PRÁCTICAS DE MYXOMYCETES

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHE
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICO BIOLGICAS
PROGRAMA EDUCATIVO: BILOGO
MANUAL DE PRCTICAS: HONGOS
TERCER SEMESTRE
PERIODO ESCOLAR: SEPTIEMBRE - FEBRERO
HRS/SEM/MES: 5 HORAS
COMPILADOR:
OLIVIA DEL ROCO COMPEN GARCA
San Francisco de Campeche, Camp., Mxico-2008
Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas
Programa Educativo - Bilogo
CONTENIDO
PRESENTACION
UNIDAD 1 INTRODUCCION A LA MICOLOGIA Prctica No. 1 Los diferentes grupos vegetales Prctica No. 2 Morfologa de los hongos UNIDAD 2 DIVISION MYXOMMYCOTA Prctica No. 3 Aislamiento de Myxomycetes UNIDAD 3 DIVISION EUMYCOTA, SUBDIVISION PHYCOMYOTINA Prctica No. 4 Subdivisin Phycomycetes UNIDAD 4 DIVISION EUMYCOTA, SUBDIVISION DEUTEROMYCOTINA Y ASCOMYCOTINA Prctica No. 5 Deuteromycotina Sembrado, cultivo y aislamiento Prctica No. 6 Deuteromycotina Sembrado, cultivo y aislamiento (2 parte) Prctica No.7 Ascomycetes UNIDAD 5 SUBDIVISION BASIDIOMYCOTINA Y DIVISION LICHENES Prctica No. 8 Elaboracin de una clave Prctica No.9 Prctica de campo. Macromycetes y Liquenes BIBLIOGRAFA GENERAL ANEXOS Anexo I Forma de reporte de prctica 33 21 24 32 20 14 16 12 10 2 7
______________________________________________________________________
PRACTICAS DE HONGOS OLIVIA DEL R. COMPEN GARCIA
PRESENTACIN
Este
manual de practicas esta diseado para que el alumno refuerce el
conocimiento adquirido en las sesiones tericas; ayudndole a comprender las caractersticas Morfolgicas, Fisiolgicas, Taxonmicas, los Patrones de Distribucin y la Importancia Ecolgica del Reino Fungi. As como tambin el manejo de estos organismos; desde las tcnicas de colecta, cultivo, aislamiento y conservacin bsicas que ayuden a la identificacin de este importante grupo taxonmico.
Este documento esta integrado por una prctica de campo; diseada para que el alumno aprenda la metodologa de colecta, preservacin, conservacin para herbario y conozca en su medio natural los hongos (macromicetos) propios de la selva tropical. Ocho prcticas de laboratorio planeadas para que el alumno distinga, la morfologa de los micro y macromicetes, as como tambin se familiarice con el manejo de las claves para la identificacin taxonmica de ambos. As mismo, en cada prctica el alumno deber desarrollar la introduccin de cada prctica con los conocimientos adquiridos en las sesiones tericas y la investigacin documental realizada, as como que resuelva un cuestionario con conceptos analizados en el laboratorio y lo observado en cada prctica.
En esencia este manual servir de gua para que el alumno tenga a su disposicin la informacin bsica e introductoria para cubrir los objetivos del curso, persiguiendo se fortalezcan las capacidades de investigacin, indagacin y creatividad, proponiendo las alternativas mas viables conforme a la infraestructura de los laboratorios de la facultad.
______________________________________________________________________
PRCTICA NO.1
LOS DIFERENTES GRUPOS VEGETALES
Objetivo: Reconocer por medio de tcnicas de tincin y observaciones microscpica y macroscpicas los principales grupos vegetales cloroflicos y su clasificacin en procariontes, eucariontes, talofitas y cormofitas.
Recursos Materiales: -Biolgico: Cianofita Ficofita Musgo Helecho Fanergamas -Equipo: Microscopio compuesto Microscopio estereoscpico Pinza y aguja de diseccin Porta y cubre objetos Mechero Bao mara Charola de diseccin Caja de petri Tubos de ensaye Pinzas para tubo de ensaye Goteros -Reactivos: Agua destilada Lugol ______________________________________________________________________
Eritrosina Caf Bismarck Carmin Azul de Cresil Azul de Metileno Formol HCL Solucin Ringer Liquido de Schiff
Tcnica: 1. Tcnica de Feulgen para tincin nuclear: -Lave el material biolgico con agua corriente -Hidrolice con HCL N a 60 C durante 15-20 minutos (en estufa o bao mara). -Lave con agua corriente. -Coloque el material en liquido de Schiff durante 2 hrs o ms. -Pase el material a la solucin Ricanger durante 3 minutos. -Lave con abundante agua corriente. -Coloque el material en el portaobjetos. -Coloque 2-3 gotas de un colorante de contraste. -Coloque el cubreobjetos. -Quite el exceso de lquido con un lienzo, limpie el portaobjetos.
2. Diferencie entre talo y cormo. -Con las cianofitas, observe al microscopio la estructura general. -En las ficofitas observe la constitucin, arreglo de las clulas y la estructura de reproduccin. -En el musgo obsrvelo en el estereoscopio y seale el rizoide, caulidio y filidios, la seta y la cpsula.
______________________________________________________________________
-En el helecho observe la raz, tallo y hojas. En el corte transversal del tallo, seale la epidermis, corteza, tejidos conductores y mdula. -En la fanergama observe la raz, tallo, hojas, flor, fruto y semilla.
3. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas, indicando el nombre de cada una de las estructuras observadas.
6. Reportar de la manera acostumbrada.
Cuestionario: 1.- Cul es la funcin de la tcnica de Feulgen? 2.- Qu papel juega el reactivo Schiff en la tcnica? 3.- Para que se agrega el colorante de contraste? 4.- Qu grupo estudiado present un ncleo procaritico? 5.- Qu grupos presentaron ncleo eucaritico? 6.- Qu grupos presentan talo? 7.- Qu grupos presentan cormo? 8.- Histolgicamente como diferenci entre una talfita y una cormofita? 9.- Cmo se presentan las estructuras reproductoras en las talfitas y en las cormofitas?
______________________________________________________________________
PRCTICA NO.2
MORFOLOGA DE LOS HONGOS
Fundamentacin: Objetivo: Que el alumno conozca y se familiarice con las principales caractersticas morfolgicas de los hongos.
Recursos Materiales: -Biolgico: Cultivo de hongo Levadura(Saccharomyces cerevisiae) Setas -Equipo: Microscopio compuesto Microscopio estereoscpico Pinza y aguja de diseccin Porta y cubre objetos Mechero Triangulo de vidrio Caja de petri Pipeta pauster Asa de sembrado Aguja de diseccin Bistur Pizeta Papel secante -Reactivos: Agua destilada Azul de algodn solucin acuosa al 0.5% Verde de malaquita solucin acuosa al 7.6% Safranina solucin acuosa al 0.25% ______________________________________________________________________
Floxina solucin acuosa al 0.5% Solcin acuosa de hidrxido de potasio al 2-3%
Tcnica: 1. Elaborar preparacin de micelios, teir con azul de algodn. 2. Elaborar un frotis de levadura, tiendo con verde de malaquita y safranina. 3. Hacer un corte delgado del cuerpo fructfero, en caso de que este seco colocarlo en la solucin acuosa de KOH aadiendo unas gotas de floxina para teir los tejido, si este no se encuentra deshidratado, teir directamente. 4. Reconocer y diferenciar las variantes que presentan los talos: -Estructuras ramificadas y filamentosas. -Estructura miceliar y levaduriforme. 5. Reconocer y diferenciar: -Estructuras de reproduccin o propgulos, de tipo sexual (esporas), de tipo asexual (conidios), pileo, lamelas, estpite. -Pared, ncleos, septos. -Tipo de tejido fngico -Estructuras de resistencia. -Tipos de hifas: Septadas, cenocticas (aseptadas); en espiral, nodosas;
pectinadas; en candelabro fvico; en raqueta; unicelulares (levaduriformes); seudohifas; vesiculosas.
6. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas. 7. Reportar de la manera acostumbrada.
______________________________________________________________________
BIBLIOGRAFA
-Deacon J.W., 1988. Introduccin Micologa Moderna. Limusa Noriega, Mxico. 350 p. -Guzmn G., 1990. Identificacin de los Hongos de Mxico. Limusa. Mxico. 424 p. -Lpez M. R., 1995 Micologa Mdica. Editorial Trillas. Mxico. -Herrera T., Ulloa M., 1998. El Reino de los Hongos. Micologa bsica aplicada. Fondo de Cultura Econmica. Mxico. 550 p.
______________________________________________________________________
PRCTICA NO. 3
AISLAMIENTO DE MYXOMYCETES
Objetivo: Diferenciar las principales caractersticas morfolgicas vegetativas y reproductivas de algunos Myxomycetes.
Recursos Materiales: -Biolgico: Diferentes sustratos como corteza de rboles vivos o troncos en
descomposicin. Hojuelas de avena esterilizadas. -Equipo: Estereoscopio Cmara hmeda forrada con papel filtro o toallas de papel. -Reactivos: Caja de petri con medio harina de maz agar .
Tcnica: 1. Colocar pedazos delgados de corteza o de tronco en la cmara hmeda forrada con el papel filtro o toallas de papel; los pedazos de papel son remojados durante una noche y al da siguiente se escurre el agua sobrante y se incuba a temperatura de laboratorio. 2. Examinar en estereoscopio despus de cuatro o cinco das, localizar los plasmodios y transferir a la caja de petri que contiene el medio harina de maz agar a mitad de concentracin normal. 3. Despus de que el plasmodio alcance un tamao suficientemente grande como para ser visto sin ayuda del estereoscopio, transferirlo a otra placa de medio de harina de maz agar para obtener un cultivo puro donde ser
alimentado por hojuelas de avena esterilizadas. 4. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas. 5. Reportar de la manera acostumbrada. ______________________________________________________________________ 10
Cuestionario 1. Qu tipo de plasmodio observo? 2. Qu ocurre con el plasmodio cuando hay formacin de esporangios? 3. Qu producen las esporas de un myxomycete?
BIBLIOGRAFA -Herrera T., Ulloa M., 1998. El Reino de los Hongos. Micologa bsica aplicada. Fondo de Cultura Econmica. Mxico. 550 pag.
______________________________________________________________________ 11
PRCTICA NO.4
SUBDIVISIN PHYCOMYCETES
Objetivo: Al finalizar la prctica el alumno conocer las principales caractersticas morfolgicas, de aislamiento y sustratos sobre los que se desarrollan algunos miembros de esta subdivisin.
Recursos Materiales: -Biolgico: Diferentes sustratos como semillas de caamo, granos de polen, papel celofn, pelo humano desengrasado con ter, piel de vbora, exoesqueleto de camarn o moscas muertas. Detritus vegetal obtenido de un lago o charco y del suelo. -Equipo: Cajas de petri Pinzas de diseccin Bistur -Reactivos: Agua destilada estril
Tcnica: 1. Para el aislamiento de ficomicetes acuticos colocar una pequea cantidad de detritos vegetal, o aproximadamente dos cucharaditas de suelo, en la caja de petri y aadir agua destilada estril hasta una profundidad de 5 mm. No aadir demasiado detritus o suelo, ya que esto har que el suelo se descomponga e impida realizar los aislamientos. El aislamiento puede comenzarse con agua de charco o de lago, esta se vaca en las cajas de petri sin necesidad de agregar detritos. 2. Aadir una pequea cantidad de carnada a la superficie; utilizar vario trozos de carnada en cada caja de petri, no mezclar diferentes tipos de carnada, ______________________________________________________________________ 12
para no dificultar las observaciones. Los granos de polen en pequea cantidad pueden ser espolvoreados sobre la superficie del agua. El exoesqueleto de camarn, celofn y piel de vbora debern ser esterilizados sumergindolos rpidamente en agua hirviendo y cortados en cuadros pequeos para caber debajo del cubreobjetos cuando se realice la observacin al microscopio. Las semillas de caamo deben ser sumergidas brevemente en agua hirviendo para ablandar la testa y esterilizarlas superficialmente, despus cortadas a la mitad antes de ser colocadas en el agua como carnada. 3. Dejar las cajas de 3 a 4 das. Antes de ser examinadas con el microscopio. 4. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas indicando el nombre de las estructuras identificadas, as como el de los organismos aislados. 5. Reportar de la manera acostumbrada.
Cuestionario 1. De qu manera podra obtener un cultivo monoespecfico de los hongos encontrados? 2. Por qu podemos empezar el aislamiento utilizando agua de charco o lago sin utilizar detritos, a diferencia de cuando lo hacemos con agua destilada? 4. Cul es la finalidad de esterilizar las carnadas antes de ponerla en la caja de petri?
______________________________________________________________________ 13
PRCTICA NO.5
DEUTEROMYCOTINA Sembrado, cultivo y aislamiento Objetivo: El alumno se familiarice con las tcnicas de cultivo ms comunes para el estudio de algunos hongos microscpicos.
Recursos Materiales: -Biolgicos: Mohos provenientes de distintos medios amilceos Suelo -Equipo y Reactivos: Microscopio compuesto Microscopio estereoscpico Estufa Tres tubos con 10ml de papa dextrosa agar Medio de agar rosa de bengala espectromicina Seis cajas de Petri esterilizadas Gradilla para tubos Pinzas estriles Mechero de gas Asa para siembra Lpiz de cera Cinta adhesiva Cubre bocas
Tcnica: Para hongos que crecen en medios amilceos 1. Vaciar los tubos con 3ml de medio de cultivo en tres cajas de Petri esterilizadas. Esto se hace junto a la flama del mechero y levantando la ______________________________________________________________________ 14
tapa de la caja solamente lo necesario para verter el medio de cultivo. Dejar enfriar el medio en las cajas hasta que solidifique. 2. Destapar el frasco que contienen los cultivos de hongos. Se esteriliza el asa para siembra y se deja enfriar; se toma con el asa un poco de micelio por cultivar, sobre todo hifas con esporangios. Se siembra en la caja de petri.
Para aislamiento de hongos de suelo 1. Colocar una pizca de suelo con las pinzas estriles en el centro de una caja de petri, triturando todo agregando de suelo presente. Si el suelo es muy hmedo tratar previamente con calor a 60-70 C durante una hora. 2. Aadir de 8 a 10 ml del medio de agar rosa de bengala espectromicina fundido y enfriado a una temperatura aproximada de 45 C, para evitar matar los organismos que estn en el, dispersando las partculas de suelo por todo el medio.
La caja sembrada se invierte y se unen la tapa y la base con cinta adhesiva para evitar que entre aire y contamine el medio, incubar a temperatura de laboratorio. Se observa diariamente y se hacen las anotaciones pertinentes.
Revisar las cajas de petri con los cultivos de hongos y anotar lo observado (nmero de colonias, aspecto, color, dimensiones y dems caracteres tiles para su identificacin).
BIBLIOGRAFA -Gavio Gonzalo. et al. 1979. Tcnicas biolgicas selectas de laboratorio y campo. Limusa. Mxico. 251 pp. -Lpez M. R., 1995 Micologa Mdica. Editorial Trillas. Mxico.
______________________________________________________________________ 15
PRCTICA NO.6 DEUTEROMYCOTINA Sembrado, cultivo y aislamiento (2 parte)
Objetivo: El alumno se familiarice con las tcnicas de cultivo ms comunes para el estudio de algunos hongos microscpicos.
Recursos Materiales: -Biolgico: Cultivo de hongos en caja de Petri -Equipo y Reactivos: Seis tubos con papa dextrosa agar inclinado esterilizados Azul de algodn lacofenol Gelatina glicerinada Bao Mara a 45C-50C Cubre y porta objetos Asa bacteriolgica Mechero Pinzas de diseccin Vernier Ligas Cubre bocas
Tcnica: 1. Escoger de cada caja dos micelios con caracteres lo ms diverso posible. Hacer una preparacin fresca de cada uno, colocando una gota de agua en un portaobjetos. Se esteriliza el asa en la flama del mechero, se deja enfriar y se coloca cerca de la flama la caja de Petri, se abre solo lo necesario para introducir el asa, tomar un poco del micelio de uno de los hongos; el cual se coloca un la gota de agua del portaobjetos. Observar al microscopio con ______________________________________________________________________ 16
menor y mayor aumento. Anotar todos los caracteres perceptibles, identificar consultando una micologa. 2. Una vez escogidos los dos micelios diferentes, sembrar en los tubos con agar inclinado, cada uno en tres tubos distintos. Para hacer esto, se coloca cerca de la flama la caja de Petri con el micelio, se esteriliza con la flama el asa y se deja enfriar. Se levanta un poco la tapa de la caja y se toma un poco de micelio o esporas. Despus, sin que el asa toque algn objeto, se acerca uno de los tubos con medio de cultivo y se destapa para
introducirle el asa con la muestra de hongo. Se desliza en lnea recta por la mitad del medio de cultivo, cuidando de no romperlo. Se tapa el tubo con el algodn previamente flameado. El algodn se flamea sostenindolo con pinzas de diseccin.) 3. Terminada la siembra, etiquetar cada uno de los tubos anotando: nmero de caja de donde se tom el micelio, fecha, nombre o iniciales de quien realizo la siembra. 4. Tapar cada uno de los tubos con dos papeles estao o aluminio de aproximadamente seis centmetros, ajustados con una liga, dndole una o dos vueltas para cerrar hermticamente. Colocar en posicin vertical en la gradilla y dejar incubar a temperatura ambiente durante diez o quince das. Al cabo de este perodo se habrn desarrollado nuevos micelios que se examinarn al microscopio estereoscpico y con los cuales se harn preparaciones fijas. 5. Cuando aparezcan los micelios, se procede a resembrarlos en tubos con medio inclinado o bien a hacer observaciones directas de preparaciones en el microscopio. 6. Reportar de la manera acostumbrada.
Preparaciones frescas: 1. Escoger cuatro micelios que muestren caractersticas diferentes y que provengan de cajas o tubos diferentes. 2. Colocar una gota de agua en un portaobjetos. ______________________________________________________________________ 17
3. Esterilizar el asa con la flama y deje enfriar. Destape un tubo de cultivo de los que se prepararon previamente, introducir el asa hasta el micelio para tomar una muestra, colocarla en la gota de agua del portaobjetos. Adicionar un portaobjetos. Observar de menor a mayor aumento. En caso necesario agregar azul de algodn, rojo neutro o cualquier otro colorante vital para destacar las estructuras por observar.
Preparaciones semipermanentes: Estas pueden obtenerse reemplazando el agua con azul de algodn lactofenol y sellando los bordes del cubreobjetos con varias aplicaciones de esmalte de uas transparente 1. Poner una o dos gotas de azul de algodn lactofenol en una orilla del cubreobjetos, extraer el agua desde la orilla opuesta del cubreobjetos con un pedazo de papel toalla o secante, de manera que el azul de algodn lactofenol reemplace al agua. 2. Sellar con esmalte de uas.
Preparaciones permanentes: 1. Tomando las mismas precauciones anteriores par evitar la contaminacin, se toma con el asa estril y cerca de la flama, un poco de micelio del tubo 2. Se coloca en el portaobjetos sobre una gota de agua. Se tapa el tubo y con la aguja de diseccin se extiende el micelio. 3. La preparacin se fija a calor pasando varias veces la superficie inferior del portaobjetos por la flama del mechero, hasta que se caliente de tal manera que no queme al tocarlo. 4. Poner la preparacin ya fijada en un triangulo de vidrio colocado dentro de una caja de Petri. Dejar enfriar. 5. Agregar unas gotas de azul de algodn extendindolas sobre el micelio, dejar actuar el colorante durante diez minutos. Licuar la gelatina glicerinada mientras se tie la preparacin. ______________________________________________________________________ 18
6. Lavar la preparacin con agua destilada, dejando caer esta lentamente sobre el portaobjetos, el agua se escurre sobre un vaso de precipitado hasta que esta salga sin colorante. 7. Secar la preparacin, bordes y parte inferior del portaobjetos, con papel secante o filtro, no secar la superficie que tiene el micelio esta se seca al aire libre. 8. Tomar con un agitador delgado o con un gotero, un poco de gelatina glicerinada licuada y poner una pequea gota encima del micelio teido. Realizar esto con cuidado para evitar que se formen burbujas, si estas se forman, desbaratarlas colocndoles la punta de una aguja caliente. 9. Colocar el cubreobjetos antes de que solidifique. Pasar la superficie inferior del portaobjetos por la flama del mechero hasta que la gelatina cubra todo el cubreobjetos. Limpie el excedente con papel filtro en caso de que este escurra por los bordes. 10. Deje solidificar la gelatina por diez o veinte minutos. Rotule la preparacin, pegndole un membrete en el que se anota: nombre de la tcnica usada, fecha, tipo de hongo y nombre de quien realizo la preparacin.
11. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas indicando el nombre de las estructuras identificadas, as como el de los organismos aislados. 12. Reportar de la manera acostumbrada.
Las preparaciones permanentes como semipermanentes debern mostrar la estructuras reproductoras del hongo. Estas debern ser entregadas junto al reporte de prcticas, identificando los hongos a clase, orfen, familia y gnero. Si es posible tambin deber indicarse la especie.
______________________________________________________________________ 19
PRACTICA NO. 7 ASCOMYCETES
Objetivo: Que el alumno se familiarice con algunas caractersticas morfolgicas de los Ascomycotina.
Recursos Materiales: -Biolgico: Diferentes ejemplares de ascomycetes: Cultivo joven y viejo de levadura (Saccharomyces cerevisiae) -Equipo: Microscopio estereoscpico Microscopio compuesto Porta objetos Cubre objetos Pipeta pauster -Reactivos: Agua destilada Azul de algodn
Tcnica: 1. Observar las clulas vegetativas de las levaduras en los diferentes estados de gemacin, 2. Elaborar un frotis de levadura, tiendo con verde de malaquita y safranina. Identificar ascas con ascosporas. 3. Observe diferentes ascocarpos al estereoscopio, hacer cortes longitudinales, teir e identificar: acas, ascosporas, peridio, parlisis y ostiolo.
______________________________________________________________________ 20
PRCTICA NO.8 ELABORACION DE UNA CLAVE
Fundamentacin:
Objetivo: Al trmino de la prctica el alumno podr elaborar una clave basndose en las caractersticas morfolgicas distintivas de un conjunto de elementos orgnicos e inorgnicos.
Recursos Materiales: -Biolgico: -Diferentes ejemplares de hongos -Equipo: Diferentes ejemplares de hongos Tcnica: 1. Separe los elementos del conjunto de manera dicotmica hasta que, en pasos sucesivos se tengan subconjuntos constituidos por dos elementos cada uno; en algunos casos un subconjunto puede estar constituido por un elemento. En cada caso de separacin anote las caractersticas que us para hacer dicha separacin. En este caso procure que las caractersticas que usadas sean mutuamente excluyentes. Por ejemplo: Con rosca Sin rosca Con punta Sin punta Procure no usar caractersticas diferentes para separar en grupos, por ejemplo: Con agujero - Con rosca
______________________________________________________________________ 21
2. Al separar los grupos, escoja la caracterstica ms simple que sirva para hacerlo en cada paso. 3. Enumere las operaciones de dos en dos yendo de lo general ( las caractersticas comunes al conjunto formado) distintiva del ltimo elemento) ejemplo: 1 a. Alargado, con rosca y punta..2 1 b. Redondo, sin rosca y sin punta.8 2 a. Con cabeza, rosca en todo el cuerpo...3 2. b. Sin cabeza, rosca en lamitad anterior del cuerpo..5 a lo particular (la caracterstica
Y as construya su clave. Material Biolgico. Clasifique el material proporcionado, organicelo en jerarquas taxonmicas (taxas) y d el nombre adecuado, siguiendo las reglas de la clasificacin biolgica:
Reino: Nombre arbitrario Divisin: Nombre terminado en mycota Subdivisin: Nombre terminado en mycotina Clase: Nombre terminado en mycetes Orden: Nombre terminado en mycetidae Familia: Nombre terminado en ales Gnero: Un solo nombre latinizado Especie: Un solo nombre latinizado
Cada categora o jerarquia taxonmica debe agrupar a los elementos de acuerdo con un criterio. Este puede ser naturaleza, funcin, organizacin, morfologa, origen, etc.. Haga las divisiones sucesivas de acuerdo con las jerarquias; en este caso, las divisiones no necesariamente va a hacerse de manera dicotmica.
______________________________________________________________________ 22
CUESTIONARIO
1. Qu es una clave? 2. Qu tipode taxonoma se aplica al usar una clave? 3. Qu tipo de clave se utiliza en la actualidad?
______________________________________________________________________ 23
PRACTICA No.9 PRCTICA DE CAMPO (MACROMYCETES y LIQUENES)
Fundamentacin: Objetivos: 1. Aprender la metodologa para la colecta, fijacin, preservacin y determinacin de hongos. 2. Conocer en su medio la flora micolgica de selva del estado de Campeche. 3. Fomentar y aumentar la capacidad de observacin, investigacin, sntesis y crtica que debe cumplir todo profesionista de la biologa 4. Constituir con este tipo de estudios un banco de datos bsico que pueda utilizarse como antecedente para investigaciones ms detelladas y diversas.
RECURSOS MATERIALES: -Equipo: Una libreta de campo y lpiz semi duro Una cesta plana y extendida Guantes de ltex Cuchillo o navaja de campo bien afilada Bolsas de papel estraza de diferentes tamaos Papel blanco Lupa Rejilla con fuente de calor para secar los hongos Vernier Regla de madera Cmara fotogrfica (35 mm) Caja de plstico (plexigls) Termmetro Frasco de vidrio o plstico de 200 ml ______________________________________________________________________ 24
Papel encerado (hojas de 30 x 30 cm) Brjula Pala de jardinera Desuhumidificador 3 goteros Bolsas de plstico de 15 x 10 cm aprox. -Reactivos: HCL al 10% 50ml NaOH al 10% 50ml H2O2 al 50ml al 3% que es la presentacin comercial. Agua destilada 500ml en una pizeta Papel pH Perlas de Naftalina
Tcnica: Colecta 1.-La colecta del material micolgico se har excavando con el cuchillo o navaja, de tal manera que se pueda sacar totalmente con todo y sus partes subterrneas, o al menos con la base completa. Se colectarn solo ejemplares en buen estado. Se recomienda no daar ni destruir ejemplares "no recolectables.
2.-Colectar dos o tres ejemplares de la misma especie, disponiendo de ejemplares de todas las edades, el material colectado inmediatamente, colquese sobre una hoja de papel encerado ya cortada, hgase un paquete y depostese en la canasta.
3.-En la libreta se anotarn, nmero de colecta, el nombre de la localidad lo ms exacto posible (Estado, municipio, Km. al N, S, E, O, etc). Se anotar tambin fecha, tipo de terreno y caractersticas de suelo, tipo de vegetacin del lugar (rboles, hierbas que crecen al rededor, etc) en caso de ______________________________________________________________________ 25
no conocer el nombre de las plantas, se tomar una muestra de esta, y se herborizar, para su posterior identificacin. Pero sobre todo debern anotarse y estudiarse las caractersticas inmediatas perecederas del hongo, anotarse y estudiarse las caractersticas tales como: Forma del cuerpo fructfero; color de cada una de las partes de dicho cuerpo, incluyendo la interna y las partes subterrneas; color de las esporas en masa (por medio de una esporada), presencia o ausencia de cualquier estructura o caracterstica del cuerpo fructfero, llamativa a la vista; por ejemplo: escamas, verrugas, pelos, espinas, poros (generalmente debajo del sombrero, es muy importante el contar cuntos hay en un mm), grietas, estras, viscosidad, carnosidad, etc.; cambios de color de cualquiera de las partes, ya sea al maltratarse o cortarse (para ello se corta el hongo con una navaja y se observa si cambia o no de color); presencio o no de jugo lechoso o ltex al cortarse el hongo; color del ltex y si cambia de color al exponerse al aire. Olor del hongo (principalmente de la carne) Sabor de la carne, para ello se masticar suavemente un pequeo fragmento del cuerpo fructfero, se saborea y se escupe. No existe ningn peligro en probar hongos venenosos, si se escupe inmediatamente y se enjuaga la boca con agua. El anillo y la copa que presentan el pie de algunos hongos son estructuras valiosa para la identificacin, pero son muy delicadas y poco durables en el cuerpo fructfero del hogo que se maltrata por lo que debern ser estudiadas en el momento de la recoloeccin (ver anexo). 4.- Una fraccin de la muestra se utilizar para el anlisis o la determinacin especfica, y la otra para realizar un herbario de hongos que permitir contar con material micolgico de esa localidad.
Preparacin de una esporada
1- Se retira la piel de la seta.
______________________________________________________________________ 26
2. -Se corta el pie del hongo si es que tiene y se coloca el sombrero con las laminillas hacia abajo, sobre una hoja de papel blanco.
3. -Al cabo de unas horas (8 hrs.) Se levanta el sombrero y se encontraran sobre el papel depositadas una gran masa de esporas a manera de polvo fino. Este dato es muy importante para la identificacin de muchos hongos. Se doblar el papel, se sellar y etiquetar, para anlisis microscpico posterior. Secado para herbario
1- Los especimenes grandes y carnosos deben abrirse longitudinalmente y extenderse o desdoblarse sobre la reja o malla de alambre, debajo de la cual deber existir una fuente de calor. Cbrase todo el dispositivo con papel peridico, para proporcionar un ambiente clido y libre de humedad, dejando hendiduras entre los peridicos para permitir el paso del aire a travs de la maya de alambre, y desalojo de la humedad que desprendida por los hongos. La temperatura ms recomendable es entere los 35C y 37C.
2. - Ya secos los hongos se depositan en bolsas de papel, que contenga una etiqueta que indique los datos contenidos en la libreta de campo, as como un poco de insecticida. Las bolsas se depositan en una caja hermtica de plstico con un poco de deshumidificador dentro de la caja. Retirar el deshumidificador durante el traslado del material.
3. - Los hongos de tipo leoso son fciles de conservar simplemente limpindolos, secndolo, y guardndolos convenientemente, con sus datos respectivos, ya que este tipo de hongo no sufre cambios notables como los carnosos. , que en el secado pierden su aspecto original.
______________________________________________________________________ 27
Lquenes.
Sern colectados, siempre que sea posible, con una pequea porcin del sustrato donde se encuentran adheridos. Colquelos dentro de bolsitas individuales de plstico y ponga en cada una de ellas los datos correspondientes. En la libreta de campo adems registre los datos del hbitat. Para conservarlos se limpiarn y secarn, para guardarlos en cajas hermticas con un poco de naftalina.
Determinacin sencilla de algunos rasgos edficos.
1. -Con la pala extraer una muestra de suelo (que quepa en la palma de la mano) debajo de la capa de races, de cada ambiente visitado.
2. - Humedecer con agua formando una especie de rodillo de 2 cm de ancho por 8 de largo. Realice las pruebas que se sealan a continuacin:
Textura:
a) Huella Si en el rodillo quedan grabadas las huellas de los dedos, es indicador de que el suelo tiene alto contenido de arcilla que revela una relativa abundancia de nutrientes y una dificultad en el drenaje y en la aeracin de los suelos; si se trata de fondos de cuencas, podra esperarse anegamiento. Si no se graban las huellas, entonces es posible que se trate de suelos no arcillosos, ms pobres en nutrientes, con mejor drenaje y aireacin.
b) Doblado
______________________________________________________________________ 28
Intente doblar el rodillo: si se logra (como plastilina), es que el contenido de arcilla es alto; Si no, lo contrario es cierto.
c) Morder las partculas Tome un pedacito de suelo humedecido y murdase con cuidado. Si se siente como piedras diminutas duras, se trata de un suelo con cierta cantidad de
arena; por otro lado, si la sensacin es la de morder talco, entonces predominan los limos. Si se siente que se disuelve, est compuesta de arcilla primordialmente. Lo ms comn es que los tres tipos de partculas estn presentes en diferentes proporciones, por lo que hay que desarrollar un poco la habilidad para diferenciarlas.
d) Manchado Si el suelo al manejarlo hmedo en las manos deja manchas persistentes, es indicador de un nivel de arcilla alto.
e) Escuchar Tomar una pizca de muestra entre los dedos ndice y pulgar, estrujndose cerca del odo para escuchar el sonido que produzcan; si se escucha un chirrido, es de esperar que el suelo contenga una elevada proporcin de arena; si no se escucha, es que predominan limos y arcillas.
Para las siguientes pruebas se tomar una muestra que se dividir en cuatro porciones y se aplicar una prueba a cada una.
Acidez o alcalinidad:
a) Papel pH A la muestra del suelo, se le agregar agua destilada, se agita y se deja reposar por 30 min. Despus se vuelve a agitar y se pone en contacto con el papel pH, para determinarlo. ______________________________________________________________________ 29
b) HCL Se aplicar gotas a la muestra del suelo y se observarn los efectos. Se establecer una escala comparativa de cual fue el suelo con mayor efervescencia y cul con menos. Registra los resultados en la tabla. El ms reactivo tendr pH ms alcalino y el menos ms cido. Comnmente la aplicacin de HCL con fines de diagnstico de suelos es usada para determinar la presencia de carbonatos, los cuales suelen ser abundantes en los suelos bsicos.
c) Se proceder en la misma forma que el apartado anterior, esta ves aplicando la misma cantidad de NaOH a un a submuestra de cada tipo de suelo. La escala comparativa mostrar que el suelo ms alcalino es el que menos reacciona, mientras que el ms cido es el que presenta mayor efervescencia.
Contenido de materia orgnica:
H2O2 A la ltima submuestra de suelo de cada ambiente se le aplicar agua oxigenada, e este caso, la mayor efervescencia la mostrar el suelo que presente mayor contenido de materia orgnica. Orden tus observaciones conforme a la siguiente tabla:
Ambiente Nombre HCL NaOH pH H2O2 ______________________________________________________________________ 30

X XX XXX XXXX XXXXX
= Nula Reactividad = Poca reactividad = Regular = Alta = Muy alta reactividad
Reportar de la manera acostumbrada y entregar de coleccin biolgica.
______________________________________________________________________ 31
BIBLIOGRAFA GENERAL
-Becker Georges. 1989 2a. ed. El Gran Libro de las Setas (Hongos y setas de Europa) Susaeta Ediciones S. A. Madrid, Espaa. 319 pp.
-Deacon J.W., 1988. Introduccin Micologa Moderna. Limusa Noriega, Mxico. 350 p.
-Gavio Gonzalo. et al. 1979. Tcnicas biolgicas selectas de laboratorio y campo. Limusa. Mxico. 251 pp.
-Guzmn Gastn. 1990.Identificacin de los hongos (Comestibles, venenosos y alucinantes) Limusa Noriega. Mxico. 451 pp.
-Guzmn G., 1990. Identificacin de los Hongos de Mxico. Limusa. Mxico. 424 p.
-Herrera T., Ulloa M., 1998. El Reino de los Hongos. Micologa bsica aplicada. Fondo de Cultura Econmica. Mxico. 550 pag.
-Lpez M. R., 1995 Micologa Mdica. Editorial Trillas. Mxico.
-Mille P. S:R:; Parra A. Prez
CH. 1993. Gua para la identificacin de.
Invertebrados. Trillas. Mxico 465 pp.
-Surez G. Ana Isabel, Carmona V. Toms. 1998. Ecologa general. (Manual de prcticas) Universidad Veracruzana. Mxico. 65 pp.
_____________________________________________________________________________________________________ PRACTCAS DE HONGOS OLIVIA DEL R. COMPEN GARCIA
32
ANEXOS
ANEXO I
FORMA DE REPORTE DE PRCTICA.
PORTADA Logotipo de la UAC y de la Facultad Nombre de la Universidad Nombre de la facultad Nombre del programa educativo Nombre de la asignatura Grado en el que se imparte Perodo escolar en el que se imparte Nombre del maestro responsable de la asignatura Nombre del alumno Fecha de elaboracin NMERO DE LA PRCTICA NOMBRE DE LA PRCTICA INTRODUCCIN. Incluye justificacin y objetivo MATERIALES Y MTODOS UTILIZADOS. Incluye procedimientos, materiales, equipo, reactivos de laboratorio, muestra biolgica. RESULTADOS OBTENIDOS. En stos resultados se pueden incluir dibujos, tablas o grficas. OBSERVACIONES Y ANLISIS DE RESULTADOS CONCLUSIONES CUESTIONARIO RESUELTO BIBLIOGRAFA CONSULTADA
_____________________________________________________________________________________________________ PRACTCAS DE HONGOS OLIVIA DEL R. COMPEN GARCIA
33

PRÁCTICAS DE MYXOMYCETES

Încărcat de

Informații document

Descriere originală:

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

PRÁCTICAS DE MYXOMYCETES

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHE

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICO BIOLGICAS

PROGRAMA EDUCATIVO: BILOGO

MANUAL DE PRCTICAS: HONGOS

PERIODO ESCOLAR: SEPTIEMBRE - FEBRERO

OLIVIA DEL ROCO COMPEN GARCA

San Francisco de Campeche, Camp., Mxico-2008

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

manual de practicas esta diseado para que el alumno refuerce el

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

6. Reportar de la manera acostumbrada.

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Floxina solucin acuosa al 0.5% Solcin acuosa de hidrxido de potasio al 2-3%

pectinadas; en candelabro fvico; en raqueta; unicelulares (levaduriformes); seudohifas; vesiculosas.

6. Dibujar detalladamente las observaciones realizadas. 7. Reportar de la manera acostumbrada.

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

PRCTICA NO.6 DEUTEROMYCOTINA Sembrado, cultivo y aislamiento (2 parte)

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

PRACTICA NO. 7 ASCOMYCETES

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

PRCTICA NO.8 ELABORACION DE UNA CLAVE

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

Facultad de Ciencias Qumico Biolgicas

Programa Educativo - Bilogo

PRACTICA No.9 PRCTICA DE CAMPO (MACROMYCETES y LIQUENES)