Sunteți pe pagina 1din 60

Florin Molnar Contribuii la cunoterea transmiterii ereditare a culorii la guppy

ISBN 978-973-88929-2-7

2008 Bioflux, Cluj-Napoca

Autor Florin Molnar

Refereni tiinifici: Ioan Valentin Petrescu-Mag Lucian Drago Gorgan

Director editur: Ioan Valentin Petrescu-Mag Consilier editorial: Ruxandra Mlina Petrescu-Mag

Editura Bioflux, Cluj-Napoca, 2008

Mulumiri
Doresc s aduc pe aceast cale mulumiri Conducerii Facultii de Zootehnie i Biotehnologii, referenilor tiinifici, Cercet. Dr. Ioan Valentin Petrescu-Mag i asist. Dr. Lucian Drago Gorgan pentru competena, rbdarea i nelegerea cu care m-au ndrumat n finalizarea acestei lucrri. De asemenea, mulumesc tuturor cadrelor didactice de la Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar care de-a lungul acestor cinci ani de zile, au contribuit la formarea mea ca inginer i cercettor. Nu mai puin important a fost contribuia fotografului Mircea Roca, cu ajutorul caruia au fost realizate superbele fotografii, mulumesc acvaritilor clujeni Vanea Ciprian, respectiv domnului Chifu Claudiu. Adresez mulumiri colegilor mei, alturi de care am nvat de-a lungul celor cinci ani de studiu, pentru buna nelegere care a dinuit ntre noi. Nu n ultimul rnd, mulumesc prietenilor care mi-au fost alturi, dar, mai presus de toate, in s mulumesc familiei i n mod cu totul special mamei mele care m-a susinut fizic i moral n aceast etap important a formrii mele i nu numai. Florin Molnar

CUPRINS

Intoducere

Partea I. Date din literatura de specialitate

1. Scurt retrospectiv asupra acvaristicii 2. Petii guppy 2.1. Origine i rspndire 2.2. Taxonomie i filogenie 2.3. Genetica petilor guppy 3.Varietile de guppy 3.1. Varieti ameliorate

2 7 7 8 9 16 17

Partea a II-a. Cercetri proprii

1.Premisele tiinifice i scopul cercetrii 2.Material i metod 2.1.Material biologic 2.1.1. Origine 2.1.2.Descriere 2.1.2.1.Half-Black Black (Tuxedo negru, Full Black) 2.1.2.2.Red Blond

20 22 22 22 23 23 25

2.2.Mediul de cretere 2.2.1.Iluminarea 2.2.2.Calitatea apei i parametri fizico-chimici 2.2.3.Aerarea apei 2.3.Furajarea loturilor experimentale 2.3.1. Hrana vie 2.3.1.1. Tubifexul 2.3.1.2 Crustaceii zooplanctonici 2.3.2. Hrana uscat 2.3.3. Modul de administrare a hranei 2.4. Plantele utilizate 2.5. Desfurarea experimentelor 3.Rezultate i discuii 3.1.Rezultatele ncrucirilor 3.2.Analiza segregrii caracterului Half-Black prin testul X2 4.Concluzii Referine bibliografice

28 28 28 29 30 30 30 31 33 34 34 35 37 37 41 44 46

Introducere
Piscicultura ornamental sau acvaristica reprezint una din preocuprile mereu crescnde ale tot mai numeroilor amatori, care, graie progreselor tehnice i a schimburilor internaionale, cucerete i intereseaz mii i mii de adepi. Eforturile conjugate ale acvariofililor, oamenilor de tiin i ale comercianilor, promit pentru viitorul nu prea ndeprtat, un interes mereu crescnd pentru acest hobby pasionant. Acvariile, fie c sunt de ap dulce sau de ap srat, reprezint o secven de natur, un univers viu i fascinant n miniatur, expus ochilor notri, care ne transpun ntr-o lume feeric, de poezie i basm. Ele ne ofer secvene revelatoare din secretele unei lumi vii, care altfel ar rmne necunoscute, iar noi am fi mult mai sraci. Un acvariu amenajat cu gust i pricepere, constituie un col armonios de via, n care pot fi introduse numeroase organisme acvatice, ncepnd cu cele minuscule, unicelulare i terminnd cu vertebratele. Acvaristica, aceast frumoas i odihnitoare ndeletnicire, ne asigur n mod plcut i util o parte din timpul liber, ne captiveaz i ne incit, relaxndu-ne totodat i oferindu-ne clipe de neuitat din fascinantul univers al componentelor acvatice. Diversitatea vieuitoarelor din mediul submers, ce nu pot fi mngiate dect cu privirea, admirndu-le totodat frumuseea, elegana i paleta cromatic, au condus la strnirea curiozitii omului, care s-a oferit cu mult rbdare i pasiune s le studieze, s le descifreze tainele, aa nct n prezent sunt milioane de amatori ndrgostii de acest microunivers acvatic i de aceast ndeletnicire. A fi proprietarul unui acvariu nu este ns o joac de moment, ci presupune acceptarea unor responsabiliti privind viaa i activitatea din acest microunivers viu, regizat de principii bioecologice eseniale, pentru buna lui funcionare i spre binele colocatorilor notri. Un acvariofil serios nu se va mulumi numai s ntrein o colecie de peti valoroi, ci va fi obligat, chiar fr s vrea, s-i dea seama, s-i rememoreze unele cunotine asimilate pe parcursul vieii, s-i completeze bagajul de informaii cu noile cuceriri din biologie, hidrologie, biochimie, biogeografie, fizic, genetic etc. i s neleag legile biologice ce guverneaz natura.

Acvaristica este extrem de benefic i pentru copii, deoarece, pe lng plcerea pe care le-o produce fascinanta lume subacvatic, dezvolt la acetia cromatica culorilor, agerimea observaiilor, responsabilitatea, ordinea, capacitatea de judecat i gndire, curiozitatea i pasiunea. De asemenea, oblig copiii s se informeze n vederea sporirii posibilitilor de a crea permanent noi biotopuri naturale, ct mai reconfortante n acest minuscul univers acvatic. n afara rolului decorativ, acvariul contribuie i la lupta mpotriva ruperii de natur, speciile de peti i flora acvatic trezindu-le interesul celor care vin n contact cu acesta pentru nelegerea relaiilor ecologice, dezvolt gustul pentru natur i ofer posibilitatea acumulrii unor noi noiuni despre lumea plantelor i animalelor. Rolul benefic al acvariilor a fost demonstrat i n ameliorarea strilor psihice ale bolnavilor, considerent pentru care n numeroase cabinete medicale, case de copii sau cmine pentru btrni, au fost instalate acvarii. Acum, cnd deertul urban i industrial, masa de beton, fier i asfalt, ofer omului o via de calitate biologic tot mai sczut, ce duce la tracasare, agitaie, poluare sonic sau biologic, noi putem s-i recomandm cu mult cldur ACVARISTICA. Cteva minute petrecute n prezena acestui col al naturii, i poate aduce omului ce triete n claustrare, un sentiment de intimitate, de contopire cu natura, o relaxare i o stare de confort psihic (I OAN B UD 2002).

Partea I Date din literatura de specialitate

1. SCURT RETROSPECTIV ASUPRA ACVARISTICII

Dac unele plante cultivate sau domesticirea unor animale i-au servit ca surs de hran sau i-au uurat munca i totodat viaa, altele avndu-le n preajm i bucurau inima, i ncntau ochii prin culorile lor, auzul prin cntecul lor, sau l mbtau cu al lor parfum. Omul primitiv a desenat pe pereii peterilor plante i animale dintre care nu lipsesc petii. ngrijirea animalelor sau creterea unor plante n ghivece confirm faptul c natura a fascinat omul din cele mai vechi timpuri. Acvaristica i are nceputurile n cele mai ndeprtate timpuri ale istoriei omeneti, lucru dovedit de descoperirile arheologice din mai multe ri. n antichitate, cu 5000-6000 ani n urm, egiptenii aveau n locuina lor bazine din care erau crescute specii ornamentale de peti, existente si azi n acvariile noastre ca Bagrus schilbeides, Chromis nilotica, Haplochromis sp, Mormyrus sp i alte specii, care triau n bazinul Nilului. n vechea Chin, creterea petilor n recipiente era un lucru obinuit. Multe legende chinezeti vorbesc despre istoria ,,petiorului de aur. Caraii aurii de diferite varieti i frumusee rar au fost creai de ctre chinezi printr-o selecie de mii de ani. n China veche, cultul creterii carailor aurii a atins apogeul n provincia Che-Kiang, unde n veacul al VI-lea cei nstrii obinuiau s creasc aceti peti n vase sferice, de porelan, frumos colorate. Dup o cronic veche, mpratul Kia-Tsing (1522-1566) a poruncit unui atelier manufacturier de porelan s confectioneze 300 de vase din porelan pentru temple, ornate cu flori de lotus i cu zmei. Oaspeii acestor vase erau, bineneles ,,petiorii de aur.

n veacul al XVI-lea cnd spaniolii au invadat Mexicul au gsit la curtea mpratului aztec Montezuma o grdin zoologic frumos amenajat, unde existau bazine pentru peti de consum i peti ornamentali prini din apele Mexicului iar n palat avea chiar vase de porelan sferice n care erau inui petii ornamentali. Pe teritoriul Italiei au fost decoperite, n jurul palatelor, rmiele unor piscine i vivarii, acestea dovedind c i romanii obinuiau s creasc animale pentru frumusee. Lng Pompei au fost descoperite, urmele mai multor piscine ornamentale, pe care le putem considera drept precursori ai acvariului de astzi. n veacul al XVIII-lea, vasul de porelan pentru peti ajunsese unul dintre articolele nsemnate ale exportului chinezesc pe care l cumprau n special curile europene amatoare de lux. Odat cu vasele de porelan, vasele comerciale au adus n Europa muli carai aurii. Aceast pasiune a creterii petilor roii s-a extins mai ales n Portugalia, Spania i Frana, datorit flotelor comerciale dezvoltate ale acestor ri, care i aduceau din sud-estul Asiei, unde btinaii i exportau. Pe lng China, europenii au descoperit i alte ri furnizoare de peti ornamentali (caras auriu i combatant de Siam) ca, de exemplu, India, Thailanda, Siam, insulele Djawa (Jawa), Kalimantan (Borneo), Japonia etc. i aici petii erau inui, fie n bazine, fie n vase sferice, asemntoare cu cele chinezeti. A trebuit s treac mult vreme pn cnd amenajarea acvariului s se fac dup cunotine de hidrochimie, hidrobiologie, fiziologie, ecologie, fizic, discipline a cror dezvoltare a permis pstrarea unui raport corect ntre plante i peti. Atunci s-a constatat c ngrijirea, hrnirea i nmulirea nu trebuie fcut la ntmplare ci conform condiiilor mediului de via din care provin speciile respective.

Un pas important n evoluia acvaristicii l-a reprezentat dezvoltarea industriei sticlei (n jurul anului 1600) i apariia vaselor din sticl, care au revoluionat aceast pasiune. Astfel, datorit transparenei vaselor de sticl, au fost posibile studii i observaii care au mbogit cunotinele de acvaristic. Strnsa legtur dintre plantele acvatice i peti a fost descoperit pentru prima dat n anul 1841 de ctre S.H. Ward, care a pstrat timp ndelungat ntrun bazin plante acvatice i peti de ap dulce. El a observat c apa din bazin rmne curat mai mult vreme. n anul 1842, Johnston a demonstrat existena unui echilibru al gazelor n ap, folosind n experienele lui peti i plante acvatice. Ph.H.Gosse amenajeaz primul acvariu cu peti marini n incinta Grdinii zoologice din Londra, n 1850. El a introdus termenul de aquarium. Acest aquarium modest nfiinat de Gosse a fost un precursor al acvariului de astzi. Expoziiile de acvarii, acvariul permanent din Grdina zoologic i moda de a amenaja acvarii n locuine din Anglia l-au impresionat pe germanul Rossmssler. Acesta a considerat c acvariul poate fi un mijloc de culturalizare a maselor i a ntreprins n Germania o campanie de popularizare n pres a acestuia. A scris numeroase articole despre acvariu, dintre care se detaeaz cel aprut n 1856 n revista Gartenlaube intitulat Der See im Glasse adic un lac n bazinul de sticl. Articolul coninea principii care stau i astzi la baza amenajrii tiinifice a acvariului. n articol, autorul dezvolt ideea c acvariul este o podoab a cminului i mijlocul cel mai eficient de distracie i totodat de studiu, prere pe care astzi o mprtesc toi acvarofilii. Anul apariiei acestui articol (1856) este considerat drept anul naterii acvaristicii moderne. Pe drumul indicat de Rossmssler, acvaristica s-a dezvoltat i s-a rspndit repede i n alte ri din Europa. La aceast rspndire i popularizare a contribuit n mod

substanial cartea Das Ssswasser Aquarium (Acvariul de ap dulce), care a fost reeditat de patru ori ntr-un interval scurt. Iar n 1869, cunoscutul zoolog A.Brehm organizeaz acvariul de la Berlin. n cadrul unor institute de cercetare cu profil ihtiologic sau hidrobiologic iau fiin acvarii n mai multe ri. Astfel, n 1872 se amenajeaz acvariul marin al Staiunii de cercetri marine de la Sevastopol. n Rusia, N.S.Sograf duce o intens propagand pentru rspndirea acvaristicii, organiznd n anul 1870 primul cerc de acvaristic. N.F.Zolotnikii editeaz n 1889 cartea intitulat Akvarium liubitelia (Acvariul amatorului), care s-a epuizat imediat dup apariie. n perioada interbelic n toat Europa, dar i pe alte continente, iau fiin acvarii n grdinile zoologice sau n parcuri publice. Au loc numeroase expoziii de popularizare a petilor ornamentali, apar cri, reviste i ulterior, filme, din ce n ce mai multe. Se nfiineaz asociaii, iar dup cel de-al doilea rzboi mondial ei s-au unit n Federaia mondial a acvaritilor (World Federation of Aquarists), cu sediul n Olanda, care ncepnd cu anul 1955 editeaz i o revist proprie, cu titlul The World Aquarists. Acvariile publice de astzi sunt adevrate muzee vii, n care mediul de via artificial se apropie tot mai mult de biotopul natural. Astfel sunt Centrul Oceanopolis din Brest, Centrul Naional Marin Boulogne-sur-Mer, Acvariul Muzeului de Zoologie din Nancy, Acvariul de la Rochelle, Acvariul din Tourain, Acvariul Tropical de la Tours etc. O scurt trecere n revist a acvaristicii romneti scoate n evidena preocuparea pentru acest domeniu nc din secolul trecut, cnd sunt menionate primele date referitoare la acvarii amenajate la unele case boiereti i respectiv la unele cadre militare superioare. Organizarea expoziiilor de peti exotici a

nceput la noi n ar de mai bine de o jumtate de veac, ceea ce nseamn c acvaristica are la noi un trecut destul de lung. n 1957-58 s-a nfiinat acvariul de la Constana, care poart numele marelui hidrobiolog romn I. Borcea. n cadrul muzeului din Tulcea funcioneaz acvariul Delta Dunrii. Aceste acvarii sunt vizitate anual de zeci de mii de persoane, crora li se prezint fauna piscicol a apelor dulci din ara noastra, din Marea Neagr, dar i petii ornamentali din apele tropicale i subtropicale. Alte acvarii la dispoziia publicului larg mai sunt la Bucureti, Galai, Cluj-Napoca, Tg Mure, Iai, etc. Datorit pasiunii unor profesori de biologie, n multe coli s-au organizat cercuri de acvaristic i aproape n fiecare ora exist asociaii i magazine specializate pentru peti de acvariu i accesorii. Astzi acvariul nu se rezum la un bol de sticl n care cretem civa petiori colorai, ci el a devenit un univers aparte, un univers n miniatur, supus unor legi naturale exacte i precis cunoscute n care vieuitoarele interacioneaz i convieuiesc. Parametrii acestui microunivers sunt, astzi, deplin controlabili, putndu-se astfel asigura condiiile cele mai asemntoare biotopului natural. Acvaristica, prin complexitatea ei, a contribuit la dezvoltarea cercetrii tiinifice n domeniul acvatic, astfel nct, astzi, diferite ramuri tiinifice i gsesc aplicabilitatea, dintre ele putnd meniona: biologia (genetica, microbiologia, hidrobiologia), fiziologia, ecologia, etologia, reproducia, biochimia, alimentaia, biologia molecular,

ameliorarea, ingineria

genetic, arhitectura etc.

2 PETII GUPPY

2.1 Origine i rspndire


Poecilia reticulata, sau att de popularul i raspnditul pete guppy, a fost adus pentru prima dat n Europa n anul 1960 de ctre Robert John Lechmere Guppy, de unde i se trage i numele. Specia este originar din America de Sud: Venezuela, Barbados, Trinidad, nordul Braziliei i Guyane (Matre-Allain 1999; Bud 2002; Bud et al. 2005). Astzi specia triete, n apele naturale sau bazinele artificiale, pe aproape toate continentele acolo unde temperatura i-a permis aclimatizarea i perpetuarea. Specia a fost larg introdus n apele naturale cu scopul principal de a se combate narul anofel, dar guppy s-a dovedit un invadator, putnd crea dezechilibre ecologice n ecosistemele naturale. Populaii slbatice de guppy se gsesc astzi pe continentul African n Surinam i Namibia, n Europa cel mai frecvent n apele termale, cum sunt cele din Ungaria, Romnia (Rezervaia 1 Mai, Bile Felix; Mag et al. 2005), n rile europene cu climat exotic, n Asia i pe continentul Americii de Nord.

2.2. Taxonomie i filogenie


Una dintre cele mai acceptate ncadrri sistematice ale petilor guppy (NCBI http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) i consider ca fcnd parte din clasa

Actinopterygii, ordinul Cyprinodontiformes, ordin ce reunete rivulinele, petii killy i ovoviviparii, din familia Poeciliidae (unde intr petii molly, xipho, platy, gambuziile etc), subfamilia Poeciliinae i din genul Poecilia. Denumiri populare: petele milionar (the Millionfish) sau guppy (the Guppyfish). Un cunoscut cercettor din domeniul geneticii populaiilor, al ecologiei i al comportamentului petilor guppy este cunoscutul biolog Felix Breden, de la Departamentul de tiine Biologice a Universitii Simon Fraser, Burnaby, British Columbia, din Canada. Actualele lui preocupri sunt identificarea cauzelor i consecinelor diferenierii populaiilor de peti poeciliizi i nelegerea relaiilor filogenetice din cadrul genului Poecilia. Breden a ales acest grup de peti, deoarece guppy este un organism model pentru studiul seleciei naturale i a seleciei sexuale. Studiile lui sunt importante ntruct datele filogenetice ar ajuta la nelegerea i cunoaterea locului i condiiilor n care caracterele au evoluat divergent. Pentru investigarea bazelor variaiei fenotipice a petilor guppy, a apelat la studii genomice i spune el: cartarea genetic la petii guppy ar putea rspunde la multe din semnele de ntrebare referitoare la selecia sexual (www.sfu.ca/biology). Aceste rezultate ne-ar ajuta s nelegem care sunt forele care produc izolarea reproductiv i fenomenul de speciaie. De exemplu, n Trinidad exist dou ramuri distincte de guppy care, probabil, reprezint invazii n etape diferite ale populaiilor din America de Sud. Masculi ce prezint un grad nalt de pigmentare cu portocaliu i femele cu o preferin pronunata pentru aceste caractere ca i la guppy, ntalnim i la alte specii ale

genului: Poecilia picta Regan 1913 i Poecilia parae Eigenmann 1894. Acestea sunt, de asemenea, n atenia cercettorilor n scopurile amintite mai sus. Viviparii lui Endler (Endlers livebearers sau ELB) din Venezuela, par s fie o populaie de peti pe cale de a depi bariera de specie, sau proaspt desprins din specia Poecilia reticulata, pn de curnd fiind considerat o populaie sau o subspecie a acesteia. Este ELB o nou specie sau nu, cercetrile care vor urma vor elucida acest lucru. Analiza cariotipic a complexelor sinaptonemale (SC) ale speciilor Poecilia reticulata, P. sphenops, P. velifera, ct i ale hibrizilor interspecifici P. sphenops x P. velifera i P. velifera x P. reticulata, arat c divergena genetic dintre aceste trei specii nu a fost acompaniat de rearanjamente cromosomiale grosiere, iar nemperecherile cromosomiale observate n cazul bivalenilor hibridului interspecific P. velifera x P. reticulata par, mai degrab, a fi determinate de diferenele genice ale mecanismelor specifice care controleaz profaza meiotic, dect de divergenele cromosomiale ale speciilor (Rodionova et al. 1996). Cele trei specii poart acelai numr de perechi de cromosomi (n = 23) i sunt foarte nrudite, avnd origini comune (grup monofiletic) n ciuda diferenelor de tip de determinism al sexelor dintre ele.

2.3. Genetica petilor guppy


La petii guppy determinismul sexelor este, n principiu, unul de tip Drosophila. Masculul posed un cromosom sexual X i unul Y (Winge 1922) i produce, din acest punct de vedere, gamei de dou tipuri: X i Y. Femela posed doi cromosomi X i prin urmare va produce doar gamei cu cromosomul X. Teoretic, dac masculul doneaz progeniturii cromosomul Y, va rezulta un mascul. n caz

contrar va rezulta o femel. Practic lucrurile nu stau tocmai aa. Numeroase gene minore (poligene), cu rol n determinarea sexelor se gsesc rspndite prin tot genomul. Acestea, pot fi masculinizante sau feminizante. n situaii extreme, cnd genele autosomale masculinizante se gsesc n numr mare, ele pot contrabalansa efectul genelor epistatice rspunztoare de determinismul sexelor de pe heterosomi, rezultnd masculi n ciuda unei constituii de tip XX a individului. Winge a denumit aceti masculi masculi fali. Exist i femele false, iar ele au o constituie XY. Dup ce a demonstrat existena unor masculi fali XX a cror factori genetici ce determin sexul sunt situai exclusiv pe autosomi, Winge a ncruciat aceti masculi cu femele normale. Dup cum se atepta, a rezultat o descenden compus exclusiv din femele. Femelele obinute le-a retroncruciat cu masculii fali. Continund aceste retroncruciri a constatat c n cteva generaii raportul dintre sexe se reechilibreaz, aprnd att masculi ct i femele n proporii aproximativ egale. Aadar, lipsa cromosomului Y din populaie nu reprezint un impediment n perpetuarea ei. Se nelege deci, c masculinizarea femelelor n absena cromosomului Y nu poate fi atribuit dect factorilor genetici masculinizani autosomali, care contrabalanseaz efectul cromosomilor X. Poecilia reticulata are n propriul cariotip un numr de 46 cromosomi adic 22 perechi autosomi i doi heterosomi (Rodionova et al. 1996). Cromosomii X i Y la guppy sunt de aceeai mrime i poriunea lor proximal homoloag poart acelai set de gene, gene ce se pot recombina prin crossingover. Genele situate n poriunea distal a heterosomilor se transmit de obicei nlluit (Traut & Winking 2001, Nanda et al. 1990, 1992, Lindholm & Breden 2002; tabelul 1).

Datele din literatura de specialitate legate de motenirea caracterelor atractive mascule de culoare arat faptul c acestea precum i forma, mrimea i ratele de curtare sunt primar sex-linkate la guppy. O excepie o reprezint mrimea corpului, care se pare c este i ea ereditar, dar nu este sex-linkat (Reynolds & Gross 1992; Yamanaka et al. 1995; Brooks & Endler 2001). Att analizele de pedigree ct i datele de genetic cantitativ arat faptul c cele mai multe caractere de form i culoare nu sunt strict Y linkate (Kirpichnikov 1981). Multe dintre acestea se recombin ntre cromosomii X i Y, ceea ce denot o homologie ntre cei doi heterosomi. Frecvenele crossing-over-ului sugereaz c regiunile de pe cromosomii X i Y n care are loc recombinarea sunt similare. Probabil c restricia recombinrii nu este complet nici n regiunea nehomoloag. Rare cazuri de crossing-over (la o frecven mai mic de 1/3.800) s-au relatat chiar i ntre genele maculatus red i maculatus black, care sunt considerate a fi situate foarte aproape de locusul genei epistatice determinante a sexului (Lindholm & Breden 2002). O hart genetic recent ntocmit de Khoo et al. (1999, 2003) arat c acest locus este flancat pe ambele pri de regiuni recombinante. Cromosomul X este mai puin neles, dar se pare c poart gene similare cu cele de pe Y, nafar de cele implicate n diferenierea sexului mascul, atta timp ce masculii YY care nu au cromosom X sunt deplin viabili (Lindholm & Breden 2002). O singur gen X-linkat s-a gsit la guppy, mai precis cea pentru rezistena la temperaturi sczute, care se exprim att la masculi ct i la femele (Fujio et al. 1990). Dou gene de culoare se cunosc pe X care nu s-au gsit pe cromosomul Y (lineatus i nigrocaudatus I), dar numrul redus de probe experimentale ar putea fi o explicaie pentru acest fapt. Probabil c dac s-ar fi efectuat mai multe ncruciri aa cum s-au fcut n cazul altor gene de culoare, s-ar fi nregistrat recombinri genetice prin crossing-over i

pentru aceste caractere (Lindholm & Breden 2002). Oricum, aceste fenomene sporadice de recombinare nu pot explica extraordinara variabilitate fenotipic a patternurilor mascule Y-linkate i dinamica rapid a evoluiei lor n funcie de spectrul de prdtori. S-a demonstrat recent c exist diferene citologice i moleculare ntre cromosomii X i Y (Traut & Winking 2001). Doar jumtate din cromosomul Y face sinaps cu regiunea corespunztoare a cromosomului X n SC. Mai mult, orientarea cromosomilor a permis recombinarea n doar 2 cazuri din cele 49 SC observate. Aceasta sugereaz c recombinarea este mult redus chiar i n regiunea proximal, homoloag a celor doi heterosomi. Studiul prin CGH a indicat un segment mare, distal, al cromosomului Y care cuprinde ADN specific mascul (Traut & Winking 2001) i c exist o deosebit variaie structural n aceast regiune. Aceste date sunt confirmate de rezultatele unei hibridri in situ care arat c cromosomul Y, dar nu i cromosomul X, al unor varieti domestice de guppy poart un numr mare de secvene simplu-repetate (Nanda et al., 1990). Aceste secvene ADN specific mascule simplu repetate nu au putut fi observate la descendenii receni ai petilor guppy slbatici (Hornaday et al. 1994). Diferenierea de astzi dintre heterosomii X si Y se explic prin acumularea de astfel de secvene simplu repetate ntr-un numr mare de copii i acumularea de alele Y-specifice n segmentul distal al cromosomului Y. Degenerarea cromosomului Y este mpiedicat de un mecanism prin care motenirea cromosomilor Y purttori de alele ce codific caractere mascule puternic atractive conduce la creterea mortalitii (Brooks 2000). Caracterele de culoare se exprim n marea majoritate a cazurilor la masculi, dar pot fi exprimate la femele n cazul tratrii lor cu testosteron, ceea ce denot transmiterea lor i pe linie matern. Doar unele caractere care nu se regsesc n fenotipul populaiilor naturale (nigrocaudatus I i II, flavus,

pigmentiert caudalis, black caudal peduncle, red tail, blue tail, green tail, variegated tail) se exprim la femele fr tratarea cu testosteron i sunt mai degrab mutaii prezente doar la indivizii unor varieti ameliorate. Autosomii au doar puine gene de culoare i de morfologie a nottoarei caudale. Caracterele zebrinus i bar se exprim doar la masculi, pe cnd celelalte gene autosomale se exprim atat la masculi ct i la femele (tabelul 1).
Tabelul 1 nlnuirea caracterelor de form i culoare la guppy (Lindholm & Breden 2002)

Linkajul

Numrul de descendeni examinai (N)

Frecvena crossing-overului De pe X pe Y %(N) De pe Y pe X %(N)

Referine bibliografice

Y-linkate Maculatus red 3,841 Schmidt 1920; Winge 1922, 1927, 1934; Winge & Ditlevsen 1938, 1947; Haskins & Haskins 1951; Haskins et al.1970 Oculatus Armatus 399 1,412 Schmidt 1920; Winge 1927 Blacher 1927, 1928; Winge 1927; Haskins et al. 1970 Pauper 636 Winge 1927, 1934; Winge & Ditlevsen 1938, 1947; Haskins et al. 1970 Sanguineus Iridescens 575 256 Winge 1927 Winge 1922; Blacher 1928; Winge & Ditlevsen 1947; Dzwillo 1959 Aureus Variabilis Ferrugineus Bimaculatus Reticulatus 105 81 68 Winge 1927 Winge 1927 Winge 1927 Blacher 1927, 1928 Natali & Natali 1931 (citai de Lindholm & Breden 2002)

Trimaculatus

78

Natali & Natali 1931 (citai de Lindholm & Breden 2002)

Viridis

Natali & Natali 1931(citai de Lindholm & Breden 2002)

Bipunctatus

Natali & Natali 1931(citai de Lindholm & Breden 2002); Kirpichnikov 1935

Doppelschwert Filigran Orange area

609 71 -

Dzwillo 1959 Dzwillo 1959 Houde 1922; Brooks & Endler 2001; Karino & Haijima 2001

Black area Fuzzy black area Iridescent area Mean brightness Mean chroma Attractiveness Tail area Courtship X-linkate Lineatus Nigrocaudatus I X- i Y-linkate Maculatus-black

Brooks & Endler 2001 Brooks & Endler 2001 Brooks & Endler 2001 Brooks & Endler 2001 Brooks & Endler 2001 Brooks & Endler 2001 Brooks & Endler 2001 Farr 1983

76 21

Winge 1927, 1934 Nybelin 1947

Winge & Ditlevsen 1947; Haskins et al. 1961

Elongatus Vitellinus Coccineus Tigrinus Luteus Minutus Cinnamomeus Solaris Caudomaculatus Anterior rubra Purpureus

4.31 (348) 6.13 (1,321) .33 (1,198) .21 (938) .89 (1,012) 20 (25) -

6.43 (1,276) 3.75 (800) .48 (414) 2.91 (206) 3.82 (157) 2.67 (487) 0 (20) 0 (52)

Winge 1922,1927 Winge 1927,1934; Haskins et al. 1970 Winge 1927, 1934; Dzwillo 1959 Winge 1927, 1934 Winge 1927, 1934 Winge 1927, 1934 Winge 1927 Kirpichnikov 1935 Blacher 1928 Blacher 1928 Natali & Natali 1931; Kirpichnikov 1935

Lutescens Nigrocaudatus II Flavus Pigmentiert caudalis Sb Red tail Blue tail

0 (74) 0 (77) 5.19 (270)

4.00 (25) 0 (17) 7.42 (364)

Natali & Natali 1931 Dzwillo 1959; Nayudu 1979 Winge & Ditlevsen1947; Nayudu 1979 Dzwillo 1959; Schrder 1969a; Nayudu 1979

2.06 (97) 1.79 (280)

1.64 (548) -

Haskins et al. 1961 Fernando & Phang 1990; Khoo et al. 1999 Fernando & Phang 1990, Phang & Fernando 1991

Green tail Snakeskin body

0 (312) -

.36 (2,507)

Phang et al. 1989a; Phang & Fernando 1991 Phang et al. 1989, 1990; Phang & Fernando 1991

Snakeskin tail

.11 (948)

Phang et al. 1989, 1990; Phang & Fernando 1991

Variegated tail Black caudal peduncle Autosomale Zebrinus Bar Blond Golden Blue Albino Kalymma Supressor Elongated

1.03 (679) 2.73 (549)

3.25 (462) 2.56 (260)

Khoo et al. 1999 Khoo et al. 1999

Winge 1927 Phang et al. 1999 Goodrich et al. 1944 Goodrich et al. 1944 Dzwillo 1959 Haskins & Haskins 1948 Schrder 1969b Schrder 1969b Horn 1972

3.Varietile de guppy

Varietile de guppy

pot fi clasificate dup forma nottoarelor. Pentru

participarea n cadrul unor competiii i expoziii de peti guppy trebuie ca

exemplarele s ndeplineasc anumite condiii legate de forma i dimensiunile corpului i a nottoarelor (plana 1).

Groflosser

Schwertflosser

Kurzflosser

Fantail

Doublesword

Spadetail

Triangle

Topsword

Speartail

Veiltail

Bottomsword

Roundtail

Flagtail

Lyretail

Pintail

Plana 1. Condiiile standard de form i mrime ce trebuiesc ndeplinite pentru admiterea n concursuri. Denumirea standard apare sub fiecare tip, precum i dimensiunile, respectiv proporiile standard (http://www.world-guppy.de/english/guppy-championat-anmeldung.php).

3.1. Varieti ameliorate


La petii guppy exist un polimorfism, un policromism i o variabilitate genetic extraordinar att ntre diferite populaii, ct i ntre indivizii ce compun aceeai populaie. Dac n natur lucrurile stau aa, n cadrul varietilor ameliorate

standardizate de form i culoare (actual existnd mai mult de 40; Ben et. al. 2003) variabilitatea intrapopulaional este mult redus, indivizii fiind parc scoi la indigo, iar diferenele genotipice i fenotipice dintre diferitele varieti de culoare este impresionant. Fr a mai intra n amnunte privitoare la multitudinea de forme i culori ale varietilor de guppy de astzi, putem clasifica varietile de guppy n mai multe categorii majore dup culoarea de baz a corpului (tabelul 2).
Tabelul 2 Categorii de varieti de culoare dup culoarea de baz a corpului (adaptat dup Ramona Osche, n Guppy Labs e-Bulletin)

Fotografie -

Culoarea de baz i alelele rspunztoare super albino (aa[bb]rr) -

Caracteristici albinism (total) albinism (partial)

Descriere Lipsa total a vreunui pigment n piele, ochi roii Lipsa parial a pigmentaiei, corp lipsit de culoare i ochi colorai normal sau corp nor mal colorat dar ochi roii

white (bbrr)

leucism/ flavism

Lipsa parial a pigmentaiei roii sau negre a pielii, ochi normal sau slab colorai

albino (aa)

amelanism

Lipsa total a pigmentaiei negre (absena melaninei), ochi roii

blond (bb)

hipomelanism

Pigmenii negrii (melanina) sunt redui la jumtate, ochi normal sau slab colorai

melanism

Un numr de dou ori mai mare de pigmeni melanici

blue2 /asian blue (r2r2)

Aneritrism

Lipsa total a pigmentaiei roii, ochii sunt colorai normal. Corp colorat albastru

hipoeritrism eritrism

Cantitatea de pigmeni roii este redus la jumtate Cantitate dubl de pigmeni roii

blue1 /european blue (r1r1)

axantism

Lipsa total a pigmenilor galbeni. Corp colorat albastru

hipoxantism xantism

Cantitatea de pigmeni galbeni este redus la jumtate Cantitate dubl de pigmeni galbeni

Partea a II-a Cercetri proprii

1.Premisele tiinifice i scopul cercetrii


Avnd n vedere faptul c aceast specie ocup prima poziie n topul vnzrilor pe piaa acvariofil, genetica petilor guppy i ndeosebi cunoaterea modului de transmitere ereditar a caracterelor de form i culoare are o deosebit importan n acvariofilie. Dei multe probleme legate de transmiterea tiparelor coloristice se cunosc din ndelungatele observaii ale pasionailor i laboratoarele de acvacultur ale cresctorilor de peti ornamentali, nu toate acestea au fost studiate ntr-o manier tiinific n laboratoare de specialitate. Un grup dintre cele mai reprezentative varieti de guppy l constituie Half-Black sau Tuxedo, uneori numit i Guppy Imperial. Grupul reunete o gam larg de varieti tuxedo, toate prezentnd caracterul Half-Black sau corp cu jumtatea posterioar neag. Iat cteva dintre cele mai cunoscute varieti de guppy tuxedo: Half-Black Red, Half-Black Black, Half-Black Blue i Half-Black White. Toate acestea au un caracter comun de culoare i anume: jumtatea posterioar neagr a corpului (Half-Black) determinat de gena Nigrocaudatus II (sau foarte rar Nigrocaudatus I). Uneori poriunea neagr se ntinde pe trei sferturi din lungimea corpului (3/4 Black). Premisele tiinifice care au determinat realizarea studiilor noastre sunt cele cteva lucruri care se cunosc pn n prezent despre tiparul varietilor HalfBlack i care ridic anumite semne de ntrebare. Se tie pn n prezent c gena Nigrocaudatus II : determin pigmentarea de un negru intens a pielii n

jumatatea posterioar a corpului; inhib aproape orice alt tipar coloristic al corpului;

nu afecteaz coloritul nottoarelor; este dominant; se exprim la diferii indivizi n doze diferite, ceea ce pune

sub semnul ntrebrii dominana complet a genei. Se mai cunoate despre gena Nigrocaudatus II c prezint o form Xlinkat (DZWILLO 1959) dar, totodat i o form Y-linkat, form despre care se tie, de asemenea, c este semiletal. Forma Y-linkat a fost studiat de ctre NAYUDU 1979, acesta constatnd c gena n form Y-linkat determin o rat sczut de cretere i o mortalitate mare n populaie. Rata mortalitii constatate cretea direct proporional cu intensitatea expresiei fenotipice a genei Nigrocaudatus II. Cu ct negrul corpului era mai pronunat, cu att mai grav afectat era individul respectiv (NAYUDU 1979). Despre gena Nigrocaudatus II mai putem spune, de asemenea, faptul c realizeaz crossing-over sub urmtoarele rapoarte: - de pe X pe Y frecvena crosig-overului este de 0,00 % (D ZWILLO, 1959), iar - de pe Y pe X frecvena crosig-overului este de 4,00 % (N AYUDU, 1979). Gena Nigrocaudatus I (studiat de NYBELIN 1947) este o form rar a genei Nigrocaudatus II, este prezent la guppy n form X-linkat i nu se cunoate pn n prezent n forma Y-linkat. Numrul mic de ncruciri fcute de autori ar putea fi o explicaie pentru acest caz de linkaj strict cu cromosomul X (LINDHOLM & B REDEN 2002). Probabil c dac studiul s-ar fi fcut pe loturi mai mari s-ar fi constatat i n acest caz fenomenul de crossing-over, respectiv gena Nigrocaudatus I n forma Y-linkat. Lucrarea de fa este una ce abordeaz n ansamblu genetica culorii petilor guppy i i propune elucidarea unor probleme de transmitere ereditar a caracterelor de culoare la varietatea tuxedo rou, mai precis:

stabilirea dominanei sau dominanei incomplete a genei

Nigrocaudatus II; elucidarea unor probleme legate de transmiterea caracterului

Red tail n descenden; desluirea naturii genetice a caracterului Black tail la guppy.

Dorim i sperm c rezultatele obinute de noi sunt utile att cresctorilor de peti ornamentali la scar mare (en gros), ct i competitorilor/participanilor la expoziii/concursuri de guppycultur sau acvariofililor pasionai, n munca de ameliorare i perfecionare a varietilor de guppy.

2.Material i metod
Materialul biologic, bazinele de cretere, ct i aparatele, ustensilele i materialele consumabile necesare desfurrii experimentelor au fost puse la dispoziia noastr de ctre conducerea Catedrei III Zootehnie, ele existnd n dotarea biobazei i microlaboratorului de piscicultur ornamental a USAMV Cluj-Napoca.

2.1.Material biologic
2.1.1. Origine

n vederea studierii modului de transmitere ereditar a caracterelor de culoare a fost necesar efectuarea de ncruciri ntre varietatea roie Red Blond i varietatea neagr Half-Black Black (Tuxedo negru, sau Full Black), urmat de o retroncruciare a femelelor din generaia F1 cu masculul iniial. Materialul

biologic din varietile amintite mai sus provine din biobaza USAMV ClujNapoca, ea existnd acolo din anul 2004 cnd a fost adus de biol. Drd. PetrescuMag Ioan Valentin de la cresctorii Vanea Ciprian (varietatea Red Blond), respectiv de la Chifu Claudiu (varietatea Half-Black Black).

2.1.2.Descriere

2.1.2.1.Half-Black Black (Tuxedo negru, Full Black)

Denumirea varietii i are originea n limba englez: half = jumtate i black = negru, neagr. Varietatea Tuxedo negru (Planele 2 i 3) se caracterizeaz printr-un colorit negru al prii posterioare a corpului (Half-Black), de la nottoarele pectorale pn la pedunculul caudal. Responsabil de caracterul Half-Black este gena Nigrocaudatus I sau II, gen care se exprim la ambele sexe. Acest caracter de culoare acoper orice alt colorit al corpului de-a lungul regiunii respective, cu excepia caracterului albastru metalizat poligenic numit iridescent area (B ROOKS & ENDLER 2001) care poate aprea uneori la inseria nottoarei dorsale. Cea de a doua denumire (tuxedo = smoking) are aceeai origine i definete un colorit negru n partea posterioara a corpului. Full Black (eng. full = complet, plin, total) este o denumire caracteristic unor linii din aceast varietate la care negrul se ntinde aproape pn la cap. Ali specialiti denumesc toate liniile din varietatea Half-Black Black ca fiind Full Black (sfertul anterior nepigmentat putnd fi neglijat). Al doilea Black din prima denumire se refer la coloritul nottoarelor, care la varietatea noastr sunt negre. n situaia n care nottoarele poart alt

culoare, spre exemplu rou, denumirea varietii va deveni Half-Black Red (eng. red = rou). Mai exist i varieti cu alte culori ale nottoarelor: albastre (HalfBlack Blue, eng. blue = albastru, albastr), albe (Half-Black White, eng. white = alb, alb) etc. Uneori coloritul nottoarelor nu este unicolor i determinarea varietii nu poate fi fcut clar. La varietatea noastr, Half-Black Black, pot aprea uneori impuriti de culoare ca: albastru iridescent la inseria nottoarei dorsale, rou n caudal, alb n dorsal, sau rou lng branhii. Toate aceste impuriti coloristice au cauz ameliorarea defectuoas sau fecundrile necontrolate n lotul reproductor. Prin degenerarea n timp a varietii Half-Black Black rezult, de obicei, indivizi Half-Black Red, datorit scderii intensitii coloraiei negre a nottoarelor.

Plana 2. Half-Black Black Guppy femel

Plana 3. Half-Black Black Guppy - mascul

Tiparul coloristic negru este determinat, n cazul populaiei noastre, de gena Nigrocaudatus II, alturi de alte gene cromogene melanice care determin pigmentarea cu negru a nottoarelor. Alte tipare coloristice corporale lipsesc la aceast varietate, expresia lor fiind inhibat de gena Nigrocaudatus II. Singurul caracter persistent n prezena genei Nigrocaudatus II este Iridescent area, caracter genetic cantitativ, slab reprezentat n cazul liniei noastre.

2.1.2.2.Red Blond

Varietatea Red Blond se caracterizeaz prin coloritul rou curat al ntregului corp i al nottoarelor. Roul pur este datorat genei blond, gen aprut printr-o mutaie autosomal (GOODRICH
ET AL.

1944; LINDHOLM &

B REDEN 2002) care determin o sintez redus a pigmenilor melanici, iar negrul

fiind slab reprezentat n expresia fenotipic. Indivizii acestei varieti prezint corpul rou fr impuriti melanice, o pigmentaie normal sau slab a ochilor i uneori, foarte reduse impuriti melanice la nivelul nottoarei caudale care este tot de culoare roie. Coloritul rou de fond al corpului este determinat de poligenele ce codific caracterul cantitativ Orange area (HOUDE 1922; B ROOKS & ENDLER 2001; KARINO & HAIJIMA 2001). Cu ct exist mai multe copii ale acestei gene ndr-un genom, cu att mai puternic este expresia caracterului respectiv. Mrimea suprafeelor roii de pe corpul masculului este direct proporional cu numrul poligenelor din genomul individului. Orange area este un caracter Y-linkat (HOUDE 1922; BROOKS & ENDLER 2001; KARINO & HAIJIMA 2001).

Plana 4. Red Blond Guppy - mascul

Plana 5. Red Blond Guppy - femel

Coloritul rou caudal este determinat de gena major sex-linkat Red tail care se exprim la aceast varietate i la femele ntr-o doz mai redus (plana 5.). Caracterul Red tail este un caracter X- ct i Y-linkat, prezentnd un procent de recombinare de 2,06% de pe X pe Y i de 1,64% de pe Y pe X (F ERNANDO & P HANG 1990; KHOO ET AL. 1999b,c).

2.2.Mediul cretere
2.2.1.Iluminarea Petilor li s-au asigurat condiii optime de iluminare, perioadele de iluminare alternnd cu cele de ntuneric, raportul ore lumin: ore ntuneric fiind de 1:1, astfel nct petilor nu le-au lipsit orele de odihn, absolut necesare. n vederea realizrii acestor condiii, alturi de iluminarea natural a bazinelor care n perioada n care s-a desfurat experimentul nu atingea un nivel satisfctor de intensitate i durat, s-a folosit iluminarea artificial prin utilizarea tuburilor de neon (20W) amlpasate la o nlime de aproximativ 40 cm deasupra acvariilor. 2.2.2.Calitatea apei i parametri fizico-chimici

Cu privire la parametrii fizico-chimici medii ai apei potabile utilizate de ctre noi n cadrul experimentelor, acetia au fost analizai de ctre colectivul nostru. Iat-i pe cei mai importani n tabelul de mai jos (tabelul 3.).

Tabelul 3. Valoarea celor mai importani parametri fizico-chimici ai apei, nregistrai n bazinele experimentale Parametrul pH Oxigen dizolvat Salinitate Duritate Temperatura Valoarea medie 7-7,5 6-7mg/l 0,4 (g/l) 2 grade germane (20mg CaO/l) 22-24C

Apa utilizat n experimente a fost cea potabil de la reeaua de alimentare a Municipiului Cluj-Napoca. Conform Comunicatelor Companiei de Ap Some SA, principalii parametri ai apei potabile din perioada efecturii experimentelor au fost cei redai n tabelul 4.

Tabelul 4. Sinteza buletinelor de analiz a apei n perioada desfurrii experimentelor (www.rajaccj.ro) Parametru (Unitate de msur) Turbiditate (NTU) Cloruri (mg/l) Plumb (/l) Azotai (mg/l) Coliformi totali (nr/100ml) Admis prin Legea 458/2002 5 250 25 50 0 n sistemul administrat de Companiei de Ap Some SA 0,47 - 0,97 1,85 4,76 0,83 - 4,05 1,34 3,98 0

Apa a fost schimbat periodic. La fiecare dou zile erau nlturate resturile organice de pe fundul bazinului prin sifonare i odat cu acestea din volumul de ap. Schimbarea parial a apei era fcut chiar i n situaiile cnd ea era limpede pentru a se pstra un pH aproximativ constant i identic pentru toate bazinele experimentale. nvechirea apei (puin dure) i acumularea de substan organic ar fi dus la scderea valorii pH-ului la valori sub 6,5, lucru care nu era de dorit.

2.2.3.Aerarea apei

Este bine ca n bazinele de cretere s se asigure un minimum de 5-8 mg oxigen per litru ap. Actual, pe piaa acvariofil se gasete o gam larg de

contactoare aer-ap sau oxigen-ap. Uneori, se poate folosi oxigenul pur mbuteliat i n anumite situaii chiar apa oxigenat (H2O2). Oxigenul mbuteliat se folosete frecvent la ambalarea materialului biologic acvariofil. Cu toate acestea, datorit preurilor ridicate ale sistemelor mai sus prezentate am folosit n cadrul experimentelor noastre un sistem simplu, compus dintr-o pomp cu piston, furtun de silicon, racorduri din material plastic cu robinet, burei paralelipipedici i pietre poroase pentru dispersia bulelor. Acest sistem are la baz dispersia aerului n bule fine mrind suprafaa de contact dintre cele dou medii. Astfel s-a realizat meninerea unui nivel satisfctor al oxigenului n ap i facilitarea schimbului de gaze ntre aer i ap.

2.3.Furajarea loturilor experimentale


Hrnirea petilor n perioada de desfurare a experimentlor s-a fcut ntrun mod diversificat, att cu hran vie ct i cu furaje speciale, procurate de pe piaa acvariofil.

2.3.1. Hrana vie

S-au utilizat tubifeci i crustacei acvatici, dup cum se vede n cele ce urmeaz.

2.3.1.1. Tubifexul

Tubifecii (Tubifex ssp., plana 6.) sunt viermi oligochei care triesc n apele poluate ale oraelor de unde sunt colectai i splai prin site speciale n

mai multe ape. Au obiceiul de a se aduna ghemotoace i astfel sunt uor de separat de resturile grosiere de deeuri care rmn pe fundul vaselor de separare. Necesit splarea continu sub curent de ap pentru o perioad minima de trei zile naintea folosirii lor ca hran. Tot n acest mod trebuiesc i pstrai n vederea hrnirilor viitoare, ntruct nu supravieuiesc n medii bogate n compui azotai. Ei se administreaz ntregi sau tiai i splai.

Plana 6. Grmjoare de viermi tubifex dup splare (Tubifex ssp.)

2.3.1.2. Crustaceii zooplanctonici

Crustaceii zooplanctonici sunt o alt hran apetisant pentru peti cu care acetia se dezvolt foarte bine. Dintre genurile mai cunoscute menionm: Daphnia, Ciclops, Artemia (Plana 7.) etc. Exist date foarte multe n literatura

de specialitate despre creterea crustaceilor cu destinaie acvariofil i n special a acelora de ap srat. Crustaceii zooplanctonici sunt indispensabili creterii puietului de pete.

Plana 7. Artemia autohton - Artemia salina Ca hran vie pentru puiet, dar i pentru aduli, s-au folosit cu precdere naupli de artemia. Pentru obinerea acestora s-a achiziionat de pe piaa acvariofil o cutie de 450g ou de artemia liofilizate care au fost incubate dup cum urmeaz.

Sistemul de obinere a naupliilor este unul foarte simplu, compus dintr-un tub de plastic cu un volum de 2 litri. Recipientul a fost suspendat n poziie vertical cu ajutorul unei cleme de marginea unui acvariu. n

interiorul recipientului a fost introdus o piatr poroas racordat la sistemul de aerare. Perdeaua din bule de aer menin n suspensie oule i mai apoi nauplii, asigurnd n acelai timp o cantitate de oxigen necesar dezvoltrii acestora. Avnd n vedere faptul c aceti crustacei triesc ntr-un mediu salin, n recipient s-au introdus 1,5 litri de ap, la care s-a adugat o lingur i jumtate de sare gema (aproximativ 15-20g). n condiiile n care s-a desfurat experimentul timpul de incubare al a durat n medie aproximativ 22-26 de ore. Administrarea naupliilor s-a realizat dup o separare a acestora de cojile oulor care plutesc. Naupli au constituit hrana exclusiv n primele stadii de dezvoltare, iar mai apoi s-a administrat o doz zilnic pe ntreaga perioad de cretere a puietului, juvenililor i adulilor.

2.3.2. Hrana uscat

Hrana uscat trebuie n primul rnd s conin toat gama de vitamine, minerale i aminoacizi. Raportul glucide/lipide/proteine nu este, nici el, de neglijat. n perioada experimental am folosit acelai tip de furaj, Troco Grower Premium, tip 0, adic varianta cea mai fin granulat. Date referitoare la compoziia furajului folosit n decursul experimentelor se regsesc n tabelul 5.

Tabelul 5 Compoziia furajului Troco Grower Premium, utilizat n experimentele efectuate Component Protein brut Grsime brut Celuloz brut Cenu Calciu Fosfor Lizin Metionin Vitamina A Vitamina D3 Vitamina E Vitamina C Cupru Seleniu Cantitatea 56% 15% 0,5% 9% 1,8% 1,5% 3,7% 1,5% 22500UI/kg 2500UI/kg 200mg/kg 300mg/kg 5mg/kg 0,35mg/kg

2.3.3.Modul de administrare a hranei

ncepnd cu prima zi alevinii se hrnesc cu naupli de artemia de 3-4 ori pe zi ad libitum; trebuie prevenit supraalimentarea pentru a menine calitatea bun a apei n acvariu. ncepnd cu a doua sptmn se administreaz alternativ naupli i furaj, numrul hrnirilor scznd la 3 iar dup prima lun de via ncepe administrarea de tubifex.

2.4.Plantele utilizate

n bazinele experimentale s-au sdit specii de plante din genul Cryptocoryne, plante foarte decorative (Plana 8.). Pe lang acestea au mai fost folosite i plantele plutitoare Ceratopteris spp., Elodea spp. i Pistia stratiotes care pot fi chiar consumate de ctre petii poeciliizi ca hran vegetal.

Plana 8. Bazin de cretere plantat cu Criptocorine spp.

2.5. Desfurarea experimentelor Dup alegerea a trei femele virgine din varietatea Half-Black Black n vederea ncrucirii lor cu masculi Red Blond, acestea au fost meninute pentru o

perioad de dou luni izolate de alte exemplare pentru a avea certitudinea c sunt cu siguran nefecundate i libere de orice tip de ali posibili produi. n momentul confirmrii acestui fapt au fost introdui, alturi de femele n bazin, trei masculi din varietatea Red Blond pentru o durat de o sptmn, n vederea mperecherii, perioad dup care au fost ndeprtai. Dup alte trei sptmni, femelele au fost introduse ntr-un bazin de reproducere suspendat, cu fundul din plas rar de culoare verde prin care nounscuii s poat evada ntr-un bazin mai mare imediat dup momentul parturiiei (plana 9.).

Plana 9. Parturiia n cuti cu gratii pentru evadarea puilor

n momentul finalizrii parturiiei, pentru a nu influena negativ dezvoltarea puietului i pentru o mai mare uurin n manipularea i creterea

tineretului, s-a recurs la transferarea femelelor ntr-un alt bazin cu condiii similare. Odat cu nceputul diferenierii sexuale, masculii au fost imediat transferai n alt bazin de cretere, nainte ca ei s ating maturitatea sexual, femelele rmnnd n continuare n acelai bazin. Dup separarea pe sexe, tineretul a fost crescut separat o perioad de aproximativ trei luni pentru confirmarea diferenierii sexuale, pentru atingerea maturitii depline a femelelor virgine i pentru confirmarea virginitii femelelor necesare pentru urmtoarea etap experimental. Durata de trei luni, stabilit pn la urmtoarea etap experimental, era necesar deoarece stadiile ontogenetice timpurii se caracterizeaz prin apariia parial (n linii mari) a caracterelor sexuale mascule sau femele, sau apariia doar a unora din caracterele sexuale. Spre exemplu, o femel juvenil poate avea prezent punctul negru (sau de culoare nchis) din regiunea anal ce va da natere petei de gestaie, dar poate s nu aib un abdomen dezvoltat specific unei femele. O alt femel juvenil, poate avea att punctul ct i abdomenul dezvoltat, dar s aib o dimensiune extrem de mic pentru a putea fi considerat femel adult etc (Mag 2004, 2005). Ulterior, s-a trecut la cea de a doua faz a experimentului, n care s-au ales n mod randomic un numr de cinci femele din generaia F1 i au fost introduse intr-un lot format exclusiv din mascului Red Blond, unde au rmas pentru o perioad de o sptmn, fiind ulterior mutate ntr-u bazin cu condiii similare de via. La trei sptmni de la acest moment, femelele au fost introduse n cuti cu gratii i bazine pentru parturiie, similare cu cele utilizate n prima etap. Imediat dup ncheierea parturiiei, toate femelele au fost transferate ntr-un alt

bazin, puietul rmnnd n continuare n bazinul iniial pn la evidenierea diferenierii sexuale.

3.Rezultate i discuii
3.1.Rezultatele ncrucirilor
Indivizii rezultai n generaia F1 (plana 10.) i analiza fenotipic a acestora nu a adus nici o informaie nou n ceea ce privete ereditatea culorii petilor guppy. Astfel, n urma maturizrii progeniturii celor trei femele au rezultat un numr de 24 de masculi i 22 de femele, destul de omogeni din punct de vedere fenotipic. Ambele sexe au prezentat caracterul Half-Black, femelele prezentndu-l mai puin intens dect mamele lor. n ceea ce privete coloritul nottoarei caudale, Black tail, el a sczut n intensitate la ntreaga progenitur (46 de indivizi). n figura 1. se poate observa schema ncrucirii unei femele Haf-Black Black homozigote la locusul ni cu un mascul Red Blond hemizigot pentru locusul ni. Se poate observa, de asemenea c femela produce un singur tip de gamei XNi, pe cnd masculul produce dou tipuri de gamei: Xni i Y0. Deci gametul teoretic productor de mascul nu are gena Nigrocaudatus II. Cu toate acestea, n generaia F1 rezult un singur fenotip (sau dou fenotipuri dac lum n considerare i sexul, masculul prezentnd caracterul ntr-o doz mai mare dect femela).

Plana 10. Fenotipul generaiei F1 (n stnga femela, n dreapta masculul)

XNiXNi
XNi XNi

X
Xni

XniY0
Y0

XNiXni

XNiY0

XNiXni

XNiY0

P G F1

Figura 1. Schema ncrucirii Half-Black Black X Red Blond

n urma retroncrucurii unor femele din generaia F1 cu masculi din generaia parental de Red Blond s-a observat n FB o segregare mendelian, o dominan a genei Nigrocaudatus II i o variaie a intensitii expresiei acesteia datorit poligenelor melanice. n generaia FB (figura 2. ) au rezultat dou fenotipuri diferite (patru, dac lum n considerare i sexul, respectiv dimorfismul sexual) din punctul de vedere al coloritului corpului, dup cum urmeaz: 66 masculi Half-black, 59 femele Half-black, 72 masculi de tip slbatic i 65 femele de tip slbatic (plana 11.).

Intensitatea caracterului half-black n F B (la cei 125 de indivizi Half-black) a sczut din nou n intensitate comparativ cu cea a indivizilor din generaia F1 (fapt vizibil mai mult la femele dect la masculi, plana 11. ). nottoarea caudal a prezentat n F B o slab expresie fenotipic a caracterului Black tail, pigmentul rou (Red tail) devenind vizibil n anumite poriuni ale nottoarei caudale la masculi. La masculii acestei generaii FB, caudala a prezentat o variabilitate mare coloristic, aprnd pe lng caudala negricioas, caudale maronii, crmizii, roii murdare i roii, care au segregat independent de culoarea corpului. Se pare c poligenele melanice sunt responsabile, att pentu caracterul Black tail ct i de alterarea caracterului Red tail la guppy. Coloritul caudalei variaz de la negru la rou odat cu scderea numrului poligenelor melanice i direct proporional cu creterea numrului de retroncruciri efectuate.

XNiXNi
XNi XNi

X
Xni

XniY0
Y0

XNiXni
XNi Xni

XNiY0
Xni Y0

XNiXni
Backcross

XNiY0

P G F1

XNiXni X XniY0
G

XNiXni XNiY0 XniXni XniY0

FB

Figura 2. Schema retroncrucirii femelei rezultate n F1 cu masculul Red Blond iniial

Plana 11. Fenotipul femelelor (stnga) i masculilor (dreapta) Half-Black din generaia FB

X
F1 F1 P

X
24
FB

22
FB FB

66

59

65

72

Plana 12. Fenotipul generaiilor parentale (P), F1 i FB, respectiv numrul de indivizi rezultai pentru fiecare fenotip n parte

3.2.Analiza segregrii caracterului Half-Black prin testul X2


Testul X2 elaborat de ctre P EARSON 1900 (citat de ARDELEAN 2006), poate fi folosit n compararea unei frecvene empirice cu una teoretic. Cu ajutorul acestui model de calcul statistic vom putea vedea dac modul de segregare obinut este conform cu ateptrile noastre, respectiv dac gena Nigrocaudatus II este dominant sau nu. Frecvena teoretic n cazul nostru este frecvena calculat pentru apariia caracterului Half-Black, conform legilor mendeliene - - - (frecvena ateptat, a se urmri figura 2). Frecvena empiric a cazului nostru este cea observat n urma analizei fenotipice a indivizilor rezultai n urma ncrucirilor efectuate (a se urmri plana 12 de mai sus). Valoarea X2 se calculeaz cu ajutorul urmtoarei formule: X2 = (f0-fa)2/fa, unde:

fa= frecvena ateptat, iar f0= frecvena observat.

Tabelul 6. Analiza segregrii prin testul X2 Fenotipul corpului n FB Numr de indivizi n FB, segregani Observat Half-Black masculi Half-Black femele Masculi cu corp slbatic Femele cu corp slbatic Total 66 59 72 65 262 Calculat/ateptat 65,5 65,5 65,5 65,5 262

X2 = ((66-65,5)2/65,5)+ ((59-65,5)2/65,5)+ ((72-65,5)2/65,5)+ ((6565,5)2/65,5) = 0,52/65,5 + 6,52/65,5 + 6,52/65,5 + 0,52/65,5 = 0,25/65,5 + 0,25/65,5 + 42,25/65,5 + 42,25/65,5 = 0,0038 + 0,0038 + 0,6450 + 0,6450 = 1,2976. Atunci cnd se lucreaz cu testul X2, se pornete de la ipoteza zero, adic se presupune c ntre msurtorile empirice i cele ateptate (teoretice, standard) nu exist nici un fel de deosebiri. n realitate, frecvenele reale de apariie ale unor fenomene calitative sunt ntotdeauna diferite de cele teoretice, ateptate. Valoarea X2 msoar magnitudinea acestor diferene pe baza comparrii X2calc cu X2teor.P5% pentru P 5%. Evident, cnd valoarea calculat este mai mic dect cea observat, ipoteza zero se verific. Dimpotriv, atunci cnd valoarea calculat este mai mare sau egal cu cea observat ipoteza zero nu se verific, deci ntre cele dou frecvene deosebirile sunt reale.

Pentru GL = 4-1 = 3 (GL = numrul claselor ateptate - 1), valoarea lui X2


teor

pentru P 5% este de 7,81. n cazul nostru, 1,2976 este cu mult mai mic dect

valoarea 7,81, deci, ipoteza zero se verific. Putem afirma asfel c gena Nigrocaudatus II este dominant sau incomplet dominant. Dominana incomplet a genei Nigrocaudatus II este infirmat de diferenele vizibile de expresie genic dintre indivizii femeli Half-Black ale generaiilor FB i F1. Avnd certitudinea dominanei genei Nigrocaudatus II, putem pune cu certitudine pe seama poligenelor melanice diferenele de intensitate ale expresiei genei Ni ntre generaiile FB, F1 i femela Half-Black iniial (P).

4.Concluzii
n vederea observrii modului de transmitere ereditar a caracterelor Half-Black (jumtatea posterioar neagr), Red tail (caudal roie) i Black tail (caudal neagr), s-a efectuat ncruciarea dintre femele din varietatea HalfBlack Black cu masculi Red Blond, urmat de retroncruciarea femelelor din generaia F 1 cu masculul iniial Red Blond (P). Fenotipul obinut n F1 nu a adus nici o informaie nou cu privire la transmiterea ereditar a caracterelor de culoare la guppy, rezultnd indivizi HalfBlack Black heterozigoi sau hemizigoi pentru locusul Ni. Putem meniona totui c negrul corporal, dar i caudal a sczut n intensitate ca expresie fenotipic n generaia F1 fa de generaia parental matern (P). n urma retro-ncrucirii femelelor heterozigote pentru Ni din F1 cu masculi din generaia parental Red Blond i analiza fenotipului descendenilor prin testul X2, s-a observat n generaia FB o segregare de tip mendelian, o

dominan a genei Nigrocaudatus II i o variaie a intensitii expresiei acesteia datorit poligenelor melanice, implicate i ele, se pare, n intensitatea expresiei negrului corporal. Aceste poligene melanice sunt, de asemenea, responsabile att pentru caracterul Black tail ct i pentru alterarea caracterului Red tail la guppy. n generaia FB au rezultat dou fenotipuri diferite (patru, dac lum n considerare i sexul, respectiv dimorfismul sexual) din punct de vedere al coloritului corpului, dup cum urmeaz: 66 masculi Half-Black, 59 femele HalfBlack, 72 masculi de tip slbatic i 65 femele de tip slbatic. Intensitatea caracterului Half-black n FB (la cei 125 de indivizi Half-black) a sczut din nou n intensitate comparativ cu cea a indivizilor din generaia F1, fapt vizibil mai mult la femele dect la masculi. nottoarea caudal a prezentat n FB o slab expresie fenotipic a caracterului Black tail, pigmentul rou (Red tail) devenind vizibil n anumite poriuni ale nottoarei caudale la masculi. La masculii acestei generaii FB, caudala a prezentat o variabilitate mare coloristic, aprnd pe lng caudala negricioas, caudale maronii, crmizii, roii murdare i roii, care au segregat independent de culoarea corpului (Half-Black). Se pare c poligenele melanice sunt responsabile, att pentu caracterul Black tail ct i de alterarea caracterului Red tail la guppy. Coloritul caudalei variaz de la negru la rou odat cu scderea numrului poligenelor melanice i direct proporional cu creterea numrului de retroncruciri efectuate. Experimentul efectuat a dus la diluarea cu fiecare generaie a caracterului Black tail, pn la exticie. Putem afirma asfel c gena Nigrocaudatus II este dominant sau incomplet dominant. Dominana incomplet a genei Nigrocaudatus II este infirmat de diferenele vizibile de expresie genic dintre indivizii femeli heterozigoi Half-Black ale generaiilor FB i F1.

Avnd certitudinea dominanei genei Nigrocaudatus II, putem pune cu certitudine pe seama poligenelor melanice diferenele de intensitate ale expresiei genei Ni ntre generaiile FB, F1 i femela Half-Black iniial (P). Cunoaterea bazei genetice i a modului de transmitere ereditar a caracterelor de culoare la varietarea roie de tuxedo este esena i punctul de plecare al ameliorrii varietii n scop economic, comercial i tiinific.

REFERINE BIBLIOGRAFICE

1. ARDELEAN, M. 2006 Principii ale metodologiei cercetrii agronomice i medical veterinare. Editura AcademicPres, Cluj-Napoca. 2. BEN, J. et al. 2003 Clonning and tissue expression of 6-pyruvoyl tetrahydropterin synthase and xantine dehydrogenase from Poecilia reticulata. Mar. Biotechnol. 5:668-2003. 3. B ROOKS 2000 Negative genetic correlation between male sexual attractiveness and survival. Nature 406:67-70. 4. B ROOKS, R., J. A. ENDLER 2001a Direct and indirect sexual selection and quantitative genetics of male traits in guppies (Poecilia reticulata). Evolution 55:1002-1015. 5. B ROOKS, R., J. A. ENDLER 2001b Female guppies agree to differ: phenotypic and genetic variation in mate choice behavior and the consequences for sexual selection. Evolution 55(8):1644-1655. 6. B UD, I. 1995 Acvaristica pe nelesul tuturor. Editura Promedia ClujNapoca.

7. B UD et al. 2001 Petii i tainele umbrelor subacvatice. Ed. Ceres, Bucureti. 8. B UD, I. 2002 Acvaristica. Piscicultura ornamental. Editura AcademicPres, Cluj-Napoca. 9. B UD, I., V.V. V LDU 2004 Ghid de lucrri practice n piscicultur. Ed. Risoprint Cluj-Napoca. 10. B UD, I. et al. 2005 Acvaristica - mic enciclopedie. Editura Risoprint, Cluj-Napoca. 11. B URA, M. 2002 Acvacultur special: broate, crustacee i molute. Ed. Orizonturi universitare Timioara. 12. B URA, M. 2005 Acvacultur special. Tehnologia creterii i valorificrii broatelor i racilor. Lucrri practice. Ed. Orizonturi universitare Timioara. 13. F ERNANDO, A. A., V. P. E. PHANG 1990 Inheritance of red and blue caudal fin colourations in two domesticated varieties of guppy, Poecilia reticulata. Journal of Aquaculture in the Tropics. 14. F UJIO et al. 1990 Detection of a low temperature-resistant gene in guppy (Poecilia reticulata), with reference to sex-linked inheritance. Japanese Journal of Genetics 65:201-207. 15. GOODRICH, H. B. et al. 1944 The cellular expression and genetics of two new genes in Lebistes reticulatus. Genetics 29:584-592. 16. HORNADAY et al. 1994 Absence of repetitive DNA sequences associated with sex chromosomes in natural populations of the Trinidadian guppy (Poecilia reticulata). Journal of Molecular Evolution 39:431-433.

17. KHOO, G. et al. 1999a Genetic basis of the variegated tail pattern in the guppy, Poecilia reticulata. Zoological Science (Tokyo) 16:431-437. 18. KHOO, G. et al. 1999b Linkage analysis and mapping of three sexlinked color pattern genes in the guppy, Poecilia reticulata. Zoological Science (Tokyo) 16:893-903. 19. KHOO, G. et al. 1999c Sex-linkage of the black caudal-peduncle and red tail genes in the tuxedo strain of the guppy Poecilia reticulata. Zoological Science (Tokyo) 16:629-638. 20. KHOO, G. et al. 2003 Genetic Linkage Maps of the Guppy (Poecilia reticulata): Assignment of RAPD Markers to Multipoint Linkage Groups. Marine Biotechnology: 5(3):279-293. 21. KIRPICHNIKOV, V. S. 1981 Genetic bases of fish selection. Translated by G. G. Gause. Springer, Berlin. 22. LINDHOLM , A., F. B REDEN 2002 Sex chromosome and sexual selection in Poeciliid fishes. The American Naturalist 160:214-224. 23. M AG, I. V. 2004 Cercetari privind posibilitatile de dirijare a reproductiei in vederea modificarii raportului sexual la pestii guppy (Poecilia reticulata). Disertatie. Conducator stiintific: conf.dr. Corina Rosioru. Facultatea de Biologie si Geologie. Universitatea Babes Bolyai, Cluj-Napoca. 24. M AG-M UREAN, I. V. et al. 2004 The constancy of water quality in guppyculture. Cea de-a 33-a Sesiune Internaional de Comunicri tiinifice a Facultii de Zootehnie din Bucureti / The 33rd International Session of Scientific Communications of The Faculty of Animal Science Bucharest.

25. M AG, I. V., I. B UD 2004 Predispoziia organismului la mutaii somatice se poate transmite ereditar / Predisposition of the organism to somatic mutations may be hereditary. Revista Agricultura 51-52:4144. 26. M AG, I. V. 2005 Caracterizarea biofiziologica si particularitatile speciei Poecilia (Lebistes) reticulata. Referat. Conducator stiintific: prof. dr. ing. Ioan Bud. Facultatea de Zootehnie si Biotehnologii. Universitatea de Stiinte Agricole si Medicina Veterinara ClujNapoca. 27. M AG, I. V. 2005a Stadiul actual i performanele obinute pe plan mondial n domeniul pisciculturii ornamentale. Referat. Conductor tiinific: Prof. Dr. Ing. Ioan B UD. Facultatea de Zootehnie si Biotehnologii. Universitatea de Stiinte Agricole si Medicina Veterinara Cluj-Napoca. 28. M AG, I. V. 2005b Caracterizarea biofiziologic i particularitile speciei Poecilia (Lebistes) reticulata. Referat. Conductor tiinific: Prof. Dr. Ing. Ioan B UD. Facultatea de Zootehnie i Biotehnologii. Universitatea de tiinte Agricole i Medicin Veterinar ClujNapoca. 29. MAG, I. V., R. M. P ETRESCU 2006 Petii ca bioindicatori ai polurii apei. Environment & Progress nr. 8, in press. 30. M ATRE-ALLAIN, T. 1999 Marele ghid al acvaristului. Cum construim, amenajm i ntreinem un acvariu. Ed. Aquila 93. 31. M ICLEA, V., M. ZHAN 2006 Reproducia petilor. Editura Accent. 32. M OLNAR F., P. ERBAN 2006 Linkage-ul genelor Nigroaudatus cu cromozomul X la guppy (Poecilia reticulata, PETERS 1859) ,

Sesiunea de comunicrii tiinifice studeneti. USAMV, ClujNapoca. 33. M OLNAR, F., R. HRAN 2007 Caracterizarea fenotipic a varietilor de guppy din Romania, Sesiunea de comunicrii tiinifice studeneti. USAMV, Cluj-Napoca. 34. M OLNAR F.,M.-I. MOLNAR 2007 Ereditatea paternurilor coloristice la varietatea de guppy tuxedo rou (Poecilia reticulata Peters 1859) , Sesiunea de comunicrii tiinifice studeneti. USAMV, ClujNapoca. 35. N ANDA, I. et al. 1990 Simple repetitive sequences are associated with differentiation of the sex chromosomes in the guppy fish. J. Mol. Evol. 30:456-462. 36. N ANDA, I. et al. 1992 Early stages of sex chromosome differentiation in fish as analysed by simple repetitive DNA sequences. Chromosoma 101:301-310. 37. N AYUDU, P. L. 1979 Genetic studies of melanic color patterns and atypical sex determination in the guppy, Poecilia reticulata. Copeia 1979:225-231. 38. N YBELIN, O. 1947 Ett fall av X-bunden nedrvning hos Lebistes reticulatus (Peters). Zoologiska Bidrag fran Uppsala 25:448-454. 39. P SRIN, B. 2001 Acvacultura ornamental. Editura Terra Nova, Iai. 40. P SRIN, B., T. STAN 2003 Acvacultura. ndrumtor practic. Editura Karro, Iai. 41. P SRIN, B., T. STAN 2004 Reproducerea petilor. Editura Karro, Iai. 42. O PREA, L., R. GEORGESCU 2000 Nutriia i alimentaia petilor. Editura tehnic, Bucureti.

43. R ODIONOVA, M. I. et al. 1996 Synaptonemal complex analysis of interspecific hybrids of Poecilia (Teleostei, Poeciliidae). Brazilian Journal of Genetics, 19:231-235. 44. R EYNOLDS & GROSS 1992 Female mate preference enhances offspring growth and reproduction in a fish, Poecilia reticulata. Proceedings of the Royal Society of London B, Biological Sciences 250:57-62. 45. S ABADO, L. 2006 Cercetri privind fenomenul de inducere artificial a feminizrii prin administrarea de estrogeni la specia Poecilia reticulata (Peters, 1859). Lucrare de diplom. Universitatea de tiine Agricole i Medicin Veterinar Cluj-Napoca, Facultatea de Zootehnie i Biotehnologii. Coordonatori tiinifici: Prof. Dr. Ing. Ioan B UD, Biol. Drd. Valentin I. M AG. 46. TRAUT , W., H. W INKING 2001 Meiotic chromosomes and stages of sex chromosome evolution in fish: Zebrafish, Platyfish and Guppy. Chromosome Research 9:659-72. 47. WINGE, . 1922 Crossing over between the X- and the Y-chromosome in Lebistes. Comptes rendus des Travaux du Laboratoire Carlsberg 14(20):1-20. 48. WINGE, . 1922 One-sided masculine and sex-linked inheritance in Lebistes reticulatus. Journal of Genetics 12:146-162. 49. WINGE, . 1927 The location of eighteen genes in Lebistes reticulatus. Journal of Genetics, 18:1-43. 50.W INGE, . 1934 The experimental alteration of sex chromosomes into autosomes and vice versa, as illustrated by Lebistes. Comptes Rendus des Travaux du Laboratoire Carlsberg 21:1-49.

51. Y AMANAKA et al. 1995 Estimation of the number of loci controlling the male body size in the guppy. Tohoku Journal of Agricultural Research 46:21-28. 52. INTERNET 2005: The International Federation of Online Clubs and Aquatic Societies website (http://www.ifocas.fsworld.co.uk/). 53. INTERNET 2005: Felix Breden - http://www.sfu.ca/biology 54. INTERNET 2006: http://www.kathyboast.com/pics/fish/100_0132.jpg. 55. INTERNET 2006: http://www.deeplens.com/gallery/page_01.htm. 56. INTERNET 2006: Guppy Labs e-Bulletin http://www.guppylabs.com 57. INTERNET 2006: NCBI - http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ 58. INTERNET 2006: Fishbase - http://www.fishbase.org 59. INTERNET 2007 : www.rajaccj.ro

Acvariul USAMV Cluj-Napoca