Curs Biochimie 2 Sef lucrari dr. ing.

Irina ALEXA Universitatea Vasile Alecsandri din Bacau

ENZIME NO IUNI INTRODUCTIVE

Enzimele sunt catalizatorii lumii vii - biocatalizatori

o catalizeaz reac iile biochimice din organism o rol esen ial n biosinteza i degradarea substan elor din materia vie

Exist peste 2000 de enzime diferite Primele enzime izolate = fermen i Sinteza enzimelor are loc n interiorul organismelor i pot exercita ac iunea i atunci cnd sunt extrase din organism, i n afara acestuia
1

ENZIME
NO IUNI INTRODUCTIVE
forma inactiv proenzime trec n stare activ cnd celula are nevoie endoenzime i desfoar activitatea chiar n celulele n care sunt biosintetizate

exoenzime dei biosintetizate n celule, sunt eliminate n

lichidele din organism, exercitndu-i ac iunea la acest nivel d.p.d.v. chimic enzimele sunt PROTEINE cu rol func ional i pierd puterea catalitic sub ac iunea:

- cldurii; - acizilor i a bazelor tari; - solven ilor organici

2

substan a asupra creia ac ioneaz enzimele = SUBSTRAT

ENZIME
CARACTERISTICI
o permit ca reac iile biochimice s fie considerabil accelerate
De exemplu: o reac ie - n prezen a unei enzime poate dura o secund - n absen a enzimei dureaz 12 zile

o ac ioneaz n cantit i extrem de mici o le regsim intacte la sfritul reac iei o se disting printr-o caracteristic - specificitate o mresc viteza reac iilor prin scderea Eactivare a substratului
3

ENZIME
CARACTERISTICI
Substraturile (A i B) n condi ii normale necesit o cantitate de energie considerabil (E1) pentru a atinge starea de tranzi ie A...B, dup care produsul de reac ie (AB) se poate forma. Enzima (E) creaz un microclimat propice n care A i B pot s ating starea de tranzi ie (A...E...B) mai uor, reducnd astfel cantitatea de energie necesar (E2).
4

ENZIME
NOMENCLATURA
denumire constituit din 3 pr i:
o denumirea substratului o tipul de reac ie o sufixul -az

exemplu: lactat-dehidrogenaza

COOH H C-OH CH3

5

lactatdehidrogenaza -2H2

COOH C=O CH3

acid lactic

acid piruvic

ENZIME
STRUCTURA
edificiu macromolecular complex determinat de nivelurile de organizare structural ale proteinelor

numeroase enzime au o structur binar

o componenta proteic - APOENZIMA o componenta neproteic - COFACTORI

HOLOENZIMA

Activ d.p.d.v. catalitic prin ndeprtarea cofactorului rmne componenta proteic inactiv n form liber
6

ENZIME
STRUCTURA
componenta proteic - APOENZIMA
o manifest propriet ile generale ale proteinelor o stabilete legtura enzimei cu substratul o manifest diferite grade de afinitate pentru cofactor o imprim specificitate de substrat

componenta neproteic - COFACTORI

o sunt indispensabili pentru manifestarea activit ii catalitice o imprim specificitate de ac iune
7

ENZIME
STRUCTURA
componenta neproteic - COFACTORI
1. COENZIME deriva i de la vitamine se ataeaz temporar de apoenzim uor disociabile de apoenzim NAD+, NADP+, FMN, FAD, ATP substan e organice fixate pe apoenzim greu disociabile de apoenzim leg. cov. piridoxalfosfatul, hemul

2. GRUPRI PROSTETICE

3. IONI METALICI
8

- enzimele ce con in ioni metalici = metal-enzime - Mg2+, Mn2+, Cu2+, Zn2+, Fe2+(3+), Mo2+

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o difer de catalizatorii neproteici o proprietate caracteristic - specificitatea DEFINI IE Prin specificitatea unei enzime se n elege proprietatea sa de a ac iona preferen ial numai asupra unui substrat sau grup de substraturi cu caractere chimice comune.

o specificitatea de reac ie o specificitatea de substrat

9

- specificitate absolut - specificitate de grup - stereospecificitatea

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de reac ie (ac iune)
- se manifest asupra unui singur substrat de ctre mai multe enzime, fiecare cataliznd o anumit reac ie - exemplu: un -aminoacid poate constitui substratul pentru mai multe enzime oxidaza H R C COOH + NH 3

H R C COOH NH2

OH
decarboxilaza R C NH 2 + CO 2 H2

tra n s a m in a za
10

CO COOH

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
- se refer la activitatea care o manifest enzimele fa de anumite substraturi SPECIFICITATE ABSOLUT - unele enzime nu ac ioneaz dect asupra unui singur substrat fiind inactive fa de altele cu structur asemntoare - exemplu: ureaza hidrolizeaz numai ureea NH2 ureaza O=C CO2 + 2NH3 NH2 H2O
11

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
SPECIFICITATE ABSOLUT - exemplu: arginaza hidrolizeaz numai arginina

NH2 C=NH NH (CH2)3 HC NH2 COOH

12

NH2 arginaza H2O (CH2)3 HC NH2 COOH ornitina +

NH2 C=O NH2 uree

arginina

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
STEREOSPECIFICITATEA - unele enzime au stereospecificitate fa de izomeria cis-trans - exemplu: fumaraza ac ioneaz numai asupra acidului fumaric i este inactiv asupra izomerului su cis acidul maleic
HOOC H
13

H COOH

fumaraza

HOOC H

H H OH COOH

H2O acid malic

acid fumaric

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat
STEREOSPECIFICITATEA - unele enzime manifest o ac iune specific fa de o anumit form stereoizomer a substratului exemplu: L-aminoacid-oxidazele nu recunsoc dect L-aminoacizii - unele enzime fac distinc ie ntre conforma iile i din legturile glicozidice exemplu: maltaza hidrolizeaz numai legtura (1-4) glicozidic din molecula de maltoz i nu atac legtura (1-4) glicozidic din celobioz
14

ENZIME
SPECIFICITATEA ENZIMELOR
o specificitatea de substrat SPECIFICITATE de GRUP - unele enzime ac ioneaz asupra substraturi apropiate ca structur unei serii de

- exemplu: amilaza hidrolizeaz amidonul, dextrinele, glicogenul hexokinaza catalizeaz fosforilarea unei serii de hexoze n prezen a de ATP

15

ENZIME
MECANISM DE AC IUNE
o pentru ca o reac ie s aib loc cu o vitez apreciabil, moleculele reactan ilor trebuie s fie activate o enzima are capacitatea de a cobor nivelul energetic care condi ioneaz reac ia o astfel moleculele reac ioneaz cu o vitez apreciabil ENZIMELE SCAD NIVELUL ENERGIEI DE ACTIVARE necesar ca o reac ie s aib loc

16

ENZIME
MECANISM DE AC IUNE
o scderea energiei de activare se datoreaz formrii unui complex activat ntre enzim (E) i substrat (S) K1 K2 o ipoteza formrii complexului intermediar activat ES a fost emis de Michaelis i Menten

K3

17

ENZIME
MECANISM DE AC IUNE
o la formarea complexului activat, substratul se fixeaz pe centrul activ al enzimei o enzima particip cu o por iune limitat din structura sa o pe aceast por iune exist grupri capabile s atrag i s fixeze molecula substratului o ansamblul acestor grupri chimice = centru activ = centru catalitic
18

ENZIME
MECANISM DE AC IUNE
o ntre centrul activ i molecula substratului exist complementarit i conforma ionale i chimice care permit asamblarea lor o ipoteza LACT-CHEIE

19