Note de curs

BIOFIZICA SISTEMELOR DISPERSE Definiia i clasificarea sistemelor disperse Prin sistem dispers nelegem un amestec de dou sau mai multe substane, avnd o component dispersant (solventul) i una dispersat (solvitul). Solventul reprezint elementul activ, iar solvitul elementul relativ pasiv, deoarece i acesta influeneaz caracteristicile sistemului. Concentraia Pentru caracterizarea sistemelor disperse din punct de vedere cantitativ se folosete un parametru intensiv de stare numit concentraie. Unitatea de msur a concentraiei molare n SI (sistemul internaional de mrimi i uniti) este numrul de Kmoli de solvit pe unitatea de volum de soluie (Kmoli/m3):

Cm =

solvit Vsolutie

, Cm

[ ]S . I . = Kmol 3
m

Concentraia molal (molalitate) reprezint numrul de moli de solvit la 1 kg de solvent. Concentraia procentual de mas exprim masa de solvit aflat n 100 de grame de solvent, n timp ce concentraia volumic arat cte grame de solvit se gsesc n 100 ml de soluie. Concentraia normal (normalitate) pentru soluii de electrolit reprezint numrul de echivalent de solvit la 1 litru de soluie (un echivalent este egal cu cantitatea de substan care conine NA de sarcini electrice elementare). Clasificarea sistemelor disperse Sistemele disperse se clasific n funcie de dimensiunile particulelor, starea de agregare a dispersantului, afinitatea dintre componeni sau tipul fazelor componente (faza reprezint o parte omogen a unui sistem, la suprafeele de separare de celelalte pri aprnd variaii brute ale proprietilor fizico - chimice). Pentru a caracteriza complet un sistem dispers, trebuie luate n considerare toate aceste criterii. 1. Pornind de la dimensiunile particulelor solvitului, se definete gradul de dispersie ca fiind inversul diametrului particulelor solvitului d: 1 = d n funcie de care se disting: - soluii adevrate (moleculare) > 109 m-1, d < 1 nm, aceasta este invizibil la microscopul optic sau la ultramicroscop - soluii coloidale 107 m-1 < < 109 m-1, 1 nm < d < 100 nm, vizibil la ultramicroscop - suspensii < 107 m-1, d > 100 nm, vizibil la microscopul optic sau chiar cu ochiul liber. Deoarece n aplicarea acestui criteriu de clasificare se pornete de la premisa ca particulele solvitului sunt sferice, nu putem aplica aceast clasificare hidrocarburilor care sunt molecule lungi. 2. n funcie de starea de agregare a solventului (solvitul putnd fi gaz, lichid sau solid) sistemele disperse pot fi: - gazoase substana dispersant este un gaz (amestecurile gazoase, vaporii n aer, ceaa) - lichide substana dispersant este un lichid (lichide nemiscibile, lichid n gaz, soluii de electrolit) - solide substana dispersant este un solid (unele aliaje)
72

Biofizic Medical

3. n funcie de afinitatea dintre componeni sistemele disperse sunt: - liofile (exist afinitate ntre solvit i solvent) - liofobe (nu exist afinitate ntre solvit i solvent) 4. Din punct de vedere al tipului fazelor componente sistemele disperse pot fi: - monofazice, care pot fi omogene (proprieti identice n toate punctele sistemului) i neomogene (proprietile difer de la un punct la altul) - polifazice - heterogene: ntre prile componente exist suprafee de separare. (ceaa, aerosoli, spuma : lichid i gaz, gel : solid cu lichid) n organism exist soluii adevrate, coloizi i suspensii n care dispersantul este lichid, comportamentul lichidelor biologice fiind complex, avnd proprieti conjugate tuturor celor trei clase de sisteme disperse. De exemplu, sngele este soluie pentru cristaloizi (Na, Cl, K), coloid (deoarece conine proteine: serumalbumine, globuline), suspensie (datorit prezenei elementelor figurate). Lichidul cefalo rahidian (LCR) are substane cristaloide, deci este soluie, n concentraie sczut are i albumine, deci este coloid, are i foarte rare celule endoteliale i limfocite, fiind astfel reprezentat i componenta de suspensie. Soluiile moleculare Au diametrul particulelor solviilor mai mic dect 1 nm, sunt sisteme omogene, monofazice, starea de agregare a solventului putnd fi oricare (gazoas, lichid sau solid). Solventul este constituentul lichid aflat n cantitate cea mai mare al soluiei moleculare. Excepie de la aceast regul face apa care este ntotdeauna solventul (de exemplu, o soluie de alcool 75% are ca solvent apa). Soluiile apoase sunt de foarte mare importan n medicin. Pentru studiul teoretic al sistemelor disperse se folosete conceptul de soluie ideal caracterizat prin faptul c este foarte diluat. Soluia nu mai este ideal atunci cnd concentraia ei crete. Concentraia limit a solvitului la care acesta nu se mai dizolv, ci precipit se numete solubilitate, iar soluia obinut se numete soluie saturat. Solubilitatea unei soluii depinde de natura solventului i a solvitului (nu toate substanele produc soluii saturate, exist substane care formeaz faze omogene, indiferent de concentraie), temperatur i de presiune. Saturaia este o stare de echilibru, condus de legile termodinamice ale echilibrului. Solubilitatea se poate explica pornind de la interaciunile care exist ntre particulele de solvent i particulele de solvit. Dac interaciunea dintre tipurile diferite de particule este mai puternic dect interaciunea dintre particulele aceleiai faze, solubilitatea crete, soluia se formeaz spontan, particulele de solvit sunt nglobate ntre particulele de solvent. Suspensiile Sunt sisteme disperse care au gradul de dispersie cuprins n intervalul 105 107 m-1, dimensiunile particulelor lor fiind mai mari dect 10-7 m i mai mici dect 10-5 m. Suspensiile pot fi solide i lichide sau gazoase. Suspensiile medicamentoase sunt suspensii solide care se prepar printr-o mrunire mecanic i dispersarea particulelor n mediul de dispersie sau prin scderea solubilitii anumitor substane dizolvate. Aerosolii care se administreaz sub form de inhalaie se obin prin pulverizarea unor soluii de substane medicamentoase solide dizolvate ntr-un lichid. Stabilitatea suspensiilor crete cu gradul de dispersie (scderea dimensiunilor particulelor solvitului) deoarece particulele mai mici sunt mai bine inute n suspensie prin fenomenele de tensiune superficial.
73

Note de curs

Emulsiile Sunt sisteme alctuite dintr-un lichid dispersat ntr-un lichid (laptele care este o emulsie de globule mici de grsime ntr-o soluie apoas de sruri minerale, lactoz, proteine etc.), dintr-un gaz dispersat ntr-un lichid (spuma) sau dintr-un lichid dispersat ntr-un gaz (ceaa). Formarea unei emulsii presupune o cretere a suprafeei interfaciale dintre cele dou faze nemiscibile (Fig. 72), i este nsoit de o cretere a energiei libere.

Fig.72 Formarea unei emulsii la punerea n contact a dou faze nemiscibile lichide Datorit instabilitii lor, emusiile pot constitui poteniale rezervoare de substan ncapsulat ce poate fi eliberat n condiii variabile. O parte a aplicaiilor implic domeniul farmaceutic uman, emulsiile ap/ulei/ap fiind investigate ca vehicule poteniale ale medicamentelor hidrofile (vaccinuri, vitamine, enzime, hormoni), ce pot fi eliberate apoi progresiv, n mod controlat. Emulsiile pot fi folosite n nutriie (ca surse concentrate de calorii), n administrarea vaccinurilor (emulsiile putnd prezenta efecte adjuvante), n eliberare controlat de medicamente (permind ncorporarea de medicamente hidrofile / hidrofobe n cantiti mari, medicamentul nefiind n contact direct cu fluidele i esuturile organismului), la stabilizarea chimic a medicamentelor care hidrolizeaz rapid n soluii apoase. Soluii de gaz n lichid - Legea lui Henry Conform legii lui Henry, cantitatea de gaz ce se dizolv n unitatea de volum de lichid este proporional cu presiunea gazului de deasupra lichidului (sau cu presiunea parial a gazului in amestec). Cel mai bun exemplu pentru nelegerea acestei legi const n observarea fenomenelor care au loc la deschiderea unui recipient care conine un lichid gazos (ap carbogazoas, de exemplu). Se observ cum apar bule de aer la suprafaa lichidului deoarece bioxidul de carbon, aflat la presiune mai mare dect cea atmosferic, deci dizolvat n cantitate mai mare, prsete amestecul, ca rezultat al egalizrii presiunii pariale cu presiunea atmosferic. Similar, azotul care este un gaz inert, n mod normal depozitat n esuturile vii i n snge, va ncerca s prseasc esuturile i fluidele corpului dac acestea sunt supuse unei diferene brute de presiune, cum ar fi cazul unui scafandru care iese foarte rapid de la o adncime foarte mare. Apare boala de decompresie care se manifest prin erupii cutanate, dureri articulare, paralizie, putnd duce chiar la deces. Dizolvarea gazelor n lichide se face pn la saturaie (la temperatur i presiune date, cantitatea dizolvat atinge o valoare limit).
74

Biofizic Medical

Gazele sunt din ce n ce mai puin solubile pe msur ce temperatura crete, cnd lichidul fierbe, gazele fiind eliminate. Dintr-un amestec de gaze, aflate n prezena unui lichid, fiecare gaz se dizolv ca i cum ar fi singur n lichidul dizolvant. La o temperatur dat, cantitatea de gaz dizolvat n lichid este proporional cu presiunea pe care o exercit gazul asupra lichidului dup ce s-a dizolvat cantitatea maxim de gaz posibil n condiiile date. Coeficientul de solubilitate reprezint volumul de gaz (n condiii normale de presiune i temperatur) care se dizolv ntr-un litru de lichid. Acesta depinde de natura gazului i de natura lichidului. Oxigenul este mai solubil n ap i n lichidele biologice dect hidrogenul. Dizolvarea gazelor n snge i esuturi Conform legii lui Henry, cantitatea de gaz dizolvat ntr-un lichid crete cu creterea presiunii sale de deasupra lichidului, solubilitatea gazelor n snge crescnd dup o lege exponenial, constanta de timp a procesului depinznd de tipul de esut. Din acest punct de vedere esuturile pot fi rapide sau lente i din acest motiv apare o diferen de presiune (disbarism) ntre diferite esuturi, ca ntre snge i esuturi, important n special la decompresie (exemplu ar fi revenirea scafandrilor la suprafa). Eliminarea gazelor inerte la decompresie este mai rapid n snge dect n esuturi, prin urmare poate aprea situaia n care exist n snge bule de gaz (aa numitele embolii gazoase). Accidentele grave se datoreaz localizrii emboliilor la nivelul arterelor creierului i mduvei spinrii. Apariia emboliilor poate fi prevenit prin decompresie lent. n cazul hiperoxiei (la p > 1,7 atm) apar efecte toxice asupra sistemului nervos central (grea, ameeli, convulsii). Dei mecanismul prin care apar aceste efecte toxice nu este complet elucidat, se avanseaz ideea c producerea de radicali liberi este responsabil pentru producerea acestora. n cazul scafandrilor, la adncimi foarte mari, apare aa numita beie a adncurilor care se manifest cu simptome similare primelor stadii ale anesteziei generale i care este datorat creterii presiunii gazelor inerte. Heliul intr n organism i l i prsete mai rapid dect azotul, astfel c pentru scufundri de trei sau patru ore, organismul uman atinge saturaia cu He. De aceea, pentru astfel de scufundri, timpul de decompresie este mai scurt dect n cazul n care s-ar folosi amestecuri gazoase pe baz de azot (cum este cazul aerului atmosferic). De aceea, n amestecul gazos furnizat scafandrilor se folosete He. Din acest amestec este complet ndeprtat CO2 care se acumuleaz n esuturi, cu efect toxic, ducnd la acidoz (dei la suprapresiuni mici are un efect stimulator). Apa: structur i proprieti Molecula de ap este format dintr-un atom de oxigen i doi atomi de hidrogen, ntre fiecare atom de hidrogen i cel de oxigen existnd o legatur colavent de lungime 0,958 (1 = 10-10 m) (Fig. 73), unghiul dintre legturile covalente fiind 1050.

75

Note de curs

Fig. 73 Structura moleculei de ap Datorit structurii asimetrice a moleculei de ap, centrul sarcinilor pozitive (ionii de hidrogen) nu coincide spaial cu centrul sarcinilor negative (ionul de oxigen), aceasta se comport ca un dipol electric permanent (Fig. 74) avnd un moment dipolar de 1,858 Debye 6,2 10-30 Cm (momentul dipolar reprezint produsul dintre sarcina dipolului () i distana dintre centrul sarcinilor electrice negative i cel al sarcinilor electrice pozitive).

Fig. 74 Apa este un dipol electric permanent Datorit caracterului dipolar, molecula de ap se orienteaz n cmp electric, iar constanta sa dielectric este mare (Fig. 75).

Fig. 75 Orientarea dipolilor apei n cmp electric Molecula de ap are 10 electroni (Fig. 76) care sunt repartizai astfel : - 2 electroni n apropierea oxigenului; - 2 perechi de electroni neparticipani (nu particip la legtura covalent) care se rotesc pe dou orbite aflate n plan perpendicular pe planul moleculei de ap; - 2 perechi de electroni care care realizeaz legturile covalente.

76

Biofizic Medical

Fig. 76 Repartiia electronilor n molecula de ap Dispunerea orbitelor determin structura tetraedric a moleculei de ap (Fig. 77).

Fig. 77 Structura tetraedric a moleculei de ap ntre dipolii electrici se manifest fore de natur electrostatic, numite Van der Waals care sunt mai slabe dect forele ionice i care scad cu puterea a 7-a a distanei. De asemenea, aceste legturi sunt mult mai slabe dect legturile chimice, deci nu modific structura i proprietile moleculei. n afara legturilor de tip van der Waals, n lichide se ntlnesc i legturile coordinative care sunt mai puternice. Ele apar cnd norii electronici ai moleculelor se suprapun parial. Aceste legturi confer un comportament cooperativ apei, legarea unei molecule facilitnd legarea alteia, o molecul de ap putnd lega n acest fel nc 4 alte molecule (Fig. 78).

Fig. 78 Comportamentul cooperativ al apei conferit de prezena legturilor coordinative de hidrogen Proprietile fizice ale apei Dou dintre caracteristicile moleculare ale apei sunt responsabile pentru proprietile ei speciale i anume: momentul dipolar al apei i capacitatea moleculelor de ap de a forma legturi de hidrogen intermoleculare. Proprietile fizice ale apei care au o importan biologic remarcabil sunt: - densitate maxim la 40 Celsius pe fundul lacurilor temperatura apei nu scade sub aceasta valoare nici iarna (apa mai dens se va duce n jos), gheaa fiind mai puin dens dect apa va pluti, iar viaa se poate dezvolta n continuare n mediul subacvatic;
77

Note de curs

Structura afnat a gheii (Fig. 79) datorit creia densitatea ei este mai mic dect a apei la 00C se datoreaz tocmai capacitii apei de a forma legturi de hidrogen;

a) b) Fig. 79 Structura afnat a gheii (a)) i structura apei (b)) - cldur specific (cldura necesar unitii de mas pentru a-i varia temperatura cu un grad) mult mai mare dect cea a oricrei substane solide sau lichide (4,18 J/(gK)); aceast caracteristic poate fi explicat prin faptul c interaciunea dintre dipolii apei nmagazineaz o mare cantitate de energie intern; n termoreglarea organismului, cldura specific mare menine temperatura constant a corpului n timpul unor eforturi musculare intense care ar putea duce la o supranclzire; - cldur latent specific de vaporizare (cldura latent specific reprezint cldura necesar unitii de mas pentru a-i modifica starea de agregare) mult mai mare dect a altor lichide (40,65 kJ/mol amoniacul, de exemplu, are cldura latent specific de vaporizare mai mare dect a apei), acest lucru fiind datorat tot capacitii apei de a forma legturi de hidrogen. Evaporarea apei este un proces consumator de cldur, aadar evaporarea pulmonar i transpiraia consum cldur de la organismul viu, asigurnd homeotermia; - conductibilitate termic de cteva ori mai mare dect cea a majoritii lichidelor i de 27 de ori mai mare dect a aerului, consecina acestui fapt fiind c apa are rol de amortizor termic n organism; - constant dielectric relativ are valoarea 80, fiind foarte mare, rezultatul fiind facilitarea disocierii electrolitice; - apa disociaz foarte puin, avnd o constant de disociere mic (1,210-14 la 25oC), protonii produi n concentraie mic n urma disocierii apei au importan biologic deosebit; - tensiune superficial mai mare dect a altor lichide (73 mN/m); acest lucru are un rol hotrtor n fenomenele de capilaritate

Fig. 80 Pelicula de surfactant care cptuete interiorul unei alveole pulmonare Exemplu: tendina alveolelor de a colapsa la sfritul expiraiei se datoreaz, n esen, tensiunii superficiale a stratului apos care cptuete epiteliul alveolar. Stabilitatea alveolar este asigurat de surfactantul pulmonar (amestec de fosfolipide i lipoproteine)
78

Biofizic Medical

de la interfaa aer-lichid (Fig. 80) care reduce tensiunea superficial, meninnd diferena de presiune din interiorul alveolei n cursul ciclului respirator la o valoare aproximativ constant, prevenind astfel colapsarea. Surfactantul pulmonar particip i la ndeprtarea corpilor strini, fiind parte a sistemului imunitar pulmonar. Insuficiena acestui surfactant pulmonar sau absena sa pot provoca boli respiratorii grave: un copil nscut prematur (dupa 28-32 sptamni de gestaie) prezint o deficien a surfactantului pulmonar care duce la detres respiratorie manifestat imediat dup natere prin tahipnee (accelerare rapid a frecvenei respiratorii), cianoz (apariia coloraiei albstrui a pielii i a mucoaselor datorit unei cantiti inadecvate de oxigen n snge). Structura i rolul apei n sistemele biologice n structurile vii exist o multitudine de specii moleculare, macromoleculare i ionice care sunt hidrofile sau hidrofobe, capabile s formeze cu apa diferite tipuri de legturi. Spunem c apa din sistemele vii este structurat adic are un grad mare de ordonare i acest lucru este responsabil pentru rolul foarte important pe care l joac apa ntr-o serie de mecanisme de reglare i bioenergetice cum ar fi: capacitatea caloric mare i conductivitatea termic mare previn nclzirea excesiv a esuturilor vii n urma unor eforturi musculare intense, cldura latent de vaporizare mare permite rcirea prin evaporare pulmonar i prin transpiraie (rol n homeostazia termic).

Fig. 81 Ap structurat Structurarea apei n sistemele biologice se datoreaz faptului c moleculele de ap sunt capabile s formeze legturi de hidrogen nu numai unele cu altele, dar i cu macromolecule care au la capete grupri OH sau NH2, cum este cazul proteinelor (Fig. 81). ns n sistemele vii exist i electrolii care sunt substane capabile s disocieze n ioni negativi i pozitivi n prezena apei (Fig. 82), care formeaz cu apa legturi electrostatice, rezultnd o ordonare local a apei.

Fig. 82 Disocierea clorurii de sodiu n ap

79

Note de curs

Apa structurat n prezena proteinelor se numete ap legat, iar apa structurat n prezena electroliilor se numete ap de hidratare. Proprietile coligative ale soluiilor Proprietile coligative ale soluiilor nu depind de tipul solvitului, ci doar de tipul solventului. Interaciunea solvent-solvit duce la: scderea presiunii vaporilor saturani ai solventului; - scderea punctului de congelare proporional cu concentraia molar, conform legii lui Raoult T =kcrcM unde kcr se numete constanta crioscopic i reprezint scderea T la dizolvarea unui mol de substan ntr-un litru de soluie ; creterea punctului de fierbere. Deoarece scade presiunea vaporilor saturani, trebuie s creasc temperatura de fierbere, fierberea aprnd n momentul n care presiunea vaporilor saturani de deasupra lichidului devine egal cu presiunea atmosferic. Ori, presiunea vaporilor saturani crete cu temperatura. n legea lui Raoult, care este respectat, n locul constantei crioscopice apare keb - constanta ebulioscopic. Proprietile electrice ale soluiilor Disocierea electroliilor este favorizat de permitivitatea electric foarte mare a apei (de 80 de ori mai mare dect a vidului), precum i de faptul c apa este un dipol electric. Deoarece n soluia format n urma dizolvrii unui electrolit exist purttori de sarcin liberi, aceasta are o rezisten electric mult mai mic dect a apei pure. Definim gradul de disociere ca fiind raportul dintre numrul n de molecule disociate i numrul total de molecule dizolvate din soluie. Exist electrolii tari care sunt complet disociai n soluie apoas i electrolii slabi care sunt doar parial disociai n soluie apoas. Gradul de disociere depinde invers proporional de concentraia electrolitului, la diluie infinit, electroliii fiind total disociai. Conductivitatea unei soluii () definit ca fiind inversul rezistivitii () = 1/ , este funcie de concentraia purttorilor de sarcin, valen, mobilitate, caracteristicile soluiei. ntr-o soluie de electrolit exist i ioni negativi i ioni pozitivi, conductivitatea soluiei fiind dat de suma conductivitilor ionilor de semne contrare. Datorit interaciunii dintre ioni, doar o fraciune f din concentraia total de ioni din soluie poate participa liber la conducie. Aceast fraciune f se numete coeficient de activitate. Activitatea a a unei soluii este dat de relaia: a = fC Activitatea reprezint concentraia unei soluii ideale care ar prezenta aceeai conductivitate ca soluia real. ntr-o soluie ideal: f = 1 (conductivitate total) i deci: a=C Cnd exist mai muli ioni n soluie, cmpul electric generat de acetia depinde de concentraie, de valen i de interaciunea dintre ioni. Tria ionic I ine seama de toi aceti factori i matematic se scrie astfel: I = Cizi2 Proprieti optice ale soluiilor Sunt folosite pentru analiza calitativ i cantitativ a substanelor n soluie, prin diferite tehnici, cum ar fi: - Refractometria este o metod prin care, n urma msurrii indicelui de refracie al unei soluii se poate determina concentraia acesteia datorit interdependenei dintre aceste dou mrimi, n = f(c). n laboratoarele de analize medicale poate fi folosit la
80

Biofizic Medical

determinarea glicozuriei, adic a concentraie de glucoz n urin n caz de diabet (altfel, glucoza nu este decelabil n urin). - Polarimetria este o metod pe baza creia se poate calcula concentraia unei soluii optic active (substan care rotete planul luminii polarizate (Fig. 83)) n urma msurrii unghiului de rotire a planului de polarizare a luminii (Fig. 84), unghi direct proporional cu concentraia substanei optic active i cu grosimea stratului de substan strbtut. Aceast metod se bazeaz pe faptul c substanele organice care au cel puin un carbon asimetric sunt optic active, adic exist dou structuri spaiale diferite simetrice n oglind corespunztoare aceleiai formule moleculare.

Fig.83 Orientarea vectorului electric al undei electromagnetice luminoase n lumina nepolarizat (natural) i n lumina polarizat liniar n mod normal, n organism se sintetizeaz i se reine numai una dintre cele dou structuri, n funcie de tipul acesteia. De exemplu, aminoacizii sunt levogiri (L), iar glucidele sunt dextrogire (D).

Fig.84 O substan optic activ rotete planul luminii polarizate cu un unghi proporional cu concentraia sa n soluie - Spectrofotometria de absorbie este o metod care permite analiza calitativ i cantitativ a unor soluii. Fiecare tip de molecul are un spectru de absorbie specific. Absorbia luminii se face conform legii Beer Lambert: I1 = I0 e- l c unde I1 reprezint intensitatea fasciculului emergent (Fig. 85), I0 reprezint intensitatea luminoas a fasciculului incident, c este concentraia solvitului, iar este o constant de material.

81

Note de curs

Fig. 85 Atenuarea intensitii fasciculului emergent dup absorbie Spectrele de absorbie n vizibil i ultraviolet corespund excitrii electronice, iar cele din IR rotaiei i vibraiei moleculare. Analiza calitativ care poate fi efectuat se refer la identificarea substanelor dintrun amestec, determinarea entropiei i a capacitii calorice, determinarea tipului legturilor chimice. Analiza cantitativ permite evaluarea cantitativ a concentraiei substanelor, determinarea puritii unei substane. Spectrele de absorbie ale soluiilor pot fi influenate de natura solventului, valoarea pH-ului (dac n soluie se afl dou substane ce se pot transforma una n alta, curbele de extincie pentru diferite pH-uri se intersecteaz n punctul izobestic ; modificarea pHului se observ prin virarea culorii), concentraia soluiei (apariia a dou puncte izobestice, datorit concentraiilor mari la care pot s apar asociaii moleculare, cele dou puncte izobestice corespunznd monomerului i dimerului, respectiv), temperatur (agitaia termic inhib formarea dimerilor, aadar creterea temperaturii are efect invers dect cel al creterii concentraiei), iradierea substanei. Fenomene de transport n soluii n cazul n care ntr-un sistem exist gradieni de concentraie, potenial sau presiune are loc un transport de substan orientat spre atingerea unei stri de echilibru termodinamic. Transportul de substan n cazul soluiilor se poate face prin dou moduri : prin difuzie care reprezint transportul de solvit sub aciunea gradientului electrochimic i prin osmoz care reprezint transportul de solvent sub aciunea gradientului de presiune. Cele dou fenomene pot fi simultane. Difuzia simpl Difuzia const n transportul de substan din regiunile cu concentraie mai mare spre cele cu concentraie mai mic, realizat exclusiv prin micrile de agitaie termic.

Fig. 86 Difuzia simpl are loc datorit gradientului de concentraie Difuzia este descris de cele dou legi ale lui Fick.

82

Biofizic Medical

Legea I a lui Fick: Cantitatea de substan d care difuzeaza n timpul dt printr-o seciune de arie A este proporional cu gradientul de concentraie

dc , cu dt i cu aria A: dx

d = DA
sau

dc dt dx

unde D este coeficientul de difuzie care se msoar n S.I. n m2/s (D este definit ca fiind cantitatea de substan care difuzeaz n unitatea de timp prin unitatea de suprafa, pentru un gradient de concentraie egal cu unitatea), iar d/dt reprezint viteza de difuzie. Semnul minus apare deoarece fluxul de substan este ndreptat de la concentraie mare la concentraie mic, adic n sensul gradientului de concentraie. Este valabil numai cnd distribuia de concentraie nu se modific n timp, adic atunci cnd are loc o difuzie staionar. n cazul n care difuzia este non-staionar concentraia variaz i n timp i este guvernat de legea a doua a lui Fick: Variaia n timp a concentraiei ntr-o regiune dat a soluiei este proporional cu variaia n spaiu a gradientului de concentraie.

d dc = DA dt dx

Coeficientul de difuzie D (acelai din legea I a lui Fick) este proporional cu viteza de difuzie a particulelor care depinde de temperatur, de vscozitatea lichidului i de mrimea particulelor. Difuzia prin membrane O pelicul de grosime neglijabil fa de aria suprafeei, care desparte dou medii avnd caracteristici fizico-chimice diferite constituie o membran. Deosebim mai multe tipuri de membrane: - membrane permeabile (care permit trecerea tuturor componenilor unei soluii n mod egal, i inegal permeabile, care permit trecerea componenilor soluiei n mod diferit) - selectiv permeabile (permit trecerea numai a unor componeni) - semipermeabile (permit doar solventului s le strbat) - ireciproc permeabile (permit trecerea solvitul numai ntr-un sens). Membrane permeabile n cazul n care dou compartimente care conin aceeai soluie, dar n concentraii diferite, sunt separate de o membran de grosime , n desfurarea difuziei se ine cont i de coeficientul de partiie care reprezint raportul dintre solubilitatea solvitului n membran i cea a solventului. Legea I-a a lui Fick pentru membrane se va scrie:

dC d 2C = D 2 dt dx

d d (c ) DA (c2 c1 ) = D Ac = PAc = DA = dt dx

unde parametrul P = solvit.

D reprezint coeficientul de permeabilitate a membranei pentru

83

Note de curs

Osmoza Este fenomenul de difuzie a solventului dinspre soluia mai diluat nspre cea mai concentrat printr-o membran semipermeabil. Presiunea osmotic reprezint presiunea mecanic necesar pentru mpiedicarea osmozei i se datoreaz micrii de agitaie termic a moleculelor de solvit care ciocnesc membrana pe o singur parte neputnd s o strbat (Fig. 87).

Fig. 87 Presiunea osmotic este datorat moleculelor de solvit care ciocnesc membrana semipermeabil neputnd trece. Osmolul reprezint cantitatea de substan care, dizolvat n solvent, se disperseaz ntr-un numr de particule osmotic active (capabile s se agite termic, dar nu s traverseze membrana) egal cu numrul lui Avogadro NA.

Fig. 88 Principiul de funcionare al osmometrului Dutrochet Aparatul cu care se msoar aceast presiune este osmometrul Dutrochet. n vasul mare (Fig. 88) se gsete solventul pur, iar n tubul nchis n partea inferioar cu o membran semipermeabil se afl o soluie cu acelai solvent. Moleculele de solvit neputnd strbate membrane semipermeabil o s apar un flux de solvent dinspre vasul mare spre tub i nivelul lichidului n tub va crete, ducnd la diluarea soluiei din tub. Sistemul ajunge n starea de echilibru atunci cnd presiunea hidrostatic gh exercitat de lichidul care a urcat n tub este egal cu presiunea exercitat de soluie . Legile presiunii osmotice Legile presiunii osmotice se aseamn cu legile gazelor, Vant Hoff fiind cel care a propus similitudinea presiunii osmotice cu presiunea gazelor, moleculele dizolvate ntr-un
84

Biofizic Medical

lichid comportndu-se ca moleculele unui gaz aflat ntr-un vas. Legile presiunii osmotice sunt legi deduse experimental. 1. La temperatur constant, presiunea osmotic a unei soluii este proporional cu concentraia molar a soluiei (numrul de moli de solvit ntr-un litru de soluie).

c
unde c este concentraia molar. Trecnd de la directa proporionalitate la egalitate, obinem : = kTc, iar constanta are valoarea kT = 22,4 103 Nm/mol. Adar, presiunea osmotic este invers proporional cu volumul, similar legii transformrii izoterme a gazelor. 2. La concentraie constant, presiunea osmotic este direct proporional cu temperatura

T
Sau = kcT, enun similar cu cel al legii transformrii izocore a gazelor ideale. 3. Presiunea osmotic a unei soluii n care faza dispersat este alctuit din substane diferite, este egal cu suma presiunilor osmotice ale fiecrei soluii n parte, iar fiecare substan dizolvat i are presiunea ei proprie, ca i cum s-ar afla dizolvat singur n ntreaga cantitate de solvent. Aceast lege este analoag legii lui Dalton cu privire la presiunea total a unui amestec de gaze, care egal cu suma presiunilor pariale ale componentelor. 4. Presiunea osmotic a unei soluii este independent de natura substanei dizolvate, ea depinde numai de numrul moleculelor din soluie. Astfel, soluiile de concentraii molare egale ale diferitelor substane au aceeai presiune osmotic dac nu intervin alte fenomene. Aceast lege este similar legii lui Avogadro care afirm c acelai numr de molecule ocup acelai volum i exercit aceeai presiune, la temperatur dat. De exemplu, o soluie de zahr 1M (340 g/l) exercit o presiune osmotic egal cu cea exercitat de o soluie 1M de glucoz sau de acid tartric. Dac n loc de ap se folosete alt solvent, la aceeai concentraie molar, presiunea osmotic rmne nemodificat, deoarece, fiecare molecul, indiferent de tipul ei, exercit aceeai presiune osmotic. Combinnd cele dou relaii (legile 1 i 2) se obine c : S-a constatat c: k R. Dar c = /V, de unde:

= kcT = RT/V i: V = RT

Aceasta este legea Vant Hoff, similar ecuaiei termice de stare pentru gazul ideal. Pentru soluiile disociate de electrolii presiunea osmotic are expresia :

V = iRT unde i este indicele de disociere. Travaliul osmotic este lucrul mecanic efectuat de solvent la traversarea unei membrane semipermeabile (similar cu lucrul mecanic efectuat de un gaz ideal ntr-o transformare izoterm): W = RT ln c1/c2
c1, c2 - concentraiile molale iniial i final ale soluiei, - numrul de moli de solvent.

85

Note de curs

Msurarea presiunii osmotice Se poate face prin: 1. Utilizarea osmometrului Dutrochet 2. Metoda crioscopic prin care se determin diferena dintre temperatura de nghe a soluiei i cea a solventului pur T, diferen care este direct proporional cu concentraia osmolar a soluiei. Constanta se numete crioscopic i este numeric egal cu valoarea cu care scade temperatura de nghe a unei soluii avnd concentraia de 1 osmol la litru de solvent, fa de temperatura de nghe a solventului pur. Toate soluiile moleculare coboar punctul de congelare al apei cu 1,86 grade Celsius. Important de reinut c aceast coborre a punctului de nghe este direct proporional nu cu concentraia procentual a soluiei ci cu cea molar. Aadar, pentru solvent ap, la o concentraie de 1 osmol, punctul de nghe ajunge la -1,86oC, constanta crioscopic kcr = 1,86.10-3 m3K/mol, iar kT = 22,4.102 N.m/mol, se obine valoarea presiunii osmotice a apei de 12 T . Exemple de crioscopie clinic. Serul uman normal nghea la -0,56oC. Aceasta nseamn c presiunea osmotic a serului este de 6,72 atm. Constana punctului de congelare a serului este remarcabil i este aproape imposibil s-l facem s varieze, chiar prin ingerarea unei cantiti importante de NaCl. Rezultatele experimentale arat c serul sanguin se comport ca o soluie apoas de concentraie 0,3M. O soluie de NaCl n ap cu concentraia de 9%o produce aceeai coborre crioscopic de 0,56 i are aceeai presiune osmotic precum serul sanguin. De aici, soluia NaCl 9 %o se mai numete curent, dar impropriu ser fiziologic. Oricum, presiunea osmotic a sngelui este dat de electrolii, adic de srurile de Na, K, Ca, Mg. Anumite stri patologice fac s varieze punctul de congelare a serului; dac rinichii nu funcioneaz normal, concentraia serului se mrete, cobornd punctul de congelare. Urina are punctul de congelare la -1,5oC, n general urina nghea la o temperatur variabil n intervalul -1 i -3,5 grade Celsius. Amplitudinea osmotic este mult micorat, n anumite cazuri de nefrite, cnd rmne aproape invariabil cu tot excesul de ap ingerat. Fenomenul se observ prin retenie de ap i prin apariia de edeme. 3. Metoda ebulioscopic msoar diferena dintre temperatura de fierbere a soluiei i cea a solventului pur, diferen care depinde direct proporional de concentraia osmolar, prin constanta ebulioscopic Transportul apei prin membrane S considerm o membran semipermeabil de-o parte i de alta a creia se afl soluii diferite, de concentraii diferite. Fluxul de ap Japa prin membran reprezentat de numrul de moli de ap ce traverseaz unitatea de suprafa a membranei n unitatea de timp se poate scrie astfel: Japa = - Papa (p -) unde Papa reprezint coeficientul hidrodinamic de permeabilitate al membranei (acesta depinde de grosimea membranei i de mobilitatea apei prin membran), p reprezint diferena dintre presiunile efective de-o parte i alta a membranei, iar reprezint diferena dintre presiunile osmotice ale soluiilor aflate de-o parte i alta a membranei. Dar = RTc, = RTc, unde c este diferena dintre concentraiile osmolale: Japa = -Papa (p - RTc) n cazul n care membrana nu este perfect semipermeabil, se utilizeaz coeficientul de semipermeabilitate definit ca fiind raportul dintre fluxul osmotic real i fluxul osmotic printr-o membran semipermeabil.
86

Biofizic Medical

Dac n soluiile separate de membran exist mai multe specii de solvii avnd coeficienii de permeabilitatea i i diferenele de concentraie ci se poate exprima fluxul de ap prin membrana n felul urmtor:

J apa

n = Papa p RT i ci i =1

Deosebim dou cazuri distincte, funcie de valorile relative ale diferenei dintre presiunile efective de o parte i de alta a membranei, p, i diferena dintre presiunile osmotice ale soluiilor aflate de-o parte i alta a membranei : - dac p > are loc ultrafiltrarea (sub aciunea presiunii mecanice apa trece n cellalt compartiment (fiindc numai ea poate trece). Ultrafiltrarea reprezint separarea coloizilor i a macromoleculelor de cristaloizi i de moleculele mici, prin difuzia acestora printr-o membran sub aciunea unui gradient de presiune (prin aceasta deosebindu-se de dializ). Presiunea are rolul nu att de a accelera ultrafiltrarea, ct s mpiedice endosmoza. - dac p < se produce osmoza. Membranele biologice sunt selectiv permeabile, deci osmoza este ntotdeauna nsoit de difuzie. Contribuia proteinelor la presiunea osmotic a lichidelor biologice este mic, dar ele determin o repartiie inegal a cristaloizilor. Osmoza n biologie Compoziia osmolar i ionic a fluidelor biologice este aceeai. Dac o soluie urmeaza a fi injectat, ea trebuie s aib aceeai presiune osmotic ca a plasmei sanguine - soluie izotonic (izoosmotic). n caz contrar apar dou posibiliti (Fig. 19): - soluie hipertonic (hiperosmotic) soluie > plasm: apa prsete hematiile, acestea micorndu-i volumul; - soluie hipotonic (hipoosmotic) soluie < plasm: se produce hemoliz, hematiile i mresc volumul datorit influxului masiv de ap i se sparg. Izotonicitatea lichidelor biologice se face prin schimburi de ap i electrolii, la nivel tisular. Cnd introducem cantiti mari de lichid n snge trebuie s ne asigurm c soluia introdus este izotonic (soluii izotonice: serul fiziologic 9o/oo i glucoza de 5%). Fenomenele de osmoz i de ultrafiltrare asigur schimburile de ap ntre celule i mediul extracelular i, mpreun cu unele substane dizolvate, ntre compartimentul vascular i interstiial.

Fig.89 O hematie introdus ntr-o soluie hipertonic i va micora volumul, n timp ce o hematie introdus ntr-o soluie hipotonic i va mri volumul
87

Note de curs

Temperatura de nghe a plasmei sanguine este de -0,560C, presiunea sa osmotica fiind la aceast temperatur de = 6,72 atm. La temperaura corpului uman (370C), presiunea osmotic a plasmei atinge valoarea de pl=7.6 atm. Presiunea osmotic a plasmei sanguine este dat de suma presiunilor osmotice datorate micromoleculelor, ionilor i macromoleculelor.

pl = micromolecule + ioni + macromolecule

Endoteliul capilar este membran semipermeabil n raport cu proteinele din plasm (nu pentru ap, ioni, micromolecule). n capilarul arterial diferena dintre presiunile efective intravascular i extravascular este (p) = 32 mm Hg (Fig. 90), iar n capilarul venos aceast diferen este p = 12 mm Hg. Diferena dintre presiunile osmotice este constant pe toat lungimea capilarului, avnd valoarea de 28 mm Hg. La captul arterial, unde p > , are loc ultrafiltrarea apei cu moleculele i ionii dizolvai, ctre spaiul extravascular, n timp ce la captul venos, unde p < , are loc rentoarcerea apei n compartimentul vascular mpreun cu produii de catabolism prin osmoz. mpreun asigur schimbul de ap (mpreun cu unele substane dizolvate) ntre compartimentul vascular i interstiial.

Fig. 90 Distribuia presiunilor la nivelul endoteliului capilar Dac reabsorbia apei nu se realizeaz corespunztor n capilarul venos, apa se acumuleaz n lichidul interstiial dnd natere la edeme. Osmoza mai intervine i n creterea esuturilor : o floare rupt i introdus cu tulpina n ap se desface rapid, datorit afluxului osmotic din interior, introdus n ap cu sare, floarea se vetejete, deoarece apa trece din celule ctre apa din vas prin curent exosmotic. Eliminarea renal a apei i a cataboliilor toxici Are loc n dou etape: ultrafiltrarea glomerular i reabsorbia tubular. Nefronul este format din corpusculul renal Malpighi i din tubii renali. La nivelul glomerulului are loc o ultrafiltrare sub presiunea 42 mmHg, aceast presiune fiind determinat de presiunea hidrostatic din capilare, i implicit de presiunea arterial, o scdere a presiunii arteriale ducnd la diminuarea eliminrii renale. O parte din ap i unele substane necesare organismului (aminoacizi, glucoz, ioni de sodiu si clor) trec din urina primar n snge prin reabsorbia tubular. Fenomenele de transport prin care are loc reabsorbia sunt difuzia i transportul activ, micorndu-se astfel foarte mult volumul de urin. Rinichiul artificial Fiind un catabolit al metabolismului proteic, ureea trebuie s aib un nivel constant n snge de 35 mg o/oo, peste acest prag apar deficiene renale grave, fatale. Creterea
88

Biofizic Medical

concentraiei de uree apare ca urmare a dezechilibrului n producerea urinei legate de pierderea funciilor renale. n aceste cazuri, detoxifierea sngelui se face cu ajutorul rinichiului artificial (Fig. 91).

Fig. 91 Desfaurarea hemodializei Sngele este filtrat prin dializ care folosete o membran din plastic, semipermeabil, care permite particulelor de dimensiuni mici, cum ar fi molecule sau ioni, s o strbat n ambele direcii, n timp ce particulele coloidale i macromoleculele sunt reinute de o parte (Fig. 22). Soluia de dializ este salin i uor hipertonic, acest lucru asigurnd o presiune osmotic mrit n compartimentul care conine sngele, determinnd apa s treac n dializor (curent endosmotic).

Fig. 92 Sngele n contact cu soluia de dializ prin intermediul unei membrane semipermeabile Pentru eliminarea complet a cristaloizilor, soluia spre care se desfoar dializa trebuie n permanen nlocuit. Acest lucru se face pentru a mpiedica atingerea unui echilibru ionic ntre cele dou compartimente, care ar duce la ncetarea fluxului. Viteza de dializ este influenat de dimensiunea porilor membranei, de temperatur, de vscozitate, de ncrctura electric a membranei.

89

Note de curs

FENOMENE DE TRANSPORT PRIN MEMBRANA CELULAR Structura i funciile membranei celulare Organismele vii sunt alctuite dintr-un numr foarte mare de compartimente fluide interdependente, mrginite de membrane plasmatice. Membranele celulare sunt structuri planare cu grosimi moleculare cuprinse ntre 6 i 10 nm (1 nm = 10-9 m) care ndeplinesc cel puin dou funcii dinamice eseniale, ele neputnd fi privite ca nite pelicule pasive care delimiteaz dou medii care au caracteristici fizico-chimice diferite (lichidul interstiial i citoplasma). Prima funcie a membranei celulare este de a mpiedica micarea liber a particulelor ntre dou compartimente adiacente (lichidul interstiial i citoplasma), prin urmare membrana are rolul unei bariere fizice active. Lichidul interstiial i citoplasma sunt sisteme disperse avnd ca solvent apa, iar ca faze dispersate electrolii (ioni de Na, K, Cl, Ca, Mg), macromolecule (de ex. proteinele), organite intracelulare (de ex. mitocondriile) i molecule polare mici, n concentraii diferite. Lichidul interstiial i citoplasma au aceeai osmolaritate de aproximativ 300 mOsM/l, fiind deci, lichide izotonice. Fiind semipermeabile i selective, membranele celulare ndeplinesc i o a doua funcie foarte important i anume reglarea volumului i a compoziiei mediului intracelular. Aceast reglare asigur meninerea la valori constante a compoziiei i volumului intra- i extracelular, n ciuda fluctuaiilor din mediul extern. Structura membranei celulare a fost studiat prin microscopie electronic, difracie de raze X i recent, vizualizat cu ajutorul microscopiei de for atomic.

Fig. 93 Structura membranei celulare conform modelului mozaicului fluid proteolipidic Principalii constitueni ai membranelor biologice sunt lipidele i proteinele, conform modelului mozaicului fluid proteolipidic (Fig. 93) al lui Nicholson i Singer elaborat n 1972: membrana este format dintr-un bistrat lipidic, n care sunt inserate proteine i glicoproteine. Acest model presupune distribuia uniform a diferitelor tipuri de lipide n bistrat, lucru care a fost infirmat n ultimii ani. Simon si Ikonen au demonstrat n 1987 existena asa numitelor microdomenii lipidice (lipid rafts) de colesterol i sfingomielina care nu sunt solubile n detergeni nonionici, adic prezena unor insule membranare, lipidele nedistribuindu-se uniform pentru a forma bistratul lipidic. Lipidele Sunt molecule insolubile n ap i uor solubile n solveni organici, constituind aproximativ 50% din masa membranelor celulelor animale, avnd o densitate de

90

Biofizic Medical

aproximativ 5106 lipide / 1 m2 arie de membran. Lipidele formeaz matricea pentru fixarea proteinelor, dar ndeplinesc i alte funcii. Lipidele sunt fie amfifile, adic prezint capt polar (extremitate polar care interacioneaz puternic cu apa) i una sau mai multe catene alifatice puternic hidrofobe (formate din dou lanuri de hidrocarburi numite i cozi hidrofobe) (Fig. 94).

Fig. 94 Moleculele lipidice sunt amfifile Aceast conformaie influeneaz mpachetarea i micarea respectivei molecule lipidice n planul lateral al membranei. Capetele polare ale moleculelor amfifile au radicali fosfat i sunt fie ionice fie neutre, acestea din urm au o distribuie asimetric a sarcinii electrice determinnd orientarea n cmpul electric sau magnetic. Cele mai importante clase de lipide ntlnite n constituirea bistratul lipidic sunt: fosfolipidele, glicolipidele i colesterolul. Fosfolipidele sunt derivai ai glicerolului (acool simplu) sau ai sfingosinei (alcool complex) (Fig. 95). Exist fosfolipide care conin colin: fosfatidilcolina, sfingomielina sau care nu conin colin: fosfaditiletanolamina, fosfatidilserina, fosfatidilinositol etc. Una dintre cele dou cozi hidrofobe ale fosfolipidelor se prezint sub forma unui lan drept de acizi grai saturai, iar cealalt prezint o mic bucl datorit unei legturi duble cis nesaturate. Fosfolipidele sunt asimetric distribuite n bistrat, astfel, pe partea interstiial a membranei se afla fosfatidilcolina i sfingomielina, iar pe partea citoplasmatic a membranei se afla fosfatidiletanolamina i fosfatidilserina care are i sarcina electric negativ. Glicolipidele conin la captul polar molecule de zahr (glucoz sau galactoz), ele fiind ntlnite exclusiv pe suprafaa extracelular a membranelor lipidice. Colesterolul se orienteaz n biomembrane cu gruprile hidroxil din structura inelar steroid n vecintatea capetelor polare ale fosfolipidelor (Fig. 99) interacionnd i imobiliznd parial gruprile hidrocarbonate din cozile fosfolipidelor, avnd ca efect scderea fluiditii biomembranelor. Interacia fosfolipide ap Capetele polare ce conin gruparea fosfat interacioneaz cu moleculele polare de ap. Deoarece cozile moleculelor amfifile sunt hidrofobe, interaciunea cu moleculele de ap este mai slab dect interaciunea dintre moleculele de ap, din acest motiv, la contactul cu apa, cozile hidrofobe sunt eliminate din contactul cu aceasta. n funcie de concentraia fosfolipidelor n ap, se pot realiza trei tipuri de structuri (Fig. 96):
91

Note de curs

- monostrat lipidic pentru concentraii mici de fosfolipide; prin mprtierea unei soluii de lipide pe o faz apoas se formeaz spontan un monostrat la interfaa aer/ap unde capetele polare ale lipidelor sunt orientate ctre ap, iar cozile hidrofobe ctre aer; astfel, lipidele sunt surfactani (au proprietatea de a scdea coeficientul de tensiune superficial al apei)

Fig. 95 Clasificarea lipidelor membranare n funcie de structura lor (Structure-based classification of membrane lipids Expert Reviews in Molecular Medicine 2002 Cambridge University Press) - micele, cnd coninutul de lipide al amestecului este mult mai mare catenele alifatice se vor orienta ctre interior, iar capetele polare vin n contact cu faza apoas - bistraturi, la concentraie foarte mare de fosfolipid, capetele polare vin n contact cu faza apoas, iar catenele alifatice sunt mpachetate paralel una cu alta; miezul lipidic fiind hidrofob este exclus din faza apoas, iar bistraturile lipidice se nchid spontan formnd vezicule stabile.
92

Biofizic Medical

Fig. 96 Organizarea spontan n ap a moleculelor lipidice

Fig. 97 La temperatura la care se desfoar procesele biologice, bistratul lipidic se comport ca o structur dinamic Bistratul lipidic este o structur dinamic, prezentnd fluiditate: moleculele lipidice prezint micri de translaie n stratul n care se afl (difuzie lateral), rotaie n jurul axei proprii, rotaie descriind o suprafa conic, flexie, basculare dintr-un strat lipidic n cellalt (Fig. 97). Experimentul Gorter Grendel n 1925, Gorter i Grendel (iniiatorii modelului de bistrat al membranei plasmatice) au emis ipoteza c dac membrana plasmatic este bistrat, atunci, suprafaa ei trebuie s fie jumtate din cea ocupat de totalitatea lipidelor sale ntr-un monostrat. Pentru a testa aceast ipotez ei au msurat suprafaa eritrocitelor recoltate de la diferite mamifere la microscop, apoi au extras lipidele din membrana eritrocitelor, au mprtiat lipidele la supraata aer/soluie salin i au msurat aria monostratului obinut. Prin compararea celor dou tipuri de msurtori s-a obinut raportul de aproximativ 2:1 pentru diferitele celule roii, confirmnd astfel modelul de bistrat al membranei plasmatice. Proteinele membranare Proteinele sunt macromolecule care constituie elemente eseniale pentru toate procesele biologice. Concentraia proteinelor membranare variaz ntre 20% (mielina, de exemplu) i 75% (n membrana mitocondriilor) sau chiar 80% (n membrana microorganismului Halobacterium halobium, coninnd bacteriorodopsin care este un pigment fotosensibil). Proteinele reprezint elementul activ al membranei, fiind structuri organizate de baz n desfurarea urmtoarelor procese biologice: - fenomene de transport (canalele i transportorii care contribuie la transportul ionilor i al moleculelor mici sunt proteinele specifice); - cataliza enzimatic (enzimele, n majoritatea cazurilor, sunt structuri proteice, care mresc de ordinul milioanelor de ori vitezele de reacie ale proceselor desfurate in vivo);
93

Note de curs

- micarea coordonat (de exemplu, actina i miozina sunt structuri proteice specifice responsabile pentru existena micrii coordonate); - suport mecanic (colagenul este o protein esenial n structura pielii, a esuturilor osoase i a tendoanelor); - imunoprotecie (anticorpii sunt de asemenea proteine extrem de specializate cu rol n recunoaterea organismelor strine). Varietatea lor este mult mai mare dect a lipidelor fiind determinat de diversitatea funciilor lor. n funcie de modul n care se insereaz n membran, proteinele (Fig. 98) sunt: a) proteine intrinseci (integrale) care au urmtoarele caracteristici: - traverseaz membrana celular o dat (glicoforina) sau de mai multe ori (exemplu: proteinele transportoare, pompe ionice constituite din mai multe helixuri)

Fig.98 Tipuri de proteine membranare - pot fi extrase prin tratare cu detergeni - sunt implicate n procesele de transport b) proteine extrinseci (periferice) - ptrund n membran pe o anumit distan, pe una din cele dou fee, sau sunt ataate la suprafaa membranei (receptorii membranari, proteine cu rol imunologic etc.) - pot fi ndeprtate prin splare ori prin tratare cu soluii cu trie ionic sczut - sunt implicate n transmiterea informaiei n interiorul celulei Fluiditatea membranelor plasmatice La temperatura la care se desfoar procesele biologice, membrana are proprieti fizice ce o apropie mai mult de starea de agregare fluid, aadar, dispunnd de o mare libertate, att lipidele ct i proteinele membranare pot executa diferite micri. Aceste micri sunt datorate agitaiei termice proprii, precum i ciocnirilor cu moleculele cu care vin n contact, ceea ce permite realizarea reaciilor enzimatice. Proteinele pot executa micri de translaie lateral prin bistrat, precum i de rotaie n jurul unei axe perpendiculare pe bistratul lipidic. Spre deosebire de lipide care se pot mica liber n bistrat, micarea proteinelor este mai restrictiv, fiind condiionat de interaciunea cu alte proteine. n orice moment, o fraciune nsemnat a lipidelor membranare este adiacent proteinelor, dar exist un permanent schimb ntre lipidele limitrofe i cele din restul stratului lipidic. Diversele tipuri de lipide au afinitate diferit fa de proteine, aadar vor exista diferene ntre compoziia general a bistratului i a pturii adiacente a proteinelor. Fluiditatea membranar depinde de compoziia acesteia. Cnd membranele plasmatice sunt alctuite din fosfolipide nesaturate sunt mult mai permeabile pentru substanele liposolubile. Acest lucru poate fi explicat prin existena legturilor duble ale catenelor alifatice din fosfolipidele nesaturate, legturi duble care mpiedic rotirea catenelor conducnd la imposibilitatea mpachetrii strnse a acestor catene. Prin urmare, interacia dintre catene este mai slab i fluiditatea membranei crete. Se poate astfel explica de ce substanele lipidice difuzeaz mai repede prin membrane mai fluide.
94

Biofizic Medical

Fluiditatea membranelor biologice depinde i de cantitatea de colesterol din membran. Structural, colesterolul este situat alturi de capetele polare determinnd extinderea catenelor alifatice n aceast zon (Fig. 99).

Fig.99 Colesterolul n bistraturile lipidice Rigiditatea inelului colesterolului limiteaz micarea natural a catenelor alifatice nvecinate, partea dinspre exterior a moleculei lipidice devenind mai puin flexibil, creterea concentraiei de colesterol din membran determinnd scderea fluiditii membranare. Acest efect al colesterolului are un anumit rol i n natur. De exemplu, unele antibiotice formatoare de canal (Nystatinul, de exemplu) opereaz numai n membrane ce conin colesterol, probabil c rigiditatea membranar indus de colesterol determin o stabilitatea mai mare a porilor. Pe de alt parte, colesterolul descrete permeabilitatea biomembranelor pentru moleculele biosolubile mici, conducnd la creterea stabilitii mecanice a bistratului lipidic. S-a constatat c membranele celulelor crora le-a fost suprimat genetic capacitatea de a sintetiza colesterol sunt foarte fragile din punct de vedere mecanic, prezena colesterolului fiind absolut necesar supravieuirii celulor respective. Funciile membranei celulare n primul rnd, membrana asigur meninerea caracteristicilor fizico-chimice diferite ale celor dou compartimente pe care le separ. Membrana reprezint o zona de comunicare controlat ntre cele dou compartimente, n ambele sensuri prin: 1. Transport de substan prin membrana intact (molecule, ioni i ap) sau prin ruperea membranei urmat de refacerea acesteia datorit plasticitii ei excepionale. 2. Traducere i transfer de informaie adus de diferii stimuli (mecanici, electrici, electromagnetici, chimici, termici etc.) prin receptorii specifici pe care membrana i conine. 3. Implicare n funciile celulare datorit enzimelor i complexelor enzimatice pe care le conine: replicarea ADN, biosinteza proteinelor, bioenergetic celular, rspuns hormonal. Transportul de substan prin membran se face prin macrotransport dac substana transportat este n stare solid sau lichid (formele de macrotransport fiind fagocitoza i pinocitoza) i prin microtransport care poate fi pasiv sau activ. Macrotransportul n procesul de fagocitoz celula nglobeaz particule de substan solid, nvluindu-le anterior cu nite prelungiri citoplasmatice numite pseudopode, prelungiri care fuzioneaz apoi n spatele acestor particule.

95

Note de curs

La protozoare (la amoebe de exemplu) fagocitoza este procesul prin care celula se hrnete. La celulele mai dezvoltate, acest mecanism servete altor scopuri i anume: macrofagele i leucocitele nghit fragmente celulare i intrui. Prin pinocitoz, lichidele, dispersate n picturi fine, i macromoleculele sunt introduse n celul sau scoase din aceasta, dup ce n prealabil au fost nvelite ntr-un bistrat lipidic devenind vezicule. Veziculele fuzioneaz cu membrane celular i pot fi transportate dintr-o parte ntr-alta a membranei. Expulzarea coninutului lichid al veziculei are loc ca efect al forelor de tensiune superficial. Formele pinocitozei sunt: - endocitoza (ptrunderea in interiorul celulei a veziculei, urmat de eliberarea coninutului acesteia). - transcitoza (vezicula traverseaz celula, fr a se sparge, Fig. 100) are loc cu precdere n celulele endoteliului capilar, facilitnd trecerea proteinelor plasmatice din snge ctre spaiul extravascular.

Fig. 100 Transcitoza - exocitoz (expulzarea de ctre celul a unei vezicule care, de exemplu, conine substane pe care celula este incapabil de a le utiliza). Fenomenele de exocitoz sunt frecvente n terminaiile nervoase i n celulele secretorii. Microtransportul Transportul pasiv Prin transport pasiv moleculele i ionii se deplaseaz n sensul gradientului electrochimic sau de presiune fr consum de energie metabolic, sistemul avnd tendina de a ajunge la echilibru termodinamic. Gradientul electrochimic este o for termodinamic productoare de flux i reprezint rezultatul unor procese desfurate cu consum energetic. n timpul transportului, moleculele i ionii utilizeaz energia micrilor de agitaie termic i cea derivat din atracia sau respingerea electrostatic. Un anumit tip de molecule aflate ntr-o soluie nmagazineaza o energie chimic sub form de potenial chimic care se poate exprima prin relaia c = 0 + RT ln 0 c unde 0 reprezint potenialul standard (potenialul chimic al unui solvit aflat ntr-o concentraie egal cu unitatea, la 25oC), R este constanta universal a gazelor, iar T este temperatura termodinamic. n cazul n care solvitul este un electrolit disociat, pe lng energia chimic a ionilor si exist i energia electric a acestora exprimat prin relaia: zFV
96

Biofizic Medical

unde este numrul de echivalent-gram de ioni de un anumit tip, z este valena ionilor, F este numrul lui Faraday (96400 C/eq), V este potenialul electric al soluiei. Prin urmare, potenialul electrochimic al unei specii ionice n soluie va fi dat de suma celor dou energii: W = ( + zFV) Considernd c de o parte i de alta a membranei celulare avem o anumit specie ionic n concentraii c1 = cin, c2 = cex, cu potenialele electrice ale soluiilor V1 = Vin, V2 = Vex obinem:

W = Win Wex = RT ln

cin + zF (Vin Vex ) cex

Deosebim dou cazuri: - W > 0 - ionii tind s prseasc celula i se ntmpl acest fenomen dac membrana este permeabil pentru acei ioni. - W < 0 - ionii tind s ptrund n celul, dac membrana este permeabil pentru acetia. Transportul pasiv al unei specii ionice nceteaz la echilibru, adic n momentul n care potenialele electrochimice ale ionului n celul i n afara ei devin egale, adic pentru W = 0:

E = Vin Vex =

RT cex ln zF cin

ecuaia Nernst Folosind relaia lui Nernst se poate calcula diferena de potenial electric de o parte i de alta a membranei a unei specii ionice n condiiile n care se cunosc concentraiile ionului, la echilibru. Exist trei tipuri de transport pasiv: difuzia simpl, difuzia facilitat i difuzia prin canale i pori. Difuzia simpl se produce prin dizolvarea speciei moleculare transportate n membran. Datorit structurii membranei de bistrat lipidic, zona intern fiind hidrofob, o particul, pentru a trece de pe o fa a membranei pe cealalt, trebuie s strbat o zon hidrofil i s ptrund n zona hidrofob. De aici rezult c mecanismele de difuzie sunt diferite pentru particulele hidrofile (ioni i molecule polare) i particulele hidrofobe (nepolare), respective particulele hidrosolubile i liposolubile. Solubilitatea unei substane este diferit n mediul apos i n membran, prin urmare, difuzia simpl depinde de coeficientul de permeabilitate al membranei (P vezi cursul de sisteme disperse) dar i de caracteristicile particulei, adic de coeficientul de partiie (). S vedem care sunt particulele care pot traversa membrana prin difuzie simpl. Un ion n mediu apos formeaz un sistem stabil cu acesta datorit interaciunii cu moleculele polare de ap, i de aceea pentru a-l transporta n mediul dielectric al bistratului lipidic este nevoie de un lucru mecanic. Prin urmare, simpla difuzie a ionilor prin bistrat este improbabil, trecerea ionilor prin membran fcndu-se prin mecanisme specializate care nltura bariera energetic. Macroionii nu pot difuza prin membrana celular datorit att sarcinii electrice ct i dimensiunii lor mari, acest lucru avnd o importan deosebit n stabilirea diferenei de potenial dintre feele membranei.

97

Note de curs

Moleculele hidrofobe pot traversa membrana, permeabilitatea membranei pentru acestea fiind cu att mai mare cu ct dimensiunea particulei este mai mic, deoarece bistratul lipidic are o structura destul de compact. n concluzie, numai moleculele mici nepolare, moleculele hidrofobe i gazele pot traversa membrana prin difuzie simpl. Difuzia facilitat Moleculele hidrofile mari, cum sunt muli factori nutritivi necesari celulei, precum i unii ioni traverseaz membrana prin difuzie facilitat, utiliznd molecule transportoare existente n membran sau introduse artificial n aceasta. Asemenea molecule transportoare au o anumit specificitate, recunoscnd specia molecular sau ionic pe care o transport. Exist transportori pentru glucoz, colin, pentru diferii ioni (ionofori).

Fig. 101 Exemplu de difuzie facilitat: difuzia facilitata a gucozei (dupa Baldwin & Lienhard, Trends Biochem. Sci. 6:208, 1981) Transportorii sunt proteine att de specializate nct pot deosebi speciile levogire de cele dextrogire. Fiind vorba despre o form de transport pasiv, sensul de aciune al transportorilor n difuzia facilitat este sensul gradientului electrochimic. Molecula transportoare, cu rol enzimatic, se poate gsi n dou stri conformaionale. n Fig. 101 este figurat transportul facilitat al moleculei de glucoz. Se poate observa cum molecula de glucoz, numit substrat n aceast situaie, se leag pe una din feele membranei ntr-un anumit loc de legare numit situs. Se produce n urma legrii o modificare conformaional i situsul de legare este expus prii opuse, simultan cu scderea afinitii transportorului pentru glucoz i eliberarea acestei molecule de partea cealalt a membranei. Prin eliberare se revine la conformaia iniial i ciclul se repet. Difuzia prin canale ionice Substanele ionizate nefiind liposolubile, difuzia lor prin membran se poate face prin structuri proteice specializate care strbat membrana pe toat grosimea ei i creeaz ci de trecere pentru ioni, formnd canale sau pori. Noiunea de por este folosit pentru structurile neselective, fcnd o discriminare doar pe baza diametrului particulei. Cu
98

Biofizic Medical

precdere, prin pori trece apa, caz n care acetia se numesc porine. Ionii au n jurul lor o zona de hidratare, din care cauz au diametrul prea mare pentru pori. Canalele ionice sunt proteine specializate care strbat membrana lipidic celular, permind astfel trecerea substanelor neliposolubile. Prin canale ionii pot s treac n ambele sensuri, dar transportul are loc n sensul gradientului electrochimic. Spre deosebire de pori, canalele ionice sunt structuri selective. Eficacitatea transportului prin canale este foarte mare, printr-un singur canal putnd trece 106-108 ioni/s. n Fig. 102 este reprezentat schematic structura unui canal ionic. Filtrul recunoate un anumit tip de ion i l las s treac n vestibulul. Senzorul primete informaia din exterior, fie din partea unei molecule receptoare, fie direct de la un semnal electric (acesta este cazul canalului din Fig. 102), i, dac informaia este corespunztoare, comand deschiderea porii permind ionului s intre sau s ias din celul, mpins de potenialul su electro-chimic. Canalul poate fi nchis sau deschis printr-o modificare conformaional a proteinei canal comandat printr-un mecanism specific electric, chimic sau prin alte mecanisme. Fiecare tip de canal poate fi blocat specific de anumite toxine: tetrodotoxina inhib funcionarea canalului de Na+ din membrana axonal, tetraetilamoniul blocheaz canalul de K+). Blocanii specifici permit studierea proprietilor canalelor sau identificarea proteinelor canal. Canalul ionic este caracterizat de un parametru electric numit conductan G, care reprezint inversul rezistenei electrice R.

G=

1 R

Unitatea de msur a conductanei este Siemens-ul (S). Din punct de vedere biologic, conductana canalului reprezint echivalentul electric al permeabilitii acesteia pentru un anumit tip de ion. Se poate aprecia conductana unei poriuni de membran ca fiind dat de produsul dintre conductana unui canal izolat i densitatea canalelor deschise, deoarece conductana canalului deschis este constant. Ordinul de mrime al conductanei unui canal ionic este pS (1 picoSiemens = 10-12 S).

Fig. 102 Reprezentarea schematic a canalului membranar Exist substane care formeaz n jurul ionului o structur hidrofob, permindu-i acestuia difuzia prin bistrat. O astfel de substan care, inclus n membrana celular, permite translocarea ionilor de pe o fa pe cealalt se numete ionofor. Ionoforii pot forma canale prin membran sau pot aciona ca nite molecule transportoare. De exemplu, valinomicina (Fig. 103) este un ionofor care poate ncorpora ionii de K+, forndu-i s prseasc prin membran celula bacterian, provocnd moartea acesteia, acionnd astfel ca un antibiotic.

99

Note de curs

Fig. 103 Valinomicina este un ionofor care face ca ionii de K+ s ias din celula bacterian, provocndu-i moartea Din studiul comparativ al transportului pasiv prin difuzie facilitat i al transportului prin canale rezult urmtoarele: - moleculele transportoare au o specificitate mai mare pentru moleculele sau ionii transportai dect canalele, moleculele transportoare putnd distinge ntre diferiii izomeri ai unei molecule - moleculele transportoare au o vitez mult mai mic de lucru dect a canalelor ionice, permind trecerea doar a 1000 de ioni pe secund, acest lucru fiind compensat de numrul lor foarte mare - transportorii pot participa i la transportul activ - canalele au o foarte mare vitez de lucru, pn la 10 milioane de ioni pe secund motiv pentru care canalele sunt cile preferate pentru transportul ionilor atunci cnd sunt necesare variaii brute ale compoziiei i concentraiei ionice (n excitaia celular, de exemplu).

Fig. 104 Comportamentul diferitelor tipuri de molecule n apropierea membranei lipidice n concluzie, membrana celular poate fi traversat prin transport pasiv de moleculele mici hidrofobe prin difuzie simpl, de ioni prin canale i difuzie facilitat i de moleculele hidrofile mari prin difuzie facilitat (Fig. 104).

100

Biofizic Medical

Fig. 105 Difuzia apei printr-un por Transportul apei care intervine esenial n toate procesele biologice se realizeaz att prin difuzie simpl i osmoz ct i prin canale (pori apoi (Fig. 105)), permeabilitatea membranei pentru ap fiind foarte mare. Mecanismele de transport al apei sunt foarte complexe i incomplet elucidate, un rol foarte important avndu-l diferena de presiune osmotic. Transportul activ Este o form de transport care necesit consum de energie metabolic (a unei reacii chimice, de exemplu). Se realizeaz n sens invers gradientului de potenial electrochimic. Se disting dou forme de transport activ: transportul activ primar i transportul activ secundar. Transportul activ primar se realizeaz folosind proteine integrale numite pompe ionice membranare. n urma transportului activ se stabilete gradientul de concentraie n sensul cruia se desfoar transportul pasiv. Pompa leag ionul pe o parte a membranei ntr-o anumit zon activ numit situs de legare i, datorit unor modificri conformaionale care intervin n urma legrii ionului, l transfer pe cealalt parte unde l elibereaz. Pompa folosete, de obicei, hidroliza ATP n ADP i P. Exemplul cel mai cunoscut este ATP-aza Na+/K+ care transloc 3 ioni de Na + din interiorul celulei, unde concentraia acestuia este mic, spre mediul extracelular i 2 ioni de K+ din exteriorul celulei n interiorul acesteia (Fig. 106).

Fig. 106 Pompa Na/K Deoarece rezultatul unui ciclu este un transfer net de sarcin pozitiv n exteriorul celulei, spunem c pompa este electrogenic. De asemenea, pompa de Na+/K+ asigur prin funcionarea ei osmolaritatea egal pe ambele fee ale membranei.

101

Note de curs

Fig.107 Schema Albert Post a etapelor funcionrii ATP-azei Na+/K+ n Fig. 107 este reprezentat succesiunea etapelor ATP-azei de Na+/K+. Aceasta este schema Albert Post i are urmtoarele etape: 1. enzima ia Na+ pe partea citoplasmatic i leag ATP aceast legare este posibil numai n prezena ionilor Mg++ 2. ATP este hidrolizat, complexul fosforilat sufer o tranziie conformaional, urmat de scderea afinitii pentru Na+ i creterea afinitii pentru K+ 3. ionii de Na+ se desprind i se leag ionii de K+ 4. legarea ionilor de K+ determin defosforilarea 5. n urma defosforilrii, proteina pierde afinitatea pentru K+, acetia desprinzndu-se 6. enzima revine la conformaia iniial i ciclul se reia. Exist i alte pompe n membrana celular, cum ar fi: - pompa de H+, K+ din mucoasa gastric (din membrana plasmatic a celulelor parietale) (Fig. 108), tot o ATP-az a crei structur este asemntoare cu cea a Na-K-ATP-azei.

Fig. 108 ATP-aza H+/K+ din mucoasa gastric Aceast pomp se gsete n veziculele intracelulare. n urma unui semnal hormonal, veziculele fuzioneaz cu membrana, n care se insereaz pompele. Se pot obine diferene de pH de 6,6, corespunztoare unui raport de concentraie a protonilor de 4.106. - pompa de Ca++ din reticulul sarcoplasmic i din membrana plasmatic
102

Biofizic Medical

Fig. 109 Mecanismul prin care se menine un pH sczut n lumenul stomacal - pompa protonic bacteriorodopsina (Fig. 110) care, sub aciunea luminii, pompeaz protoni din interiorul n exteriorul celulei.

Fig. 110 Bacteriorodopsina pompeaz protoni mpotriva gradientului lor electrochimic, sub aciunea luminii Transportul activ secundar Prin transport activ secundar speciile transportate ptrund ntr-un compartiment (extracelular sau intracelular) mpotriva gradientului lor electrochimic, asociindu-se cu molecule care se deplaseaz n sensul gradientului de concentraie. Specia transportat ct i molecula care efectueaz transport pasiv se leag de aceeai molecul transportoare.

Fig. 111 Comparaie ntre formele de transport activ: primar i secundar Transportul activ secundar utilizeaz transportorii ntlnii la difuzia facilitat, acetia putnd lega substratele transportate n aceeai stare conformaional sau n stri conformaionale diferite (Fig. 111). Dac ambele specii moleculare transportate se leag de aceeai parte a proteinei, transportul poart denumirea de simport sau co-transport, iar transportorul i poate modifica starea conformaional doar dup ce ambele substrate au
103

Note de curs

ajuns n situsurile de legare. Cazul n care speciile transportate se leag pe cele dou pri ale transportorului, care se va afla astfel n stri conformaionale diferite, se numete antiport sau contra-transport. ntlnim simport la ptrunderea glucozei n celulele mucoasei intestinale; ea se asociaz cu Na+ care intr pasiv. Ionii de Na+ sunt eliminai activ prin transport primar, prin ATP-aza de Na+/K+, iar glucoza rmne. i n acest caz, avem de-a face cu un transport electrogenic deoarece rezultatul net const n transportul unei sarcini pozitive dintr-o parte a membranei n cealalt.

Fig. 112 Simportul glucoza Na+ din celulele mucoasei intestinale Un exemplu de antiport este cel de 3Na+/Ca2+, de la nivelul muchiului cardiac, care asigur o concentraie sczut a ionilor de calciu n interiorul celulei. Energia pe care o folosete antiportul este furnizat de transportul pasiv al ionilor de sodiu din mediul extracelular ctre interiorul celulei.

Fig. 113 Antiportul de 3Na+/Ca2+ menine sczut concentraia ionilor de calciu n interiorul celulelor Transportul este electrogenic, deoarece avem sarcin net (+1) translocat prin membrana celular. Traducerea i transferul de informaie prin membrana celular Pentru a menine parametrii termodinamici n limite fiziologice i pentru a deprta sistemele biologice de strile de echilibru termodinamic este nevoie ca ntre diferitele compartimente ale unui organism viu s existe transfer de informaie. Receptorii membranari din membrana plasmatic celular sunt proteine intrinseci cu funcie enzimatic care au capacitatea de a recunoate o molecul semnal din mediul extracelular, numit mesager prim, i de a interaciona cu ea rapid i reversibil. Molecula purttoare de informaie se numete ligand specific i se poate lega de un anumit tip de
104

Biofizic Medical

receptor. n mod obinuit, moleculele semnal nu ptrund n interiorul celulei, rolul lor fiind doar de a transmite prin diferite mecanisme membranare informaia pe care o poart. Mesagerii primi pot fi molecule dar i factori fizico-chimici. Printre moleculele cu rol de mesager prim se ntlnesc: mediatorii chimici, hormonii polipeptidici, factori de cretere, antigenii, medicamentele, drogurile. n urma interaciei, celula poate sintetiza o alt molecul semnal numit mesager secund care declaneaz rspunsul celular specific. Mesagerul secund poate fi, uneori, chiar complexul receptor mesager prim. Mesageri secunzi frecvent ntlnii sunt: acidul adenozin monofosforic ciclic (c-AMP), acidul guanozin monofosforic ciclic (c-GMP), diacil glicerolul (DAG), inozitol trifosfatul (InosP3). Procesele care au loc la nivel celular sunt urmtoarele (Fig. 114): de ndat ce ligandul s-a fixat de receptor, informaia este transmis la nivelul membranei, acest lucru survenind de obicei, n urma modificrii conformaiei receptorului; n urma acestui proces se declaneaz o cascad de reacii n interiorul celulei avnd ca urmare o modificare a activitii celulare la nivelul metabolismului sau la nivelul expresiei genelor; informaia se transmite i de-a lungul membranei celulare, prin semnale electrice sub forma de poteniale locale i de tip tot sau nimic.

Fig. 114 Calea de transducie a unui semnal De exemplu, membrana plasmatic a axonilor celulelor nervoase este capabil s conduc pe distane lungi informaia sub forma unui curent electric transmembranar care se propag de la corpul celular la extremitile sinaptice.

105

Note de curs

NOIUNI DE ELECTRICITATE I MAGNETISM. APLICAII MEDICALE ALE CURENILOR ELECTRICI I CMPURILOR MAGNETICE Att n mediul celular ct i cel extracelular sunt prezente o mare varietate de atomi i molecule ionizate, n diferite concentraii ale cror valori sunt meninute constante de procesele metabolice, iar fenomene electrice se desfoar n toate celulele vii. n esuturi se pot percepe tensiuni de 0,1 mV cu o durat de 0,1 ms. Cureni electrici foarte slabi sunt generai de activitatea creierului, a retinei. Pe de alt parte, la ora actual exist numeroase aplicaii ale electricitii n diagnostic i terapie. Iat cteva motive pentru care este foarte important s nelegem fenomenele fizice legate de electricitate. Electrostatica Studiaz starea de electrizare i aciunile reciproce ale corpurilor electrizate. Sarcina electric (pozitiv i negativ) este o mrime fizic scalar, derivat, a crei unitate de msur n S.I. este 1C (Coulomb), constituid o msur a strii de electrizare a unui corp. Spunem c sarcina electric este o mrime cuantificat deoarece ea nu poate fi dect multiplu ntreg al unei sarcini elementare. Sarcina electric elementar este cea mai mic sarcin pus n eviden pn acum prin numeroase experimente; reprezint numeric sarcina electric a unui electron i este egal cu 1,6.10-19 C. Principiul conservrii sarcinii electrice Pentru un sistem izolat din punct de vedere electric suma algebric a sarcinilor electrice ale corpurilor din sistem rmne constant. Legea lui Coulomb Fora de atracie sau de respingere dintre dou corpuri punctiforme ncrcate cu r sarcinile electrice q1 i q2, situate la distana r are expresia:

r qq 1 q1q2 F = k 1 22 = r 4 r 2
unde = permitivitate electric a mediului Kvid = 9109 Nm2C-2 i este strns legat de viteza luminii n vid, Kvid = 10-7 c2. Corpurile electrizate la fel se resping, cele electrizate cu sarcini de semne contrare, se atrag. Cmpul electric Reprezint forma de existen a materiei din jurul corpurilor electrizate care se manifest prin aciuni asupra corpurilor cu sarcin electric. Putem spune c ntr-un punct exist un cmp electric dac asupra unui corp ncrcat plasat n acel punct se exercit o for de origine electric. Cmpul electrostatic Este cmpul electric constant n timp produs de un corp n repaus, avnd sarcin electric. Este caracterizat de o mrime fizic vectorial numit intensitate a cmpului r electrostatic, notat cu E care reprezint valoarea limit a forei pe unitatea de sarcin care acioneaz asupra unei sarcini de prob q aflate ntr-un punct, atunci cnd sarcina q tinde la zero.
106

Biofizic Medical

r r F E = lim q '0 q ' n realitate, cmpurile electrice sunt produse de sarcini distribuite pe suprafaa conductorilor de dimensiuni finite i nu de sarcini punctiforme. Intensitatea cmpului electrostatic creat se calculeaz imaginndu-ne c sarcina fiecrui conductor este mprit n elemente infinitezimale dq.
Linia de cmp este linia imaginar trasat astfel nct direcia ei n fiecare punct (direcia tangentei ei) s fie direcia cmpului n acel punct. O sarcin punctiform staionar produce n spaiul din jurul ei un cmp electrostatic radial, n timp ce o distribuie superficial de sarcin produce un cmp ale crui linii de cmp sunt perpendiculare pe suprafa i paralele. Sensul liniilor de cmp este dat de semnul sarcinii. Fluxul liniilor de cmp printr-o suprafa de arie S este reprezentat de produsul r r scalar dintre vectorii E i S : r r = E S = E S cos n zonele spaiale n care valoarea fluxului cmpului electric, stabilit prin unitatea de suprafa normal, este mai mare, intensitatea cmpului este mai mare. Teorema lui Gauss Cmpul electrostatic generat de un sistem de corpuri electrizate 1, 2, , N care au sarcinile q1, q2, q3,...,qN, aflate ntr-un mediu izolat (cu permitivitate absolut ) determin prin orice suprafa nchis (care cuprinde corpurile de mai sus) fluxul total: Q 1 N E = = qk

k =1

Potenialul electric ntr-un punct M Este o mrime fizic egal cu raportul dintre lucrul mecanic LMRef. efectuat de cmp la deplasarea unui corp de prob ncrcat, din acel punct n punctul de referin arbitrar ales, i sarcina q a acelui corp.

VM =

LM Re f . q

Se poate demonstra c lucrul mecanic efectuat de cmpul electrostatic pentru a transporta o sarcin de prob ntre dou puncte din cmp nu depinde de drumul ales, prin urmare, cmpul electrostatic este un cmp conservativ de fore (ca i cmpul gravitaional, de exemplu). Unitatea de msur pentru potenialul electric este 1V (Volt-ul). Diferena de potenial electric dintre dou puncte M i N sau tensiunea electric U dintre ele, n cmpul unei sarcini punctiforme Q, este o mrime fizic egal cu ctul dintre lucrul mecanic efectuat de cmp la deplasarea unui corp de prob ntre cele dou puncte i sarcina electric a acelui corp.

VM V N =

LM N Q 1 1 =U = q 4 rM rN

107

Note de curs

Potenialul de difuzie S considerm dou compartimente n care se gsete KCl n concentraii diferite (c1 > c2) ntre care se poate msura diferena de potenial electric (Fig.116). Aceste compartimente sunt separate printr-o membran inegal permeabil (coeficienii de permeabilitate pentru K+ i Cl- sunt diferii, considerm ca permeabilitatea membranei pentru K este mai mare dect pentru Cl, adic PK+ >PCl-). Deoarece membrana este permeabil i concentraia iniial a ionilor n compartimentul al doilea este nul, conform legilor difuziei, dinspre compartimentul 1, ionii de K+ i Cl- vor migra ctre compartimentul 2 cu viteze diferite (mai repede ionii de K+).

Fig. 116 Exemplificarea potenialului de difuzie Ca urmare, ionii de K+ se vor acumula mai rapid n compartimentul 2, ncrcndu-l pozitiv i producnd astfel o diferen de potenial ntre cele dou compartimente. Aceast diferen de potenial aprut ntre cele dou compartimente se numete potenial de difuzie. Deoarece compartimentul 2 este ncrcat pozitiv, ionii de Cl- vor fi accelerai. Se va ajunge la o egalizare a concentraiilor din cele dou compartimente, potenialul de difuzie va scdea n timp. Se ajunge n final la o stare staionar. Expresia potenialului de difuzie este dat de o lege similar ecuaiei Planck-Henderson (mobilitile sunt nlocuite de permeabiliti):
E = E1 E 2 = PCl PK RT c1 ln PCl + PK zF c 2

n cazul n care PK+ = PCl- potenialul de difuzie este nul (E = 0). Dac cele dou compartimentele sunt separate printr-o membran selectiv permeabil, de exemplu impermeabil pentru Cl- (PCl- = 0) nu pot s difuzeze dect ionii de K. Relaia lui Nernst stabilete diferena de potenial dintre cele dou compartimente la echilibru i are expresia: RT K + 1 ln + E = zF K 2

[ ] [ ]

Prin urmare, compartimentul 2 devine ncrcat pozitiv fa de primul i diferena de potenial rmne constant imediat ce ionii de K+ i-au atins echilibrul. Datorit valorilor diferite ale concentraiilor din cele dou compartimente, apare un un dezechilibru osmotic, urmat de difuzia apei ctre compartimentul 1. Conductori, izolatori, dielectrici Un conductor este un material prin care sarcinile electrice se pot deplasa cu uurin. Valena pozitiv a metalelor ca i faptul c ele formeaz n soluii ioni pozitivi, arat c atomii unui metal cedeaz mai uor unul sau mai muli dintre electronii lor de valen. ntr-un izolator exist foarte puini sau deloc electroni liberi. Un mediu dielectric
108

Biofizic Medical

este un mediu n care nu apare curent electric n prezena unui cmp electric extern, dar care i modific starea sub aciunea cmpurilor electrice i la rndul lui modific interaciunea dintre corpurile cu sarcin electric. Plasat n cmp electric, dielectricul micoreaz intensitatea acestuia. Moleculele unui dielectric pot fi polare i nepolare. O molecul nepolar este o molecul n care centrul de greutate al nucleelor pozitive coincide n mod normal cu cel al electronilor, iar o molecul polar este o molecul n care centrele nu coincid.

Fig. 117 a) molecule nepolare n cmp electric b) molecule polare n cmp electric Sub influena unui cmp electric sarcinile unei molecule nepolare (Fig. 117) se polarizeaz i devin dipoli indui. Cnd o molecul nepolar se polarizeaz, asupra sarcinilor ncep s acioneze fore de revenire care tind s le aduc n poziia iniial. Sub influena unui cmp extern dat, sarcinile se ndeprteaz una de alta pn cnd fora de revenire devine egal i opus forei exercitate de cmp asupra sarcinilor. Forele de revenire variaz n mrime de la un tip la altul de molecule, ceea ce corespunde unor diferene n deplasrile produse de un cmp dat. Forele care acioneaz asupra unui dipol permanent aflat n cmp electric dau natere unui cuplu al crui efect este orientarea dipolului n aceeai direcie cu cmpul.

Fig. 118 Polarizarea unui dielectric ntr-un cmp electric d natere pe feele lui unor straturi subiri de sarcini legate. Capacitatea electric Experiena arat c diferii conductori ncrcai cu aceeai sarcin electric au poteniale diferite. Diferena este dat de o proprietate fizic a acestora numit capacitate
109

Note de curs

electric. Capacitatea electric a unui conductor depinde i de poziia corpurilor din jur, de aceea, n continuare, vom lua n considerare doar corpuri izolate. Dac sarcina de pe corp este Q, iar potenialul acestuia V, raportul dintre cele dou: Q =C V este constant i egal cu valoarea capacitii C. Unitatea de msur a capacitii electrice este Farad-ul (F). 1C 1F = 1V Dou plci conductoare paralele ntre care se afl un mediu dielectric formeaz un condensator plan. Capacitatea condensatorul plan este: S C = d unde - reprezint permeabilitatea electric a mediului dintre armturi - S suprafaa comun a armturilor - d distana dintre armturi La nivel membranar, capacitatea electric reflect proprietatea membranei de a menine o ncrcare electric de semne contrare pe cele dou fee ale ei. Gruparea condensatoarelor A determina capacitatea echivalent a dou sau mai multor condensatoare conectate ntr-un circuit nseamn a determina capacitatea unui condensator care, plasat n circuit n locul condensatoarelor, nu modific valorile mrimilor electrice din circuit (cderi de tensiune, distribuia sarcinii). Gruparea serie a condensatoarelor Dou condensatoare sunt conectate n serie dac au o born comun (B din Fig. 119).

Fig. 119 Condensatoare n serie Grupate astfel, pe armturile celor dou condensatoare, sarcina este aceeai Q, iar suma cderilor de tensiune UAB i UBC este egal cu tensiunea de la bornele circuitului:
U = U AB + U BC = Q Q Q + = C1 C 2 C echiv

Se obine expresia capacitii echivalente a celor dou condensatoare conectate serie: 1 1 1 = + C echiv. C1 C 2 CC Cechiv. = 1 2 C1 + C 2 Generaliznd pentru n condensatoare montate n serie, se obine:
110

Biofizic Medical

Cechiv.s

=
i =1

1 Ci

Gruparea paralel a condensatoarelor Dou condensatoare sunt conectate n paralel dac au ambele borne comune (bornele A i B n Fig. 120).

Fig. 120 Condensatoare legate n paralel n acest caz, cderea de tensiune pe cele dou condensatoare este aceeai, prin urmare putem scrie:

U AB = U 1 = U 2
Dar sarcina Q de la borna A se va divide n Q1 i Q2 pe armturile celor dou condensatoare: Q = Cechiv. p U = Q1 + Q2 = C1 U + C 2 U
C echiv. p = C1 + C 2

i generaliznd pentru n condensatoare montate n paralel, obinem pentru capacitatea echivalent expresia:
C echiv. p = C i
i =1 n

Electrocinetica. Curentul electric staionar Micarea dirijat a sarcinilor electrice reprezint curent electric. Intensitatea curentului electric I care strbate o suprafa este definit prin sarcina total care trece prin acea suprafa n unitatea de timp: dQ I= dt Se msoar n Amperi (1 A). Surs de energie Este un acumulator sau un generator care poate furniza energie unui circuit electric. Pentru meninerea constant a intensitii curentului electric ntr-un segment de circuit trebuie ca tensiunea pe acel circuit s rmn aceeai tot timpul. Aceast condiie se realizeaz cnd circuitul dispune de o surs de energie care s efectueze lucrul mecanic necesar deplasrii cu vitez constant a purttorilor de sarcin electric. Aceast surs de energie este generatorul electric. Tensiunea electromotoare este numeric egal cu lucrul mecanic efectuat pentru a transporta unitatea de sarcin pozitiv de-a lungul ntregului circuit.

111

Note de curs

Rezistena electric Rezistena electric R a unui element de circuit msoar opunerea elementului la trecerea curentului electric i stabilete proporionalitatea dintre cderea de tensiune la bornele acelui element de circuit U i valoarea intensitii curentului electric care-l strbate I (U = RI). Ea este o mrime fizic ce caracterizeaz elementul de circuit i depinde de caracteristicile geometrice ale acestuia precum i de materialul din care acesta este fcut, astfel:

R=

l S

unde reprezint rezistivitatea electric a materialului, l este lungimea rezistenei, iar S reprezint aria seciunii transversale a rezistenei. Unitatea de msur a rezistenei electrice este Ohm-ul (1 - litera greceasc omega) Rezistivitatea tuturor conductoarelor metalice crete cu creterea temperaturii, pentru un interval de temperaturi nu foarte larg, variind astfel: = 0 [1 + (T T0 )] unde 0 este rezistivitatea la temperatura de referin T0, iar la temperatura T. Coeficientul se numete coeficient termic al rezistivitii, avnd ca unitate de msur grd-1. Gruparea serie a rezistorilor

Fig. 121 Rezistori n serie La gruparea n serie a doi rezistori avnd rezistenele ohmice R1 i R2, conform Fig. 121, intensitatea I a curentului care i strbate este aceeai, iar suma cderilor de tensiune UAB i UBC este egal cu tensiunea la bornele circuitului U: U = U AB + U BC = U 1 + U 2 = R1 I + R2 I = I ( R1 + R2 ) = Rechiv.s I

Rechiv.s = R1 + R2 Generaliznd relaia de mai sus pentru n rezistori conectai n serie, se obine urmtoarea expresie pentru rezistena echivalent a gruprii serie Rechiv.s:

Rechiv.s = Ri
i =1

Gruparea paralel a rezistorilor Dac doi rezistori sunt conectai n paralel (Fig. 122) atunci au ambele borne comune, iar intensitatea curentului din circuit I se va divide n nodul A (din Fig. 122) n I1 i I2. Cderea de tensiune la bornele celor doi rezistori fiind aceeai, putem scrie:

I = I1 + I 2 =

1 U AB U AB U AB 1 + = U AB + R R = R R1 R2 2 echiv. p 1

112

Biofizic Medical

Fig. 122 Gruparea paralel a rezistorilor Rezult c pentru cei doi rezistori, rezistena echivalent este dat de: 1 1 1 R R = + adic: Rechiv. p = 1 2 Rechiv. p R1 R2 R1 + R2 Pentru n rezistori conectai n paralel, rezistena echivalent Rechiv.p se poate calcula din formula:

1 Rechiv. p

=
i =1

1 Ri

Legea lui Ohm pentru o poriune de circuit Arat c raportul dintre cderea de tensiune U la capetele unui conductor strbtut de curentul de intensitate I are o valoare constant, egal cu rezistena R a conductorului

U =R I
Legea lui Ohm pentru un circuit simplu Intensitatea curentului printr-un circuit este direct proporional cu tensiunea electromotoare din circuit i invers proporional cu rezistena total a circuitului. E I= R+r Legile lui Kirchhoff 1. Suma algebric a intensitilor curenilor electrici care se ntlnesc ntr-un nod de reea este egal cu zero. 2. De-a lungul conturului unui ochi de reea suma algebric a tensiunilor electromotoare este egal cu suma algebric a cderilor de tensiune pe elementele acelui ochi de reea. Gruparea serie i paralel a surselor n cazul n care se conecteaz n serie dou sau mai multe surse de curent continuu (Fig. 123) se poate demonstra c tensiunea electromotoare echivalent are expresia: Eech. serie = E1 E2 .. EN n timp ce, rezistena ohmic a gruprii de surse este chiar rezistena echivalent a n rezistori grupai n serie: r ech. serie = r1 + r2 + + rN
113

Note de curs

Fig. 123 Gruparea serie a surselor de t.e.m.

Fig. 124 Gruparea paralel a surselor de t.e.m. Dac gruparea surselor se face n paralel (Fig. 124), expresiile de calcul ale tensiunii electromotoare echivalente, respectiv rezistenei echivalente a gruprii rezultante sunt: E ech. paralel E1 E 2 E = ... N rech. paralel r1 r2 rN 1 1 1 1 = + + ... + rech. paralel r1 r2 rN Instrumente de msur a curentului electric i a potenialului Instrumentul care se utilizeaz pentru a determina valoarea intensitii curentului electric dintr-o ramur de circuit se numete ampermetru i se monteaz n serie cu restul elementelor coninute n acea ramur de circuit. Valoarea msurat a intensitii curentului electric este diferit de valoarea intensitii curentului electric prin circuitul respectiv n lipsa ampermetrului, deoarece i acesta are o rezistena intern, care trebuie s fie foarte mic. Un ampermetru ideal are rezistena ohmic zero. n cazul n care ampermetrul aflat la dispoziie poate msura cureni maximi mai mici dect cei presupui n circuit, scala de msur a acestuia poate fi lrgit prin montarea unei rezistene suplimentare, n paralel cu ampermetrul, numit unt. untul preia o parte din curentul din circuit, protejnd astfel, ampermetrul.

114

Biofizic Medical

Fig. 125 Montarea untului ampermetrului Valoarea rezistenei untului pentru ca ampermetrul s msoare o intensitate de n ori mai mare dect cea permis este R Rsunt = A n 1 ampermetru Voltmetrul servete la msurarea cderii de tensiune pe un element de circuit. Se monteaz n paralel cu elementul la bornele cruia dorim s msurm cderea de tensiune. Valoarea msurat a cderii de tensiune la bornele elementului de circuit este diferit de cea calculat teoretic, n absena voltmetrului, deoarece i prin acesta trece o parte din curentul din circuit, motiv pentru care rezistena voltmetrului trebuie s fie foarte mare, practic infinit. n cazul n care scara de msur a voltmetrului nu permite msurarea unei tensiuni foarte mari se monteaz o rezisten adiional n serie cu voltmetrul (se preia astfel o parte din cderea de tensiune de pe voltmetru, protejndu-l).

Fig. 126 Montarea rezistenei adiionale a voltmetrului Valoarea rezistenei adiionale pentru ca voltmetrul s msoare o cdere de tensiune de n ori mai mare dect cea permis este Raditionala = RV (n 1) Modelul electric al membranei celulare Din punct de vedere electric, o celul mpreun cu mediul ei extracelular pot fi comparate cu o reea electric alctuit din condensatoare, rezistoare i surse de tensiune electromotoare (Fig. 127). - lichidul intracelular i cel extracelular pot fi considerate bornele unei surse de tensiune electromotoare format din trei baterii de c.c. grupate n paralel (baterii de Na, K i Cl ale cror t.e.m. se calculeaz cu relaia lui Nernst);
115

Note de curs

- lichidul extracelular i intracelular pot fi considerate armturile unui condensator al crui dielectric este membrana celular; - canalele de Na+, K+ i Cl- reprezint rezistori electrici care se opun trecerii ionilor corespunztori; - lichidul intracelular i extracelular pot fi considerate rezistene electrice ale cror valori depind de rezistivitatea electric a lichidelor precum i de lungimea i aria transversal a seciunilor reprezentate de celul i de spaiile extracelulare. Aceste elemente de circuit au valori variabile n timp.

Fig. 127 Modelul electric al membranei celulare Cmpul magnetic al curenilor electrici n spaiul din jurul sarcinilor electrice apare un cmp electrostatic ce se manifest prin aciuni asupra altor corpuri cu sarcin electric.

Fig.128 Regula burghiului (a minii drepte) folosit pentru stabilirea sensului liniilor de cmp magnetic ce se stabilete n jurul unui conductor strbtut de curent electric r continuu; inducia magnetic B are acelai sens cu liniile de cmp i este tangent la acestea n mod similar, n spaiul din jurul unui conductor strbtut de curent electric apare un aa numit cmp magnetic care constituie, de asemenea, o form de existen a materiei. Cmpul magnetic este continuu, vectorial, mrimea i direcia sa n orice punct r fiind date de inducia magnetic B (unitate de msur 1 Tesla, 1 T) (Fig. 128).

116

Biofizic Medical

Cmpul magnetic poate fi produs att de substanele magnetizate ct i de curenii din conductoare (electromagnei). Orice magnet are doi poli (Fig. 129), unul negativ i cellalt pozitiv, un singur pol magnetic izolat nefiind niciodat descoperit.

Fig. 129 Polii unui magnet: convenional liniile de cmp magnetic ies din polul nord i intr n polul sud Asupra unui conductor strbtut de curent continuu, aflat ntr-un cmp magnetic extern se exercit o for a crei mrime depinde de sensul curentului electric I, de sensul r i orientarea cmpului magnetic B , precum i de lungimea conductorului l. Aceast for, numit for electromagnetic (F din Fig. 130), este rezultatul interaciunii dintre curentul electric i cmpul magnetic i are expresia:

r r r F = I l B

r Fig. 130 Sensul forei electromagnetice F ce se exercit asupra unui conductor strbtut r de curent electric aflat n cmp magnetic exterior de inducie B
Fluxul magnetic (Fig. 131) care traverseaz o suprafa S intersectat de linii de cmp magnetic se definete ca fiind produsul scalar dintre inducia magnetic i suprafaa normal. r r = B S = B S cos Unitatea de msur pentru fluxul magnetic este Weber-ul.

117

Note de curs

Fig. 131 Suprafa strbtut de linii de cmp magnetic ntr-un cadru metalic strbtut de flux magnetic variabil n timp, apar un curent electric indus i respectiv, o tensiune electromotoare (t.e.m.) indus a crei expresie este dat de legea lui Faraday: d e= dt Conform acestei expresii tensiunea electromotoare indus n circuit este numeric egal cu viteza de variaie a fluxului magnetic prin acesta. Fenomenul de apariie a t.e.m. induse se numete inducie electromagnetic. Curentul indus are un astfel de sens nct cmpul su magnetic s se opun variaiei cmpului magnetic inductor (legea lui Lenz). Curentul alternativ Dac ntre polii unui magnet permanent un cadru metalic se rotete cu vitez unghiular constant , acul ampermetrului montat pe una dintre laturile cadrului va devia (Fig. 132). Intensitatea curentului citit pe cadranul ampermetrului nu va fi constant i periodic i va schimba sensul (Fig. 133). Curentul aprut n urma induciei magnetice, n condiiile descrise se numete curent alternativ sinusoidal, iar legea de variaie n timp a intensitii curentului electric este: i(t) = I0sint unde i(t) este valoarea instantanee, I0 este amplitudinea curentului electric, este pulsaia. ntre pulsaie si frecvena curentului electric alternativ exist relaia: = 2

Fig. 132 Producerea curentului alternativ sinusoidal n cadrul metalic ce se rotete cu o vitez unghiular constant ntr-un cmp magnetic constant (polii magnetului)

118

Biofizic Medical

Fig. 133 Repezentarea grafic a curentului continuu i a curentului alternativ cu frecvene diferite Electrogeneza biologic O serie de organisme i organe sunt capabile s produc electricitate, evident nu n sensul unei cantiti de curent electric ce poate fi folosit n practic. Exist o serie de plante i de animale care au organe specializate, ce produc tensiuni electrice (de exemplu, petii electrici din familia silurienilor, care provoac la atingere zguduiri violente). n organismul uman, modificrile care au loc ntr-un esut pot da natere unui curent electric. Dintre aceste modificri cea mai frecvent este contracia muscular, curenii produi fiind de repaus i de aciune. Curenii de repaus se pot pune n eviden prin aplicarea unuia dintre cei doi electrozi nepolarizabili conectai ntr-un circuit electric ce conine i un galvanometru sensibil, pe o leziune a muchiului. Se constat o deviaie a acului galvanometrului, electrodul aezat pe leziune comportndu-se ca un pol negativ. Diferena maxim de potenial se obine dac aezm un electrod la mijlocul suprafeei laterale a muchiului, iar cellalt, n mijlocul leziunii. Curenii de aciune apar la excitarea electric, mecanic, chimic sau fiziologic a muchiului sau a nervului. i n cazul acesta, polul negativ este electrodul cel mai apropiat de regiunea n care se produce excitaia. Prin suprapunerea polului pozitiv al curentului de repaus peste polul negativ al curentului de aciune, se constat o slbire a curentului de repaus msurat iniial (variaia negativ a curentului de repaus). Fenomene electrice ntlnim peste tot n organism: n scoara cerebral a crei activitate electric se materializeaz prin nregistrarea electroencefalogramei. n diferite sectoare ale sistemului nervos central se produc oscilaii electrice spontane, cu frecvene i amplitudini diferite, nedeterminate de aciunea unor excitaii exterioare. Activitatea electric a scoarei variaz cu diferitele stri funcionale (apariia excitaiei n scoar se observ la om n accesele epileptice).
119

Note de curs

Aplicaii medicale ale curenilor electrici n aplicaiile medicale, electricitatea se utilizeaz sub urmtoarele forme : - electricitate static sau franklinizare - curent electric continuu sau galvanizare - curent electric alternativ sau faradizare - curent electric n impulsuri Electricitatea static Masina electrostatic medical Wimshurst (Fig. 134) este un generator electrostatic clasic capabil s produc poteniale electrostatice nalte. Este format din dou discuri acrilice mari pe care sunt lipite foie de staniol, care se rotesc n sens opus n plan vertical i un spaiu pentru scnteie ntre dou sfere metalice. n timpul rotaiei, discurile sunt frecate de dou perechi de periue aezate diametral, fiecare pereche fiind situat fa de orizontal la un unghi de 45 de grade. Cei doi conductori n forma de U aezai de o parte i de alta pe diametrul orizontal sunt prevzui cu vrfuri ascuite i fiecare este legat la armtura interioar a unui conductor cilindric (numit element Leyden), i la un pol al mainii.

Fig. 134 Maina electrostatic Wimshurst Sarcinile electrice produse sunt sunt culese de vrfurile conductorilor i acumulate de elementele Leyden care se ncarc cu sarcini electrice de semn contrar, maina avnd, n consecin, un pol pozitiv i unul negativ ntre care se creeaz o diferen de cteva zeci de mii de voli. Scnteia produs prin frecare ntre cele dou capete polare ale mainii ajunge la o lungime de pn la 15 cm, n funcie de tensiunea maxim care se stabilete ntre poli n timpul funcionrii mainii electrostatice. Maina medical electrostatic i pstreaz o polaritate constant n timpul funcionrii. n funcie de efectele urmrite, electricitatea static (franklinizarea) se poate aplica astfel: 1. Baia electrostatic este indicat n hipotensiune arterial, insomnie, astenie, fiind un tonic general i un sedativ al sistemului nervos; intensific arderile n organism, deoarece produce o ozonizare a aerului (ozonul este un excitant energetic al hematozei). O edin dureaz aproximativ 15 minute, timp n care pacientul este plasat pe un scaun aflat pe o baz izolat din punct de vedere electric. Pacientul este conectat la polul negativ al mainii, cellalt pol al acesteia fiind mpmntat, iar potenialul la care este adus pacientul este de cteva mii de voli. Electricitatea cu care se ncarc pacientul se pierde continuu prin asperitile corpului. 2. Efluviile electrice sunt sedative si calmante i se ntrebuineaz n tratarea plgilor atone, n diferite aciuni cutanate (cum ar fi eczeme, prurit). n cazul acestei edinte, pacientul nu este conectat direct la un pol al mainii, ci n dreptul regiunii ce urmeaz a fi
120

Biofizic Medical

tratate se plaseaz la o distan determinat un electrod de metal cu vrf ascuit mpmntat. 3. Duul electric este similar, att din punct de vederea al aplicaiei, ct i din cel al efectelor cu efluviile electrice, doar ca n acest caz, n locul electrodului se aeaz un disc de lemn cu mai multe vrfuri de la care pornesc sarcini electrice. 4. Scnteia direct se poate aplica apropiind de pacient electrodul legat de un pol al mainii electrostatice, pacientul fiind plasat n faa acesteia la fel ca n cazul bii electrostatice; ntre pacient i electrod se produc scntei cu aciune local. Supunnd zona de tratat unei serii de scntei apare la nceput o vasoconstricie periferic, pielea devine palid, urmat de vasodilataie. Pe aceast cale se distrug epitelioame cutanate, negi. Curenii Morton reprezint un alt mod de administrare a electricitii statice i produc contracii musculare puternice i nedureroase, folosite mai ales pentru a aciona asupra muchilor netezi ai organelor interne (n cazuri de atonie asupra muchilor stomacului, de exemplu). Curentul continuu de joas tensiune, generat de baterii, acumulatori sau redresori de curent alternativ, se aplic esuturilor prin intermediul a doi electrozi, numii anod i catod. Utiliznd electrozi inatacabili, insolubili, de platina, nichel sau crbune, se fac aplicaii ale electrolizei medicale. Electroliza biologic se poate face prin aplicaie monopolar, cnd se folosesc efectele electrolitice produse la un singur electrod, numit electrod activ, sau prin aplicaie bipolar, ambii electrozi fiind activi. Electroliza medical se face monopolar sau bipolar, curentul circulnd prin esuturi nu numai de-a lungul liniei drepte ce unete electrozii, ci i prin regiuni aflate n afara acestei linii, dispersndu-se sub form de cureni din ce n ce mai slabi. Curenii se numesc electrotonici: anelectrotonici (micoreaz excitabilitatea esuturilor) n vecintatea anodului, catelectrotonici (mresc excitabilitatea esuturilor), n vecintatea catodului. La intensiti mari ale curentului electric continuu, pot aprea escare negative cenuii n zona de contact a tegumentului cu catodul i escare pozitive brune la anod, n urma electrolizei ce are loc n esuturi care sunt mici electrolizori n care se produce electroliza soluiilor biologice. Efectele sunt folosite pentru distrugerea pe cale galvanocaustic a unor tumori. Se folosesc drept electrod negativ ace de aur, de platin sau de oel, intensitatea curentului ajungnd pn la 15 20 mA, durata de aplicaie variind ntre 30 120 s. Folosind electrodul activ drept anod, se pot trata hemoragiile uterine care sunt oprite de aciunea hemostatic a reaciei secundare produs la polul pozitiv. n afara fenomenelor care apar la electrozi n timpul electrolizei biologice, curentul electric aplicat un timp ndelungat poate s provoace i electroliza interstiial manifestat prin leziuni vizibile la microscop. Tot n cadrul electrolizei medicale, se pot folosi electrozi solubili care sunt atacai de substanele depuse la electrozi, substanele noi obinute avnd proprieti terapeutice speciale. Folosind un anod de fier, ionul clor eliberat sub form de atom la anod, formeaz clorura feric ce are aciune coagulant. O alt aplicaie a electrolizei medicale cu electrozi solubili const n tratarea anevrismelor cu anozi solubili de fier care provoac formarea unui cheag ce umple complet sacul anevrismal. Curentul continuu de mic intensitate se folosete n cadrul ionoterapiei pentru introducerea n organism, prin piele i prin mucoase, a unor ioni medicamentoi (iod, salicilat etc.), fenomen numit ionoforez. Astfel introdui, ionii se elimin mai lent dect n cazul injeciilor subcutanate, prelungind timpul de exercitare a efectelor lor terapeutice. Pentru introducerea ionilor metalici, se mbib cu soluia medicamentoas un electrod activ care se leag la polul pozitiv al generatorului de curent continuu. Intensitatea
121

Note de curs

curentului va fi de 20 100 mA, durata aplicaiei fiind de 30 pn la 60 de minute. Deoarece ionii medicamentoi introdui prin piele acioneaz local, ionoterapia electric se folosete cu precdere n afeciunile dermatologice. Ionoterapia electric poate fi folosit i n cazul tratamentului reumatismului articular subacut, prin introducerea prin ionoforez a ionului salicilat, precum i pentru ameliorarea artritelor cronice prin ionoterapia cu iod i calciu. n stomatologie, ionoforeza cu novocain produce o bun anestezie local. Curentul continuu se folosete i la defibrilarea cardiac, metod folosit n cazul stopului cardiac. Curenii alternativi de joas frecven (50-100 Hz) produc modificri circulatorii locale, senzaii dureroase, contracii musculare precum i o nclzire local. Curentul alternativ de joas frecven poate produce moartea prin electrocutare la o intensitate de patru ori mai mic dect cea la care produce electrocutarea mortal un curent continuu, n condiii identice. Curenii alternativi de frecvene nalte nu produc electrocutare. Curenii alternativi de nalt frecven nu produc excitaii. Efectele lor principale sunt cele termice iar aplicarea lor n medicin poart numele de diatermie. Efectul curenilor de nalt frecven poate fi folosit i pentru distrugerea unor tumori prin diatermocoagulare, ca i pentru tierea esuturilor (bisturiu electric), precum i n electrofiziologia intervenional. Curentul electric sub form de impulsuri poate produce efecte biologice diverse n funcie de forma, durata, amplitudinea i frecvena impulsurilor: stimulare, contracii musculare, durere, sedare, anestezie, somn. Impulsurile de durat mare se supun legilor lui Pflger conform crora, la nchiderea circuitului electric, excitarea nervilor i a muchilor se produce la catod iar la deschiderea circuitului, excitarea se produce la anod. Aplicate la nivelul capului, impulsurile pot produce sedare, electrosomn, electronarcoz sau electrooc (n aceleai scopuri se folosesc i curenii alternativi de joas frecven). Electroterapia const n folosirea impulsurilor electrice pentru nlturarea simptomelor de durere, slbiciune a muchilor i depresiei, reprezentnd una dintre cele mai sigure i eficace metode de tratament deoarece are foarte puine efecte secundare. Curentul, pulsatoriu de cele mai multe ori, administrat pacientului provoac contracia urmat de relaxarea muchiului, stimulrile repetitive ducnd la ntrirea acestuia i ndeprtarea durerii. Stimularea electroterapeutica a muchilor reprezint un tratament efectiv al durerilor cronice i al oboselii asociate cu fibromialgia (sindrom de durere cronica ce este caracterizat prin durere difuz, sensibilitate excesiv n muchi i esutul moale, puncte sensibile localizate i tulburri de somn, slbiciune). Procedeele electroterapeutice sunt ituate de numeroase i variate, un loc deosebit n rndul lor fiind ocupat de stimulatoarele electrice, cu ntrebuinri multiple (defibrilatoare, stimulatoare cardiace, aparate de electroanestezie, aparate pentru electroocuri etc.). Electroterapia poate fi comparat cu un masaj al esuturilor, efectele ei sunt cumulative. Utilizarea magneilor n practica medical Magneii i electromagneii sunt larg ntrebuinai n aparatele de laborator, n electrofiziologie i terapeutic. n medicin, sunt utilizai pentru localizarea i extragerea corpurilor feromagnetice intrate accidental n organism (de exemplu, n ochi). Sideroscopul este un aparat format dintr-un sistem de ace magnetice, coaxiale, aezate rigid unul fa de altul, cu polii de semn contrar fa n fa pentru a nu se simi influena cmpului magnetic terestru (sistem astatic). Aparatul este adus cu acul inferior al sistemului astatic n apropierea ochiului n care se presupune c au intrat achiile de fier, acul magnetic fiind deviat de particula de fier, cu att mai mult cu ct este mai aproape de acesta. Astfel se poziioneaz corpul strin. Pentru extragerea corpurilor feromagnetice
122

Biofizic Medical

strine intrate n diferite regiuni ale corpului se construiesc aparate magnetice mai puternice. De exemplu, dac particula de fier a intrat n camera anterioar a ochiului, extracia se poate face cu un electromagnet format dintr-un miez cilindric de fier moale situat n interiorul conductorului prin care circul curentul electric. La un capt electromagnetul are form ascuit, acest capt apropiindu-se de ochi n dreptul deschiderii produse de corpul strin, particula strin fiind atras de magnet i extras din ochi. Electromagnetoterapia se utilizeaz n tratamentul diferitelor forme de durere fizic i emoional. Cu ajutorul unor dispozitive electromagnetice se poate interveni pentru diminuarea durerii, pentru grbirea vindecrii fracturilor, pentru eliberarea stresului. Datorit faptului c membrana celular este strbtut de cureni ionici, apar cmpuri magnetice n jurul acestora, care, nsumate, formeaz un cmp magnetic, de joas intensitate, produs de organism. Bioelectricitatea Bioelectricitatea se refer la cmpurile electrice i magnetice produse de materia vie. Unele animale, cum ar fi rechinii, pisicile de mare posed senzori bioelectrici, altele cum ar fi psrile migratoare se crede ca se orienteaz, cel puin parial, n funcie de cmpul magnetic al Pmntului. Potenialul de repaus (PR) ntre faa extern i cea intern a membranei celulare, chiar i n repaus, exist o diferen de potenial electric numit potenial de repaus (PR), cu valori de ordinul milivolilor (ntre 50 mV i 100 mV). Pentru a nelege cauzele apariiei acestei diferene de potenial, vom porni de la simularea cazului real cu ajutorul unui sistem format din dou compartimente separate de o membran selectiv permeabil (Fig. 135). n primul compartiment se afl o soluie de KCl i anioni nedifuzibili prin membran (A-Z), iar n cel de-al doilea ap distilat. Membrana selectiv permeabil care desparte cele dou compartimente nu permite trecerea anionilor proteici A-Z. Conform legilor difuziei att ionii de Cl- ct i cei de K+ vor trece prin membran ctre compartimentul n care se afl doar apa distilat, la echilibru avem ecuaia Donnan:

E =

RT K+ ln + F K

[ ] [ ]

1 2

RT Cl ln F Cl

[ ] [ ]

1 2

unde [X+,-]1,2 reprezint concentraia ionului oarecare X n compartimentele 1 sau 2, R este constanta universal a gazelor, T temperatura absolut la care se desfoar procesul, iar F este numrul lui Faraday. Din ecuaia echilibrului Donnan rezult c:

[K ] = [Cl ] [K ] [Cl ]
+ +
1

Deoarece anionii nu pot traversa membrana, presiunile osmotice pe cele dou fee ale membranei vor fi diferite, presiunea osmotic fiind mai mare n compartimentul 1, unde se afl ionii nedifuzibili.

123

Note de curs

Fig. 135 Exemplificarea echilibrului Donnan Dac cele dou compartimente conin un ion nedifuzibil prin membran, n concentraii diferite, cum ar fi Na+, obinem o situaie similar distribuiei ionilor n cazul fibrei musculare (Fig. 136). Observm c n acest caz, numrul de particule osmotic active este acelai de ambele pri ale membranei, prin urmare presiunea osmotic de cele dou fee ale acesteia este aceeai.

Fig. 136 Distribuia ionilor n interiorul i exteriorul fibrei musculare

[K ] [K ]
+ +

in

ex

[Cl ] [Cl ]

ex in

= 30 > 1 ,

[Na ] [Na ]
+ +

ex in

= 14,5

Diferena de potenial E pe cele dou fee ale membranei este dat de relaia lui Nernst pentru K+: K+ RT E = ln + ex F K in

[ ] [ ]

Acesta poate fi considerat potenialul de repaus PR, pornind de la ipoteza c ionii de Na+ rmn predominant n spaiul extracelular fa de citoplasm, dei att gradientul de concentraie ct i cel de potenial tind s-l introduc n celul. n realitate, Na+ intr pasiv n celul, concentraia sa rmnnd constant datorit interveniei fenomenelor de transport activ i anume scoaterea acestuia din celul cu ajutorul pompelor ionice. n repaus celula se afl n stare staionar, fluxurile pasive sunt echilibrate de cele active. Potenialul de repaus al celulei se poate calcula teoretic folosind relaia GoldmanHodgkin-Katz:

124

Biofizic Medical

P C+ RT Ci i E = ln i F PCi Ci+
i

[ ] + P [A ] [ ] + P [A ]
ex Ai i in Ai i

i in

i ex

Unde C+, A- reprezint abrevieri pentru speciile de cationi i anioni difuzibili, iar P reprezint permeabilitatea membranei pentru specia respectiv. Pentru valorile din Fig. 136 i considernd c PK = PCl = 1 i PNa = 0,02, obinem, aplicnd ecuaia Goldman-Hodgkin-Katz:
+ RT PK K E = ln F PK K +

[ ] [ ]

ex

+ PNa Na +
+

+ PNa in

[ ] [Na ]

ex

+ PCl Cl

+ PCl in

[ ] [Cl ]

in

= 84mV

ex

Contribuia celorlali ioni cum ar fi Ca++ i Mg++ este mai mic i o putem neglija, la nivelul fibrei musculare, dar n cazul altor celule, cum este celula cardiac, nu se mai poate neglija contribuia acestora. Potenialul de aciune celular (local PA-l i de tip tot-sau-nimic PA-tn) Prin potenial de aciune se nelege o depolarizare trectoare a membranei celulare prin care interiorul celulei devine mai puin negativ dect n stare de repaus, avnd drept consecin scderea diferenei de potenial de-o parte i de alta a membranei celulare. Exist ns i poteniale de aciune hiperpolarizante, prin care interiorul celulei devine i mai negativ dect n stare de repaus (vezi celulele receptoare retiniene). Potenialul de aciune este produs de un stimul sau poate fi rezultatul unei activiti celulare spontane, iar propagarea sa reprezint impulsul nervos. Potenialele de aciune sunt de dou feluri: - poteniale de actiune locale PA-l; - poteniale de aciune tot sau nimic PA-tn Potenialele de aciune locale (PA-l) Sunt produse n urma aciunii unor stimuli de intensitate mic, cu valori sub valoarea de prag, numii stimuli subliminari (Fig. 137). n urma aciunii stimulilor subliminari apare o depolarizare redus a membranei, proporional cu amplitudinea stimulului i care se propag decremental sau cu pierderi, pe distane scurte (scderea amplitudinii PA-l se face exponenial cu distana de la locul de producere a acestuia). Rolul determinant n declanarea potenialelor de actiune l au canalele ionice ale cror pori se nchid sau se deschid, ducnd astfel la apariia unor fluxuri ionice. Un stimul de intensitate mic produce deschiderea unui numr mic de canale de + Na aflat n concentraie mare n mediul extracelular. Prin porile deschise ale canalelor, ionii de Na+ vor ptrunde n celul, n sensul gradientului electrochimic, atrai fiind i de electronegativitatea intracelular. Ca urmare, potenialul intracelular scade pan la o valoare aproximativ egal cu -60 mV cnd se deschid porile canalelor de K- dependente de voltaj, ionii de K- prsind celula, restabilindu-se astfel potenialul de repaus. Concentraiile ionice se refac prin intermediul mecanisemlor de transport activ (pompele membranare). Potenialele de aciune de tip tot-sau-nimic (PA-tn) Iau natere n urma aciunii unui stimul intens care atinge o valoare critic, de prag. Interiorul celulei devine pozitiv, PA-tn avnd amplitudine constant (odat ce a fost declanat). PA-tn se propag pe distane mari, fr pierderi (nedecremental), cu viteze
125

Note de curs

mari. Amplitudinea potenialului de vrf, pragul i viteza de propagare sunt caracteristici ale fibrei (sau celulei). Etapele care duc la apariia PA-tn sunt urmtoarele: sub aciunea unui stimul de intensitate mare se deschid mai multe canale de Na+, iar ionii de Na+ care au ptruns n numr mare n celul determin deschiderea altor canale de Na+, astfel intrnd, printr-un fenomen de avalan, din ce n ce mai muli ioni de Na+, interiorul celulei pozitivndu-se.

Fig. 137 Potenialele de aciune Datorit acestui proces n avalan ne ateptm ca interiorul celulei s devin din ce n ce mai pozitiv, atingnd valoarea potenialului de echilibru al Na+, dat de relaia Nernst, care este de + 50 mV. n acest caz, s-ar ajunge la distrugerea celulei, lucru care nu se ntmpl n realitate, deoarece la o anumit valoare a potenialului celular (+30 mV) se produce inactivarea canalelor de Na+, i mai mult, se deschid porile canalelor de K+, permind astfel, ieirea lor din celul. Deschiderea porilor canalelor de K dependende de voltaj este un proces mai lent. Ionii de K+ prsesc celula n sensul gradientului lor electrochimic i astfel se revine la valoarea potenialului de repaus. Procesul dureaz 1ms. Faza ascendent (Fig. 137) a PA-tn este dat de intrarea n avalan a ionilor de Na+, n timp ce faza descendent este dat de intrarea n aciune a canalelor de K+, urmat de ieirea acestor ioni din celul. Nu toate celulele vii sunt capabile s produc PA-tn, ci numai cele nervoase, musculare i glandulare. Capacitatea tuturor celulelor vii de a rspunde prin poteniale de aciune locale se numete iritabilitate. Proprietatea de a rspunde prin poteniale de aciune tot sau nimic se numete excitabilitate. Att PR, ct i curentii ionici transmembranari pot fi determinai experimental. Pentru msurarea potentialului de repaus se folosesc microelectrozi de sticl (metod direct) sau substane fluorescente (metod indirect). Microelectrodul umplut cu o soluie de electrolit, cum ar fi KCl i avnd un vrf mai mic de 0,5 m strpunge membrana, fr a cauza leziuni considerabile, iar ceea ce se msoar este diferena de potenial ntre microelectrodul introdus n celul i un electrod de referin. Valoarea curenilor ionici transmembranari se poate determina pentru ntreaga celul folosind tehnica potentialului fixat sau doar pentru canale individuale folosind tehnica patch-clamp. n principiu, n tehnica potenialului fixat, se msoar PR, care va fi modificat de apariia unui curent transmembranar. Potenialul de repaus este adus la valoarea iniial cu ajutorul unui alt electrod i se msoar curentul necesar restabilirii valorii iniiale a PR, curent ce trebuie s fie egal cu cel care a produs modificarea. n tehnica patch-clamp se izoleaz un mic
126

Biofizic Medical

fragment de membran (numit in limba englez patch) cu ajutorul unui pipete, n care se afl o soluie cu o compoziie ionic, iar n exterior cu o alt compoziie ionic. Cunoscnd concentraiile celor dou soluii, se poate urmri comportamentul canalelor ionice n diferite situaii. Propagarea PA La producerea PA are loc o modificare local a distribuiei de sarcini electrice aceast modificare de polaritate duce la apariia unor cureni electrici locali ntre zona activ i zonele nvecinate: curenii locali Hermann. Pentru apariia unui nou PA trebuie ca intensitatea acestor cureni n zonele din margine s depeasc pragul de detonare.

Fig. 138 Curenii locali Hermann Datorit rezistenelor ntlnite, intensitatea curentului local scade cu distana. Distana la care amplitudinea PA se reduce la jumtate prin cderile de tensiune pe Rm rezistene este d , unde Rm reprezint rezistena electric transmembranar pe Ri unitate de lungime a membranei, iar Ri reprezint rezistena pe unitatea de lungime a lichidului intracelular, considernd c rezistena lichidului extracelular este neglijabil. Rezistena pe unitatea de lungime a lichidului (Ri) crete cu scderea diametrului fibrei. Cu ct distana maxim la care se atinge pragul de detonare este mai mare, cu att crete viteza de propagare. n funcie de tipul fibrelor, propagarea se face n mod diferit: - prin fibrele nemielinizate are loc propagarea recurent (din aproape n aproape) prin cureni locali ce traverseaz ntreaga suprafa a membranei axonale i se nchid prin axoplasm i lichid interstiial (spre centru n exterior i invers n interior) - prin fibrele mielinizate, propagarea are loc prin conducerea saltatorie. Teaca de mielin, care are rol izolator, este ntrerupt la nodurile Ranvier i acolo se poate face contactul electric dintre mediul extracelular i cel intracelular. Curenii locali nu traverseaz toat suprafaa membranei, ci sar de la un nod la cellalt, nchizndu-se prin axoplasm i lichidul extracelular.

Fig. 139 Axon nconjurat de teaca de mielina cu rol izolator, ntrerupt din loc n loc de nodurile Ranvier prin care are loc conducia
127

Note de curs

Propagarea este regenerativ, fr atenuarea semnalului, acest lucru putnd fi explicat prin faptul c ceea ce se propag este excitaia i nu semnalul electric, acesta avnd doar rolul de a declana un nou potenial de aciune consumnd energie metabolic. Viteza de propagare a impulsului nervos poate crete fie prin micorarea rezistenei lichidului intracelular, fie prin mrirea rezistenei transmembranare. Micorarea rezistenei lichidului intracelular se realizeaz n fibrele nervoase i musculare gigante (1,5 mmm diametru: calmar - axon gigant, molusca barnaclu fibr muscular gigant), n timp ce mrirea rezistenei transmembranare se realizeaz prin mielinizare tecile de mielin sunt electric izolatoare i astfel crete rezistena transmembranar. Propagarea impulsului are loc unidirecional prin sinapse. Sinapsele neuronale Contactul ntre doi neuroni sau dintre un neuron i o celul muscular sau glandular se realizeaz printr-o structur specializat numit sinaps. Sinapsele sunt de dou tipuri: chimice i electrice. Sinapsa chimic Sinapsa chimic (Fig. 140) prezint un spaiu presinaptic cu membrana presinaptica, un spaiu sinaptic de aproximativ 20-50 nm lime i un spaiu postsinaptic cu membrana postsinaptic n care se afl receptori i canale ionice. n apropierea membranei presinaptice exist un mare numr de vezicule cu mediator chimic. La sosirea unui PA-l (depolarizare), membranele unor vezicule (cca 40 nm) fuzioneaz cu membrana presinaptic i coninutul este expulzat prin exocitoz n spaiul sinaptic (semnalul electric PA este tradus n semnal chimic).

Fig. 140 Sinapsa chimica Moleculele de mediator (mesager prim) se combin cu moleculele receptoare din membrana postsinaptic, activndu-le. Acestea vor comanda deschiderea porilor canalelor ionice. n celula postsinaptic vor intra ioni i n acest fel este generat un PA-l. Semnalul chimic este transformat n semnal electric. Datorit faptului c mediatorul trebuie s strbat spaiul sinaptic dintre cele dou celule adiacente i ntrzierii eliberrii mediatorului fa de momentul sosirii potenialului de aciune, sinapsa chimic introduce o ntrziere de minimum 0,3 ms, uneori chiar i 5 ms. Transmisia informaiei este unidirecional.

128

Biofizic Medical

Sinapsa electric Funcioneaz fr mediatori chimici, agentul mediator fiind un curent ionic. Sinapsele electrice nu sunt att de rspndite ca sinapsele chimice. Se gsesc, de exemplu, n anumite pri ale creierului sau ntre celulele receptoare i cele orizontale n retin.

Fig. 141 Sinapsa electrica Spre deosebire de sinapsa chimic o sinaps electric are un spaiu sinaptic de numai 2 - 4 nm, prezentnd o continuitate a citoplasmei ntre celula presinaptic i cea postsinaptic, prin canale (Fig. 141). Datorit acestei continuiti, o variaie de potenial la nivelul membranei presinaptice induce o variaie similar n membrana postsinaptic. Transmiterea este direct i de aceea foarte rapid. n sinapsa electric transmiterea este practic instantanee i nu se poate face o gradare n intensitate, iar transmiterea poate fi bidirecional, spre deosebire de cea chimic n care este unidirecional. Bioexcitabilitatea Excitantul sau stimulul reprezint o variaie suficient de intens, ndelungat i brusc a proprietilor mediului, care poate s produc excitarea sistemului biologic. Un stimul este caracterizat de anumii parametrii: form, amplitudine, durat, frecven de repetiie

Fig.142 Stimulii pot avea diferite forme (a), diferite amplitudini (b), pot fi repetitivi (c) Excitarea reprezint fenomenul prin care excitantul modific permeabilitatea membranei celulare pentru ioni (nchiderea sau deschiderea canalelor ionice). Un factor fizic sau chimic este excitant dac este capabil s determine ntr-un fel sau altul deschiderea porilor canalelor ionice. Excitaia celular reprezint totalitatea fenomenelor care au loc n celul ca urmare a excitrii acesteia de ctre factorii excitani. Excitaia are aspecte: electrice (PA), optice (modificri ale transparenei, refringenei i activitii optice a celulei), radiante (emisie de IR, vizibil, UV), chimice (hidroliza ATP, producere de NH3 etc.), calorice (producere i absorbie de cldur). Excitabilitate este proprietatea unui sistem biologic de a rspunde prin excitaie la aciunea excitanilor (stimulilor).
129

Note de curs

Reobaza i cronaxia Cantitativ, excitabilitatea se evalueaz cu ajutorul mrimilor numite reobaz i cronaxie. Reobaza este intensitatea minim a unui excitant (stimul) cu durat de aciune foarte mare (teoretic infinit) care poate s declaneze excitaia n sistemul biologic. Cronaxia este durata minim a unui excitant de intensitate egal cu dublul reobazei pentru care acesta poate produce excitarea. Relaia lui Weiss stabilete legtura dintre valorile intensitii i duratei unui stimul care poate produce excitarea unui sistem biologic: i = a/t + b unde a, b constante ce depind de sistem.

Fig. 143 Relaia lui Weiss ntre valorile intensitii i duratei unui stimul care poate produce excitarea unui sistem biologic Se observ din Fig. 143 c pentru o durat infinit de aciune a stimului (t ), se obine valoarea reobazei i = b (reobaza). n cazul n care intensitatea stimulului este dublul reobazei (i = 2b), durata minim a acestuia pentru a produce excitarea este cronaxia t = a/b.

130

Biofizic Medical

NOIUNI FUNDAMENTALE DE ACUSTIC Introducere Acustica este tiina care studiaz undele mecanice (sunetele mai ales) sub toate aspectele lor: producere, caracteristici, propagare, fenomene produse, recepie i analiz de ctre dispozitivele tehnice i de ctre analizorul auditiv (n particular uman). Undele mecanice reprezint propagarea oscilaiilor particulelor unui mediu deci spre deosebire de undele electromagnetice ele nu se pot propaga n vid.

Fig. 144 Propagarea undelor sonore, prin comprimri i rarefieri succesive ale particulelor mediului Ele vor fi caracterizate de aceleai mrimi fizice ca orice alt und respectiv viteza de propagare, perioada, frecvena, lungimea de und, amplitudinea, densitatea de energie etc. De asemenea undele sonore vor suferi, n propagare, toate fenomenele specifice undelor: reflexie, refracie, difracie, interferen, absorbie, efect Doppler. Undele sonore sunt unde longitudinale, deci oscilaiile particulelor au loc pe aceeai direcie pe care se propag energia (unda). n medii omogene unda sonor este o und sferic (se propag n toate direciile cu aceeai vitez) i din acest motiv densitatea de energie (energia n unitatea de volum), chiar neglijnd absorbiile, scade proporional cu ptratul distanei undele fiind amortizate rapid. Mrimi specifice undelor sonore Pe lng mrimile fizice ce caracterizeaz orice tip de und n caracterizarea undelor sonore se folosesc i mrimi i uniti specifice acestora. Intensitatea undei sonore se definete ca energia acustic ce strbate unitatea de suprafa n unitatea de timp. Intensitatea undei sonore este direct proporional cu ptratul presiunii exercitate de und. Dei nu este specific numai undelor sonore este de remarcat c energia acestora este proporional att cu ptratul amplitudinii ct i cu ptratul frecvenei. Dat fiind faptul c senzaiile apar dac este depit un anumit prag i c ele depind logaritmic de energia stimulului se introduc i alte mrimi i uniti de msur specifice cum ar fi nivelul intensitii sonore, atenuarea sau amplificarea. I I (n Bell B) = 10 lg (n decibel dB) N = lg I0 I0 (reamintim c lg semnific logaritmul n baza 10, adic log10). I0 este intensitatea semnalului de referin. n cazul nivelului intensitii sonore el reprezint intensitatea minim audibil a sunetului cu frecvena de 1000 Hz care este W I0=10-12 2 m
131

Note de curs

n cazul atenurii i amplificrii I0 este intensitatea sunetului incident. Clasificarea undelor sonore Se poate face n funcie de frecven astfel: 1. infrasunete unde cu frecvena mai mic de 16 Hz; 2. sunete (percepute de urechea uman) cu frecvene ntre 16 i 20.000 Hz; 3. ultrasunete cu frecvene mai mari de 20.000 Hz. De fapt, undele sonore conin foarte rar o singur frecven (sunete pure) cel mai des ele fiind un amestec de mai multe frecvene. Foarte des este ntlnit situaia n care pe lng unda de frecvena cea mai mic (fundamental) sunt prezente undele avnd frecvenele multiplii ntregi ai acesteia (armonice). n general, unda fundamental transport o energie mult mai mare dect armonicele. Producerea undelor sonore Undele din domeniul audibil pot fi obinute prin producerea de oscilaii n coarde, bare, membrane ntinse etc. n funcie de caracteristicile emitorului (lungime, tensiune) se pot obine sunete cu frecvene diferite dar i avnd compoziii armonice diferite. Sunetele articulate caracteristice vorbirii au un mecanism foarte complicat de producere. Astfel vibraia corzilor vocale produce sunetele primare relativ simple. Frecvena acestora este determinat de lungimea corzilor vocale i de tensiunea din ele. De exemplu n cazul brbailor sunetele sunt n general mai grave (au frecvene mai mici) dect n cazul femeilor sau al copiilor deoarece lungimea corzilor vocale i a cavitilor rezonante este mai mare. Sunetele simple emise de corzile vocale sunt apoi transformate n sunete articulate, mult mai complexe, cu ajutorul cavitilor rezonante (toracele, cavitatea bucal, laringele, faringele, cavitatea nazal i chiar cutia cranian - ce joac i un rol de element de legtur invers).

Fig. 145 Undele sonore produse de pian sunt reprezentate prin cercuri concentrice care radiaz din sursa sonor La rndul lor aceste caviti i modific proprietile prin intermediul limbii, buzelor, palatului moale etc. acionate de sute de muchi. ntregul proces este coordonat dintr-o zon situat ntr-una din emisferele cerebrale (de regul stng pentru dreptaci i dreapt pentru stngaci). Infrasunetele sunt generate att n cazul unor fenomene naturale cum ar fi vntul, valurile erupiile vulcanice, cutremurele, avalanele ct i n cazul funcionrii unor aparate construite de om cum ar fi mainile compresoarele ventilatoarele etc. La intensiti mari (peste 140db) infrasunetele pot produce anxietate, grea, perturbaii ale echilibrului i simului de orientare. Ultrasunetele sunt produse de ctre unele animale cum ar fi liliecii sau delfinii i utilizate fie pentru orientare fie pentru comunicare. n practic ultrasunetele au numeroase utilizri cum ar fi evidenierea unor defecte n materiale (defectoscopia ultrasonic),
132

Biofizic Medical

cartografierea fundului mrilor sau detectarea unor obiecte n imersie (sonarul), sablarea (curirea) pieselor i altele. n medicin ultrasunetele sunt utilizate n scop de diagnostic (ecografie, ecografie Doppler) sau tratament prin nclzirea unor esuturi, masaje n profunzime sau distrugerea calculilor. Pentru producerea ultrasunetelor se utilizeaz cel mai des efectul piezoelectric invers dar poate fi folosit i fenomenul magnetostrictiv. Efectul piezoelectric apare n cazul unor cristale cum ar fi cuarul i const n dilatarea sau contracia cristalului sub aciunea unei tensiuni electrice. Dac unui astfel de cristal i aplicm o tensiune alternativ cristalul se va dilata sau contracta cu aceeai frecven ca i a tensiunii genernd unde mecanice n mediul nconjurtor. Dac frecvena tensiunii depete 20 kHz se vor genera ultrasunete. Acelai cristal poate fi utilizat i pentru detecia ultrasunetelor prin efectul piezoelectric direct (generarea de tensiuni electrice n urma contraciilor i dilatrilor produse de ultrasunete). Efectul magnetostrictiv este asemntor cu cel piezoelectric doar c dilatrile i contraciile cristalelor se produc sub aciunea unui cmp magnetic alternativ. Fenomene ce apar la propagarea undelor sonore Viteza cu care se propag undele sonore este diferit n diferite medii depinznd de proprieti cum ar fi elasticitatea i densitatea mediului dar i de temperatur. De m m m n aer, 1500 n apa de mare i 5000 n oel. n exemplu vitezele sunt de circa 340 s s s aer viteza crete uor cu creterea temperaturii. Pe msura propagrii undelor ntr-un mediu ele sunt progresiv absorbite. Absorbia depinde att de natura i proprietile mediului ct i de frecvena undelor i energia undei scade exponenial cu distana parcurs de und n mediu. Astfel sunetele sunt relativ puin absorbite de aer dar puternic absorbite n ap n timp ce ultrasunetele sunt mai puternic absorbite n aer dect n ap. Exist materiale, cum ar fi vata de sticl, care absorb foarte puternic undele sonore i care sunt folosite pentru izolri fonice sau pentru mpiedicarea apariiei reflexiilor de exemplu n slile de concert. Densitatea de energie a undelor scade pe msura propagrii lor att datorit absorbiei ct i datorit mprtierii. Este de remarcat c ultrasunetele avnd lungimi de und mai mici permit o focalizare mai bun (o mprtiere mai mic). Reflexia undelor Reprezint schimbarea direciei de propagare a undelor la ntlnirea suprafeei de separaie dintre dou medii cu ntoarcerea undei n mediul din care a venit. Dac sunetul reflectat este perceput distinct de sunetul direct fenomenul se numete ecou (fenomen folosit n ecografie) iar dac sunetul reflectat pare s prelungeasc sunetul direct fenomenul se numete reverberaie. Pentru percepia distinct a sunetului reflectat trebuie ca ntre emisia sunetului i recepia sunetului reflectat s treac cel puin 0,1 s. Dat fiind m faptul c viteza sunetului n aer este de circa 340 ecoul nu va apare dect dac s obstacolul pe care are loc reflexia se gsete la o distan de minim 17m de sursa care emite sunetul. n practic reflexia poate fi folosit pentru msurarea distanelor iar n medicin pentru obinerea imaginilor organelor interne n ecografie. Efectul Doppler Acest efect apare atunci cnd sursa de unde se deplaseaz fa de observator sau observatorul fa de surs.

133

Note de curs

Efectul apare i n cazul reflexiei undelor pe un obiect n micare. Efectul Doppler se manifest prin modificarea frecvenei undei conform relaiei v = 0 (1 ) c unde reprezint frecvena undei percepute (respectiv reflectate) 0 este frecvena undei emise de surs, v este viteza de deplasare a sursei, observatorului sau obiectului pe care are loc reflexia iar c reprezint viteza undei. Semnul + reflect situaia n care sursa se deplaseaz spre observator iar semnul - cea n care sursa se ndeprteaz (respectiv apropierea sau ndeprtarea obiectului pe care are loc reflexia).

Fig. 146 Datorit efectului Doppler, frecvena sunetului provenit de la sursa sonor care se apropie pare mai mare dect frecvena real, iar frecvena sunetului provenit de la sursa care se ndeprteaz pare mai mic dect frecvena real Fenomenul este folosit n determinarea vitezei de deplasare a autovehiculelor (radar) iar n medicin n ecografia Doppler. Difracia undelor sonore Const n ocolirea obstacolelor atunci cnd dimensiunea acestora este comparabil cu lungimea de und a undei sonore. Ultrasunetele avnd lungimi de und mai mici dect sunetele nu vor putea ocoli dect obstacole de dimensiuni mici n timp ce sunetele au lungimi de und mari ocolind astfel obstacole de dimensiuni mari (ele nu vor fi reflectate dect de obiecte de dimensiuni foarte mari). Difracia face posibil recepionarea undelor chiar i atunci cnd ntre sursa sunetelor i receptor se gsesc obstacole. Interferena Reprezint fenomenul de suprapunere i compunere a undelor. n urma interferenei se obine o und mai complex sau, n cazul n care undele au aceeai frecven, o und cu amplitudinea cuprins ntre suma i diferena amplitudinilor celor dou unde. n acest ultim caz, dac undele au aceeai amplitudine, acestea se pot anihila reciproc (amplitudinea undei rezultante este 0) sau se pot ntri reciproc (poate rezulta o und cu o amplitudine egal cu dublul amplitudinii fiecreia din undele care interfer). Un caz particular l reprezint interferena dintre unda incident i unda reflectat caz n care unda rezultat se numete und staionar. De exemplu, n cutia de rezonan a instrumentelor muzicale sunetele sunt ntrite prin formarea undelor staionare.

134

Biofizic Medical

Rezonana reprezint fenomenul de transfer al energiei ntre doi oscilatori care au aceeai frecven de oscilaie. Absorbia undelor poate fi explicat printr-un fenomen de rezonan prin care energia undei este preluat de particulele din mediul strbtut. Cavitaia este un fenomen ce poate apare la propagarea ultrasunetelor n lichide i const n apariia n lichide, sub aciunea ultrasunetelor, a unor bule de gaz n interiorul acestora putndu-se produce ionizri. Acest fenomen se explic prin dilatrile i comprimrile succesive rapide ce au loc n interiorul lichidului ceea ce duce la apariia bulelor de gaz, iar n interiorul bulelor ultrasunetele formeaz unde staionare ce duc la acumularea de energie i apariia ionizrilor (dei ultrasunetele nu au energie suficient pentru a produce ionizri directe). Caracteristicile sunetului Sunetul reprezint senzaia produs de undele sonore asupra analizorului auditiv. Aceast senzaie este caracterizat de trei caracteristici: nlimea, intensitatea i timbrul. Fiecare din aceste caracteristici este determinat de ctre o anumit proprietate fizic a undei sonore. nlimea sonor. Sunetele sunt percepute ca fiind nalte (acute, ascuite) sau joase (grave). nlimea este legat de frecvena undei sonore. n mod normal analizorul auditiv uman percepe undele sonore cu frecvene cuprinse ntre 16 i 20.000 Hz dar intervalul variaz de la persoan la persoan. Acest interval se micoreaz o dat cu vrsta dar i n cazul expunerii prelungite la sunete de intensiti mari. n general frecvenele foarte mici sau foarte mari nu pot fi percepute dect de persoanele antrenate (de exemplu muzicieni). Undele sonore cu frecvene mici sunt percepute ca sunete joase iar cele cu frecvene mari ca sunete nalte. Noiunea de nlime poate fi folosit i n compararea a dou sunete devenind relativ. Astfel un sunet care are o frecven mai mare dect altul va fi mai nalt dect aceasta. Intervalul de frecvene n care frecvena se dubleaz (de exemplu de la 1.000 la 2.000 Hz) se numete octav. n muzic o octav conine 7 note. Notele succesive au frecvene ce sunt n raport de numere ntregi. Intensitatea (tria) sonor indic percepia mai puternic sau mai slab a sunetului. Ea este legat de energia ce trece n unitatea de timp prin unitatea de suprafa (intensitatea undei sonore) dar i de sensibilitatea analizorului auditiv pentru diferite frecvene. Pentru fiecare frecven analizorul auditiv prezint dou praguri: pragul de audibilitate i pragul de durere (Fig. 147). Pragul de audibilitate reprezint intensitatea minim a undei sonore care mai permite percepia acesteia. Acesta variaz cu frecvena avnd un minim n regiunea 1.000- 2.000 Hz i crescnd mult spre limitele spectrului audibil. Pragul de durere reprezint intensitatea undei sonore minime la care apare senzaia de durere i de presiune n ureche. El prezint un maxim n aceeai regiune de 1.000- 2.000 Hz scznd spre limitele spectrului audibil unde devine aproape egal cu pragul de audibilitate (deci atunci cnd apare senzaia sonor aproape apare i senzaia de durere). n figur sunt reprezentate grafic presiunea sonor respectiv intensitatea undei sonore att pentru pragul de audibilitate ct i pentru cel de durere ca funcie de frecven. Cele dou praguri pot fi determinate n clinic folosind audiometrul. Subiectului i se pun pe urechi cti care l izoleaz fonic de mediul exterior. Pe rnd, n fiecare casc se trimit unde sonore pure (ce conin o singur frecven) crescnd intensitatea pn cnd se obine senzaia de audibilitate. Rezultatul este marcat pe grafic obinndu-se audiograma. Se traseaz separat audiograme pentru fiecare ureche n parte. n practic se traseaz doar pragul de audibilitate.

135

Note de curs

Fig.147 Pragul de audibilitate i cel de durere pentru urechea normal Pe lng intensitate unda sonor trebuie s aib i o durat minim de circa 0,06 s (60 ms) pentru a putea fi perceput. De asemenea dou sunete pentru a fi percepute independent trebuie s fie separate de minim 10 ms. Timbrul (calitatea) sunetelor permite deosebirea sunetelor produse de instrumente diferite chiar dac unda fundamental are aceeai frecven i aceeai amplitudine. Acest lucru este posibil deoarece sunetul complex poate avea o compoziie diferit n armonice att n ce privete numrul acestora ct i n ce privete amplitudinea fiecrei armonice n parte. Sunetul complex poate fi analizat prin descompunerea lui n armonicele componente (analiza Fourier).

136