Insectes Plantes

COLLOQUES
Interactions insectes-plantes
ORsrOM 1 CIRAD
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes
26-27 octobre 1995
Montpell ier, France
CIRAD
Illustrations de couverture
Coupe transversale d'un apex de manioc, montrant un trajet intercellulaire et intracellulaire des stylets de cochenille du manioc
Clich: C. Nardon (INSA, CNRS, Villeurbanne, France), P.-A. Calatayud (LIN, ORSTOM, Montpellier, France)
Chenille de Chilo suppressalis dans une tige de riz
Clich: B. Vercambre (CiRAD, Montpellier, France)
Paul-Andr CALATAYUD et Bernard VERCAMBRE
diteurs
26-27 octobre 1995, Montpellier, France
P.-A. CAlATAYUD, B. VERCAMBRE {dit.}, 1996.
Interactions insectes-plantes.
Actes des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes
26-27 octobre 1995, Montpellier, France. Collection Colloques, CIRAD,
Montpellier, France, 96 p.
Remerciements
Les organisateurs tiennent remercier les personnes suivantes qui, par leurs soutiens
financier et logistique, ont permis la mise en uvre de cet atelier, l'laboration de ces actes
et la diffusion de ce document:
- Monsieur G. MATHERON (prsident du centre de Montpellier, CI RAD) ;
- Messieurs J.-L. NOTIEGHEM (MIDEC), J.-c. FOLLIN (directeur scientifique, ClRAD-CA),
M. VAISSAYRE (unit de recherche entomologie applique, CI RAD-CA) ;
- Monsieur G. FABRES (unit de recherche relations plantes parasites ravageurs,
ORSTOM) ;
- Monsieur G. RIBA (dpartement de zoologie, INRA) ;
- Madame F. FERRON (INRA) ;
- Mesdames J. SALIN et C. MORTIER (unit de recherche entomologie applique,
ClRAD-CA), Messieurs J.-P. GillES (prsidence du centre de Montpellier, CIRAD)
et P. GONDOT (unit de recherche entomologie applique, CIRAD-CA) ;
- Monsieur P. RONDEAU (service des ditions, ORSTOM) ainsi que
le service des publ ications, de l'information et de la documentation du ClRAD-CA
pour la codition de ces actes.
1996 ORSTOM et ClRAD
ISBN 2-7099-1346-1 (ORSTOM)
ISBN 2-87-614-259-7 (CI RAD)
ISSN 1264-11 2X
Printed by ClRAD
Avant-propos
C
et atelier existe depuis 1990 et runit chaque anne tous ceux qui travaillent en France
sur les ({ interactions insectes-plantes . Cette anne, le thme choisi a port sur les
modifications de la physiologie de la plante dans les relations insectes ravageurs-
plantes et incidence de l'tat physiologique ou phnologique de la plante sur la biologie des
phytophages. Comme chacun le sait, les facteurs environnementaux (sol, climat...) influencent
la physiologie de la plante et, corrlativement, les interactions plantes-ravageurs. Ces obser-
vations nous ont conduits rflchir, au cours de ces journes, aux questions suivantes:
1) Comment l'tat physiologique de la plante (stade phnologique... ) peut-il influencer le
comportement et le dveloppement des insectes ravageurs?
2) Comment les stress abiotiques (stress hydrique... ) peuvent-ils modifier la rsistance des plantes aux
ravageurs?
3) Comment valider une tude faite en laboratoire dans le milieu naturel et inversement?
A titre de comparaison et d'introduction, des communications sur les modifications de la
physiologie de la plante lors de stress abiotiques (stress hydrique.. J, lors de stress biotiques
(interactions plantes micro-organismes) et sur l'importance du phylloplan et de sa physiologie
dans les relations plantes-insectes ont t proposes.
Ce document est scind en deux parties: la premire rassemblant les communications
d'introduction et la deuxime exposant celles relatives aux trois questions mentionnes
ci-dessus. A l'issue de chaque communication, et selon les possibilits, des questions-rponses
et des discussions sont prsentes.
Voici quelques-unes des rflexions qui nous sont parvenues avant le droulement de ces
journes.
Guy RIBA (INRA)
Je tiens vous tmoigner l'importance que j'accorde ce type de rencontres qui sont
l'origine de bilans actualiss, d'changes sur de nouvelles mthodes ou techniques, de rflexions
sur des perspectives.
Yves GILLON (ORSTOM)
Thme trs prometteur, mme s'il n'est pas nouveau.
Franois LIEUTIER (1 NRA)
Une comparaison entre des modifications de la plante dues au stress hydrique (ou autre stress
abiotique) et des modifications dues aux stress biotiques est, certes, intressante. Mais il est plus
intressant d'examiner les modifications causes par les stress abiotiques dans les relations
insectes-plantes. Je citerais par exemple: les consquences du stress hydrique, ou de l'enrichis-
sement en CO
2
, ou de l'enrichissement en ozone, sur les mcanismes de rsistance; lesquels
peuvent tre soit stimuls, soit freins, selon les ravageurs et l'intensit du stress.
Claude WELCKER (INRA)
Notre programme a pour objectif d'identifier de nouvelles sources de rsistance
Spodoptera frugiperda (noctuelle dfoliatrice), et de les utiliser en slection pour l'amlioration
du rendement et de la stabilit du rendement dans la rgion carafbe. Bien que nos mthodes
aient fortement volu en quelques annes, notamment avec la prise en compte des effets
d'interaction gnotype-milieu pour l'valuation de la rsistance, un certain nombre de questions
demeure au sujet de la dynamique de ralisation des dgts selon les conditions de croissance et
de dveloppement des plantes (et des insectes), sur l'interaction avec la vigueur (induite ou
hybride par exemple) ...
CAlATAYUD P.A.. VERCAMBRE B. (dil.), 1996.
Actes des S' journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
2627 octobre 1995, Montpellier, France.
Colloques, ClRAO-CA, Montpellier. France. 96 p.
Sommaire
Premire partie
Rsistance des plantes la scheresse: mcanismes physiologiques
T. LAMAZE, D. TOUSCH, X. SARDA, C. GRIGNON, D. DEPIGNY-THIS, P. MONNEVEUX 9
Contribution de la cytologie l'tude des mcanismes de dfense aux attaques parasitaires
M. NICOLE, B. BOHER, C. VAUDE, C. MARTINEZ, P.-A. CALATAYUD, K. KPEMOUA, C. DAAYF , J.-F. DANIEL,
E. BRESSON, J.-L. SARAH, C. ANDARY, J.-P. GEIGER 19
Influence des conditions de milieu sur la prdisposition des plantes aux maladies: synthse sur le cas
des bactrioses des arbres fruitiers noyau
A. VIGOUROUX 29
Les relations insectes-plantes vues sous l'angle de la physiologie vgtale sur l'exemple
de la pyrale du mas
F. FERRON 39
Informations biochimiques prsentes la surface des feuilles. Implications dans la slection
de la plante hte par un insecte
S. DERRIDj, B.R. Wu 43
Deuxime partie
Phnologie du fruit du cafier en relation avec l'infestation de Hypothenemus hampei Ferr.
B. DECAZY 55
Relation entre la phnologie du cacaoyer et l'apparition de races physiologiques chez Earias bip/aga
(Wlk) Noctuidae
J. NGUYEN-BAN 57
Comportement de slection de la plante hte par la cochenille farineuse du manioc P. manihoti :
rle des composs biochimiques
S. RENARD, B. LE R, P.-A. CALATAYUD, G. LOGNAY, C. GASPAR 59
Raction du pin sylvestre aux agressions par les scolytes et leurs champignons associs:
action des composs phnol iques sur les agresseurs
E. BOIS, F. LEUTIER, A. YART 63
Influence de la plante sur les caractristiques dmographiques d'Epidinocarsis /opezi, parasito.,.de
de la cochenille farineuse du manioc
R. SOUISSI, P.-A. CALATAYUD, B. LE R 65
Influence de la prsence des fourmis ou des Phycitinae sur la production de corps nourriciers
par Cecropia obtusa Trecul. rCecropiaceaeJ en Guyane franaise
P. SOLANO, M. BELIN-DEPOUX 68
Rsistance du pin sylvestre au champignon Ophiostoma ips (naturellement associ au scolytide
/ps sexdentatus), effets de diverses modalits de stress hydriques
L. CROIS, F. LEUTIER, E. DREYER 70
Influence du statut hydrique de jeunes pommiers en pots sur l'abondance de l'araigne rouge
Panonychus ulmi
M.-H. SAUGE, G. FAUVEL 72
Composition biochimique de la sve phlomienne de la luzerne et performances du puceron du pois:
effet d'un dficit hydrique
C. GiROUSSE 75
Influence de l'tat physiologique du colza sur le potentiel reproducteur de deux charanons phytophages
J. LERIN 78
La vigueur accrot la sensibilit du pin maritime la pyrale du tronc, Dioryctria sylvestrella
H. JACTEL, P. MENASSIEU, M. KLEINHENTl 82
Nouvelle technique de slection des cacoyers tolrants aux mirides. Relation entre les rsultats
de microtests et les donnes d'observations en champ
J. NGUYEN-BAN 85
La rsistance des cafiers la chenille mineuse des feuilles, Perileucoptera coffeella Gurin-Mneville.
Validation des tests prcoces
B. DECAlY 86
Etude du comportement du riz vis--vis de Chilo suppressalis
B. VERCAMBRE, M. BETBDER-MATIBET(t), M. RENAND 88
Resistance de Cucumis melo L. Liriomyza trifolii (Burgess), Diptera : Agromyzidae
D. BORDAT, M. PITRAT, C. DOGIMONT, C. PAGS 90
Effets sur le manioc de la dfoliation artificielle et naturelle par le criquet puant (Zonocerus variegatus L.)
P. LE GALL, Y.-R. SOUlA 92
Liste des participants 95
Premire partie
Texte prsent dans Le slectionneur franais,
1995 (45) : 75-85.
CAlATAYUD P.-A. VfRCAMBRf B. (l'dit.). 1996.
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes.
26-27 octobre 1995. Montpellier, France.
Colloques, ClRAD-CA. Montpellier. France, 96 p.
Rsistance des plantes la scheresse :
mcanismes physiologiques
1. LAMAZE(l), D. TOUSCH(l), X. SARDA(1), C. GRIGNON(l), D. DEPIGNY-THls(2),
P. MONNEVEUX(2)
(1) INRA-ENSA-CNRS, URA 573/UMII, Biochimie et physiologie vgtales,
34060 Montpellier Cedex l, France.
(2) ENSA-INRA, Gntique et amlioration des plantes, 34060 Montpellier Cedex l, France.
1Introduction
[q Les proprits chimiques et physiques de l'eau
expliquent pourquoi la vie lui est intimement lie. Les
molcules d'eau sont capables d'tablir entre elles
des forces d'attraction (liaisons de type hydrogne)
relativement fortes. 1\ rsulte de ces liaisons que l'eau
est liquide temprature ambiante contrairement aux
autres composs de mme masse molculaire (NH
3
,
CO
2
, N
2
par exemple). Sa faible viscosit lui permet
de migrer facilement travers les tissus et dans les
vaisseaux conducteurs. Mais les forces cohsives
entre molcules sont suffisamment importantes pour
que la traction exerce sur la colonne liquide par
l'vaporation dans les feuilles se rpercute jusqu' la
racine. Ainsi la sve peut gagner les parties ariennes
les plus hautes. L'eau est essentielle l'quilibre ther-
mique de la plante. En effet. sa chaleur spcifique
leve lui permet d'absorber ou de perdre d'impor-
tantes quantits d'nergie en minimisant les varia-
tions de la temprature cellulaire. De plus, sa forte
chaleur latente de vaporisation permet un refroidisse-
ment efficace des feuilles par la transpiration. A cause
de sa constante dilectrique trs leve, l'eau est un
excellent solvant pour les lectrolytes, et la plupart
des molcules du protoplasme lui doivent leur acti-
vit chimique spcifique ou leur conformation. Enfin,
si l'eau est chimiquement relativement inerte, elle
intervient dans la photosynthse comme donneur
d'lectrons et source de protons.
La plupart des fonctions physiologiques dpendent de
l'eau et des substances qui y sont dissoutes. Or, les
vgtaux terrestres, de rares exceptions prs, ne
possdent pas de rserve interne d'eau et vivent dans
un environnement o les quantits disponibles de ce
compos sont minemment variables. Dans cet
article, nous dcrivons les rpercussions sur la phy-
siologie du vgtal d'une baisse de la disponibilit de
l'eau dans le milieu. Nous considrons les rpercus-
sions l'chelle de l'individu, de l'organe ou du tissu
et au plan cellulaire ou molculaire. Nous prsentons
le caractre adaptatif de certaines rponses pour
tenter de les distinguer de celles de type purement
pathologique.
1 Le stress hydrique: dfinition
1~ e t s : : ~ : ~ : : : ~ : t : : : : : : ~ o : ~ ~ : ~ : : ~ e
de la disponibilit de l'eau, se traduisant par une
rduction de la croissance de la plante ou de sa
reproduction par rapport au potentiel du gnotype. La
contrainte hydrique est le facteur ou l'ensemble de
facteurs ayant pour consquence le stress. D'autres
auteurs limitent la dfinition du stress aux seules
conditions correspondant une hydratation subopti-
male des tissus (PUGNAIRE et al., 1993). D'un point de
vue physique, le stress hydrique rsulte d'un abaisse-
ment du potentiel hydrique dans l'air ou dans le sol
en dessous d'une certaine valeur, dpendante du
gnotype, du phnotype et des caractristiques du
milieu (type de sol, temprature, vent, etc.). Au
champ, la contrainte hydrique est caractrise par
son type (humidit relative de l'air, disponibilit de
Actes des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995 9
l'eau dans le sol, prsence ou absence de sels, etc.l,
son intensit et sa dure. Au laboratoire, les stress
appliqus sont gnralement plus rapides et plus
svres que dans les conditions naturelles. La multi-
plicit de tous ces facteurs, la difficult d'en tablir la
hirarchie cause des interactions existant entre eux,
et la diversit des modles exprimentaux (plante
entire divers stades de dveloppement, organes ou
tissus exciss, cellules isoles ou protoplastes) expli-
quent probablement les observations contradictoires,
dcrites dans la littrature la suite d'un stress
hydrique. Nanmoins, on observe classiquement une
diminution de la vitesse d'longation cellulaire, puis
si le stress s'accentue, de la conductance stomatique.
La balance hormonale est frquemment altre, et
l'activit de nombreuses enzymes est change, ainsi
que l'expression du gnome. A terme, on peut
dtecter un ajustement osmotique des cellules, et
ventuellement des modifications morphologiques,
anatomiques, physiologiques et du dveloppement
de la plante.
Les effets prcoces
Balance hormonale
Les modifications de la balance hormonale touchent
aussi bien l'auxine, les gibberellines et les cytoki-
nines, que les mdiateurs classiques de la rponse
aux stress, l'acide abscissique (ABA), l'thylne et le
jasmonate. L'effet le plus notable est l'augmentation
de la synthse d'ABA et la rduction de celle de cyto-
kinine. Le rle exact des perturbations de l'quilibre
hormonal, dans la succession des ractions respon-
sable de la rponse complexe et graduelle de la
plante au stress hydrique, n'est pas encore lucid.
Nanmoins, il est vident que ce rle est central et
considrable. Les modifications de l'expression des
gnes, des activits enzymatiques et de la balance
hormonale interagissent: une augmentation de la
teneur en ABA des tissus engendre un ensemble de
rponses aux plans molculaire (gnes induits par
l'ABA), cellulaire (extension, mtabolisme) et du
dveloppement (croissance et modifications anato-
miques). Cet ensemble de rponses une augmenta-
tion de l'ABA est proche de celui observ lors de
l'application d'un stress hydrique. Cette observation,
conforte par l'analyse du comportement de mutants
incapables de synthtiser l'ABA, ou de rpondre
cette hormone, suggre que l'une des premires
tapes de la rponse au stress hydrique implique un
accroissement du niveau d'ABA. Mme si ce phno-
mne peut rsulter en partie d'une redistribution de
l'ABA prexistant, il est probable qu'il traduit aussi
une modification de l'expression des gnes de la voie
10
de synthse de ce compos. Actuellement, un intrt
considrable est port sur ces aspects.
Protines et activit enzymatique
L'analyse des gels d'lectrophorses bidimension-
nelles montre que le stress hydrique inhibe la syn-
thse de la plupart des protines, tandis que celle
d'un ensemble restreint de protines - dites de stress
- est induite. Simultanment, la protolyse est favo-
rise. Ce schma est commun dans ses grandes lignes
diffrents types de stress. Beaucoup de protines de
stress ont un faible poids molculaire et, pour la plu-
part, leur fonction est inconnue. L'hypothse souvent
mise est que les protines de stress jouent un rle
dans l'adaptation de la plante, aussi, de nombreux
chercheurs tudient-ils la rsistance au stress d'aprs
l'isolement et l'tude de ces molcules. Alors que
l'activit de certaines enzymes diminue lors d'un
stress hydrique (par exemple, RuBisCo et PEPcase),
celle d'autres enzymes augmente. C'est le cas des
enzymes hydrolytiques comme l'a-amylase et les
protinases, ou d'enzymes catalysant la synthse des
composs de type osmolyte compatible (voir ci-
dessous) et de glucides. Le stress provoque aussi
l'activation ou l'inhibition de trs nombreuses autres
enzymes.
Dans le cas trs particulier de certaines plantes
grasses soumises un stress hydrique ou salin, des
bou leversements mtabol iques s'oprent avec
l'abandon par la plante de la photosynthse de type
C3 au profit de celle de type CAM (Crassulacean
Acid Metabolism). En photosynthse de type CAM, le
prlvement et la rduction du CO
2
sont spars tem-
porellement. Le prlvement s'effectue la nuit alors
que le dficit de vapeur d'eau de l'air est plus faible,
ce qui rduit la transpiration. L'activit d'une quin-
zaine d'enzymes impliques dans le mtabolisme du
carbone est active par le stress hydrique. La protine
la plus tudie est la PEPcase, spcifique des plantes
de type CAM, responsable de la fixation nocturne du
CO
2
(HC0
3
-). Le caractre CAM est acquis lentement
aprs l'application du stress (5 10 jours). Nan-
moins, des changements dans l'expression de
plusieurs gnes codant des enzymes de la voie
CAM s'observent bien avant. L'ARN
m
correspondant
la PEPcase CAM s'accumule dans des feuilles
excises aprs seulement quelques heures de stress.
Expression des gnes
Ces dernires annes, de nombreux travaux se sont
focaliss sur la recherche de gnes induits dans les
organes vgtatifs durant un stress hydrique. Dans la
plupart des cas, la fonction des protines correspon-
dantes n'est pas dmontre, mais prdite d'aprs la
squence en acides amins, dduite de la squence
du gne. Les gnes inductibles par le stress sont sup-
poss jouer un rle dans l'adaptation du vgtal au
dficit hydrique. L'expression d'un grand nombre de
ces gnes est aussi amplifie dans la graine lors de la
dessiccation naturelle qui accompagne leur matura-
tion. Il en est ainsi des gnes lea (LaIe Embryogenesis
Abundant) exprims au moment o l'embryon
devient tolrant la dessiccation, mais dont certains
sont aussi impliqus dans la rponse au stress
hydrique environnemental, parfois sous la dpen-
dance de l'ABA (gnes rab). Dans la graine, leurs pro-
duits d'expression exerceraient au moins quatre types
de fonctions protectrices des structures cellulaires:
les unes empcheraient la cristallisation des ions dans
le cytoplasme en les squestrant, d'autres stabi 1ise-
raient les membranes, d'autres encore (Em) lieraient
l'eau. Ces protines faciliteraient l'apparition de la
structure de type vitreux caractristique du cytosol
des embryons de graines sches. Un autre groupe de
lea, auquel appartient la dhydrine, prserverait la
conformation des protines au cours de la dshydra-
tation (fonction d'une classe de protines appeles
chaperons). D'autres gnes sont impliqus dans
l'ajustement osmotique des cellules. Ce phnomne
ncessite l'accumulation de soluts organiques
hydrophiles, appels osmolytes. C'est le cas de gnes
codant pour des enzymes des tapes de la synthse
d'osmolytes comme la proline, la glycine btaine, le
saccharose, des sucres-alcools, etc. C'est aussi le cas
de gnes impliqus dans la compartimentation de
soluts et codant des H+-ATPases du plasmalemme
ou du tonoplaste, et pour des transporteurs du tono-
plaste. D'autres fonctions, comme la protection
contre les pathognes (osmotine et autres inhibiteurs
de protases, et protines de transfert de lipides) ou la
dgradation de protines (ubiquitine et protases),
sont attribues des gnes induits par le stress
hydrique. Enfin, de tels gnes sont aussi impliqus
dans des mcanismes de rgulation enzymatique et
de l'expression d'autres gnes ainsi que dans la trans-
mission de signaux (BRAY, 1993). L'utilisation de
mutants dficients en ABA (tomate, mas,
Arabidopsis) et l'apport d'ABA exogne ou d'inhibi-
teurs de la synthse de cette hormone ont permis de
montrer que l'expression de certains des gnes induc-
tibles par le dficit hydrique dpend strictement
d'une lvation importante de la teneur en ABA des
tissus. D'autres gnes ne sont pas directement dpen-
dants d'une telle lvation, bien qu'ils soient induits
par cette hormone. Enfin, certains gnes inductibles
par le stress hydrique ne rpondent pas une lva-
tion artificielle de la concentration en ABA des tissus.
L'expression de nombreux gnes est vraisemblable-
ment diminue sous une contrainte hydrique, mais
seulement quelques-uns d'entre eux ont t identifis.
C'est le cas de ceux codant la petite sous-unit de la
RuBisCo (gnes rbc5) et les protines qui s'associent
aux chlorophylles a et b (gnes cab).
L'longation cellulaire
La croissance des tissus foliaires est l'un des pro-
cessus physiologiques les plus sensibles au stress
hydrique. La croissance est due l'absorption d'eau
par les cellules. Cette absorption est lie la diff-
rence de potentiel hydrique, 'JIw' entre le xylme et
les tissus en longation et la conductance des tissus
pour l'eau (lp) selon G = - Lp x 'JIw' Elle se produit
lorsque l'entre d'eau dans la cellule lve la pres-
sion de turgescence des cellules (P) au-dessus d'un
seuil critique (y) dit seuil de dformation des parois.
Dans cette condition, la vitesse d'augmentation du
volume cellulaire est dcrite par G =m x (P - y), o
m est un coefficient traduisant la plasticit des parois.
Ce type de modlisation montre que la baisse de
croissance en condition de stress hydrique peut
rsulter d'une baisse de la turgescence (P), d'une
diminution de l'extensibilit des parois (m), d'une
rduction de la conductibilit hydraulique (Lp), ou
d'une augmentation de leur seuil de dformation (Y).
En fait, les donnes exprimentales sont trs variables
selon les mthodes de mesure utilises pour estimer
les diffrents paramtres. Ainsi, P et Y ont t dcrits
comme pouvant augmenter, rester inchangs ou
diminuer (PASSIOURA et FRY, 1992) pendant le stress
hydrique. Cependant, la baisse de croissance est rare-
ment imputable ces paramtres, c'est--dire la
force mcanique qui s'exerce sur les parois. Concer-
nant Lp, l'ide qui prvaut ( quelques exceptions
prs) est que la conductivit hydraulique des tissus
est diminue en condition de scheresse. L'impact de
cette diminution est nanmoins discutable, puisque
ce paramtre n'est pas ou est peu limitant pour la
croissance. Depuis quelques annes, une hypothse
merge selon laquelle l'extensibilit des parois est
dterminante pour la croissance dans un grand
nombre de situations. Elle serait dtermine par des
protines paritales endognes. Certaines de ces pro-
tines ont t isoles (expansines) ; elles ont la capa-
cit d'induire l'extension de parois isoles (COSGROVE,
1993). D'une faon gnrale, l'ABA et d'autres hor-
mones sont impliqus dans les processus aboutissant
('inhibition de la croissance des feuilles par le
stress, mais les mcanismes en jeu ne sont pas claire-
ment identifis. Le dveloppement des racines est
beaucoup moins sensible l'ABA que celui des
feuilles. Dans certaines situations, il est mme stimul
par cette hormone.
La conductance stomatique
La conductance stomatique des feuilles est rapide-
ment affecte par le stress hydrique. La fermeture des
stomates peut rsulter en partie d'un mcanisme
intrinsque de l'piderme, rpondant au dficit de
vapeur d'eau de l'air ou au flux lev de transpiration
en atmosphre trs sche et agite. Nanmoins, lors
de l'tablissement d'un dficit hydrique progressif
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995 11
dans le sol, la fermeture des stomates s'observe sou-
vent avant que les paramtres hydriques foliaires ne
soient affects par le stress. La fermeture des stomates
semble induite principalement par une augmentation
de la teneur en ABA au voisinage des cellules de
garde. L'hormone est libre par les racines subissant
le dficit hydrique et transporte par le flux de sve
ascendant. Elle constitue un signal racinaire d'alerte ,
qui limite la transpiration lorsque la disponibilit de
l'eau dans le sol diminue (DAVIES et ZHANG, 1991).
La scheresse du sol et celle de l'atmosphre peuvent
conduire une dshydratation de la feuille si la
demande de transpiration excde la capacit des
vaisseaux conducteurs alimenter la feuille en eau.
Dans ce cas, la fermeture des stomates rsulte de pro-
cessus foliaires comme la redistribution de l'ABA
endogne entre les diffrents compartiments cellu-
laires, ou la synthse nette de ce compos dans la
feuille, et l'lvation de la sensibilit des rcepteurs
l'ABA.
A cause de la rsistance la diffusion des gaz et en
raison des pressions partielles de vapeur d'eau et de
CO
2
dans l'atmosphre et dans les chambres sous-
stomatiques, le flux de molcules d'eau quittant la
feuille est plusieurs centaines de fois suprieur celui
des molcules de CO
2
prleves. Les consquences
d'une diminution de la conductance stomatique sur
la transpiration sont beaucoup plus prononces que
sur la photosynthse. Cela est d la rsistance la
diffusion du CO
2
qui est suprieure celle de la
vapeur d'eau. Ds lors, toute augmentation de la
rsistance d'une tape commune de la voie de diffu-
sion des deux gaz augmente l'efficacit d'utilisation
de l'eau mme si la photosynthse est elle aussi dimi-
nue. La fermeture des stomates est probablement la
cause principale de la baisse de la photosynthse
chez les plantes modrment stresses (KAISER, 1987).
En effet, la capacit photosynthtique ( saturation de
CO
2
) des feu i Iles n'est pas affecte, tant que les tissus
ne sont pas fortement dshydrats. Plusieurs mca-
nismes, diffrents selon les plantes et les conditions
de stress, participent la diminution de la photosyn-
thse en cas de scheresse accentue et prolonge.
Ce sont par exemple la baisse d'activit des enzymes
photosynthtiques, et, pour les stress les plus svres,
l'inhibition des photosystmes. Dans d'autres cas, la
diminution de la demande des organes puits aboutit
une rtro-inhibition de l'assimilation du CO
2
par
l'accumulation des produits terminaux de la photo-
synthse.
Il semble que le mtabolisme photosynthtique soit
peu sensible aux variations de potentiel hydrique cel-
lulaire mais qu'il soit rapidement inhib par la dimi-
nution du volume des cellules et des chloroplastes.
Dans le cas d'un dficit hydrique modr, la rduc-
tion de la photosynthse globale du vgtal rsulte
principalement d'une rduction de la surface totale
12
des feuilles. La teneur en glucides des plantes subis-
sant un dficit hydrique est souvent suprieure celle
de plantes bnficiant d'une alimentation hydrique
optimale. Cela suggre que la photosynthse n'est
pas limitante pour la croissance. Nanmoins, une l-
vation de la pression partielle de CO
2
induit un gain
de croissance et peut permettre la survie de plantes
dans des conditions de stress normalement ltales.
Cette observation est rapprocher du fait qu'une l-
vation de CO
2
entrane une diminution de la densit
des stomates et de la conductance stomatique ainsi
qu'une augmentation du rapport racines/feuilles.
les effets moyen terme :
l'ajustement osmotique
L'ajustement osmotique a t dfini comme un abais-
sement du potentiel osmotique par l'accumulation de
soluts dans les cellules en rponse un stress salin
ou hydrique. Nanmoins, un abaissement passif du
potentiel osmotique rsultant d'une diminution du
volume cellulaire correspond aussi une forme
d'ajustement osmotique. Les soluts accumuls sont
trs varis et appartiennent diverses familles biochi-
miques comme les acides amins (proline, arginine,
citrulline, ornithine, etc.), les amides (glutamine et
asparagine), les polyamines, les acides organiques
(citrate, malate, lactate, etc.), les sucres (saccharose,
pinitol, sorbitol, mannitol, glycerol, etc), les amines
quaternaires (glycine-btaine) et les sels minraux
(K+, Na+, C1-).
Le cot nergtique en quivalent-photons de
l'accumulation d'une mole d'ions (K+, Na+, C1-) est
de 2 4 photons. Il est de 70 100 photons pour une
mole de sorbitol ou de mannitol, de proline, ou de
glycine-btaine. Pour mmoire, il faut une dizaine de
photons pour rduire une mole de CO
2
.
les effets plus long terme
Beaucoup d'tudes sur le stress hydrique portent sur
des temps relativement courts. Elles concernent alors
les processus cellulaires, le fonctionnement d'organes
exciss et le comportement de jeunes plantes. En
revanche, les tudes portant sur des stress de longue
dure ont souvent trait aux rendements et l'utili-
sation de l'eau par les cultures. Il existe peu d'tudes
correspondant une approche intgre l'chelle de
l'individu sur des pas de temps longs (SCHULZE, 1986).
Des changements physiologiques et anatomiques
classiques ont tout de mme t rapports pour de
telles conditions. Ils comprennent principalement une
baisse du volume des nouvelles cellules, une rduc-
tion de la surface des feuilles et une augmentation
de leur paisseur, un vieillissement prmatur
des feuilles matures, une lvation du rapport
racine/feuille en terme de biomasse et, dans le cas
d'un stress dpassant la capacit de rsistance de la
plante, la dessiccation et la mort de celle-ci.
La scheresse affecte aussi la nutrition minrale via
divers facteurs. Elle entrane des modifications de la
concentration des lments dans la solution du sol,
l'installation de manchons gazeux autour des racines
qui perdent ainsi la capacit prlever les ions et des
effets souvent dpressifs sur les vitesses d'absorption
et de transfert vers les parties ariennes. Les rsultats
relatifs la teneur des tissus en potassium sont
contradictoires. On note souvent une accumulation
de composs azots (proline, etc.) et une diminution
des teneurs en phosphore.
Finalement, l'exploration de la diversit des adapta-
tions au stress hydrique, rsultant de la slection
naturelle dans les cosystmes arides, est une autre
stratgie pour identifier des rponses la scheresse
fondes sur des modifications du dveloppement
telles que le raccourcissement du cycle reproductif,
ou la flexibilit du dveloppement vgtatif.
Le syndrome de stress
Les symptmes dvelopps par les plantes soumises
un stress hydrique se retrouvent pour d'autres formes
de stress (nutritionnel, thermique) et ont t regroups
sous le terme de syndrome de stress environnemen-
taux ou abiotiques (CHAPIN, 1991). Ce syndrome
comprend essentiellement une baisse de la crois-
sance et une rduction de l'acquisition de toutes les
autres ressources qui ne sont pas limitantes (par
exemple CO
2
, lments minraux, lumire). Celte
caractristique participe vraisemblablement au main-
tien d'un quilibre entre l'lment limitant et les
autres. Les relations source-puits jouent un rle dans
ce comportement, notamment par un mcanisme
fond sur les quilibres hormonaux (ABA, cytoki-
nines), qui intgre les rponses des diffrents organes.
Il existerait une rponse gnrale des plantes aux
stress, car sous l'effet d'une contrainte environnemen-
tale, les divers signaux emprunteraient la mme voie
pour dclencher la rponse physiologique. A cet
ensemble de rponse gnrale, s'ajoutent les
rponses spcifiques de chaque stress et ventuelle-
ment de chaque tissu.
1
1,& Mcanismes de rsistance
J la scheresse
~ .
;::( La rsistance la scheresse est un terme gn-
rique qui comprend plusieurs processus. On en
distingue classiquement quatre : l'chappement,
la restauration, la tolrance la dshydratation, et
l'vitement.
L'chappement correspond la capacit de la plante
achever son cycle pendant la priode o l'eau est
disponible, ainsi la plante n'est pas vritablement
confronte au dficit hydrique. C'est une stratgie
largement dveloppe par les plantes des milieux
dsertiques.
La restauration est la capacit de la plante rtablir
un mtabolisme normal aprs une priode de dficit
hydrique. Elle concerne principalement les mousses,
les lichens, les bryophytes et les algues (vgtaux po-
kilohydriques). Ce mcanisme de rsistance li la
restauration des structures et des fonctions cellulaires
n'est pas utilis par les angiospermes tolrantes, qui
mettent en jeu plutt des processus de protection.
La tolrance la dshydratation correspond la
capacit des tissus vgtatifs supporter des poten-
tiels hydriques trs ngatifs. C'est un caractre cellu-
laire qui ncessite une certaine acclimatation. La
tolrance la dshydratation des tissus vgtatifs va
de -1,2 MPa, pour les plantes aquatiques, -10 MPa,
pour les plantes xrophytiques. A l'extrme, on
connat plusieurs dizaines d'espces de plantes sup-
rieures capables de survivre aprs avoir t dess-
ches. Les mcanismes de celte tolrance sont mal
connus. La dshydratation des cellules engendre des
troubles nombreux comme la dsorganisation des
membranes, des organites et du cytosol, la dnatura-
tion des protines et l'inhibition des activits enzyma-
tiques, l'apparition d'espces actives d'oxygne
(peroxyde, superoxyde, radical hydroxyde), et des
dommages du matriel gntique. Les mcanismes de
rsistance correspondent aux processus capables de
protger et de rparer les fonctions et les structures
cellulaires. Il s'agit par exemple de l'lvation de la
viscosit du cytoplasme, de la protection des
enzymes et des membranes par certains osmo-
protectants et antioxydants, de la modification de la
composition phospholipidique de ces membranes
(PUGNAIRE et al., 1993).
L'vitement correspond la capacit de la plante
viter la dshydratation des tissus, d'une part, en
continuant de prlever l'eau du milieu, et d'autre
part, en conservant l'eau prsente dans les cellules.
L'ajustement osmotique, comme il est dit prcdem-
ment, est l'un des mcanismes fondamentaux partici-
pant l'vitement. En effet, la conservation de l'eau
dans les cellules et l'expansion cellulaire ncessitent
une accumulation de soluts pour abaisser le poten-
tiel hydrique des cellules en dessous de celui du
milieu. Certains des soluts accumuls (proline,
glycine-btaine, sucres-alcools) sont qualifis
d'osmolytes compatibles et d' osmoprotectants
car, d'une part, ils peuvent tre prsents des
niveaux trs levs dans les cellules sans en perturber
le mtabolisme et, d'autre part, ils semblent protger
les structures cellulaires et les enzymes des effets de
la dshydratation et de la prsence d'espces chi-
miques toxiques. Les mcanismes molculaires de
cette osmoprotection ne sont pas vraiment identifis.
De nombreux arguments suggrent que les osmolytes
compatibles sont accumuls prfrentiellement dans
le cytoplasme des cellules alors que les soluts -
toxiques aux concentrations leves (sels minraux,
certains sucres) - assureraient de manire privilgie
l'osmorgulation de la vacuole.
Chez des plantes subissant un dficit hydrique, une
accumulation de proline de 100 fois suprieure
celle de plantes non stresses peut tre frquemment
observe. Cette accumulation rsulte la fois d'une
augmentation de synthse lie un contrle de la
transcription des deux tapes catalyses entre le
glutamate et la proline, et de la leve de la rtro-
inhibition que la proline exerce sur sa propre voie de
synthse. La diminution de la dgradation de la
proline, et de son incorporation dans les protines
favorise aussi l'augmentation de son niveau d'ac-
cumulation. L'accumulation de proline dans les tissus
peut tre positivement corrle l'intensit du dficit
hydrique subi par le vgtal. La proline est donc sou-
vent considre comme un marqueur de stress
(DELAUNAY et VERMA, 1993). Certains auteurs la consi-
drent comme une consquence pathologique. Bien
qu'il n'y ait pas toujours de corrlation entre la
quantit de proline accumule dans la plante et la
tolrance de celle dernire la scheresse, l'accumu-
lation de proline pourrait avoir de nombreux avan-
tages. Certains auteurs considrent que cette
molcule reprsente une forme de stockage de
carbone et d'azote. Elle aurait un rle de protection
des protines et des membranes cellulaires. La syn-
thse de la proline interviendrait dans la stabilisation
du pH du cytosol et permettrait de rgnrer le
NAD(P)+ ncessaire au maintien de la respiration cel-
lulaire et de la photosynthse, en condition d'excs
de pouvoir rducteur li au stress. L'effet bnfique
d'une accumulation de proline dans les cellules n'est
pas admis par tous les auteurs - chez certaines halo-
phytes, la proline ne s'accumule que lorsque la
teneur en sel du milieu atteint des valeurs leves qui
deviennent toxiques. Mais d'autres molcules orga-
niques, telles que les polyols ou les btaines semblent
jouer des rles analogues ceux de la proline.
Chaque espce vgtale capable d'ajustement osmo-
tique utilise prfrentiellement (mais rarement exclu-
sivement) un osmoticum particulier.
L'ajustement osmotique joue un rle important dans
la protection des apex et des feuilles en croissance.
En effet, il maintient la turgescence et entretient donc
l'ensemble des processus dpendant de cette dernire
comme la conservation du volume du protoplasme et
des organites (chloroplastes notamment) et l'ouver-
14
ture des stomates permettant la photosynthse
(PREMACHANDRA et al., 1992). En outre, associ des
modifications de l'extensibilit des parois, l'ajuste-
ment osmotique permet la croissance cellulaire.
Les vgtaux sont plus tolrants au dficit hydrique si
celui-ci s'est install lors d'un stress progressif ou en
conditions de teneur leve de CO
2
dans l'air
(CONROY et al., 1988). Ces conditions permettent l'ac-
climatation de la plante, et favorisent l'ajustement
osmotique. Nanmoins, le rle central tenu par
l'ajustement osmotique dans l'adaptation la sche-
resse a t mis en doute par certains auteurs qui ont
pu montrer qu'il n'y a pas toujours de relation directe
entre le potentiel de turgescence, la croissance cellu-
laire, la conductance stomatique et la photosynthse.
Il est effectivement surprenant de trouver - dans la
littrature et parfois dans un mme article - l'ide
que l'ajustement osmotique qui permet l'ouverture
des stomates est un mcanisme majeur de rsistance,
alors que la sensibilit des stomates aux processus
entranant leur fermeture est aussi prsente comme
participant d'un tel mcanisme. L'explication de cette
contradiction est vraisemblablement lie aux types
multiples de stress hydrique et donc de rsistance. Un
mcanisme comme l'ajustement osmotique, qui
permet au vgtal de maintenir sa photosynthse et
sa transpiration un niveau lev pour une large
gamme de potentiel hydrique du sol, est probable-
ment un avantage dans les rgions et durant les
poques o la disponibilit de l'eau est trs variable
mais jamais nulle. Au contraire, une plus grande sen-
sibilit des stomates peut tre un atout dterminant
dans des rgions o les plantes ne disposent
que d'une quantit donne et limitante d'eau
(PREMACHANDRA et al., 1992).
Paralllement l'ajustement osmotique, le prlve-
ment d'eau en situation de stress hydrique est favoris
par diverses adaptations structurales de l'appareil
racinaire. Les racines constituent vraisemblablement
la barrire de rsistance principale aux mouvements
d'eau dans la plante. Au sein de la racine elle-mme,
c'est la conduction radiale - de la solution du sol
la lumire des vaisseaux - qui prsente la rsistance
la plus leve (PETERSON et al., 1993). Le systme raci-
naire de plantes adaptes la scheresse a une bio-
masse accrue (soit en valeur absolue, soit en valeur
relative par rapport celle des parties ariennes). Il
peut reprsenter 60 90 % de la biomasse du vgtal
chez les plantes tolrantes soumises un dficit
hydrique. Il descend profondment dans le sol et pr-
sente des racines paisses. Il peut ainsi explorer un
plus grand volume de sol et s'installer dans des hori-
zons o la disponibilit de l'eau est plus grande. Le
systme racinaire semble jouer un rle considrable
dans la rsistance des vgtaux la scheresse. En ce
qui concerne le pois, des expriences de greffage
entre gnotypes rsistants ou sensibles la scheresse
ont montr que les racines, et non les parties
ariennes, dterminent certains paramtres hydriques
des feuilles et le rendement en grain (SANDERS et
MARKHART, 1992). Enfin, le rle de la symbiose myco-
rhizienne pour faciliter la nutrition minrale et la
collecte de l'eau ne doit pas tre sous-estim.
Les vgtaux ont dvelopp plusieurs stratgies pour
retenir l'eau dans leurs tissus. Les pertes peuvent tre
minimises pour les racines par un mcanisme de
rectification des mouvements d'eau ", dfini
comme la capacit de prlever rapidement l'eau d'un
sol humide, alors que les fuites d'eau vers le milieu
seront limites dans un sol sec grce des change-
ments touchant l'hypoderme. Nanmoins, la plupart
des adaptations visent rduire les pertes d'eau par
la transpiration. Les unes restreignent la surface va-
porante (chute des vieilles feuilles, diminution de la
vitesse d'mergence des feuilles, rduction de la sur-
face et paississement des nouvelles feuilles). Les
autres augmentent la rsistance des stomates et de la
cuticule la diffusion des gaz (fermeture stomatique,
stomates regroups dans des dpressions de l'pi-
derme, dpt de cire et paississement des parois qui
s'imprgnent de substances diverses). D'autres enfin
augmentent la rflectance, diminuent la temprature
foliaire et maintiennent une couche d'air humide la
surface des feuilles par le dveloppement d'une pilo-
sit caractristique des plantes de milieux arides.
Dans le cas particulier des plantes grasses, un
changement fondamental du mtabolisme photo-
synthtique - dcrit prcdemment - permet
d'conomiser l'eau.
Amlioration de la rsistance
des plantes la scheresse: les
outils apports par la physiologie
L'amlioration de la rsistance la scheresse
peut relever de deux types de dmarche. La premire
est une dmarche classique de slection avec des
essais effectus dans diffrentes conditions environ-
nementales pouvant utiliser des indicateurs physiolo-
giques et des marqueurs molculaires de rsistance.
La seconde dmarche est une approche cible sur un
ou plusieurs gnes impliqus dans la rsistance, qui
sont introduits (gnes trangers) ou surexprims
(endognes) dans des plantes.
les indicateurs physiologiques
et les marqueurs molculaires
Des indicateurs physiologiques et des marqueurs
molculaires utilisables pour la dmarche classique
de slection existent dj (potentiel osmotique,
composition bioch i mique, fi uorescence, discri mi-
nation isotopique du carbone, etc.). Nanmoins,
l'obtention d'indicateurs et de marqueurs plus nom-
breux et plus efficaces ncessite une meilleure
connaissance de la rponse adaptative des plantes
aux stress. Dans leur ensemble, les caractres mor-
phophysiologiques participant la rsistance sont
assez bien identifis. Cependant, ils sont le rsultat de
l'intgration complexe de nombreux processus qui ne
sont pas bien caractriss en termes mcanistiques et
molculaires. Ainsi, l'chelle de la cellule, de
nombreuses interrogations subsistent concernant
les mcanismes intimes de l'osmoprotection, du
mtabolisme des osmolytes organiques, des systmes
de transport responsables de la compartimentation
des soluts, et de la croissance cellulaire. En outre, de
nombreuses questions se posent sur la faon dont les
tissus ressentent le dficit hydrique. Les variables
pertinentes prendre en compte sont-elles les poten-
tiels hydrique, osmotique ou la pression de tur-
gescence, ou bien les contenus en eau, ou en volume
cellulaire? Depuis la transformation d'une cause
physique (baisse du potentiel hydrique ou perte
d'eau) en un premier effet biochimique, puis en une
succession de rponses intgres, une longue chane
d'vnements encore mal caractriss est pressentie.
Mais nos connaissances sur la gnration et la trans-
mission l'chelle cellulaire ou tissulaire des signaux
de stress restent fragmentaires. Enfin, les valeurs
adaptatives des divers processus induits par le stress
restent souvent hypothtiques, ce qui limite notre
aptitude dterminer la pertinence des critres pour
l'analyse de la tolrance au stress.
Les interrogations listes ci-dessus portent sur des
processus qui peuvent tre abords une chelle
relativement simple puisqu'ils dpendent de caract-
ristiques essentiellement cellulaires. Les processus qui
participent la rponse intgre de la plante
(contrle de la conductance stomatique, adaptations
anatomiques et morphologiques, relations source-
puits) sont encore plus complexes et leur dtermi-
nisme est souvent trs mal connu. A l'vidence, de
nombreuses recherches sont encore ncessaires pour
comprendre, et parfois mme simplement identifier,
les processus qui permettent la rsistance la sche-
resse et leur coordination au sein de l'organisme.
Les approches de la physiologie classique ont permis
d'identifier de nombreux caractres associs la
rsistance la scheresse. La physiologie molculaire
permettra une meilleure comprhension des mca-
nismes en jeu et de leur dterminisme gntique.
L'approche molculaire facilitera aussi la dtermina-
tion de l'implication exacte de ces caractres dans
la rsistance la scheresse. Il est probable que dans
un futur proche, les physiologistes pourront fournir
des indicateurs physiologiques et des marqueurs
molculaires plus puissants pour la recherche des
caractres morphophysiologiques d'adaptation et
pour la slection.
Actes des 5
e
journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995 15
la cration de plantes transgniques
La possibilit de crer des plantes transgniques
suscite de grands espoirs pour guider l'amlioration
de la rsistance la scheresse des plantes cultives.
Afin d'identifier des gnes ayant un rle effectif dans
la rsistance, de nombreux chercheurs tudient les
modifications de l'expression du gnome induites par
le stress. L'amplification de l'expression d'un gne
lors d'un stress n'est pas un fait suffisant pour
conclure que la protine correspondante est spcifi-
quement implique dans la rsistance de la plante
ce stress. Mais, si des tudes complmentaires per-
mettent de montrer une forte corrlation, la fois
temporelle et spatiale, entre l'apparition de la
protine et le caractre de rsistance, une telle hypo-
thse peut alors tre soutenue. L'obtention de mutants
sous-exprimant ou surexprimant un gne spcifique
est un atout puissant pour dterminer si le produit
d'expression d'un gne est impliqu dans la tol-
rance. Les stress appliqus dans les laboratoires sont
souvent trs svres, allant jusqu' une dshydra-
tation marque des tissus. De nombreux gnes dont
l'expression est augmente sous l'effet de telles
contraintes sont aussi induits au cours de la matura-
tion de la graine (gnes lea). Ces gnes participent
vraisemblablement la protection des structures
cellulaires lors de la dshydratation. Or, la tolrance
la dshydratation n'est probablement pas un des
premiers critres prendre en compte pour l'amlio-
ration des espces cultives dans les pays dve-
lopps, puisque ce caractre intervient quand le
stress devient trs svre, bien aprs que la crois-
sance de la plante n'ait t affecte et le rendement
fortement diminu. Ceci pose l'importante question
du type de rsistance que l'on souhaite accrotre,
autrement dit de la fonction physiologique que l'on
veut amplifier via la transgense.
Les vgtaux naturellement adapts aux milieux diffi-
ciles (pauvres en azote ou en phosphore ou en autres
lments minraux, froids, arides, salins, etc.), placs
dans des conditions optimales o aucun facteur n'est
limitant, prsentent nanmoins une croissance faible.
Il semble donc que le caractre de rsistance aux
contraintes abiotiques soit li une capacit limite
produire de la biomasse et utiliser les ressources du
milieu. Ainsi, les plantes rsistantes la scheresse
prsentent une faible productivit en l'absence de
contrainte hydrique et, par exemple, les plantes
mtabolisme de type CAM, qui sont probablement les
plus rsistantes sont aussi celles prsentant le taux le
plus bas de production de biomasse. Ce syndrome
(rsistance associe une capacit limite de crois-
sance) est une caractristique cologique permettant
la conservation de l'espce en assurant la descen-
dance dans des cosystmes marqus par la svrit
16
et la frquence des stress. Elle n'intresse probable-
ment pas les agronomes des pays dvelopps. Le rac-
courcissement du cycle de la plante peut permettre
d'chapper au stress, mais c'est plutt le dveloppe-
ment d'une stratgie d'vitement qui constitue la voie
principale d'amlioration de la tolrance des espces
cultives aux stress modrs.
L'vitement est essentiellement fond sur l'aJustement
osmotique, le contrle de la conductance stomatique,
l'augmentation du rapport racine/feuille et les adapta-
tions des appareils racinaire et arien limitant les
pertes d'eau. Le premier de ces caractres et, dans
une moindre mesure, le second concernent des
mcanismes plutt cellulaires. Les autres caractres
impliquent des mcanismes multiples et intgrs, et
dterminisme gntique complexe. Dans un futur
proche, on peut penser que les premires tentatives
d'amlioration de la tolrance des plantes la sche-
resse par le biais de la transgense porteront sur
l'ajustement osmotique, car c'est une fonction thori-
quement modifiable par l'introduction d'un ou de
quelques gnes. Il a t montr rcemment que la
transformation d'un tabac avec un gne dT coli
codant une mannitol-1-phosphate dshydrognase se
traduit par l'accumulation de mannitol dans les tissus
et une croissance accrue de la plante en condition de
stress salin (TARCZYNSKI et al., 1993). Mais la plante
transgnique stresse prsente un dveloppement
considrablement rduit par rapport celui des
plantes tmoins non stresses. Cela illustre bien ce
que souponnent physiologistes et gnticiens: une
amlioration de la tolrance significative sur un plan
agronomique ne peut gure tre espre en chan-
geant l'activit d'un seul gne. Elle ncessitera l'ajus-
tement simultan de plusieurs traits de la physiologie
de la plante. Le dterminisme vraisemblablement
polygnique de la tolrance au stress hydrique,
comme aux autres stress abiotiques, fait que la pro-
duction par voie transgnique de gnotypes d'intrt
agronomique reste au-del de notre horizon. Dans
l'immdiat, les perspectives les plus attrayantes des
approches transgniques sont de permettre d'identi-
fier les gnes qui participent la tolrance, et ven-
tuellement de peser leur contribution la rponse
globale de la plante au stress. Cette analyse souligne
l'intrt d'inscrire les tudes physiologiques des ph-
nomnes, que nous avons voqus, dans une
dmarche globale, intgrant les approches physiolo-
giques et gntiques, et introduisant dans chacune
d'elles les approches molculaires (MONNEVEUX,
1991 ; MONNEVEUX et DEPIGNY-THls, sous presse). La
diversit disponible dans les ressources gntiques
sera plus facilement utilisable que dans le pass, ds
lors que l'association des approches permettra de
connatre le rle du gne introgress et son effet sur
la productivit.
1nteractions insectes-plantes
Rfrences bibliographiques
BRAY E.A., 1993. Molecular response to water deficit.
Plant Physiol. 103 : 1 035-1 040.
CHAPIN F.S., 1991. Integrated response of plants to
stress. Bioscience 41 : 29-36.
CONROY J.P., VIRGONA J.M., SMILLIE R.M., BARLOW E.W.,
1988. Influence of drought acclimation and CO
2
enrichment on osmotic adjustment and chlorophyll, a
fluorescence of sunflower during drought. Plant
Physiol. 86 : 1 108-1 115.
COSGROVE D.J., 1993. How do plant cell walls
extend ? Plant Physiol. 102 : 1-6.
DAVIES W.J., METCALFE J., LODGE T.A., DA COSTA A.R.,
1986. Plant growth substance and the regulation of
growth under drought. Aust. J. Plant Physiol. 13 :
105-125.
DAvlEs W.J., ZHANG J., 1991. Root signal and the regu-
lation of growth and development of plant in drying
soil. Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 42 :
55-76.
DELAUNAY A.J., VERMA D.P.S., 1993. Proline bio-
synthesis and osmoregulation in plants. Plant ). 4 :
215-223.
KAISER W.M., 1987. Effect of water deficit on photo-
synthetic capacity. Physiol. Plant. 71 : 142-149.
MONNEVEUX P., 1991. Quelle stratgie pour l'amlio-
ration gntique de la tolrance au dficit hydrique
des crales d'hiver? ln L'amlioration des plantes
pour l'adaptation au milieu aride, N. CHALB/ et
Y. DEMARLY (diteurs). AUPELF-UREF, Paris, France,
p. 165-186.
MONNEVEUX P., DEPIGNy-THIS D., sous presse. Intgra-
tion des approches physiologiques, gntiques et
molculaires pour l'amlioration de la tolrance la
scheresse chez les crales. Colloque Quel avenir
pour l'amlioration des plantes? ", Namur, Belgique,
18-21 novembre 1992. AUPELF-UREF, sous presse.
PASSIOURA J.B., FRY S.C, 1992. Turgor and cell expan-
sion: Beyond the Lockhart equation. Aust. J. Plant
Physiol. 19 : 565-576.
PETERSON CA., MURRMANN M., STEUDLE E., 1993.
Location of the major barri ers to water and ion
movement in young roots of Zea mays. L. Planta 190 :
127-136.
PREMACHANDRA C.S., SANEOKA H., FUJ/TA K., OGATA S.,
1992. Osmotic adjustment and stomatal response to
water deficits in maize. J. Exp. Bot. 43 : 1 451-1 456.
PUGNAIRE F., ENDOLZ L.S., PARDOS J., 1993. Constraints
by water stress on plant growth. In Handbook of plant
and crop stress. M. PESSARAKLI (Ed.). Marcel DEKKER
Inc., Tucson, Arizona, Etats-Unis, p. 247-255.
SANDERS P.L., MARKHART A.H., 1992. Interspecific
grafts demonstrate root system control of leaf water
status in water-stressed Phaseolus. J. Exp. Bot. 43 :
1563-1 567.
SCHULZE E.D., 1986. Whole-plant responses to
drought. Aust. J. Plant Physiol. 13 : 127-141.
TARCZYNSKI M.C, JENSEN R.C., BOHNERT H.J., 1993.
Stress protection of transgenic tobacco by production
of the osmolyte mannitol. Science 259 : 508-510.
Actes des 5
e
CAlATAYUD P.-A. VERCAMBRl B. (dit.). 1996.
Acles des se journes du groupe de lravail relations insecles-plantes,
26-27 octobre 1995. Monlpellier, France.
Colloques, CIRAD-CA. Monlpellier. France, 96 p.
Contribution de la cytologie l'tude
des mcanismes de dfense des plantes
aux attaques parasitai res
M. NICOLE(1), B. BOHER(1), C. VALETIE(2), C. MARTINEZ(1), P.-A. CALATAYUD(3), K. KPEMOUA(1),
C. DAAYF(4), J.-F. DANIEL(1), E. BRESSON(1), J.-L. SARAH(2), C. ANDARY(S), J.-P. GEIGER(1)
(1) ORSTOM, laboratoire de phytopathologie, BP 5045, 34032 Montpellier, France.
(2) ClRAD, laboratoire de nmatologie, BP 5035, 34032 Montpellier, France.
(3) ORSTOM, laboratoire des insectes nuisibles (LIN), BP 5045, 34032 Montpellier, France.
(4) Centre de recherche en horticulture, universit de Laval, GIK7P4, Qubec, Canada.
(5) Facult de pharmacie, universit de Montpellier 1, laboratoire de botanique et phytochimie,
34060 Montpellier, France.
L'un des dfis actuels de la pathologie vgtale rside
dans la matrise des techniques de transfert de gnes
de rsistance aux maladies dans la perspective de dis-
poser de varits de plantes susceptibles de mieux
rsister la pression parasitaire ambiante. Si le
concept de transgnose chez les plantes est large-
ment dvelopp au plan exprimental (BROGLIE et al.,
1991 ; SAuViaN et al., 1995), son application grande
chelle demeure, pour le moment, problmatique par
rapport aux perspectives envisages (MICHELMORE,
1995). Dans ce contexte, il parat ncessaire de
conforter les recherches sur le fonctionnement de ces
gnes de rsistance et des gnes de dfense des
plantes, incluant l'tude des mcanismes de leur
rgulation et du rle des protines pour lesquelles ils
codent (LINDSAY et al., 1993). Les techniques de bio-
logie molculaire associes celle de la biochimie
ont largement favoris la comprhension de certains
mcanismes de dfense des vgtaux aux agressions
biotiques. Mais les progrs rcents de la microscopie
permettent aux disciplines telles que l'histologie et la
cytologie de contribuer efficacement la connais-
sance des rponses des plantes aux maladies parasi-
taires (BENHAMOU, 1993 ; NICOLE et GIANINAZZI-
PEARSON, 1996). C'est ainsi que la cytologie
molculaire facilite la localisation spatio-temporelle
de molcules synthtises par les plantes et impli-
ques dans leur stratgie de dfense face aux attaques
microbiennes.
Dans la prsente synthse, on se propose de montrer
l'apport de l'histopathologie la comprhension de
ces mcanismes la fois l'chelle tissulaire, cellu-
laire et molculaire. Les photographies rapportes
dans ce chapitre ont t acquises sur la base de
recherches ralises sur les modles suivants: Hva-
champignon (Rigidoporus lignosus), manioc-bactrie
(Xanthomonas campestris pv. manihotis), manioc-
cochenille, cotonnier-champignon (Verticillium
dalhiae et Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum),
coton nier-bactrie (Xanthomonas campestris pv.
malvacearum) et bananier-nmatode (Radopholus
similis).
L'examen microscopique
1 l'chelle tissulaire
m@
I ~ L'observation au microscope photonique d'un
matriel vgtal infect permet une analyse
l'chelle histologique d'une situation parasitaire
donne. Associ aux techniques conventionnelles de
coloration des constituants cellulaires (JENSEN, 1962),
un tel examen rend compte d'vnements intressant
plusieurs compartiments tissulaires. Dans le cas des
maladies racinaires d'essences ligneuses causes par
Actes des 5
e
des champignons agents de pourridis, il n'est pas
rare de constater la mise en place de tissus lignifis,
nodiffrencis rsultant de la stimulation d'activits
cambiales (NICOLE et al., 1991 et 1992). Le cambium
libro-ligneux, de mme que l'assise gnratrice
subro-phellodermique, peut ainsi tre sollicit au
cours de ces mcanismes de diffrenciation cellu-
laire (RIoux et BIGGS , 1992). Les phnomnes de
nogense tissulaire impliquent une activation de la
biosynthse des composs paritaux dont des poly-
saccharides, des protines, la lignine et la subrine
impliqus dans le renforcement des barrires prfor-
mes (PETRINI et OUELLETTE, 1994). Ce mcanisme
contribue la tolrance des arbres aux agressions par
les champignons en compartimentant les zones tissu-
laires infectes, phnomne qui se traduit dans le cas
des maladies racinaires par la mise en place d'un
nouveau systme racinaire (SHIGO, 1984).
Une analyse similaire a t ralise chez le manioc
infect par Xanthomonas campestris pv. manihotis,
chez lequel la mise en place d'assises cicatricielles
n'a t observe que dans les varits tolrantes au
parasite (KPEMOUA et al., 1996).
En cas d'infection, la stimulation de la production de
composs phnoliques reprsente une rponse asp-
cifique mais gnrale des plantes. L'accumulation de
phnols peut nanmoins caractriser une interaction
diffrentielle comme dans l'exemple de la bactriose
du cotonnier cause par X. campestris pv. malva-
cearum. Pour ce modle, au cours d'une interaction
incompatible, les plantes rsistantes produisent des
composs de type f1avonode dtects histochimique-
ment dans les portions de msophylle contamin
par la bactrie (DAI et al., 1996). En revanche, dans
les plants sensibles, l'infection gnralise
l'ensemble de la feuille ne dclenche pas une telle
accumulation. La recherche d'activits enzymatiques
associes la production de flavonodes a rvl une
intense activit peroxydase dans les plants rsistants,
apparaissant plusieurs heures avant l'accumulation
de composs phnoliques. La rsistance du cotonnier
est fortement relie la synthse de plusieurs types
de molcules incluant les phnols, les peroxydases et
les terpnodes (ESSENBERG et PIERCE, 1994), toutes
dtectables par des techniques simples d'histochimie.
Aprs extraction de certains de ces composs, des
tests de toxicit ont permis de leur attribuer in vitro
une activit antimicrobienne, autorisant leur classe-
ment dans le groupe des phytoalexines.
L'examen microscopique
l'chelle cellulaire
Les ractions de dfense des plantes se traduisent
par des perturbations cellulaires importantes obser-
20
vables l'chelle ultrastructurale. L'application des
diffrentes techniques de microscopie lectronique
dans le domaine de la pathologie vgtale permet
ainsi d'affiner l'examen histologique en largissant
l'observation aux compartiments de la cellule (HALL
et HAWES, 1991). Ainsi, la paroi constitue le sige pri-
vilgi de nombreuses rponses de la plante infecte,
en ayant pour effet de renforcer cette barrire prexis-
tante. Un enrichissement en protines, en polysac-
charides ou en polyphnols a ainsi t caractris
dans les parois cellulaires de plantes contamines.
L'augmentation de la densit en lectrons des parois
des cellu les de racines de bananier attaques par le
nmatode migrateur Radopholus similis a pu tre
associe l'imprgnation de ces parois par des f1avo-
nOldes pralablement dtects par voie histo-
chimique (VALETIE et al., 1996) (figure 1). Dans les
feuilles de cotonnier infectes par X. campestris pv.
malvacearum, l'accumulation de flavonodes dans les
cellules du msophylle se caractrise sur le plan cyto-
logique par la prsence de globules denses aux lec-
trons qui sont produits dans le cytoplasme (figure 2)
avant de se concentrer dans les parois et dans la
lamelle moyenne des cellules ncrotiques (figure 3)
(DAI et al., 1996). En raison des capacits des Xantho-
monas hydrolyser les pectines des lamelles
moyennes (BOHER et al., 1995), il est logique de
suggrer que X. campestris pv. malvacearum se
trouve confront des produits de dgradation de la
pectine renfermant des molcules potentiellement
bactricides.
Dans le cas des maladies vasculaires, il est gnrale-
ment admis que la colonisation de la plante repose
sur le succs ou l'chec de l'expression de gnes de
dfense, d'une part, durant la colonisation des tissus
corticaux et, d'autre part, durant l'installation et le
dveloppement du parasite dans le systme vas-
culaire de la plante (BECKMAN, 1987). Au cours de la
phase corticale, peu de parasites vasculaires
fongiques ou bactriens sont freins par les ractions
diffrencies par la plante pour les contrer, malgr
l'efficacit potentielle de barrires structurales ou
chimiques constitutives. C'est dans l'environnement
des tissus vasculaires que le systme dfensif de la
plante parvient ralentir, voire bloquer, la progres-
sion du parasite. Le transport des micro-organismes
par les flux hydriques des vaisseaux accentue
d'autant le risque de contamination systmique,
imposant la plante de ragir rapidement la pr-
sence du parasite. C'est l'ensemble des parenchymes,
paravasculaire et phlomique, qui est impliqu dans
cette course contre la montre, qui va ainsi dterminer
le niveau de rsistance de l'hte la maladie.
Un groupe de molcules a t particulirement
tudi dans le cadre des mcanismes de rsistance du
cotonnier aux maladies vasculaires d'origine
fongique. En effet, une tude histochimique et
l
3
Figure 1. 0/
de racines de bananier infectes par le nmatode
Radopholus similis. Le nmatode (n) est localis dans un
espace intercellulalfe du parenchyme cortical d'une racine
d'une varit tolrante. La lamelle moyenne autour du
parasite prsente une densit importante aux lectrons
(flches), rvlant l'accumulation de composs
osmiophiles et identifis comme des flavonOides par les
tests histochimiques, (p : paroi cellulaire de l'endoderme)
(x 8 000).
Figure 2. Observation en microscopie lectronique de
cotyldons de cotonnier rsistant infects par Xanthomonas
campestris pv. malvacearum. Les cellules voisines de la
ncrose typique de la raction hypersensible conllennent
eps'
oss
osmiophiles (flches) identifis par les techniques
histochimiques comme des flavonoides, (p : paroi
cellulaire), (x 28 000).
cotyldons de cotonnier rsistant infects par Xanthomonas
campestris pv. malvacearum. La bactrie (b) localise dans
les espaces intercellulaires du msophylle cotyldonnaire
produit des exopolysaccharides en grande quantit (eps).
Oes composs de types flavonoides denses aux lectrons
sont localiss dans le cytoplasme coagul des cellules
parenchymateuses et dans la lamelle moyenne,
dont des fragments se dtachent et s'accumulent
dans les eps bactriens (ttes de flches), (x 43 500).
biochimique a dmontr que certains mtabolites
secondaires appartenant aux terpnodes possdaient
une activit antifongique l'gard de Verticillium
dahliae, agent de la verticilliose (BELL, 1992 ; MACE
et al., 1989). Une analyse similaire ralise conjoin-
tement l'observation ultrastructurale a montr que
ces terpnodes sont produits dans les cellules paren-
chymateuses du phlome et du xylme puis excrts
dans l'espace paramural d'abord et les vaisseaux
du xylme, ensuite (figure 4). Or, c'est dans ces
vaisseaux que le champignon se dveloppe pour
coloniser la plante entire. Ainsi, dans les plantes
tolrantes ou rsistantes la verticilliose, il a t
observ que ces composs tapissaient la paroi du
champignon ds les premiers jours de l'infection
(figure 5). Un examen attentif rvle une dsorganisa-
tion des systmes endomembranaires des hyphes
mycliennes, traduisant un effet cytotoxique de ces
molcules (DAAYF et al., 1996) (figure 6).
Dans le modle manioc-X. campestris pv. manihotis,
des ractions identiques ont t observes, aussi bien
dans les plantes de la varit sensible que dans celles
de la varit rsistante. Sur cette dernire cependant,
elles apparaissent plus prcocement que sur la plante
sensible et avec une intensit suprieure. A cet gard,
des comptages comparatifs de vaisseaux contamins,
de cordons bactriens intercellulaires, de cellules
produisant des composs phnoliques et de thylles
dans les vaisseaux ont permis de mieux apprcier
l'impact de ces rponses sur le dveloppement bact-
rien. Durant la phase vasculaire, la description des
rponses de la plante rvle l'existence de diffrences
significatives pouvant expliquer certains aspects de la
rsistance du manioc la bactriose (KPEMOUA et al.,
1996). Ces ractions intressent entre autres les modi-
fications cellulaires de certains thylles. Le thylle est
un moyen de dfense qui permet, dans certains cas,
de contenir localement les micro-organismes dans les
vaisseaux contamins, mme s'il contribue galement
ralentir le transfert de l'eau dans la plante. Leur
production a largement t dmontre dans le cas de
trachomycoses (OUELLETIE et RIOUX, 1992 ; RIoux
et al., 1995) et leur participation la rsistance ces
maladies a t clairement tablie sur le cotonnier
infect par Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum
(BEcKMAN, 1987) et sur le bananier infect par
Fusarium oxysporum f. sp. cubense (VANDERMOLEN
et al., 1987). Dans le manioc infect par X. campes-
tris pv. manihotis, les observations ultrastructurales
ont montr que certains des thylles diffrencis par la
varit rsistante subissaient une volution morpholo-
gique non observe dans les plants infects des
varits sensibles. En effet, ces thylles prennent un
aspect digit par comparaison la forme globuleuse
des thylles produits dans les varits sensibles conta-
mines (figure 7). Cette ddiffrenciation est associe
une dsorganisation de leur contenu cellulaire.
Avant le stade ultime du collapsus, le cytoplasme de
22
ces thylles subit une modification profonde caract-
rise par l'augmentation du nombre des organites,
une augmentation de sa densit lectronique et par
l'apparition de vsicules dont le contenu, trs osmio-
phi le, se dverse d'abord dans l'espace priplas-
mique, imprgne ensuite la paroi cellulosique et la
lamelle moyenne et s'exclue enfin dans la lumire
des vaisseaux (figure 8). Certaines des bactries loca-
lises au voisinage des zones de scrtion de ces
thylles en phase de dstabi 1isation montrent des
signes de dgradation (figure 7). Ce mcanisme s'ap-
parente celui d'une scrtion de composs, de
nature probablement phnolique, qui pourraient
avoir un effet bactricide. L'abondance d'organites
dans les cellules compagnes et les thylles tels que
mitochondries, rticulum endoplasmique et appareil
de Golgi conforte j'existence d'un processus
de scrtion trs actif. En outre, la prsence de
composs phnoliques dans les thylles est relier
la densit particulire du cytoplasme des cellules
parenchymateuses compagnes dont ils sont issus.
L'organisation de ces cellules de la varit rsistante
est en effet trs diffrente de celle des cellules
compagnes des plantes sensibles, suggrant que les
thylles diffrencis par les cellules parenchymateuses
compagnes du xylme de la varit de manioc rsis-
tante la bactriose possdent les capacits mtabo-
liques pour accumuler et scrter des composs
possdant des proprits bactriostatiques (KPEMOUA
et al., 1996).
L'observation en microscopie lectronique permet
donc de caractriser un certain nombre de rponses
de la plante soumise un traumatisme parasitaire.
Cette approche complte parfaitement l'analyse
histochimique en prcisant l'aspect ultrastructural et
la cytolocalisation des composs identifis par les
techniques de coloration. En revanche, l'examen
cytologique conventionnel reste souvent insuffisant
pour la caractrisation chimique de structures nodif-
frencies l'chelle ultracellulaire. Le dveloppe-
ment rcent de la cytologie molculaire a ouvert de
nouvelles voies de recherche, qui approfondissent
d'autant notre connaissance du rle des produits des
gnes de dfense dans les stratgies labores par les
plantes pour se protger des infections.
1 l'examen microscopique
1 l'chelle molculaire
~ i ( ;
N, La cytologie molculaire fait appel aux tech-
niques de marquage des molcules l'aide de sondes
spcifiques. En raison de leur haute spcificit, elles
sont considres comme des outils particulirement
puissants, pour l'tude spatio-temporelle des produits
des gnes. Ces sondes, couples des marqueurs
racines de cotonnier tolrant la verticilliose.
Oans le systme vasculaire, des cellules parenchymateuses
du phlome et du xylme produisent des substances
denses aux lectrons identifies en histochimie comme des
composs terpnoidiques. Ces molcules sont localises
dans le rticulum endoplasmique (ttes de flches),
les vacuoles (v) et au voisinage des mitochondries (mi),
(p : paroi cellulaire, tc : tube cribl du phlome),
(x Il 000).
racines de cotonnier tolrant la verticilliose. Les
composs terpniques denses aux lectrons s'accumulent
dans les vaisseaux (v), tapissant la paroi des hyphes
fongiques (h) et la paroi secondaire des cellules
(ps, flches), (x 26 000).
racines de cotonnier tolrant la verticilliose. L'impact des
composs toxiques produits par les racines en rponse
l'infection par Verticillium consiste en une dsorganisation
du cytoplasme des hyphes (c) qui se traduit par une
dgradation des systmes membranaires, (ps : paroi
secondaire du vaisseau v), (x 21 000).
feuilles de manioc rsistant infectes par Xanthomonas
campestris pv. manihotis. Les thylles digits au cytoplasme,
trs dense aux lectrons, renferment des vsicules qui
scrtent des composs (ttes de flches) dans la lumire
du vaisseau (v). Oes bactries vivantes (doubles flches)
et mortes ({lches) sont visibles prs du thylle, (x 5 000).
campestris pv. manihotis. Agrandissement de la zone
encadre de la figure 7 montrant les vsicules (v) qui
relarguent leur contenu osmiophile ({lches) dans la paroi
(p) et la lumire du vaisseau (v). Remarquez le nombre
important de mitochondries (m) et le rseau dense du
rticulum (re), (x 40 000).
facilement dtectables en microscopie tels que l'or
collodal ou la fluorescine, entre autres, permettent
la cytolocalisation prcise et fiable d'une trs grande
varit de molcules incluant des sucres, des
polysaccharides, des protines, des composs
phnoliques, des lipides et des acides nucliques
(CHAMBERLAND, 1994).
Les anticorps, monoclonaux ou polyclonaux, repr-
sentent certainement le type de sonde le plus large-
ment utilis dans l'tude des ractions de dfense des
plantes (BENHAMOU, 1993), condition d'assurer une
prparation adquate des tissus vgtaux sans trop
altrer les sites antigniques recherchs. La distribu-
tion des HRGP (hydroxyproline-rich glycoprotein) a
ainsi t suivie au cours de l'infection de racines de
tomates par Fusarium oxysporum f. sp. radicis-Iyco-
persici, dmontrant une production suprieure et une
localisation plus large de cette glycoprotine dans les
plantes rsistantes (BENHAMOU et al., 1990). Ces
HRGP ont t visualises dans les espaces intercel-
lulaires et les parois primaires. Des protines enzy-
matiques produites par la plante en rponse aux
infections fongiques ont de mme t immunocyto-
localises; l'exemple le plus connu concerne les
chitinases et les glucanases. Leur immunolocalisation
in planta a dmontr leur implication respective dans
la dgradation de la chitine et des ~ - 1 ,3 glucanes des
parois fongiques (BENHAMOU et ASSElIN, 1992).
Conjointement l'immunocytochimie de protines
enzymatiques, la recherche d'activit enzymatique
permet d'associer in situ la localisation d'une enzyme
son activit (HALL et HAWES, 1991).
Les proprits immunognes des polysaccharides ont
galement t mises profit pour confirmer le rle de
certains de ces polymres dans la rsistance des
plantes aux agressions microbiennes. L'activation de
la synthse de callose a ainsi t confirme sur les
plantes ayant subi une infection parasitaire. Si les
dpts de callose dans les cellules ne constituent pas
en-soi une raction de dfense spcifique, ils inter-
viennent nanmoins de manire systmatique lors
d'un traumatisme abiotique ou biotique. Ils ont pu
tre dtects dans le cas des maladies d'origine bac-
trienne (KPEMOUA et al., 1996), fongique (DAAYF et
al., 1996), virale (PETERSCHMITI, non publi) ainsi que
dans le cas d'attaques de nmatodes (VALETIE et al.,
1996) et d'insectes (CALATAYUD et al., 1996). Dans les
tissus infects, la callose est dpose dans les espaces
intercellulaires, les papilles paramurales ou dans les
parois cellulaires associes une rorganisation de
leur architecture (figure 9).
La production de pectine par les thylles durant leur
diffrenciation en rponse aux infections par des
maladies vasculaires a de mme t immunocaract-
rise dans les vaisseaux de manioc contamins par
X. campestris pv. manihotis (KPEMOUA et al., 1996).
Des fragments de composs pectiques se dtachent
24
de la lamelle moyenne des thylles et s'accumulent
dans la lumire des vaisseaux jusqu' leur occlusion
(figure 10). D'une manire gnrale, l'immunoloca-
lisation des composs pectiques confirme les
processus de dgradation des lamelles moyennes,
qui conduit la libration dans le compartiment
apoplastique d'oligomres de pectine dont le rle
liciteur des mcanismes de dfense a dj t dcrit
par ailleurs (RYAN et FARMER, 1991).
La cytolocalisation de mono- ou oligosaccharides
peut tre conduite en utilisant les lectines, glycopro-
tines prsentant une trs forte affinit pour les sucres
(BENHAMOU, 1989). La lectine de germe de bl (WCA,
Wheat germ agglutinin) a ainsi t teste avec succs
pour la localisation de la N-actylglucosamine,
monomre constitutif de la chitine des parois de
champignons (figure 11) (NICOLE et BENHAMOU, 1991).
Dans le cadre de l'tude des ractions de dfense des
racines de cotonnier infectes par Fusarium
oxysporum f. sp. vasinfectum, l'utilisation de cette
lectine a montr que la paroi du champignon subis-
sait de graves dommages dans les plantes plus tol-
rantes l'infection suggrant l'intervention d'une
chitinase dans le systme dfensif du cotonnier
(figure 12). Une telle approche a par ailleurs confirm
la production de cette PR-protine dans des plantes
transgniques pour le gne de la chitinase (BENHAMOU
et al., 1993).
L'application de la technique enzyme-or permet de
localiser avec succs des substrats aussi diversifis
que les acides nucliques, les lipides, les sucres ou
les composs phnoliques (BENDAYAN, 1984 ; VIAN
et al., 1991). L'utilisation d'une laccase fongique, une
ortho-diphnol oxydase, conjugue l'or collodal
aprs purification de l'enzyme a permis de localiser
la prsence de composs phnoliques impliqus dans
des rponses de plantes infectes, soit par des cham-
pignons (BENHAMOU et al., 1994), soit par des bact-
ries (BOHER et al., 1996). La stimulation du systme
dfensif de tomates attaques par Fusarium
oxysporum f. sp. radicis-Iycopersici induit la forma-
tion et l'accumulation dans le parenchyme cortical
racinaire de structures globulaires, dont certaines ren-
ferment des composs phnoliques indtectables
par les techniques histochimiques conventionnelles
(BENHAMOU et al., 1994). Dans les parenchymes
vasculaires de tiges de manioc rsistant, le complexe
laccase-or a confirm l'imprgnation des espaces
intercellulaires et des lamelles moyennes par des
composs phnoliques (KPEMOUA et al., 1996)
(figure 13). De tels composs ont galement t
caractriss dans des bactries en dgnrescence au
voisinage des thylles dans les vaisseaux contamins
du xylme. L'observation de ces tissus sous lumire
ultra-violette confirme la prsence de ces composs
grce leur fluorescence naturelle.
racines de cotonnier tolrant la verticilliose. Marquage
de la callose aprs utilisation d'anticorps polye/onaux
anti-B-7,J-glucanes. Un dpt de callose (ca) est visible
dans l'espace paramural d'une cellule du phlome,
(c : cellule phlomique; p : paroi cellulaire), (x 27000).
campestris pv. manihotis. Immunomarquage de la pectine
avec des anticorps monoe/onaux montrant la prsence
de fragments de lamelle moyenne ({lches) se dtachant
du thylle (t), (x 20 000).
racines d'Hevea brasiliensis infectes par le champignon
Rigidoporus lignosus, agent de pourriture blanche.
Marquage de la chitine fongique par la lectine de germe
de bl conjugue l'or colloidal.
Les particules d'or sont rgulirement distribues sur la
paroi des hyphes mycliennes (h), (x 9 000).
racines de cotonnier infectes par le champignon Fusarium
oxysporum f. sp. vasinfectum. Marquage de la chitine fon-
gique par la lectine de germe de bl conjugue
l'or colloldal. La prsence de particules d'or ({lches) au
voisinage de la paroi des filaments mycliens (h) suggre
une dgradation de la chitine paritale avec libration
d'oligomres de chitine, (x 26 000).
figure 13. Observation en microscopie lectronique de
campestris pv. manihotis. Marquage des composs
phnoliques par une enzyme (la laccase) conjugue l'or
col/oldal. Les particules d'or sont localises sur la lamelle
moyenne (lm) et la paroi primaire (p), (x 24 000).
Actes des 5
e
Si l'approche enzyme-or apparat comme extr-
mement sduisante, elle ncessite cependant un
travail pralable et incontournable de purification de
protine, limitant a priori l'accessibilit cette
mthodologie.
Enfin, l'expos de ces approches molculaires ne sau-
rait tre complet si l'on n'voquait les techniques
d'hybridation in situ. Dans la problmatique de
l'identification des ractions de dfense des plantes,
elles apportent sans conteste des informations pr-
cieuses relatives la cintique de l'expression des
gnes par la caractrisation des ARN messagers
(BRANGEON, 1996), permettant ainsi d'affirmer les
associations troites pouvant exister entre les gnes
de rsistance et la prsence plus ou moins prcoce de
certaines protines. C'est le cas, notamment, des
recherches portant sur les gnes impliqus dans la
raction hypersensible, manifestation cellulaire
extrme de la rsistance des plantes aux attaques
microbiennes (GOODMAN et NOVACKY, 1994).
1 Conclusion
m ~ m
Il Dans ce chapitre, nous nous sommes attachs
dmontrer l'apport de la biologie cellulaire la
comprhension des mcanismes de rsistance des
plantes aux parasites. Les techniques modernes de la
cytologie molculaire permettent ainsi les oprations
suivantes:
- suivre in planta le devenir d'une molcule au
cours d'une interaction;
- en prciser la distribution l'chelle des tissus et
de la cellule;
- la visualiser par rapport aux sites d'infection et de
localisation du parasite.
Aussi efficace que parat cette approche, elle prsente
nanmoins un facteur limitant important qui rside
dans la prservation du matriel vgtal durant la
prparation des chantillons pour l'observation
microscopique. C'est particulirement vident pour
les tapes de fixation, pour lesquelles les techniques,
fondes sur l'utilisation du froid (cryo-fixation) sous
haute pression, vitent les artefacts possibles pouvant
se produire lors de la fixation chimique.
Il faut, en outre, conserver l'esprit que la micro-
scopie gnre l'information sous forme d'images qui,
en elles-mmes, ne constituent qu'un instantan
d'une situation particulire. Dans une stratgie
d'tude des interactions plante-parasite, elle occupe
une place essentielle, condition qu'elle s'insre
dans un dispositif plus large comprenant des
approches biochimiques, molculaires, voire immu-
nologiques. C'est vrai au plan fondamental pour une
meilleure comprhension des mcanismes tudis,
c'est vrai aussi au plan technologique pour l'obten-
26
tion de ces outi Is performants que sont les sondes
molculaires.
BECKMAN CH., 1987. The nature of wilt diseases of
plants. APS Press, St Paul, Etats-Unis, 175 p.
BELL A.A., 1992. Verticillium will. In Cotton diseases.
HILLOCKS J.H. (Ed.l, CAB International, Wallingford,
Grande-Bretagne, p. 87-126.
BENDAYAN M., 1984. Enzymes-gold electron micro-
scopic cytochemistry : a new affinity technique for
the ultrastructural localization of macromolecules.
journal of Electron Microscopical Techniques 1 :
349-352.
BENHAMou N., 1989. Preparation and application of
lectin-gold complexes. In Colloidal Gold. Principles,
Methods, and Applications. HAYAT MA (Ed.),
Academic Press, New York, Etats-Unis, p. 96-145.
BENHAMou N., 1993. Spatio-temporal regulation of
defense genes : immunocytochemistry. In Mecha-
nisms of Plant Defense Responses. FRITIG B. et
LEGRAND M. (Eds), Kluwer Academic Publishers,
Dortrecht, Pays-Bas, p. 221-235.
BENHAMou N., ASSELIN A., 1992. In situ immuno-
cytochemical localization of plant proteins. In
Methods in Plant Molecular Biology and Biotechno-
logy. THOMPSON j.E. and GLiCK B.R. (Eds), CRC Press,
Londres, Grande-Bretagne, p. 128-141.
BENHAMou N., BROGLIE K., CHET 1., BROGLIE R., 1993.
Cytology of infection of 35S-bean chitinase
transgenic canola plants by Rhizoctonia solani:
cytochemical aspects of chitin breakdown in vivo.
The Plant Journal 4 : 295-305.
BENHAMou N., LAFONTAINE P.-J., NICOLE M., 1994. Seed
treatment with chitosan enhanced resistance to
Fusarium crown and root rot in tomato plants. Phyto-
pathology 12 : 1 432-1 444.
BENHAMOU N., MAzAu, D., ESQUERRE-TuGUAYE M.-T.,
1990. Immunogold localization of hydroxyproline-
rich glycoproteins in tomato root cells infected by
Fusarium oxysporum f. sp. radicis-Iycopersici, study
of a compatible interaction. Phytopathology 80 : 163-
173.
BOHER B., KPEMOUA K., NICOLE M., LUISETTI J.,
GEIGER J.-P., 1995. Ultrastructure of interactions
between cassava and Xanthomonas campestris
pv. manihotis : Cytochemistry of cellulose and pectin
degradation in a susceptible cultivar. Phytopathology
85 : 777-788.
BOHER B., BROWN 1., NICOLE M., KPEMOUA K.,
BONAS U., GEIGER j.-P., MANSfiELD J., 1996. Histology
and cytochemistry of interactions between plants and
Xanthomonas. In Histology, Ultrastructure and
Molecular Cytology of Plant-Microorganism Inter-
actions. NICOLE M. et G!ANINAZI-PEARSON V (Eds),
Kluwer Academie Publishers, Oortrecht, Pays-Bas,
p.193-210.
BRANGEON J., 1996. In situ hybridization to RNA in
plant biology. In Histology, Ultrastructure and Mole-
cular Cytology of Plant-Microorganism Interactions.
NICOLE M. and G!ANINAZI-PEARSON V (Eds), Kluwer
Academie Publishers, Oortrecht, Pays-Bas, p. 21-42.
BROGLIE K., CHET 1., HOLLIDAY M., CRESSMAN R.,
BIDDLE P., KNOWLTON S., MAUVALS CJ., BROGLIE R.,
1991. Transgenic plants with enhanced resistance to
the fungal pathogen Rhizoctonia solani. Science
254 : 1 194-1 197.
CALATAYUD P.-A., BOHER B., NICOLE M., GEIGER J.-P.,
1996. Interactions between cassava mealybug and
cassava : cytochemical aspects of plant cell wall
modifications. Entomologia Experimentalis et Appli-
cata, sous presse.
CHAMBERLAND H., 1994. Gold labeling methods for
the ultrastructural localization of host wall and
pathogen components. In Host wall alterations by
parasitic fungi. PETRINI O. and OUELLETTE G.B.O. (Eds),
APS Press, St Paul, Etats-Unis, p. 1-12.
OAAYF F., NICOLE M., BOHER B., PANDO A., GEIGER J.P.,
1996. Early defense reactions of cotton to Vertici/lium
dalhiae. European Journal of Plant Pathology, sous
presse.
OAI G.-H., NICOLE M., MARTI NEZ C, BRESSON E., OANIEL
J.-F., ANDARY C, GEIGER J.-P, sous presse. Histoche-
mistry and ultrastructure of flavonoid accumulation
during an incompatible interaction between Xantho-
monas campestris pv. malvacearum (race 18) and
cotton. Planta, sous presse.
ESSENBERG M., PIERCE M., 1994. Sesquiterpenoid phy-
toalexins synthesized in cotton leaves and cotyledons
during the hypersensitive response to Xanthomonas
campestris pv. malvacearum. In Handbook of
phytoalexin metabolism and action. DANIEL M. and
PURKAYASTHA R.P. (Eds), Marcel OEKKER Inc., New York,
Etats-Unis, p. 183-198.
GOODMAN R.N., NOVACKY AJ., 1994. The hypersensi-
tive reaction in plants to pathogens, a resistance
phenomenon. APS Press, St Paul, Etats-Unis, 245 p.
HALL J.L., HAWES C, 1991. Electron microscopy of
plant cells. Academie Press, Londres, Grande-
Bretagne, 466 p.
JENSEN W.A., 1962. Botanical Histochemistry.
Freeman and Company, San Francisco, Etats-Unis,
409 p.
KPEMOUA K., BOHER B., NICOLE M., CALATAYUD P.-A.,
GEIGER J.-P., 1996. Cytochemistry of defense
responses in cassava infected by Xanthomonas
campestris pv. maniho(is. Canadian Journal of Micro-
biology, sous presse.
LINDSAY W.P., LAMB CJ., OIXON RA, 1993. Microbial
recognition and activation of plant defense systems.
Trends in Microbiology 1 : 181-187.
MACE M.E., STIPANOVIC R.O., BELL A.A., 1989.
Histochemical localization of deoxyhemigossypol a
phytoalexin in Vertici/lium dahliae-infected cotton
stems. New Phytologist 111 : 229-232.
MICHELMORE R., 1995. Molecular approaches to mani-
pulation of disease resistance genes. Annual Review
of Phytopathology 15 : 393-427.
NICOLE M., BENHAMOU N., 1991. Ultrastructural loca-
lization of chitin in cell walls of Rigidoporus lignosus,
the white root rot fungus of rubber trees. Physiolo-
gical and Molecular Plant Pathology 39 : 415-432.
NICOLE M., G!ANINAZI-PEARSON V, 1996. Histology,
Ultrastructure and Molecular Cytology of Plant-
Microorganism Interactions. Kluwer Academic
Publishers, Oortrecht, Pays-Bas, 270 p.
NICOLE M., GEIGER J.-P., NANORIS O., 1992. Defense
mechanisms of angiosperm roots to fungal invasion.
ln Defense mechanisms of woody plants against
fungi. BLANCHETTE RA and BIGGS A.R. (Eds), Springer
Verlag, New York, Etats-Unis, Heidelberg, Allemagne,
p.181-206.
NICOLE M., TOPPAN A, GEIGER J.-P., ROBY O., RIO B.,
NANDRIS O., 1991. Defense responses of Hevea
brasiliensis to elicitors from root rot fungi. Canadian
Journal of Botany 69 : 1 819-1 824.
OUELLETTE G.B.O., RIoux O., 1992. Anatomical and
physiological aspects of resistance to Outch elm
disease. In Defense mechanisms of woody plants
against fungi. BLANCHETTE RA et BIGGS A.R. (Eds),
Springer Verlag, Berlin, Allemagne, p. 257-307.
PETRINI O., OUELLETTE G.B.O., 1994. Host wall altera-
tions by parasitic fungi. APS Press, St Paul, Etats-Unis,
159 p.
RIoux O., BIGGS AR., 1994. Cell wall changes in host
and non host systems: microscopie aspects. In Host
wall alterations by parasitic fungi. PETRINI O. and
OUELLETTE G.B.O. (Eds), APS Press, St Paul, Etats-Unis,
p.31-44.
RIoux O., CHAMBERLAND H., SIMARD M., OUELLETTE
G.B., 1995. Suberized tyloses in trees : an ultrastruc-
tural and cytochemical study. Planta 196 : 125-140.
RYAN CA, FARMER LE., 1991. Oligosaccharide signais
in plants : a current assessment. Annual Review
of Physiological and Molecular Plant Biology 42 :
651-674.
SAUVION N., BONADE-BoTTINO M., JOUANIN L.,
RAHBE Y, 1995. Les plantes transgniques rsistantes
aux insectes. INFO 2000, Bulletin d'information des
zoologistes de l'INRA 10: 3-13.
SHIGO AL., 1984. Compartmentalization : a concep-
tuai framework for understanding how trees grow and
defend themselves. Annual Review of Phytopathology
22 : 189-214.
Actes des 5
e
VALETTE C, NICOLE M., SARAH J.-L, BOISSEAU M.,
BOHER B., FARGETTE M., GEIGER J.-P., 1996. Ultrastruc-
ture and cytochemistry of interactions between
banana and the nematode Radopholus similis.
Fundamental and Applied Nematology, sous presse.
VIAN B., NAIRN J., REID J., 1991. Enzyme-gold cytoche-
mistry of seed xyloglucans using two xyloglucan
specifie hydrolases. Importance of prior deactivation
of the enzymes. Histochemical Journal 23 : 116-124.
Discussion
Les flavonodes
Les f1avonodes appartiennent au groupe des
composs phnoliques. Certains sont constitutifs alors
que d'autres sont induits aprs un traumatisme bio-
tique ou abiotique. Parmi les fonctions multiples
qu'elles occupent (reconnaissance, attractivit, stimu-
lateurs de croissance), ces molcules peuvent gaIe-
ment tre impliques dans le systme dfensif des
vgtaux comme signaux activateurs de gnes ou en
tant que phytoalexines. Dans ce dernier cas, on a pu
dmontrer in vitro l'action antimicrobienne de
certaines d'entre elles sur un grand nombre de micro-
organismes (champignons, bactries, nmatodes.. .).
Les sites de production des phytoalexines
Ils sont bien entendu synthtiss dans le cytoplasme
des cellules de tissus infects. Dans le cas du coton-
nier infect par les champignons vasculaires Verticil-
lium ou Fusarium, ou par une bactrie foliaire,
Xanthomonas campestris pv. malvacearum, deux sites
de production des terpnoides drivs du gossypol
ont t mis en vidence sur le plan cellulaire: les
cellules parenchymateuses du phlome et celles
associes aux vaisseaux du xylme.
Mise en vidence d'anthocyanes
Dans les modles dcrits, aucune production
d'anthocyanes n'a t caractrise, mme si ces
molcules sont connues pour intervenir dans d'autres
modles plantes-parasites.
Tolrance et rsistance des vgtaux
Ces deux notions diffrent dans leur dfinition. La
tolrance est une notion essentiellement agrono-
mique reposant sur des variations dans le rendement
en fonction du degr de maladie, mais les anglo-
phones utilisent galement le terme de tolrance dans
le cadre des interactions plantes-micro-organismes.
La rsistance a un fondement gntique qui repose
sur le concept gne pour gne, pour lequel le(s)
gne(s) de rsistance de la plante s'oppose(nt) un
gne d'avirulence du parasite.
Dans le cas d'une interaction incompatible, la rsis-
tance rsulte de l'expression d'un ou de quelques
28
gnes; elle se traduit par une raction de type hyper-
sensible (exemple: la bactriose du cotonnier). Ces
gnes gouvernent l'activation de signaux impliqus
dans la mise en place de la raction hypersensible ou
le dclenchement des ractions de dfense. Dans le
cas d'une interaction compatible, l'absence de ces
gnes de rsistance de la plante conduit des degrs
d'infection variables rsultant de la manifestation
essentielle de gnes de dfense. Parmi ces derniers,
citons ceux qui codent pour la synthse de molcules
impliques dans le renforcement des parois cel-
lulaires : lignine, subrine, callose, HRGP. Alors que
d'autres codent pour la synthse de protines relies
la pathogense (PR-protines), telles les chitinases
ou les glucanases, ou pour la production de
composs phnoliques comme les f1avonodes ou les
drivs cathchiques. L'efficacit des ractions
de dfense varie en fonction de l'environnement, du
cultivar et, surtout, des micro-organismes pathognes,
dont certains ont la capacit de contourner ces
rponses.
Une bonne connaissance des mcanismes de rsis-
tance des plantes associe la matrise des tech-
niques de transgnose permet de disposer de plantes
transgniques dans lesquelles ont t introduits des
gnes de rsistance certains microbes (bactrie et
champignon).
Quel est le cot nergtique des mcanismes
de dfense pour la plante?
La diffrenciation de ractions de dfense sollicite
plusieurs mtabolismes, souvent au dtriment des
fonctions physiologiques essentielles de la plante
(croissance, photosynthse, respiration, reproduction,
stockage de substances de rserve). La synthse de
nova de molcules antimicrobiennes ou la mise en
place de mcanismes de cicatrisation exige une
consommation d'nergie plus ou moins importante.
Bien que le mtabolisme primaire ne puisse tre
fondamentalement altr dans une situation d'in-
compatibilit entre la plante et son micro-organisme
pathogne, il a t dmontr des dtournements de
transfert de flux intressant des lments comme le
carbone et l'azote. Cependant, la production de
mtabolites secondaires (composs phnoliques et
terpniques, hormones de croissance... ), impliqus
dans la rponse de la plante l'agression parasitaire,
peut se traduire par une diminution de la biomasse
vgtale, une rduction des substances de rserve
ou une diminution de l'efficacit des processus
physiologiques.
D'une manire gnrale, il est difficile de quantifier
de telles perturbations physiologiques en termes de
consommation d'nergie car la plante cherche, dans
la mesure du possible, tablir la situation
d'quilibre nergtique la plus favorable son
dveloppement.
CAlATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit.), 1996.
Acles des se journes du groupede travail relations insectes-plantes,
26-27 octobre 1995. Montpellier,
Colloques. ClRAD-CA, Montpellier, France. 96 p.
. des conditions de milieu
sur la prdisposition des plantes aux nlaladies :
synthse sur le cas des bactrioses des arbres fruitiers
"
a noyau
A. VIGOUROUX
INRA, EN5A, UFR de biologie et pathologie vgtales, 9 place Viala, 34060 Montpellier Cedex 1, France.
Les phytopathologistes se sont toujours intresss
l'influence des conditions de milieu sur les maladies
mais il s'agissait essentiellement de l'influence sur le
dveloppement du parasite: germination de spores,
transport (se rfrer aux tudes sur les mildious, les
tavelures, etc.). L'action du milieu sur l'hte, pouvant
modifier les ractions de la plante au parasite, a t
nettement moins tudie (5CHNWEISS, 1981), sinon,
par exemple, pour souligner certains effets vidents
comme les gerures constituant des portes d'entre,
l'asphyxie ou certaines carences affaiblissant l'hte et
ses ractions de dfense. Le cas des pourridis
dveloppement aggrav dans les zones de vergers
tendances asphyxiantes est typique de ce que l'on
peut appeler des maladies de faiblesse.
Il est pourtant des situations assez frquentes o ne se
rencontrent ni lsions, ni modifications physiolo-
giques de dprissement, mais des changements
d'taUout fait normaux, souvent temporaires et peu
marqus, permettant cependant l'installation de para-
sites que l'on peut alors qualifier d'opportunistes.
Mme si des parasites divers peuvent prtendre
profiter de ces opportunits, a priori ce sont les
organismes dveloppement trs rapide qui seront
les mieux placs pour valoriser une situation favo-
rable phmre et peu marque. En peu de temps,
ils peuvent s'accrotre considrablement, ou bien
une faible variation de leur substrat ou de leur
milieu nutritif peut leur permettre de passer un
seuil au-dessus duquel cette croissance peut tre
rapidement considrable.
Les bactries rpondent ces caractristiques et ce
type de comportement est apparu clairement durant
notre tude des bactrioses Pseudomonas des
arbres fruitiers noyau. Ces maladies sont trs diffi-
ciles contrler moins de pulvriser gnreusement
les vergers d'antibiotiques, ce qui n'est videmment
pas envisageable. En revanche, en prcisant ce qui
concourt crer les conditions particulires d'instal-
lation des germes, c'est--dire prdisposer les arbres
aux bactrioses, on peut esprer laborer une
dmarche prventive de protection, pour l'inclure
ensuite dans une stratgie globale de lutte intgre.
C'est l'objectif que nous avons poursuivi en tudiant
les conditions de dveloppement des Pseudomonas
affectant les arbres fruitiers noyau. Ces divers
Pseudomonas relvent tous de l'espce syringae (des
pathovars tant infods plus ou moins spcifique-
ment chacune des espces fruitires) et ont des
comportement trs voisins. Pour des raisons histo-
riques et de commodit d'tude (nombreux rameaux
identiques disponibles sur un mme arbre),_ nous
avons approfondi l'tude de la bactriose sur pcher
mais nous vrifions les possibilits de gnralisation
aux germes voisins.
Etude des conditions
de dveloppement
de la bactriose du pcher
Maladie nouvelle apparue la fin des annes 60
dans les conditions cologiques trs types du
plateau granitique du Moyen-Vivarais, cette affection
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995
29
s'est rapidement montre trs influence par plusieurs
facteurs 'diJ milieu.
Elle consiste pour l'essentiel en des lsions
tiques d'tendue trs variable provoques par le
dveloppement du germe responsable, Pseudomonas
syringae pv. persicae dans les tissus corticaux des
rameaux et branches (LUISETTI et al., 1985). Ces
lsions commencent et s'tendent pendant l'hiver, et
peuvent provoquer, au printemps, le desschement
des parties situes au-dessus, lorsque l'arbre retrouve
un dveloppement vgtatif actif.
L'importance des dgts est en grande partie fonction
du nombre et de l'tendue de ces lsions, lments
eux-mmes directement lis la facilit d'installation
et de progression de la bactrie responsable dans les
tissus. Or, l'occasion de l'extension gographique
de la maladie dans les zones de culture du pcher,
sont vite apparues des conditions de dveloppement
prfrentielles de ces lsions, impliquant trs claire-
ment le climat et le sol des parcelles affectes.
L'intensit du phnomne incitait confirmer exp-
rimentalement ces interventions, estimer leur
importance et prciser leurs modalits.
Cependant, un pralable a t de reproduire la
maladie volont. Or, l'inoculation artificielle du
germe, qui aurait pu se limiter une simple piqre
des rameaux avec une aiguille lancole trempe
dans une suspension bactrienne, donnait des rsul-
tats alatoires, jusqu'au moment o nous avons pu
mettre en vidence une forte corrlation entre
la rceptivit des arbres et leur phnologie. En
particulier, des inoculations chelonnes durant
Importance
5 des ncroses
4
3
2
Dates
d'inoculation
2911 25 8 22 7 21 5
Sept. Oct. Oct. Nov. Nov, Dec., Dec. Jan.
, Figure 1. Importance (note sur 5) atteinte au printemps
par lesinfectioflS sur rameau en fonction de la date
d'inoculation. . .
30
l'automne et le dbut de l'hiver ont montr
l'existence d'un accroissel11ent et d'un maximum de
rceptivit des tissus des rameaux pendant la chute
automnale des feuilles (figure 1). La concidence de
cette grande rceptivit avec la ralisation des plaies
ptiolaires, que nous avions auparavant caractrises
comme des voies de contamination naturelle effi-
caces, soulignait une bonne adaptation du germe
pour parasiter le pcher et toutes les exprimen-
tations ralises par la suit ont pris en compte ce
phnomne pour raliser les inoculations.
Compte tenu du type d'investigation (temps morts
importants lis au caractre prenne du modle de
travail), les tudes concernant ces influences
daphiques ou climatiques ont t menes parall-
lement, d'autant que des interactions importantes
entre les deux aspects pouvaient tre attendues. Pour
"expos, nous aborderons en premier lieu les aspects
daphiques.
Etude des influences
fTh1
1;1 d'ordredaphique
r,
It La zone d'extension gographique de la maladie,
en fort accroissement les premires annes, compre-
nait des terrains trs varis sur le plan gologique.
Nous avons ainsi pu constater que les vergers culvs
sur deux types distincts de sols acides (forms sur
arne granitique ou bien sur diluvium de terrasses
fluvio-glaciaires) taient trs affects alors que ceux,
tout proches, sur alluvions rcentes limono-calcaires,
ne montraient aucun dgt.
L'inoculation de jeunes pchers cultivs, dans des
conteneurs de 100 1itres, rempl is de terre de ces
diverses catgories de vergers, confirma la prdisposi-
tion des arbres dvelopps dans les terres caractre
acide. Cependant, la correction de ce caractre par
chaulage ne fournit qu'une amlioration trs limite,
ou mme pratiquement nulle pour des exprimenta-
tions ralises en pleine terre. Les agronomes ne
dcelaient, par ailleurs, aucune care'nce notable ou
systmatique dans la composition des terres et c'est
plutt dans le fonctionnement du systme plante-sol
en place que nous avons recherch l'origine de la
prdisposition observe.
La comparaison de profils culturaux des vergers,
affects ou non, permit d'opposer deux types de
situations: les sols limono-calcaires gnralement
profonds, permettant un enracinement homogne
bien rparti avec une proportion de terre fine argilo-
limoneuse leve; et les sols forms sur arne ou
diluvium, peu profonds, profil htrogne gnrant
Tableau II. Caractristiques des terres de diluvium
(alluvions anciennes) et de limon.
Une autre exprimentation en grands conteneurs fut
donc entreprise dans des conditions d'alimentation
calcique plus contrles. Par le biais de deux niveaux
d'irrigation, l'incidence de la consommation en eau
sur le degr de sensibilit des arbres et sur leur ali-
mentation minrale fut compare celle de deux
formes d'apport de calcium: utilisation, pour l'irriga-
tion, d'eau calcaire contenant 120 mgll de calcium
(par opposition une eau dminralise) et amen-
dement calcique de la terre de culture par mlange
avec 1 g de CaO/kg de terre. Les caractristiques de
la terre de diluvium employe pour l'ensemble de
cette tude figurent au tableau Il, compares celles
d'une terre limono-calcaire type. Comme dans l'essai
prcdent, les arbres (un par conteneur et analyss
individuellement) n'ont t cultivs qu'un an raison
de 12 par traitement. Leur sensibilit a t estime
Granulomtrie
sans dcalcification,
5 fractions en %0
Argile 247 100
limon fin 299 154
Limon grossier 200 151
Sable fin 198 266
Sable grossier 56 329
Fraction suprieure
2 mm en % 9 45
pH 8,2 5,7
C : carbone organique
(mthode Anne 1945) 0/00 14,8 7,2
C : matires organiques
Cxl,72%0 25,2 12,3
Azote Kjeldahl %0 1,8 0,74
Rapport carbone organique
(Anne)/ Azote Kjeldahl 8,22 9,72
Calcaire total %0 364 a
Acide phosphorique
Ooret-Hebertl 0/00 0,07 0,05
Capacit d'change
(mthode de Metson)
meq/l 00 g 10,5 4,2
Calcium changeable
meq/l00 g 35,4 3,1
Magnsium changeable
meq/l00 g 0,86 0,17
Potassium changeable
meq/l00 g 0,185 0,276
des systmes racinaires irrgulirement distribus, la
fraction terre fine dominante sableuse se rvlant
en outre fortement rduite par une importante
proportion de cailloux.
Ces caractristiques, recoupes avec celles des
parties de verger les plus atteintes (hauts de pente,
zones spcialement caillouteuses), suggraient l'exis-
tence, dans les vergers malades, de conditions d'ali-
mentation hydrique estivales dfectueuses et l'on
pouvait penser que, par un arrire-effet se manifestant
en hiver, cette anomalie soit implique dans la
prdisposition des arbres.
Une exprimentation ralise en grands conteneurs
(250 litres), pour que les arbres connaissent des
conditions de dveloppement proches de celles du
plein champ, permit de confirmer que l'augmentation
de la proportion de cailloux et surtout la rduction du
volume de terre disponible taient des facteurs d'aug-
mentation de la sensibilit des arbres. En parallle,
l'incidence trs nette de la seule variation de la quan-
tit d'eau consomme (obtenue en jouant sur le
niveau d'irrigation) confirmait que l'alimentation
hydrique tait bien l'lment dterminant du compor-
tement des pchers face aux infections bactriennes
provoques (VIGOUROUX et al., 1987).
En outre, les rsultats des analyses individuelles des
teneurs en cations des soixante pchers de l'essai,
rapprochs des notations de bactrioses effectues
sur ces mmes arbres, ont permis de dresser la
matrice de corrlation prsente au tableau 1.
Tableau 1. Corrlations entre les lsions observes et les
teneurs en potassium (K), calcium (Ca) et magnsium (Mg)
(au seuil de 1 %).
lsions K Ca Mg
lsions 1 000 + 0,717 - 0,591 - 0,409
K 1 000 - 0,614 - 0,380
Ca 1 000 + 0,240
Mg 1 000
Ainsi, des teneurs superieures en potassium sem-
blaient associes la sensibilit des arbres tandis que
des teneurs plus leves en calcium semblaient asso-
cies un tat plus rsistant. L'examen des rsultats
d'analyses minrales indiquait par ailleurs que la
teneur en calcium des pchers semblait nettement
lie aux quantits d'eau consommes par les arbres,
ce qui suggrait que les modalits d'action d'un
dficit hydrique estival pour prdisposer les arbres
pouvait consister en la rduction de leur teneur en
calcium. Cependant, l'eau utilise pour l'essai s'tant
rvle nettement calcaire, toute laboration de
conclusion sur l'origine du calcium consomm tait
impossible.
Elments analyss Limon calcaire Terres d'alluvions
anciennes
durant l'hiver qui a suivi l'anne de culture et
d'application des traitements, par inoculation artifi-
cielle sur des rameaux d'un an raison de 6 rameaux
par arbre. A la mme poque, en mars, on a prlev
14 rameaux par arbre, identiques ceux inoculs,
pour analyse minrale de leur corce afin de dter-
miner l'incidence des traitements sur la composition
des plants.
L'importance compare des lsions obtenues dans
ces conditions est prsente dans le tableau III. A
niveau d'irrigation identique et pour chacun des deux
niveaux pratiqus, le calcium apport par l'eau
calcaire d'irrigation ou contenu dans l'amendement
du sol n'a pas eu d'effet apprciable. En revanche, la
diminution du niveau d'irrigation s'est traduite par
une augmentation des infections, dans tous les cas o
elle a t applique. C'est donc uniquement la
variation de consommation d'eau qui est associe
aux variations de sensibilit des pchers. Un dficit
hydrique estival constitue ainsi un lment majeur de
prdisposition.
Les rsultats des analyses minrales, au moins en ce
qui concerne le calcium - le seul vraiment mar-
quant -, sont aussi indiqus dans le tableau III. L
aussi, on note une variation des teneurs seulement en
cas de modification du niveau d'irrigation. La teneur
significativement infrieure, constate dans le cas du
plus faible niveau d'irrigation avec l'eau calcaire, qui
aurait pu entraner, logiquement, un taux en calcium
suprieur par rapport celui obtenu avec l'eau pure,
est en fait due une rduction temporaire acciden-
telle de la quantit d'eau dlivre pour ce traitement.
Cette dfaillance confirme le rsultat gnral.
La quantit d'eau consomme par les arbres est donc
le facteur majeur - au moins dans ces types de sol
- des variations des teneurs en calcium des arbres
(VIGOUROUX et BUSSI, 1989). Ce type de rsultat
recoupe parfaitement les connaissances des physio-
logistes sur diverses plantes herbaces et semis
d'espces ligneuses (EpSTEIN, 1972 ; STEBBINS et DEWEY,
1972 ; BANGERTH, 1979). De plus, on retrouve encore
ici un coefficient de corrlation de r =-0,690 entre
l'importance des infections et les taux de calcium des
rameaux des 72 arbres tudis.
La relation entre dficit hydrique estival, faible teneur
en calcium et prdisposition hivernale des arbres,
semble donc se confirmer. Le rle du potassium n'est
pas apparu dans cet essai o le niveau de dficit
hydrique tait bien moindre. Selon les physiologistes
(HUDSON, 1958 ; SALSAC, 1977), son intervention dans
le mtabolisme de l'eau entrane son absorption
intense en cas de dficit important. Ses proprits
antagonistes de celles du calcium doivent donc
intervenir dans des conditions plus svres mais assez
frquentes et il semble ncessaire de conduire paral-
llement les tudes des rles de ces deux cations.
Pour tablir ces rles avec certitude, et les analyser
de faon plus dtaille, un travail s'appuyant sur la
culture de semis de pcher sur sable siliceux avec
solutions nutritives diffrentes concentrations est
entrepris actuellement. De toute faon, une meilleure
connaissance des mcanismes de l'infection est indis-
pensable pour localiser l'intervention de ces cations
et l'tude de l'action climatique nous a permis
d'avancer dans ce domaine.
1 d'ordre
@m A travers l'influence de la topographie ou de
l'exposition, nous avons rapidement peru une inci-
dence trs marque des tempratures ngatives,
retrouve dans l'tendue des dgts qui suivaient,
Tableau III. Comparaison de l'influence de la consommation en eau et de deux formes d'apports de calcium sur
l'importance d'infections bactriennes induites sur des rameaux de pchers et sur la teneur en calcium des rameaux.
Eau employe Type de terre Importance des infections(3) Teneurs en ca!cium
(4
)
Irrigation lger dficit Irrigation lger dficit
forte HP hydrique forte HP hydrique
HP x 0,7 HP x 0,7
Eau calcaire
ll
) Terre acide tmoin 2,91 a 3,87 b 3,55 c 2,26 a
Eau dsionise Terre acide tmoin 3,26 a 3,80 b 3,33 c 2,57 b
Eau dsionise
Terre amende(2)
3,16 a 3,69 b 3,50 c 2,65 b
(1) eau du rseau contenant 120 mgll de Ca.
(2) amendement par addition de 1 g de CaO par kg de terre.
(3) moyenne de 6 inoculations sur rameau par arbre et 12 arbres par traitement (chelle progression logarithmique
de 1 9)
(4) en % de matire sche, moyenne de 14 rameaux par arbre et de 12 arbres par traitement.
les valeurs suivies par la mme lettre ne sont pas distingues par le test de classement des moyennes de Newman et Keuls
au seuil de 5 %.
32 Interactions insectes-plantes
l'chelle rgionale, les hivers spcialement froids.
L'installation d'une petite station mtorologique prs
d'un verger contamin permit alors de suivre plus
prcisment les relations entre arrive des tempra-
tures ngatives et volution de la symptomatologie au
champ. Nous avons ainsi constat l'troite liaison
entre l'apparition des premires ncroses de bour-
geons et l'occurrence des premiers minima ngatifs
(figure 2). Les contaminations des bourgeons tant
obtenues chaque anne lors de la ralisation des
plaies ptiolaires durant la chute des feuilles
(mi-novembre), l'incidence des premiers froids appa-
raissait dterminante pour la dure de l'incubation et
l'extriorisation de l'infection.
Pour confirmer ce rsultat dans des conditions expri-
mentales contrles, nous avons labor un modle
d'inoculation artificielle sur rameau dormant d'un an,
excis et conserv plusieurs mois en tube de verre en
trs bon tat de fracheur. Parmi des lots de rameaux
ayant sjourn, aprs inoculation, diverses tempra-
tures, seuls ceux ayant subi des tempratures
ngatives ont fourni des lsions bactriennes
(figure 3). La dure du froid semblait aussi un lment
important, comme le montrent les traitements III
et IV de la figure 3 (VIGOUROUX, 1979).
Observe aussi dans le cas de bactriose sur d'autres
arbres, cette action du froid, qui apparat si dcisive,
semble constituer un phnomne clef dans le drou-
lement de l'infection bactrienne sur pcher et nces-
siter une analyse spcifique.
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15
E
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10
5
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Janvier
5
: apparition des premiers symptmes hivernaux
Figure 2. Relation entre l'volution des tempratures et
l'apparition des premiers symptmes hivernaux (5).
oc Tempratures subies par les rameaux Longueur moyenne des
lsions obtenues (en mm)
V 1
.10
Inoculation
Figure 3. Influence des basses tempratures sur le
dveloppement de lsions bactriennes provoques
sur rameaux de pcher exciss.
Pour des cas voisins, certains auteurs expliquent l'ac-
tion des tempratures ngatives par l'effet glaogne
des bactries en cause (WEAVER et al., 1981 ; LUISEnl
et GAIGNARD, 1985). D'autres (KLMENT et al., 1984)
invoquent une consommation de sucres solubles par
les bactries, ce qui favoriserait le gel des tissus
potentiel osmotique diminu (SAKAI et YOSHIDA, 1968 ;
LEVITI, 1980). La russite d'inoculations ralises juste
avant l'action du froid nous permet de penser que ce
type d'action des bactries (consommation des sucres
et diminution de la rsistance au froid), s'il existe,
doit tre de porte trs limite.
Compte tenu de la gamme des tempratures effi-
caces, pour lesquelles le mtabolisme des bactries
est pratiquement bloqu, on doit envisager une
action s'exerant plutt sur l'hte. Par exemple, la
transformation d'amidon en glucose, qu'entranent
certainement les tempratures concernes, doit
favoriser la multiplication des bactries fortes
consommatrices de ce sucre (DEAR, 1973).
Actes des 5
e
Tableau IV. Effets de l'imbibition d'eau due au gel sur la diffusion d'encre noire et de bactries dans l'corce de troncs
de pchers et d'abricotiers.
Matriel vgtal Indicateur de Troncs non gels Troncs imbibs d'eau aprs le gel
diffusion
longueur Ecart des Nombre longueur Ecart des Nombre
moyenne de valeurs de mesures moyenne de valeurs de mesures
diffusion (mm) (mm) diffusion (mm) (mm)
Pcher g de 6 mois Encre noire 1.2 1-2 15 21.3 7-25 19
Tiges de jeune pousse Suspension 1.5 1-5 8 24.4 15-35 11
de pcher bactrienne
Abricotier g de 6 mois Encre noire 20 17.6 8-22 20
Tiges de jeune pousse Suspension 9 22.5 15-30 10
d'abricotier badrienne
Pcher dormant Encre noire 3 2-4 38 11.5 4-22 36
g de 1 an
Une observation au champ nous a cependant
orients vers une autre voie. L'aspect gel, vitreux,
que prennent les rameaux lors des priodes froides
favorables l'volution des lsions bactriennes, et
une tude bibliographique (SIMINOVITCH et SCARTH,
1938 ; GENEVS , 1955 ; LEVITT, 1980 ; ASHWORTH
et al.) 1985) sur les phnomnes accompagnant le gel
et le dgel de nombreux vgtaux ligneux nous ont
suggr que pouvait se raliser, au moment du dgel,
un tat d'infiltration hydrique des tissus, connu, dans
d'autres circonstances (JOHNSON, 1945), pour assurer
la pntration et la diffusion de bactries dans les
tissus concerns.
Dans un premier temps, nous avons pu vrifier que
l'corce de semis d'un an de pcher et d'abricotier,
en cours de dgel, absorbait en quelques secondes
une goutte de suspension de bactries (ou de colo-
rant) dpose ce moment-l sur une piqre ou toute
autre blessure. Pratiquement en mme temps, la sus-
pension absorbe se diffusait largement (quelques
millimtres quelques centimtres) dans les tissus
corticaux (tableau IV) (VIGOUROUX, 1989) ; ce qui
constitue un mode de contamination a priori adapt
puisque c'est ce niveau que la bactrie en cause
exerce sa pathogense.
En utilisant, dans un deuxime temps, des rameaux
dtachs acclimats au froid et capables de sup-
porter, sans tre lss, des tempratures de -10C,
nous avons pu montrer que la seule diffusion du
Pseudomonas dans l'corce suffit, si l'on ajoute une
incubation +10C, pour provoquer une lsion
identique celles observes au verger en hiver. En
outre, si le froid est appliqu alors qu'un inoculum
est dj introduit dans ces tissus, il y a diffusion de
cet inoculum au moment du dgel qui suit les temp-
ratures ngatives. Ensuite, comme dans la situation
34
prcdente, une incubation temprature positive
permet l'obtention d'une lsion. Rapport l'volu-
tion de la maladie au verger, cela montre que des
priodes de froid successives peuvent entraner la
progression d'infections en cours en assurant la diffu-
sion des bactries accumules dans les tissus dj
infects vers les tissus sains; ce qui recoupe tout
fait les observations faites au champ, par exemple
lors de priodes anticycloniques O alternent gel
nocturne et net rchauffement diurne faisant suite
un bon ensoleillement.
Interaction des facteurs
climatiques et daphiques
En cherchant prciser les conditions et les
mcanismes de diffusion des germes dans les tissus
infiltrs d'eau (actuellement aucune explication
connue). nous avons relev divers facteurs suscep-
tibles d'influencer fortement le phnomne. Par
exemple, la dure d'action du gel, prcdant le dgel
et l'infiltration, intervient de faon proportionnelle.
L'accumulation de glace dans les mats intercellu-
laires aux dpens des cellules tant trs progressive,
cette influence de la dure du gel apparat assez
logique.
Ce rsultat suggre l'importance de la quantit de
glace accumule, mais d'autres observations vont
dans le mme sens en impliquant l'importance de la
teneur en eau des vgtaux au moment du gel. Au
verger, on note une sensibilit des plants ou des
organes vigoureux peu lignifis, plus aqueux ou de
plants installs dans des zones humides en hiver. Au
laboratoire, on remarque une plus grande diffusion
des colorants obtenue avec des rameaux rcolts
aprs une pluie. Or, on peut penser que des tissus
plus aqueux susceptibles de librer plus d'eau
permettront une plus grande accumulation de glace
dans leurs mats intercellulaires.
Toute une srie d'exprimentations, menes aussi
bien sur des rameaux exciss (plus ou moins
hydrats) que sur des plants entiers cultivs en conte-
neur (pour modifier aisment leur teneur en eau en
hiver), a permis de confirmer qu'une teneur en eau
suprieure assurait une diffusion plus large de
colorants et des infections plus tendues pour les
essais ayant mis en jeu une suspension de germes
(tableaux V et VI) (VIGOUROUX, 1991, 1993).
Ce rsultat a des consquences importantes car il
implique que tout ce qui peut augmenter la teneur en
eau des arbres pourra indirectement augmenter les
possibilits de dveloppement des infections et donc
prdisposer les arbres. Ainsi, outre le fait qu'elles
peuvent hydrater directement les parties ariennes,
les pluies vont augmenter la disponibilit de l'eau
dans le sol (diminuer la tension mesurable par un ten-
siomtre) et permettre une alimentation en eau des
arbres plus facile; ce qui est d'autant plus efficace
que les racines sont, en hiver, peu actives cause de
la basse temprature du sol.
En outre, nous avons constat qu'en hiver, la teneur
en eau des pchers cultivs sur terrains texture gros-
sire (type diluvium) est nettement suprieure celle
de pchers cultivs sur sols texture plus fine, type
limon ou limon sableux. les carts observs (1 2 %)
sont de l'ordre de ceux provoquant des accroisse-
ments nets des infections dans le cadre des expri-
mentations antrieures sur des matriels plus ou
moins hydrats. Ainsi, outre l'induction d'un stress
hydrique d't et d'une dficience de la nutrition cal-
cique, la texture grossire des sols semble aussi inter-
venir sur la prdisposition des arbres en entranant un
accroissement notable de leur teneur en eau en hiver
(VIGOUROUX et BUSSI, 1994).
l
''J;: Perspectives et conclusion
I ~ Ces divers rsultats ouvrent plusieurs voies dans
la recherche de la connaissance de cette maladie et
des moyens de lutte, ainsi que pour des maladies
similaires. Expliquer les causes des diffrences de
teneur en eau des arbres selon les sols doit permettre
de mettre en vidence des informations peut-tre
insouponnes sur le fonctionnement hydrique des
arbres en hiver. Le potentiel de l'eau et l'oxygnation
de la solution du sol nous paraissent des pistes int-
ressantes explorer. En mme temps, on peut esprer
y trouver des moyens d'intervention, de prvention,
ou au moins de prvision des risques.
Les mcanismes de la diffusion des germes durant
l'infiltration hydrique apparaissent difficiles tudier,
Tableau V. Influence de la teneur en eau hivernale de rameaux dtachs de pcher sur la diffusion de colorant
et des infections bactriennes provoques.
Traitement des rameaux
Frais
Dshydrats
Pourcentage d'eau
pour 30 rameaux (MF)
53,3
52,0
ppds = 0,69
Diffusion de colorant
pour 32 rameaux (mm)
4,4
3,0
p < 0,001
Lsions bactriennes
pour 32 rameaux (mm)
11,5
5,2
p < 0,001
Tableau VI. Influence d'une rduction de la teneur en eau hivernale de pchers cultivs en conteneur
(couverts ou non en hiver) sur le dveloppement d'infections bactriennes provoques.
Mode de culture
des arbres
Anne 1993
6 paires d'arbres par traitement
Pourcentage d'eau Lsions (mm)
fin fvrier (6 inoculations
par arbre)
Anne 1994
11 arbres par traitement
Pourcentage d'eau Lsions (mm)
fin fvrier (7 inoculations
par arbre)
Conteneur libre
Conteneur couvert
52,6
51,9
P < 0,025
r = 0,698
9,1
8,0
P < 0,025
57,2
55,9
P < 0,025
31,4
21,4
P < 0,025
r = 0,645
en particulier compte tenu du caractre phmre et
fragile du phnomne, interdisant toute approche
directe. Des forces de tension superficielle sont cer-
tainement impliques, de mme que des variations
de permabilit membranaire. Potassium et calcium
- cits plus haut - doivent avoir un rle, ou des
rles, dans ces changements d'tat et ces transferts
d'eau. En particulier, le potassium est connu pour
intervenir dans les changes hydriques sur le plan tis-
sulaire comme pour la plante entire (SALSAC, 1977).
Les mouvements d'eau l'origine de la congestion
hydrique des tissus sont donc certainement potas-
sium-dpendants ". Le calcium est un facteur impor-
tant de la permabilit membranaire, y compris en ce
qui concerne le passage de l'eau, (MARINOS, 1962 ;
SIMON, 1978). Cest aussi un constituant et mme un
lment stabilisant de la lamelle moyenne des
cellules et du gel qui sert de ciment intercellulaire
(GOOR, 1968 ; FULLER, 1976). En culture in vitro, des
carences en calcium peuvent induire spontanment
des tats vitreux des tissus des cals.
On peut enfin souligner la remarquable combinaison
de facteurs interfrant entre eux mais aussi interve-
nant chacun selon plusieurs modalits, aboutissant
ainsi composer un systme susceptible de gnrer,
selon les annes ou les local isations, diffrents degrs
de maladie; ce qui peut aboutir aux manifestations
sporadiques, erratiques qui caractrisent fortement
beaucoup de bactrioses et spcialement celles des
arbres fruitiers.
ASHWORTH LN., ANDERSON J.A., DAVIS G.A.,
lIGHTNER G.W., 1985. !ce formation in Prunus persica
under field conditions. J. Amer. Soc. Hort. Sci. 110 :
322-324.
BANGERTH B., 1979. Calcium-related physiological
disorders of plants. Ann. Rev. Phytopathol. 17 :
97-112.
BIER J.E., 1964. The relation of some bark factors to
canker susceptibility. Symposium on cankers of forest
trees. Phytopathology 54 : 250-253.
DEAR J., 1973. A rapid degradation of starch at harde-
ning temperatures. Cryobiology 10: 78-81.
ErsTEIN E., 1972. Mineral nutrition of plants: prin-
ciples and perspectives. JOHN WILLEY and Sons, New
York, Etats-Unis, 412 p.
FULLER M.M., 1976. The ultrastructure of the outer
tissues of cold-stored apple fruits of high and low
content in calcium in relation to cell breakdown.
Ann. Appl. Biol. 83 : 299-304.
36
G E N E V ~ S L., 1955. Recherches sur les effets cytolo-
giques du froid. Rev. Cytol. Biol. Veg. XVI (1-2) :
1-207.
GOOR VAN B.J., 1968. The role of calcium and cell
permeability in the disease blossom-end rot of toma-
toes. Physiol. Plant. 21: 1110-1121.
HUDSON J. P., 1958. General effect of potassium on the
water economy of plants. In Potassium Symposium.
Institut international de la potasse, Berne, Suisse,
p. 95-108.
JOHNSON J., 1945. Infection experiments with
detached water-congested leaves. Phytopathology 35 :
1 017-1 028.
KLMENT Z., ROZSNYAY O.-S., BALo E., PAN(ZEL M.,
PRILESZKI GY, 1984. The effect of cold on develop-
ment of bacterial canker in apricot trees. Physiol.
Pl. Path. 24 : 237-246.
LEVITI J., 1980. Response of plants to environmental
stresses. 1.1. Academic Press, New York, Etats-Unis.
LUlsETII J. , GAIGNARD J.-L., 1985. Les bactries glao-
gnes et les geles de printemps. In comptes rendus
5
e
colloque Recherches fru itires, 13- 14 novembre
1985, Bordeaux, France, CTIFL, Pont-de-la-Maye,
France, p. 67-73.
MARINOS N.G., 1962. Studies on submicroscopic
aspects of minerai deficiencies. 1. Calcium deficiency
in the shoot apex of barley. Amer. J. Bot. 49 :
834-841.
SAKAI A., YOSHIDA S., 1968. The role of sugar and
related compounds in variations of freezing
resistance. Cryobiology 5 : 160-174.
SALSAC L., 1977. Le potassium dans le vgtal: locali-
sation cytologique, absorption et transport, rle
physiologique. In Compte rendu du colloque sur le
potassium dans ses rapports avec la vigne et le vin,
4 mars 1977, Montpellier, France, 11 p.
SCHOENWEISS D.F., 1981. The role of environmental
stress in disease of woody plants. Plant Dis. 64 :
308-314.
SIMINOVITCH O., SCARTH G.W., 1938. A study of the
mecanism of frost injury to plants. Cano J. Res. 16 (c) :
467-481.
SIMON E.W., 1978. The symptoms of calcium defi-
ciency in plants. New Phytol. 80 : 1-15.
STEBBINS R.L., DEWEY D.H., 1972. Role of transpiration
and phloem transport in accumulation of 45Ca
in leaves of young apple tree. J. Amer. Soc. Hortic.
Sci. 97 : 471-474.
VIGOUROUX A., BERGER J.-F., BUSSI C, 1987. La sensibi-
lit du pcher au dprissement bactrien en France:
incidence de certaines caractristiques du sol et de
l'irrigation. Relations avec la nutrition. Agronomie 7 :
483-495.
VIGOUROUX A, 1989. Ingress and spread of Pseudo-
monas in stems of Peach and Apricot promoted by
frost-related water-soaking of tissues. Plant Dis. 73 :
854-855.
VIGOUROUX A., 1991. Influence du froid et de la
teneur en eau sur la prdisposition des tiges de
pchers aux infections certains Pseudomonas. In
L'arbre, Naturalia Monspeliensia, numro hors srie,
Claude EDELIN (dit.), p. 539-545.
VIGOUROUX A, 1993. La teneur en eau hivernale des
tiges, facteur d'installation et de dveloppement des
bactrioses Pseudomonas des arbres fruitiers
noyau. Com. 3
e
Congo Nation. Soc. Fr. Phytopatho-
logie, 6-10 dcembre 1993, Dijon, France, 1 p.
VIGOUROUX A, Bussi C, 1989. Importance of water
consumption on calcium content and protection of
peaches predisposed to bacterial dieback by growing
in acid soils. Acta. hort. 254 : 291-296.
VIGOUROUX A., Bussi C, 1994. Une action possible
des sols sur la prdisposition des pchers au dpris-
sement bactrien par modification de la teneur en
eau hivernale des tiges. Agronomie 14 : 319-326.
WEAVER D.J., GONZALEZ C-F. ENGLISH H., 1981. Ice
nucleation by Pseudomonas syringae associated with
canker production in peach. Phytopathology 71 :
109.
Discussion
Explication du dveloppement pidmiologique
des maladies bactriennes
En t, les germes connaissent une priode de vie
piphyte non pathogne la surface des feuilles. En
automne, ces feuilles emportes par le vent dissmi-
nent la maladie. En hiver, lors de priodes de
gel-dgel, dans les tissus corticaux des tiges, s'tablit
un tat d'infiltration hydrique, ce qui induit la pn-
tration des bactries en suspension dans la pellicule
d'eau prsente la surface des organes (pluie, rose),
et cela est possible par n'importe quelle blessure. La
pntration semble associe des phnomnes de
tension superficielle, possibles grce la prsence
pralable d'eau dans les mats intercellulaires (reli-
quat de fonte de glace). Le phnomne de prise en
glace de l'eau, sortie des cellules vers les mats
intercellulaires lors du gel, n'est qu'une adaptation
naturelle au froid: les cellules sont plus rsistantes au
froid lorsque le cytoplasme se concentre par l imina-
tion d'eau et la formation de glace absorbe du froid.
Les cycles gel-dgel successifs favorisent la progres-
sion de la bactrie l'intrieur des tissus puisque,
chaque phase, selon le mme processus dcrit
ci-dessus, les bactries accumules dans les zones
dj infectes vont diffuser vers les parties saines.
L'volution des lsions est trs rapide au cours de
l'hiver. Dans les tissus peu lignifis et trs aqueux, la
diffusion est meilleure.
Il existe un Xanthomonas sur feuilles de pcher qui se
manifeste sous forme de taches au printemps aprs
des priodes d'hygromtrie saturante (brouillard), qui
favorisent elles aussi une infiltration hydrique des
feuilles et une pntration, ce moment-l, des
bactries piphytes.
Les bactrioses observes sur les diffrentes espces
de fruits noyau correspondent diffrents pathovars
de Pseudomonas syringae.
Varits rsistantes la maladie
Il existe des varits plus ou moins sensibles. De plus,
il est connu que l'importance de l'infiltration
hydrique est hritable pour certaines espces vg-
tales (tomate, mas). Peut-tre est-ce le cas pour le
pcher et la moindre sensibilit serait peut-tre due
une moindre aptitude l'infiltration. Il y aurait alors
un critre de slection possible.
Origine de l'aspect vitreux des tissus
Il existe deux causes bien distinctes:
- un aspect vitreux, phmre au moment du gel et
du dgel par suite de la prsence de glace ou d'eau
(glace fondante au dgel) dans les mats intercel-
lulaires, phnomne donc tout fait naturel;
- un autre type d'aspect vitreux, durable et li
l'infection bactrienne aprs que les bactries
accumules dans les tissus (en fait dans les mats
intercellulaires) aient altr la permabilit des mem-
branes cellulaires au point que l'eau des cellules
sorte librement vers les mats cellulaires et y reste.
On peut penser qu'une carence en calcium favorise
ces divers dplacements d'eau extracellulaires car le
calcium est connu pour diminuer la permabilit
membranaire.
En culture in vitro, l'apparition spontane d'aspect
vitreux a t observe en cas de carence en calcium
du milieu de culture.
Actes des 5
e
CAlA1AYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit.). 1996.
InteraClions insectes plantes.
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
2627 octobre 1995. Montpellier, France.
Colloques, CIRADCA. Montpellier. France, 96 p.
Les relations insectes-plantes
vues sous l'angle de la physiologie vgtale
sur l'exemple de la pyrale du mas
F. FERRON
INRA, dpartement de physiologie vgtale, laboratoire ENSAM-INRA, cophysiologie des plantes
sous stress environnementaux, 2 place Viala, 34060 Montpellier Cedex 1, France.
1: r : s ~ : : ~ ~ : : I ~ : a c l';nsecte est vue comme
source de variations de son environnement dans la
couche limite, pouvant induire un stress biotique
environnemental . La nature de la rponse mtabo-
lique de la plante ce type de stress a constitu un
autre volet de l'tude mene jusqu'ici sur les ajuste-
ments du mtabolisme foliaire primaire face un
environnement variable, lors de mon dtachement
la station de recherche de zoologie de Versailles (de
mai 1990 octobre 1993).
Dans le cadre de l'tude du choix du site de ponte
d'un insecte phytophage gnraliste, la biochimie de
la surface foliaire (phylloplan) reprsente un facteur
important du dterminisme de ponte au contact de la
feuille. Les phnomnes suivants sont dmontrs:
- une corrlation troite entre certains glucides,
acides amins, amines foliaires et le choix de l'in-
secte;
- une concordance, dans l'apoplaste, entre la locali-
sation de la microflore piphyte et certains assimilats ;
- une modification biochimique du phylloplan, lie
probablement au dveloppement de la microflore
piphyte et au comportement de l'insecte, pour
lequel la concentration molculaire du phylloplan
peut induire une transition de l'effet attractif l'effet
rpulsif.
Dans la recherche du dterminisme de la variabilit
biochimique du phylloplan, l'accent a t port sur
d'ventuelles dviations dans les flux d'assimilation,
pouvant tre l'origine d'une intensification de leurs
transferts en surface sous l'effet de l'implantation de
l'insecte pour pondre.
1 Aspect conceptuel
1La slect;on du site de ponte d'un lp;dopt,e
polyphage au contact de la plante est aborde pour
ce qui est de l'thologie et de la physiologie senso-
rielle pour l'insecte et en ce qui concerne l'histo-
chimie et la biochimie du phylloplan pour la plante.
L'tude prliminaire qui suit constitue l'approche
physiologique de la feuille entire dans les relations
insectes-plantes.
Les relations explicites du vgtal dans la biologie
des interactions plante-ravageur-auxiliaire sont
soumises l'hypothse suivante: parmi les facteurs
de variabilit de la biochimie du phylloplan (nom-
breux et complexes), l'tat molculaire de ce dernier
est suppos exprimer la rponse mtabolique de la
feuille au toucher de la surface par l'insecte. Cette
rponse induite par le toucher, ou stimulus mca-
nique, expliquerait non pas l'attractivit du phyllo-
plan pour l'insecte mais l'implantation de ce dernier
pour pondre, aprs atterrissage sur la surface foliaire
suivi d'un balayage de celle-ci par l'ovipositeur. Son
expression dpend des capacits gntiques de
rsistance de la plante toute perturbation de son
environnement, au niveau de la couche limite.
La dfinition de l'impact du ravageur sur le mtabo-
lisme foliaire, tel qu'il se rvle dans la biochimie du
phylloplan, est donc fonde sur les concepts suivants:
- la corrlation entre la variabilit biochimique du
phyllollan et la facult gntique d'ajustement du
mtabolisme foliaire un environnement variable;
- l'analogie entre la relation plante-insecte dans la
discrimination biochimique de son site de ponte et la
relation source-puits dans la distribution des assimi-
lats primaires.
C'est pourquoi, il est envisag de mesurer, l'aide
d'une mthode radio-isotopique rapide et simple,
globale et comparative, le transport d'assimilats
extraits de feuilles, soit sensibles l'insecte mais pla-
ces dans des conditions varies envers celui-ci, soit
connues pour une rsistance diffrente l'gard du
comportement de ponte du ravageur. Les donnes
succinctes de la bibliographie - notamment les
rsultats de M.-O. DEsBIEz au sein du laboratoire
communication intercellulaire et intracellulaire de
l'universit de Clermont-Ferrand (France) et ceux du
professeur M. THELLIER au sein du laboratoire physio-
logie cellulaire, signaux et rgulation, de l'universit
de Rouen (France) - permettent d'tablir un schma
explicatif des effets mtaboliques du toucher de la
surface foliaire et d'y inclure le fait dmontrer,
c' est--di re la poss ibi 1it de dvi ations rapides du
mtabolisme primaire parmi les ractions de dfense
du vgtal dans les relations plantes-ravageurs
(figure 1). Ces dviations se rpercuteraient dans la
rgulation des flux d'assimilats sous forme d'un ajus-
tement entre deux effets contradictoires du {( toucher
de la surface foliaire par le ravageur. Or, des modifi-
cations dans le passage d'assimilats des tissus foliaires
en surface peuvent avoir un effet dissuasif sur l'im-
plantation de l'insecte sur le phylloplan notamment
en faisant varier la concentration en glucides.
A l'aide de la mthode radio-isotopique d'incorpora-
tion de 14C-saccharose dans les voies de transport de
la feuille excise, le fondement de ces points de vue
est test dans les conditions de source constante
(dfinition d'une feuille dtermine) et de puits
variable (recherche d'un site de ponte par l'insecte).
Dans l'tude cintique des variations de flux d'assi-
milats extraits des tissus foliaires, la variabilit du
puits, dont dpend le choix du site de ponte, corres-
pond la variabilit de composition biochimique du
phylloplan.
Ce protocole est appliqu sur disques foliaires pr-
levs la nervure principale et proximit du dpt
d'ooplaques pour les feuilles visites; le matriel
vgtal est ensuite incub en milieu ractionnel,
dfini pour la mesure, par dilution radio-isotopique
du transport d'assimilats sous forme de saccharose.
Rsultats prliminaires
Nous avons valu, d'une part, la mthode utilise
pour mesurer le transport d'assimilats dans un disque
foliaire, d'autre part, l'effet ventuel sur ce phno-
mne de l'enceinte qui permet d'assurer la prsence
de l'insecte dans l'environnement de la feuille expri-
mente. Ensuite, nous avons ralis une premire
approche de la question pose: la mobilisation du
saccharose, mesure par une mthode de dilution
isotopique dans les feuilles l'aisselle de l'pi
principal d'une varit de mais sensible la pyrale
(Zea mas varit Da), est plus intense en prsence
(E) qu'en absence (T) du ravageur.
Ce fait doit conduire dfinir la part du mtabolisme
primaire foliaire dans l'enrichissement du phylloplan
en composs bioractifs sur la discrimination bio-
chimique du substrat de ponte par l'insecte (valeur du
rapport E/ T = 1,56).
Aspect exprimental
r Perspectives
%.'19
tm
Principe de base du protocole
Le but des expriences est de donner une interprta-
tion mtabolique de la variabilit biochimique du
phylloplan, qui dtermine le choix du site de ponte
par l'insecte. Ce choix se traduirait par une rupture
d'quilibre de la {( balance source-puits , l'origine
des {( appels molculaires de mtabolites primaires
vers le phyllop/an : si la source de ces molcules se
situe normalement dans les sites de biosynthse
chlorophylliens, leur puits d'utilisation est reprsent
par le site de ponte de l'insecte, sans exclure le site
d'implantation de la microflore piphyte.
40
Elles s'appliquent deux domaines.
la dfinition d'un test mtabolique
du comportement de la plante l'gard
du ravageur
Il s'agit de la recherche de modifications inductibles
dans le transport d'assimilats foliaires suite l'atterris-
sage de l'insecte sur le phylloplan, puis au dpt
d'ooplaques ; comparaison entre une feuille non
visite (tmoin T) et une feuille visite (essai El
Toucher de la surface foliaire par l'insecte
Dterminisme de la survie de la
plante au ravageur, li au codage
gntique de la saccharose
phosphate synthase (SPS), l'une
des enzymes cls du phnomne
de transport, sensible
l'htrosis chez le mas
Analogie entre l'effet potentiel
du balayage de la surface foliaire
par l'ovipositeur de l'insecte
el l'effet dmontr
d'un prtraitement par massage
des tiges sur l'exsudation
de sve hors du phlome
Rduction, par voie gntique,
des flux d'assimilats
1
,
Stratgie de dfense de la plante l'gard
du ravageur: rgulation de la transmission
des signaux de l'environnement par un
quilibre entre deux effets contradictoires
du toucher sur la rpartition des assimilats
A
Rduction de la croissance cellulaire
,
Thigmomorphogense..
,
Fixation slective de calcium
(augmentation de la concentration
en calcium cytosoliquel
,
Stimulation des voies enzymatiques
de synthse d'hormones vgtales
,
Production d'thylne
,
Production d'acide abcissique
,
,
Induction mcanique
de l'expression de certains gnes
Activation dJcodage
de certaines protines
,
Calmoduline active
Stress mcanique par contact ......... Activation, par voie mcanique
du papillon sur le phylloplan du transport transcuticulaire
d'assimilats
Figure 1. Schma explicatif de la relation insecte-plante au niveau du contact phylloplan-papillon (hypothse de travai/).
prleves sur la mme espce vgtale sensible au
ravageur (exemple: Zea mas varit Da).
Pour la dfinition de ce test, le choix de la dure d'in-
cubation des feuilles, dans le milieu ractionnel, la
plus courte et la plus significative, sera fait la suite
d'une tude cintique du transport des flux : par
exemple, 6 mn, 16 mn, 1 h, 2 h, 3 h aprs l'incorpo-
ration de 14C-saccharose.
L'application de ce test
Ce test doit tre ensuite appliqu la recherche
d'une caractrisation, sur le plan mtabolique
foliaire, de la rsistance la pyrale, aprs avoir vrifi
l' interprtation donne pouri' origine de l'afflux
glucidique attractif l'gard de l'insecte en surface
de la feuille.
On doit tablir la comparaison entre deux feuilles
visites par l'insecte, mais provenant de deux varits
de mais sensibilit gntiquement diffrente
l'gard du ravageur (comparaison entre deux
hybrides tels que D10 sensible la pyrale et D14
rsistant). D'aprs D. LECHARNY (CNRS, Orsay, comm.
pers.), l'activit de la saccharose-phosphate-synthase
est sensible l'htrosis en ce qui concerne le mas.
Ce fait semble bien signifier une relation ( dmon-
trer) entre les modulations dans le transport des flux
d'assimilation d'une part, et les degrs de rsistance
la pyrale gntiquement dfinis entre hybrides de
mas, d'autre part.
Ainsi, les rsultats concernant l'impact du caractre
de sensibilit au ravageur sur la distribution des
assimilats primaires doivent permettre de savoir
comment la plante corrige son mtabolisme face aux
variations de son environnement, induites par un
paramtre biologique, le toucher du phylloplan par
l'insecte dans l'tude prsente. Cette correction du
transport des assimilats s'ajouterait celles mises en
vidence pour la part relative des voies de biosyn-
thse dans l'accumulation du compos nergtique
final. Elle traduit une autre forme d'aptitude du
vgtal instaurer une rgulation dans les communi-
cations intercellulaires et intracellulaires, au mme
titre que le rle cl de certains oligo-saccharides en
tant que molcules signaux ou liciteurs du mca-
nisme de dfense des vgtaux. Il s'agit l de projets
soumis la suite d'expriences prliminaires - leur
ralisation n'est pas envisageable actuellement, en
raison de mon affectation Montpellier.
Discussion
Sur quels faits repose le schma
explicatif de la relation plante-insecte
pour le phylloplan-papillon ?
Il est issu d'une recherche bibliographique sur la
sensibilit des plantes: les plantes ont le sens du
toucher. Lorsque la pyrale atterrit sur la feuille et
recherche un site de ponte avec l'ovipositeur, il y a
modification de l'environnement immdiat de la
plante. Cela se traduit pour le vgtal par une rcep-
tion d'informations, mme en l'absence d'une modifi-
cation de structure de la surface foliaire.
D'aprs la littrature, il y a dmonstration d'un sens
du toucher du vgtal. D'aprs les faits exprimen-
taux antrieurs sur les dviations mtaboliques et ces
rsultats prliminaires (exposs ici), une analogie est
tablie entre le comportement de la plante en
rponse au toucher et ses ractions de dfense
induites par un stress de type mcanique. Par
exemple, l'effet du vent se traduit par une diminution
de la croissance comme s'il y avait induction de
stress.
42
la modification des flux de glucides en surface
a-t-elle un effet sur l'alimentation des larves?
Non, car la pyrale pond sans assurer la nourriture de
la descendance.
y a-t-il spcificit de la plante?
Non, car la pyrale est un ravageur gnraliste.
les dviations mtaboliques dans les relations
source-puits ont-elles un impact
sur la productivit de la plante?
L'tude phnologique est faire. A priori, les stades
juvniles et de fructification sont les stades de dve-
loppement plus sensibles l'agresseur, dans la
mesure o ils reprsentent des tats de crise mta-
bolique.
Une question mthodologique se pose pour
l'tude de la rsistance varitale des plantes
Etant donn le sens du toucher des plantes, on peut
crer des artefacts. Tout tient dans la dfinition du
tmoin.
CAlATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dil.l. 1996.
Inleraclions insecles-plantes.
Actes des se journes du groupe de Iravail relalions insectes-plantes,
26-27 octobre 1995, Montpellier, France.
Colloques, ClRAD-CA, Monlpellier, France, 96 p.
1nformations biochimiques prsentes la surface
des feuilles. Implications dans la slection
de la plante hte par un insecte
S. DERRIDJ, B.R. Wu
INRA, unit de phytopharmacie et des mdiateurs chimiques, 78026 Versailles Cedex, France.
Au cours de la slection de la plante hte par un
insecte, une partie des vnements comportementaux
- qui mnent, soit la prise de nourriture soit au
dpt de ponte - a lieu sur la surface des feuilles.
Lorsque l'insecte se dplace sur la surface de la
feuille, il se trouve en contact avec un grand nombre
de stimuli, d'ordre visuel, tactile, olfactif et gustatif.
En ce qui concerne les stimuli gustatifs, ils sont essen-
tiellement d'ordre biochimique. Ils peuvent tre d'ori-
gine exogne (poussires, pollens, miellats d'insectes,
produits excrts par les micro-organismes, sub-
stances polluantes de l'atmosphre) et endogne tels
que les composs des cires cuticulaires, et les mta-
bolites primaires et secondaires provenant des tissus
de la plante. Ceux-ci peuvent leur tour tre mtabo-
liss par les micro-organismes piphytes. Ces sub-
stances sont plus ou moins imbriques dans les cires
et leur dtection par l'insecte va dpendre de son
comportement, des parties de son corps (pattes,
pices buccales, ovipositeur) en contact avec la sur-
face foliaire, et des sensilles gustatives (type, nombre,
localisation) concernes dans la reconnaissance du
site.
Nous ferons le point sur nos connaissances concer-
nant les mtabolites primaires et certains cations.
Leur nature, leur signification et le type d'information
qu'ils peuvent donner seront prsents. Puis, nous
aborderons le rle de ces mtabolites dans la slec-
tion du site de ponte d'un insecte avec, en exemple,
un insecte qui n'a aucun contact avec les tissus de la
feuille avant de dposer ses ufs: la pyrale du mal's
Ostrinia nubilalis Hbn. (Ipidoptre, pyralidae).
les mtabolites primaires
A ~ ~
Il la surface des feuilles
.1;;' et leur signification
. ~
w
Prsence et rcupration des substances
Les sucres ont pu tre local iss - en microscopie
lectronique balayage associe la micro-analyse
par spectromtrie des rayonnements X - la surface
des feuilles de plusieurs espces vgtales. Leur
dispersion est plus ou moins homogne et leur micro-
localisation peut galement varier avec l'espce
(figure 1). Sur les feuilles de mas, dans les endroits
o l'on observe des monosaccharides, ceux-ci sont
localiss en majorit dans les zones anticlinales des
cellules de l'piderme, ils apparaissent plus clair-
sems au-dessus des cellules. A l'occasion de la
visualisation des sucres, un grand nombre d'ions
minraux tels que le potassium, le chlorure, le
magnsium, le sodium et le calcium ont t observs
la surface des feuilles de toutes les espces
vgtales.
La collecte des substances peut tre faite par pulvri-
sations des faces foliaires sur un plan inclin, avec de
l'eau ultra pure, un temps trs court et une pression
faible (25 ml en 30 s). Par cette mthode, ne sont
rcupres que les substances trs superficielles, en
excluant les phnomnes de leaching (induction de
sortie des substances par la prsence d'eau). Les
Actes des 5
e
(B)
Figure 1. Caractrisation de monosaccharides, par microscopie lectronique balayage associe la microanalyse
par spectromtrie des rayonnements X, la surface des feuilles de laurier cerise (Prunus laurocesarus U et de laitue
(Chicorium endiva U.
Tableau 1. Glucides et composs ninhydrine-positifs
dtermins dans les lessivats obtenus partir de la feuille
de l'pi de mais et de la plus jeune feuille adulte de
tournesol.
Chaque rsultat est la moyenne de 14 dterminations
effectues au cours de 4 expriences indpendantes.
Les cultivars taient Frankasol et Vraflor pour le tournesol
et Da, LG" et AXF pour le ma,s. Les nombres entre
parenthses reprsentent l'cart-type de la moyenne.
Composs ninhydrine-positifs
Acides amins 3,45 (1,65)
Inconnus 0,41 (0,17)
Ure 13,2 (9,20)
Ammoniac 0,26 (0,33)
Dosage des composs en mmol./m
2
Mas Tournesol
6,16 (2,14)
0,30 (0,10)
10,1 (3,41)
1,57 (1,94)
4,44 (0,92)
2,14 (1,04)
3,43 (1,03)
2,09 (0,8)
1,08 (0,64)
0,82 (0,98) Fructose
Glucides
Saccharose
Glucose
Composs
Sources de variations
Les quantits de substances collectes la surface
des feuilles peuvent varier avec l'heure de la journe.
Pour la salade par exemple, les taux de sucres aug-
mentent partir de 9 h pour atteindre un maximum
vers 13 h, puis diminuent progressivement jusqu'au
lendemain matin (figure 6),
collectes sont faites deux heures avant le coucher du
soleil lorsqu'il s'agit d'expliquer le comportement de
la pyrale du mas (O. nubilalisJ.
Par cette mthode, ont t rcuprs les sucres libres
tels que le fructose, le glucose, le saccharose, les
acides amins libres et des acides organiques (tableau l,
figures 2 et 3).
Pour extraire ces substances imbriques galement
dans les cires, il est ncessaire d'utiliser alors des
solvants organiques comme le chloroforme. Les
quantits et les proportions des substances extraites
dpendent de la nature du solvant et du temps
d'extraction utilis (figures 4 et 5).
Quantit relative %
40
30
20
10
o
Asp Thr Ser Asn Glu Gin Pro Gly Ala Cil Val
Tournesol
D Mais
Ile Leu Tyr Phe Gaba Orn Lys His Arg
Acide amin
Figure 2. Composition relative en acides amins des lessivats de feuilles de mas et de tournesol.
Laurier cerise
nglcm
2
8
6
4
2
o---'-l__
Malate t-Aconitate Succinate Total
nglcm
2
5
4
3
2
o
Figure 3. Quantits des diffrents acides organiques
collects la surface des feuilles de laurier cerise
(P. laurocerasus L.) et de mas (l. mays L.).
Figure 4. Evolution en fonction du temps des quantits des
diffrents amino-acides extraits sur la cuticule de la feuille
de mas.
Actes des 5
e
journes du groupe de travai 1 relations insectes-plantes, 1995 45
prliminaires ont t faites dans le but de dfinir le
lien entre la prsence des sucres la surface des
feuilles et la photosynthse. Il s'agit de faire fixer la
plante lorsque la photosynthse est stable, du 13C
issu de (02 marqu 90 % et de suivre l'augmenta-
tion des proportions de sucres marqus par rapport
aux non marqus (12C). L'observation est faite dans la
cellule, dans l'apoplaste et la surface de la feuille,
3, 6, 5 et 9 h aprs la fin de la priode de fixation
J.lglcm
2
0,30
0,20
0,10
o
Temps (s)
Figure 5. Evolution en fonction du temps des sucres
extrails sur la cuticule de la feuille de mais.
Quantits
35
Figure 7a. Enrichissement en glucose-
13
e.
% 50
40
30
20
10
..- ......
--
0
Oh 3h
-10
Figure 7b. Enrichissement en fructose-
13
e.
40
6h
Surface
Apoplaste
Cellule
9h
Temps
Figure 6. Quantits de carbohydrates collects la face
suprieure des feuilles de laitue (Chicorium endiva L.)
pendant 24 heures.
Ces variations sont plus ou moins importantes selon
l'espce vgtale. Elles sont plus faibles sur les
feuilles de mas. Ces variations semblent voluer avec
la photosynthse. Cela est long dmontrer car il faut
tenir compte de la composition apoplastique qui
varie au cours du temps, des transports longue
distance des mtabol ites et des phnomnes
d'changes des molcules entre la surface foliaire et
le compartiment apoplastique. Quelques expriences
9h 6,5h 3h
- _--_.----_.--_ ..
3h 6.5h --'9h
--
.......
---
o
Oh
-10
Oh
-10
10
20
30
60
50
40
30
20
10
o
Figure 7e. Enrichissement en sucrose_
13
e.
Figure 7. Evolution en fonction du temps de l'enrichisse-
ment en 7]C0
2
du fructose, du glucose et du saccharose
sur trois compartiments foliaires (surface, apoplaste,
cellule) dans les feuilles de mas. Le temps 0 reprsente
l'chantillon aprs 30 minutes en prsence de /]C0
2
(90 %). Les autres chantillons sont collects en prsence
de CO
2
naturel (330 ppm). Les pourcentages d'enrichis-
sement se rfrent au tmoin rcolt au temps O.
5 9
Temps (H)
- Fructose
- Glucose
- _. Sucrose
21 17 13
5
10
15
30
25
20
ignors. Cependant, il est admis que l'eau traverse la
cuticule, et les phnomnes de lessivage Oeaching)
sont reconnus. La question pose ici, pour com-
prendre l'information qui peut tre donne l'insecte
par la plante, est de dterminer le rle de la cuticule
dans la composition de la surface foliaire.
Les rsultats d'une thse - effectue par L. STAMMITII
~
K
o Ca
Na
N3
T
N3
N3
Position foliaire
N2
N2
N2
o
50
o
N1
0--'-----
50
Nl
200
100
50
N1
Figure 9c. Jeune panicule.
250
100
150
100
300
250
200
150
Figure 9b. Cornet avanc.
350
Figure 9a. Cornet moyen.
Quantit de cation sur la feuille de mas ng/cm
2
400
350
300
250
200
150
Sneon
(30 mn). Les sucres marqus sont prsents la surface
des feuilles ds la fin de la fixation du CO
2
par la
feui Ile de mas. On note une progression pendant
6 h, puis une diminution des proportions des mol-
cules marques pendant la priode nocturne (figure
7). Cela montre que les sucres dtects la surface
des feuilles, durant la priode d'tude, sont le reflet
rapide de ce qui se passe dans la feuille.
A ct des variations quantitatives au cours de la
journe, il existe des lments d'information stables
qui caractrisent l'espce vgtale et mme le genre,
tels que les acides amins libres. Leurs proportions
la surface des feuilles caractrisent l'espce quels que
soient la varit, le stade de croissance et les condi-
tions de culture (figures 2 et 8). Des variations quanti-
tatives sont galement observes selon l'ge de la
feuille un stade de croissance donn. Cela est
valable pour les mtabolites primaires et les cations
(figure 9).
Tournesol
M
C
9
c
o
.....
Rle des cuticules dans la composition
en mtabolites primaires de la surface
des feuilles
La prsence des substances d'origine vgtale la
surface des feuilles est peu connue. Les mcanismes
de passage des substances hydrosolubles au travers
de la cuticule, qui est un milieu lipidique, sont
figure 8. Reprsentation graphique d'une analyse discri-
minante sur les proportions d'acides amins libres trouvs
dans les lessivats aqueux de surface de feuille de poireau,
de mais, de tournesol et de sneon (% de la variation
reprsent respectivement sur les axes 7, 2 et 3 : 87,79 ;
76,45 et 2,34).
figure 9. Quantits de cations (K, Ca, Na) collects dif-
frentes positions foliaires (N 7 : 70, 77, 72
e
tages foliaires,
N2 : 7, 8, g
e
tages foliaires, N3 : 4, 5, 6
e
tages foliaires)
sur la face infrieure des feuilles diffrents stades de
croissance (cornet moyen, cornet avanc, jeune panicule).
Rle des mtabolites et
des cations prsents la surface
des feuilles dans la slection
du site de ponte
en collaboration avec M. CARREC - montrent que la
cuticule isole de laurier-cerise discrimine le passage
des sucres. Le glucose traverse plus rapidement la
cuticule que le fructose et le saccharose sur 24 h.
Le dpt de molcu les marques au 14C (glucose,
fructose, et acide glutamique) la surface des feuilles
de salade montre galement que la pntration des
molcules est discriminante. La slectivit de la cuti-
cule est d'origine probablement chimique et structu-
rale. Nous avons dj observ que les quantits
d'acides gras libres 16 et 18 carbones qui se trou-
vent dans les cires intracuticulaires sont corrles aux
quantits de sucres qui y sont imbriques. Les
compositions des cires sont lies la plante et aux
conditions de l'environnement. Il est probable que la
composition biochimique de la surface des feuilles
corresponde l'intgration de ces facteurs addi-
tionns la compostion apoplastique.
1
1
1\
Diffrentes tapes sont ncessaires pour dmon-
trer le rle des substances de la surface foliaire sur la
slection du site de ponte. Sur plante entire, en
conditions naturelles ou contrles, nous avons
observ une relation entre le choix de la plante
(hybrides de mas, tabacs, espces vgtales diff-
rents stades de croissance) et le choix du site (tage et
face foliaires) avec les quantits de sucres solubles ou
d'acide malique et de proline prsentes la surface
des feuilles. Les concentrations sont dterminantes et
les fortes teneurs entranent un refus de la plante ou
du site pour pondre. Sur diffrents stades de crois-
sance du maIS, la face suprieure des feuilles tait
Nombre d'ufs
1400
o Face suprieure
SOO
1 200
1000
!'I Face i nfrieu re 400
800
300
600
200
400
20
100
0 0
N'l N'2 NT N2 N3
Stade 8-9 feu i Iles Etage foliaire Stade cornet
soo SOO
400 400
300 300
200 200
100
100
0 0
Nl N2 N3 N1 N2 N3
Stade panicule sensible Stade panicule visible
Neutralit (test Monte Carlo) Prfrence inverse Prfrence forte
Figure 10. Rpartition des ufs par niveau et par face foliaires aux diffrents srades du mas.
48 1nteractions insectes-plantes
plus riche en cations (calcium, sodium, potassium)
que la face infrieure. Les tages foliaires les plus
gs taient galement plus riches en cations que les
autres niveaux. L'insecte a pondu chaque stade de
croissance sur les niveaux et les faces les moins
riches (figure 10). Des effets squentiels ont t
observs entre les sucres et les cations, et les sucres et
l'acide malique, montrant que selon les concentra-
tions, c'est une substance ou l'autre qui est domi-
nante dans la rponse comportementale observe.
Par exemple, une forte concentration en cations ou
en acide malique a une action dominante sur celle
des sucres.
L'analyse du comportement de j'insecte montre que
les femelles balayent la surface foliaire avec l'oviposi-
teur avant de pondre (P. ROBERT). Sur les pattes et
l'ovipositeur, nous avons pu distinguer plusieurs types
de sensilles qui permettent la dtection des sucres
(E. STAoLER, F. MARION POLL, L. SOLDAAT, S. MERRY). Les
rponses sont relativement spcifiques. Les quantits
dtectes sont de l'ordre de 10-
3
moles. Il y a une
variabilit entre femelles et certaines peuvent dtecter
des quantits de l'ordre de 10-
6
moles par sensille.
Conclusion
1A la surface des feuilles, il existe des mtabolites
d'origine photosynthtique. Ceux-ci peuvent donner
des informations sur l'tat physiologique et sur
l'espce de plante. Ces informations apparaissent
rapidement la surface des feuilles aprs leur bio-
synthse dans les cellules. Ces substances peuvent
pntrer nouveau en partie dans la plante. La
composition biochimique de la surface est donc le
Figure 11. Oviposition d'O. nubilalis sur papier filtre
imprgn d'une solution de NaC/ 48,3 ng/cm
2
, CaC/
2
67,6 ng/cm
2
et KC/ 17,5 ng/cm
2
, compar un substrat
imprgn d'eau pure.
L'tude des substances isoles et des interactions
entre substances doit se faire sur substrat inerte. Des
problmes techniques se rvlent importants quant
l'interprtation des rsultats. Le substrat devrait tre
inerte, c'est--dire n'ayant aucune proprit physique
ou chimique pouvant tre perue par l'insecte. La
rpartition des substances dans le substrat et sa sur-
face devrait tre matrise. La qualit chimique des
subtances exprimentes devrait tre conserve pen-
dant toute la dure de ponte tudie. Les conditions
hygromtriques (80 % d'humidit relative) devraient
tre strictement constantes, cela pouvant interfrer
avec l'tat des molcules et la perception de l'in-
secte. Les substrats inertes sans ions ne conviennent
pas tous l'insecte, surtout cause de la texture
(comme les fibres de verre). La dispersion des sucres
solubles sur le papier filtre est htrogne - comme
cela a t observ sur la feuille de malS - mais elle
est diffrente de celle observe sur la feuille de
salade, o elle est relativement homogne. Les subs-
tances peuvent se dgrader plus ou moins vite. Nous
avons fix une priode d'tude pour les mtabolites
primaires et les cations, de trois heures conscutives,
au maximum de ponte, pendant deux jours.
Ces remarques faites, nous pouvons toutefois
conclure l'effet de certaines substances isoles sur
la ponte de l'insecte. Les sucres (sans condition de
choix) stimulent la ponte et, en particulier le fructose,
le glucose ayant un effet plutt dissuasif. En condi-
tions de choix, l'insecte prfre pondre sur le support
deux foix plus riche en sucres (fructose, glucose et
saccharose), que la moyenne observe sur mas
cultiv en serre.
Les cations (calcium, sodium, potassium), donns
sous forme de sels de chlorure, aux quantits obser-
ves sur les niveaux prfrs de mas, stimulent la
ponte (30 50 % de pontes de plus que sur un sup-
port tmoin) (figure 11). Lorsque l'on ajoute ceux-
ci, des sucres (frutose, glucose et saccharose) en trs
faibles quantits (inactives sans les sels), l'effet des
cations est augment. Il existe donc une synergie
entre les sucres et les cations.
Nombre de ponte
100-
BO
60
40
20
o- - ' - - - ' - ~
1
er
jour
lD:l
~
3
e
jour
Jours de ponte
rsultat d'un quilibre d'changes entre les tissus et la
surface, en passant par la cuticule. Celui-ci est
dynamique.
La cuticule semble avoir un rle non ngligeable
dans la composition en mtabolites primaires de la
surface de la feuille. Isole ou en place, elle a rle
discriminant sur le passage des sucres.
La pyrale (O. nubilalis) a un comportement et un
systme sensoriel qui lui permettent de dtecter un
certain nombre de ces substances. L'insecte n'a
probablement pas besoin de substances pour dclen-
cher sa ponte. Toutefois, la femelle est stimule par
un certain nombre de mtabolites qui se trouvent
dterminants pour apprcier la plante et le site de
ponte.
La surface foliaire constitue une source d'information
sur la plante et son environnement. Il est probable
que la plupart des mtabolites soient prsents. La
prsence de certains mtabolites secondaires reste
exploiter, pour expliquer le comportement d'insectes
plus spcifiques et mme des insectes polyphages qui
pourraient dtecter aussi ces substances.
Discussion
Prfrences de ponte de la pyrale entre
diffrentes espces vgtales
La pyrale pond sur de nombreuses familles et espces
vgtales. Toutefois, elle exprime des prfrences
nettes en condition de choix de plantes cultives.
Nous avons observ que l'insecte est capable d'ex-
primer une prfrence pour un site de ponte en
conditions de choix, entre hybrides de mas, entre
niveaux et faces foliaires. Lorsqu'il y a prfrence
entre les deux espces tournesol et mas, elle est
plutt lie au stade de croissance qu' l'espce vg-
tale. La femelle est galement capable de refuser de
pondre sur une plante telle que le colza jeune. Les
stimuli qui gouvernent la slection d'une plante sont
d'ordre multiple, il peut s'agir d'une stimulation qui
entrane une rponse comportementale positive ou
ngative et galement d'un choix rel entre plantes.
Par exemple, pour ce dernier cas, si l'insecte a un
choix binaire entre A et B, l'insecte choisit B. Si B se
trouve en condition de choix avec C, l'insecte choisit
C. Bien qu'il soit un insecte polyphage, lorsqu'il est
en prsence de plantes, il fait un choix prcis. Le fait
qu'il puisse pondre sur des supports artificiels pour-
rait signifier que la femelle n'a pas besoin de stimuli
spcifique pour dclencher la ponte.
50
Prfrences de ponte entre plusieurs varits
de mas
Entre hybrides de mas en conditions naturelles de
choix, il existe une prfrence. L'cart du nombre de
pontes dposes peut s'lever de 1 10. Nos obser-
vations confirment des observations amricaines
faites dans des conditions similaires de choix mul-
tiples en conditions naturelles.
le modle pyrale
Le modle pyrale n'est pas plus complexe qu'un
autre dans le cadre de l'tude des facteurs qui gou-
vernent la slection de la plante par un insecte pour
pondre. Il est intressant pour plusieurs raisons: c'est
un insecte qui a chang d'hte au cours de ses migra-
tions. En simplifiant, l'origine, l'insecte infestait les
crales, dont le millet en Europe de l'Est, puis arriv
en France, il a infest l'Est le houblon, puis le mas
et le haricot. Aux Etats-Unis o il a t export , il
ravage le mas, mais il s'tend de plus en plus sur
d'autres cultures comme la pomme de terre, le poi-
vron, le haricot, le cotonnier ... Ces choix s'oprent
dans des conditions culturales diffrentes et varient
avec chaque gnration au cours de la mme anne.
C'est donc un insecte potentiellement dangereux,
puisqu'il peut s'attaquer des cultures diffrentes
selon les conditions. Ce sont ces dernires que nous
devons comprendre pour limiter les attaques.
A un stade plus fondamental, les facteurs qui gouver-
nent la slection de l'hte pour pondre par un insecte
polyphage sont peu tudis. O se situe la frontire
entre les mcanismes qui gouvernent la slection de
l'hte par un insecte polyphage, oligophage ou
monophage ? Dans ce cadre, il est intressant d'tu-
dier le rle des substances dites spcifiques (mtabo-
lites secondaires) dans le choix de l'insecte
polyphage et celui des mtabolites primaires ou des
nutriments dans le choix d'insectes plus spcifiques.
Choix du support de ponte
pour la descendance
Les insectes doivent pondre sur une plante qui
permet aux descendants de se dvelopper. Le choix
du support de ponte est primordial, surtout lorsque
les larves se dplacent peu. L'insecte est adapt son
milieu lorsqu'il choisit un site sur lequel les pontes
peuvent rester jusqu' l'mergence, lorsque les larves
trouvent leur lieu d'alimentation sans trop de risques
et enfin, lorsque la nourriture permet le dveloppe-
ment (nutriments, possibilits de dtoxification). La
femelle de pyrale, comme d'autres lpidoptres, n'a
pas de contact avec les tissus foliaires avant de
pondre. En revanche, dans les diffrentes tapes
comportementales conduisant la dcision de ponte,
interviennent les stimuli que la femelle distingue
la surface de la feuille. L'adaptation de l'insecte par
l'intermdiaire des stimuli dtects la surface des
feuilles est trs peu connue. Les rsultats des tudes
prsentes ce sminaire montrent qu'il y a un trs
grand nombre d'informations sur la plante et son
adaptation son environnement, qui sont donnes
par la surface foliaire. La pyrale a un comportement
et un systme sensoriel adapts la reconnaissance
d'lments biochimiques donns par la surface
foliaire. Cette reconnaissance du support est
essentielle pour la survie des descendants, qui vont se
nourrir ds leur closion l'endroit o aura t
dpose la ponte.
La dmonstration irrfutable de l'activit d'une
substance sur le dpt de ponte passe par diffrentes
voies:
- faire des observations en conditions naturelles sur
la prfrence de ponte;
- dmontrer dans un milieu complexe de stimuli (sur
plante entire), mais en conditions contrles, qu'il
existe une relation entre une substance (ou un groupe
de substances) et la ponte;
- vrifier sur un substrat inerte que la substance (ou le
groupe de substances) est active. Ce point demande
la connaissance de la distri bution des substances sur
la surface foliaire, et des concentrations, des associa-
tions ioniques et du pH, lorsqu'il s'agit de substances
ionisables, du maintien de leur qualit chimique et
des concentrations au cours de l'exprimentation. Le
fait que les ions minraux soient dtects par l'insecte
impose que le substrat utilis soit sans ions;
- vrifier sur le plan sensoriel que les substances sont
dtectes (isoles et groupes) ;
- revenir aux conditions naturelles et vrifier dans
plusieurs situations le rle des substances supposes
actives.
."
Oeuxime partie
CAlA1AVUD P.-A., VERCAMBRE B. (di!.), 1996.
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
Colloques, ClRAD-CA, Montpellier, France, 96 p.
Phnologie du fruit du cafier en relation
avec l'infestation de Hypothenemus hampe; Ferr.
B.DECAZY
CI RAD-CP, unit de recherche dfense des cultures, BP 5035, 34032 Montpellier Cedex 1, France.
Cette tude a t conduite par J.-F. BARRERA, lors de la
prparation de sa thse de doctorat prsente
l'universit Paul SABATIER, Toulouse, France.
1Introduction
.., , ~ Le scolyte des fruits Hypothenemus hampei Ferr.
ne vit et ne peut se dvelopper que dans les fruits de
caf. De plus, les fruits ne contiennent jamais de pro-
gniture : ufs ou stades post-embryonnaires. Il a
donc paru intressant de dterminer le stade de dve-
loppement du fruit partir duquel l'insecte peut se
reproduire.
1Rsultats
l ~ J
Dveloppement du fruit
Le dveloppement du fruit a t estim en mesurant
la croissance relative du poids sec de l'endosperme
par rapport au poids sec total du fruit (le poids sec a
t obtenu aprs dshydratation des chantillons
dans un four 60-80 oC pendant trois quatre jours).
Une mesure a t faite tous les 14 jours pendant
200 jours.
Lorsque le fruit est trs petit, il est difficile de mesurer
le poids relatif de l'endosperme. Lorsque ce dernier
est bien form, mais encore mou, il reprsente
environ 20 % du poids sec total du fruit. Ce stade est
atteint d'autant plus vite que la temprature moyenne
est leve: 115 jours aprs la floraison pour une tem-
prature moyenne de 26 oc, 138 jours aprs floraison
pour une temprature moyenne de 22,2 oc.
Reproduction du scolyte en liaison
avec la phnologie du fruit
On a effectu des prlvements, au hasard, dans des
plantations, de 231 fruits attaqus et ayant atteint
divers niveaux de dveloppement, puis ils ont t
dissqus.
Suivant le degr de pntration du scolyte dans les
fruits, ceux-ci ont t classs en trois catgories:
- catgorie 1, la galerie creuse dans l'endosperme
mesurait moins de 1 mm ;
- catgorie 2, galerie de plus de 1 mm, mais la
femelle n'avait pas pondu;
- catgorie 3, les premiers ufs avaient t dposs.
Les femelles, qui ont for leurs galeries de pntration
dans le msocarpe du fruit, demeurent dans celui-ci,
attendant que l'endosperme devienne plus dur: la
ponte n'a lieu gnralement que lorsque l'endo-
sperme reprsente au moins 20 % du poids sec du
fruit (figures 1 et 2).
Discussion et conclusion
La pntration du scolyte, et surtout sa reproduc-
tion, ne sont possibles qu' partir d'un certain stade
phnologique du fruit. Cette observation aura une
consquence directe sur les recommandations pour
le contrle des populations de ce ravageur. Il est
ncessaire d'enregistrer les dates de floraison et le
Actes des 5
e
1 000 m
El Rinc6n (400 m)
San Jos Nexapa (600 m)
Santa Teresa Chicharras (800 m)
San Antonio Chicharras (1 000 m)
Maturit "p,",ioo "pid' tG
> 50%
Accumulation
de poids sec
10
Endosperme non dcelable Endosperme Endosperme dj form
en formation
Graine Graine dure
molle
semi-ferme
~ 60
CD

0 8
.;;;
< 50%
CD
~ Tte d'pingle"
20
o 28 56 84 112 140 168 196 224
Jours aprs floraison
Figure 1. Evolution du poids sec de la graine de C. arabica
var. Bourbon aprs la floraison dans 4 sites d'altitude
diffrente, du Soconusco (Chiapas) en 7987.
12 < 1 mm de pntration
10
8
6
11 14 17 20 23
4
2
O..L...J-'ULLlL...lL.lLlL.lLli--'..LlL.lL..L...J....ll..l----L.l.L.L.LL__
12 > 1 mm de pnlralion sans descendance
10
8
6
4
Pourcentage de poids sec de l'endosperme
2
o--"--'--'-..ll-'.L.LL...JL.-'.L.LL-"-'-'--J.J....J.L...J"-iJ......u...."-iJ..-'"--''--'--'--.........-'-'_
'" 12 prsence d'une descendance
~ 10
QI
"D
QI 8
1;
E 6
o
Z 4
Figure 2. Relation entre le poids sec du fruit de caf
et l'installation de la femelle d1-L hampei.
BARRERA J.-F., 1994. Dynamique des populations du
scolyte des fruits du cafier, Hypothenemus hampei
(Coleoptera : SeoIytidaeJ, et lutte biologique avec le
parasitode Cephalonomia stephanoderis (Hymenop-
tera : BethylidaeJ, au Chiapas, Mexique. Thse de
doctorat, universit Paul SABATIER, Toulouse, France,
301 p.
PENAoos-RoBLS R., OCHOA-MILAN H., 1979. La
consistencia deI fruto dei caf y su importancia en el
control de broca, Hypothenemus hampei Ferr.
Revista Cafetalera 181 : 10-16.
moment partir duquel les fruits commencent tre
attaqus par le scolyte. Une bonne connaissance de
ces dates permettrait aux caficulteurs de mieux pr-
voir leurs interventions pour lutter contre ce ravageur.
De faon pratique, elles devront avoir lieu, au plus
tt deux mois aprs la floraison et de toute faon
avant 100 150 jours, selon les tempratures
moyennes ambiantes.
56
CAlATAYUD P.-A" VERCAMBRE B. (dit.', 1996.
Actes des 5' journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
Colloques, ClRAO-CA, Montpellier, France, 96 p.
Re'lation entre la phnologie du cacaoyer
et l'apparition des races physiologiques
chez Earias biplaga (Wlk) Noctuidae
J. NCUYEN-BAN
ClRAD-CP, unit de recherche dfense des cultures, BP 5035, 34032 Montpellier Cedex 1, France.
Figure 1. Relation entre la moyenne d'ufs pondus
par les femelles leves en laboratoire, leur fcondit
potentielle et les ufs observs en champ.
Il 12 1 2 ] 4 5 6 7 8 9 10 Il 12 1 2 ] 4 5 6 7 8 9 10 Il Mois
Moyenne d'ufs pondus
5
25
20
10
40
35
50
55
65
75
Annes
20 15
40 30
10
50
60 45
70
100 75
80 60
90
~
"
"
" , ,
, ,
, ,
, ,
, ,
, ,
1
,
,
,
,
, '
" 30
"
"
~
,
1972
- ufs rcohs
Fcondit
potentielle (Fpl
Moyenne
- d'ufs pondus
1971
,
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\
\
1970
600
100
200
500
300
700
400
800
900
ufs rcolts
1000
1 100
1 200
1 300
1600
1 500
1 400
1Introduction
~ 4 ~
fi L'tude du cycle volutif d' farias bip/aga (Wlk),
noctuelle du cacaoyer, a t mene selon une
approche deux niveaux:
- tude en plein champ de la dynamique des popula-
tions de noctuelle dans trois zones cologiques diff-
rentes de la basse Cte d'Ivoire;
- tude en salle de l'activit ovarienne des femelles
issues des souches sauvages rcoltes mensuellement
dans les plantations.
If
1
!'1 Cycle cultural du cacaoyer
et rythme d'apparition
mM des noctuelles
~ ~ * ~
fiAt ~ : : ~
..
,. Les rsultats de cette tude ont montr que, dans
l'cosystme du cacaoyer cultiv en Cte d'Ivoire, les
pullulations de grande amplitude des populations de
noctuelles ont pour origine, l'mergence -
certaines poques de l'anne - des races physio-
logiques haut potentiel biotique qui colonisent le
milieu (figure 1).
L'apparition des races fertiles dans l'agrosystme
cofncide rgulirement avec des modifications ph-
nologiques majeures pour le cacaoyer.
C'est ainsi que, l'infestation du mois de janvier est
contemporaine de la premire floraison de l'anne
(figure 2).
Saison sche
".: ..' :':::':,-, ,::,::,

Grande saison des pluies Petite saison des pluies
Floraison
Pousse foliaire
Rcolte secondaire
AAA"

Floraison
Pousse foliaire
Rcolte principale
Figure 2. Reprsentation schmatique de la concidence temporelle entre l'tat des ovarioles des femelles
d'Earias biplaga et la phnologie du cacaoyer.
Aprs une rarfaction en fvrier-mars (saison sche),
les cheni Iles pineuses rappara issent avec les pre-
mires prcipitations du mois d'avril. A cette priode
d'quinoxe, le bilan hydrique du sol, la temprature
et l'ensoleillement sont particulirement favorables
au dclenchement des pousses foliaires, suivies
d'abondantes floraisons chez les cacaoyers.
En ce qui concerne l'activit reproductrice des noc-
tuelles, les carts thermiques journaliers importants
ractivent les fonctions ovariennes des femelles et
occasionnent une deuxime vague de pontes. A
l'closion des ufs, les chenilles pineuses trouvent
leur disposition une abondante nourriture pour
assurer leur survie.
La troisime et dernire pullulation de noctuelles, en
octobre-novembre, concide avec la rcolte princi-
pale, priode o les pousses vgtatives sont abon-
dantes.
58
l'anne sont rgis par des mcanismes extrmement
labors qui ont t tudis en dtail.
En conclusion, il se trouve qu' chaque invasion de
noctuelles, le haut potentiel biotique des souches
mergeantes rsulterait de la rencontre temporelle
des facteurs trophiques et climatiques privilgis.
Discussion
L'existence de races physiologiques
est-elle bien prouve?
On observe dans l'anne, deux types de femelles
des femelles trs fertiles et des femelles peu fertiles
qui se succdent dans la nature. On se fonde ici sur
des diffrences de potentiel reproducteur des
souches. De mme certaines priodes de l'anne,
on observe des diffrences de colorations alaires
notamment au niveau des taches. En autocologie
exprimentale, si on modifie les conditions de l'le-
vage (temprature, hygromtrie.. .) et d'alimentation
des chenilles, on obtient la mme diffrenciation
dans les pigmentations alaires et dans les potentiels
reproducteurs des souches.
CAlATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit.), 1996.
Actes des 5" joumes du groupe de travail relations insectes-plantes,
Colloques, CIRAD-CA, Montpellier, France, 96 p.
Comportement de slection de la plante hte
par la cochenille farineuse du manioc P. manihoti :
rle des composs biochimiques
S. RENARD(ll, B. LE R(2), P.-A. CALATAYUD(3), G. LOGNAy(4), C. GA5PAR(l)
(1) Facult des sciences agronomiques, UER de zoologie gnrale et applique, 2 passage des dports,
5030 Gembloux, Belgique.
(2) Centre OR5TOM, BP 1286, Pointe-Noire, rpublique du Congo.
(3) OR5TOM, L1N-BGP, parc scientifique Agropolis Il, Bt B5-B6, 34397 Montpellier Cedex 5, France.
(4) Facult des sciences agronomiques, UER de chimie gnrale et organique, 2 passage des dports,
5030 Gembloux, Belgique.
1: ~ : : : : , C : : : o t e<culenta Ccantz (EuphO'-
biaceae), originaire d'Amrique latine, reprsente
l'heure actuelle un aliment de base dans les zones
forestires de l'Afrique centrale. Depuis les annes
1960-1970, la suite de l'introduction en Afrique de
boutures contamines, le manioc subit de graves
dommages dus la cochenille farineuse Phenacoccus
manihoti Mati le-ferrero (Hom., Pseudococcidae). Cet
insecte piqueur-suceur, phlomophage et oligophage,
infod au genre Manihot, est en effet dot d'un
important pouvoir de multiplication.
Mthodologie
Le sujet de notre travail s'inscrit dans le cadre
gnral de l'tude des interactions multitrophiques
manioc-cochenille farineuse-auxiliaires. Il s'intgre
plus particulirement dans le contexte de l'tude de
la rsistance des plantes, afin d'identifier les caract-
ristiques du manioc susceptibles d'induire une rduc-
tion des effectifs des cochenilles. Il se propose d'ana-
lyser le comportement de fixation de la cochenille sur
sa plante hte en relation avec son quipement
sensoriel et les caractristiques physiques et chi-
miques de la surface des feuilles. L'tude est ralise
sur plusieurs gnotypes de manioc et sur le talinum
(Talinum triangularae Jack, Portulacaceae) hberge
parfois des populations de cochenilles sur le terrain et
il constitue une excellente plante de substitution au
laboratoire (NEUENSCHWANDER et MADOJEMU, 1986 ;
IZIQUEL, 1990). Ces plantes ont t choisies d'aprs
leur degr de rsistance antixnotique l'gard de la
cochenille (au sens de PAINTER, 1951) tabli lors de
criblages varitaux au champ et au laboratoire
(TERTULIANO et al., 1993 ; LE R et TERTULIANO, 1993).
1 Rsultats et discussion
1Le compoctement de ceconnaissance de la plante
par la cochenille a t dcrit d'aprs les observations
l'il nu de cochenilles de stade L1 pendant
90 minutes sur des feuilles entires. Nous avons
reprsent les rsultats sous forme d'thogrammes
(figure 1). Ces expriences ont conduit une nou-
velle classification des plantes selon leur degr de
reconnaissance (antixnose) et l'observation de
mouvements particuliers suggrant que les organes
sensoriels de la cochenille sont mobiliss. Par des
techniques de microscopie lectronique balayage et
1ncoza
Type 1 9 .,...,.
Type2 4
-
Type 3 3
t
Type4 4
M'Pemb
Type 1 3
.,
Type2 4
-
M:
M.
Type 4 B _--=- IJ*.-:;:z;'':.-Cl*C,',::,,,',::;;,,,,::', ,:::I::;:::::: ..,.,.:;:: ..,., :z--:::::::;:z::::z::z:::::::::::::::::=::::::,,,z"'::!m.::.,.,',.::;,,;'"'::., ,.,:: ,..,::; ,.. ::::;:::.:!:,.y::./:E,",z::"., ..,::,'w,,:::::z::::::::::::::,.,.,.; ..::::::J ..,.,.,'
Type 5 5
Fa ux-caoutchouc
-,==.:.: : : : : : : = : = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = = : : : : : : : : : : : : : : : ~ ~ : : : : : : : : : : : : : ......... ':::z::=.:., .... , ::::::::J. ':""."
. --
Type 1 3
Type 4 7
Type 5 5
Type 6 5
.........._-_:..:._-_:.
_:,M
Talinum
Type4 2 .-=--=_-=:J -=-_[]--=:.=--[]-IC,==::J-k========== .. .=....::;:: .....,.,:: .....::: ....::::::::::::::::::::=======:::1,.,
Type 7 5
Type B 9
11-=-::11:- - .'
.- ... 1
Type 9 4
, _ t ~ ___
t Passage sur la ieuille
---
Progression sur la ieuille
~ Passage sur bauche ioliaire
t
Passage sous la ieuille
---
Progression sous la ieuille
Cl Essai
HU Changement de ioliole ou de ieuille
D Passage sur le ptiole
~ Essai sur bauche ioliaire
Figure 1. Ethogrammes caractristiques du comportement de fixation de la cochenille du manioc avant l'arrt sur les
feuilles des varits M'Pemb et Incoza, de l'hybride Faux-caoutchouc et du Talium, Observations de 90 minutes,
60
transmission, nous avons alors dcrit la structure
externe et interne des sensilles de l'antenne, de la
patte et du labium. Nous avons ainsi montr que les
fonctions mcaniques, gustatives et olfactives sont
bien reprsentes sur le labium et sur les antennes,
tandis que seule la fonction mcanique est retrouve
sur la patte.
L'observation dtaille sur cran vido (camra
adapte la loupe binoculaire) du comportement
d'acceptation de l'hte, c'est--dire des diffrentes
tapes rencontres aprs l'arrt de la cochenille sur le
vgtal, a mis en vidence une succession de phases
typiques, quelle que soit la plante (figure 1).
Ces observations ont t compltes par un enregis-
trement lectrique de la pntration des stylets dans
la plante. Nous avons montr qu'une progression des
stylets s'effectue au cours des diffrentes phases
observes au cours de l'enregistrement vido et que
les signaux lectriques peuvent tre associs aux
items comportementaux. La comparaison des
maniocs, en ce qui concerne les frquences d'asso-
ciation signaux lectriques-items comportementaux
et la dure des signaux, a montr que le chemine-
ment des stylets entre (et dans) les cellules jusqu'au
phlome est plus difficile pour la varit la plus
antixnotique et que le nombre de potential drops
(courtes piqres dans les cellules) est significative-
ment plus lev pour cette mme varit.
L'observation de la surface des diffrentes plantes,
tudies en microscopie lectronique balayage, n'a
mis en vidence aucune diffrence structurale
majeure entre les trois maniocs. Les seules variations
retrouves concernent l'paisseur de la couche de
cires picuticulaires et la taille des cellules pider-
miques. Actuellement, nous nous attachons corrler
les caractristiques chimiques de la surface de la
feuille aux rsultats de tests biologiques: l'extraction
des substances foliaires l'aide de solvants de pola-
rits diverses fournit d'une part des extraits slectifs
soumis l'analyse chimique et, d'autre part, un
substrat biologique modifi soumis au test
comportemental classique de reconnaissance.
Les premiers rsultats ont rvl la prsence de
linamarine, l'un des glycosides majeurs du manioc.
Elle a t mise en vidence pour la premire fois la
surface de la feuille et son rle phagostimulant a t
suggr par CALATAYUD et al. (1994).
I ~ Conclusion
Il
MW Dans l'tat actuel de nos connaissances, nous
pouvons dire que la cochenille du manioc est
pourvue d'un quipement sensoriel compos d'un
petit nombre de sensilles mais trs diversifies, qui lui
permettent de faire la distinction entre des plantes
htes et non htes. Cela signifie que les plantes
qu'elle rencontre lui fournissent un ensemble d'infor-
mations qui la conduisent l'acceptation ou au rejet
de la plante.
Il est donc essentiel de comprendre les mcanismes
lis la reconnaissance, c'est--dire de dterminer
les stimuli physiques et surtout chimiques qui
influencent son choix.
CALATAYUD P.-A., RAHBE Y, TJALLINGI W.F., TERTULlA-
NO M., LE R B., 1994. Electrically recorded feeding
behaviour of Cassava mealybug on host and non-host
plants. Entomol. Exp. Appl. 72 : 219-232.
IZIQUEL Y., 1990. Le parasitisme de la cochenille du
manioc par l'Encyrtidae Epidinocarsis lopezi : un
exemple d'interactions hte-parasitode chez les
insectes. Thse de doctorat, universit de Rennes l,
France, 75 p.
LE R B., TERTULIANO M., 1993. Tolerance of different
host-plants to the cassava mealybug Phenacoccus
manihoti Matile-Ferrero (Homoptera, Pseudo-
coccidae.) Int. j. of Pest Management 39 (4) :
379-384.
NEUENSCHWANDER P., MADOJEMU E., 1986. Mortality of
the Cassava mealybug Phenacoccus manihoti (Hom.,
Pseudococcidae) associated with an attack by Epidi-
nocarsis lopez; (Hym., Encyrtidae). Bull. Soc. Suisse
59 : 57-62.
PAINTER R.H., 1951. Insect resistance in crops plants.
The University press of Kansas, Lawrence, Kansas,
Etats-Unis, 520 p.
TERTULIANO M., DoSSOU-GBETE S., LE R B., 1993.
Antixenotic and antibiotic components of the resis-
tance to the cassava mealybug Phenacoccus manihoti
in various host-plants. Insee!. Sei. Applie. 14 :
657-665.
Discussion
Quelle est la dure des enregistrements EPG ?
La dure est de 22 minutes. Elle correspond celle
des squences comportementales filmes antrieure-
ment et a t choisie en fonction de l'attnuation
marque de l'activit des cochenilles la fin de cette
priode.
Actes des 5
e
Les insectes supportent-ils bien l'clairage?
Oui.
Observation du comportement de la cochenille
sur les diffrentes varits de manioc tudies
Il apparat que le comportement de test probing est
plus confus sur la varit la moins prfre. Cela se
traduit par une agitation plus importante de la
cochenille et une plus grande diversit d'items.
62
Pourquoi focaliser l'tude sur l'analyse
des composs de surface ?
Leur influence sur les insectes, que cela concerne la
nutrition ou l'oviposition, ne fait plus de doute.
Puisque l'insecte est d'abord confront la surface de
la plante, c'est dj ce moment-l qu'une non
prfrence peut-tre observe.
CALATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. (DIT.), 1996.
INTERACTIONS INSECTES,PLANTES.
ACTES DES SE IOURNES DU GROUP! DE TRAVAIL RELATIONS INSECTES-PLANTES,
26-27 OCTOBRE 1995, MONTPELLIER, FRANCE.
COLLOQUES, CIRAD-CA, MONTPELLIER, FRANCE, 96 p.
du pin sylvestre aux agressions
par les scolytes et leurs champignons associs:
action des composs phnoliques sur les agresseurs
E. BOIS, F. LIEUTIER, A. YART
INRA, station de zoologie forestire, 45160 Ardon, France.
Etude de la croissance
de L. wingfieldii
lli1 Introduct"lon

tk
4"\1 Une attaque de scolytes (Tomicus piniperdaJ et
de leurs champignons associs (Leptographium wing-
(ieldii) sur pin sylvestre est gnralement stoppe par
une raction induite du phlome. Cette raction
matrialise par une zone elliptique longitudinale est
imprgne de divers mtabolites secondaires.
Etude des composs
phnoliques
L'tude de la composition phnolique de cette
zone a permis de mettre en vidence des diffrences
entre phlome sain et ractionnel. Trois composs
totalement absents du phlome non agress sont
nosynthtiss : la pinosylvine (PSl, son monomthy-
lther (PSMl et la pinocembrine (PC). D'autres
composs prsents dans le liber sain voient leur
concentration modifie. La catchine augmente dans
la raction alors que les drivs de l'acide hydroxy-
cinnamique diminuent. La taxifoline et son glycoside
ont des concentrations qui varient selon les arbres.
Afin de mieux comprendre le rle de ces diffrents
composs phnoliques dans la raction, nous avons
entrepris de tester leur action sur les agresseurs:
L. wing(ieldii et T. piniperda.
1

I
l
.;$'
lIt La croissance de L. wing(ieldii en prsence des
divers composs a t teste en micro-plaque et
mesure par spectrophotomtrie. La pinosylvine, son
monomthylther et la pinocembrine inhibent la
croissance du champignon. En revanche, la catchine
stimule la croissance, et la taxifoline n'a aucun effet.
Diverses combinaisons ont aussi t testes, Lors de
mlanges des diffrents composs inhibiteurs, l'inhi-
bition est amplifie. En prsence de taxifoline, l'inhi-
bition due la PC et la PS est identique celle de
ces composs introduits seu Is. En revanche, la taxifo-
line diminue l'inhibition induite par la PSM, De plus,
l'analyse par HPLC du milieu de culture en fin d'ex-
prience a permis d'valuer la stabilit des composs
et l'action du champignon sur ces derniers. L. wing-
(ieldii est capable de dgrader les diffrents composs
inhibiteurs, PS, PSM et Pc. Cependant, au-del d'une
certaine dose seuil, cette action n'est pas observe, le
champignon est alors totalement inhib, En revanche,
L. wing(ieldii ne dgrade pas les composs qui ont un
effet positif {catchinel ou neutre (taxifolinel sur sa
croissance.
Action des composs
sur T. piniperda
L'utilisation d'un milieu artificiel base de
phlome a permis d'tudier l'action de ces composs
sur T. piniperda. Les tests ont t raliss en bote de
Actes des 5
e
Ptri avec une rondelle de milieu artificiel. La
consommation du milieu obtenue par pese est iden-
tique quelle que soit la concentration en composs
phnoliques prsents dans le milieu nutritif. Dans
tous les cas, la mortalit est trs faible.
f@ CI
~ 1 one uSlon
::;?.;
Les composs phnoliques nosynthtiss dans
la zone de raction semblent donc avoir un effet
fongistatique alors que celui dont la concentration
augmente aurait un effet stimulateur sur
L. wingfieldii. Cependant, cette action n'a t
observe qu'in vitro en absence de phlome. Contrai-
rement leur champignon associ, les insectes ne
semblent pas gns par la prsence de ces composs
dans leur milieu nutritif. La mthodologie utilise
pour les insectes n'est cependant peut-tre pas assez
prcise pour permettre l'observation de diffrences
entre les traitements. De plus, il serait intressant de
tester l'action des composs phnoliques sur les
stades larvaires de T. piniperda.
64 1nteractions insectes-pl an tes
CAlATAYUD P.A., VERCAMBRE B. (dit.), 1996.
Actes des Se journes du groupe de travail relations insectes-plan'tes,
Influence de la plante sur les caractristiques
dmographiques d'Epidinocarsis lopezi,
parasitode de la cochenille farineuse du manioc
R. SOUISSI(l), P.-A. CALATAYUD(2), B. LE R(J)
(1) Universit de Rennes l, laboratoire d'cobiologie des insectes parasitodes, campus de Beaulieu,
35042 Rennes Cedex, France.
(2) ORSTOM, L1N-BGP, parc scientifique Agropolis Il, Bt B5-B6, 34397 Montpellier, Cedex 5, France,
(3) ORSTOM, laboratoire d'entomologie agricole, BP 1286, Pointe-Noire, Rpublique du Congo,
Introduction
Depuis quelques annes, dans un contexte de
lutte intgre faisant appel la lutte varitale et biolo-
gique, l'tude de l'incidence de la rsistance des
plantes sur l'efficacit des parasitofdes se dveloppe.
Parmi les diffrentes catgories de rsistance dfinies
par PAINTER (1958), il semble que l'antibiose soit
davantage susceptible d'agir ngativement sur le troi-
sime niveau trophique (VAN EMDEN, 1991), Nous
nous proposons dans la prsente tude de dterminer
dans quelle mesure des plantes caractrises par
diffrents degrs de rsistance antibiotique la
cochenille Phenacoccus manihoti Matile-Ferrero
(Homoptera : Pseudococcidae) influencent l'efficacit
du parasitode Epidinocarsis lopezi De Santis
(Hymenoptera : EncyrtidaeJ. Cet effet est apprci au
travers du calcul du taux intrinsque d'accroissement
naturel (rm) (BIRCH, 1948) qui intgre les diffrentes
composantes du dveloppement du parasitode telles
que la dure de dveloppement, la fcondit, la
mortalit et le sex ratio.
Matriel et mthodes
Quatre plantes htes ont fait l'objet de notre
tude: Incoza et Zanaga (MM 79). Deux varits de
manioc Manihot esculenta Crantz (Euphorbiaceae)
sont testes: Faux-caoutchouc, hybride de M. escu-
lenta et de M. glazovii Mul!. Arg. et Talinum, Talinum
triangularae Jacq (Portulacaceae). Les souches du
parasitolde et de la cochenille, maintenues depuis
trois ans au laboratoire, proviennent du Congo.
Les expriences se sont droules sur des plants
entiers, simultanment sur 9 12 femelles disposant
chacune de 20 cochenilles L3 par jour. A la momifi-
cation, les cochenilles sont mises une par une en
glules, A l'mergence, les adultes sont dnombrs,
le sexe dtermin, et leur dure de dveloppement
totale note. Les cochenilles non momifies sont
observes la loupe binoculaire afin d'observer un
ventuel phnomne d'encapsulation. La fcondit
journalire du parasitode est assimile la somme
des nombres de momies et de parasitodes encap-
suls obtenus chaque jour.
1Rsultats et discussion
tl
ilt] L'espce de plante et la varit influencent signi-
ficativement le succs reproducteur d'E. lopezi : le
taux intrinsque d'accroissement naturel r
m
est signi-
ficativement plus lev sur Zanaga et Talinum que sur
Incoza et Faux-caoutchouc (tableau 1), Parmi les dif-
frents paramtres qu'intgre r
m
, on note que seul le
sex ratio n'est pas modifi par la plante (tableau Il).
La varit de manioc Incoza, qui est la plante o l'on
enregistre la fcondit la plus leve, 1,4 fois plus
importante que celle du Faux-caoutchouc est celle o
le taux de mortalit primaginale est le plus impor-
tant. Les substances secondaires ingres par les
Actes des 5
e
Tableau 1. Comparaison du taux net de reproduction (r
o
) du temps de gnration ((T), et du taux intrinsque d'accroisse-
ment naturel (r
m
) dT lopezi et de P. maniholi.
Conditions rpertories Temprature Plante r
o
Temps gnration r
m
et humidit relative (F/F/gnration) (jours)
f. lopez;
Etude de SOUISSI, CALATAYUD 25 oC, 70 % Incola 37,4 7,4 a 30,1 1,2 a 0,120 0,008 a
Zanaga 53,0 17,0 b 29,9 1,2 a 0,1310,013b
Faux-caoutchouc 35,7 7,7 a 31,31,5b 0,114 0,008 a
Talinum 54,0 24,7 b 29,4 1,2 a 0,132 0,012 b
IZIQUEL, Le Ru, 1992 26 oC, 64 % Talinum 269,9 33,9 0,213
LOHR el al., 1989 27 oC, 60 % M. esculenla 24,6 19,9 0,166
P. man;hot;
TERTULIANO el al., 1992 25 oC, 70 % Incola 295,6 20,8 0,133
Zanaga 299,1 18,1 0,155
Faux-caoutchouc 401 18,8 0,141
Talinum 287,6 20,8 0,15
SCHULTHESS et al., 1987 8 oC, 65-95 % n091934 357,4 39,8 0,157
LEMA et HERREN, 1985 27 oC, 72 % M. esculenta 443,2 32,9 0,2
Tableau II. Comparaison de la fertilit, de la dure de dveloppement de la mortalit primaginale et du sex ratio
d'E. Lapez; sur quatre plantes htes.
Plante Fcondit Dure de dveloppement Mortalit primaginale Sex ratio
ufs/femelle des femelles (jours) (Ofa)
Incola 129 19,2 a 23,8 0,4 a 30,7 7,9 a 62,99 0,68 a
Zanaga 11521,4a 24,3 0,4 ab 18,510,4bc 64,95 1,29 a
Faux-caoutchouc 94 12,5 b 24,3 0,3 bc 22,7 6,1 b 62,14 0,58 a
Talinum 118 33,6 24,8 0,5 14,8 2,9 c 60,45 2,78 a
insectes phytophages sont souvent invoques pour
expliquer un tel effet ngatif de la plante sur la
biologie et le dveloppement des parasitodes (VAN
EMDEN, 1991). En ce qui concerne le couple manioc-
cochenille, CALATAYUD et al. (1994) ont pu observer
que la rutine transporte par la sve phlomienne de
la plante serait ingre et mtabolise par la coche-
nille. " est permis de se demander si la rutine ou le
produit d'hydrolyse de ce glycosyde - la querctine
- ne perturbe pas le dveloppement du parasitode.
En effet, la plus forte mortalit pr-imaginale
d'E. lapez; est enregistre sur la varit de manioc
Incoza prcisment celle prsentant la plus forte
teneur en rutine : 10,9 mglg de matire sche contre
7,0 et 8,1 respectivement chez Zanaga et Faux-caout-
chouc. Cette hypothse reste vrifier en tudiant
les caractristiques cobiologiques d'E. lapez; se
66
dveloppant sur des cochenilles leves sur un milieu
artificiel holidique dans lequel on fera varier les
teneurs en rutine.
Dans notre tude, la plante est responsable d'une
variation du r
m
du parasitode de prs de 16 %. La
comparaison de nos rsultats avec ceux rapports
dans la lillrature indiquent des variations de valeur
du r
m
bien suprieures allant jusqu' prs de 84 %
(tableau 1). Les diffrences observes ne rsultent pro-
bablement pas de la seule plante mais de facteurs tels
que la densit de l'hte, l'alimentation des femelles,
la temprature exprimentale, l'cotype du parasi-
tOI de, voire la mthode d'estimation de la fcondit.
A temprature gale et sur les mmes plantes htes,
le r
m
dT lopezi est sensiblement infrieur celui de
la cochenille (tableau 1). Le rm' qui peut tre utilis
comme un indice du fitness du parasitoide, est
souvent compar celui de son hte (GODFRAY,
1994). En lutte biologique, certains auteurs consid-
rent qu'un parasitode peut tre efficace, quand
son r
m
est suprieur ou gal celui de son hte
(BIGLER, 1989). Fonds sur ce critre, les rsultats pr-
sents dans le tableau 1suggrent une certaine ineffi-
cacit d'E. lopezi.
En dfinitive, nos rsultats montrent que le r
m
d'E. lopezi est modifi significativement par des
plantes exprimant diffrents niveaux de rsistance
antibiotique P manihoti. I/s indiquent notamment
que la forte rsistance exprime par Incoza est dfa-
vorable au parasitode, dont elle affecte la mortalit
et la dure de dveloppement primaginales. Dans
l'optique d'un renforcement de la lutte biologique
l'aide de varits rsistantes, l'utilisation de varits
de manioc prsentant des caractristiques de rsis-
tance comparable Zanaga apparat souhaitable.
Toutefois, nos observations ayant t ralises sur une
seule gnration du parasitode au laboratoire,
il conviendrait de les confirmer long terme sur plu-
sieurs gnrations du parasitode et en conditions
exprimentales de terrain, avant d'envisager de
recommander telle ou telle caractristique de la
plante des slectionneurs.
BIGLER F., 1989. Quality assessment and control in
entomophagous insects used for biological control.
j. Appl. Entomol. 108 : 390-400.
BIRcH L.C., 1948. The intrinsic rate of natural increase
of an insect population. j. Anim. Ecol. 17 : 15-26.
CALATAYUD P.-A., RAHBE Y., DELOBEL B., KHUONG-
Huu F., TERTULIANO M., LE R B., 1994. Influence of
secondary compounds in the phloem sap of cassava
on expression of antibiosis towards the mealybug
Phenacoccus manihoti. Entomol. Exp. Appl. 72 :
47-57.
GODFRAY H.C.)., 1994. Parasitoids : Behavioural and
evolutionary ecology. KREBS, J.R. and T. CLunON-BROCK
(Eds), Princeton University Press, Etats-Unis, 473 p.
IZIQUEL Y, LE R B., 1992. Fecundity, longevity and
intrinsic natural rate of increase of Epidinocarsis
lopezi (De Santis) (Hym. EncyrtidaeJ. Cano Entomol.
124 : 1 115-1 121.
PAINTER R.H., 1951. Insect resistance in crops plants.
The University press of Kansas, Lawrence, Kansas,
Etats-Unis, 520 p.
VAN EMDEN H.F., 1991. The role of host plant resis-
tance in Insect Pest Management. Bull. Ent. Res. 81 :
123-126.
Actes des 5
e
CAlA1AYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit.), 1996.
Interaclions insecles-p/anles.
Acles des Se journes du groupe de travail relalions insectes-plantes,
26-27 octobre \ 995, Montpellier, France.
Colloques, CtRAD-CA, Monlpellier, France, 96 p.
1nfluence de la prsence des fourmis
ou des Phycitinae sur la production de corps nourriciers
par Cecropia obtusa Trecul. (Cecropiaceae)
en Guyane franaise
P.-J. 50LANO, M. BELIN-DEPOUX
Universit Paris VI, laboratoire de biologie vgtale tropicale, 12 rue Cuvier, 75005 Paris, France.
Introduction
Cecropia obtusa, plante pionnire de Guyane
franaise est un myrmcophyte associ commun-
ment aux fourmis Azteca dans une relation stricte,
symbiotique. L'lment trophique fondamental pro-
duit par la plante est le corps de Mller, corpuscule
blanchtre, ovolde, runissant des cellules gorges de
rserves. Les entre-nuds sont transforms en doma-
ties abritant la colonie. Sur chaque entre-nud,
l'oppos de l'insertion foliaire se situe une zone lg-
rement invagine, le prostoma. Ce dernier est perc
par la reine au moment de la fondation de la colonie.
La base de chaque ptiole porte un tissu spcialis, la
trich ilium, 1ieu d' origi ne des corps nourriciers pro-
tgs par des poils pluricellulaires unisris, les para-
physes. La production des corps nourriciers survient
toujours dans un mme nyctmre, trois heures avant
la tombe de la nuit, et se poursuit jusqu'au crpus-
cule. L'mission des corps nourriciers suit toujours ce
rythme, que l'individu soit occup ou non par les
fourmis, habit par des chenilles ou cultiv en serre.
Etude de la production
des corps de Mller
L'tude s'est droule sur le site de Petit Saut
proximit du barrage EDF sur le Sinnamary. Deux
espces d'Azteca vivent en association avec Cecropia
obtusa, A. Iraili et A. a/fari. Cette dernire, nettement
68
maJOritaire, est prsente dans plus de 60 % des
arbres. Avant l'occupation par les fourmis, les entre-
nuds peuvent tre habits par des chenilles de
Pyra/idae phycitinae qui se nourrissent des corps
nourriciers. La production des corps de Mller a t
suivie pendant vingt jours (SOLANO, 1995) sur dix
arbres occups par les fourmis (figure 1), dix autres
habits par les chenilles (figure 2), et enfin dix arbres
Nombre de corps
nourrieiers
400
350
300
250
200
150
100
50
o
Figure 1. Production de corps nourriciers par Cecropia
obtusa occups par des Azteca, pendant 20 jours.
Interactions
Nombre de corps
nourricien.
SOLANO P., 1995. Dynamique du systme Cecropia
obtusa Trcu!. (Cecropiaceae)-Azteca Emery (Formi-
cidae) en Guyane franaise. DEA biologie des popu-
lations et co-thologie, universit Franois RABELAIS,
Tours, France, 29 p.
BELIN-DEPOUX M., DEjEAN A., CORBARA B., WICKERS S.,
PASCAL L., TOUZET M.-C, MC KEY D., DUREDON J.,
1995. Les interactions plantes pionnires-fourmis en
Guyane franaise. Rle dans la protection biotique.
Rapport programme SOFT 1993-94,70 p.
de cent corps nourriciers par jour et par feuille). Elle
reste importante (70) lorsque les chen iIles svissent et
diminue considrablement (19) lorsque le Cecropia
est inoccup. Cependant un cart de production de
deux catgories d'arbres occups par les chenilles
apparat. Les Cecropia, habits par les fourmis, mon-
trent une croissance acclre par rapport ceux qu i
ne le sont pas (TOUZET, 1993), consquence possible
de la rcupration de nutriments contenus dans les
dchets des fourmis ou de l'utilisation du CO
2
accumul dans les domaties. Cet apport nergtique
pourrait galement tre responsable de l'accroisse-
ment de la production des corps de Mller. Dans une
population presque monospcifique ge de dix-huit
mois (BELIN-DEPoux et al., 1995) avant l'occupation
par les Azteca, la prsence de chenilles de Phycitinae
dans les entre-nuds n'entrane qu'exceptionnelle-
ment l'endommagement des feuilles, la consomma-
tion des corps nourriciers tant prioritaire. En l'ab-
sence de fourmis, le feuillage est donc protg par les
corps de Mller. Dans les Cecropia plus gs, habits
par les fourmis, les feuilles sont souvent endom-
mages. Cependant, la production foliaire accrue
dans le cas des individus occups compense la perte
en surface photosynthtisante des feuilles adultes.
Ainsi, une protection phnologique, consquence de
la modification physiologique de la plante, engen-
dre par la prsence des fourmis, pourrait suppler la
protection biotique dficiente.
350
300
250
200
150
100
50
a
400
350
300
250
200
150
obtusa non occups, pendant 20 jours.
obtusa occups par des chenilles, pendant 20 jours.
non occups (figure 3). La supriorit de la produc-
tion des Cecropia occups par les fourmis ou par les
chenilles est manifeste. Cependant la production est
maximale en prsence des fourmis (en moyenne, plus
TOUZET M.-C, 1993. Biologie des Cecropia guyanais.
Comportement des espces myrmcophiles et
non myrmcophiles dans le milieu naturel. DEA
d'cologie gnrale et production vgtale, universit
Paris VI, France, 32 p.
Actes des 5
e
CAlATAYLJO P.-A., VERCAMBRE B. (dit.), 1996.
Interactions inseCies-planles.
Acles des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
26-27 octobre 1995, Monlpellier, France.
Colloques, CIRAD-CA, Montpellier, France, 96 p.
Rsistance du pin sylvestre au champignon
Ophiostoma ips (naturellement associ au scolytide
Ips sexdentatus), effets de diverses modalits
de stress hydrique
L. CROIS(l) (2), F. LIEUTIER(l), E. DREYER(2)
(1) INRA, station de zoologie forestire, 45160 Ardon, France.
(2) INRA, unit de recherche cophysiologie forestire, quipe de bioclimatologie
et cophysiologie forestire, 54280 Champenoux, France.
1Introduction
i . % ~ : ~
~ : : : - ; ~
1 Les quipes de recherche, travaillant sur divers
modles con ifre hte/scolytides et leurs champi-
gnons associs aux Etats-Unis, en Scandinavie et en
France, s'accordent pour attribuer la fois une
importance primordiale au systme de dfense loca-
lis proximit des points d'agressions (la raction de
dfense induite) et au rle prdisposant du stress
hydrique sur les possibilits de dfense naturelle des
conifres htes lors d'attaques de scolytides. Toute-
fois, l'tat des connaissances sur le rle prcis du
stress hydrique, dans les dprissements observs
conscutivement des priodes de scheresse mar-
que, reste trs insuffisant pour envisager des moyens
d'actions efficaces en pareilles situations. Les mca-
nismes orientant la rsistance sont ainsi quasiment
inconnus. Cependant, le cot lev de l'laboration
de la raction induite (via les mtabolites secondaires:
terpnes et phnols) et la relation troite entre la
contrainte hydrique et le niveau de photosynthse
font que le concept des relations source-puits de car-
bone est souvent utilis pour interprter des rsultats
obtenus sur ces modles d'tude. Les recherches
entreprises sur le modle Pinus sy/vestris-Ophiostoma
ips (un des champignons pathogne associ avec une
frquence leve au scolytide Ips sexdentatus)
visaient deux principaux objectifs: caractriser les
variations de la raction de dfense induite (longueur
et composition phnolique) pour diffrentes moda-
lits de stress hydrique bien dtermines, et tenter de
tester la relation entre le niveau de photosynthse et
la variabilit de la raction.
70
Etude des ractions aux dficits
hydriques et aux inoculations
Mthodes
De jeunes plants de pin sylvestre, gs de six ans et
installs en serre, ont t soit soumis des priodes
successives de dficit hydrique, soit constamment
bien arross avant d'tre inoculs avec le pathogne.
Trois sries successives d'inoculations ont t rali-
ses sur les mmes arbres, au tout dbut du dessche-
ment, au plus fort du dficit et immdiatement aprs
rarrosage. L'tat hydrique des plants a t mesur
frquemment par le potentiel hydrique foliaire de
base (lJI wp), et l'assimilation nette de CO
2
(A) a t
mesure deux fois par semaine pendant la priode de
croissance. A partir de ces donnes brutes d'assimila-
tion photosynthtique, un indice de dficit cumul
d'assimilation nette de CO
2
(DA) a t calcul entre
les arbres stresss et les tmoins pour mieux prendre
en compte le facteur dure de dveloppement de la
raction induite dans le liber. Trois semaines aprs
inoculation, la longueur des ractions la surface du
liber a t mesure individuellement. Une moiti lon-
gitudinale de chaque raction a t prleve pour
dterminer l'extension du pathogne dans les tissus,
et l'autre moiti a t congele dans l'azote liquide
pour le dosage des phnols par HPLC et par prcipi-
tation des protines, Paralllement l'analyse des
phnols prsents dans les ractions, des dosages dans
des chantillons de liber non ractionnel ont t
raliss au moment des inoculations comme de la
lecture des ractions.
Rsultats
Un stress hydrique modr ('fi wp > - 1,5 MPa)
a provoqu une augmentation de la longueur des
ractions induites tandis qu'un stress plus important
('fi wp < - 1,5 MPa) a induit une diminution de cette
longueur. Toutes les situations correspondant des
inoculations ralises, soit au tout dbut d'une phase
de desschement, soit juste aprs rarrosage, n'ont
mis en vidence aucune diffrence entre les lon-
gueurs de raction des arbres tmoins et celles des
arbres stresss. En outre, aucune relation n'a t
observe entre le dveloppement du pathogne dans
la raction et l'tat hydrique de l'hte. En premire
analyse, l'effet stress hydrique Il est faible sur les
douze composs phnoliques tudis. Il ressort
nanmoins des rsultats dj traits, qu'une forte
accumulation de catchine et d'autres composs non
identifis (PB) est observe entre le liber sain et le
liber ractionnel, indpendamment des traitements
hydriques. On observe galement que deux stilbnes
(la pinosylvine et son monomthylther) et une flavo-
node (la pinocembrine) apparaissent systmati-
quement dans la raction induite. Enfin, pour un
stress modr, on observe dans la raction, une forte
augmentation des quantits d'un driv de l'acide
hydroxycinnamique (l'ester de l'acide paracouma-
rique) et une augmentation moindre (non significa-
tive) des deux stilbnes. Dans les mmes conditions,
les deux flavonodes analyss - le glucoside de la
taxifoline et la pinocembrine - prsentent, comme
la catchine et le compos PB, une lgre diminution
dans la raction induite des arbres stresss.
Une relation linaire ngative a t obtenue entre les
variations de longueur de raction des arbres stresss
par rapport celle des tmoins et le dficit cumul
d'assimilation de CO
2
calcul pendant le dveloppe-
ment des ractions.
Les rsultats marquants de cette tude montrent l'im-
portance de l'intensit du stress hydrique sur les
modifications de la longueur de la raction induite,
mais galement du moment des agressions par rap-
port la phase du cycle de desschement. Le pin syl-
vestre semble ainsi capable de moduler de manire
trs prcise l'allocation d'nergie vers la raction
induite par le pathogne. En particulier, le retour
des conditions hydriques favorables aprs une
priode dficitaire en eau, intense mais courte,
indique une trs bonne facult de rcupration de ses
mcanismes de dfense. Ces rsultats soulignent l'im-
portance fondamentale de la synchronisation entre
les priodes de dficit hydrique et l'existence des
phases d'attaque des scolytes.
Les relations source-puits de carbone et les modifica-
tions de l'importance relative des diffrents puits en
fonction du statut hydrique de l'hte nous fournissent
une trame utile pour interprter nos rsultats. L'aug-
mentation de la longueur de la raction induite lors
d'une contrainte hydrique modre peut ainsi rsulter
d'un report des assimilats carbons des processus de
croissance vers l'laboration de la raction tant que
la photosynthse reste apprciable. Au contraire, une
contrainte hydrique plus forte induit la fois un arrt
de la croissance et un arrt de la photosynthse, il
n'est donc pas surprenant d'observer une diminution
de la longueur de raction. Ce type d'interprtation
suppose que l'nergie utilise pour l'laboration de la
raction induite provient du flux courant d'assimilats
photosynthtiques et non pas des rserves carbones.
La corrlation ngative obtenue entre le dficit
cumul d'assimilation photosynthtique et la lon-
gueur de la raction renforce effectivement cette
hypothse.
En terme purement statistique, les rsultats sur les
modifications de la composition phnolique dues aux
stress semblent dcevants. Le rle majeur de ces
mtabolites secondaires dans la limitation du dve-
loppement du pathogne suggrait en effet des varia-
tions de concentrations marques dans la raction en
fonction du stress hydrique. Deux remarques peuvent
cependant tre faites: la premire porte sur l'impact
biologique rel des variations observes des concen-
trations en phnols. Une lgre variation mme non
significative au sens statistique peut avoir un effet
inhibiteur important sur le pathogne et par cons-
quent sur les dimensions de la raction induite. Des
tests biologiques en cours permettront d'valuer le
bien fond de cette remarque (cf. communication de
BOIS E.l. La deuxime remarque se rapporte au proto-
cole de prlvement des chantillons de liber. La
moiti de la raction dans le sens longitudinal a t
analyse globalement. Des travaux rcents montrent
cependant l'existence d'un gradient de concentration
en phnols depuis le point d'inoculation jusqu'
l'extrmit de la raction visible. Une analyse globale
peut donc entraner un phnomne de dilution, ou
une perte d'information susceptible de masquer des
diffrences relles dues au stress hydrique mais
rduites par la procdure d'chantillonnage.
Conclusion
Nos travaux permettent de considrer le pin
sylvestre comme beaucoup mieux arm contre le
pathogne tudi pendant un stress hydrique que ne
le laissait supposer la littrature forestire fonde sur
des observations de terrain. Enfin, les relations
source-puits de carbone semblent effectivement tre
trs utiles dans l'analyse de la variabilit de la rsis-
tance du pin sylvestre lors d'une contrainte hydrique.
CALATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit,), 1996.
Actes des Se journes du groupe de Iravail relations insectes-plantes,
Colloques, ClRAQ-CA, Montpellier, France, 96 p.
1nfluence du statut hydrique de jeunes pommiers
en pots sur l'abondance de l'araigne rouge
Panonychus ulm;
M.-H. SAUGE, G. FAUVEL
INRA-ENSAM-ORSTOM, UFR d'cologie animale et de zoologie agricole, section d'acarologie,
2 place Viala, 34060 Montpellier Cedex 1, France.
Objectifs
Mesures sur le vgtal
Les mesures effectues sur pommier sont les suivantes:
- potentiel hydrique foliaire de base, avec chambre
de Scholander, deux fois par semaine;
- la conductance stomatique, avec poromtre diffu-
sion de vapeur, une fois par semaine;
- la teneur en eau, par dessiccation 130 oC la fin
de l'exprimentation;
- la temprature foliaire avec thermocouples
connects un enregistreur automatique. Cette
mesure est effectue toutes les trois minutes sur une
priode de vingt-quatre heures.
pullulations d'acariens phytophages sont
gnralement observes en priode de forte chaleur
et de scheresse. A partir de ce constat, diverses
exprimentations en conditions contrles ont t
ralises pour valuer l'influence du stress hydrique
sur la dynamique des populations d'acariens. Parmi
les nombreux couples tudis, seuls Tetranychus
urticae Koch sur soja et Panonychus ulmi (Koch) sur
pommier rpondent ngativement au stress hydrique.
1 Problmatique
li Les
Il s'agit de confirmer l'effet du statut hydrique de
jeunes pommiers en pot sur l'abondance de l'arai-
gne rouge, avec une attention particulire porte
aux modifications microclimatiques foliaires de la
plante hte.
Matriel et mthodes
Suivi des populations de P. ulm;
Sur chaque arbre exprimental, l'infestation est
contrle par dpt de trois femelles adultes par
feuille, avec trois feuilles par arbre. Chacune de ces
trois feuilles est prleve respectivement 1, 2 et
3 semaines aprs le jour de dpt et le nombre d'aca-
riens (ufs, immatures et adultes) est compt sous
loupe binoculaire.
Dispositif
Les pommiers d'un an sont greffs et plants en pot
de 30 litres sous tunnel plastique; trois traitements
d'irrigation sont appliqus: 33 %, 66 % et 100 % de
la capacit au champ (CC), quantit d'eau ajuste
tous les deux jours par pese; chaque traitement
rpt 26 fois dans un dispositif complet randomis.
La dure de l'exprimentation est de trois semaines.
I .
~ . @ Rsultats
~
ti Les rsultats sont mentionns dans les tableaux 1
et Il et dans la figure 1.
72 1nteractions insectes-pl antes
o-TI---.----r----rl----.----.---------,-----.,
-35 -30 25 -20 -15 -10 -5 0
Leaf water potential (bar)
Figure 1. Relation entre le potentiel hydrique foliaire de
base et le nombre d'acariens par feuille trois semaines
aprs infestation en fonction des traitements hydriques
appliqus.
1Discussion
S Dans la littrature, il existe deux hypothses
pour expliquer l'effet positif du stress hydrique sur les
populations:
- l'accroissement de la vitesse de dveloppement via
celui de la temprature foliaire;
- l'amlioration des qualits nutritionnelles de la
plante via l'augmentation de la quantit de soluts
(osmorgulation).
Dans la situation tudie, on se trouve en prsence
des conditions suivantes:
- un stress hydrique dfavorable;
- une relation non linaire (figure 1) avec un seuil de
potentiel hydrique (-5 bars), en de duquel les
populations sont trs rduites. L'explication possible
est que la plupart des processus physiologiques et
biochimiques chez les plantes stresses sont affects
dans la fourchette 0 et -10 bars (HSIAO, 1973) ;
- dans la couche limite foliaire, la diminution de
l'hygromtrie des arbres stresss apparat plus dter-
minante que l'accroissement de la temprature. Le
comportement de ponte est modifi. La proportion
d'ufs en face infrieure (prsence de stomates) aug-
mente avec le stress hydrique. La troisime semaine,
la conductance stomatique explique 49 % de la
variance du nombre d'acariens (rgression non
linaire) ;
- des difficults pour dissocier les effets des facteurs
abiotiques de ceux des facteurs biochimiques. Dans
la littrature, on trouve peu ou pas de rsultats signifi-
catifs concernant les produits azots et les sucres.
Quel est le rle possible de l'acide abscissique ? La
structure chimique est proche de celle de la }H
(juvenil hormone), elle servirait chez les criquets de
signal pour synchroniser la reproduction de l'insecte
avec l'tat physiologique de la plante hte (VISSCHER-
NEUMANN, 1980).
o
o
o
o
o
o
o 33 %CC
[; 66 % CC
o 100%CC
25-
75 -
50-
100-
Mite number per leaf
150-
125 -
Tableau 1. Moyenne des mesures ralises sur les pommiers en pots selon les diffrents traitements hydriques.
Mesures effectues
33 % CC
Traitement hydrique
66 % CC 100 % CC F
Potentiel hydrique (bar)
Conductance somatique (cm/s)
Teneur relative en eau (% poids frais)
Temprature foliaire diurne (OC)
-27,7 1,7 a
0,014 0,027 a
55,1 2,6 a
30,4 l,la
6,6 2,6 b
0,23 +0,19 b
57,3 2,3 b
28,9 1,2 b
-2,1 0,5 c
1,34 0,62 c
58,1 2,4 b
28,9 0,8 b
1 420,2
92,9
10,2
5,5
CC : capacit au champ.
Les moyennes ( cart-type) suivies d'une mme lettre sur une mme ligne ne sont pas significativement diffrentes
P ~ 0,05, test de Duncan.
Tableau II. Nombre moyen Oog(n+ 1)) d'acariens par feuille, l, 2 et 3 semaines aprs infestation.
Dates de mesure Traitement hydrique
33 % CC 66 % CC 100 % CC F
Semaine 1 0,98 0,41 a
1,1 0,33 ab
1,25 0,27 b 4,1
Semaine 2 0,59 0,35 a 0,92 0,32 b 1,190,36c 19,4
Semaine 3 0,26 0,35 a 0,68 0,43 a 1,49 0,34 b 72,3
Les moyennes ( cart-type) suivies d'une mme lettre sur une mme ligne ne sont pas significativement diffrentes
P ~ 0,05, test de Duncan.
HSIAO T.c., 1973. Plant response to water stress. Ann.
Rev. Plant Physiol. 24 : 519-570.
VISSCHER-NEUMANN 5., 1980. Regulation of gras-
shopper fecondity, longevity and egg viability by
plant growth hormones. Experientia 36 : 130-131.
CALA1AYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit.l. 1996.
Actes des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
Colloques, CtRAD-CA, Montpellier, France, 96 p.
Composition biochimique de la sve phlomienne
de la luzerne et performances du puceron du pois:
effet d'un dficit hydrique
C. GIROUSSE
INRA, laboratoire de zoologie, 86600 Lusignan, France,
1 1ntroduction
~
~ } ~
bli Les modifications de la physiologie des vgtaux
lies des dficits hydriques ont fait l'objet de nom-
breux travaux (BRADFORD et HSIAO, 1982), mais les
tudes sur les consquences de telles modifications
sur les relations entre les plantes htes et les insectes
sont moins nombreuses. En particulier, les rsultats
d'un dficit hydrique subi par les plantes htes sur le
dveloppement des aphides se sont rvls contradic-
toires, entranant parfois une augmentation des popu-
lations de pucerons (ZUNIGA et CORCUERA, 1986) et
d'autres fois une diminution (DE VRIES et MANGlITZ,
1982). Bien qu'une tude comparative de ces diff-
rents travaux soit dlicate en raison de la raret des
prcisions exprimentales portant en particulier sur
l'application des dficits hydriques, il semble ressortir
de ces quelques travaux que les effets d'un dficit
hydrique des plantes htes sur le dveloppement des
aphides dpendent de plusieurs facteurs:
- du systme plante-aphide ;
- de la faon dont se dveloppe le dficit hydrique
(intermittent ou continu) ;
- du temps pass par les pucerons sur les plantes
stresses;
- de l'ge de l'organe vgtal sur lequel les pucerons
sont suivis.
En outre, les tudes tentant d'lucider les mcanismes
qui conduisent des changements de la physiologie
de la plante aux modifications des populations de
pucerons sont encore moins nombreuses. Une des
hypothses est qu'un dficit hydrique subi par la
plante hte altre la composition biochimique de la
sve phlomienne de la plante (rel substrat alimen-
taire des aphides), entranant ainsi une modification
du taux de multiplication des pucerons. Dans ce
cadre, ce travail avait pour objectif d'tudier les
caractristiques biologiques d'Acyrthosiphon pisum
sur des plantes de luzerne dficitaires en eau et de les
relier aux variations concomitantes de la composition
biochimique des plantes stresses hydriquement.
f K ~ Matriels et mthodes
1Les plantes de Medkago safiva ufilises sont des
boutures d'un clone d'un hybride Flamand Douze.
Elles sont entretenues en serre jusqu' leur utilisation
en conditions contrles (20 oc, 16 h de photophase)
o elles sont transfres l'ge de six mois. Elles sont
uti 1ises au stade vgtatif (5-8 entre-nuds). Les
plantes sont rparties en deux lots : les plantes
tmoins sont arroses quotidiennement ad libitum;
les plantes stresses hydriquement sont arroses avec
un volume d'eau diminu de moiti chaque jour jus-
qu'au total arrt de l'arrosage. L'tat hydrique des
plantes est valu par mesure du potentiel hydrique
de base (\Il) de feuilles trifolioles adultes l'aide
d'une chambre pression (SCHOLANDER et al., 1965),
soit juste aprs la collecte de la sve, soit les diff-
rents jours de relevs des performances aphidiennes.
La sve phlomienne est collecte par stylectomie et
les teneurs en saccharose et en acides amins libres
totaux sont mesures (GIROUSSE et al., 1991). Indpen-
damment, le dveloppement des aphides est tudi
par des tests d'antibiose. Les aphides dont on suit les
caractristiques biologiques sont des virginopares
adultes aptres de Acyrthosiphon pisum Harris levs
Actes des 5
e
en conditions contrles. On value sur quatorze
jours (aux jours L J + 7, J + 14) le poids des adultes
installs individuellement sur des tiges appartenant
aux deux lots de plantes. On value ces mmes
dates la fcondit des adultes ainsi que le poids de
leur descendance et les ventuelles mortalits.
1Rsultats
1 Les plantes tmoins prsentent un potentiel
hydrique compris entre -0,3 et -0,5 MPa et les plantes
stresses hydriquement, un potentiel hydrique com-
pris entre -0,55 et -1,9 MPa. Un tel dficit hydriq'.Je
entrane une diminution de la vitesse moyenne
d'longation des tiges de plus de 50 % aprs
quatorze jours d'exprimentation (GiRouSSE, 1992).
Dficit hydrique et performances
aphidiennes
Quelle que soit la semaine d'exprimentation consi-
dre, ni le poids des adultes, ni leur fcondit ne
sont affectes par le dficit hydrique de la plante hte
(tableau 1). Si la biomasse larvaire est identique entre
traitements au jour J + 7 de l'exprience, elle est au
jour) + 14, significativement (P > F = 0,03) plus
faible sur les plantes ayant subi un stress hydrique
que sur les plantes tmoins. De plus, la survie des
aphides installs sur les diffrentes plantes n'est pas
significativement modifie (tableau 1).
Il faut prciser que lors d'une exprience conduite de
manire indpendante, sur treize jours, en conditions
contrles et sur des plantes dont le potentiel
hydrique variait de -0,3 MPa (plantes non dfici-
taires) -1,3 MPa, nous avons trouv des rsultats
similaires alors mme que le dficit hydrique tait
appliqu postrieurement (72 h) l'infestation aphi-
dienne (BAOENHAUSSER et al., 1994). En effet le seul
paramtre aphidien affect de manire significative
aprs treize jours d'exprience est la biomasse totale.
Dficit hydrique et composition
biochimique de la sve phlomienne
En ce qu i concerne le saccharose, plus la plante subit
une contrainte hydrique intense, plus la sve phlo-
mienne s'enrichit en saccharose. De plus, quand le
potentiel hydrique diminue de -0,3 -1,9 MPa, on
note une augmentation significative de la teneur en
acides amins totaux, lie l'augmentation en cer-
tains acides amins (figure 1) : Pro, Val, Ile, Leu, Glu,
Asp, Thr (par ordre dcroissant d'augmentation). La
teneur en asparagine et celles des autres acides
amins restent stables. L'augmentation la plus specta-
culaire est celle de la proline dont la concentration
est multiplie par 60 quand le potentiel hydrique
baisse de -0,9 -1,9 MPa. Sur le plan qualitatif, le
spectre des acides amins reste semblable celui
dcrit en conditions de non contrainte.
I
~ ' Conclusion
..~ ~ .. Ce travail nous permet de constater qu'en condi-
tions de mild stress, les performances biologiques
mesures du puceron du pois sur luzerne ne sont pas
affectes, hormis la biomasse larvaire la fin de la
seconde semaine d'exprimentation (ce dernier l-
ment constituant peut tre le dbut d'une rponse).
Plusieurs hypothses sont avances pour expliquer la
quasi absence de rponse du puceron du pois un
dficit hydrique (If compris entre -0,6 MPa et
- 1,9 MPa) de sa plante hte:
- une relle absence de relation entre teneurs en
sucres et en acides amins et performances des
pucerons. Cette hypothse est taye par une tude
de la rsistance varitale de la luzerne au puceron du
pois qui n'a pas mis en vidence de lien entre la
composition en sucres et en acides amins de la sve
phlomienne de diffrents gnotypes de luzerne et
leur sensibilit au puceron (GiROUSSE et BOURNOVILLE,
1994) ;
Tableau 1. Caractristiques biologiques (exprimes par individu survivant) d'A. p;sum sur des luzernes tmoins
ou dficitaires en eau (moyenne cart-type),
Traitement Poids de l'adulte (mg) Biomasse larvaire (mg) Fcondit ( ~ / ~ )
Date J + 7 J + 14 J + 7 J + 14 J + 7 J + 14 Totale
Tmoins 2,9 a 3,5 a 2,6 a 45,9a 42,7 a 58,6 a 44,0 a 102,6 a
Ecart-type 0,4 0,7 1,4 15,2 17,3 10,2 11 17,3
Dficitaire 3,0 a 3,5 a 2,2 a 49,4 il 32,7 b 55,5 a 43,4 a 98,9 a
Ecart-type 0,5 0,9 0,8 10,6 14,2 9,2 10,2 14,7
Par colonne, les moyennes suivies d'une mme lettre ne diffrent pas significativement au seuil de 5 %.
76
Teneur en acides amins (nmol!fll)
300
'1/ = -0,55 Mpa
'1/=-1,9Mpa
200
100
a
_ __ __ 1: *1
Ala Arg Asn Asp Cys Gaba Gin Glu Gly His Ile leu lys Met Orn Phe Pro Ser Thr Tyr Val
Composition en acides amins
Figure 1. Composition en acides amins de la sve phlomienne de deux tiges de luzerne ayant des dficits hydriques
trs diffrents.
- une insuffisance (en termes qualitatifs et quan-
titatifs) des variations de composition de la sve
phlomienne induites par le dficit;
- une compensation d'une moindre ingestion de sve
(vitesse d'exsudation diminue) par une augmenta-
tion de sa qualit (augmentation des teneurs globales
en sucres et en acides amins).
BADENHAUSSER 1., BOURNOVILLE R., DEVAL R.,
DURAND j.-L., LERIN j., 1994. Pea aphid (Homoptera :
Aphididae) and water deficit interaction on alfalfa
stem growth. j. Econ. Entomol. 87 : 1 689-1 695.
BRADFORD K.j., HSIAO T.c., 1982. Physiological
Responses to moderate water stress. In Encyclopedia
of Plant Physiology, NS Vol. 12B. O.L. LANGE,
NOBEL P.S., OSMOND C.B., ZIEGLER H. (Eds), Springer
Verlag, New York, Etats-Unis, p. 263-324.
GIROUSSE c., 1992. Composition en sucres et en
acides amins de la sve phlomienne de la luzerne
(Medicago sativa L.) : effets de facteurs cophysio-
logiques et consquences sur les relations
luzerne / puceron du pois (A. pisum Harris). Thse de
doctorat, universit de Poitiers, France, 136 p.
GIROUSSE c., BOURNOVILLE R., 1994. Role of phloem
sap quality and exudation characteristics on perfor-
mance of pea aphid grown on lucerne genotypes.
Entomol. Exp. Appl. 70 : 227-235.
GIROUSSE c., BONNEMAIN j.-L., DELROT S., BOURNO-
VILLE R., 1991. Sugar and amino acid composition of
phloem sap of Medicago sativa : a comparative study
of two collecting methods. Plant Physiol. Biochem.
29:41-49.
SCHOLANDER P.F., HAMMEL H.T., BRADSTREET ED., HEM-
MINGSEN E.A., 1965. Sap pressure in vascular plants.
Negative hydrostatic pressure can be measured in
plants. Science 148 : 339-346.
DE VRIES NEL, MANGLITZ G.R., 1982. Spotted alfalfa
aphid (Therioaphis maculata) (Homoptera : Aphi-
didae) : water stress, amino acid content and plant
resistance. j. Kans. Entomol. Soc. 55 : 57-64.
ZUNIGA G.E., CORCUERA L.j., 1987. Glycine-betaine in
wilted barley reduces the effects of gramine on
aphids. Phytochemistry 26 : 3 197-3 200.
Actes des 5
e
CALATAYUO P.-A., VERCAMBRE B. (di1.l, 1996.
InteraClions inseClesplanles.
ACles des Se journes du groupe de travail relations inseCies-planles,
26-27 OClObre 1995, Montpellier, France.
1nfluence de l'tat physiologique du colza
sur le potentiel reproducteur de deux charanons
phytophages
J. LERIN
INRA, centre de Poitou-Charentes, laboratoire de zoologie, 86600 Lusignan, France.
1 1 1 ~ Introduction
Il
m1
Le colza, Brassica napus L., var. oleifera Metzger,
est une crucifre originaire de l'ancien monde asso-
cie un cortge de ravageurs spcialistes nombreux
et bien adapts leur plante hte. Le terme bien
adapt signifie que l'insecte peut exploiter au
maximum la plante sans empcher sa prennit,
c'est--dire sa multiplication. De son ct, la plante
alloue une partie non ngligeable de son potentiel
la tolrance aux insectes. En termes plus agrono-
miques, l'indice de rcolte est faible.
C'est la raison pour laquelle on a souvent constat
que la plupart des insectes adaptent leur ponte la
vigueur de la plante. Le charanon de la tige, Ceuto-
rhynchus napi Gyll., pond plus d'ufs dans les
plantes massives, dont le mtabolisme, mesur par
thermoluminescence, est le plus actif (DMOCH et
LAGOWSKA, 1978). Le mligthe du colza, Meligethes
aeneus F., est plus abondant sur les plantes fort
potentiel que sur les autres (LARSEN et al., 1985). Le
baris du colza, Baris coerulescens Scop., ravageur
des racines, adapte galement sa ponte la vigueur
de la plante, mesure par son diamtre au collet
(KOUBAITI, 1992 ; KOUBAITI et LERIN, 1992) et la rela-
tion est density dependent (LERIN et KOUBAITI, 1995).
Enfin, on constate une corrlation forte (R2 = 0,52)
entre le nombre de siliques et le nombre de larves par
plante chez le charanon des siliques, Ceutorhynchus
assimilis Payk. (LERIN, 1982).
Mais d'autres facteurs que la taille (vigueur) de la
plante - qui agit sur la rpartition des ufs -
peuvent avoir une influence directe sur la fcondit
78
globale des insectes et leur comportement de ponte.
Par exemple, la dure de floraison chez C. assimilis
ou le potentiel hydrique de la plante sur l'ovogense
de B. coerulescens.
, Matriel et mthodes
l
,;
j
", Des expriences en cage ont t menes pour
valuer la fcondit des femelles de C. assimilis en
fonction de la dure de la floraison. Des plantes,
cultives en pot ou en pleine terre, places dans des
cages grillages, ont t infestes artificiellement avec
des insectes prlevs dans la nature au moment du
vol d'infestation. On a not la dure de floraison
moyenne d'une cage et le nombre de trous de sortie
(soit le nombre de larves par cage).
Des expriences en chambre de culture ont t
conduites, 20 oC, avec une photopriode de 16 h,
pour valuer l'influence d'un stress hydrique sur la
ponte et la production ovarienne de B. coerulescens.
Des pivots de plantes arroses ou non arroses pen-
dant quatre ou huit jours ont t prsents des
couples de baris pendant quatre jours. Le pivot a t
renouvel pour une deuxime priode de quatre
jours. Les pivots taient repiqus dans de la vermi-
culite humide, permettant une rhydratation partielle,
ou dans de la vermiculite sche, aggravant le dess-
chement du pivot. Enfin des couples, ayant subi pen-
dant huit jours des plantes stresses pendant huit
jours, ont t remis durant quatre jours sur des pivots
tmoins arross.
Re'sultats

\l,
Le charanon des siliques pond de prfrence
dans les siliques jeunes, juste aprs la chute des
ptales. Les siliques ges, de taille suprieure
5 cm, inhibent la ponte (LERtN, 1991 J. Une floraison
lente, fournissant de jeunes siliques sur une longue
priode pourrait donc tre plus favorable une
fcondit abondante des femelles. Ces conditions
permettront galement une production ovarienne
soutenue, les femelles se nourrissant sur des organes
jeunes lors du forage du trou de ponte. C'est bien ce
que l'on constate: plus la dure de floraison est
longue, plus la fcondit du charanon des siliques
augmente. Il existe une fcondit minimale d'environ
50 ufs, obtenue avec des floraisons de quatre
semaines et une fcondit maximale d'environ
200 ufs pour une dure de floraison de huit
semaines environ (figure 1J. Des infestations diffres
en cours de floraison, la mme anne, induisent ga-
Iement une rduction de la fcondit des insectes:
les triangles sur la figure 1 correspondent trois dates
d'infestation. Les insectes ayant t maintenus basse
temprature, la diminution de la fcondit n'est pas
due au vieillissement des femelles. Ce rsultat
explique pourquoi, dans les zones o du colza de
printemps est cultiv en mme temps que du colza
d'hiver (la floraison des deux types tant dcale), les
problmes lis ce ravageur sont beaucoup plus
importants que dans les zones o seul le colza
d'hiver est cultiv. Cela confirme que la slection du
colza pour la production humaine a rduit la dure
de la floraison par rapport aux crucifres sauvages,
comme les ravenelles (plante hte alternative du cha-
ranon des siliques), dont la floraison commence
avant celle du colza et finit bien aprs, comme on
peut le constater dans les champs o elles sont
prsentes.
Le baris introduit ses ufs un par un dans la plante
au niveau du collet ou dans la partie suprieure de la
racine, sous l'piderme, aprs avoir consomm le
vgtal pour dgager une cavit. La femelle peut
donc, pour chaque uf, estimer la qualit hydrique
de la plante. En conditions sches, l'insecte tend
pondre de plus en plus bas sur la racine, probable-
ment pour retrouver un environnement hydrique qui
lui convienne mieux.
La ponte sur quatre jours du baris diminue en fonc-
tion du stress hydrique des plantes. La rduction de la
ponte est plus marque lors de la deuxime priode
de quatre jours (figure 2), la rduction tant d'autant
plus forte que le stress est important comme on peut
le voir pour les plantes stresses huit jours et repi-
ques dans de la vermiculite sche. Cela s'explique
par le fait que la production ovarienne, aprs huit
jours passs sur les plantes stresses, est stoppe ou
Fcondit
200
+
-------
+
100
150
+
+
+
+
,
,
,
,
,
,
+ "
,
,
,
,
,
,
,
+
+
+
+
50 1*;..............
+
t
+
7,5 7 6,5 6 5,5 5 4,5

4
Dure de floraison en semaines
figure 1. Relation entre la dure de floraison et la fcondit (.. : points supplmentaires de 1978).
Actes des 5
e
Nombre d'ufs pondus pour 4 jours
16
Nombre d'ovocytes par femelle
20 -
Tmoin
15 -
Stress 8 i
sans rhydratation
Cas 1 Cas 2 Cas 1 Cas 1 Cas 1
o
Stress 4 j ,.....
10 -
5 -
Stress 8 j
avec
rhydratation
-0- 4 premiers jours
- Wn- 4 derniers jours
4
2
o-L._-'--_
6
8
14
10
12
tmoin 4 jours 8 jours 8-12 jours
~ - - - - - - - - - - - . . . . . . - '----y---"
Vermiculite humide Vermiculite sche
Cas 1 : 8 Jours de ponte sur des plantes stresses
Cas 2 : 8 jours de ponte sur des plantes stresses
et 4 jours sur des plantes tmoin
Dure du stress hydrique appliqu aux plantes
Figure 2. Ponte de B. coerulescens en fonction du stress
hydrique des plantes (moyenne erreur standard).
Figure 3. Production d'ovocytes en fonction du stress de la
plante hte (moyenne erreur standard).
fortement diminue, le nombre d'ovocytes prsents
dans les voies gnitales des femelles, constat aprs
dissection, est plus faible que dans les tmoins rgu-
lirement arross (figure 3). Ce phnomne est rapi-
dement rversible, en moins de quatre jours, chez les
insectes qui survivent au stress hydrique le plus
drastique (50 % de survie) (figure 3, droite). La
rduction de la ponte dpose dans les plantes en
fonction du dficit hydrique a pu tre galement
constate en conditions naturelles.
superieures 10 oC, la slection a galement per-
turb la stratgie en rdu isant la dure du cycle de la
plante pour obtenir des rcoltes prcoces. La plupart
du temps, seuls les premiers ufs pondus pourront
donner des larves suffisamment ges pour se nym-
phoser avant la rcolte. La rcolte cre, de plus, un
choc thermiqu et provoque le desschement trs
rapide des pivots rests dans le sol entranant la mor-
talit de toutes les jeunes larves issues d'ufs pondus
tardivement.
Cette adaptation de la ponte aux conditions
hydriques permet une meilleure survie des ufs.
Cette hypothse a t confirme par la comparaison
du taux d'closion d'ufs poss sur du papier filtre
humide ou sec en bote de Ptri.
On peut voir sur ces deux exemples d'effet de la
plante hte sur la fcondit que, dans un cas,
l'insecte est en prsence d'un artefact humain, qui
l'empche le plus souvent de raliser sa fcondit
potentielle, alors que, dans l'autre cas, on est en pr-
sence d'une adaptation efficace permettant apparem-
ment la survie du plus grand nombre de descendants.
En fait, dans le cas du baris et parce que le dvelop-
pement larvaire est lent et ncessite des tempratures
OMOCH J., LAGowSKA A., 1978. Investigations on the
cabbage weevil (Ceuthorrhynchus napi Gyll.).
II. Insect-plant relationships and influence on the
yield of winter rape (en polonais). Rocz. Nauk. Roin.,
ser. E8 (2): 137-150.
KOUBAITI K., 1992. Reproduction, dveloppement et
nuisibilit de Baris coerulescens Scop. (Col., Curcu-
lionidae) au contact du colza (Brassica napus varit
oleifera). Thse de doctorat, universit F. RA13ELAI5,
Tours, France, 85 p.
KOUBAITI K., LERIN J., 1992. Fecundity and egg laying
dynamics of 8aris coerulescens on oilseed
rape: effect of cultivar and plant size, in controlled
conditions. J. Appl. EnI. 114 : 289-297.
LARSEN L. M., NIELSEN J.K., PLOCER A., SORENSEN H.,
1985. Responses of some beetles species ta varieties
of oilseed rape and ta pure glucosinolates. In
Advances in the production and utilization of cruci-
ferous crops. SORENSEN (Ed.) Gravenhage, Martinus
NIJHOFf, Dr W. JUNK Publishers, p. 230-244.
LERIN J., 1982. Estimation de l'action du charanon
des siliques (Ceuthorrhynchus assimilis Payk.) sur la
productivit du colza d'hiver. 1. Aspects mthodo-
logiques. Agronomie 2 (10) : 1 005-1 014.
LERIN J., 1991. Influence de la phnologie de la plante
hte sur la reproduction de Ceuthorhynchus assimilis
Payk. J. Appl. EnI. 111 : 303-310.
LERIN J., KOUBAITI K., 1995. Effect of temperature and
plant size on the infestation dynamics of oilseed rape
plants by 8aris coerulescens Scop. (Col., Curculio-
nidae) in fjelds conditions. J. Appl. EnI. 119 :
149-156.
Acles des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995 81
CAlATAYUD P.A., VERCAMBRE B. (di1.l. 1996.
Colloques, (lRADCA, Montpellier, France, 96 p.
la vigueur accrot la sensibilit du pin maritime
la pyrale du tronc, Dioryctria sylvestrella
H. JACTEL, P. MENASSIEU, M. KLEINHERT
INRA, laboratoire d'entomologie forestire, Pierroton, BP 45, 33611 Gazinet Cedex, France.
Figure 1. Type de lande et taux d'infestation des
peuplements par Dioryctria sylvestrella (72 parcelles).
Le taux d'infestation des peuplements augmente
significativement avec leur vigueur, dfinie comme
l'accroissement annuel en surface des cernes
( 1,3 m) des arbres (figure 2).
A l'intrieur d'un mme peuplement, les arbres les
plus vigoureux sont prfrentiellement attaqus
(figure 3).
1 p,valoi, chez les fo'es
tiers pour considrer que toute sylviculture qui tend
accrotre la vigueur des arbres favorise la rsistance
des peuplements aux attaques parasitaires, Cette
conviction est sans doute justifie pour un certain
nombre de xylophages secondaires ou de dfoliateurs
pour lesquels l'ampleur des dgts dpend des
rserves nergtiques mobilisables par l'arbre pour se
dfendre. Mais de nombreux exemples montrent au
contraire une augmentation des attaques sur des
arbres de fort diamtre (scolytes) ou de croissance
rapide (tordeuses, hylobes). La sensibilit accrue de
ces arbres est souvent interprte comme la cons-
quence d'une augmentation de la quantit et de la
qualit des tissus nourriciers qui favoriserait la survie
larvaire. Nous voudrions prsenter un insecte rava-
geur pour lequel la vigueur favoriserait galement
l'attractivit et donc la slection de l'arbre hte.
.:!j 25
:J
cr
r9 20
;;;
15

'1:l
cft 5
O-j---
Lande sche
y = 1,5604 x 7,4507
R
2
= 0,4028
7 9 11 13 15 17 19 21
Accroissement annuel en surface terrire (cm
2
)
Observations
Les peuplements de pin maritime en lande
humide, moins soumis au stress hydrique et manifes-
tant une forte productivit forestire, sont trois fois
plus attaqus que les peuplements en lande sche
(figure 1).
82
.:!j 35
:J
cr 30
'"
25
20
15
"0
10
""
o 5
O+--.....,-----,--r--,--.,----,-----,,-------,
5
figure 2. Vigueur et taux d'infestation des peuplements
par Dioryctria sylvestrella (12 parcelles suivies sur 4 ans).
Classes de circonfrence des arbres
La notation des attaques de pyrale, des mesures
dendromtriques et l'analyse de la composition
terpnique de la rsine ont t ralises sur
200 arbres correspondant la familles de plein-
frres. Pour chacun des 13 mono et sesquiterpnes
identifis, un taux d'mission par arbre a t calcul
comme tant le produit de la proportion relative de
ce terpne par la proportion de surface d'corce
fissure.
Alors qu'il n'existe aucune diffrence significative
entre arbres indemnes et attaqus pour les propor-
tions de terpnes, les taux d'mission du myrcne, du
camphne, du limonne et du terpinolne sont signi-
ficativement suprieurs pour les arbres infests
(figure 5).
En analyse discriminante, l'utilisation simultane des
donnes dendromtriques et des proportions de ter-
pnes permet de prdire si l'arbre sera indemne ou
attaqu avec un risque d'erreur de 22 % seulement.
Le taux d'infestation par famille est significativement
corrl au taux d'mission moyen de terpinolne,
9 10 7 8 6 5 4 3 2
y = 3,2579 x + 0,3467
R
2
=0,7108
o+-----'r------.---.--,------,--,----,.---r-------.-,
o
,:il 50
::J
g- 40
l:
'"
30
..0
20
'D
10
La prsence d'attaques pl us frquentes sur des arbres
vigoureux peut tre due une meilleure russite des
infestations, Les larves doivent en effet pntrer, au
premier stade, travers l'corce, puis se nourrir au
dpend du phlome. Les arbres forte croissance
prsenteraient alors une fissuration du rhytidome et
une paisseur de 1iber suffisante pour permettre une
bonne survie larvaire. La distribution des niveaux
d'attaque dans l'arbre montre d'ailleurs que les entre-
nuds les plus souvent atteints sont ceux gs de
trois cinq ans, pour lesquels le compromis entre
une corce fine et un phlome pais parat le
meilleur.
Figure 3. Taux d'infestation par Dioryctria sylvestrella par
classe de circonfrence, dans un peuplement de 15 ans
en lande humide,
Cependant, la raison pour laquelle un arbre est
infest ne semble pas dpendre uniquement des
chances de survie larvaire. En effet, nous avons
montr que les arbres lagus sont plus attaqus que
les autres - indpendamment de leur diamtre - et
que le risque d'attaque est proportionnel au nombre
de branches vivantes coupes, ce mode d'infestation
tant non contagieux, Il semble donc que la slection
de l'arbre hte corresponde une attraction primaire,
individuelle, l'gard de l'insecte,
100
Capture
75 de D. sy/vestrella
c (
1 \
50 1 \ 50 b
. 1 \
'D Croissance 1 \ 11)
11) \ 'D
u du pin maritime 1 \
25 /" 25 E.
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c '11)
'"
::J 0
0 11)
LI-
..2.
11)
0 Z 0
Vl
Mois
Les composs olfactifs attractifs
Figure 4. Proportions de croissance radiale du pin
maritime (sur 3 ans et 28 placettes) et de capture
de papillons (sur 7 ans) au cours de {'anne.
Figure 5. Moyenne des taux d'mission de terpnes
pour les arbres indemnes et attaqus
(* : diffrence significative, test 1).
L'attraction serait lie la prsence de composs
olfactifs, sans doute de nature terpnique, manant
de la rsine qui s'coule des blessures de l'corce.
Par la suite, la vigueur, traduite par une forte crois-
sance radiale, pourrait aussi, en augmentant la fissu-
ration de l'corce, favoriser l'coulement rsinique,
ce qui augmenterait l'mission du signal attractif.
Un premier argument de type phnologique semble
tayer cette hypothse: la priode d'attaque du rava-
geur suit immdiatement dans le temps la priode de
plus forte croissance radiale de l'arbre hte, pendant
laquelle une importante fissuration du rhytidome est
observe - la composition terpnique de la rsine
restant inchange au cours de l'anne (figure 4).
-0
1
.
6
2.: 1 4
c
Q 1,2
1
0,8
0,6
0,4
0,2

35
Y= 103,4 X+ 2.1347
..
.;;; 30
R
2
= 0,6425
] 25
c
"0
20
x
15

:::J
~
10
5
0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3

Taux d'mission du terpinolne
Figure 6. Relation entre le pourcentage d'arbres attaqus
par famille et le taux d'mission moyen de terpinolne
des arbres de 'a famille.
11 est entirement expliqu (r ::; 0,99) par la combi-
naison linaire des taux d'mission de cinq terpnes
-pinne, myrcne, limonne, terpinolne et
d-3 carne) (figure 6).
> ~ I 1
1
< Conc uSlon
: La slection de l'arbre hte par O. sylvestrella
dpendrait donc de l'interaction de deux facteurs
limitants : la prsence d'un signal attractif, dpendant
des proportions d'un ou de plusieurs terpnes, et
l'mission effective de ce signal dans l'atmosphre,
dpendant de la permabilit de l'corce. La vigueur
qui se traduit par une forte croissance radiale et une
importante fissuration de l'corce contribuerait donc
84
augmenter la sensibi 1it des arbres en favorisant la
survie larvaire mais aussi en augmentant leur attracti-
vit. La sylviculture intensive du pin maritime, dont
toutes les actions visent augmenter la croissance
des arbres (drainage, fertilisation, plantations faible
densit, claircies vigoureuses) pourrait donc avoir
pour consquence un accroissement sensible des
dgts de la pyrale du tronc.
Discussion
Comment les larves peuvent-elles
se dfendre contre la rsine?
Les larves vivent dans cette rsine, se nymphosent
mme l'intrieur de la coule de rsine. Elles mon-
trent une capacit de rsistance remarquable. La
rsine n'a pas d'effet direct sur celles-ci. DUCASSE
(1936) a tudi les raisons pour lesquelles les che-
nilles de la pyrale du pin maritime ne sont pas
englues dans la rsine qui enduit leurs galeries. Elle
voque une couche de substance transparente sur la
cuticule des larves, correspondant une scrtion
cutane de nature cireuse et protectrice, ainsi qu'une
scrtion basique blanchtre, produite par les glandes
mandibulaires et qui protgerait galement la
chenille de l'action des acides rsiniques.
CALATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dit.}, 1996.
Colloques, ClRAD-CA. Montpellier, France, 96 p.
Nouvelle technique de slection des cacaoyers
tolrants aux mirides.
Relation entre les rsultats de microtests
et les donnes d'observations en champ
J. NCUYEN-BAN
ClRAD-CP, unit de recherche dfense des cultures, BP 5035, 34032 Montpellier Cedex 1, France.
I
l\W Introduction
L'tude de la rsistance gntique du cacaoyer
aux attaques du miride, Sahlbergella singularis
(Hagl.), repose jusqu' prsent, sur des observations
au champ du comportement des cultivars face ce
dangereux ennemi de la cacaoculture en Afrique tro-
picale. Intressante dans la mesure o cette approche
a permis de guider les programmes de slection, il
n'en demeure pas moins que les observations sur
plantes prennes sont longues (trois quatre ans en
moyenne) et coteuses en investissements humains.
Ce constat nous a amens normaliser une mthode
de microtests en salle, fonde sur l'tude des prf-
rences alimentaires des mirides (PIART, 1972) pour
quantifier les niveaux d'attractivit des cacaoyers
des conditions contrles et donnant des rsultats
reproductibles.
1
. Deux niveaux d'tude
1
Mill En vue d'tablir une concordance entre les don-
nes de laboratoire et celles collectes au champ,
une approche deux niveaux a t entreprise:
- tri prliminaire des cultivars en salle opr au
moyen de microtests ;
- couplage avec un programme d'observations sur
huit ans dans deux zones cologiques diffrentes de
la Cte d'Ivoire - en bordure lagunaire (Bingerville)
et sous fort claircie de la Basse Cte (Divo).
Dans les blocs exprimentaux, les clones-ttes de
slection, ainsi que les hybrides qui en taient issus,
furent suivis individuellement pendant toute la
priode d'activit des mirides dans les agrosystmes.
Aprs trois squences d'observations successives sur
le terrain, l'analyse comparative des rsultats a rvl
une bonne similitude entre les rponses des cultivars
en microtests et celles obtenues en plein champ.
En Cte d'Ivoire, les rponses des cultivars aux
attaques de mirides rvlent l'existence de deux
groupes comportementaux au sein du matriel
vgtal slectionn, par ordre d'attractivit croissante,
les Forasteros (haut et bas amazoniens) et les Trini-
tarios. Au Cameroun, les microtests ont rvl un
polymorphisme comportemental dans les cultivars
tests. C'est ainsi que les plants de mme origine sont
susceptibles d'avoir des ractions fort diffrentes aux
punaises (exemple les SNK).
Conclusion
Rapide et simple raliser, la technique de
microtests peut tre efficace pour la slection prcoce
d'un matriel vgtal tolrant aux mirides.
Actes des se journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995 8)
CALATAYUD P.-A" VERCAMBRE B. (dil.l, 1996.
Interactions insectesplantes.
ACles des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes,
La rsistance des cafiers la chenille mineuse
des feuilles, Perileucoptera coffeella
Gurin-Mneville. Validation des tests prcoces
B. DECAZY
CIRAD-CP, unit de recherche dfense des cultures, BP 5035, 34032 Montpellier Cedex 1, France.
Cette tude a t conduite par O. GUERREIR-FILH
lors de la prparation de sa thse de doctorat pr-
sente \'ENSA de Montpellier.
1 Introduction
1 1 ] l j ! j ! ~ i
#'i La chenille mineuse des feuilles, Perileucoptera
co((eella Gurin-Mneville, est considre comme
l'un des principaux ravageurs du cafier au Brsil.
Elle peut entraner une chute importante des feuilles
l'origine de fortes diminutions de production. Outre
la lutte chimique fort dveloppe, la vulgarisation de
varits rsistantes semble tre la mthode idale,
puisque le genre Co((ea prsente au champ une
grande diversit gntique pour cette rsistance. Afin
de l'valuer, des tests de laboratoire ont t mis au
point. Encore doit-on s'assurer de la conformit des
rsultats.
Rsultats
la rsistance des cafiers au champ
Les informations sur la sensibilit de C. arabica sont
parfois assez contradictoires. Cependant, la grande
majorit des rsultats montre que toutes les varits
sont sensibles la chenille mineuse. Dans une tude
conduite par MEDINA FILH et al. (1977), lors de fortes
86
infestations naturelles au champ, le pourcentage de
feuilles mines par les insectes fut trs lev: les
cultivars catuai Vermelho, Mundo Novo, Acai,
Bourbon Vermelho et Bourbon Amarelo ont eu plus
de 75 % de leurs feuilles attaques; tandis que chez
d'autres varits comme le Tipica, San Ramon,
Caturra Vermelho, Caturra Amarelo et Maragogipe, le
pourcentage d'infestation se trouve autour de 50 %.
Certaines lignes sub-spontanes d'Ethiopie, centre
d'origine de l'espce, montrent, en conditions de
champ, une bonne tolrance la mineuse.
Le plus haut niveau de rsistance la mineuse des
feuilles est observ chez l'espce C. stenophylla.
Dans les feuilles de cette espce, les larves, aprs
closion des ufs, meurent rapidement sans faire de
galerie, cette rsistance semble due la composition
biochimique des tissus foliaires.
Au champ, certains cultivars de l'espce
C. canephora, les espces C. liberica, C. dewevrei,
C. eugenioides, C. kapakata, C. salvatrix montrent
une certaine rsistance. Cette rsistance se traduit par
une baisse du pourcentage d'infestation (les galeries
formes sont gnralement plus petites), mais surtout
par une baisse marque du taux de reproduction de
l'insecte, ce qui diminuerait le potentiel d'inoculation
pour le prochain cycle d'infestation.
C. racemosa allie une bonne rsistance la mineuse
des caractres agronomiques intressants pour la
culture du caf: floraison abondante, croisement
facile avec l'arabica. Aussi cette espce a-t-elle t
utilise dans des programmes de cafiers arabica
rsistants la mineuse.
la rsistance des cafiers en laboratoire
Le matriel vgtal utilis est constitu par des
semenceaux de cafiers levs en ppinire et gs
de quelques mois. Aprs une tude prliminaire de
conformit pour les paramtres biotiques de la che-
nille mineuse entre un levage sur feuille et un le-
vage sur disque de feuille, il a t retenu, pour plus
de commodit, de travailler avec des disques de
feuilles.
Pour chaque espce ou pour chaque cultivar de
cafier, les paramtres mesurs sont les potentialits
biotiques de l'insecte (dure du cycle de dveloppe-
ment, viabilit des diverses stades, etc.), ainsi que la
forme et la taille des galeries (NPA, chelle de 0 4)
et la surface foliaire dtruite (5FD, en mm). A titre
d'exemple, le tableau 1 montre le comportement de
divers cafiers.
Ce tableau montre que le cultivar Catua de
C. arabica est trs sensible: les lsions sont grandes
et peu prs circulaires. Les autres espces
de cafiers sont moins sensibles. Les espces
C. stenophylla et C. kapakata sont trs rsistantes,
Tableau 1. Rsultats des mesures effectues sur diffrentes
varits de cafiers: forme et taille des galeries
(NPA, chelle de 0 4) ; surface foliaire dtruite (SFD,
mm).
Espce de cafier NPA Surface foliaire dtruite
C. arabica 3,97 a 2,13 a
C. canephora 3,39 ab 1,76 abc
C. congensis 3,14 ab 1,55 bc
C. liberica 1,60 cd 0,83 de
C. dewevrei 1,18 0,57
C. slenophylla 0,06 e 0,03 f
C. racemosa 0,49 0,28
aucune galerie ne parvient se former. L'espce
C. racemosa est intermdiaire, elle prsente tout de
mme une bonne rsistance, les lsions sont de type
filiforme et trs petites.
1
Discussion et conclusion
, Les ,sultats des tests p,coces en labmato;,e
confirment totalement les observations faites au
champ dans le pass. On peut donc utiliser ces tech-
niques de laboratoire pour les actions suivantes:
- valuer un matriel vgtal nouvellement cr;
- cribler le matriel vgtal existant lorsque ce mat-
riel, slectionn pour certains critres agronomiques
intressants, doit tre mis en place dans des zones
d'endmie de la chenille mineuse.
Dans le cadre du programme de transformation
gntique du cafier, des techniques de tests plus
prcoces sur des cafiers in vitro sont en cours
de mise au point pour le rendre rsistant
Perileucoptera coffeella, grce l'introgression de
gnes de Bacillus thuringiensis.
GUERREIRO FILHO o., 1994. Identification de gnes de
rsistance Perileucoptera coffeella en vue de l'am-
1ioration de Coffea arabica : Potentiel d'espces
diplodes du genre Coffea ; gnes de Bacillus thurin-
giensis. Thse de doctorat, EN5A, Montpell ier,
France, 173 p.
MEDINA FILHO H.P., CARVALHO A., MEDINA D.M., 1977.
Melhoramento do cafeeiro. Observaaoes sobre a
resistencia do cafeeiroao bicho mineiro. Bragancia,
Campinas, Brsil 37 (36) : 131-137.
CALATAYUD P.-A., VERCAMBRE B. ldil.l, 1996.
Actes des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes.
26-27 oCiobre 1995, Montpellier, France.
Etude du comportement du riz
vis--vis de Chilo suppressalis
B, VERCAMBRE, M. BETBDER-MATIBETt, M. RENAND
ClRAD-CA, unit de recherche entomologie applique, BP 5035,34032 Montpellier Cedex 1, France.
Introduction, objet
Mettre au point un test rapide de sensibilit du riz
la chenille Chilo suppressalis (Lep., Pyralidae) en vue
d'orienter le slectionneur pour la mise au point de
varits rsistantes et tolrantes afin d'envisager la
limitation, voire la suppression des traitements insec-
ticides sur la deuxime gnration du foreur en
Camargue.
Matriel et mthode
Ils sont dcrits dans le tableau 1.
Tableau 1. Prsentation des essais au laboratoire
et au champ, mesures des dgts de pyrale.
Rsultats
Les rsultats sont prsents dans la figure 1.
Conclusion
Globalement, on remarque le mme classement des
varits.
Dans le dtail, des diffrences apparaissent (choix,
non choix, croissance vgtative trs diffrente, stade
phnologique diffrent).
Les rsultats demandent une confirmation sur un plus
grand choix de varits.
laboratoire
Anne 1992
Lieu Insectarium
ClRAD-CA,
Montpell ier
Dispositif Terrines
comportant
16 pots de 5 tiges
1nfestation art ificielle
(100 ufs/16 pots)
non choix
Jour
d'infestation Semis + 34 j
Observations % tiges attaques
(mortes) 3 dates
(4, 10, 18 jours
aprs infestation)
88
Plein champ
1992
Station du Mas-Adrien
CFR-Arles
Collection de rfrence
chaque varit
tant reprsente
par 3 lignes de 2,5 m
naturelle, choix
possible, attaque tout
au long du cycle
vgtatif du riz
Date de semis du riz:
dbut mai
% tiges attaques
aprs dissection
3 dates (dbut,
mi-septembre,
et la rcolte
mi-octobre)
Discussion
Quelle est la liaison entre les composs
anthocyans et le comportement de la chenille?
On ne connat pas trs bien cette liaison. L'antho-
cyane est un compos phnolique. Ces composs
sont importants dans le comportement des insectes.
Dans le cas du riz, les anthocyanes sont particulire-
ment dvelopps, ce qui se traduit par des
symptmes importants lors de stress hydrique, lors
d'attaques d'insectes... Les composs anthocyans
sont localiss dans les tissus l'tat juvnile, dans les
zones de croissance intense, dans les entre-nuds. Il
n'y a pas ncessairement un lien entre la prsence de
composs anthocyans et une rsistance ou une
sensibilit au stress. Dans le cas des cacaoyers, la
pigmentation rouge attire plus les mirides. Cela est
contradictoire avec le fait que l'on sait que les
insectes voient}) trs mal le rouge.
1nteractions insectes-plante5
- - - - . - - - - ~
Thabonnet
Varits
Observations 3 dates
o
20
40
80
60
Infestation naturelle (collection au champ)
% tiges attaques
100
Observations 3 dates
Infestation artificielle laboratoire {jour il
20
80
40
60
% tiges mortes
100
.)+4 flj)+10 11I)+18 1er septembre M 17 septembre Il 12 octobre (rcolte)
Figure 1. Observation des dgts de Chilo suppressalis sur 4 varits de riz {Ballila 28, Arite, Calendal, Thabonnet},
trois dates, aprs infestation artificielle au laboratoire, en infestation naturelle au champ.
CALATAYUD P.-A.. VERCAMBRE B. (dil.l. 1996.
Actes des 5" journes du groupe de travail relations insectes-plantes.
26-27 octobre t99S. Montpellier. France.
Colloques, CIRAD-CA, Montpellier. France. 96 p.
Rsistance de Cucumis melo L. Liriomyza trifolii
(Burgess), Diptera : Agromyzidae
D. BORDAT(1), M. PITRAT(2), C. DOGIMONT(2), C. PAGS(1)
(1) CIRAD-FHLOR, laboratoire d'entomologie, BP 5045, 34032 Montpellier Cedex 1, France.
(2) INRA, station d'amlioration des plantes marachres, BP 94, 84143 Montfavet Cedex, France.
Introduction
Liriamyza. trirali; est un diptre, dont les adultes
piquent le vgtal pour se nourrir et pondre. Les
larves minent le parenchyme des feuilles, diminuant
ainsi l'efficience de la photosynthse d'un grand
nombre de plantes cultives. L. trirali; est devenue
rsistante de nombreux insecticides, l'tude de la
rsistance est devenu un secteur cl de son contrle.
1Rsultats et discussion
Le nombre moyen de mines obtenues par plante
fut similaire dans les deux exprimentations: labo-
ratoire 16,3 ; serre 15,2 avec un nombre moyen de
femelles infestantes par plante de 2,5 et 29 respecti-
vement. Mais le nombre de mines obtenues fut signi-
ficativement diffrent entre les trois gnotypes
(tableaux 1 et Il, figure 1). Le gnotype Nantais a un
..... Vdrandais (total)
'-0- Vdrandais (alive
___ B 66.5 (total)
-0- B 66.5 (alive)
--r- Nantais (total)
-/'>- Nantais (alive)
LS L6 L7 L8 L9 LlO L11 L12 L13
a a ab b c d d
Etage foliaire
3
4

L3 L4
b b
Nombre de larves par feuille
5
Figure 1. Nombre de larves de L. trifolii observes sur les
feuil/es de trois varits de melons. Les tages foliaires
ayant des lettres diffrentes sont significativement diffrents
au seuil de 5 % d'aprs le test de Newman-Keuls.
Deux essais comparatifs ont t mens en labo-
ratoire et en serre sous infestations contrles pour
tudier la rsistance de trois gnotypes de melon:
Vdrantais, Nantais Oblong et B 66-5 la mineuse
L. triralii.
Matriel et mthodes
En laboratoire, il a t ralis des infestations de
10 plants de melon au stade de deux feuilles bien
dveloppes. De plus, l'essai tait ralis sous cage:
25 oC, 75 % d'humidit, photopriode 12h/12h.
Sous serre, il a t dispos 5 blocs de 3 parcelles de
6 plants par gnotype, rpartis au hasard. L'infestation
a eu lieu sur des plants palisss de 13 18 feuilles,
en disposant 400 pupes de L. trdalii au centre de
chaque parcelle. La temprature moyenne tait de
18-20 oC, sous photopriode annuelle.
Dans les deux cas, on note le nombre de mines par
feuilles, avec larves vivantes ou mortes, six et treize
jours respectivement.
nombre significativement plus faible de mines que
B 66-5, la diffrence tant plus leve pour les
plantes en serre que les plants en laboratoire, le
rapport est de 0,17 et 0,59 respectivement. Le pour-
centage de mortalit larvaire fut total chez Nantais
dans les deux tests, les mines ne dpassant pas 1
2 mm (L1). On en conclut que ce gnotype prsente
une rsistance par antibiose, dont il reste dcouvrir
la nature. Ce gnotype ayant des qualits agrono-
miques intressantes pourra tre utilis comme
source de rsistance. La stabilit de cette rsistance
doit tre vrifie l'gard d'autres populations de
L. trifolii.
Tableau 1. Nombre moyen de mines de L. trifolii observes sur les plantes au stade 2
e
feuille pour trois varits de melon
(10 plantes par essai).
N du test B 66.5 Vdrantais Nantais
m ext. d.s. m. ext. d.s. m. ext. d.s.
42-1 22,8 5-59 14,9 16,8 3-30 9,6 24,1 6-47 11 ,6
42-2 21,3 6-48 15,3 21,4 13-30 4,8 28,7 3-61 18,9
43-1 21,2 8-39 10,3 15,3 11-21 3,1 6,3 1-14 4,6
43-2 17,0 6-25 5,7 15,2 11-28 4,9 7,4 5-15 3,4
44-1 20,9 12-46 11,5 11,8 8-17 3,0 5,2 1-18 5,2
44-2 16,0 7-30 6,4 11,8 3-20 4,9 8,6 1-24 6,1
45-1 13,2 4-32 10 15 11-23 3,8 6,9 3-12 3,5
45-2 16,3 3-45 13,3 17 11-24 4,3 4,3 1-11 3,7
46-1 20,6 9-34 7,4 12,2 8-17 3,3 14,3 6-31 10
46-2 14,8 4-29 7,1 12,8 8-29 7,4 12,1 4-23 7,6
47-1 34,9 18-52 11,7 18,2 3-38 9,8 11 ,9 6-23 5,4
47-2 33,5 17-53 11 ,7 17,8 9-27 5,9 18,2 9-37 9,3
Moyenne 21,0 a 15,3 b 12,3 c
O.s. 12,8 6,25 11,09
Les nombres suivis de lettres diffrentes sont diffrents au seuil de 5 % d'aprs le test de Newman-Keuls,
m, moyenne; ex!. valeurs extrmes; d.s. dviation standard.
Tableau Il. Nombre de mines par plantes et pourcentage de mortalit larvaire de L. trifolii aprs infestation de plants
de melons au stade rcolte dans les serres (13
e
-18
e
stade foliaire).
Essais B 66.5
Nombre de mines % mortalit
Vdrantais
Nantais
1 33,0 2,9 16,2 6,2 3,5 100
2 21,3 2,6 17,8 14,2 5,8 100
3 27,3 5,7 14,0 9,5 3,0 70,3
4 24,0 15,5 16,5 13,3 6,8 100
5 24,2 15,9 12,3 22,7 2,7 100
Nombre moyen
de mines 26,0 a (8,3) 15,4 b (6,51 4,4 c (3,2)
% mortalit 8,5 f (7,4) 14,5 e (10,0) 94,0 d (17,2)
Les nombres suivis de lettres diffrentes sont diffrents au seuil de 5 % d'aprs le test de Newman-Keuls.
Actes des 5
e
CAlA1AYUD P.-A., VERCAMBRE B. (dil.), 1996.
Colloques, ClRADCA, Montpellier, France, 96 p.
Effets sur le manioc de la dfoliation artificielle
et naturelle par le criquet puant
(Zonocerus variegatus L.)
P. LE GALL(1), Y.-R. SOUZA(2)
(1) ORSTOM cio liTA, BP 08-0932, Cotonou, Bnin.
(2) ORSTOM, BP 181, Brazzaville, Rpublique du Congo.
1Introduction
f)."@ Il est difficile d'estimer les pertes induites par les
acridiens (WEWETZER et al., 1993). L'analyse au champ
par des questionnaires est complique par la labilit
de la prsence acridienne dans les cultures. Le labo-
ratoire offre deux techniques pour dterminer l'effet
de la perte de feuillage: la simulation par prlve-
ment de feuilles l'aide de ciseaux et l'infestation
artificielle par des insectes. Nous avons compar ces
deux techniques dans le mme protocole expri-
mentai, car les discussions autour des potentialits de
rcupration des plantes aprs dfoliations restent
d'actualit (BELSKI et al., 1993 ; TRUMBLE et al., 1993).
Il Matriel et mthodes
1
En phase 1, les boutures (tiges de treize mois,
varit MM 79) sont places dans des sacs plastiques
remplis de terre strilise 200 oC et laisses en
vgtation jusqu'aux stades 5 6 feuilles (trois
semaines) et 9 10 feuilles (cinq semaines), en
conditions de laboratoire de temprature moyenne de
25 oC et d'humidit relative moyenne de 80 %.
Aucun traitement n'est apport aux pots sauf un arro-
sage bi-hebdomadaire de 400 ml d'eau par pot.
En phase 2, les plants de mme ge (trois et cinq
semaines) sont soumis 1, 3 ou 5 criquets mles
adultes. Des plants identiques ont leurs feuilles cou-
pes moiti aux ciseaux.
92
En phase 3, les plants sont retirs des cages 48 h
aprs infestation afin d'tre suivis. Ceci correspond
au temps t
o
des mesures sur le dveloppement arien
du manioc.
Le dispositif statistique exprimental utilis est le dis-
positif compltement alatoire ou dispositif en rando-
misation. Chaque traitement est rpt dix fois. Les
tmoins sont reprsents par 9 lots de 10 plantes.
Rsultats
Le criquet consomme principalement les feuilles,
et suivant le nombre d'individus, la dfoliation varie
de 20 60 % du feuillage (tableau 1). La linarit de
la croissance du manioc lors des sept premires
semaines est vrifie par l'analyse des lots tmoins.
La vitesse de croissance de la plante est modifie par
les traitements (figures 1 et 2). Elle subit une baisse,
suivie d'une rcupration plus ou moins importante.
La vitesse de croissance de l'entre-nud de base est
modifie chez les plants gs de trois semaines
(figure 3) : stable chez les tmoins, elle apparat en
dents de scie chez les plants traits. A cinq semaines,
elle est nulle que ce soit chez les tmoins ou chez les
plants traits. L'apparition des entre-nuds n'est
gnralement pas modifie et se maintient un entre-
nud pour trois jours.
Tableau 1. Nature des organes de manioc attaqus par Zonocerus variegatus et apprciation des dgts.
Age manioc
3 semaines
5 semaines
Densit criquet Apex Tige Feuilles
1 nulle nulle moyenne (20 %)
3 faible nulle forte (50 %)
5 faible nulle svre (60 %)
1 nulle nulle moyenne (22 %)
3 nulle faible assez forte (33 %)
5 nulle nulle forte (50 %)
Vitesse de croissance
msO
msO'
msl
ms3
msS
,
" 1
, J
" J
msO
msO'
msl
ms3
msS
3
2
4
5
7
6
1
1
)
1
1
1
1
1
1
1
,./"./' '"""'""",, ,,', .'.
//J/:.:.,

" J' \
' J
2
4
7
3
5
6
0-+---,---------,------,----,-------,---- O-+----,----,------,.-------,-----r--
11 12 13 14 15
11 12 13 14 15
Figure 1. Vitesse de croissance de plants de manioc
de trois semaines soumis l'action mcanique (msO')
ou ] (ms]), ] (ms]) ou S (msS) criquets.
msO : tmoins.
Figure 2. Vitesse de croissance de l'entre-nud
de base de plants de manioc soumis l'action mcanique
(msO') ou ] (ms]), ] (ms]) ou S (msS) criquets,
msO : tmoins.
1 Discussion
1
La phytophagie influence largement la chimie et
la physiologie de la plante (KARBAN et MYERS, 1989).
La rponse du manioc au comportement alimentaire
peut tre induite par une telle relation. La forte varia-
bilit et la rusticit du manioc compliquent toute ten-
tative de gnralisation des rsultats. Nous avons
opt pour un chantillon tmoin trs important
constitu de 9 lots de 10 plantes suivies sur sept
semaines. La variabilit observe alors est assez faible
et les variations exprimentales mieux estimes.
Notre exprience se place dans une priode de la vie
de la plante o elle est encore sensible aux attaques.
Les taux de dfoliation artificielle choisis sont compa-
tibles avec les taux de consommation des feuilles par
les criquets. Les paramtres de la croissance du
manioc sont affects de faon diffrente, lorsque
la plante est consomme par des criquets
ou lorsqu'on simule la dfoliation par une action
mcanique. La vitesse de croissance de la plante est
15 14
, .
, .
, .
, .
.
msO
msO'
msl
ms3
msS
13
1
J
1
1
1
J
12
..
, .
, .
, .
: .
, .
, .
" '. , "
tl
0,3
0,2
0,1
0,4
.
"",."'F""'."", .."", ...""' ....""' ...,... --
Figure 3. Vitesse de croissance de plants de manioc
de cinq semaines soumis l'action mcanique (msO')
ou ] (ms 1), ] (ms]) ou S (msS) criquets, msO : tmoins.
affecte aussi bien chez les plants traits trois
semaines qu' cinq semaines. En revanche, la vitesse
de croissance de l'entre-nud de base n'est suscep-
tible d'tre modifie qu' l'ge de trois semaines.
L'apparition de nouveaux entre-nuds n'est pas per-
turbe par les traitements. L'action sur les jeunes
plants est dtermine par le traitement subi. L'impor-
tance et la nature de l'attaque induisent des ractions
plus ou moins fortes.
BELSKY A.j., CARSON, W.P., JENSEN CL., Fox G.A.,
1993. Overcompensation by plants. Herbivore
optimization or Rd Herring. Evol. Ecol. 7 (1).
KARBAN R., MYERS j., 1989. Induced plant responses to
herbivory. Ann. rev. Eco!. Syst. 20 : 331-348.
TRUMBLE ).T., KOLOONy-HIRSCH D.M., TING 1. P., 1993.
Plant compensation for Arthropod herbivory. Ann.
Rev. Entomol. 38 : 93-119.
WEWETZER KRALL S., SCHULZ F.A., 1993. Methods for the
assesment of crop losses due to grasshoppers and
locusts. GTZ, Rossdorf, Allemagne, 54 p.
Discussion
Comment dcoupez-vous les feuilles pour
simuler la dfoliation par le criquet?
On coupe la moiti distale de la feuille l'aide de
ciseaux.
Cela reprsente-t-il correctement les dgts
occasionns par l'insecte?
Afin de simuler au mieux les dgts, il faudrait che-
lonner les attaques tout au long de la priode de
culture, soit deux ans. On tiendrait ainsi compte de la
94
progression et du cumul des attaques. La rponse de
la plante diffre certainement suivant son volution
physiologique.
Comment dcouper une feuille de manioc
50 % ?
On coupe la moiti de chaque lobe. Mais cela ne
simule pas vritablement l'attaque du criquet qui est
plus progressive. Le criquet fait souvent deux ou trois
repas par jour. Il mange, s'arrte, se dplace et
recommence aprs quelques minutes ou quelques
heures. Les dgts sont dissmins sur l'ensemble de
la plante, mais moins importants l'apex, sur les trs
jeunes feuilles.
Avez-vous une ide de l'impact
sur la production en tubercule?
Pour l'instant, on n'a pas de rsultats cohrents sur la
production en tubercule. Ces rsultats restent trs
variables dans nos tudes prliminaires. En fait, nous
avons concentr nos efforts sur l'analyse des effets de
l'insecte sur la croissance de la plante.
Qu'en est-il de la variabilit du manioc,
comment l'avez-vous apprhende?
Les tmoins sont constitus d'un nombre trs impor-
tant de rpliques puisque l'on a 9 lots de 10 chan-
tillons, soit 90 tmoins. La grande homognit des
paramtres mesurs sur ces tmoins consolide la vali-
dit des diffrences observes sur les plants traits.
Le criquet prfre-t-il les jeunes feuilles
ou d'autres organes?
Non, au contraire, il s'attaque prfrentiellement aux
feuilles ges. On observe peu de dgts sur les tiges.
Lorsque le criquet arrive sur un plant de manioc de
cinq ou six feuilles, il se dirige vers l'extrmit des
feuilles bien dveloppes. Il ne se nourrit ni sur les
tiges, ni sur les bourgeons.
Liste des participants
BEAUDOIN LAURENCE
CI RAD-CP,
Unit de recherche dfense des cultures,
Avenue du Val de Montferrand,
BP 5035,
34032 Montpellier Cedex 1
France
BELIN-DEPOUX MONIQUE
Universit Paris VI,
Laboratoire de biologie vgtale
tropicale,
12 rue Cuvier,
75005 Paris
France
BaHER BERNARD
OR5TOM,
Laboratoire de phytopathologie
tropicale,
911 avenue Agropolis,
BP 5045,
France
BOIs EVELYNE
INRA,
Station de zoologie forestire,
Ardon,
45160 Olivet
France
BOIS JEAN-FRANOIS
ORSTOM,
ClRAD-CA,
Laboratoire d'cophysiologie
BP 5035,
France
BOISSOT NATHALIE
INRA,
Station d'amlioration
des plantes marachres,
BP 94,
84143 Montfavet Cedex
France
BORDAT DOMINIQUE
ClRAD-FLHOR,
avenue du Val de Montferrand,
BP 5035,
France
BORSA PHILIPPE
ORSTOM,
Laboratoire d'entomologie,
BP 5045,
France
CALATAYUD
ORSTOM,
parc scientifique Agropolis Il,
Bt B5-B6,
France
Luc
INRA,
Laboratoire de zoologie forestire,
Ardon, 45160 Olivet
France
DECAZY BERNARD
ClRAD-CP,
BP 5035,
France
FABRES
ORSTOM,
Milieu et activits agricoles,
Unit de recherche dynamique
des systmes de production Dc),
BP 5045,
34032 Montpellier Cedex 1, France
FAUVEL GUY
INRA-ENSA,
Laboratoire de zoologie,
section acarologie,
2 place Viala,
France
FEBVAY
INRA-INSA,
Laboratoire de biologie applique,
406-20 avenue A. Einstein,
69621 Villeurbanne Cedex
France
FERRON FRANOISE
INRAENSAM,
Laboratoire d'cophysiologie des plantes
sous stress environnementaux,
2 place Viala,
France
FORNASARI LUCA
USDA-EBCL,
Entomologie mauvaises herbes,
Agropolis,
BP 4168,
34092 Montpellier
France
GAGNEPAIN CLAUDE
Universit Paris Sud (Paris XI),
Laboratoire de biologie volution
dynamique de populations,
Bt 446,
91405 Orsay Cedex
France
GEIGER JEAN-PAUL
ORSTOM,
tropicale,
BP 5045,
France
GIROUSSE CHRISTINE
INRA,
centre de Poitou-Charentes,
86600 Lusignan
France
JACTEl
INRA,
Station de recherches forestires,
33611 Gazinet
France
LE GALL PHILIPPE
ORSTOM,
liTA (International Institute of Tropical
Agriculture),
BP 08-0932,
Cotonou,
Bnin
LERIN JACQUES
INRA,
centre de Poitou-Charentes,
86600 Lusignan
France
LIEUTIER FRANCOIS
INRA,
Station de zoologie forestire,
Ardon,
45160 Olivet
France
LOUVEAUX ALAIN
Universit Paris-Sud (Paris XI),
Laboratoire de biologie,
volution dynamique de populations,
Bt 446,
91405 Orsay
France
MAINGUET ANNE-MARIE
Universit Paris-Sud (Paris XI),
Laboratoire de biologie volution
dynamique de populations,
Bt 446,
91405 Orsay Cedex
France.
MARTIN THIBAUD
ClRAD-CA,
Unit de recherche entomologie
applique,
BP 5035,
France
MATHIEU FRDRIC
INRA,
Laboratoire des mdiateurs chimiques,
route de Saint-Cyr,
78026 Versailles
France
N'GUYEN BAN JEAN
CIRAD-CP,
BP 5035
France.
NICOLE MICHEl
ORSTOM,
tropicale,
BP 5045,
France
PAGS CHRISTINE
CIRAD-FLHOR,
BP 5035,
France
RAFAILLAC JEAN-PIERRE
ORSTOM,
Laboratoire d'cophysiologie
ClRAD-CA,
BP 5035,
France
RAT-MORRIS ELIZABETH
ENSH-ENITHP,
2 rue Le-Ntre,
49045 Angers Cedex
France
RENARD SOPHIE
Facult des sciences agronomiques,
unit de recherche de zoologie
gnrale et applique,
2 passage des dports,
5030 Gembloux
Belgique
96
ROBERT PHILIPPE
INRA-ENSH,
Station de phytopharmacie,
route de St-Cyr,
78026 Versailles Cedex
France
SAUGE MARIE-HLNE
INRA, Station de zoologie,
Domaine Saint-Paul, site Agroparc,
84914 Avignon Cedex 9
France
SAUVION NICOLAS
INRA-INSA,
Laboratoire de biologie applique,
406-20 avenue A. Einstein,
69621 Villeurbanne Cedex
France
SOLANO P.
Universit Paris VI,
Laboratoire de biologie vgtale
tropicale,
12 rue Cuvier,
75005 Paris
France
SOUISSI RACHID
Universit de Rennes l,
Laboratoire d'cobiologie des insectes
parasitodes,
Campus de Beaulieu,
35042 Rennes Cedex
France
THIERY DENIS
INRA-CNRS,
Laboratoire de neurobiologie
compare des invertbrs,
BP 123,
91440 Bures-sur-Yvene
France
VAISSAYRE MAURICE
ClRAD-CA,
applique,
avenue du Val de Montferrand.
BP 5035,
France
VERCAMBRE BERNARD
ClRAD-CA,
applique,
BP 5035,
France
VIGOUROUX ANDR
INRA-ENSAM.
Laboratoire de pathologie vgtale.
2 place Viala,
France
WELCKER CLAUDE
INRA,
Laboratoire de recherches
en productions vgtales,
BP 515,
97185 Pointe--Pitre
France
Wu BEN-Rui
INRA.
Laboratoire des mdiateurs chimiques,
Station de phytopharmacie,
route de St-Cyr,
78026 Versailles
France
Interactions
La collection Colloques
La collection Colloques publie les actes de sminaires organiss
ou coorganiss par le CIRAD
Dj parus
Analyse de la diversit des situations agricoles
Consquences sur la programmation de la recherche
22-28 octobre 1993, Garoua, Cameroun
Coco'nut Phytophthora
26-30 October 1992, Manado, Indonesia
La recherche europenne au service du cocotier/
European Research Working for Coconut
8-10 septembre 1993/September 8-70, 7993, Montpellier, France
Traitements statistiques des essais de slection,
Stratgies d'amlioration des plantes prennes
12-14 septembre 1994, Montpellier, France
Production et valorisation du mas
l'chelon villageois en Afrique de l'Ouest
25-28 janvier 1994, Cotonou, Bnin
Sustainable Land Management
in African Semi-Arid and Subhumid Regions
November 15-19, 1993, Dakar, Senegal
Rencontres cacao: les diffrents aspects de la qualit/
Cocoa meetings: the various aspects of qualit y
30 juin 1995, Montpellier, France
Fertilit du milieu et stratgies paysannes
sous les tropiques humides,
13-17 novembre 1995, Montpellier, France
A paratre
Chameaux et dromadaires, animaux laitiers
24-26 octobre 1994, Nouakchott, Mauritanie
Couplage de modles en agriculture
14-15 juin 1995, Montpellier, France
Al'poque de l'expansion des produits chimiques, l'tude de la relation
insecte-pesticide a t largement favorise. Depuis l'essoufflement de cette mthode
de contrle, la communaut scientifique porte une attention renouvele la relation
fondamentale insectes-plantes . On passe ainsi d'une pratique empirique
ancienne une analyse rationnelle des mcanismes physiologiques concernant
les perceptions des plantes htes par les insectes ou de la rponse de celles-ci
leurs agresseurs. Afin de favoriser les changes entre chercheurs nationaux,
le groupe de travail Relation insectes-plantes s'est runi pour la cinquime fois,
' Montpellier. Cette anne, le thme choisi a port sur l'influence des modifications
physiologiques de la plante en relation avec les facteurs environnementaux
dans les relations plantes-insectes. Mme si ce thme n'est pas nouveau, il reste
toujours d'actualit. Ce document n'a pas la prtention de rpondre aux questions
que nous nous posons sur ce sujet, mais d'y apporter quelques rflexions. Il se trouve,
d'une part que les ractions des plantes aux ravageurs relvent de processus
complexes et souvent communs de nombreuses espces vgtales, et d'autre part,
que ces ractions sont influenables par divers facteurs de l'environnement.
Non seulement ces connaissances apporteront des alternatives en matire de lutte
ou de production intgre (nouvelle rvolution verte rizicole en Asie), mais elles
nous aideront mieux prparer les quilibres biologiques du sicle prochain.
Insect-Plant Interactions
Proceedings of the 5
th
Seminar of the Insect-Plant Workshop
At the time when chemical use was increasing, the study of insect-pesticide
relations was widely favoured. As this control method tails off, the scientific
community is paying renewed attention to the fundamental relation "insect-plant".
We pass thus from an ancient empirical practice to a rational analysis of the
physiological mechanisms involved in the perception of host plants by insects and
the response of host plant to attack. In order to favour exchanges between national
researchers, the working group "plant-insect relations Il met for the fifth time, in
Montpellier. This year; the chosen theme concerned the influence on plant-insect
relations of the physiological changes of the plant in relation to environnemental
factors. Although this is not a new theme, it remains topical. This document
does not try to answer the questions we ask ourselves on the subject, but attempts
to contribute a few thoughts. ft is noted that the reactions of plants to pests involve
complex processes often common to many plant species, and that these reactions
can be influenced by various environnemental factors. Not only will this knowledge
offer alternatives in matters of integrated control and production (new green
revolution on rice in Asia), but it will help us to better prepare the biological
equilibria of the next century.
Institut franais de recherche scientifique
pour le dveloppement en coopration
Centre de coopration internationale en recherche agronomique
pour le dveloppement
Diffusion: ClRAD-CA
BP 5035, 34032 Montpellier Cedex l, France
ISBN 2-7099-1346-1 (ORSTOM)
ISBN 2-87-614-259-7 (CI RAD)
ISSN 1264-1l2X

Insectes Plantes

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Actes des Se journes du groupe de travail relations insectes-plantes, 1995 83

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