MICROBIOLOGA AMBIENTAL

PROTOZOOS OBJETIVOS: Observar diferentes grupos de protozoarios en muestras de agua estancada e identificar los gneros ms frecuentes. MARCO TERICO Los protozoarios, pertenecen al Reino Protista. Son eucariticos, unicelulares y heterotrficos. Muchos son mtiles. Hay aproximadamente 45,000 especies descritas de protozoarios. Podemos encontrarlos en agua, donde juegan un papel importante en la cadena alimentaria o en simbiosis con animales superiores o con otros microorganismos. Importancia: Contribuyen a la fertilidad del suelo, ya que descomponen la materia orgnica. Funcionan en el control natural de poblaciones microbianas, ya que se alimentan de varios tipos de microorganismos. Causan enfermedades a humanos y animales de importancia domstica. ESTRUCTURA Y FUNCIN: Poseen organelas responsables del movimiento, la obtencin de nutrientes, la excrecin, la osmoregulacin, la reproduccin y la proteccin. Locomocin 1. Pseudpodos, que son extensiones temporeras del citoplasma, generalmente encontrados en amebas. Estos tambin son importantes para capturar alimento. 2. Flagelos, son estructuras alargadas que impulsan el organismo. Reaccionan a sustancias qumicas y al tacto. 3. Cilios, son estructuras parecidas a flagelos, pero de menor tamao. Estos organelos pueden cubrir la superficie total del protozoario o estar restringida a una regin en particular como la regin oral. En algunos organismos estos cilios se fusionan formando cirris, que pueden funcionar como patas. Alimentacin y digestin 1. La alimentacin autotrfica, los protozoarios sintetizan su propio alimento, mediante el proceso de fotosntesis. 2. La alimentacin heterotrfico, los protozoarios requieren sustancias orgnicas que las toman del ambiente. 3. La alimentacin holozoica cuando ingieren organismos completos o pequeas partculas de comida. Poseen mecanismos para la captura de alimentos como las copas de comida y citosomas ("boca"). Luego de la ingestin de partculas, stas pasan a unas cavidades degestivas llamadas vacuolas de alimentos. Los desechos son eliminados por el citopigio. Excrecin y osmoregulacin La vacuola contrctil, es el responsable de estas funciones. La excrecin de productos de desecho se puede llevar a cabo por la superficie de la clula. Estructuras de proteccin
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1. Caparazones, estn formados de granos de arena u otras partculas forneas.

Pueden estar formados tambin de carbonato de calcio o slice.Evitan el dao mecnico, protegen al organismo de desecacin, evitan la obtencin excesiva de agua y el ataque de depredadores. 2. Tricocistos, son organelas intracelulares usados para la captura de alimento y defensa. 3. Pelcula ("pelicle") es una cubierta ms fuerte que la membrana celular que provee proteccin contra sustancias qumicas, dao mecnico y prdida de agua. Ciclo de vida de protozoarios Posee dos fases: Trofozoitos.- Fase donde los protozoarios desarrollan sus principales actividades: nutricin y crecimiento. En esta fase son muy sensibles, no soportan los efectos de diferentes sustancias qumicas, deficiencias de comida, cambios drsticos en temperatura, pH y otros factores ambientales. 2. Cistos (quistes).- En esta fase, los protozoarios pueden resistir condiciones ambientales adversas. Los cistos se encuentran en estado latente (inactivos metablicamente). Esta fase es importante para la dispersin de los organismos. Por ejemplo la Entamoeba histolytica, que causa la disentera ambica, se dispersa de bajo esta fase. Formas de reproduccin Reproduccin asexual: 1. La fisin binaria, que es el tipo ms comn de reproduccin asexual. 2. Gemacin, los nuevos individuos se forman en la superficie o dentro del organismo. 3. Fisin mltiple, Los organismos que tienen este tipo de divisin forman progenie multinucleada. Reproduccin sexual : 1. Singamia, ocurre la unin de 2 clulas sexuales diferentes con el resultado de un cigoto. 2. Conjugacin, ocurre el intercambio de un par de microncleos haploides. Luego de la fusin forman microncleos diploides, que se dividen por mitosis y originan a 2 organelos diploides idnticos. 3. Autogamia, el microncleo se divide en 2 partes y luego se renen para formar un cigoto. El protozoario se divide para dar lugar a 2 clulas, cada una con las estructuras nucleares completas. CLASIFICACIN : REINO PROTISTA A. Filum Ciliophora : Se caracteriza por la presencia de miles de cilios en su superficie, que tienen como funcin el movimiento y la obtencin de la comida. Los ciliados son los ms especializados, ya que poseen organelos que llevan a cabo funciones vitales. Estos se encuentran en agua salada o dulce. La mayora son de vida libre, algunos son parsitos o comensalistas. Representantes: Paramecium, Vorticella , Colpidium, etc. B. Filum Sarcomastigophora
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1.

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1. Subfilum Opalinata. Posee organelos en forma de cilios arreglados en filas sobre la superficie de su cuerpo. Algunos poseen dos ms ncleos, pero no estn diferenciados en micro y macroncleo. Se reproduce por singamia. Se encuentra en el intestino de sapos. Representante:Opalina sp 2. Subfilum Sarcodina Poseen seudpodos utilizados para moverse y capturar comida. Poseen pocos organelos y no poseen una forma definida. Se encuentran en todos los cuerpos de agua. Representante Entamoeba histolytica que causa la disentera ambica. 3. Subfilum Mastigophora Son flagelados en alguna etapa de su vida y mayormente unicelulares, stos son de vida libre, comensales, mutualistas o parsitos. Representantes Trypanosoma sp, Girdia lamblia C. Filum Apicomplexa No posee organelos de locomocin. Mayormente son parsitos intra e intercelulares de animales. Son parsitos y absorben nutrientes de sus huspedes, algunos son intracelulare, otros viven en el fluido del cuerpo u otros rganos. Los sporozoas adultos no poseen organelos de locomocin. Representantes: Plasmodium sp , que causa malaria Toxoplasma gondi, causante de la toxoplasmsis, causa muerte en pacientes con SIDA)

CARACTERSTICAS DE LOS GRUPOS PRINCIPALES DE PROTOZOOS Nombre comn Representante Hbitat Enfermedades tpicos comunes Mastigforos Flagelados Trypanosoma Aguas dulces, Enfermedad del parsitos de sueo Giardia animales Giardiasis Leishmania Leishmaniasis Grupo Sarcodinos Amibas Amoeba Entamoeba Balantidium Paramecium Didinium Plasmodiun Toxoplasma Aguas dulces y marinas, parsitos de animales Aguas dulces y marinas, parsitos de animales, rumen Principalmente parsitos de animales; insectos (vectores de enfermedades parasitarias Disentera amibiana (amibiasis) Disentera

Ciliforos

Ciliados

Esporozoos

Esporozoarios

Malaria Toxoplasmosis

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CULTIVO Los protozoarios necesitan luz moderada, temperatura de 15 a 21 grados C y un pH de neutral a un poco alcalino. Si se utiliza un medio artificial, ste puede contener arroz, granos de trigo, leche descremada y lechuga. Si es un medio especfico, contiene glucosa, protenas, minerales y extracto de levaduras. Algunos necesitan microorganismos como alimentos. Por otro lado, los parsitos se cultivan en preparaciones de cultivo de tejido. MATERIAL Microscopio Vaso de precipitado Portaobjetos y cubreobjetos (22x22 mm) muy limpios y desengrasados con alcohol Gotero gua estancada PROCEDIMIENTO OBSERVACIN MICROSCPICA: 1. Homogenizar la muestra de agua a observar 2. Colocar sobre un portaobjetos una gota de de la muestra de agua. 3. Colocar el portaobjetos en ngulo de 45 y suavemente para evitar que se formen burbujas entre las lminas. 4. Observar al microscopio con los objetivos de 10, 40. 5. Reconozca los organismos existentes (protozoarios) 6. Elabore los esquemas que corresponde a cada observacin 7. Con ayuda de lminas referenciales trate de identificar el o los gneros que observe. RESULTADOS OBSERVACIN MICROSCPICA

Muestra: Aumento: Genero:

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Muestra: Aumento: Genero: 4

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Muestra: Aumento: Genero: Muestra: Aumento: Genero:

CONCLUSIONES

Muestra: Aumento: Genero: Muestra: Aumento: Genero:

PHYLUM CILIOPHORA

Paramecium sp Colpidium sp

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Vorticella

Stentor

Didinium sp

Subfilum Opalinata

FILUM SARCOMASTIGOPHORA Subfilum Sarcodina

Opalina ranarum Ameba sp

Subfilum Mastigophora

Tripanosoma sp

Giardia lamblia FILUM APICOMPLEXA / SPOROZOA

Leishmania sp

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Toxoplasma gondii Plasmodiun vivax

CILIADOS

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Fig. 1: Paramecium bursaria, ventral view. Fig. 2: Paramecium caudatum, left lateral view. Fig. 3: Colpidium colpoda, right lateral view. Fig. 4: Paramecium trichium, dorsal view. Fig. 5: Vorticella microstoma, left lateral view; A, fully extended specimen; B, encysted specimen. Fig. 6: Vorticella nebulifera var. similis; A, extended specimen, left lateral view; B, view from above. Fig. 7: Coleps elongatus, dorsal view. Fig. 8: Pyxidium cothurnoides, lateral view. Fig. 9: Cyclidium glaucoma. Fig. 10: Vorticella microstoma, telotroch formation. Abbreviations: C, contractile stalk; CA, caudal teeth; CS, cytostome; CV, contractile vacuole; CY, cytopharynx; FD, frontal disc; FV, food vacuole; MN, micronucleus; N, nucleus (usually macronucleus); OT, oral teeth; P, peristome; PD, peristomial disc; PL, plates; TR, trichocyst; UM, undulating membrane; V, vestibule; Z, zoochlorell.
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