n organism i
induc o producie persistent de Ac, cu generarea unor cantiti mari de complexe imune ;
- unele Ag din mediu care sunt inhalate n mod repetat de pacient, sub form de particule mici
(spori, pulberi, praf)

- unele Ag injectate

HS III se produce n dou etape :
- generarea complexelor imune patologice;
- producerea leziunilor tisulare de tip inflamator acut.


HS III sau boala prin complexe imune are dou forme clinice :
- forma local sau fenomenul Arthus, dac Ag ptrund de la nceput direct intratisular i
complexele imune se formeaz direct n esuturi. La om se poate produce un corespondent al
reaciei Arthus dac un anume Ag ajunge n esuturi n mod repetat, strbtnd tegumentele
sau mucoasele. De fapt bariera cutanat nu permite n general trecerea Ag, iar la nivelul
epiteliului digestiv Ag sunt distruse de enzimele digestive. Epiteliul bronic i membrana
alveolo-capilar sunt singurele zone permeabile pentru Ag exogene inhalate : spori, fungi sau
proteine animale. Se produc alveolitele alergice extrinseci. Bolile apar mai ales n mediul rural,
la agricultori (plmnul de fermier, pneumonita cresctorilor de psri).
- forma general sau boala serului, dac Ag ptrund n circulaia sistemic n doze mari. Se
formeaz cantiti excesive de complexe imune care persist n circulaie i se numesc de aceea
CIC. Apoi ele se depun n diverse esuturi i organe, producnd leziuni. Boala serului apare cel
mai frecvent dup administrarea de ser antidifteric heterolog n cantitate mare. Dup circa 10
zile apar semnele de boal a serului : febr, artralgii, adenopatii, splenomegalie,
glomerulonefrit cu proteinurie care poate evolua spre insuficien renal acut, HTA,
insuficien cardiac. Manifestrile clinice se datoreaz produciei de CIC n concentraie mare,
care consum complementul i se depoziteaz pe membranele bazale capilare din diverse
esuturi i organe : renal, n valvele cardiace, subcutanat.


HIPERSENSIBILITATEA DE TIP IV

HS IV este un RIC patologic care are o intensitate foarte mare i produce leziuni tisulare. El se
caracterizeaz morfologic prin infiltrate de celule inflamatorii n esuturile unde este prezent Ag.
Manifestrile apar la intervale de timp diferite dup expunerea la Ag, n funcie de forma clinic. Ele
apar mai trziu ca n celelalte tipuri de HS, de aceea HS IV se mai numete i HS ntrziat.

ntre RIC i HS IV exist asemnri i deosebiri.
Asemnarile sunt c n ambele reacii sunt implicate n principal LTH1 i LTC i c are loc o secreie
intens de citokine.
Deosebirea fundamental este c :
- RIC este un mecanism de aprare contra germenilor intracelulari i a celulelor tumorale, care nu
produce leziuni tisulare importante.
- HS IV este un RIC patologic, fr efect de protecie, care nu poate s distrug eficient Ag, dar
induce leziuni tisulare grave.

HS IV apare n anumite condiii :
- Cnd Ag declanatoare au structur complex i APC le degradeaz lent i incomplet. n aceste
situaii se produce un RIC care dureaz mult i are o intensitate anormal de mare.
- Cnd MF cu rol de APC sunt colonizate cu bacterii cu dezvoltare intracelular, care rezist la
mecanismele bactericide ale MF.

n esutul unde se gsesc Ag, limfocitele activate secret citokine care activeaz intens celulele
efectorii :
- MF sunt atrase i activate de : MIF (factorul de inhibare a migrrii MF), MCF (factorul chemotactic
pentru MF), IL2, IFN. TNFo.
- Mastocitele i bazofilele sunt atrase i activate de : IL3, bazofilopoietina i HRF (factorul de
eliberare a histaminei).
Se produce un aflux local de MF, precum i activarea mastocitelor i bazofilelor atrase prin
chemotactism. Enzimele eliberate de MF i mediatorii inflamaiei eliberai de mastocite i de bazofile
produc leziunile tisulare.

Formele clinice ale HS IV difer prin severitatea leziunilor tisulare i prin intervalul scurs de la
contactul cu Ag declanator :
- Reacia Jones-Mote prezint leziuni tisulare minime i apare la 24 h dup contactul antigenic.
- HS de contact prezint leziuni tisulare mai severe dect reacia Jones-Mote i apare la 48-72 h de
la contactul antigenic.
- HS tuberculinic prezint leziuni de necroz tisular. Ea apare n cteva zile de la contactul
antigenic.

- Reacia granulomatoas este cea mai sever form, caracterizat prin leziunile granulomatoase.
Ea apare ntr-un interval variabil, de la 2 sptmni la cteva luni.

MECANISMELE DE APRARE SPECIFIC I NESPECIFIC LA NIVELUL CAVITII BUCALE

Cavitatea bucal este primul segment al tractului digestiv, dar este i o cale de acces spre
aparatul respirator, aflndu-se permanent n contact cu germenii provenii din aer, ap i
alimente.
Factorii care menin sntatea la nivelul cavitii bucale sunt :
- Integritatea mucoasei bucale
- Saliva i lichidul gingival
- RIU (mai ales) i RIC de la nivelul cavitii bucale

Mucoasa bucal

Aprarea cavitii bucale depinde n primul rnd de integritatea mucoasei. Mucoasa bucal
este una din principalele pori de ptrundere a antigenelor n organism. Mucoasa normal nu
permite trecerea microorganismelor, datorit structurii complexe :
- La suprafa se afl epiteliul pluristratificat keratinizat i nekeratinizat. Epiteliul buzelor, al
obrajilor, podelei cavitii bucale i al palatului moale nu sunt keratinizate. Celulele epiteliale
sunt unite prin jonciuni strnse din fibre de citokeratin. Unele celule superficiale sunt unite
prin jonciuni impermeabile numite zonula ocludens, care opresc trecerea antigenelor. De
asemenea, antigenele de pe suprafaa epiteliului sunt ndeprtate mecanic de fluxul salivar,
care le antreneaz n stomac, unde sunt inactivate.
- Sub epiteliul de suprafa exist o zon epitelial numit stratul granular. La acest nivel, n
spaiul intercelular se elibereaz granule care ader de membranele bacteriene, iar
imunoglobulinele formeaz complexe imune cu antigenele corespunztoare.
- Membrana bazal constituie alt obstacol mecanic contra microorganismelor.
- Lamina propria este aezat sub membrana bazal i conine un numr mic de limfocite, care
sunt stimulate de antigenele care au reuit s ptrund prin straturile supraiacente.


O zon aparte de risc pentru ptrunderea antigenelor este epiteliul joncional situat ntre
gingie i dinte, care comunic prin intermediul membranei parodontale cu oasele mandibulei i
maxilarelor.

Organizarea esutului limfoid la nivelul cavitii bucale

esutul limfoid este organizat sub dou forme :
- Ganglionii limfatici extraorali dreneaz limfa din mucoas, gingii i dini.
- Agregrile limfoide intraorale au funcii imunologice incomplet nelese.
Ganglionii limfatici extraorali

Limfaticele se formeaz n zonele superficiale ale mucoasei limbii, planeului bucal,
palatului, obrajilor, buzelor, gingiilor i n pulpa dentar. Ele conflueaz i formeaz vase mai
mari, care se unesc cu limfaticele care dreneaz muchii limbii, ai obrajilor i alte structuri
submucoase.
Limfaticele dreneaz n funcie de regiune n ganglionii submandibulari, submentali,
cervicali superiori profunzi i retrofaringieni. Antigenele microbiene care au ptruns prin epiteliul
bucal ajung n limf direct, sau sunt captate i transportate de ctre celulele Langerhans. Ajunse
n ganglionii limfatici, antigenele declaneaz RIU corespunztor.

esutul limfoid intraoral

Celulele implicate n rspunsul imun situate n cavitatea bucal se gsesc sub forma unor
agregri limfoide situate :
- la nivelul amigdalelor palatine i linguale
- la nivelul glandelor salivare
- la nivelul gingiilor
- difuz n submucoasa cavitii bucale

Amigdalele palatine i linguale


Amigdalele palatine sunt structuri limfoide pereche, situate la limita dintre gur i faringe.
Epiteliul scuamos care le acoper ptrunde n profunzimea esutului limfoid, formnd 10-20 de
cripte. Epiteliul criptelor are permeabilitate crescut i permite ptrunderea antigenelor. esutul
limfoid este organizat n noduli limfoizi asemntori cu ganglionii limfatici. Ei au urmtoarea
structur :
- n zona central se gsete un centru germinativ cu MF.
- Acesta este nconjurat de o zon cu foliculi limfoizi care conin LB.
- Zona folicular este nconjurat la exterior de o zon perifolicular care conine MF i LT. ntre
foliculi se gsesc cordoane de celule care conin de asemenea LT.
- La periferia nodulilor limfoizi, n regiunea care privete spre cripta amigdalian, se afl un grup
de limfocite i plasmocite dispuse ca o cciul sau un cap al nodulului limfoid.
Antigenele care ptrund prin epiteliul criptelor sunt regsite n MF din centrul germinativ i
din zona perifolicular. Nodulii limfoizi au numai vase limfatice eferente.
LB stimulate de antigene migreaz din foliculii limfoizi n centrul germinativ, unde
prolifereaz, apoi migreaz sub form de LB i de plasmocite n capul nodulului limfoid. Prin
imunofluorescen s-a determinat c majoritatea plasmocitelor produc IgG i mult mai puine
produc IgA.
Limfocitele tonsilare rspund la antigene in vivo i in vitro, genernd RIU primar i secundar.
Modul de funcionare i producia crescut de IgG aseamn amigdalele palatine cu ganglionii
limfatici.
Plasmocitele care produc monomeri de IgA nu produc i lanuri J. De asemenea, la nivelul
epiteliului tonsilar nu s-a detectat componenta secretorie, indispensabil pentru exocitarea
moleculelor de IgA secretoare. Aceste date arat c amigdalele palatine nu produc IgAs.

Amigdalele linguale sunt mai mici dect cele palatine i sunt situate posterior de papilele
circumvalate. Structural i funcional ele seamn cu amigdalele palatine. Epiteliul scuamos
formeaz cripte, n care se vars canalele glandelor mucoase. Probabil c secreia mucoas,
splnd continuu criptele, nu permite ptrunderea antigenelor n cantiti mari la acest nivel,
astfel c rolul imun al amigdalelor linguale este minor.

Amigdala faringian este situat n zona median a peretelui superior al nazofaringelui. Ea
are o structur asemntoare celorlalte amigdale. Dei anatomic nu aparine cavitii bucale,
amigdala faringian particip la formarea inelului de esut limfoid numit inelul Waldeyer care
separ gura i nasul de faringe. Hipertrofia amigdalei faringiene constituie vegetaiile adenoide.

esutul limfoid de la nivelul glandelor salivare


Att glandele salivare majore (parotide, submandibulare, sublinguale) ct i glandele
salivare minore, rspndite difuz sub mucoasa bucal, conin limfocite i plasmocite. Celulele
limfoide sunt dispuse n mici noduli dispui lng ductele salivare sau rspndii printre acinii
glandulari. Majoritatea plasmocitelor produc IgA, iar un numr mic secret IgG i IgM.
Plasmocitele dispuse la nivelul glandelor salivare secret cea mai mare parte din IgA salivare.
Aceste molecule de IgA sunt secretate sub form dimeric, spre deosebire de moleculele de IgA
serice, care sunt monomeri.

esutul limfoid de la nivelul gingiilor

Datorit existenei plcii bacteriene, leucocitele se gsesc n numr mare n esutul
gingival. Cnd placa bacterian este puin dezvoltat predomin limfocitele, mai ales LB, dar dac
apare gingivita celulele predominante devin plasmocitele.
Sunt dou explicaii pentru formarea infiltratului limfoplasmocitar gingival :
- Limfocitele din gingie se activeaz i prolifereaz local, apoi se transform n plasmocite,
datorit contactului persistent cu antigenele i cu substanele mitogene din placa bacterian.
- Stimularea antigenic se produce n ganglionii limfatici regionali. Acolo se formeaz limfoblati
care migreaz i prolifereaz n gingie, unde se transform n plasmocite.
Plasmocitele se grupeaz iniial n vecintatea epiteliului joncional i a vaselor sanguine,
apoi infiltreaz difuz esutul conjunctiv gingival. Plasmocitele produc predominent IgG, mai puin
IgA (cu un raport IgG : IgA ntre 4/1-7/1). Sub 1% dintre plasmocite produc IgM. Unele plasmocite
produc un RIU specific ndreptat contra antigenelor din placa bacterian, pe cnd altele sunt
stimulate nespecific de antigene ca lipopolizaharidele (LPZ) bacteriene. Stimularea nespecific i
numrul mare de antigene din placa bacterian fac ca producia de anticorpi specifici s fie
sczut, probabil insuficient pentru un RIU eficient.
n gingie se gsesc MF cu rol de APC, care fagociteaz bacterii din placa bacterian i
prezint antigenele spre limfocitele din vecintate. PMN ies din vasele sanguine gingivale, trec
prin epiteliul joncional dento-gingival i au rol bactericid, meninnd sub control populaia
bacterian din placa dentar.
La nivelul gingiilor sistemele de aprare au i efecte negative : activarea complementului,
eliberarea enzimelor lizozomale din PMN i eliberarea endotoxinelor din bacteriile gram negative
lizate contribuie la apariia i persistena gingivitei.


esutul limfoid difuz

Sub mucoasa bucal se gsesc celule limfoide dispuse difuz ntr-un strat. Ocazional unele
limfocite sunt stimulate i prolifereaz, genernd agregate limfoide de mici dimensiuni.

Saliva

Saliva din cavitatea bucal este un amestec al secreiilor provenite din cele trei perechi de
glande salivare mari tubuloacinoase i din numeroasele glande mucoase accesorii diseminate n
mucoasa bucal, la care se adaug lichidul gingival. Volumul secretat zilnic este de 1000-1500 ml.
Secreia salivar este continu i difer n funcie de stimulare :
- Secreia nestimulat, de repaus, este de 0,3-0,5 ml/min sau 20 ml/h. Aceasta este produs de
glandele salivare mari, care au urmtoarea contribuie : submandibularele 70%, parotidele
25%, sublingualele 5%.
- n timpul somnului debitul este de 0,05 ml/min.
- Dup stimulare alimentar secreia crete la 1,5-2,3 ml/min.
Saliva mixt din cavitatea bucal este un lichid transparent, discret opalescent datorit
leucocitelor i resturilor de celule epiteliale descuamate, filant datorit prezenei mucinei. Saliva
conine ap (99,4%) i reziduu uscat (0,6%), din care 0,4% sunt substane organice, iar 0,2% sunt
substane anorganice. Printre substanele organice se numr o serie de componente implicate
n aprarea nespecific i specific de la nivelul cavitii bucale.

Lizozimul

Lizozimul este o mucoprotein format din 129 de aminoacizi. Lizozimul este produs de
glandele salivare, mai ales de glandele submandibulare, dar i de unele leucocite (monocite,
granulocite), de MF i de celulele Paneth din tubul digestiv. El se gsete n diverse umori ale
organismului, mai ales n saliv i lacrimi.

Lizozimul este o enzim care distruge peretele bacterian, prin hidroliza specific a
legturilor glucidice dintre radicalii N-acetilglucozamin i acidul N-acetilmuramic. Acestea
sunt zaharuri aminate care intr n structura lanurilor polizaharidice din membrana unor
bacterii. De aceea lizozimul are efect bactericid asupra multor bacterii gram pozitive :
streptococi (inclusiv Streptococcus mutans, implicat n cariogenez), stafilococi, Proteus,
Brucella. Alte bacterii sunt rezistente. Este posibil ca lizozimul s coopereze cu IgA secretor
pentru efectul bactericid.

Peroxidaza

Peroxidaza este o enzim produs de mai multe tipuri de celule din organism, inclusiv de
celulele glandelor salivare. Ea catalizeaz reaciile de reducere a peroxidului de hidrogen (apa
oxigenat) i a peroxizilor organici.
Aciunea antibacterian a peroxidazei se manifest n cavitatea bucal n special prin
efectul bacteriostatic asupra lui Streptococcus mutans i prin efectul bactericid asupra lui
Lactobacillus acidophilus, bacterie cunoscut de asemenea cu efect cariogenic. Unii streptococi
elibereaz n saliv inhibitori ai peroxidazei.

Lactoferina

Lactoferina este o protein care capteaz fierul i inhib astfel nmulirea bacteriilor. Ea
este prezent n lapte i n saliv, avnd efect bacteriostatic asupra multor specii bacteriene.

Aglutininele salivare

Aglutininele sunt o serie de glicoproteine salivare care ader de peretele celular al
bacteriilor din cavitatea bucal. Legarea se face prin receptori de tip lectinic, care au afinitate
pentru adezinele bacteriene, care sunt molecule polizaharidice de pe suprafaa unor bacterii.
Aglutinarea bacteriilor contribuie la formarea plcii dentare bacteriene, dar are i efecte de

aprare antibacterian : favorizeaz ndeprtarea mecanic a bacteriilor i crete eficiena altor
factori de aprare din cavitatea bucal, de exemplu fagocitoza bacteriilor de ctre PMN.
S-au identificat aglutinine care ader de radicalii de acid sialic din peretele bacteriei
Streptococcus sanguis.

Complementul

n saliv s-au identificat mai multe dintre componentele sistemului complement. Cantitativ
cel mai important este factorul C3, care este eliminat mai ales n secreia parotidelor, a glandelor
submandibulare i n lichidul gingival.
Concentraia C3 n saliva mixt este de 0,5 ug/ml, de aceea s-a tras concluzia c eliminarea
complementului se face prin lichidul gingival. n saliva mixt complementul nu se activeaz, din
dou motive :
- Componentele sistemului complement, n principal C3, sunt n concentraii extrem de sczute.
- IgA secretorii nu activeaz complementul pe calea clasic.

Leucocitele

Din snge migreaz n saliv un numr foarte mare de leucocite, aproximativ un milion de
celule pe minut. Leucocitele trec prin epiteliul jonciunii dento-gingivale i ajung n lichidul
gingival, iar apoi n saliva mixt.
Dintre leucocitele din cavitatea bucal marea majoritate sunt neutrofile (98%), care provin
din lichidul gingival. Limfocitele reprezint doar 1%, iar monocitele i eozinofilele sunt foarte
rare.
Neutrofilele au efect bactericid prin fagocitoz i prin citotoxicitate, elibernd enzime
lizozomale i radicali liberi de oxigen. Trebuie menionat c dintre neutrofilele prezente n saliva
mixt, peste 60% sunt neviabile.

IgA secretorii din saliv


Dintre clasele de imunoglobuline, IgA este clasa cel mai bine reprezentat n saliva total
sau mixt. Moleculele de IgA din saliva mixt sunt n proporie de 80-90% de tip secretor,
produse de plasmocitele din glandele salivare. Restul moleculelor de IgA provin din snge i ajung
n cavitatea bucal prin intermediul lichidului gingival.
Comparnd concentraia IgA n fluidele din cavitatea bucal, moleculele de IgA se gsesc
mai ales n lichidul gingival, ntr-o concentraie aproximativ de 110 mg/dl, la pacienii cu
parodontopatii, fa de sub 20 mg/dl n saliva mixt.
n secreii moleculele de IgA se gsesc mai ales sub forma dimeric, numit IgA secretorie
(IgAs). Dimerii de IgAs salivar nu trec din snge n celulele glandulare i apoi n saliv, ci sunt
produi de plasmocitele din glandele salivare. Plasmocitele sintetizeaz monomerii de IgA,
precum i lanul polipeptidic J (piesa de jonciune). Lanul J unete la nivelul fragmentelor Fc
monomerii de IgA sub form de dimeri. Astfel, marea majoritate a IgA produse de plasmocitele
din glandele salivare sunt dimeri, nu monomeri ca IgA din snge.
Celulele epiteliale din acinii glandulari sintetizeaz piesa secretorie i o prezint pe
membran, la polul bazal sau sanguin al celulei. Piesa secretorie leag dimerii de IgA i complexul
este endocitat ca vezicule de pinocitoz. Sub aceast form IgA sunt ferite de aciunea litic a
enzimelor intracelulare. La polul apical sau luminal se elibereaz IgA secretorii (IgAs), formate din
complexul IgA-pies secretorie. Acestea ajung n lumenul acinului salivar i apoi n saliv.

Pentru stimularea LB care se difereniaz n plasmocite i produc IgAs la nivelul glandelor
salivare s-au propus mai multe mecanisme :
- LB din esutul limfoid asociat glandelor salivare, numit DALT (Duct-Associated Lymphoid
Tissue) sunt stimulate direct. Acest mecanism a fost demonstrat la primate, la care s-a obinut
imunizarea prin aplicarea la nivelul glandelor salivare a unor fragmente peptidice antigenice
din Streptococcus mutans.
- O alt cale de activare a LB implic esutul limfoid de la nivelul intestinului, numit GALT. n
esutul limfoid GALT, organizat n corionul mucoasei digestive sub forma plcilor Peyer, ajung
venule postcapilare care au endoteliu de tip HEV. Limfocitele sanguine traverseaz HEV i
ajung n esutul limfoid. Antigenele din tubul digestiv sunt preluate la polul apical al epiteliului
de un tip de celule numite celulele M, care le transport la polul bazal al epiteliului. La acest
nivel celulele M transfer antigenele spre APC locale, care prelucreaz i transport antigenele
spre esutul limfoid GALT. Acolo APC prezint antigenele spre LT. n plcile Peyer se gsesc

foliculi limfoizi primari i secundari care conin LB, LT i celule dendritice interdigitate cu rol de
APC. n foliculii secundari se activeaz LB. Dup stimularea antigenic, LB activate ies din GALT
i ajung n ganglionii mezenterici, unde LB se matureaz. Ele trec din nou n circulaia limfatic,
ajungnd n final n canalul toracic i de acolo n circulaia sanguin. n final LB activate ajung
pe cale sanguin n mucoase i n glandele salivare, unde se difereniaz n plasmocite cu via
scurt (cam 12 ore) care secret IgA dimerice.
- A treia cale propus pentru activarea LB se realizeaz n formaiunile limfoide care alctuiesc
inelul Waldeyer, mai ales n amigdalele linguale i palatine. Unele antigene din cavitatea
bucal ajung n criptele amigdaliene cu epiteliu pluristratificat nekeratinizat. n epiteliul
criptelor exist nite celule specializate n transportul transepitelial al antigenelor, numite
celule fungiforme. Celulele fungiforme transport antigenele de la nivelul epiteliului criptelor
pn n esutul conjunctiv care formeaz corionul mucoasei amigdalelor. n corion se gsete
esutul limfoid, organizat sub forma foliculilor limfoizi primari i secundari care conin LB, ntre
care ptrund cordoane de LT. LB activate migreaz din esutul limfoid amigdalian spre alte
esuturi mucoase, glande salivare unde se transform n plasmocite care produc IgAs.

Plcile Peyer i amigdalele se aseamn prin modul de transport al antigenelor (celulele M,
respectiv celulele fungiforme), prin modul de activare a LB i prin migrarea i transformarea lor n
plasmocite secretoare de IgAs. Pe ansamblul organismului, sursa cea mai important de
plasmocite care secret IgA sunt plcile Peyer. n splin i n ganglionii limfatici se activeaz mai
ales LB care se difereniaz n plasmocitele productoare de IgG i IgM.

Structura IgAs le confer proprieti deosebite fa de celelalte clase de imunoglobuline,
care fac ca IgAs s ofere o protecie mai bun la nivelul mucoasei digestive :
- Structura glicozilat a piesei secretorii ofer IgAs protecie fa de aciunea proteolitic a
enzimelor bacteriene i a hidrolazelor digestive.
- Forma dimeric asigur IgAs posibilitatea de aglutinare a bacteriilor i crete afinitatea IgA
pentru antigene.
Zilnic se produce o mare cantitate de IgAs, egal cu cantitatea total de IgG i de IgM
secretate n organism.

Marea majoritate a antigenelor alimentare, inclusiv cele cu structur proteic, sunt
tolerogene. Pentru a mpiedica rspunsul imun la numeroasele antigene alimentare, mucoasa
bucal d un rspuns imun slab sau nu rspunde la o mare varietate de antigene. Acesta este
motivul pentru care :

- Administrarea repetat a aceluiai antigen la nivelul mucoasei bucale produce un RIU
secundar slab, cu titru mic de IgG.
- Administrarea multor antigene pe cale oral nu produce rspunsuri imune sistemice cu IgG.
Acest fenomen se numete tolerana oral.
- Pentru imunizarea pe cale oral sunt necesare cantiti mari de antigene.
Spre deosebire de antigenele alimentare, proteinele microorganismelor (de exemplu
structura proteic a pililor bacterieni sau hemaglutininele virale) induc un rspuns imun sistemic
atunci cnd vin n contact cu mucoasa bucal.

IgM secretorii din saliv

n saliv exist concentraii mici de IgM secretorii (IgMs). Pentamerii de IgM sunt unii prin
lanul J, care permite legarea componentei secretorii la nivelul Fc. Moleculele de IgMs sunt
transportate activ i exocitate la polul luminal al celulelor glandelor salivare printr-un mecanism
asemntor cu IgAs.
Piesa secretorie nu asigur protecia contra enzimelor, ca n cazul IgAs. Distrugerea rapid
a moleculelor IgMs concur la concentraia lor salivar foarte mic. Fiziologic rolul de protecie a
IgMs este nesemnificativ. IgMs devin importante la pacienii cu deficit de IgAs, la care IgMs
preiau probabil funciile IgAs deficitare.

Mucinele salivare

Mucinele salivare sunt macromolecule formate din lanuri polipeptidice de care sunt
legate catene glucidice formate din : monozaharide (galactoz, manoz, fucoz), acizi uronici,
hexozamine sulfatate, hexozamine acetilate (acetilglucozamin, acetilgalactozamin), acid sialic,
polizaharide. n funcie de compoziie, mucinele sunt de mai multe tipuri :
- Cele mai abundente dintre mucinele salivare sunt glicoproteinele. Ele sunt macromolecule
formate din lanuri polipeptidice i polizaharide.
- Mucinele neutre conin mai ales monozaharide i monozaharide aminate.
- Sialomucinele conin mai ales acid sialic, care este un derivat acetilat al acidului neuraminic.
- Sulfomucinele conin hexozamine sulfatate.
Mucinele salivare difer n funcie de originea salivei :
- Saliva parotidian este mai fluid. Ea conine glicoproteine n cantiti mici.

- Saliva glandelor submandibulare i sublinguale este mai vscoas. Ea conine concentraii mari
de glicoproteine, mucine neutre, sialomucine i sulfomucine.
- Saliva secretat de glandele accesorii din mucoasa vlului palatin i a luetei este cea mai
vscoas i are coninutul cel mai mare de glicoproteine i sulfomucine.
Mucinele salivare au rol n masticaie i deglutiie pentru c ader la constituenii
alimentari, contribuie la formarea bolului alimentar i l lubrifiaz.
Mucinele salivare au rol de aprare local prin lubrifierea i protecia mecanic a
mucoasei, precum i prin aciunea de sistem tampon.

Lichidul gingival

Lichidul gingival provine din capilarele esutului conjunctiv subepitelial al gingiei. El trece
prin epiteliul joncional situat la nivelul jonciunii dento-gingivale, ajungnd n cavitatea bucal.
Acolo lichidul gingival se amestec cu secreia glandelor salivare i mucoase, formnd saliva
mixt sau total.
Epiteliul anului dento-gingival este pluristratificat. Mergnd spre jonciunea dento-
gingival epiteliul se subiaz progresiv. La nivelul jonciunii dento-gingivale epiteliul devine de
tip simplu, unistratificat i se numete epiteliu joncional. Celulele lui sunt legate att de smalul
dinilor, ct i de esutul conjunctiv subepitelial al gingiei, printr-o membran bazal. Celulele
epiteliului joncional au ntre ele spaii largi, care permit trecerea proteinelor i a elementelor
celulare spre cavitatea bucal. De aceea lichidul gingival are caracter de exudat. Tot prin epiteliul
joncional unele antigene pot s treac dinspre cavitatea bucal, prin esutul subepitelial, n
snge i s produc un rspuns imun sistemic.
Prin lichidul gingival ajung n cavitatea bucal componentele solubile ale aprrii specifice
i nespecifice din snge, n principal imunoglobulinele i factorii sistemului complement, precum
i elementele celulare de aprare, respectiv leucocite i MF. Originea sanguin a
imunoglobulinelor i a celulelor a fost dovedit prin injectarea la animalele de experien
(primate) de IgA, IgG i IgM i neutrofile marcate radioactiv, cu
125
I. Anticorpii i celulele marcate
au fost regsite dup cteva zeci de minute n lichidul gingival.
Aprarea imun asigurat de saliv depinde n principal de IgAs, produse local, n timp ce
lichidul gingival cuprinde elmente de aprare umorale i celulare care provin din snge, deci care
depind de rspunsul imun sistemic.

Exist un flux permanent de lichid gingival i de leucocite care trec dinspre capilarele
sanguine ale gingiei, prin jonciunea dento-gingival, spre cavitatea bucal. Acest flux crete n
prezena proceselor inflamatorii (gingivite), deoarece mediatorii inflamaiei eliberai local induc
vasodilataia capilarelor gingivale, creterea permeabilitii capilare i chemotactism. n
paradontopatii suprafaa epiteliului joncional crete mult, ducnd de asemenea la creterea
fluxului de lichid gingival.

Imunoglobulinele

n lichidul gingival se gsesc IgG, IgM i IgA. Dintre cele trei clase, moleculele de IgG sunt
cele mai numeroase, reprezentnd 80-90% din totalul imunoglobulinelor din lichidul gingival.
Concentraia lor este cam din concentraia seric.
IgG provin din circulaie. Ele sunt produse n cadrul RIU sistemic, extravazeaz din
capilarele gingiei i apoi exudeaz prin epiteliul joncional. n lichidul gingival s-au
individualizat IgG cu specificitate pentru numeroase antigene bacteriene din cavitatea bucal.
Subclasele de IgG sunt prezente n aceleai proporii ca n snge, cu excepia IgG2, care nu se
secret n lichidul gingival.
IgG nu sunt degradate n lichidul gingival deoarece acesta nu conine enzime proteolitice
n concentraii mari. Totui prezena enzimelor proteolitice afecteaz parial structura i
implicit funciile moleculelor de IgG. Mai afectate sunt funciile fragmentului Fc, astfel c IgG
din lichidul gingival ndeplinesc ntr-o msur mai mic urmtoarele funcii :
- Activarea complementului pe calea clasic
- Participarea la ADCC
- Stimularea fagocitozei bacteriilor pe care le opsonizeaz
Pentru c fragmentul Fab este mai rezistent la aciunea enzimelor proteolitice, funciile
de recunoatere a antigenelor bacteriene i de neutralizare a toxinelor bacteriene nu sunt
afectate.
Prezena antigenelor bacteriene i procesele inflamatorii locale (parodontopatiile)
determin creterea concentraiei imunoglobulinelor din fluidul gingival.

Complementul


n lichidul gingival se gsesc toate componentele sistemului complement, din ambele ci
clasic i altern. Concentraiile lor sunt mai mici dect n snge, dar mai mari dect n saliv.
Concentraia C3 din lichidul gingival este aproximativ din concentraia seric.
IgG formeaz complexe imune cu antigenele bacteriene i activeaz complementul pe
calea clasic. Unele componente bacteriene (LPZ, dextrani) pot s activeze calea altern a
complementului, n care intervin factorii B, D i properdina. Activarea pe ambele ci are efecte
comune :
- Se elibereaz fragmentele biologic active C3a i C5a, numite anafilatoxine.
- Se elibereaz fragmentul C3b, cu rol n fagocitoz (opsonin).
- Se formeaz complexul de atac membranar MAC, care induce liza bacterian.
Fragmentele C3a i C5a ajung n saliva mixt i i exercit efectele la nivelul ntregii caviti
bucale, dar mai ales la nivelul epiteliului joncional. Unele efectele sunt induse prin eliberarea
mediatorilor inflamaiei din mastocitele locale.
Cele mai importante efecte ale anafilatoxinelor sunt :
- Cresc permeabilitatea capilar, favoriznd extravazarea imunoglobulinelor, a altor proteine i
a leucocitelor n esutul conjunctiv i apoi la suprafaa epiteliului bucal.
- Au efect chemotactic pentru MF i neutrofile. Celulele fagocitare se deplaseaz direcionat,
dinspre patul vascular spre membrana bazal i apoi spre suprafaa epiteliului joncional.
Fragmentele C3b opsonizeaz imunologic nespecific bacteriile i apoi se leag de receptorii
CR de pe membrana neutrofilelor i MF, favoriznd fagocitoza bacteriilor.

Tabel. Factorii de aprare din saliv i din lichidul gingival

Saliva Lichidul gingival
Localizarea



Mucoasa buco-lingual i
suprafaa ocluzal, mai
puin zona cervical a
dinilor

Zona cervical a dinilor





Proveniena

Principalele Ig


Complementul


PMN



Stimularea antigenic i
activarea LB





Efectele antibacteriene

Glandele salivare

IgAs produse n glandele
salivare

Concentraii foarte mici


Provenite din lichidul
gingival; sub 40%
funcionale

LB sunt stimulate de Ag n
glandele salivare, n
amigdale i n plcile Peyer.
Plasmocitele ajung la
nivelul glandelor salivare,
unde secret IgAs

Inhibarea aderenei
bacteriene


Epiteliul joncional

IgG, IgM, IgA produse
sistemic

Prezent, n special
componentele C3,C4,C5

Provenite din sngele
periferic; peste 80%
funcionale

Ag din placa bacterian
ajung prin snge n
organele limfoide
secundare, unde
declaneaz un RIU
sistemic, cu IgG

Opsonizare cu IgG i C3b,
fagocitoz i bactericidie,
liz prin MAC, inhibarea
aderenei bacteriene



Alturi de participarea la aprarea cavitii bucale, activarea complementului are i efecte
negative : din neutrofilele i MF atrase prin chemotactism se elibereaz enzime lizozomale i
radicali de oxigen, care amplific leziunile tisulare locale.

Celulele din lichidul gingival

Neutrofilele reprezint peste 90% din celulele care ajung n cavitatea bucal prin
intermediul fluidului gingival. La examenul microscopic aproape jumtate dintre ele conin
bacterii fagocitate. Eficacitatea fagocitozei este mai sczut comparativ cu neutrofilele sanguine.
Per ansamblu peste 80% dintre neutrofile sunt viabile, comparativ cu mai puin de 40% n saliva
mixt. n numr mult mai mic se gsesc MF, LT i LB.

n tabel prezentm deosebirile dintre factorii de aprare din saliv i cei din lichidul
gingival.