BASES CIENTFICAS DA IDENTIFICAO HUMANA POR DNA

Na espcie humana, o material gentico diplide e se localiza nos ncleos das clulas constituindo 23 pares de cromossomos. Os gametas, elementos haplides, apresentam 23 cromossomos. Na fertilizao, com a unio de um espermatozide e um vulo, o nmero diplide da espcie reconstitudo na clula ovo. Assim, sem exceo, nos indivduos da espcie, cada progenitor contribui com 23 cromossomos na formao de cada um dos seus descendentes. Como os cromossomos so elementos formados por cido desoxi-ribonucleico (DNA), observa-se, na espcie humana, que o DNA herdado quantitativa e qualitativamente, na proporo de 50%, de cada um dos progenitores. A tipagem humana atravs do conhecimento da estrutura do DNA, a mais moderna metodologia aplicada mundialmente na identificao humana, tem como bero experimentos realizados h menos de 20 anos, quando, em 1985, Jeffreys e colaboradores descreveram a ocorrncia no genoma humano de regies hipervariveis caracterizadas por apresentarem seqncias nucleotdicas repetidas "in tandem". Estas observaes levaram constatao da ocorrncia de um polimorfismo de tamanho de fragmentos de restrio ("RFLP-restriction fragment lenght polymorphims") quando da digesto do DNA por enzima de restrio, cujo stio de ao se localiza nos limites das repeties "in tandem". As regies hipervariveis do DNA podem ser devidas trocas de seqncias de nucleotdeos e tem como conseqncia a criao ou eliminao de stios para enzimas de restrio. Este tipo de polimorfismo do genoma pode ainda ser decorrente da insero ou deleo de nucleotdeos ou de segmentos de DNA em posies aleatrias da molcula. Por qualquer desses processos, so gerados fragmentos allicos de tamanhos diferentes. As diferentes seqncias do DNA contendo unidades repetitivas "in tandem" se caracterizam como alelos codominantes que so transmitidos prole de modo mendeliano. O avano dos estudos demonstrou a ocorrncia de um nmero significativo de seqncias que se repetiam "in tandem" em diferentes cromossomos humanos. O conhecimento da sequncia de nucleotdeos que compem a unidade que se repete em um locus VNTR possibilita a deteco do mesmo, e a determinao do seu tamanho, atravs de uma sonda molecular especfica. O conjunto de alelos de loci VNTRs especfico para cada indivduo, com exceo de gmeos univitelinos. O polimorfismo verificado em regies constantes do genoma humano, denominadas de VNTR (Variable Number of Tandem Repeats), foi desde ento aplicado na identificao humana individual especfica. A anlise do polimorfismo de tamanho das seqncias VNTRs do DNA humano pode ser procedida a partir de quantidades to pequenas quanto 0,1 - 1 mg da macromolcula. Nos anos que se seguiram, estudos realizados por diferentes grupos levaram descoberta no DNA genmico de outras seqncias hipervariveis, cujas unidades repetitivas eram significativamente menores quando comparadas s VNTR. A deteco de tais seqncias, denominadas de STR (Small Tandem Repeats), em amostras de DNA humano dependente de amplificao pela tcnica de PCR. Os fragmentos de diferentes tamanhos detectados aps amplificao de diferentes loci STR produziro um conjunto de alelos ou perfil allico especfico para cada indivduo.

Para a anlise de DNAs preparados a partir de sangue ou semem desidratados, ossos, bulbo capilar, saliva, pele, esfregaos anal, oral ou vaginal, por exemplo, so requeridas amplificaes por PCR de seqncias STRs tendo em vista ainda a, muitas vezes, diminuta quantidade de DNA (ordem de nanogramas) e o alto grau de degradao das molculas de DNA. A comparao do perfil allico de uma amostra biolgica com aquele de um suspeito determinar se ele foi ou no o "doador" daquela amostra biolgica. Desta forma, a tipagem por DNA de amostras biolgicas coletadas em cenas de crime, de restos mortais, etc. passou a ser utilizada mundialmente para dar suporte investigaes criminais. No incio da ltima dcada, o DNA mitocondrial, molcula de DNA extra-nuclear presente apenas nas mitocndrias, passou a fazer parte do arsenal biotecnolgico utilizado para a identificao humana. O DNA mitocondrial uma herana exclusivamente materna. A molcula contm 16.569 pares de bases e foi completamente sequenciado por Anderson e colaboradores em 1981. Atravs desta mais recente metodologia, um indivduo pode ser identificado atravs da comparao do seu DNA mitocondrial com aqueles de seus parentes genticos maternos. Investigaes atravs deste tipo de DNA consistem em sequenciar e comparar as regies hipervariveis HVI e HVII do DNA mitocondrial de evidncias biolgicas e de indivduos referncias luz do conhecimento da sequncia padro publicada por Anderson e colaboradores. A anlise do DNA mitocondrial a metodologia de escolha para a identificao humana a partir de ossos e dentes obtidos de restos humanos antigos, investigaes criminais onde as nicas evidncias so pelos sem bulbos ou quando somente DNA altamente degradado obtido de evidncias biolgicas. A metodologia ainda utilizada em estudos antropolgicos e evolutivos. O avano do conhecimento cientfico sobre a estrutura da molcula de DNA resultou na gerao de ferramentas tecnolgicas que se tornaram imprescindveis na rea da identificao humana. As tcnicas de tipagem humana atravs da anlise de regies hipervariveis do DNA genmico e o sequenciamento do DNA mitocondrial permitem a identificao inequvoca de indivduos e a exata determinao da origem de qualquer material biolgico. A partir da descoberta das regies hipervariveis no DNA, investigaes genticas tm possibilitado a resoluo de disputas envolvendo direito de famlia e de nacionalidade. O emprego das inovaes surgidas em conseqncia da evoluo do conhecimento cientfico nessa rea se estendeu investigao criminal e, hoje, profissionais com profundos conhecimentos de Biologia Molecular, Gentica e Estatstica, expertos em identificao humana por DNA, fazem parte dos quadros tcnico-cientficos de servios relacionados com a segurana pblica em diversos pases. Assim, observado mundialmente o emprego da tipagem humana por DNA como instrumento adicional importante na produo de provas relacionadas com aes de investigao de paternidade, maternidade, crimes sexuais e homicdios, por exemplo, tornando-se de relevante importncia para os poderes judicirio e executivo. Nos dias atuais, o emprego desta tecnologia amplo em processos que envolvem material biolgico como evidncia, visto que, devido ao seu alto poder discriminativo, possvel vincular ou no suspeitos a diversos tipos de crimes.