Sunteți pe pagina 1din 29

ACADEMIA DE TIINE A MOLDOVEI GRDINA BOTANIC (INSTITUT) Cu titlu de manuscris C. Z. U. 58.08 + 639.

64

Dobrojan Sergiu

MODIFICRILE MORFOFIZIOLOGICE I BIOCHIMICE ALE ALGEI SPIRULINA PLATENSIS (NORDST.) GEITL. CULTIVATE PE APE REZIDUALE I UTILIZAREA EI

03.00.05 - BOTANIC

Autoreferatul tezei de doctor n biologie

CHIINU, 2011

Teza a fost elaborat n Laboratorul de Cercetrii tiinifice Algologie, Catedra Ecologie, Botanic i Silvicultur a Universitii de Stat din Moldova. Conductor tiinific: ALARU Victor, doctor habilitat n biologie, profesor universitar. Referenii oficiali: CRUU Ioan, doctor n biologie, profesor universitar, Universitatea din Bacu, Laboratorul de Cercetri pentru Acvacultur i Ecologie Acvatic, Romnia. COJOCARI Angela, doctor n biologie, confereniar cercettor, Institutul de Microbiologie i Biotehnologie al AM. Componena Consiliului tiinific specializat: CIUBOTARU Alexandru, academician, doctor habilitat n biologie, profesor universitar, Grdina Botanic (Institut) a AM. COLUN Maricica, doctor n biologie, confereniar cercettor, Grdina Botanic (Institut) a AM. CODREANU Valentin, doctor habilitat n biologie, confereniar cercettor, Grdina Botanic (Institut) a AM. MANIC tefan, doctor n biologie, confereniar cercettor, rezervaia Codrii. NEDBALIUC Boris, doctor n biologie, confereniar, faculttea Biologie i Chimie a Universitii de Stat din Tiraspol. Susinerea va avea loc la 16 septembrie, ora 1000, n edina Consiliului tiinific specializat DH 11.03.00.05 - 12, din cadrul Grdinii Botanice (Institut) a Academiei de tiine a Moldovei (MD-2002, Chiinu, str. Pdurii, 18, fax. (+37322) 550443, e-mail: gradinabotanica@moldnet.md). Teza de doctor i autoreferatul pot fi consultate la biblioteca Academiei de tiine a Moldovei (str. Academiei, 5, MD-2028, Chiinu) i la pagina web a CNAA. (www.cnaa.acad.md). Autoreferatul a fost expediat la 11 august 2011. Secretar tiinific al Consiliului tiinific specializat, doctor n biologie Conductor tiinific, doctor habilitat n biologie, profesor universitar Autor:
Sergiu Dobrojan, 2011
2

Maricica Colun Victor alaru Sergiu Dobrojan

REPERE CONCEPTUALE ALE CERCETRII Actualitatea temei i importana problemei abordate. Problema optimizrii mediilor nutritive, n direcia minimizrii preului biomasei obinute, la cultivarea Spirulinei platensis, precum i utilizarea biomasei de Spirulin n diferite scopuri, rmne a fi o prerogativ important n cercetrile biologice [1, 5, 7, 8, 9, 11]. Utilizarea ca mediu nutritiv la cultivarea Spirulinei a apelor reziduale de la complexurile zootehnice i ntrebuinarea biomasei obinute n diverse ramuri ale economiei naionale creeaz perspective mari [7, 8, 14, 22, 24]. Determinarea modificrilor morfofiziologice i biochimice ale algei Spirulina platensis, cultivate pe ape reziduale de la complexurile zootehnice n scopul stabilirii strii fiziologice a celulelor algale, precum i posibilitatea utilizrii biomasei obinute ca supliment n nutriia uman i animal vor permite soluionarea problemelor financiare legate de procurarea reagenilor chimici necesari la cultivarea Spirulinei platensis. Descrierea situaiei din domeniu i identificarea problemelor de cercetare. Alga Spirulina platensis conine un procent nalt de proteine, atingnd pn la 70%-77% din masa uscat, i alte substane biologic active [11, 16, 17, 22], fapt care a trezit un interes major fa de cultivarea Spirulinei n multe ri ale lumii. Spirulina, datorit proprietilor chimice i necesitilor populaiei lumii n proteine, este cultivat n cantiti industriale [19, 21, 23], fapt ce sporete mult necesitatea elaborrii tehnologiilor avansate de cultivare i utilizare a biomasei obinute. Utilizarea masiv a Spirulinei este limitat de costul exagerat al biomasei. De aceea, este absolut necesar elaborarea metodelor de reducere a costului biomasei i determinarea modificrilor morfologice i biochimice, care ofer posibilitatea de a stabili att starea tulpinii algei Spirulina platensis, ct i posibilitatea de utilizare a biomasei obinute n cele mai diverse scopuri, n primul rnd, ca surs alimentar pentru om i ca surs furajer pentru animale. O surs ieftin i avantajoas ce poate fi folosit ca mediu pentru cultivarea Spirulinei sunt apele reziduale de la complexurile zootehnice [7, 14, 22, 24]. Cele mai persistente elemente chimice din aceste ape reziduale rmn a fi azotul, potasiul, fosforul, calciul, magneziul, natriul [2, 7, 14, 24]. Aceste elemente sunt absolut necesare pentru asigurarea normal a proceselor fiziologice din celulele algei Spirulina platensis. Totodat, sunt cunoscute deja procedee pentru cultivarea Spirulinei pe ape reziduale [7, 17, 22], ns ele trebuie optimizate n direcia majorrii cantitative i calitative a biomasei de Spirulin. Studierea modificrilor morfofiziologice survenite la cultivarea algei Spirulina platensis pe ape reziduale de la complexurile zootehnice, determinarea coninutului biochimic al biomasei obinute, precum i utilizarea acestei biomase n diverse
3

ramuri ale economii naionale rmn a fi nite soluii avantajoase care i preocup pe oamenii de tiin din domeniu. Scopul tezei a constat n studierea modificrii morfofiziologice a Spirulinei cultivate pe medii cu ape reziduale de la complexuri zootehnice i elucidarea modificrilor biochimice i de reproducere a algei n condiii noi de cultivare; reducerea costului biomasei obinute i analiza comparativ a biomasei crescute pe medii minerale i pe cele cu adaos de ape reziduale. Obiectivele tezei: Cultivarea Spirulinei pe ape reziduale de la complexurile de bovine, porcine i cele avicole n diferite concentraii i influena lor asupra aspectului morfologic i capacitii de reproducere a algei. Studiul modificrilor morfologice i biochimice ale Spirulinei cultivate pe medii cu adaos de ape reziduale. Studierea modificrii compoziiei biochimice a biomasei n genere i a compoziiei calitative a proteinelor. Cultivarea Spirulinei pe ape reziduale dup metoda continu i modificarea productivitii algale. Administrarea biomasei de Spirulin, crescut pe medii cu ape reziduale de la complexuri avicole, ca supliment nutritiv puilor broiler. Utilizarea biomasei de Spirulina platensis, crescute pe apele reziduale de la complexuri de bovine, pe fondul diabetului experimental. Metodologia cercetrii. Asigurarea metodologiei cercetrilor tiinifice s-a realizat n baza concepiilor i principiilor expuse n lucrrile: . . [28], V. Rudic [17, 18], . . [26], . . [25], B. Melnic [13], . . [29], . . [27]. Eritrocitele au fost determinate cu ajutorul eritrocitometru TU-353966-02,95. Testarea glucozei n snge a fost fcut cu ajutorul glucometrului ,,Ez Smart" (Thailanda). Analiza statistic a valorilor obinute a fost realizat prin intermediul programului computerizat Statistica 6, cu determinarea mediei aritmetice (M), erorii-standard (m), devierii-standard (), coeficientului de variaie (V), exactitii (P), numrului (n) i testului de semnificaie (t), pragului de semnificaie (p) calculate dup criteriul Student-t. Noutatea i originalitatea tiinific a rezultatelor. n lucrare pentru prima dat a fost elucidat istoria studierii algei cianofite Spirulina platensis n Republica Moldova i n Romnia, i au fost evideniate modificrile morfologice ale talului i celulelor n parte, survenite sub
4

influena diferitelor concentraii de ape reziduale utilizate n calitate de mediu nutritiv. n premier alga Spirulina platensis a fost cultivat pe apele reziduale de la complexuri de bovine i porcine. Au fost evideniate concentraiile optime de ape reziduale, care stimuleaz creterea biomasei i nu provoac schimbri morfologice negative ale talului i celulelor algei. n premier au fost studiate modificarea productivitii algei Spirulina platensis, survenit ca rezultat al utilizrii diferitelor concentraii de ape reziduale n calitate de mediu nutritiv, fiind determinat productivitatea algei cultivate dup metoda continu. A fost analizat compoziia biochimic a Spirulinei cultivate pe apele reziduale i a fost demonstrat netoxicitatea biomasei obinute. Pentru prima dat a fost determinat compoziia aminoacid a proteinei biomasei de Spirulin crescut pe ape reziduale, fiind ntreprinse cercetri ce in de utilizarea biomasei obinute prin metoda cultivrii continue. A fost studiat n premier influena Spirulinei crescute pe apele reziduale de la complexuri de bovine prin metoda cultivrii continue asupra diabetului experimental. Semnificaia teoretic. Au fost demonstrate modificrile morfologice ale Spirulinei crescute pe medii cu ape reziduale de la complexurile zootehnice i posibilitatea utilizrii acestor ape n scopul obinerii biomasei valoroase cu pre redus. A fost dovedit tolerana algei Spirulina platensis fa de compoziia apelor reziduale, fiind determinate condiiile optime n care alga acumuleaz biomas maximal. A fost demonstrat utilitatea implementrii metodei continue la cultivare a Spirulinei n scopul obinerii biomasei cu coninut chimic favorabil. A fost demonstrat efectul pozitiv al Spirulinei crescute pe apele reziduale de la bovine asupra obolanilor de laborator. A fost soluionat problema obinerii mediilor nutritive ieftine, preparate pe baza apelor reziduale de la complexurile de bovine, porcine i avicole, utilizate la cultivarea algei Spirulina platensis dup metoda cultivrii continue, care nu provoac schimbri morfologice negative ale talului i contribuie la sporirea biomasei algale valoroase, indicnd perspectiva utilizrii ei. Valoarea aplicativ. Procedeele de cultivare a Spirulinei platensis, propuse n tez, pot fi utilizate n biotehnologie, deoarece asigur obinerea unei cantiti sporite de biomas algal cu cheltuieli minime. Prin metoda propus de cultivare a Spirulinei pe apele reziduale de la complexuri zootehnice se va obine o cretere continu a culturii i o cantitate mai mare de biomas cu coninut biochimic valoros. Biomasa obinut poate fi utilizat n zootehnie, ca supliment n nutriia puilor broiler, a porcinelor, bovinelor i a altor animale.
5

Rezultatele tiinifice principale naintate spre susinere: Particularitile morfologice ale algei Spirulina platensis cultivate pe diverse ape Modificarea capacitii de reproducere i a productivitii algale n funcie de Compoziia biochimic a algei Spirulina platensis crescute pe apele reziduale de Compoziia aminoacid a proteinelor din biomasa Spirulinei platensis crescut pe Cultivarea periodic a Spirulinei pe apele reziduale de la complexurile de bovine, Cultivarea continu a Spirulinei, utiliznd ca mediu apele reziduale de la reziduale de la complexurile zootehnice n diferite concentraii. condiiile ecologice. la complexurile de bovine, porcine i avicole. apele reziduale de la complexurile zootehnice. porcine i cele avicole i determinarea cantitativ a biomasei obinute. complexurile zootehnice, cu extragerea biomasei i nlocuirea cu mediu a 25%, 50% i 75%, stabilind asfel concentraia optim a biomasei extrase. Utilizarea biomasei de Spirulin crescut pe medii cu ape reziduale ca supliment n nutriia puilor broiler i efectul ei pe fondul diabetului experimental. Implementarea rezultatelor tiinifice. Rezultatele au fost implementate n cadrul SRL Avicola Bulboaca. Aprobarea rezultatelor. Rezultatele cercetrilor au fost comunicate i discutate la Conferina Internaional Bioetica, Filosofia, Economia i Medicina (Chiinu, 2008), Conferinele Internaionale ale Tinerilor Cercettori din Republica Moldova (Chiinu, 20072010), Conferina tiinific naional cu participare internaional Probleme actuale ale microbiologiei i biotehnologiei (Chiinu, 2009), Conferina Dezvoltarea cercetrii tiinifice, promovarea i cultivarea creativitii i a inovrii n procesul instruirii academice (Chiinu, 2010), Simpozionul tiinific internaional Conservarea diversitii plantelor, consacrat aniversrii a 60-a de la fondarea Grdinii Botanice (Institut) a AM (Chiinu, 2010). Publicaii la tema tezei. Rezultatele obinute sunt publicate n 17 lucrri tiinifice, 7 articole n reviste recenzate i 10 n materiale ale comunicrilor tiinifice. Volumul i structura tezei. Teza const din introducere, 4 capitole, concluzii i recomandri, bibliografie din 242 de titluri, volum total de 116 pagini de text de baz, 20 de tabele i 35 de figuri. Cuvinte-cheie: Spirulin, aspect morfologic, coninut biochimic, complexuri zootehnice, ape reziduale, supliment nutritiv.
6

CONINUTUL TEZEI 1. SPIRULINA PLATENSIS (NORDST.) GEITL.: CARACTERISTICILE TAXONOMIC, MORFOFIZIOLOGIC, ECOLOGIC I PERSPECTIVA UTILIZRII BIOMASEI (sintez bibliografic) Algele cianofite (Cyanophyta), la care se refer specia Spirulina platensis, sunt o grup de organisme vegetale fotosintetice de o vrst cronologic destul de naintat, care depete 3,5 miliarde ani. Anume aceast grup de alge se dezvolt abundent, neavnd concuren din partea altor grupe de alge [ 9, 13, 25, 26]. Spirulina platensis, care a servit drept obiect de studiu, se refer la ncrengtura Cyanofhyta, clasa Hormogonoficeae, ordinul Oscillatoriales, familia Oscillatoriaceae, genul Spirulina. Spirulina e o alg pluricelular, filamentoas, cu trihomii care ating aproximativ 10001500 microni n lungime. n codiii naturale filamentele algei Spirulina platensis sunt spiralate uniform pe toat lungimea. Diametrul, sau limea spiralei, oscileaz ntre 36 i 40 microni, iar distana dintre rotaiile spiralei constituie 43-57 microni. Celulele Spirulinei au form cilindric i sunt acoperite de un strat mucilaginos. Diametrul celulelor variaz ntre 1-3 microni la cultura tnr i 11-12 microni la cultura matur [6, 9, 12, 23]. Spirulina se nmulete prin intermediul hormogoniilor mobile sau prin segmentarea talului n regiunea necridiilor, care constau din 3-10 i chiar mai multe celule. Spirulina platensis este o alg cosmopolit, rspndit pe toate continentele, prefernd bazinele cu ap alcalin stagnant cu mineralizaia sporit, n care predomin bicarbonatul de sodiu, iar pH-ul de obicei oscileaz ntre 8,5 i 9,0. Se ntlnete mai frecvent n bazinele din Africa Central, Mexic, Brazilia i n alte ri din zonele tropicale. A fost depistat ns i n unele bazine din Siberia, Caucaz, Israel, Bulgaria, Romnia .a. [2, 8, 13, 24]. A fost ntlnit i n Republica Moldova, ntr-un iaz din raionul Ungheni, lng satul Nicolaevca, de unde a fost selectat o tulpin [23]. Alga Spirulina platensis este una dintre cele mai solicitate i mai bine cercetate specii de microalge, datorit coninutului nalt de proteine comestibile n biomasa ei i un ir ntreg de substane biologic active, care se utilizeaz n cele mai diverse ramuri ale activitii umane [1, 4, 6, 8, 9, 10, 11, 19, 23]. Cercetrile efectuate au demonstrat c biomasa Spirulinei platensis nu conine substane toxice i c influeneaz pozitiv asupra dezvoltrii organismului uman [1, 4, 5, 11, 16, 19]. Ca produs alimentar Spirulina poate nlocui carnea, fina de soia, oul de pasre, laptele i alte produse alimentare [7, 10, 21].

2. MATERIALE I METODE DE LUCRU Spirulina a fost cultivat pe apele reziduale de la complexurile de cretere a psrilor, bovinelor i porcinelor, preparate n condiii de laborator n concentraiile de 5%; 10%; 15% i 20%, obinute prin diluia cu ap distilat. La cultivarea Spirulinei pe mediile cu adaos de ape reziduale au fost utilizate metode de cultivare continu i periodic [27, 28]. Modalitile de studiere a aspectului morfologic al celulelor, filamentelor i a productivitii, a coninutului biochimic al biomasei i cel calitativ al proteinelor au fost efectuate dup metodele utilizate n algologia modern [17, 18, 22, 27]. Indicii chimici ai apelor reziduale au fost determinai utiliznd metodicile hidrochimice [25]. Administrarea biomasei de Spirulin crescut pe ape reziduale ca supliment puilor broiler a fost efectuat n concentraia de 250 mg/l kg de concentrate, iar obolanilor de laborator - n doza de 15 mg/kg. Au fost stabilite modificrile indicilor sangvini prin determinarea eritrocitelor, hemoglobinei, vitezei de sedimentare a hematiilor (VSH) i prin testarea glucozei din snge [13]. 3. INFLUENA MEDIILOR NUTRITIVE CU ADAOS DE APE REZIDUALE DE LA COMPLEXURILE ZOOTEHNICE ASUPRA PARTICULARITILOR MORFOLOGICE, BIOCHIMICE I A PRODUCTIVITII SPIRULINEI PLATENSIS (NORDST.) GEITL 3.1. Componena chimic a apelor reziduale de la complexurile animaliere utilizate n experimente Apa rezidual de la complexurile de cretere a bovinelor, porcinelor i de la cele avicole se deosebete esenial dup mai muli parametri chimici [2]. Cel mai nalt nivel al pH-lui (11.04) a fost stabilit n apa cu dejecii de la complexurile avicole, ceva mai mic - la cele de bovine (10.46), iar cele mai joase valori ale acestui parametru (9.04) sunt observate n apa de la complexurile de porcine. Apa rezidual de la complexurile de bovine conine cea mai nalt concentraie de Ca+2 (268.63 mg/l), iar cea de la complexurile de porcine conine cea mai nalt concentraie de Na+, Mg+2 i HCO3-. n apa rezidual de la complexurile avicole predomin elemente ca: K+, Cl-, NH4+, N i P. 3.2. Particularitile morfologice ale algei Spirulina platensis crescute pe diverse ape reziduale Modificrile morfologice ale Spirulinei cultivate pe ape reziduale de la complexurile zootehnice au fost determinate dup urmtorii parametri: lungimea filamentelor, lungimea celulelor, limea i volumul celulelor.
8

Analiza datelor experimentale obinute ne demonstreaz c dimensiunile de lungime ale filamentelor de Spirulina platensis depind de natura apelor reziduale, de concentraia lor i de vrsta culturii. n general, cele mai lungi filamente au fost stabilite la a 15-a zi de cultivare a Spirulinei pe ape reziduale de 10% concentraie, provenite de la complexurile de bovine. n acest caz, lungimea filamentelor a crescut de la 380 microni n momentul inoculrii pn la 575 microni la a 15-a zi de cultivare. Totodat, cele mai mici dimensiuni ale filamentelor de Spirulin (308 microni) au fost observate la a 5-a zi de cultivare pe ape reziduale de 20% concentraie de la ntreprinderile avicole. Cultivarea de mai departe a algei pe aceste ape n general provoac moartea culturii (figura 3.2.1).

Fig. 3.2.1. Lungimea filamentelor de Spirulina platensis crescut pe diverse ape reziduale (microni). Lungimea fiecrei celule n parte nu este n strict concordan cu lungimea filamentului de Spirulin. Rezultatele analizei acestui parametru ne demonstreaz c cele mai lungi celule le au filamentele de Spirulin crescut pe ape reziduale de la complexurile de bovine. Optime s-au dovedit a fi concentraiile mediilor de 10-15%, n care trihomii, dup lungime, ocupau o poziie medie. Cele mai bune rezultate sunt observate n a 10-a zi de cultivare (figura 3.2.2.).

Fig. 3.2.2. Lungimea celulelor de Spirulina platensis crescut pe diverse ape reziduale (microni).
9

Limea trihomului de Spirulin este determinat de limea celulelor care intr n componena lui. Valorile maximale ale limii au fost stabilite pentru apele reziduale de la complexurile de porcine la cele mai nalte concentraii (20% i 15%) n a 10-a i a 15-a zi de cultivare (figura 3.2.3).

Fig. 3.2.3. Limea celulelor de Spirulina platensis crescut pe diverse ape reziduale (microni). Dac pentru Spirulina crescut pe apele reziduale de la complexurile avicole i cele de bovine creterea maxim a limii celulelor algale a constituit, respectiv, 18% i 25% n comparaie cu cele mai mici valori ale acestui parametru, pentru celulele cultivate pe ape reziduale cu dejecii de la porcine creterea acestui parametru a ajuns la 39% i 46%, corespunztor pentru concentraiile de 15% i 20% (figura 3.2.3). O mare importan are volumul celulelor, deoarece de raportul lui fa de suprafaa celulei depinde suprafaa relativ de contact ale ei cu mediul nconjurtor, fapt ce are impact asupra intensitii schimbului de substane dintre celule, dintre celul i mediu.

Fig. 3.2.4. Volumul celulelor de Spirulina platensis crescut pe diverse ape reziduale (microni 3). Totodat, e de menionat c odat cu creterea concentraiei apelor reziduale (15% i 20%) se observ majorarea volumului celulelor, n special n cazul utilizrii apelor reziduale de
10

la porcine i bovine (figura 3.2.4). n cazul cultivrii Spirulinei pe medii cu ape reziduale de la complexurile avicole n concentraii de 5% sunt observate cele mai voluminoase celule. Volumul celulelor n varianta cu 20% ape de la psri treptat devin tot mai greu de determinat, iar peste 10 zile de cultivare majoritatea celulelor se altereaz (figura 3.2.4.). 3.3. Productivitatea algei Spirulina platensis cultivate prin metoda de cultivare periodic pe apele reziduale, provenite de la diverse complexuri zootehnice Analiznd productivitatea Spirulinei n funcie de natura apei reziduale n parte, de concentraia ei i de durata perioadei de cultivare, am observat c cele mai bune rezultate sunt obinute n a 15-a i 20-a zi de cultivare pe ape cu dejecii de la complexurile de bovine. Aceasta se refer, n primul rnd, la concentraia de 10%, n care biomasa Spirulinei atinge valoarea de 3,77 i, respectiv, 3,25 g/l corespunztor concentraiilor de 10% i 5%, respectiv. Biomasa de Spirulin obinut pe medii cu ape de la bovine este aproximativ de 3-7 ori mai mare dect cea crescut pe apele cu dejecii de la porcine i cele avicole. Productivitatea maxim a Spirulinei pe apele de 10% cu dejecii de la bovine coincide cu creterea lungimii filamentului, n general, i a celulelor, n particular. Totodat, crete i limea lor.

Fig. 3.3.1. Productivitatea Spirulinei pe diverse ape reziduale de la complexurile animaliere (g/l BAU). Pe apele reziduale de 5% concentraie cu dejecii de la complexurile de bovine, unde la fel a fost constatat una dintre cele mai mari productiviti ale Spirulinei, creterea lungimii filamentului este urmat de micorarea lungimii celulelor. Aceasta ne mrturisete despre faptul c n aceste condiii are loc o cretere mare a vitezei de diviziune a celulelor algale (figura 3.3.1). 3.4. Compoziia biochimic a algei Spirulina platensis crescute pe apele reziduale Experimentele noastre demonstreaz c coninutul diferiilor compui din biomasa algal depinde de concentraia apelor reziduale utilizate pentru cultivarea Spirulinei. Este vorba, n primul rnd, de proteine i glucide, cantitatea crora se micoreaz odat cu creterea
11

concentraiei de ape reziduale (figura 3.4.1). n cazul utilizrii mediilor nutritive compuse din ape reziduale de la bovine la cultivarea Spirulinei, se obine cel mai nalt coninut de protein (56,84%) n mediul cu concentraia de 5% ape reziduale, urmat respectiv de 10%, 15% i 20%. Peptidele sunt n cantiti mai mari n concentraiile de 10% i 5%, urmate de cele cu 15% i 20%. Lipidele se conin n cantiti mai sporite n concentraia de 15%, dup care urmeaz cele de 10% i 20%, iar cea mai redus cantitate a lor o avem n varianta cu 5% ape reziduale. Glucidele sunt mai multe n mediile cu 5% i 10% ape reziduale, iar odat cu creterea concentraiei mediului are loc descreterea cantitii lor. Coninutul ficobilinelor este mai nalt n mediul de 10% ape reziduale, urmat consecutiv de cele cu 15%, 5% i 20% (figura 3.4.1).

Fig. 3.4.1. Compoziia biochimic a Spirulinei platensis crescute pe ape reziduale de diferite concentraii provenite de la bovine. n cazul Spirulinei crescute pe ape reziduale de la porcine, observm o alt dependen a componenei biochimice de concentraia apelor utilizate. n acest caz, cel mai nalt coninut de proteine i ficobiline a fost nregistrat n biomasa crescut pe ape reziduale de 10% concentraie, urmate consecutiv de 15%, 5% i 20% (figura 3.4.2). Cantitatea peptidelor, lipidelor, ficobilinelor sporete n biomas odat cu mrirea concentraiei apelor reziduale de la 5% pn la 15%. De rnd cu creterea de mai departe a concentraiei apelor reziduale n mediul nutritiv, coninutul compuilor respectivi se micoreaz. n majoritatea cazurilor peptidele, lipidele i ficobilinele apar n cantiti mai mari n concentraiile mediilor de 10% i 15% de ape reziduale. Sunt o excepie glucidele, cantitatea maximal a crora a fost observat n variantele de 15% i 20% de ape reziduale.

12

Fig. 3.4.2. Compoziia biochimic a Spirulinei platensis crescute pe ape reziduale de diferite concentraii provenite de la porcine. Analiznd compoziia biochimic a biomasei de Spirulin crescute pe apele reziduale de la complexurile de porcine, putem spune c cel mai nalt coninut al compuilor analizai a fost atestat n mediile cu concentraii de 10% i 15% ape reziduale. Biomasa algal obinut pe ape reziduale cu concentraii de 5% i 20% este cea mai srac din punct de vedere biochimic. Conform rezultatelor cultivrii Spirulinei pe apele reziduale de la complexurile avicole, concentraiile de 20% sunt toxice pentru alg (figura 3.4.3). La concentraia cea mai nalt, antrenat n experimente, cultura de Spirulin moare. Creterea concentraiei apei reziduale de la 5% la 15% conduce, n primul rnd, la diminuarea cantitii de protein i peptide, coninutul crora, n acest caz, se micoreaz corespunztor de 3 i de 5 ori i mai mult. Coninutul de proteine scade de la 75,63% pn la 24,15%, iar cel al peptidelor de la 19,06% pn la 3,67%. Aceeai reducere a coninutului, odat cu creterea concentraiei, este valabil i pentru glucide, dar n proporii mult mai mici.

Fig. 3.4.3. Compoziia biochimic a Spirulinei platensis crescute pe ape reziduale de diferite concentraii provenite de la complexurile avicole.

13

Cea mai srac biomas algal, din punct de vedere al coninutului de lipide, a fost stabilit n concentraia de 15% ape reziduale, pe cnd n cazul diluiilor de 10% i 5% cantitatea lor aproape c se dubleaz. Nivelul de concentraie a apelor reziduale practic nu influeneaz coninuturile de ficobiliproteine. (figura 3.4.3). n concluzie la acest compartiment, menionm c concentraiile nalte de ape reziduale de la complexurile avicole sunt toxice pentru cultura de Spirulin. De concentraia acestor ape depinde mai ales coninutul de proteine i de peptide, mai puin cel al glucidelor i lipidelor. Foarte puin depinde de concentraia apei reziduale coninutul de ficobiline. Compoziia aminoacid a biomasei de Spirulina platensis crescute pe apele reziduale 3.5. Compoziia aminoacid a biomasei de Spirulina platensis crescute pe apele reziduale Aminoacizii reprezint produsul final al hidrolizei proteinelor. Importana lor este foarte mare, deoarece din ele sunt construite moleculele gigantice ale proteinelor - substane necesare vieii [13, 19, 24]. Noi am efectuat analiza coninutului aminoacizilor n biomasa Spirulinei crescute pe ape reziduale. Am analizat compoziia aminoacizilor n biomasa cu cea mai nalt cantitate de protein. n calitate de martor a servit biomasa crescut pe mediul mineral Zaruc (figura 3.5.1). Majoritatea aminoacizilor, cu excepia izoleucinei, se sintetizeaz n cantiti mai mari n biomasa algal crescut pe ape reziduale de 5% concentraie de la complexuri avicole. Totodat, coninutul aminoacizilor n acest caz este, de cele mai dese ori, mai mare sau foarte apropiat de cel stabilit pentru Spirulina crescut pe mediul Zaruc. Mediul nutritiv de 10% de la porcine s-a dovedit a fi cel mai nefavorabil pentru sinteza aminoacizilor.

Fig. 3.5.1.Compoziia aminoacid a Spirulinei crescute pe ape reziduale de la complexurile zootehnice (mg/100 mg).

14

Dup cum vedem din figura 3.5.1, Spirulina cultivat pe mediul cu dejecii de la porcine conine o cantitate de aminoacizi de 2-3 ori mai mic dect n biomasa crescut pe medii cu adaos de dejecii avicole de 5%. n biomasa crescut pe medii cu 5% dejecii de la bovine componena aminoacizilor este similar cu cea din lotul-martor, cu excepia metioninei, concentraia creia este mult mai nalt 4. CULTIVAREA ALGEI SPIRULINA PLATENSIS PRIN METODA CULTIVRII CONTINUE I UTILIZAREA BIOMASEI OBINUTE 4.1. Obinerea biomasei de Spirulina platensis prin metoda cultivrii continue La etapa iniial (n prima zi de cultivare), Spirulina a fost inoculat n concentraia de 0,350 g/l BAU. Concentraia mediilor compuse din ape reziduale utilizate la cultivarea algei au fost de 10% n varianta cu ape reziduale de la porcine i de 5% n cele cu ape reziduale de la psri i bovine. Concentraiile menionate au fost selectate i utilizate n experiene ca fiind cele optime pentru obinerea unei cantiti maxime de protein n biomas, dar i a biomasei algale. Peste o perioad de trei zile se extrgeau 25%, 50% i 75% din biomas i se nlocuiau cu mediul nutritiv, proaspt, compus din ape reziduale. Extragerea a 25% din biomas i adugarea mediului compus din ape reziduale contribuie la obinerea celei mai mari cantiti de biomas n cazul utilizrii apelor reziduale de la complexurile de bovine i cele avicole. n acest caz obinem o biomas de 6,21 ori mai mare dect la cultivarea prin metoda periodic, pe o perioad de 20 de zile, n varianta cu ape reziduale de la complexurile avicole. Acelai lucru se observ i la cultivarea Spirulinei pe mediul nutritiv alctuit pe baza apelor reziduale de la complexurile de bovine i porcine, obinnd un spor de 1,06 i, respectiv, 1,74 ori fa de metoda cultivrii periodice. Tabelul 4.1.1. Cantitatea total a biomasei de Spirulina platensis crescute pe apele reziduale de la complexurile de porcine, bovine i cele avicole dup metoda cultivrii continue (g/l BAU)
Apele reziduale Bovine Porcine Avicole 25%, M m 4,01 0,54 2,36 0,53 5,92 0,27 Cantitatea biomasei extrase 50%, M m 2,13 0,22 2,64 0,59 2,45 0,36 75%, M m 1,00 0,06 0,60 0,03 0,81 0,03

Extragerea a 50% din biomas duce la obinerea unei cantiti mai nalte de biomas de Spirulin doar n cazurile folosirii mediului compus din apele reziduale de la porcine. Dac comparm rezultatele acestor experimente cu cele obinute la cultivarea Spirulinei prin metoda
15

de cultivare periodic, observm c att n cazul utilizrii mediului compus din ape reziduale de la porcine, ct i n cazul celui de la complexurile avicole obinem o cretere de 1,95 i 2,57 ori. La extragerea a 75% din biomas obinem cantiti nensemnate pentru toate variantele analizate, fapt ce confirm ineficiena extragerii date (tabelul 4.1.1). 4.2. Utilizarea biomasei de Spirulina platensis crescute pe apele reziduale de la Experienele au fost efectuate la ntreprinderea avicol Avicola Bulboaca, cu includerea a 60 de pui cu vrsta de 10 zile, repartizai egal n dou loturi a cte 30 fiecare. Puii lotului experimental (1) primeau ca supliment Spirulina crescut pe ape reziduale de la acelai complex avicol, n concentraie de 250 mg/l kg mas corporal; cei din lotul-martor (2) primeau doar hran obinuit. n consecin am stabilit c viabilitatea puilor din lotul hrnit cu Spirulin constituie 100%, pe cnd n lotul-martor, ncepnd cu a 7-a zi, aceasta scade. Greutatea corporal a puilor, odat cu administrarea Spirulinei, se mrete. La a 31-a zi aceast diferen a constituit cu 8% mai mult n favoarea puilor hrnii cu biomas de Spirulin. i viabilitatea puilor n lotul cu Spirulin s-a dovedit a fi cu circa 7% mai nalt ca n lotul-martor (tabelul 4.2.1). Toate acestea demonstreaz c biomasa de Spirulin crescut pe mediul cu dejecii de la psri influeneaz pozitiv, att asupra greutii corporale a puilor, ct i asupra viabilitii lor, i poate fi indicat n calitate de stimulator biologic la creterea puilor. Tabelul 4.2.1. Influena Spirulinei crescute pe apele reziduale de la complexurile avicole asupra viabilitii i greutii corporale ale puilor broiler
Loturile experimentale Lotul I Lotul II Lotul I Lotul II Lotul I Lotul II Lotul I Lotul II Lotul I Lotul II Parametri analizai 1 zi de administrare Viabilitatea puilor (%) Greutatea unui pui (kg) Mm 100 0,280,004 100 0,280,005 7 a zi 100 0,620,019 96,66 0,660,031 14 a zi 100 1,100,033 96,66 1,280,043 24-a zi de 100 1,700,038** 93,3 1,400,038 31-a zi 100 93,3 2,640,044** 2,440,042

complexurile avicole ca supliment n nutriia puilor broiler

Not: ** p<0,01. Spirulina folosit n calitate de supliment n nutriia psrilor contribuie la modificarea indicilor hematologici ai sngelui, nivelul crora determin funcionalitatea i starea bun a organelor
16

interne. Eritrocitele au funcii importante, asigurnd transportul de oxigen i CO2, absorbia i transportul aminoacizilor, lipidelor etc. Norma de eritrocite din sngele ginilor, n care se ncadreaz i rezultatele noastre, este de la 1,61 pn la 3,02 mln/1 mm3. Cantitatea eritrocitelor, ca component de baz ce conine pigmentul respirator al sngelui (hemoglobina), de asemenea crete la puii din lotul hrnii cu Spirulin (figura 4.2.1).

2,3 2,3 2,28 2,26 2,24 2,22 2,2 2,18 2,16 2,14 Eritrocite (lotul 1) Eritrocite (lotul 2) 2,2

Fig. 4.2.1. Influena Spirulinei asupra numrului de eritrocite (x 1012 e/l). Cantitatea de hemoglobin n eritrocite depinde de calitatea regimului de alimentare. Prin analizele efectuate am demonstrat c coninutul hemoglobinei n eritrocite se ncadreaz n limitele normei (de la 56 g/l pn la 96 g/l). n lotul experimental cantitatea hemoglobinei este mai mare cu 9% comparativ cu lotul-martor (figura 4.2.2).

Fig. 4.2.2. Influena Spirulinei asupra nivelului de hemoglobin (g/l). Nivelul de glucoz n sngele puilor din lotul cu administrare de Spirulin crete nensemnat, dar totui diferena e de 5% n favoarea puilor hrnii cu Spirulin (figura 4.2.3).

17

Fig. 4.2.3. Nivelul de glucoz pe fundalul administrrii Spirulinei ( mmol/l ). Spre deosebire de indicii sngelui menionai, valorile crora n lotul hrnit cu Spirulin sunt mai nalte, viteza de sedimentare a hemului (VSH) descrete. Astfel, n lotul 1 viteza de sedimentare a hemului este cu 20% mai mic comparativ cu valorile din lotul-martor (figura 4.2.4).

Fig. 4.2.4. Influena Spirulinei asupra VSH (mm/or). Starea funcional a organismului depinde de nivelul de dezvoltate a tuturor organelor interne. Au fost analizate urmtoarele organe la puii din ambele loturi: ficatul, plmnii, inima, stomacul glandular i cel muscular. Datele prezentate n tabelul 4.2.2 ne demonstreaz c administrarea Spirulinei n calitate de supliment nutritiv la puii broiler n mare msur determin creterea greutii plmnilor i a inimii, care se mrete, respectiv, cu 40% i cu 38%. Un rezultat pozitiv se observ i n cazul stomacului glandular i al ficatului, masa crora se mrete respectiv cu 33% i cu 27% n lotul cu administrare de alg. Doar n cazul stomacului muscular avem un supliment nensemnat de greutate, n valoare de 5%, n comparaie cu lotul-martor.

18

Tabelul 4.2.2. Greutatea organelor interne analizate (g)


Organele analizate Loturile experimentale Lotul 1 (cu administrare de Spirulin) Mm 94,170,737*** 14,000,288*** 21,970,491*** 36,000,692 16,000,635** Lotul 2 (martor) Mm 74,000,763 10,000,288 16,000,519 34,000,750 12,000,115

Ficat Plmni Inim Stomac muscular Stomac glandular

Not: ** p<0,01; *** p<0,001. Din cele menionate putem conclude c administrarea biomasei de Spirulin crescute pe ape reziduale de la complexurile avicole, ca supliment la nutriia puilor broiler, este benefic organismului psrilor: contribuie la mrirea viabilitii, la sporirea greutii i la dezvoltarea organelor interne, favorizeaz starea indicilor hematologici ai sngelui, totodat fiind eficient din punct de vedere economic. 4.3. Administrarea biomasei algei Spirulina platensis crescute pe apele reziduale de la complexurile de bovine pe fondul diabetului experimental Este cunoscut c alga Spirulina platensis posed proprieti antidiabetice [2, 5, 18], ns toate aceste experimente au rezultate pozitive la utilizarea biomasei de Spirulin crescute pe mediul Zaruc care, dup cum am menionat, este foarte costisitor. De aceea, ne-am propus utilizarea biomasei de alg crescute pe apele reziduale de la bovine ca supliment pe fondul diabetului experimental. Pe parcursul experienelor au fost determinate volumul de ap administrat obolanilor, glucoza din urin i greutatea corporal, iar la finele cercetrilor au fost determinai indicii hematologici. Volumul cel mai mare al apei bute de obolani a fost n lotul II (alloxan), fiind de 2,63 ori mai mare fa de lotul-martor n a 10-a zi de experiment. La obolanii din lotul IV (Spirulin + alloxan) n a 10-a zi de experien consumul de ap a fost numai de 1,88 ori mai nalt dect n grupul-martor. Aadar, Spirulina administrat contribuie la stabilizarea metabolismului apei. obolanii din grupul III, crora li s-a administrat numai Spirulin, consumau practic acelai volum de ap ca i lotul-martor (tabelul 4.3.1).

19

Tabelul 4.3.1. Volumul de ap consumat de obolani pe parcursul experimentului


Loturile experimentale I (martor) II (alloxan) III (Spirulin) IV (Spirulin + alloxan) Perioada de examinare i volumul apei consumate (ml/24 ore) 1 zi 7 zi 10 zi Mm Mm Mm 13,580,20 14,961,05 13,460,50 26,001,01*** 29,801,39*** 35,401,02*** 13,380,48 10,830,60** 15,201,39 14,000,70 19,561,11* 25,401,07***

Not: *p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001. La obolanii lotului ce au consumat Spirulin i alloxan se observ o scdere n greutate de 1,00 ori, n a zecea zi, fa de greutatea iniial, pe cnd n lotul cu administrare de alloxan tot n aceeai perioad obinem o descretere de 1,05 ori. Greutatea corporal a obolanilor lotului cu administrare de Spirulin demonstreaz tendina de majorare cu 2,7 g, iar la obolanii lotuluimartor - cu 3,2 g. Astfel, considerm c perioada de 10 zile este prea mic pentru determinarea creterii greutii corporale la obolani, organismul fiind, probabil, n perioada de acomodare. n ceea ce privete influena Spirulinei crescute pe apele reziduale de la complexurile de bovine asupra indicilor hematologici ai sngelui obolanilor experimentali, putem meniona c nu exist pericol de administrare. n urma experienelor efectuate am observat o tendin de normalizare a hemoglobinei, a eritrocitelor la obolanii crora li s-a administrat Spirulina pe fondul diabetului experimental, dar care se cuprind n limitele admisibile. Influena Spirulinei asupra diabetului alloxanic se exprim prin majorarea eritrocitelor i a hemoglobinei de 1,11 ori i prin scderea glucozei i VSH, corespunztor, de 1,28 ori i 1 ori (tabelul 4.3.4). Tabelul 4.3.4. Influena Spirulinei platensis cultivate pe ape reziduale asupra indicilor hematologici la obolanii din experiment
Indicii analizai Martor Glucoza (mmol/l) Hemoglobina (g/l) Eritrocitele (10-12 e/l) VSH (mm/or) Mm 4,70 0,11 137,28 2,65 5,43 0,48 1,00 0,26 Loturile experimentale Alloxan Spirulina+ alloxan Mm Mm 7,30 0,30*** 5,7 0,26** 116,60 1,07*** 130,20 2,70 *** 4,70 0,17* 2,00 0,22* 5,22 0,30* 1,000,12 Spirulina Mm 3,52 0,15** 156,26 2,40*** 5,90 0,53 1 0,27

Not: *p<0,05; ** p<0,01; *** p<0,001.

20

CONCLUZII GENERALE 1. n rezultatul cercetrilor efectuate a fost soluionat problema obinerii mediilor nutritive ieftine, preparate pe baza apelor reziduale, utilizate la cultivarea algei Spirulina platensis dup metoda cultivrii continue, care nu provoac schimbri morfologice negative ale talului i contribuie la creterea biomasei algale valoroase din punct de vedere al coninutului de proteine i alte substane biologic active, indicnd perspectiva utilizrii ei. 2. Experimentele efectuate au demonstrat c structura morfologic a talului i a celulelor algei Spirulina platensis, capacitatea de reproducere i compoziia chimic a biomasei se modific n funcie de componena i concentraia apelor reziduale. 3. Concentraiile de 5-10% ape reziduale de la complexurile zootehnice de bovine, porcine i avicole, utilizate n mediile nutritive, indiferent de originea lor, nu provoac modificri eseniale n structura morfologic a talului algei Spirulina platensis, care practic nu se deosebete de cea din mediile minerale costisitoare. 4. Aspectul morfologic al Spirulinei i compoziia chimic a biomasei sufer modificri n mediile nutritive cu concentraii de ape reziduale mai mari de 10%. n concentraiile de 15% ape reziduale trihomii algei se micoreaz, iar volumul celulelor se mrete n rezultatul vacuolizrii intense, pe cnd n concentraia de 20% celulele deformate se altereaz. 5. Productivitatea Spirulinei depinde de tipul i de concentraia apelor reziduale, precum i de metoda de cultivare. Cultivarea prin metoda periodic permite obinerea a maximum 3,77 g/l BAU n cazul folosirii mediilor compuse din apele reziduale de la complexurile de bovine i numai 0,95 g/l BAU pe cele de la ntreprinderile avicole. 6. Utilizarea metodei cultivrii continue, cu extragerea a 25% din biomas peste un interval de trei zile, n cazul utilizrii apelor de la psri, asigur obinerea unei cantiti de biomas de 6,21 ori mai mari, comparativ cu cultivarea periodic a Spirulinei pe aceleai ape. 7. Cultivarea Spirulinei platensis pe medii cu adaos de ape reziduale nu diminueaz calitatea proteinei i corelaia dintre acizii aminici din componena ei, n special n biomasa obinut pe mediile cu 5% ape de la complexurile avicole i cele de bovine. 8. Folosirea biomasei de Spirulin crescute pe apele reziduale de la ntreprinderile avicole ca supliment n nutriia puilor broiler sporete viabilitatea lor cu 7%, greutatea corporal - cu 8%, creterea greutii organelor interne i mbuntirea indicilor hematologici ai sngelui. 9. Spirulina crescut pe apele reziduale de la complexurile de bovine acioneaz pozitiv n cazul administrrii pe fondul diabetului alloxanic, contribuind la meninerea greutii corporale a
21

obolanilor luai n experimente, la stabilizarea metabolismului apei, la reducerea glucozei din urin i la mbuntirea indicilor hematologici ai sngelui. RECOMANDRII PRACTICE 1. Se recomand utilizarea metodei cultivrii continue la cultivarea industrial a algei Spirulina platensis pe apele reziduale de la complexurile zootehnice n concentraii de 5%-10% cu extragerea a 25% din biomas i nlocuirea cu mediu nutritiv, n scopul obinerii biomasei calitative i ieftine. 2. Biomasa de Spirulin obinut pe baza utilizrii apelor reziduale de la complexurile BIBLIOGRAFIE 1. Amha B. The potential application of Spirulina (Arthrospira) as a nutritional and avicole se recomand ca supliment nutritiv ieftin i eficient n hrana puilor broiler.

therapeutic supplement in Health management. In: Journ. on nutriceutical and nutrition, 2002, nr. 2, vol. 5, p. 27-48. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Andrie S. . a. Program complex de valorificare a terenurilor degradate i sporirea Bacalov Iu., Crivoi A. Fitoterapia n dereglrile metabolismului glucidic. Chiinu: CEP Beneman B. Biotechnological applicaions of cyanobacteria. In: 8-th int. symp. Besker E. W. Spirulina alga of Life. In: Bull. inst. oceanolorg., 1993, nr. 12, p.141- 155. Cru I. Cultura n scar mare a algei Spirulina. Probleme i preocupri actuale. n: Ciferri O. Spirulina, the edible microorganism. In: Micob. reviews, 1983, p. 567-569. Ciferri O., Tiboni O. The biochemistry and industrial potential of Spirulina. In: Annual fertilitii solului, partea II. Chiinu: Pontos, 2004. 128 p. USM, 2009. 107 p. phototrophic procariots urbino, 1994, p. 29.

Studii i comunicri tiinifice, 2001, p. 233-238.

review of microbiology, 1985, p. 503-526. 9. 10. 11. 12. Drago N., Hodian V., Peterfi L. Spirulina: caracterizarea biologic, obinerea i

valorificarea biomasei. In: Contr. bot. univ. Cluj- Napoca, 1987, p. 235-247. Harald W. Spirulina mico food macro blessing. California: Leo Publishing Inc, 2004. 78 p. Hills C., Fujii M. The secrets of Spirulina. USA: Univ. of the Trees Press, 1980. 218 p. Mao hsh Y., Mau nwang J., Ran yeh T. Inorganic elements determination for algae. In:

Journal of food and drng analysis, 2001, nr. 3, vol. 9, p. 178-182.


22

13. 14.

Melnic B., Crivoi A. Compendium de lucrri practice la fiziologia omului i animalelor. Olguin E. et al. Annual productivity of Spirulina (Arthrospira) and nutrient removal in a

Chiinu: Lumina, 1991. 136 p. pig wastewater recycling process under tropical conditions. In: Journal of applied phycology, 2003, nr. 15, p. 249-257. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. Parich P. et al. Role of Spirulina in the control of glycemia and lipedemia in tyre 2 Ramirez L. M. Uso tradicional y actual de Spirulina sp. (Arthrospira sp.). In: Rudic V. Aspecte noi ale biotehnologiei moderne. Chiinu: tiina, 1993. 139 p. Rudic V., Gudumac V. Metode de investigaii n ficobiotehnologie. Chiinu: CEP USM, Rudic V. . a. Ficobiotehnologie - cercetri fundamentale i realizri practice. Chiinu: Rudic V., alari V., Obuh P. Tulpina Spirulina platensis (Nordst) Geitl. Calu-835Sasson A. Biotehnologii i dezvoltare. Bucureti: Editura tehnic, 1993. 303 p. alaru V., Socican I., Lupacu V. Utilizarea algelor productoare de substane biologic alaru V. .a. Biomasa algal surs alternativ de energie, produse alimentare non poluate Vetayasuporn S. The potential for using wastewaters from household scale fermented thai diabetes mellitus. In:. Med. food., 2001, v. 4, p. 193-199. Interciencia, 2006, nr. 9, vol. 31, p. 657-660.

2002. 130 p. Elena V. I. S.R.L., 2007. 206 p. productor de biomas. Brevet de invenie Nr. 169 ( MD ), publ. n Bopi, 3; 1995.

active n alimentaia psrilor. Chiinu: ICITE, 1999. 47 p. i substane biologic active. In: Stud. univers., 2007, nr. 7, p. 196-201. rice noodle factories for cultivating Spirulina platensis. In: Pakistan journal of biological sciences, 2004, nr. 7, p. 1554-1558. 25. .. . ., . . . : , 1973. 269 . 26. 25 . 27. . . . - . : , 1975. 241 . . ., . ., . .

. : . -, 2005.

23

28. 29.

. . 2. . ., . A., . A.

. B: , 2005, . 67, c. 98-110. . : , 1982. 317 c.

LISTA LUCRRILOR TIINIFICE PUBLICATE LA TEMA TEZEI


Articole n reviste recenzate: 1. Dobrojan S., alaru V., alaru V. Utilizarea apelor reziduale de la complexele zootehnice la cultivarea industrial a algei Spirulina platensis (NORDST.) Geitl. In: Studia Universitatis, nr. 6 (26), seria tiine ale naturii, Chiinu 2009, p. 46-50. 2. Dobrojan S. Utilizarea biomasei de Spirulina platensis (NORDST.) Geitl crescut pe apele reziduale de la complexele avicole n calitate de supliment nutritiv la puii broiler. In: Studia Universitatis, seria tiine ale naturii, 2010, nr. 1 (31), p. 57-61. 3. Dobrajan S. Estimarea strii ecologice a comunei Copceni, raionul Sngerei. In: Buletinul tiinific, Revist de Etnografie, tiinele Naturii i Muzeologie, 2009, vol. 10 (23), p. 151-155. 4. 28. 5. Dobrojan S., Bacalov Iu. Starea funcional a pancreasului endocrin n diabetul experimental pe fondul administrrii Spirulinei platensis crescute pe ape reziduale. In: Buletinul tiinific, Revist de Etnografie, tiinele Naturii i Muzeologie, 2009, vol. 10 (23), p. 143-149. 6. Dobrojan S., Bacalov Iu. Influena Spirulinei platensis crescute pe ape reziduale asupra indicilor hematologici n diabetul experimental. In: Studia Universitatis, seria tiine ale naturii, 2010, nr. 1 (30), p. 142-145. 7.
Dobrojan S., alaru V. V., alaru V. M., Negara C., Dobrojan G., Trofim A. Alga cianofit

Dobrojan S. Obinerea substanelor biologic active din biomasa microalgei Spirulina

platensis (NORDST.) Geitl crescut pe ape reziduale. In: Mediul ambiant, 2010, nr. 2 (50), p. 24-

Anabaenopsis sp. surs de nbogire a solului n azot. In: Simpozionul tiinific internaional Conservarea diversitii plantelor consacrat aniversrii a 60-a de la fondarea Grdinii Botanice (Institut) a AM, 2010, p. 182-186. 8. Bacalov Iu., Dobrojan S. Manifestrile clinice ale diabetului experimental la obolanii albi de laborator pe fondul administrrii spirulinei crescute pe ape reziduale. In: Buletinul Academiei de tiine a Moldovei, tiinele vieii, 2010, nr. 3 (312), p. 51 56. Teze ale comunicrilor tiinifice:
24

9. 10.

Dobrojan S. Purificarea apelor reziduale de la cretera psrilor cu Spirulina platensis Brsan G., alaru V., Dobrojan S. Posibilitatea utilizrii apelor reziduale ca mediu

(NORDST.) GEITL. CALU 835. In: International Conference of young Researches, 2008, p. 102 nutritiv pentru creterea Spirulinei platensis. In: Bioetica, Filosofia, Economia i Medicina, ediia a XIII-a, 2008, p. 162-164. 11. Dobrojan S. Cultivarea Spirulinei platensis (NORDST) Geitl. pe apele de la staia de epurare biologic din municipiul Chiinu. In: International Conference of young Researches, 2007, p. 113. 12. Dobrojan S. Cultivarea Spirulinei platensis (Nordst.) Geitl. pe apele reziduale de la complexele avicole utiliznd metoda cultivrii continue. In: Dezvoltarea cercetrii tiinifice, promovarea i cultivarea creativitii i a inovrii n procesul instruirii academice, 2010, p. 3940. 13. Trofim A., alaru V., Dobrojan S. Influena tratrii seminelor nainte de semnat cu suspensie de alge Cylindrospermum licheniforme var. alatosporul i Anabaenopsis sp. asupra dezvoltrii plantelor de castravei i tomate. In: Conferina tiinific naional cu participare internaional Probleme actuale ale microbiologiei i biotehnologiei, 2009, p. 173-174. 14. Trofim A., alaru V., Dobrojan S. Unele aspecte ale dezvoltrii algei Chaetomorpha linum (KUTZ) pe ape reziduale menagere de la staia de epurare din mun. Chiinu. In: Conferina tiinific naional cu participare internaional Probleme actuale ale microbiologiei i biotehnologiei, 2009, p. 176-177. 15. Trofim A., alaru V., Dobrojan S. Rolul algelor Cylindrospermum licheniforme f. alatosporum (KONDRAT) i Anabaenopsis sp. n procesul de epurare a apelor reziduale de la complexele zootehnice. In: Conferina tiinific naional cu participare internaional Probleme actuale ale microbiologiei i biotehnologiei, 2009, p. 178-179. 16. Dobrojan S. Negara C., Dobrojan G., alaru V. Capacitatea de fixare biologic a azotului atmosferic de ctre alga cianofit Cylindrospermum licheniforme (Bory) Ktz f. alatosporum Kondrat. In: International Conference of young Researches, 2010, p. 59. 17. Dobrojan S., Dobrojan G., alaru V. Cultivarea algei cianofite Spirulina platensis utiliznd ca mediu apele reziduale de la complexele de porcine. In: International Conference of young Researches, 2010, p. 60.

25

ADNOTARE
Dobrojan Sergiu. Modificrile morfofiziologice i biochimice ale algei Spirulina platensis (Nordst.) Geitl. cultivate pe ape reziduale i utilizarea ei: tez de doctor n biologie, Chiinu, 2011. Teza const din introducere, 4 capitole, concluzii i recomandri, bibliografie din 242 de titluri, volum total de 116 pagini de text de baz, 20 de tabele i 35 de figuri. Rezultatele obinute sunt publicate n 17 lucrri tiinifice. Cuvinte-cheie: Spirulin, aspect morfologic, coninut biochimic, complexuri zootehnice, ape reziduale, supliment nutritiv. Domeniul de studiu: 03.00.05 botanic Scopul tezei a constat n studierea modificrii morfofiziologice a Spirulinei cultivate pe medii cu ape reziduale de la complexuri zootehnice i elucidarea modificrilor biochimice i de reproducere a algei n condiii noi de cultivare; reducerea costului biomasei obinute i analiza comparativ a biomasei crescute pe medii minerale i pe cele cu adaos de ape reziduale. Obiective: studiul modificrilor morfologice i al capacitii de reproducere a Spirulinei, survenite la utilizarea apelor reziduale n calitate de mediu nutritiv; determinarea calitii biomasei obinute; implementarea metodei cultivrii continue a Spirulinei pe ape reziduale; administrarea biomasei obinute n raia alimentar a puilor broiler i n diabetul zaharat experimental. Noutatea tiinific. Au fost studiate modificrile morfologice, biochimice i de reproducere ale Spirulinei cultivate pe medii cu ape reziduale de la complexuri zootehnice, ceea ce asigur obinerea de biomas algal sporit. A fost demonstrat faptul c n concentraiile de ape reziduale pn la 5-10% alga se dezvolt bine, iar biomasa obinut, cu un pre mult mai sczut, nu se deosebete esenial de cea crescut pe medii minerale costisitoare. Problema tiinific soluionat: const n obinerea mediilor nutritive ieftine, preparate pe baza apelor reziduale de la complexurile de bovine, porcine i avicole, utilizate la cultivarea algei Spirulina platensis dup metoda cultivrii continue, care nu provoac schimbri morfologice negative ale talului i contribuie la sporirea biomasei algale valoroase, indicnd avantajele aplicabilitii ei. Semnificaia teoretic. Au fost obinute date noi referitor la: particularitile morfofiziologice ale Spirulinei crescute pe ape reziduale; posibilitatea utilizrii metodei cultivrii continue a Spirulinei pe ape reziduale cu scopul obinerii unui pre redus al biomasei algale. A fost determinat compoziia chimic a biomasei obinute. Valoarea aplicativ este exprimat n recomandrile expuse, implementarea crora va spori eficientizarea producerii biomasei de Spirulin cu un coninut biochimic valoros, cu cheltuieli reduse i perspective de utilizare a acesteia n nutriia animalelor care produc aceste reziduuri. Implementarea rezultatelor tiinifice. Rezultatele obinute au fost implementate n cadrul SRL Avicola Bulboaca. 26


. Spirulina platensis (Nordst.) Geitl., , : a , 2011. : , 4 , , 242 , 116 , 21 34 . 17 . : , , , , , . : 03.00.05 - . : , , , , . : , ; . . , . , , . : , , , Spirulina platensis, ,

.
. -, , . , , . . SRL Avicola Bulboaca.

27

ADNOTATION
Dobrojan Sergiu Morphophysiological and biochemical changes of the algae Spirulina platensis (Nordst.) Geitl. cultivated on wastewater and its use: doctor's degree thesis in biology, Chisinau, 2011. The thesis consists of introduction, 4 chapters, conclusions and recommendations, bibliography of 242 titles, in a total volume of 116 pages of basic text, 21 tables and 35 figures. The obtained results are published in 17 scientific papers. Key-words: Spirulina, morphological aspect, biochemical content, zootehnical complexes, wastewaters, nutritional supplement. Field of study: 03.00.05 botany. Purpose of work thesis: was to study the morphophysiological change of alga Spirulina platensis grown on media with wastewaters from zootehnical complexes and elucidation of the biochemical and reproductional changes of the algae growing in the new conditions of cultivation, reduction of cost of the obtained biomass and comparative analysis of the biomass grown on mineral media and on media with addition of wastewaters. Objectives: Study of morphological changes and reproductional capacities of Spirulina occurred in the use of wastewater as a nutritional medium; determination of the quality of the produced biomass; implementation of the method of continuous cultivation of method of Spirulina on wastewaters; administration of the obtained biomass to broiler chickens as nutritional supplement and to experimental diabetes. Scientific novelty: Were studied the particularities of morphological, biochemical and reproductional changes of Spirulina grown on media with wastewaters from zootehnical complexes, wait assures the obtaining of increased biomass of alga. It was demonstrated that in the concentrations of wastewaters till 5-10%, with a much more reduced price, does not differ essentiauy from that grown on expensive mineral media. Solved scientific problem: Is to obtain cheap culture medium preparations based complexes wastewater from cattle, swine and poultry used to cultivate algae Spirulina platensis by continuous cultivation method, which does not cause morphological changes negative talului and contribute to increased algal biomass valuable and indicating the advantages of its application. Theoretical significance: There were obtained new data on: the morphophysiological particularities of Spirulina grown on wastewaters, as well as, the possibility of using the continuous Spirulina cultivation method on waste waters in the aim to purpose to obtain a reduced cost of the algae biomass. The chemical composition of the obtained biomass was demonstrated. Practical value: is expressed in the proposed recommendations, the implimentation of wich will increase the efficiency of Spirulina biomass production with a valuable biochemical content with low-costs and perspectives of its usage in nutrition of animals producing the corresponding residues. Implementation of scientific results: The results have been implemented within and LLC Avicola Bulboaca. 28

DOBROJAN SERGIU

MODIFICRILE MORFOFIZIOLOGICE I BIOCHIMICE ALE ALGEI SPIRULINA PLATENSIS (NORDST.) GEITL. CULTIVATE PE APE REZIDUALE I UTILIZAREA EI

03.00.05 - BOTANIC

Autoreferatul tezei de doctor

___________________________________________________________________________ Aprobat spre tipar: 10.08.2011 Hrtie ofset. Tipar ofset. Coli de tipar.: 1,8 Formatul hrtiei 60x84 1/16 Tiraj 65 ex. Comanda nr. 115/11 Centrul Editorial Poligrafic al USM Str. Al. Mateevici 60, MD 2009, Chiinu
29