XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA
LOS ALIMENTOS Y SU VALOR NUTRITIVO Lic. Mnica GAGGIOTTI INTA Rafaela mgaggiotti@rafaela.inta.gov.ar 1. IMPORTANCIA DE LA CALIDAD DE LA DIETA. DEFINICIN DE NUTRIENTES Y ALIMENTO. Tradicionalmente, los objetivos de mayor peso de los programas de mejoramiento de las especies forrajeras han sido el incremento en el rendimiento de materia seca (MS) junto a una mayor persisten- cia y resistencia a las enfermedades. La importancia del valor nutritivo de los mismos en la produccin animal fue reconocida slo a partir del desarrollo del sistema proximal de anlisis en Alemania. Los esfuerzos para mejorar el valor nutri- tivo a travs de la mejora gentica son relativamen- te recientes. El manejo de cualquier especie forrajera involucra un compromiso entre produccin de materia seca y valor nutritivo del pasto. La cantidad de materia seca aumenta casi linealmente hasta el punto de madurez fisiolgica, sin embargo, el valor nutritivo de esta invariablemente decrece. Hasta no hace mucho tiempo, el criterio de selec- cin por valor nutritivo se basaba en el contenido de protena bruta y en la relacin tallo-hoja de la planta. El descubrimiento de que el contenido de protena bruta se relacionaba con la digestibilidad y que, en algunas plantas, los tallos inmaduros eran ms digestibles que las hojas, definieron diferentes parmetros de seleccin. La relacin directa hallada entre la digestibilidad y el valor energtico de los forrajes impuls al uso de este parmetro como criterio de seleccin. En los ltimos 20 aos se ha generado, a nivel mundial, apreciable cantidad de informacin que describe la relacin entre la calidad de los alimen- tos y el comportamiento productivo del ganado lechero. En la actualidad es posible producir con una mayor eficiencia y a menores costos si se for- mulan dietas sobre la base de calidad y potencial valor nutritivo de cada uno de los alimentos. En trminos de calidad, se establece que para opti- mizar la produccin de los rumiantes a partir de forrajes, es necesario optimizar la digestibilidad y el consumo, maximizar la eficiencia del crecimiento microbial y ajustar los nutrientes lo ms estrecha- mente posible a las cantidades y balances requeri- dos para la funcin productiva. Un alimento puede ser definido como cualquier componente de una dieta o racin que aporta los nutrientes necesarios para el organismo animal. Los nutrientes son compuestos orgnicos y/o inor- gnicos esenciales para los procesos metablicos (carbohidratos, compuestos nitrogenados, lpidos, vitaminas y minerales). 2. CLASIFICACIN DE LOS ALIMENTOS. Cualquier producto de origen vegetal o animal puede ser clasificado como un alimento, siendo los animales capaces de utilizar sus componentes orgnicos e inorgnicos (sin riesgo para su salud). Los alimentos pueden ser clasificados en dos gran- des grupos: forrajes y concentrados. El criterio para la caracterizacin de ambos grupos es el contenido de fibra bruta (FB); en general los forrajes contie- nen ms del 18 % de FB y los concentrados menos del 18 %. Sin embargo, sta clasificacin es imper- fecta y arbitraria. La FB no incluye totalmente a la lignina y a la hemicelulosa. Por ejemplo, la pulpa de remolacha que tiene un 17 % de FB y 47 % de pared celular (FDN), es considerada, de acuerdo a esta clasificacin, como un concentrado, mientras que la alfalfa inmadura con 24 % de FB y 36 % de FDN es clasificada como un forraje. Los alimentos dentro de cada grupo varan consi- derablemente. Algunos forrajes frescos, como gramneas y leguminosas en estado temprano de crecimiento, perteneceran al grupo de los concen- trados, pero se los clasifica como forrajes debido a que su alto contenido de humedad disminuye la concentracin de nutrientes por unidad de peso. Esto tambin se aplica a otros forrajes cuando su contenido de humedad es mayor al 40 %. Los cri- terios de clasificacin seran los siguientes: (Cuadro 1). Cuadro 1: Clasificacin de los alimentos. Alimento Materia seca Nivel de nutriente Fibra bruta (%) del alimento (%) por unidad de peso Forrajes Menos del 60% Bajo Ms del 18% Concentrados Ms del 60% Alto Menos del 18% 24 XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA 3. COMPOSICIN QUMICA DE LOS ALIMENTOS. Los constituyentes de los alimentos son el agua y la materia seca. La materia seca incluye compuestos orgnicos (carbohidratos, compuestos nitrogena- dos, lpidos y vitaminas) e inorgnicos (minerales). 3.1. El agua El contenido de agua de los alimentos est sujeto a un amplio rango de variacin. Puede oscilar desde un 8 % o menos en los alimentos secos (granos y rastrojos) hasta un 80-90 % en los alimentos sucu- lentos (forrajes muy tiernos, races y tubrculos). El agua contenida en las plantas en crecimiento est en relacin con el grado de desarrollo, siendo mayor en plantas jvenes que en las de mayor edad. La proporcin de agua de las pasturas es de aproximadamente 90 % a comienzo de primavera y de 65 % en verano, de manera que, la densidad de nutrientes se ve an ms disminuida en prima- vera que en verano (Cuadro 2). En las dietas basadas principalmente en pasturas, la presencia de agua diluye en forma marcada la con- centracin de nutrientes. Por otra parte es impor- tante destacar que el agua en las pasturas es pre- dominantemente intracelular, contribuyendo al volumen de la dieta. La densidad y el contenido de agua de un forraje estn intrnsicamente ligados y ambos pueden tener un gran impacto sobre el consumo voluntario. En varios trabajos se ha registrado que el contenido de agua en las pasturas tendra un efecto negativo sobre el consumo total de MS. 3.2. Los carbohidratos Las plantas se distinguen de las dems formas de vida por su habilidad para utilizar la radiacin solar en la sntesis de compuestos orgnicos. Los prime- ros productos de la fotosntesis son carbohidratos y cumplen fundamentalmente funciones estructura- les. Los alimentos que componen las dietas de los rumiantes son en su mayora forrajes. El principal objetivo en la alimentacin del ganado es sin dudas, la conversin eficiente de estos materiales en protenas y lpidos (carne/leche), lo cual se logra a travs de la poblacin microbiana del rumen que es capaz de metabolizarlos, con beneficios para su husped. Las plantas contienen carbohidratos en diferentes estados de polimerizacin, que van desde monosa- cridos hasta polmeros de alto peso molecular, como el almidn, la celulosa, la hemicelulosa y la pectina. Los ltimos tres estn integrados en la matriz de la pared celular y por lo tanto se los ha Alimentos ms comunes comprendidos dentro de cada grupo
FORRAJES CONCENTRADOS Forrajes verdes Forrajes conservados Residuos de cosecha y forrajes diferidos Energticos (1) Nitrogenados Suplementos minerales y vitamnicos (2) granos de cereales subproductos de molinera grasas y aceites subproductos de la industria del azcar subproductos hortcolas y frutcolas (1) Ms de 2,5 Mcal/kg MS de energa metabolizable. (2) Ms del 20% PB Teniendo en cuenta el contenido de fibra detergente neutro de los alimentos para rumiantes (FDN), los forrajes se podran caracterizar de la siguiente forma: lorrajes verdes: Entre 25 y 40 % FDN lorrajes conservados. Lnlre 40 y 70 % FDN Pesiduos de cosecha y lorrajes dileridos. Mayor a 70 lDN proteicos no proteicos 25 XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA denominados carbohidratos estructurales. Son cau- santes de la fibrosidad del alimento, no estn dis- ponibles para el metabolismo energtico de la planta, son insolubles en agua y poseen una fer- mentabilidad potencial lenta y limitada. La pectina constituye una excepcin debido a que es comple- tamente fermentable en el rumen. Los restantes carbohidratos, que no forman parte de la pared celular se denominan carbohidratos no estructura- les (CNE). Son compuestos activos en el metabolis- mo de la planta, se almacenan en rganos de reserva y estn constituidos principalmente por azcares libres, almidn y fructosanos. Este grupo de carbohidratos posee un potencial de fermenta- cin rpida y total en el rumen, al igual que en el proceso de fermentacin del ensilaje. Los componentes del contenido y de la pared celu- lar se pueden clasificar de acuerdo a su biodisponi- bilidad en tres clases (Cuadro 3). Los alimentos que poseen un alto contenido de pared celular (voluminosos) limitan el consumo en los rumiantes pero las dietas deben contener un mnimo de fibra de adecuada calidad y propieda- des fsicas para mantener las condiciones normales de fermentacin y evitar desrdenes metablicos. Con alimentos demasiados fibrosos, el consumo puede incrementarse a travs del procesamiento (picado, peleteado, reduccin del tamao de part- cula y ruptura de la estructura de la pared celular) dando como resultado un incremento en la densi- dad de la dieta y una disminucin en el trabajo de digestin y rumiacin. Los ventajas de estos trata- mientos dependern de la naturaleza del alimento. En trminos generales los voluminosos menos beneficiados son los de mayor digestibilidad. Entre los carbohidratos no estructurales, el almidn contenido en el endosperma del grano de los cereales, es uno de los compuestos relevantes en la alimentacin intensiva del ganado lechero. El balance de los nutrientes contenidos en los ali- mentos es esencial a los fines de obtener la mayor eficiencia de conversin del alimento en producto. La velocidad y la proporcin en la que son fermen- tados en rumen, son aspectos a tener en cuenta en el momento de seleccionar los componentes de la racin. Los carbohidratos poseen diferentes tasas de fermentacin relativa. Los azcares solubles tienen una tasa de fermentacin que duplica o tri- plica a la de los almidones de los granos de cereales y a su vez entre estos ltimos existen diferencias marcadas (avena, cebada, maz, en orden decre- ciente de tasa de fermentacin). Cuadro 2: Concentracin de nutrientes de una pastura de raigrs y trbol blanco, sobre base seca y hmeda. Composicin del forraje Base seca (%) Base hmeda (%) Carbohidratos no estructurales 27,0 4,1 Fibra detergente neutro 30,2 4,5 Protena bruta 25,3 3,8 Lpidos 6,1 0,9 Cenizas 11,4 1,7 Agua - 85,0 Cuadra 3: Biodisponibilidad de los componentes celulares. Componente Clase 1: - Carbohidratos solubles - Almidn - cidos orgnicos - Protenas - Pectina Clase 2 (pared celular) - Celulosa - Hemicelulosa Clase 3: - Lignina - Cutina - Slice -Taninos, aceites esenciales y polifenoles Digestibilidad (%) 100 + 90 100 + 90 100 variable variable indigestible indigestible indigestible Factor limitante Consumo Prdida fecal Consumo/toxicidad Fermentacin Fermentacin Lignificacin, silificacin y cutinificacin Limitan la utilizacin de la pared celular. Inhibidores de proteasas y celulasas 26 XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA 3.3. Componentes nitrogenados El nitrgeno (N) de los alimentos puede dividirse en dos grupos principales: protena verdadera (PV) y nitrgeno no proteico (NNP) soluble, obviando los cidos nucleicos y otras formas de NNP. En los forrajes el contenido de cidos nucleicos es insigni- ficante pero los productos fermentados, ricos en microorganismos, pueden tener una cantidad apre- ciable de estos componentes. En general, las plantas contienen cerca del 80 % de PV, compuesta por las protenas de las hojas y tallos, y las de reserva de las semillas. Las protenas de las hojas se encuentran en el citoplasma y los cloroplastos. Estas son de alto valor biolgico, pero muchas veces se les estima un valor menor debido a la tradicin de expresar la protena bruta (PB) como el contenido de N total x 6,25, olvidando las diferentes formas de nitrgeno que existen en las plantas. Las protenas citoplasmticas estn en forma soluble en el contenido celular y son muy sensibles al calor y al cambio de pH. Como ejem- plo, se puede citar la baja solubilidad de estas protenas en los henos. Los concentrados proteicos de origen vegetal son generalmente derivados de semillas de plantas de oleaginosas, que contienen protenas de alta solu- bilidad (globulinas y albminas), las cuales son propensas a la desnaturalizacin por calor y por los solventes a los que son sometidas en la extraccin del aceite. En forrajes verdes la fraccin de NNP soluble est compuesta bsicamente de aminocidos no esen- ciales, pero en silajes y henos stos pueden ser sustituidos por amonaco y aminas. En forrajes fer- tilizados con N el contenido de NNP aumenta debi- do al incremento de los aminocidos libres y nitra- tos. Los actuales sistemas de evaluacin de protena para el ganado (ARC, NRC, INRA) separan la prote- na del alimento en protena que se degrada en el rumen (protena degradable) de la protena que se escapa de la degradacin ruminal y pasa al intesti- no delgado (protena no degradable). La protena soluble se encuentra dentro de la fraccin de pro- tena degradable. La protena que se fermentar en el tracto digestivo posterior y la insoluble que est ligada a la fibra, se encuentran dentro de la frac- cin de protena no degradable. La competencia entre pasaje y digestin ruminal para el sustrato potencialmente digestible define la proporcin de alimento fermentado que pasar al omaso y abomaso. Este pasaje es importante debi- do a que determinar que proporcin de protenas alcanzar la digestin peptdica. En la reduccin de la solubilidad de las protenas estn involucrados dos tipos fundamentales de reacciones qumicas: a) la desnaturalizacin y b) la formacin de uniones conjugadas con otras sus- tancias. En los forrajes y otros alimentos para el ganado, que por alguna causa natural o artificial hayan sido sometidos a la accin del calor, ocurre con frecuen- cia la formacin de productos de la llamada reac- cin de Maillard. La reaccin de Maillard, de carc- ter no enzimtica, involucra la condensacin de azcares con aminocidos, seguida por una poli- merizacin. Se forma una sustancia de color marrn que contiene alrededor de 11 % de nitr- geno y que tiene muchas de las propiedades fsicas de la lignina. Este proceso, que se acelera en pre- sencia de agua, puede insolubilizar gran parte de las protenas (por ejemplo en henos y ensilajes mal preservados), hacindolas resistentes a la hidrlisis proteoltica. La temperatura crtica de reaccin parece estar en el orden de los 60 C o menos. Los polmeros de Maillard integran la protena insolu- ble. 3.4. Los lpidos La dieta de los rumiantes es normalmente escasa en lpidos debido a que su contenido en los forrajes es muy bajo (1-4%). Este tipo de dietas, con predo- minancia de fibra, ha conferido ciertas adaptacio- nes a los rumiantes, de manera que ellos son into- lerantes a elevados niveles de grasa en el medio ruminal. Los lpidos de los forrajes son alterados durante la digestin en los pre-estmagos, en virtud del pro- ceso de hidrogenacin de ciertas especies micro- bianas, de manera que los lpidos que el animal absorbe son bien diferentes a los que ingiere. Desde el punto de vista cuantitativo, los lpidos pueden ser agrupados en: a) los compuestos de reserva en las semillas (trigli- cridos); b) los lpidos de las hojas (galactolpidos) y c) las ceras, carotenoides, clorofila, aceites esencia- les, etc. Las grasas que se denominan de liberacin lenta en rumen, como la semilla de algodn y el poroto de soja, contienen alrededor de un 20 % de grasa altamente insaturada, mientras que las del sebo animal son relativamente saturadas y comparativa- mente inertes, por su alto punto de fusin. 27 XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA 3.5. Minerales y vitaminas El contenido mineral de una planta depende de la especie y la disponibilidad en el suelo. Los valores medios (g/Kg MS) que se han registrado de macro- minerales en gramneas y leguminosas templadas, respectivamente son: calcio 5,9 y 18,6, fsforo 3,3 y 3,6, magnesio 1,8 y 2,9, sodio 2,3 y 1,9. Estos valores enfatizan la importancia de las leguminosas como fuente de macrominerales. Las leguminosas contienen adems, una mayor cantidad de cobre, cobalto y zinc que las gramneas. En el proceso de pastoreo el ganado ingiere una cierta cantidad de suelo y absorbe minerales bajo la forma en que se encuentran en el mismo. Las retenciones de Calcio, Magnesio y Fsforo se ven incrementadas por la ingestin de suelo y sta puede ser una importe fuente de elementos trazas para el animal en pastoreo. La cantidad absorbida depender de la altura de la pastura y el nivel de contaminacin con suelo. La influencia de la fertilizacin sobre el contenido mineral del forraje es compleja. El efecto puede ser el incremento o la disminucin de un mineral en particular, dependiendo del contenido del suelo, la interaccin con otros minerales y los cambios indu- cidos en la composicin botnica de la pastura. Se han identificado como mnimo 15 minerales considerados esenciales para los rumiantes. De ellos siete son macroelementos (Calcio, Sodio, Potasio, Fsforo, Cloro, Azufre y Magnesio) y ocho microelementos (Cobre, Cobalto, Iodo, Hierro, Manganeso, Molibdeno, Selenio y Zinc). Un ele- mento mineral es considerado esencial si su defi- ciencia en la dieta es capaz de producir dao fun- cional y/o estructural. Muchos de los minerales considerados esenciales pueden tener efectos txicos cuando se suminis- tran en grandes cantidades, como por ejemplo el Cobre, Cobalto, Iodo, Manganeso, Molibdeno, Selenio y Zinc. De igual manera, algunos elementos como el Aluminio, Arsnico, Cadmio, Plomo y Mercurio son considerados txicos. Las vitaminas son nutrientes orgnicos requeridos en cantidades pequeas para numerosas funciones bioqumicas diferentes y en general no pueden sintetizarse en el organismo y, por lo tanto, deben recibirse de los alimentos. Las vitaminas se clasifican en dos grupos principa- les: Hidrosolubles (complejo vilaminico 8 y el acido ascrbico -vitamina C-) y Liposolubles (A, D, L, K). Las necesidades vitamnicas de los rumiantes son, a nivel del metabolismo general y celular, las mismas que la de los monogstricos. Sin embargo, las vas y los medios para cubrir estas necesidades son dife- rentes, debido a que las sntesis llevadas a cabo por los microorganismos del rumen hacen a los rumian- tes independientes con respecto al aporte exgeno de las vitaminas del complejo B. Sin embargo, en cuanto a las vitaminas liposolu- bles, los rumiantes dependen, al igual que los monogstricos, de los aportes de los alimentos, particularmente para las vitaminas A y E, y en menor medida para las del grupo D. 4. VALOR NUTRITIVO DE UN ALIMENTO. El valor nutritivo de los alimentos est determinado por: la concenlracion de nulrienles, la digeslibilidad de esos nulrienles y la naluraleza de los produclos linales de la diges- tin. El valor nutritivo hace referencia a las caractersti- cas del forraje consumido, que determina su con- centracin de energa digestible y su eficiencia parcial de utilizacin. La disponibilidad de los nutrientes de un alimento est esencialmente determinada por su composi- cin qumica (concentracin de nutrientes disponi- bles y no disponibles y estructuras orgnicas e inhibidores a los que estn ligados, que pueden limitar su biodisponibilidad). La caracterizacin de la disponibilidad de energa y protena de los alimentos requiere de un sistema de anlisis que permita la determinacin de la digesti- bilidad y otros parmetros del valor nutritivo. La estimacin del valor nutritivo de los alimentos utili- zados en produccin animal puede obtenerse por pruebas de laboratorio o evaluando el aprovecha- miento de las distintas fracciones en pruebas in vivo. Los mtodos tradicionales de laboratorio (anlisis qumicos convencionales - qumica hmeda -) involucran varios procedimientos para determinar los principales componentes qumicos. Son los ms usados y estn basados en principios qumicos y bioqumicos slidos. La obtencin de resultados precisos depende de que se realice un buen mues- 28 XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA treo, de una correcta manipulacin de las muestras despus de la recoleccin y de procedimientos ana- lticos adecuados. 4.1. Anlisis proximal. El sistema convencional que divide a la MS en cinco fracciones: exlraclo elereo (lipidos). LL libra brula. l8 proleina brula (nilrogeno lolal x 6,25). P8 cenizas exlraclo no nilrogenado. LNN Este sistema es la base sobre la cual se calcula el Total de Nutrientes Digestibles (TND). No obstante ser ampliamente usado fue objeto de severas crti- cas. 4.2. Sistema detergente o Mtodo de Van Soest Un nuevo mtodo de qumica hmeda fue desarro- llado por Van Soest, debido a que la FB no diferen- cia suficientemente bien los componentes de la pared celular. El sistema de anlisis proximal fue criticado por subestimar forrajes de buena calidad y sobrestimar forrajes de calidad pobre. El sistema de detergentes es la forma ms comn de particionar a los alimentos y propone el siguien- te esquema de particin de la materia orgnica: lraccion soluble en delergenle neulro (conleni- dos celulares): lpidos, azcares, almidn, protena soluble, NNP, cidos orgnicos y sustancias solu- bles en agua. lraccion insoluble en delergenle neulro (paredes celulares o fibra detergente neutro -FDN-) : Solubles en delergenle acido. proleina insoluble y hemicelulosa lnsoluble en delergenle acido (lDA). celulosa, lignina, compuestos nitrogenados lignificados, pro- tena alterada por calor, cutina, slice. Desde el punto de vista de su digestibilidad los constituyentes de la pared celular pueden ser agru- pados en dos fracciones perfectamente diferencia- das: polisacridos: celulosa e hemicelulosa que son utilizables parcialmente por la fermentacin enzi- mtica de la flora del rumen. Las gramneas pue- den contener una proporcin hasta casi tres veces mayor de hemicelulosa que las leguminosas para un mismo porcentaje de celulosa. En cuanto a la lignina las leguminosas contienen una proporcin dos o tres veces mayor que las gramneas. lignina, cutina y slice: tienen una digestibilidad prcticamente nula. Se ha demostrado que la FDN est correlacionada negativamente con el consumo de materia seca. La FDN aumenta con el avance de la madurez de los forrajes. La FDA est relacionada en forma negativa con el porcentaje de digestibilidad que tiene el forraje al ser suministrado. 4.3. Digestibilidad Una de las medidas ms tiles del valor nutricional de los alimentos es la digestibilidad aparente de la materia seca, pero debido a que su determinacin in vivo es laboriosa y consume grandes cantida- des de alimentos, se han propuestos varios mto- dos de laboratorio (biolgicos y qumicos) para su estimacin. Los mtodos de digestibilidad in vitro simulan los procesos digestivos de los rumiantes. El mtodo en dos etapas, basado en el uso de licor ruminal y seguido por un tratamiento con pepsina, para completar la degradacin de los componentes pro- teicos del alimento y de las bacterias adheridas al mismo, es el que est ms difundido. Este mtodo propuesto por Tilley y Terry es confiable, exacto y preciso para la prediccin de la digestibilidad in vivo de una amplia variedad de forrajes. Los sistemas in vitro tienen el potencial de ser ms exactos que los qumicos, debido a que los microorganismos y las enzimas son sensibles a fac- tores indeterminados que afectan la tasa y el por- centaje de digestibilidad. El inconveniente de este mtodo es la necesidad y el costo de mantener animales donantes fistulados y a que puede existir gran variabilidad entre distintas tandas de licor ruminal (especie donante, dieta suministrada, cam- bios en el manejo de la alimentacin, momento en que se recolecta el licor ruminal). Para evitar la dependencia de animales fistulados se desarrollaron las tcnicas enzimticas. Estas con- sisten en digerir los alimentos con celulasas fngi- cas con pretratamientos con pepsina o solucin detergente neutro. Otro mtodo, actualmente utilizado, es el de diges- tibilidad in situ, en el cual la digestibilidad es medida colocando el alimento en bolsas especiales e incubarlo en las mismas dentro del rumen del animal. Otra forma de estimar la digestibilidad es utilizando los datos de composicin qumica de los alimentos 29 XXI CURSO INTERNACIONAL DE LECHERIA PARA PROFESIONALES DE AMERICA LATINA El uso de ecuaciones empricas es el mtodo ms comn que usan los laboratorios comerciales. Estas ecuaciones se derivan de regresionar la digestibili- dad sobre la concentracin de una fraccin qumi- ca en particular. 4.4. Anlisis por espectroscopa de refractan- cia infrarroja cercano (NIRS) Es un mtodo instrumental que permite determinar la composicin qumica de un alimento utilizando la informacin generada por l mismo cuando es excitado con una radiacin infrarroja cercana. Las ventajas que ofrece son alta velocidad de trabajo, preparacin simple de la muestra, posibilidad de realizar mltiples anlisis en una sola operacin y la no destruccin de la muestra. La gran desventaja que presenta es la dependencia de un complicado proceso de calibracin.