1 Universidad del Quindo Programa de Biologa 2012

Determinacin e Identificacin de bacterias en crnicos de cuatro establecimientos de venta en Armenia Qundio.

Viviana Marn, Leidy J. Castillo, Daniela Hoyos, Julio C. Ramrez, Brahyam A. Arco

Resumen
La carne es un medio excelente para mantener el desarrollo bacteriano, gracias a sus propiedades biolgicas y composicin qumica, entre las que se distinguen un alto contenido de protenas, pH ligeramente cido y una elevada actividad de agua. Las Enterobacteriaceae lactosa-positivas, se caracterizan por su capacidad para fermentar la lactosa con produccin de cido y gas; son bacilos Gram -, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados; del grupo coliformes totales forman parte varios gneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella y Citrobacter. En ese trabajo se investigo y determino la presencia de coliformes totales en carne de diferentes puntos de venta, tales como supermercados y tiendas de barrios. Cada una de las muestras fue inoculada en medios de cultivos selectivos, como Bismuto sulfito, Lauryl Tryptose Broth y Brillant Green Bile (2%) Broth; tambin se realizaron pruebas bioqumicas de confirmacin de coliformes como E.M.B agar, SIM y agua peptonada. Y se realizo una sensibilidad de los microorganismos mediante antibiogramas. Debido a la especificidad de cada medio de cultivo, y con las confirmaciones bioqumicas se lograron encontrar algunos microorganismos, en particular Salmonella se presento con abundancia en las cuatro muestras sometidas a estudio. En cuanto a los antibiogramas la Gentanmicina se presento como un fuerte inhibidor de Salmonella y de Klebsiella. La contaminacin de la carne se da ya que est expuesta a la contaminacin microbiana desde el momento en que muere el animal, adems de presentar una contaminacin endgena, la carne conserva las caractersticas microbianas generales que tena previo al sacrificio. Aunque todas las muestras presentan contaminacin por microorganismos, las muestra obtenidas en las tiendas son mayores, esto debido a que la condiciones de asepsia no son las mejores lo que causa la contaminacin exgena.

Palabras clave: Crnicos, Enterobacterias, Contaminacin, Antibiticos,

Introduccin Los nutrientes esenciales que requiere el cuerpo son las vitaminas, los minerales, los carbohidratos, las grasas, las protenas y el agua. Las protenas se utilizan para construir o repara los tejidos, son partes de la hormonas, de las enzimas y de los anticuerpos; tambin son utilizadas como fuente energa; las principales fuentes de protenas son la carne y sus derivados (Werner, 2006). Lo que habitualmente se conoce con el nombre de carne, desde un punto de vista nutricional, es todo alimento que procede de las partes blandas, comestibles, de cualquier animal (Vzquez, 2005).

La carne es un medio excelente para mantener el desarrollo bacteriano, gracias a sus propiedades biolgicas y composicin qumica, entre las que se distinguen un alto contenido de protenas, pH ligeramente cido y una elevada actividad de agua (Huis, 1996). E. coli es la especie tpica del gnero Escherichia, que a su vez es el gnero tpico de la familia Enterobacteriaceae. Es tanto la especie ms frecuente de anaerobio facultativo encontrada en el tracto gastrointestinal humano como el patgeno de la familia Enterobacteriaceae hallado con ms frecuencia. Se distingue de otros miembros de la

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familia por la capacidad de las mayoras de las cepas para fermentar la lactosa y otros azucares y para producir Indol a partir de triptfano. E. coli acta como patgena extra intestinal, siendo la causa ms frecuente de ITU (infecciones del tracto urinario); tambin acta como enterotoxignica (ECET) provocando la diarrea del viajero. E. coli enterohemorrgica (ECEH) y otras cepas productoras de toxinas Shiga, pueden causar diarrea acuosa, sanguinolenta, colitis hemorrgica, sndrome hemoltico urmico y muerte; E. coli enteroagregativa (ECEA), causan diarrea y se definen por su patrn de adherencia a las clulas tisulares; E. coli enteroinvasibas (ECEI), pueden conducir a diarrea acuosa, susceptible de progresar a disentera, caracterizada por fuertes calambres abdominales, fiebre, y paso frecuente de heces de pequeo volumen que pueden contener moco y sangre (Mandell, 2006). Salmonella es un gnero de la familia Enterobacteriaceae, la mayora se encuentran en el tracto intestinal del hombre y de los animales, como patgenos o comensales. La contaminacin de la carne por Salmonella durante el proceso de carnizacin se produce a partir de las heces de los animales portadores, del ambiente y de los equipos del matadero (Snchez, 2009). Esta produce salmonelosis, y la manifestacin clnica ms comn es una gastroenteritis febril aguda (Pascual, 2005). Los patgenos oportunistas ms frecuentes son especies de Citrobacter y de Klebsiella; aunque se le consideran patgenos oportunistas, estos microorganismos producen factores de virulencia importantes, como endotoxinas, que pueden mediar infecciones mortales (Forbes, 2009). Tres especies en el gnero Klebsiella se asocian a enfermedad en humanos: K. pneumoniae, K. oxytoca y K. granulomatis; las cepas dentro de este gnero fermentan la lactosa, la mayora produce colonias sumamente mucoides en placas, debido a la produccin de una cpsula de polisacrido abundante, y todas son mviles. K. pneumoniae es un patgeno principal capaz de causar ITU y neumona en personas sanas; sin embargo, casi todas las infecciones causadas por K. pneumoniae se adquiere en el hospital y/u ocurren en quienes se encuentran

debilitados por enfermedades subyacentes (Mandell, 2006). Para determinar coliformes se utilizan medios de cultivos, tales como, agar Bismuto-Sulfato, agar Brillan Green, agar Lauryl Tryptose y agar EMB. El Verde Brillante Bilis 2% Caldo, est recomendado para el recuento de coliformes totales y fecales, por la tcnica del numero ms probable; en el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepcin de coliformes, y la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo coliformes, la fermentacin de la lactosa con produccin de cido y gas (britanialab.com). El Lauryl Sulfato Caldo, es un medio por A.P.H.A. (American Public Health Association) para deteccin y recuento de coliformes en aguas, aguas residuales y alimentos. Este es un medio rico en nutrientes, que permite un rpido desarrollo de los microorganismos fermentadores de la lactosa, an de los fermentadores lentos. La triptosa es la fuente de nitrgeno, vitaminas, minerales y aminocidos, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, las sales de fosfato proveen un sistema buffer, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. Es un medio selectivo, ya que el lauril sulfato de sodio inhibe el desarrollo de la flora acompaante. Por la fermentacin de la lactosa, se produce cido y gas, ste ltimo se evidencia al utilizar las campanas Durham (britanialab.com). El agar Sulfito de Bismuto, es un medio selectivo para el aislamiento y diferenciacin de Salmonella typhi y otras Salmonellas a partir de diversas muestras. La peptona, el extracto de carne y la dextrosa proporcionan los nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos. El sulfato ferroso acta como indicador en la produccin de sulfuro de hidrgeno que se manifiesta en el centro de la colonia por un precipitado negro y un halo negro grisceo con brillo metlico por la reduccin de los iones bismuto en presencia del sulfuro de hidrgeno (dibico.com).

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El agar EMB, es medio (tambin denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rpido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae. Este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est dada por los indicadores eosina y azul de metileno; stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. En este medio se obtiene adems, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella (britanialab.com). Objetivos Identificar y determinar por medio de pruebas bioqumicas y medios selectivos coliformes totales en crnicos. Resaltar la importancia de los antibiticos para enfermedades causadas por enterobacterias. Analizar la calidad de higiene en cuanto los procesos y manipulacin de los alimentos.

Metodologa
1. Obtencin y preparacin de la muestra Las carnes de res y cerdo fueron adquiridas de 4 puntos de venta (carniceras) provenientes de supermercado y tiendas. Se seleccion un corte menor de cada carne, el cual el peso de cada una fue aproximadamente de 2,58 g. Estas muestras fueron maceradas con un mortero el cual contena agua destilada, de este macerado se extrajeron 11 mL de cada muestra, estas se almacenaron en 4 tubos de ensayo, numerndolas del 1-4 as: Carne de res 2.16 g , tienda de barrio B-1 Carne de res 3.0 g, tienda de barrio L-2 Carne de cerdo 2.41 g, supermercado Olmpica del Norte C-3 Carne de res 2.75, supermercado Inter Norte D-4

2. Preparacin de los medios e inoculacin Para aislar las bacterias se necesitaron de los siguientes medios selectivos para coliformes totales. 2.1 Bismuto sulfito: Se suspendi los ingredientes en agua destilada. Seguidamente se calent agitando frecuentemente y se dej hervir en 1 min en bao de mara, evitando as el sobrecalentamiento. Dejamos enfriar entre 50C y 55C, se mezcl suavemente para dispersar el precipitado, y colocamos 5 mL de medio por cada caja de petri esterilizada y dejamos solidificar. Inoculamos aadiendo muestras 1, 2, 3, 4 -3 diluidas decimalmente en proporcin de 1x10 en una siembra por estra. Incubamos aerbicamente a 37C durante 48 horas. 2.2 Brillant Green Bile (2%) Broth: Se suspendieron Los polvos en agua destilada. Mezclamos bien y calentamos para disolver, autoclavamos a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos. Preparamos los tubos de ensayo contenido en el interior de estos, tubos Durham invertidos. Adicionamos el medio sobre cada tubo esterilizado. Inoculamos aadiendo muestra -3 diluida decimalmente en proporcin de 1x10 . Incubamos aerbicamente a 37C durante 48 horas.

Materiales y reactivos
Materiales 3 Erlenmeyers 4 tubos de ensayo 4 Mecheros 1 probeta Hisopos Estufa Autoclave Incubadora 4 cajas petri 10 mL y 3 cajas petri 20mL Mortero Reactivos Alcohol 90% Agar Muller-Hinton Agua destilada Agar bismuto sulfito 2 Brillant Green Bile (2%) Broth Lauryl Tryptose Broth E.M.B Agar Reactivo de Kovacs Discos de: Gentamicina, ampicilina,penicilina,eritromic ina 4 cortes pequeos carne res y cerdo

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2.3 Lauryl Tryptose Broth: Se suspendieron los polvos en agua destilada, mezclamos bien y calentamos para disolver el medio. Distribuimos en tubos de ensayo contenidos de tubos Durham invertidos. Autoclavamos a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos. Inoculamos aadiendo muestra diluida decimalmente en proporcin de 1x10-3. Incubamos aerbicamente a 37C durante 48 horas. 3. Pruebas bioqumicas: Despus de obtener crecimiento bacteriano en los anteriores medio se realizo diferentes pruebas para confirmar la presencia de algunos coliformes totales. 3.1 E.M.B Agar: Se suspendieron los polvos en un litro de agua destilada. Calentamos con agitacin suave hasta que completara su disolucin y hervimos durante un minuto. Esterilizamos en autoclave a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos. Dejamos enfriar a una temperatura 45- 50. Luego se dejo hasta que el medio se coloc solido, se inocul con las muestras del medio bismuto sulfito por una siembra en estra. Incubamos aerbicamente a 37C durante 48 horas. 3.2 Agua peptonada y prueba de Indol Se utiliz la prueba Indol para la confirmacin de triptfano por la formacin de anillo rojo en la superficie del medio, con el reactivo Kovacs, esta se prepar con 15g por 1000ml de agua peptonada. En este se inoculo de las muestras ya existentes del Brillant Green Bile (2%) Broth, que son las muestras carne de res (B-1) y carne de cerdo (C-3), y de cada una se tomaron 100 L del inoculo. 4. Antibiogramas: Despus de haber confirmado la presencia de algunas cepas en las muestras, se estudio la sensibilidad de estos microorganismos, mediante mecanismos inhibidores de la accin de los antibiticos. Los discos utilizados para la inhibir la actividad son: E: Eritromicina AMP: Ampicilina CN: Gentamicina

P: Penicilina 4.1 Agar Muller-Hinton: se suspendi los polvos en un litro de agua destilada. Calentamos con agitacin suave hasta su completa disolucin y hervimos durante un minuto. Esterilizamos en autoclave a 121C (15 p.s.i.) durante 15 minutos. Dejamos enfriar a temperatura 45-50C y vaciamos en 2 placas de petri estriles hasta solidificar. 4.2 Posteriormente se realizo la siembra en colchn de las cepas de klebsiella pneumoniae, y salmonella en cada agar Muller-Hinton (Estas se aislaron de las anteriores muestras de el agar E.M.B). Luego de haber inoculado, se colocaron los discos de E, AMP, CN y P. presionndolos ligeramente contra el agar.

Resultados
Se tomaron un total de 4 muestras, de las cuales fueron crnicos de supermercados y tiendas, el cual mostraron resultados a modo que se observ la presencia de coliformes totales en los alimentos que son de transporte y alimento diario. Medio bismuto sulfito, este medio selectivo es utilizado para el aislamiento de Salmonella y otros bacilos entricos. La peptona, el extracto de carne y la dextrosa proporcionan los nutrientes necesarios para el crecimiento de los microorganismos por el cual el sulfato ferroso acto como indicador en la produccin de sulfuro de hidrogeno que se manifiesta en el centro de la colonia por un precipitado negro y un halo negro grisceo con brillo metlico por la reduccin de los iones bismuto en presencia de sulfuro de hidrogeno, el cual indica que hubo presencia de coliformes totales. Carne de res (B-1): Se observo crecimiento de Salmonella typhi el cual haban pocas colonias con centro negro y bordes claros, a las 48 horas con halo negro grisceo y brillo metlico (Fig. 1). El aspecto de estas colonias era de forma irregular algunas circulares con borde entero y ondulado, su elevacin es elevada con una superficie mate o brillante, tambin hubo mayor presencia de Escherichia coli presenciada por colonias verdes y algunas claras muy plidas, el aspecto de las colonias fue circular con

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borde entero, su elevacin eran plana y su superficie era cremosa. Carne de res (L-2): Claramente se observ la presencia de salmonella representadas en colonias negras a verdes con brillo metlico en abundancia como se muestra en la Fig. 2. El aspecto de las colonias eran formas puntiforme y circulares con bordes enteros y ondulados, con elevacin convexa y planas, su superficie era brillante Carne de cerdo (C-3): No hubo gran cantidad de salmonella y E. coli a comparacin de las anteriores muestras. El aspecto de las colonias era de elevacin plana y convexa, su superficie era mate, sus formas eran puntiformes y algunas blancas plidas (E.coli) circulares, algunas con bordes enteros ondulados (Fig. 3). Carne de res (D-4): Fue la muestra que menos colonias present, de igual manera hubo presencia de E.coli y algunas pocas de Salmonella. Las formas de las colonias eran circulares con elevacin plana convexa, sus bordes eran enteros y su superficie era brillante y algunas cremosas (Fig. 4). Medio Brillant Green Bile (2%) Broth, los nutrientes que aportan el extracto de levadura y dos peptonas; la lactosa y sacarosa con rojo fenol forman un sistema de diferenciacin para excluir los fermentadores de lactosa o sacarosa, mientras que las salmonellas no producen cidos a partir de estos azucares. Podemos resaltar la aparicin de evidencias en este medio en la muestra B-1 que dio positivo (Fig. 5), esta es indicada mediante copiosas cantidades de formaciones de gas (formacin de una burbuja dentro del tubo Durham) y turbiedad en el medio, lo que indica evidentemente microorganismos que tienen la capacidad de fermentar un hidrato de carbono especifico que se incorpora a un medio basal, lo que produce acido con gas visible o sin l. Lo que confirma la aparicin de E.coli. En cuanto la muestra C-3, se torn a ser turbia pero sin presencia de gas en el tubo.

Fig. 1: Agar bismuto sulfito. Crecimiento bacteriano muestra B-1

Fig. 2: Agar bismuto sulfito. Crecimiento bacteriano muestra L-2

Fig. 3: Agar bismuto sulfito. Crecimiento bacteriano muestra C-3

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L-2

D-4

Fig. 4: Agar bismuto sulfito. Crecimiento bacteriano, muestra D-4 Fig 7: Medio Lauryl Tryptose Broth. Crecimiento bacteriano muestras L-2 y D-4

C-3

B-1

Medio E.M.B La sacarosa est incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliformes que fermentan ms rpidamente la sacarosa que la lactosa. Este medio utiliza la eosina y el azul de metileno, para permitir la diferenciacin de colonias fermentadoras. Se obtuvieron muestras lacto-positivas el cual evidencia la presencia de microorganismos asociados a esta actividad y se interpretaron que los colorantes actuaron como inhibidor e indicador. Los carbohidratos proporcionaron la fuente de energa, los fosfatos actuaron como buffer y el agar como agente solidificante, y los resultados de cada muestra presuntiva de el medio bismuto sulfito, fueron positivas ya que estas presentaron las siguientes formas: las colonias de salmonella y shigella son translcidas, de color mbar o incoloras y los coliformes que utilizan lactosa y/o sacarosa producen colonias de color azul a negro con centros oscuros y brillo metlico. Otros coliformes como enterobacter presentaron colonias mucosas de color rosa. Aspectos de colonias en E.M.B Agar: B-1: La forma de esta colonia fue puntiforme, sus bordes enteros, su elevacin es un poco elevada y a la vez convexa, su textura es lisa y seca (Fig. 8).

Fig. 5 y 6: Medio Green Bile (2%) Broth. Crecimiento bacteriano muestras C-3 y B-1

Medio Lauryl Tryptose Broth este caldo rico en nutrientes que permite un rpido desarrollo de microorganismos fermentadores de la lactosa, aun de los fermentadores lentos. Por la fermentacin de la lactosa, se produce acido y gas, este ltimo no se evidenciaron en los tubos de la muestras L-2 y D-4 el cual no hubo evidencias presuntivas sobre la presencia de microorganismos fermentadores en estos dos medios por el cual no hubo burbuja de gas, pero si hay presencia de turbidez en el resto del tubo, lo que puede mostrar la actividad de otros microorganismos. (Fig. 7).

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L-2: Los bordes de esta colonia son lobulados algunas filamentosas, su elevacin es plana, su forma es irregular con superficie cremosa. (Fig. 9) C-3 y D-4: Igual aspecto que la muestra L-2 con la diferencia que estn ms concentradas y su color es ms opaco. (Fig. 10 y 11)

Fig. 10 Medio E.M.B. Crecimiento bacteriano muestra C-3

Fig. 11: Medio E.M.B. Crecimiento bacteriano muestra D-4

Fig. 8: Medio E.M.B. Crecimiento bacteriano muestra B-1

En cuanto a la prueba Indol realizada a las muestras B-1 y C-3 se determin si la bacteria posee una enzima (triptofanasa). La triptofanasa hidroliza el triptfano en Indol y alanina. El Indol se detecta con el reactivo de Kovacs en el cual las muestras presuntivas fueron negativas por no presentar un anillo rosa-rojizo en la superficie (Fig. 12). Posibilidad de que puede haber presencia de Salmonella y Klebsiella.

Fig. 9: Medio E.M.B. Crecimiento bacteriano muestra L-2

B-1

C-3

Fig. 12: Agua peptonada (prueba Indol). Muestras B-1 y C-3

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Inhibicin de K. pneumoniae y Salmonella (Antibiogramas): En los antibiogramas se mostr un halo de inhibicin en la muestra de K. pneumoniae (fig. 13) con un dimetro de 0,78 mm en el disco CN, el cual indica la susceptibilidad y eficacia de este inhibidor bacteriano; de igual manera con salmonella (fig. 14) obteniendo un halo de inhibicin menor de 0,5 mm de dimetro en el disco CN.

MOO

Antibitico

CN

AMP

K. pneumoniae

Fig. 14: Medio Muller-Hinton. Inhibidores de actividad en Salmonella muestra C-3 en agar E.M.B.

Salmonella

Tabla 1: Resultados de inhibicin segn el antibitico utilizado en cepas de K. pneumoniae y Salmonella. Los discos P, E, AMP no tuvieron actividad al tratar de inhibir en las cepas de K. pneumoniae y Salmonella

Discusin
La carne es un medio rico en nutrientes tales como Carbono, Nitrgeno, vitaminas, etc., estos son necesarios para el crecimiento de los microorganismos, estos microorganismos que pueden alterar la carne llegan a ella por infeccin del animal vivo (contaminacin endgena) o por invasin postmortem (contaminacin exgena) (Ingraham et al, 2006). A partir de esto podemos inferir que esta es una de las principales causas de la aparicin de microorganismos en las muestras estudiadas. A pesar de que las muestras de carne de supermercados presentan un menor nivel de contaminacin, no fueron ajenas a la presencia de microorganismos, ya que la carne se halla expuesta a la contaminacin microbiana desde el momento en que se desangra el animal, adems de presentar una contaminacin endgena, pues la carne conserva las caractersticas microbianas generales que tena previo al sacrificio, donde la superficie del animal est contaminada por microorganismos provenientes del suelo, el aire y el agua (Medina, 2008).

Fig. 13: Medio Muller-Hinton. Inhibidores de actividad en Klebsiella pneumoniae, muestra L-2 en agar E.M.B.

Al haber analizado las condiciones de control de calidad, as como los factores que influyen en ella, se encontr predominancia de enterobacterias tales

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como E. coli y salmonella, las cuales constituyen el conjunto mayor y ms heterogneo de bacilos gram negativos de importancia mdica. Estos microorganismos son de distribucin mundial y se encuentran en el suelo, el agua la vegetacin y formando parte de la flora intestinal normal de casi todos los animales, incluido el ser humano; siendo esto comprobado por el estudio de Ingraham et al, en el 2006. En el medio Brillant Green Bile , solo se observo el crecimiento de E. coli, segn (Panreac, 2003) esto se debe a que la composicin de este medio (Bilis de buey y del Verde Brillante) inhibe el crecimiento de casi la totalidad de los microorganismos Gram positivos y Gram negativos distintos del grupo de coliformes, siendo este muy selectivo para E.coli. Se ha de sealar que la concentracin de Verde Brillante es crtica para impedir el crecimiento de grmenes anaerobios capaces de fermentar la lactosa a 44C, lo cual, si se produjera, podra falsear los resultados. Debe confirmarse la identificacin por otras pruebas, ya que la fermentacin de la lactosa con formacin de gas se interpreta como indicativo de E.coli. En el medio Lauryl Tryptose Broth utilizado para el rpido desarrollo de microorganismos fermentadores de lactosa, no se observaron presuntiva presencia de este disacrido en las muestras L2 y D4, segn (Pascual, 2003) para que la muestra se obtuviera positiva debe producir burbujas (gas) en los tubos Durham, las cuales no fueron observadas. Sin embargo se evidenci una turbidez en el resto del tubo, lo que indica la presencia de otros tipos de bacterias. En el caldo Lauryl Tryptose Broth, por la fermentacin de la lactosa, se produce acido y gas, en este no se evidenci en los tubos de la muestras L-2 y D-4 el cual no hubo evidencias presuntivas sobre la presencia de coliformes totales en estos dos medios, por el cual no hubo burbuja de gas, pero si hay presencia de turbidez en el resto del tubo, lo que puede mostrar la actividad de otros microorganismos. (Fig. 7). Con relacin a los antibiogramas, se observo que el antibitico Gentamicina fue el nico al que las

bacterias no fueron resistentes, presentando halos de inhibicin, esto debido a que la Gentamicina es un antibitico aminoglucosdico de amplio espectro, actuando sobre bacterias gramnegativas aerobias, incluyendo enterobacteriaceas, pseudomonas y hemophilus, actuando tambin sobre estafilococos, siendo su actividad limitada sobre estreptococos (Pascual, 2003). La Eritromicina no acta contra la mayor parte de los bacilos gram negativos entricos aerbicos, motivo por el cual no hubo reaccin antibitica (Pascual, 2003).

Conclusiones:
Teniendo en cuenta que la carne es un medio donde se identifica varios microorganismos, se observ que las muestras tomadas en las carniceras de los barrios presentan un mayor nivel de contaminacin con respecto a las muestras tomadas en los supermercados; esto se debe a que en estos establecimientos en muchas ocasiones no se presentan las condiciones de asepsia (utensilios, equipo, personal de procesos, instalaciones, almacenamiento, etc.) adecuadas para el manejo de control y calidad de la carne. Esto se conoce como contaminacin exgena, la cual altera las caractersticas organolpticas causando intoxicaciones alimentarias (Medina, 2008). La bacteria E.coli estn presentes en la carne de res y en la carne de cerdo, ubicadas en el intestino y en algunos msculos beneficindose de ellos, estas bacterias son perjudiciales para los humanos causndoles daos intestinales, ya que se potencia el nmero de bacterias malficas para el hombre. Para determinar la produccin de Indol, se obtuvo un resultado negativo (Indol-) de esta prueba el cual concluimos que los microorganismos de las muestras B1-C3 no presentan la enzima triptofanasa, lo cual nos indica la presencia de Klebsiella. Al encontrar gran cantidad de microorganismos en las muestras, inferimos que es de suma importancia el control de la higiene y los factores de los cuales depende el crecimiento de los microorganismos y que inciden en la calidad de la carne y los productos crnicos.

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Literatura citada:
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