TURBIDIMETRA INTRODUCCIN Cuando la radiacin electromagntica interacta con la materia adems de la absorcin y emisin de radiacin pueden presentarse otros

procesos, siendo uno de los ms importantes la dispersin de la radiacin electromagntica, la cual puede clasificarse en dos tipos: (1) dispersin elstica, donde la radiacin dispersada tiene la misma energa que la radiacin incidente; y (2) dispersin no elstica, donde la radiacin dispersada puede tener mayor o menor energa que la radiacin incidente. Ambos procesos tienen muchas aplicaciones analticas. Los mtodos de dispersin elstica se han utilizado desde hace tiempo en los anlisis por turbidimetra y nefelometra para determinar la concentracin de partculas en una suspensin. En los mtodos turbidimetricos se mide la disminucin en la radiacin transmitida que resulta de la dispersin de la luz por partculas. En los mtodos nefelomtricos se mide directamente la intensidad de la radiacin dispersada. DISPERSIN DE RADIACIN La dispersin de la radiacin electromagntica es la base de la nefelometra y la turbidimetra. Cuando un haz de radiacin electromagntica incide sobre una pequea partcula, sta experimentar una perturbacin intensa ocasionada por los campos magnticos y elctricos oscilantes de la radiacin. En efecto mientras esta pasando la radiacin, la partcula se encuentra en un fuerte campo, cuya polaridad se alterna con la frecuencia de la radiacin. Si la partcula es polarizable o sea, si las cargas dentro de ella pueden separarse bajo la influencia del campo, las cargas inducidas en la partcula tambin oscilarn cuando el campo cambie de polaridad. Este efecto se ilustra en la Fig. 1., en la cual se muestra una pequea partcula que tiene un dipolo inducido oscilante originado por una onda electromagntica que est pasando. El dipolo inducido oscilante en la pequea partcula produce un campo propio que oscila a la misma longitud de onda o frecuencia que la radiacin incidente (misma energa). Este campo producido por el dipolo oscilante acta como una fuente de radiacin propia, as que radiacin de la misma longitud de onda es emitida en todas direcciones a partir de la partcula (radiacin secundaria), esta es una radiacin dispersa y tal efecto se denomina dispersin Rayleigh (elstica). Aunque este tipo de radiacin secundaria tambin puede utilizarse para explicar la reflexin y la refraccin de la luz, el criterio necesario para el trmino dispersin es que las partculas tengan dimensiones de aproximadamente el mismo orden de magnitud o menor que la longitud de onda de la radiacin incidente y que las partculas estn distribuidas en un medio de ndice de refraccin diferente al propio. Para partculas ms grandes (mayores que 2), el anlisis ondulatorio demuestra que solo ocurre reflexin y refraccin. La tabla 1 indica aproximadamente el tamao de partcula que produce dispersin en varias regiones del espectro electromagntico.

Tabla 1. Partculas que producen dispersin en regiones de diferentes longitudes de onda. Radiacin incidente. (m) 10 0,5 0,001 Regin espectral Mximo tamao (m) 15 0,75 0,002 Tipo de agregado

Infrarrojo Visible Rayos X

Grandes partculas coloidales Partculas coloidales, macromolculas Pequeas molculas, tomos

Todas las formas de la materia pueden originar dispersin de la luz. Por ejemplo, la dispersin de la luz por los gases es observada en el aire y ello explica el color azul del cielo. La dispersin de la luz tambin ocurre en lquidos y slidos puros, pero su aplicacin analtica ms importante es, la dispersin en soluciones de macromolculas o en partculas suspendidas.

NEFELOMETRIA Y TURBIDIMETRIA Se denomina turbidez a la propiedad ptica de una muestra que hace que la radiacin incidente sea dispersada y absorbida ms que transmitida en lnea recta a travs de la muestra y es ocasionada por la presencia de materia suspendida en un lquido. Hay dos mtodos para medir la turbidez de una muestra: la turbidimetra y la nefelometra, ambas permiten determinar la cantidad de material slido en una suspensin coloidal (aquella en la cual el tamao de partcula est comprendido entre 1 y 103 nonamtros) . Las dos tcnicas difieren nicamente en la forma de medir la radiacin; la medicin de la intensidad de la luz trasmitida como una funcin de la concentracin de la fases dispersa es la base del anlisis turbidimtrico mientras que, la medida de la intensidad de la luz dispersada en ngulo recto con respecto a la radiacin incidente es la base del anlisis nefelometrico (del griego nefelo = nube), en resumen la diferencia est en el ngulo de medida de la radiacin. En los anlisis qumicos por turbidimetra o nefelometra bajo condiciones favorables se obtiene precisiones comparables a los mtodos colorimtricos al igual que una alta sensibilidad. Debido a la diferencia en el ngulo de medida, la turbidimetra es ms adecuada para determinar concentraciones relativamente altas de partculas suspendidas, mientras que la nefelometra es ms adecuada para determinar concentraciones muy bajas (suspensiones muy diluidas). Por ejemplo, si una determinada suspensin no produce una fuerte dispersin, la transmitancia estar alrededor del 95 al 98%, y la turbidimetra no puede utilizarse puesto que tendra que hacerse una comparacin entre dos grandes cantidades de aproximadamente el mismo valor. En ese caso, la nefelometra ser mucho ms sensible y

precisa, puesto que la pequea cantidad de luz dispersada sera medida contra un fondo negro. Por otra parte, para suspensiones ms densas la turbidimetra es el mtodo de eleccin puesto que ella puede medir exactamente pequeos cambios en la intensidad de la luz trasmitida cuando la intensidad absoluta es relativamente baja, mientras que las medidas nefelomtricas bajo estas condiciones experimentan efectos de interferencias que tienden a saturar la curva de respuesta.

VARIABLES QUE AFECTAN LAS MEDIDAS DE LA RADIACIN La cantidad de radiacin trasmitida o dispersada de la radiacin incidente depende de: 1. La concentracin de partculas (concentracin de la fase dispersa). 2. La relacin de ndices de refraccin de las partculas y el medio en el que se encuentran. 3. El tamao y forma de las partculas. 4. La longitud de onda de la luz incidente. Obviamente debe haber una diferencia de ndices de refraccin entre la partcula y su medio ambiente si va a ocurrir reflexin o dispersin. La geometra de las partculas y la longitud de onda son variables particularmente importantes que se deben entender claramente y merecen una descripcin ms detallada. Geometra de las partculas La variable ms crtica para el xito del anlisis nefelomtrico o turbidimtrico es el control del tamao y la forma de las partculas, las cuales en una suspensin raramente son de tamao uniforme. Por lo tanto, es extremadamente importante que todas las muestras y patrones de calibracin tengan la misma distribucin de partculas pequeas, medianas y grandes. Esto, a su vez requiere que las muestras y los estndares sean preparados bajo condiciones idnticas, lo que frecuentemente no es una tarea fcil. Las siguientes condiciones deben controlarse cuidadosamente con el objetivo de preparar suspensiones razonablemente uniformes. 1. La concentracin de los dos iones que se mezclan para producir el precipitado, as como las relaciones de las concentraciones de las soluciones. 2. La manera, el orden, el tiempo y la velocidad de mezcla. 3. Las cantidades de otras sales y sustancias presentes. 4. El tiempo permitido para el crecimiento de las partculas. 5. El pH. 6. La temperatura. Las variaciones en el crecimiento de las partculas es la causa ms frecuente de error en la nefelometra y la turbidimetra. Generalmente se aaden surfactantes o agentes tensoactivos a las soluciones precipitantes para estabilizar el estado coloidal y evitar el crecimiento de grandes partculas debido a la aglomeracin. Glicerol, gelatina y dextrina son las sustancias ms utilizadas para realizar la funcin descrita anteriormente, ellos funcionan como

protectores de coloides siendo adsorbidos sobre la superficie de las partculas, interrumpiendo el crecimiento de las mismas y estabilizando su tamao. Concentracin de la fase dispersa. Como se indico en la introduccin, la radiacin dispersada por una suspensin proporciona un mtodo analtico til. La cantidad de materia slido suspendido en una suspensin coloidal puede determinarse midiendo ya sea la luz trasmitida (turbidimetra) o la luz dispersada (nefelometra). La eleccin entre esta tcnicas no es crtica. El anlisis nefelomtrico es ms sensible para suspensiones diluidas pero para suspensiones moderadamente densas o concentraciones relativamente altas de las partculas suspendidas, la turbidimetra es ms adecuada. La turbidez o nubosidad producida por una suspensin est determinada aproximadamente por la siguiente ecuacin:

S log Po / P K 1

bcd 3 d 4 4

(1), donde

S = turbidez (o poder de dispersin), anloga a la absorbancia. Po = intensidad de la radiacin incidente P = intensidad de la radiacin trasmitida b = espesor de la celda en la que se encuentra la muestra d = dimetro promedio de las partculas = longitud de onda de la radiacin incidente K1 = constante de proporcionalidad que depende de la naturaleza de la suspensin y el mtodo de medicin = constante que depende nicamente del mtodo de anlisis

Esta ecuacin aproximada se cumple estrictamente en suspensiones muy diluidas. El hecho que la turbidez tenga una relacin inversa con la cuarta potencia de la longitud de onda explica el hecho familiar que la luz azul es dispersada ms fuertemente que la roja y por lo tanto para que el anlisis sea ms sensible en la regin visible del espectro electromagntico debe realizarse preferiblemente a la longitud de onda de la luz azul (420 nm). Para cierta suspensin medida con radiacin monocromtica en un instrumento determinado, de forma que , K1, d y sean constantes, la ecuacin anterior se puede escribir, S = Kbc (2)

La cual es anloga a la ley de Beer e indica que aparatos similares a los utilizados en colorimetra tales como fotmetros y espectrofotmetros son satisfactorios para el anlisis nefelomtrico y turbidimtrico y tambin que los resultados pueden ser calculados por procedimientos matemticos similares; es necesario recalcar que para que esos instrumentos funcionen como nefelmetros, ellos deben estar provistos de un sistema que permita colocar la iluminacin o radiacin incidente a un ngulo de 90 con respecto a la direccin de observacin. Se recomienda la construccin de curvas de calibracin en ambos anlisis puesto que la ecuacin (2), que indica la relacin entre las propiedades pticas de la suspensin y la concentracin de la fase dispersa es semi-emprica. Si la nubosidad o turbidez se va a reproducir, se debe tomar un gran cuidado en su preparacin como se indico anteriormente, el precipitado debe ser muy fino de forma que no sedimente rpidamente. La intensidad de la luz dispersada depende del nmero y tamao de las partculas en suspensin y con tal que el tamao promedio de las partculas sea reproducible, es posible la aplicacin del anlisis nefelomtrico o turbidimtrico.

APLICACIONES Anlisis inorgnico: el uso ms amplio de la nefelometra y la turbidimetra es determinar la claridad de todas las clases de agua y bebidas. La claridad y el brillo son caractersticas importantes de la calidad de los productos; la presencia de materiales suspendidos, an en cantidades tan pequeas que son invisibles en el embotellamiento se transforma en un sedimento desagradable despus del embotellamiento y almacenado. Otros ejemplos incluyen la determinacin de sulfato (como BaSO4), carbonato (como BaCO3), cloruro (como AgCl), cianuro (como AgCN), etc. La determinacin del sulfato se utiliza ampliamente y sirve para la determinacin rutinaria de azufre total en carbn, coque, aceites, cauchos y otros materiales orgnicos. Anlisis orgnico: Aplicacin al anlisis de alimentos y bebidas constituye el objetivo primordial en esta seccin. Anlisis de turbidez de productos azucarados, claridad de jugos ctricos y varias bebidas alcohlicas. Anlisis bioqumico: La nefelometra ha sido utilizada para la estimacin de protenas y la determinacin de enzimas, glicgeno adems beta y gamma globulinas en el suero sanguneo y el plasma, as como tambin la determinacin de sulfato en la orina. Monitoreo de corrientes continuas: La turbidimetra y la nefelometra son mecanismos muy importantes en el monitoreo contino de corrientes de aire y agua. El polvo y el humo son monitoreados en el aire y cualquier forma de turbidez es monitoreado en diferentes tipos de aguas naturales. La automatizacin de medidas de turbidez es utilizada ampliamente en la industria petrolera. Un ejemplo de un anlisis por turbidimetra es la determinacin de sulfato de bario bajo condiciones que conducen a la formacin de una suspensin coloidal. Tal suspensin se obtiene cuando una solucin diluida del sulfato que contiene cloruro de sodio y cido clorhdrico es mezclada con cloruro de bario slido y sometida a agitacin. El mtodo es

vlido a concentraciones tan bajas como una pocas partes por milln (ppm), pero es necesario ejercer un control estricto sobre todas las variables para obtener resultados consistentes, as como se indico anteriormente la cantidad y el tamao de grano del cloruro de bario cristalino y la eficiencia y duracin de la agitacin debe ser uniforme tanto para los patrones como para la muestra. En la presente prctica este ser el anlisis que ser llevado a cabo.

PARTE EXPERIMENTAL Determinacin de la cantidad de sulfato en una muestra problema como MgSO4. A- DISCUSIN. La turbidez de una suspensin diluida de BaSO4 es difcil de reproducir; por lo tanto es esencial seguir estrictamente el procedimiento experimental detallado posteriormente. La velocidad de la precipitacin as como la concentracin de los reactantes debe ser controlada aadiendo (despus que todos los otros componentes estn presentes) cloruro de bario dihidratado puro de un tamao de grano definido, su velocidad de disolucin controla la velocidad de la reaccin de precipitacin. BaCl2(s) + SO4=(ac) BaSO4(s) + 2Cl-(ac)

Antes de la precipitacin se aaden cloruro de sodio y HCl en solucin a fines de inhibir el crecimiento de microcristales de BaSO4 y tambin para mantener el pH ptimo y minimizar el efecto de cantidades variables de otros electrolitos presentes en la muestra sobre el tamao de las partculas suspendidas de BaSO4. Una solucin de etanol-glicerol ayuda a estabilizar la suspensin como se indic anteriormente. El recipiente de reaccin debe agitarse suavemente con el objetivo de obtener un tamao de partcula uniforme y cada recipiente debe ser agitado a la misma velocidad y el mismo nmero de veces. La muestra problema debe ser tratada exactamente igual que las soluciones estndares (patrones) y el intervalo entre el tiempo de precipitacin y la realizacin de la medida debe mantenerse constante. B- REACTIVOS. Solucin estndar de sulfato (96 ppm). Solucin acondicionadora: NaCl, HCl, glicerol y etanol disueltos en agua. BaCl2.2H2O (20 30 mesh). C- PROCEDIMIENTO 1.Encienda el espectrofotmetro (Spectronic-20), para que la fuente de radiacin empiece a calentarse, colocando la longitud en 420 nm. 2. Preparacin de los patrones de sulfato.

a) Lave con agua destilada todos los instrumentos de vidrio que va a utilizar. b) Prepare patrones de 72,0 ppm; 67,2 ppm; 57,6 ppm; 48ppm; 28,8 ppm y 19,2 ppm de SO4= a partir de una solucin estndar de 96 ppm en balones aforados de 100 mL. 3. Preparacin de la muestra problema. a) Disuelva la muestra slida de sulfato que le ser suministrada en un beacker y posteriormente trasvase a un baln aforado de 500 mL y aada agua destilada hasta alcanzar el aforo y agite aproximadamente 30 veces para homogeneizar la solucin. b) Tome 10 mL de la solucin anterior con una pipeta aforada, adalos en un baln aforado de 100 mL, dilyalos y afore. Agite alrededor de 30 veces para homogeneizar la solucin. 4. Calibracin del espectrofotmetro. Para la calibracin del aparato se procede a ajustar el valor cero de porcentaje de trasmitancia (% T) con el portamuestra vaco (perilla izquierda). Para calibrar el 100% T se coloca en el portamuestra una celda con agua destilada y mediante el ajuste de la perilla derecha el aparato se lleva el valor indicado por la aguja hasta 100 en la escala de trasmitancia. 5. Preparacin de las suspensiones patrones y muestra problema y determinacin de su trasmitancia. a) Tome 25 mL de una muestra patrn y virtalos en un beaker de 100 mL. b) Adale 5 mL de la solucin acondicionadora al beaker mediante la utilizacin de una jeringa y coloque dentro del beaker un agitador magntico. c) Agite la mezcla durante dos minutos exactos. d) Al cumplirse los dos minutos, agregue 0,60 g de BaCl2.2H2O para dar inicio a la formacin de la suspensin de BaSO4. Agite durante un minuto. e) Chequee la calibracin del espectrofotmetro mientras transcurre el minuto anterior. f) Luego de transcurrido el minuto, cure un tubo de ensayo con la mezcla de reaccin contenida en el beaker y luego llnelo 4/5 partes, limpie su superficie exterior, colquelo en el portamuestra y determine el porcentaje de trasmitancia. g) Repita los pasos de a a f para los patrones restantes y la muestra problema. h) Recoja y limpie todo el material utilizado.

CALCULOS Haga la curva de calibracin A vs C (ppm) y a partir de ella determine la concentracin de la muestra problema. A partir de la concentracin de la muestra problema y tomando en cuenta la(s) dilucion(es) determine la cantidad de sulfato en la muestra(g). Reporte su resultado como MgSO4.