Lucrarea Practic Nr.

6 Aminoacizii reacii de recunoatere

Definiie. Aminoacizii sunt compui organici cu funciuni mixte ce conin n molecul o grupare aminic primar i o grup carboxil. n soluie apoas se prezint sub form complet ionizat, de amfion (ion cu ambele tipuri de sarcini. Aceste sarcini se neutralizeaz reciproc, astfel nct aminoacizii au caracter amfoter (neutru), sunt amfolii. Se vor comporta ca acizi n reacia cu bazele i ca baze, n reacia cu acizii.

R-CH-COOH NH2 aminoacid

R-CH-COO+ NH3 amfion

1. Reaciile aminoacizilor cu acizii i bazele. Aminoacizii formeaz sruri att cu acizii ct i cu bazele. Reacia cu acizii. Aminoacizii formeaz cu acizii anorganici i unii acizi organici sruri stabile, cristalizate, uor solubile sau mai greu solubile n ap. Ele servesc la identificarea aminoacizilor prin punctele lor de topire caracteristice (clorhidrai, picrai etc.)

R-CH-COO- + H+ + NH3 R-CH-COO- + HClconc. + NH3

R-CH-COOH +NH 3

R-CH-COOH +NH Cl3

clorhidrat al aminoacidului Mod de lucru. La o soluie concentrat a unui aminoacid n ap se adaug o soluie concentrat de acid clorhidric i se nclzete. Dup rcire separ sarea (clorhidratul) cu punct de topire caracteristic.
Reacia cu bazele. Aminoacizii formeaz cu hidroxizii, carbonaii i bicarbonaii alcalini sruri solubile n ap.

R-CH-COO+ NH3

+ HO-

R-CH-COO- + H2O NH2

R-CH-COO- + NaOHdil. H2N-CH-COO-Na+ + H2O + NH3 R Mod de lucru. Se dizolv circa 0,05-0,1 g de aminoacid n soluii diluate de NaOH, Na2CO3 sau NaHCO3. Se obin amestecuri clare ale srurilor aminoacizilor folosii. Reaciile chimice specifice aminoacizilor se impart n dou mari clase: reacii chimice ce au loc la gruparea COOH i reacii chimice specifice grupei NH2

Reacii specifice grupei COOH a aminoacidului.

2. Reacia de decarboxilare. Prin nclzirea aminaocizilor peste punctual lor de topire, acetia se decarboxileaz i trec n amine. Este o reacie important n obinerea aminelor biogene (cadaverina, putresceina), a celor biologic active (histamina) i a neurotransmitorilor (GABA-acidul -aminobutiric). n organism, decarboxilarea este catalizat de o serie de enzime (decarboxilaze specifice). Mod de lucru laborator. Circa 0,1 g aminoacid se nclzete ntr-o eprubet curat i uscat, la o temperatur ridicat, peste punctul lui de topire. Dioxidul de carbon care se degaj se barboteaz ntr-o soluie de Ba(OH)2, cnd se obine o tulbureal: CO2 + Ba(OH)2 Ba2CO3 + H2O

R-CH-COOH NH2 CH2-NH2 (CH2)2 CH-NH2 COOH ornitina

R-CH2-NH2 + CO2

CH2-NH2 (CH2)2 ornitin decarboxilaza CH-NH2 NH2 putresceina lizin decarboxilaza CH2-(CH2)3-CH2 NH2 NH2 cadaverina CH2-CH2-NH2 N N histamina + CO2 + CO2

CH2-(CH2)3-CH-COOH NH2 lizina NH2

CH2-CH-COOH N N NH2 histidin decarboxilaza histidina COOH (CH2)2 CH-NH2 COOH acidul glutamic glutamic decarboxilaza COOH (CH2)2 CH2-NH2 (GABA) + CO2

+ CO2

3. Reacia cu pentaclorura de fosfor (PCl5). Prin tratare cu pentaclorur de fosfor, aminoacizii se transform n cloruri acide.

H2N-CH-COOH + PCl5 CH3

Cl-NH3+-CH-COCl + POCl3 CH3 clorur acid

4. Reacia de esterificare. Cu alcoolii n mediu acid, aminoacizii formeaz esteri, care avnd grupa COOH blocat, sunt mai bazici dect aminoacizii iniiali.

O CH3-CH-COO- + CH3CH2OH NH3+ alanin HCl CH3CHC-OCH2CH3ClNH3+ clorhidratul alanin-esterului (95%) Esterii aminoacizilor se pot izola sub form de sruri. Liberi, sunt instabili.

5. Reacia de acilare. Aminoacizii ce prezint n molecul o grup aminic primar sau secundar reacioneaz cu clorurile acide, n prezena unei baze, formnd N-acilderivai. n cele mai multe cazuri, acilarea se realizeaz cu clorur de benzoil (a doua reacie) n soluie concentrat de NaOH.

Reacii specifice grupei NH2 a aminoacidului.

(p)O2N-C6H4-COCl + H2N-CH-COOH clorura acid a CH3 acidului p-nitrobenzoic H2N-CH2-COOH + C6H5-COCl glicin

HO-HCl

(p)O2N-C6H4-CO-NH-CH-COOH CH3 N-acil derivat HOOC-CH2-NH-CO-C6H5 benzoilglicin (acid hipuric)

NaOH -HCl

Mod de lucru. Se fierbe soluia de aminoacid (2-3 mL soluie) cu 2-3 mL piridin i cteva cristale de clorur a acidului p-nitrobenzoic; sub agitare, se adaug o soluie diluat de carbonat de sodiu, cnd apare o coloraie roie sau violet, care persist la rcirea rapid a soluiei. Reacia este negativ n cazul aminoacizilor substituii la azot sau la grupa carboxil. Similar se procedeaz practic i pentru a doua reacie. 6. Reacia de alchilare. Se realizeaz cu un agent de alchilare: (CH3)2SO4 sau CH3Cl. Se obin N-alchil derivai.

+ 3(CH3)2SO4 CH3-CH-N+(CH3)3 CH3-CH-NH2 - 3H2SO4 COOH COOalanina betaine 7. Reacii de condensare cu compui carbonilici. Prin gruparea NH2 liber aminoacizii dau numeroase reacii de condensare cu compui carbonilici (aldehide i cetone) cu formare de baze Schiff.

H3C CH3-CH-NH2 COOH alanina + (H3C)H -H2O

O CH3-CH-N=C

CH3 H(CH3) COOH baz Schiff (aldimin, cetimin)

+ CH2O + CH2O CH3-CH-COOH CH3-CH-COOH CH3-CH-COOH NH2 NH-CH2OH HO-H2C-N-CH2-OH Aceti -aminoacizi care prezint n molecul grupa aminic primar reacioneaz uor cu aldehida formic (CH2O) n mediu bazic (condensare aldolic) , blocnd grupa amino.Prin aceasta se mrete caracterul lor acid.
Mod de lucru. Circa 0,2 g se aminoacid se dizolv n puin ap, se neutralizeaz, dac este necesar i se trateaz cu 1-2 picturi de rou de metil. Apare o coloraie galben, care la adugare de formaldehid (circa 3 mL) trece n rou cu o tent portocalie. 8. Reacia cu ureea. Aminoacizii formeaz cu ureea, n prezena Ba(OH)2, ureideacizi care precipit cu azotat mercuric. Ba(OH)2 HOOC-CH2-NH2 + H2N-CO-NH2 HOOC-CH2-NH-CO-NH2 -NH3 glicin uree ureide-acizi Mod de lucru. ntr-un balon de sticl se introduc 1-5 mg de aminoacid, se adaug un exces de uree i 2-3 mL dintr-o soluie saturat de hidroxid de bariu i se fierbe sub reflux 30 minute. Dup rcire se adaug puin ap, ionul de Ba2+ precipit cu un current de CO2 i se filtreaz soluia obinut. Filtratul se evapor la sec ntr-o capsul de porelan, iar reziduul se reia cu puin ap i soluia astfel obinut se picur n 5080 mL amestec 1:1 alcool etilic eter etilic. Precipitatul depus se filtreaz, se spal cu amestec de alcool etilic eter pentru ndeprtarea urmelor de uree, se dizolv n puin ap i dup filtrare s etrateaz cu o soluie diluat de azotat mercuric. Prin adugarea a 2-3 picturi de soluie de NaOH, se formeaz un precipitat alb, voluminos, solubil n exces de hidroxid de sodiu. 9. Reacia cu acidul azotos (HNO2). Conduce la hidroxiacizi, cu degajare de azot. Reacia este folosit pentru dozarea grupelor NH2 libere, msurndu-se azotul produs.

CH3-CH-COOH + O=N-OH -H2O (HNO2) NH2 alanina

H3C-CH-COOH N=N-OH

-N2

CH3-CH-COOH OH acid lactic

n general, aminoacizii reacioneaz diferit cu acidul azotos, n funcie de caracterul aliphatic sau aromatic al grupei amino. Aminoacizii aromatici se diazoteaz cu acidul azotos la temperatur joas (circa 05C, baie de ghea).Srurile de diazoniu obinute se pot cupla apoi , n mediu puternic alcalin, cu fenoli formnd colorani azoici.

OH HOOC NH2 HNO2/HCl sau NaNO2 + HCl 0-5 grade C - 2H2O OH N=N HOOC + N N ] Cl- + NaOH

acid p-aminobenzoic

sare de diazoniu beta-naftol + HCl (NaCl)

HOOC

colorant rosu-orange

Mod de lucru.0,05-1 g aminoacid se trateaz cu 1-1,5 mL HCl diluat i se rcete amestecul la circa 0C, apoi se trateaz cu 1-1,5 mL soluie NaNO2 10%. Amestecul se toarn peste o soluie alcalin de -naftol. Se obine un precipitat rou-orange caracteristic de colorant azoic. (o coloraie roie-orange caracteristic n volumul de soluie). 10. Degradri oxidative. Cu diveri ageni oxidani (KMnO4, K2Cr2O7), aminoacizii pot da aldehide imediat inferioare sau nitrili. + [O] CH3-CH=O + CO2 + NH3

CH3-CH-COOH + 2[O] NH2 CH3-CN + 2H2O + CO2 11. Dezaminarea oxidativ. Decurge n dou stadii dintre care primul este catalizat enzimatic. Se obine un iminoacid care reacioneaz repede cu apa, formnd un cetoacid. CH3-CH-COOH NH2 alanina catalizat enzimatic CH3-C-COOH + 2[H] NH iminoacid CH3-C-COOH + NH3 O acid piruvic

CH3-C-COOH + H2O NH

Proprieti fizice. Izomerie optic - completare Aminoacizii sunt substane solide cristaline cu puncte de topire ridicate. Sunt uor solubili n ap foarte greu solubili n solveni organici nepolari. Prezint izomerie optic, ca urmare a prezenei unui atom de carbon asimetric n molecul. (carbonul ). n natur sunt rspndii doar aminoacizii din seria -L aminoacizi. -L alanina se prezint sub forma unei perechi de izomeri optic active (enantiomeri):

COOH H2N CH3

alfa-L-aminoacid

HOOC H H H3C
alfa-D-aminoacid

NH2

(formule de proiecie Fischer)

Importan biologic: -aminoacizii joac roluri foarte importante n organsimul uman:

particip activ i direct la biosinteza proteinelor; la sinteza de vitamine i de poliamine; sinteza bazelor purinice i pirimidinice; la sinteza de molecule active biologic; ca surs de energie; formeaz situsul activ al enzimelor; intr n structura coenzimelor; rol important n transmiterea impulsului nervos; particip la conjugarea cu compui endo- i exogeni.

Bibliografie
1. Maria Dorneanu, Eugenia tefnescu, Odette Rogut, Chimie organic. Sinteze i reacii de recunoatere, 2002, Editura Gr.T.Popa, Iai, Universitatea de Medicin i Farmacie. 2. Mircea Iovu, Chimie Organic, 1999, Editura Didactic i Pedagogic, Bucureti. 3. Valeriu unel, Chimie Organic, curs litografiat, 1991, Univ. Al.I.Cuza, , Iai, Facultatea de Chimie. 4. Veronica Dinu, Eugen Truia, Elena Popa-Cristea, Aurora Popescu, Biochimie Medical, mic tratat, 2000, Editura Medical, Bucureti.