Universidade Federal de Gois Faculdade de Farmcia

Extrao e Determinao de Lipdios Totais em Castanha de Caju Torrada pelo Mtodo de Bligh e Dyer

Aluna: Tayse Silva dos Santos Professoras: Dra. Virgnia Farias Alves e Fernanda Garrote Marques Turma: A2

Trabalho N.4 Como exigncia da disciplina de Qumica e Bioqumica de Alimentos

Goinia, 15 de janeiro de 2012.

1 INTRODUO
A castanha de caju o verdadeiro fruto do cajueiro (Anacardium occidentale L.), explorado comercialmente nos continentes Asitico, Africano e Sul-Americano. Destacam-se, como os principais exportadores da amndoa de castanha de caju (ACC), a ndia, o Vietn e o Brasil (ARAJO; FERRAZ, 2006). A castanha constituda de trs partes: casca, pelcula e amndoa (PAIVA; GARRUTTI; SILVA NETO, 2000): A casca, que representa 65-70% do peso da castanha, constituda por um epicarpo coriceo, atravessado por um mesocarpo esponjoso, cujos alvolos so preenchidos por um lquido custico e inflamvel - o LCC (lquido da casca da castanha); A pelcula, ou tegumento da amndoa, que representa cerca de 3% do peso da castanha, rica em tanino; A amndoa, que a parte comestvel da castanha, formada por dois cotildones de cor marfim, representa cerca de 28-30% do seu peso, porm no processo industrial o rendimento mdio de apenas 21% (SOARES, 2005). Segundo a base de dados do United States Department of Agriculture - USDA (2012), a amndoa da castanha de caju crua fonte de minerais, entre estes, ferro, fsforo, magnsio, clcio, potssio e tambm selnio. Entre as principais vitaminas presentes na amndoa esto a vitamina E, K, B6 e a vitamina C. A riqueza em protenas um dos principais destaques da amndoa da castanha de caju que apresenta em sua composio nove aminocidos essenciais. A sua frao lipdica composta predominantemente de cidos graxos monoinsaturados (cido oleico), cujo consumo pode influenciar na reduo do teor de colesterol no sangue (ANDRADE NETO, 2006). Do total da produo brasileira de amndoas, estima-se, no setor de cajucultura, que apenas 20% so destinados ao consumo interno e os 80% restantes so exportados (FIGUEIRDO JNIOR, 2006). As caractersticas fsico-qumicas que esto presentes no fruto podem variar segundo o cultivo e as condies ambientais da regio (BARCEL COLL et al., 2005; STENZEL et al., 2006). Segundo Matta et al. (2004), a preservao das caractersticas originais dos alimentos pelo maior tempo possvel, aps sua transformao, um dos grandes objetivos da indstria de alimentos; e as condies do ambiente e do armazenamento (tais como a temperatura, idade e luminosidade), bem como o tipo de embalagem utilizada so aspectos que devem ser analisados e controlados, visando manuteno da qualidade dos produtos durante a vida de prateleira. As amndoas da castanha de caju podem ser comercializadas cruas ou tostadas. No Brasil, o tostar das castanhas geralmente feito pelo processo de fritura. Assim, se for de interesse comercializar as amndoas fritas, deve-se proceder fritura das amndoas j separadas por tamanho, para permitir uma fritura uniforme. O equipamento pode ser o mesmo utilizado para batata frita, a gs, com controle de temperatura. O leo deve ser de boa qualidade, com recomendao de uso de gordura hidrogenada, para no conferir sabor estranho amndoa, sendo os leos de milho ou de soja mais utilizados (PAIVA; GARRUTI; SILVA NETO, 2000). Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a qualidade fsico-qumica da castanha de caju tostada quanto ao teor de lipdios totais determinado pelo mtodo de Bligh e Dyer.
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2 MATERIAIS E MTODOS
2.1 Materiais 2.1.1 Reagentes Clorofrmio p.a Metanol p.a Soluo de sulfato de sdio 1,5% (1,5g de sulfato diludo em 100 mL de gua destilada) Sulfato de sdio p.a (Na2SO4) 2.1.2 Equipamentos e Vidrarias Pipetas Tubos de vidro de 250 x 25 mm, com tampa de rosca com teflon ou PVC (70 mL) Proveta de 25 mL Funil Papel de filtro qualitativo Agitador rotativo para tubos Cadinho Estufa 105C Dessecador Pera Bquer 2.1.3 Amostra Castanha de caju (torrada) 2.2 Mtodos Pesou-se no tubo de rosca 2,128g de amostra (castanha de caju) moda e homogeneizada. Adicionou-se 10 mL de clorofrmio, 20 mL de metanol e 8 mL de gua destilada. Agitou-se no agitador rotativo por 30 minutos (lentamente). Adicionou-se 10 mL de clorofrmio e 10 mL de soluo de sulfato de sdio 1,5%. Agitou-se vigorosamente por 2 minutos. Deixou-se separar as camadas naturalmente por 1 hora e 30 minutos. Succionou-se a camada metanlica superior e descartou-se. Adicionou-se ao papel de filtro 1g de Na2SO4 e filtrou-se a camada inferior (clorofrmica a soluo deve ficar lmpida) para uma proveta. Mediu-se 5 mL do filtrado e transferiu-se para um cadinho (este foi seco anteriormente ao se colocar em estufa a 105C por 30 minutos, e esfriado em dessecador por 20 minutos e pesou-se o cadinho vazio) ATENO: no tocar no cadinho com as mos aps seco. Evaporou-se o solvente em estufa a 105 C por 45 minutos, esfriou-se o cadinho com amostra em dessecador por 20 minutos e pesou-se.
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Anotou-se os pesos do cadinho vazio e do cadinho com a amostra.

2.3 Clculos ( ) ( )

3 RESULTADOS
Com os valores do cadinho com a amostra e do cadinho vazio, calculou-se o peso dos lipdios em gramas: Peso dos lipdios = Cadinho cheio cadinho vazio Peso dos lipdios = 40,8567g 40,6023g Peso dos lipdios = 0,2544g Assim, com esse resultado pode-se calcular a porcentagem de lipdios presentes na amostra.

4 DISCUSSO
A extrao de leo com solvente um processo de transferncia de constituintes solveis (o leo) de um material inerte (a matriz graxa) para um solvente com o qual a matriz se acha em contato. Os processos que ocorrem so meramente fsicos, pois o leo transferido para o solvente recuperado sem nenhuma reao qumica (REGITANO-DARCE; LIMA, 1987). A insolubilidade dos lipdios em gua torna possvel sua separao das protenas, carboidratos e da gua nos tecidos. Como os lipdios tm uma grande faixa de relativa hidrofobicidade, praticamente invivel a utilizao de um nico solvente universal para a extrao dos lipdios (BRUM; ARRUDA; REGITANODARCE, 2009). A extrao de lipdios uma determinao importante em estudos bioqumicos, fisiolgicos e nutricionais dos mais diversos tipos de alimentos e, portanto, deve ser realizada com cuidado. Algumas amostras requerem cuidados especiais para a obteno da frao lipdica, pois fatores como co-extrao dos componentes no-lipdicos e a oxidao indesejada podem influenciar a qualidade final da frao lipdica. Os procedimentos clssicos idealizados por Soxhlet em 1879, com refluxo de solvente por muitas horas, devem ser evitados, j que favorecem as reaes de peroxidao e de hidrlise (KATES, 1972), podendo comprometer resultados analticos posteriores, como a quantificao de certos componentes lipdicos. Um dos procedimentos de extrao mais versteis e efetivos, que supera as dificuldades mencionadas, a metodologia de Bligh & Dyer, uma verso
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simplificada do procedimento clssico usando clorofrmio-metanol proposto por Folch et al (BRUM; ARRUDA; REGITANO-DARCE, 2009). O mtodo Bligh-Dyer utiliza a mistura de trs solventes, clorofrmio-metanolgua. A amostra misturada com o metanol e clorofrmio que esto numa proporo que formam uma s fase com a amostra. Adiciona-se mais clorofrmio e gua promovendo a formao de duas fases distintas, uma de clorofrmio, contendo lipdios, e outra de metanol mais gua, contendo substncias no lipdicas. A fase do clorofrmio com a gordura isolada e, aps a evaporao do clorofrmio, obtm-se a quantidade de gordura por pesagem (PARK; ANTONIO, 2006). A formao desse sistema bifsico est baseada na teoria do equilbrio lquido-lquido desses trs componentes (clorofrmio/metanol/gua) (CECCHI, 1999). Apesar de algumas desvantagens, como a toxidez dos solventes usados e a indesejvel extrao dos contaminantes no-lipdicos da fase orgnica, os mtodos de Folch et al. e Bligh e Dyer so largamente utilizados, tanto como propostos originalmente, quanto modificados (BRUM; ARRUDA; REGITANO-DARCE, 2009). Neste presente estudo utilizou-se a metodologia de Bligh-Dyer como descrita acima. O valor obtido para lipdios totais na castanha de caju analisada foi de 47,82%. Esse resultado mostra concordncia com muitos valores observados na literatura para castanha de caju torrada. Segundo o United States Department of Agriculture - USDA (2012) a amndoa da castanha de caju crua possui 43,85% de lipdios totais, a castanha de caju tostada sem leo, 46,35% e a tostada em leo, 47,77%, valor este bem prximo ao encontrado. Vale ressaltar que a adio de sal no afeta os valores. J na TACO (2011), o valor de lipdios totais para castanha de caju torrada e salgada de 46,3%, valor bem semelhante ao da castanha de caju tostada sem leo da USDA.

Fonte: Taco (2011)

Cavalcante (1983) apresentou 44,52% no teor de lipdio para as amndoas cruas e 57,20% para as amndoas tostadas (bem acima do obtido de 47,82%), enquanto que Andrade (1984), em seu estudo sobre os aspectos da industrializao da castanha de caju, observou uma diferena bem inferior entre os dois tipos de amndoas, com valores de 45,30% e 45,71% para as amndoas cruas e tostadas, respectivamente. Talvez porque as amndoas tostadas no passassem pelo processo de fritura em leo. Em outro estudo foi feita a determinao dos lipdios
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totais obtendo-se um valor de 46,2% (LIMA; GONALVES, 1998). No estudo de Melo et al. (1998) o teor de lipdios obtido para a amndoa crua foi de 46,28% j na amndoa tostada, a mdia encontrada foi de 48,35%. Lima, Garca e Lima (2004) encontraram valores semelhantes de lipdios totais 46,64% para a amndoa crua. Akinhanmi, Atasie e Akintokun (2008) encontraram resultados bem divergentes dos anteriores (49,1%), porm a metodologia utilizada foi a de Soxhlet, o que pode ter contribudo para a divergncia dos resultados ou ainda pela espcie do cajueiro de onde a castanha foi obtida e pelos tratos culturais aos quais foi submetido. No estudo de Costa et al. (2009) os valores de lipdeos variam de 43,33 a 48,00g com teores mdios de 45,43g e 45,68g para as amndoas cruas e as amndoas tostadas e salgadas, respectivamente. Oliveira et al. (2012) obtiveram 47,73g de lipdios totais para castanha de caju torrada, valor tambm bem prximo ao obtido neste estudo. Valores maiores so esperados para amndoas tostadas, j que a amndoa geralmente frita utilizando-se leo (PAIVA; SILVA NETO; PAULA PESSOA, 2000; PAIVA; GARRUTI; SILVA NETO, 2000).

5 CONCLUSO
A extrao de lipdios uma determinao importante em estudos bioqumicos, fisiolgicos e nutricionais dos mais diversos tipos de alimentos, juntamente com os outros nutrientes. Vrias metodologias podem ser utilizadas para a determinao de lipdios totais em alimentos. Qual mais adequada a ser utilizada depende do alimento a ser analisado. A metodologia de Bligh e Dyer uma metodologia vantajosa, pois feita sem o uso de calor que pode levar a degradao do lipdio por oxidao e pode ser feita para alimentos secos ou midos com eficincia. Porm, os solventes utilizados nas extraes podem ser inviveis, alterando os resultados. Por isso, a metodologia deve ser feita com muito cuidado para no deixar resduos desses solventes (BRUM; ARRUDA; REGITANO-DARCE, 2009). O valor obtido para lipdios totais (47,82%) na castanha de caju analisada mostrou-se dentro do esperado quando comparado com a literatura. Apesar disso, aconselha-se que a determinao seja feita em triplicata para dar maior confiabilidade ao resultado obtido.

6 BIBLIOGRAFIA
AKINHANMI, T. F.; ATASIE, V. N.; AKINTOKUN, P. O. Chemical composition and physicochemical properties of cashew nut (Anacardium occidentale) oil and cashew nut shell liquid. Journal of Agricultural, Food and Environmental Sciences, v. 2, n.1, 2008. ANDRADE NETO, J. C. Competitividade na pequena produo agroindustrial: estudo na agroindstria da castanha de caju. Dissertao (Mestrado em Engenharia de Produo). Universidade Federal do Rio Grande do Norte. Natal: UFRN, 2006. 78p.

ANDRADE, J. S. Aspectos da industrializao da castanha de caju (Anacardium occidentale L.). Dissertao (Mestrado em Tecnologia de Alimentos), Universidade Federal do Cear. Fortaleza, 1984. 187p. ARAJO, M. C.; FERRAZ, A. C. O. Efeito da umidicao, tratamento trmico e deformao sobre a decorticao da castanha de caju CCP-76 por meio de impacto nico e direcionado. Engenharia Agrcola, Jaboticabal, v. 26, n. 2, ago. 2006. BARCEL COLL, J.; R. NICOLS RODRGUEZ, G.; SABATER GARCA, B. Fisiologia vegetal. Madrid, Espaa: Editorial Pirmide, 2005. 566 p. BLIGH E. G; DYER W. J. A rapid method of total lipid extraction and purification. Can. J. Biochem. Physiol. v. 37, p. 911-917, 1959. BRUM, A. A. S.; ARRUDA, L. F.; REGITANO-DARCE, M. A. B. Mtodos de extrao e qualidade da frao lipdica de matrias-primas de origem vegetal e animal. Quim. Nova, v. 32, n. 4, p. 849-854, 2009. CAVALCANTE, J. F. M. Une contribution a l'etude de la valuer nutritive de la noix de cajou (Anacardium occidentale L.) an Bresil. Blgica, 1983. 61p. Dissertao (Mestrado em Sciences Naturelles Appliquees), Universite Catholique de Louvain, CECCHI, H. M. Fundamentos Tericos e Prticos em Anlise de Alimentos 1 Edio. Editora da Unicamp. 1999. COSTA, J. M. C.; GUERRA, K. T.; MAIA, G. A.; ROCHA, E. M. F. F. Avaliao fsicoqumica e microbiolgica da amndoa da castanha de caju. Cincias Exatas e da Terra, Cincias Agrrias e Engenharias, Ponta Grossa, v. 15, n. 3, p. 181-187, 2009. FIGUEIRDO JNIOR, H. S. Desafios para a cajucultura no Brasil: o comportamento da oferta e da demanda da castanha de caju. Revista Econmica do Nordeste, v. 37, n. 4, Fortaleza, 2006. FOLCH, J.; LEES, M.; STANLEY, G. H. S.; A Simple Method For The Isolation And Purification Of Total Lipides From Animal Tissues. J. Biol. Chem. v. 226, p. 497-509, 1957. KATES, M.; Techniques of lipidology: isolation, analysis and identification of lipids, Elsevier Applied Science: London, cap. 2, 1972. LIMA, A. C.; GARCA, N. H. P.; LIMA, J. R. Obteno e caracterizao dos principais produtos do caju. Boletim Ceppa, Curitiba, v. 22, n. 1, p. 133-144, 2004. LIMA, J.; GONALVES, L.. Caracterizao Da Frao Llpdica De Amndoas De Castanha De Caju Fritas E Salgadas. Boletim do Centro de Pesquisa de Processamento de Alimentos, Curitiba, v.16, n. 2, p. 131-138, jul./dez. 1998. Disponvel em: http://ojs.c3sl.ufpr.br/ojs2/index.php/alimentos/article/view/14012/9432. Acesso em: 16 Jan. 2013. MATTA, V. M.; CABRAL, L. M. C.; SILVA, L. F. M. Suco de acerola microltrado: avaliao da vida-de-prateleira. Revista Cincia e Tecnologia de Alimentos,
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Campinas, v. 24, n. 2, June 2004. Disponvel em: <http://www.scielo.br/ scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0101-20612004000200023&lng=en&nrm=iso>. Acesso em: 15 de janeiro 2013. MELO, M. L. P.; MAIA, G. A.; SILVA, A. P. V.; OLIVEIRA, G. S. F.; FIGUEIREDO, R.W. Caracterizao fsico-qumica da amndoa da castanha de caju (Anacardium occidentale L.) crua e tostada. Cincia e Tecnologia de Alimentos, Campinas, v.18, n.2, p.184-187, 1998. OLIVEIRA, N. H.; AZEVEDO, R. M. M. C.; MONTEIRO, L. C.; LOBO, A. Relatrio sobre anlise de teor de gordura e fitosteris em nuts (amndoa, amendoim, avel, castanha de caju, castanha do par, macadmia e nozes). Programa De Anlise De Produtos. Ministrio Do Desenvolvimento, Indstria E Comrcio Exterior Instituto Nacional De Metrologia, Normalizao E Qualidade Industrial (Inmetro), Rio de Janeiro, 2012. PAIVA, F. F. de A.; GARRUTI, D. dos S.; SILVA NETO, R. M. da. Aproveitamento Industrial do caju. Fortaleza: Embrapa-CNPAT/SEBRAE/CE, 2000. 88p. (EmbrapaCNPAT. Documentos, 38). PAIVA, F. F. de A.; SILVA NETO, R. M.; PAULA PESSOA, P. F. A. de. Minifbricas de processamento de castanha de caju. Fortaleza: Embrapa-CNPAT, 2000. 22p. (EMBRAPACNPAT. Circular Tcnica, 7). PARK, K. J.; ANTONIO, G. C., Analises de materiais biolgicos. Universidade Estadual de Campinas Faculdade de Engenharia Agrcola, 2006. REGITANO-d'ARCE, M. A. B.; LIMA, U. A. Emprego do lcool etlico na extrao de leo de sementes de girassol (Helianthus annuus L.). Cincia e Tecnologia de Alimentos, Campinas, v.7, n.l, p.1-14, 1987. SOARES, M. B. Incluso do farelo da amndoa da castanha de caju na rao de postura para codornas (Coturnix coturnix japonica). Dissertao apresentada a coordenao do curso de ps graduao em Zootecnia, Fortaleza-2005. STENZEL, N. M. C.; NEVES, C. S. J. V.; MARUR, C. J.; SCHOLZ, M. B. dos S.; GOMES, J. C. Maturation curves and degree days accumulation for fruits of Folha Murcha orange trees. Scientia Agricola, v.63, n.3, p.31-36, 2006. TACO. Tabela brasileira de composio de alimentos / NEPA Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP).- 4. ed. rev. e ampl.. -- Campinas, 2011. USDA. U. S. Department of Agriculture, Agricultural Research Service. National Nutrient Database for Standard Reference, Release 25. Nutrient Data Laboratory, 2012. Disponvel em: http://ndb.nal.usda.gov/ndb/search/list. Acesso em 16 de janeiro de 2013.