UNIVERSIDAD NACIONAL DE GENERAL SAN MARTN Escuela de Posgrado

Susceptibilidad a insecticidas en Blattella germanica (Dictyoptera: Blattellidae) y monitoreo de resistencia en poblaciones de la ciudad de Buenos Aires y alrededores

Daro Rubn Taiariol

Director de tesis: Dra. Claudia Viviana Vassena Co-director de tesis: Dra. Mara Ins Picollo Lugar de Trabajo: Centro de Investigaciones de Plagas e Insecticidas

CIPEIN-CITEFA-CONICET

Tesis presentada para optar al ttulo de Magister en Control de Plagas y su Impacto Ambiental

Ao 2001

ndice pag. I.
1. 2. 3. 4. 5. 6.

Introduccin.
Generalidades. Ubicacin taxonmica. Desarrollo de B. germanica. Biologa y comportamiento. Control qumico de B. germanica. 5.1. Insecticidas. Resistencia a insecticidas. 6.1. Manejo de resistencia. 6.2. Deteccin y medicin de resistencia. 1 5 6 8 10 10 12 15 18 20 21 21 21 21 21 24 24 25 27 27 28 30 30 32 38 40

II.

Objetivos.

III. Materiales y Mtodos.

1. Material Biolgico. 1.1. Colonias de insectos. 1.2. Recoleccin a campo. 1.3. Origen de las poblaciones utilizadas. 1.4. Mantenimiento del material recolectado. 1.5. Preparacin del material biolgico para los ensayos. Insecticidas. Mtodo de aplicacin de insecticidas. Determinacin de la lnea base de susceptibilidad. Determinacin de la resistencia.

2. 3. 4. 5.

IV.
1. 2.

Resultados y Discusin.
Determinacin de la lnea base de susceptibilidad. Determinacin de la resistencia.

V. VI.

Conclusiones. Bibliografa.

A Mis Padres

Agradecimientos
Mi profundo agradecimiento a las Dras. Claudia Viviana Vassena y Mara Ins Picollo por acompaarme continuamente en el transcurso de esta tesis, guindome en todo momento y por su afecto brindado. Al Dr. Eduardo Zerba por su inters en mi trabajo, su apoyo, sus consejos y por brindarme todos los medios para la realizacin de este trabajo. Al Dr. Ral Alzogaray por su constante ayuda, por su humor y afecto. A la Sra. Susana Segovia que pacientemente y con aprecio transmiti su conocimiento en la cra de insectos. A la Lic. Adriana Martnez por su cario y enseanzas en el rea de la qumica. A la Dra. Andrea Fontn por sus opiniones y consejos y el afecto ofrecido. A la Dras. Paola Gonzlez Audino y Susana Licastro, al Dr. Hctor Masuh y Sra. Emilia Seccacini, por su colaboracin cuando necesitaba algo. Al seor Fernando Melgar e Ing. Agr. Esteban Parodi que me permitieron acompaarlos en sus trabajos y recolectar insectos en los distintos establecimientos, por sus consejos y hospitalidad. A mi familia, mis padres que siempre me brindaron infundieron amor y respeto por todos los seres de este mundo, a mis hermanos que me apoyan en todo y a mis sobrinos por cario constante. Agradezco a las siguientes Instituciones. A la Universidad Nacional de General San Martn (UNSAM) y al Instituto de Investigaciones Cientficas y Tcnicas de las Fuerzas Armadas (CITEFA), institucin a la que pertenece el Centro de Investigaciones de Plagas e Insecticidas (CIPEIN), lugar donde realic este trabajo.

de

, de 199

Dr. Eduardo N. Zerba Director Maestra en Control de Plagas y su Impacto Ambiental Universidad Nacional de San Martn Por medio de la presente solicito que apruebe la realizacin de mi Tesis de Maestra, cuyos detalles describo a continuacin. Tema: Director: Codirector: Lugar de trabajo: Fecha estimada de inicio: Adjunto un breve resumen del Plan de Trabajo. Sin otro motivo, me despido de Ud. Firma: Nonbre y Apellido:

Maestra en Control de Plagas y su Impacto Ambiental Tesista: Ttulo de la Tesis: Resumen del Plan de Trabajo (no ms de una carilla)

Proyecto de Tesis Tesista: Ingeniero Agrnomo Daro R. Taiariol Director: Dra Claudia V. Vassena Codirector: Dra Mara Ins Picollo Lugar de Trabajo: Centro de Invbestigaciones de Plagas e Insecticidas. Iniciacin: Agosto de 1998 Ttulo: Estudio sobre la Susceptabilidad a Insecticidas y Deteccin de Focos de Resistencia en Blatella germnica. Sntesis del Plan de Trabajo: Introduccin: La cicaracha Blatella germnica es una de las plagas domesticas ms importantes a nivel mundial. Su xito como plaga se debe a sus hbitos tales como: alimentacin omnvora que le permite aprovechar todas las fuentes alimenticias, actividad nocturna que la protege de predadores y puesta de huevos en ootecas protectoras de deshidratacin y predacin. Blatella germnica es una especie cosmopolta, que vive en interiores prefiriendo lugares con bao y cocina ya que necesitan alta humedad y temperaturas calidas. Su control qumico con insecticidas neurotxicos est actualmente limitado por el desarrollo de resistencia, y sta se traduce en una disminucin de la efectividad del producto que lleva a fallas de control en campo. La aparicin de resistencia en una poblacin se debe al resultado de la interaccin insecto plaga- insecticida. En esta interaccin se seleccionan individuos que por distintos mecanismos bioqumicos y fisiolgicos son capaces de tolerar mayores dosis del compuesto. Como esta capacidad est determinada genticamente es heredable a nuevas generaciones que seguirn

sobreviviendo al tratamiento con insecticida mientras seguir disminuyendo la proporcin de individuos susceptibles. De esta manera el insecticida acta como una fuerza selectiva poderosa que concentra la poblacin individuos resistentes. Sabemos que el desarrollo de resistencia en una poblacin de indiduos depende exclusivamente de la interaccin entre la plaga y el plaguicida que se est usando para su control. En muchos casos de esta interaccin surge resistencia no slo hacia el plaguicida en uso sino tambin hacia otros plaguicidas relacionados. Esta resistencia cruzada es el fnomeno por el cual el mecanismo desarrollado por una cepa de insectos para resistir al insecticida que se le est aplicando, le confiere adems resistencia a otros insecticidas no presentes en el ambiente. La resistencia cruzada es uno de los principales obstaculos en la bsqueda de insecticidas alternativos para el control y la responsable que muchos nuevos productos encuentren resistencia a campo antes de su primera aplicacin. Cuando la resistencia se ha establecido, entre las alternativas posibles para revertir el fnomeno, las ms importantes son reemplazar el activo utilizado para el control por otro al cual no haya cruzamiento o adicionar a la formulacin un sinergista que bloquee el mecanismo detoxificante causa de la resistencia, como por ejemplo butxido de piperonilo como inhibidor de monooxigenasas microsomales. Son numerosos los productos que han sido utilizados y que se usan en el control de Blatella germnica. esto nos hace plantear la necesidad de monitoreo de resisitencia. Actualmente los insecticidas de mayor uso son: deltametrina, cipermetrina, clorpirifos y fenitrotion. Objetivos:

De acuerdo a estos antecedentes el objetivo del plan de trabajo es el estudio de la lnea de base de susceptabilidad a los distintos principios activos mencionados, con el fin de establecer patrones de respuesta txica a insecticidas de distinto modo de accin en una colonia de referencia mantenida en el CIPEIN desde 1990. Adems se recolectarn muestras de cucarachas de campo en lugares de alta presin de uso de cucarachicidas para detectar focos de resistencia en la Ciudad de Buenos Aires. De acuerdo con los datos de lnea de base de susceptibilidad se determinar si existe resistencia a estos activos y de ser as los respectivos niveles de resistencia. Sobre posibles poblaciones de cucarachas con resistencia detectada a determinados insecticidas, se realizarn estudios sobre los mecanismos involucrados. Para ello se establecern patrones de resistencia cruzada a insecticidas con igual y distinto modo de accin y se estudiar el efecto de sinergstas como el butxido de piperonilo en la posible reversin del fenmeno de resistencia. Los resultados obtenidos permitirn estimar el mecanismo de resistencia involucrado para proponer formas alternativas de control. Resultados esperados: Como resultado de estos estudios se espera contibuir al conocimiento de la toxicocintica de principios activos insecticidas en cepas locales de Blatella germnica y al relevamiento de la resistencia a los insecticidas actualmente en uso. Se espera caracterizar el fenmeno de resistencia en base a los mecanismos involucrados para revertir o demorar su aparicin. Material Biolgico:

Ninfas y Adultos de Blatella germnica cepa susceptible CIPEIN, colonia mantenida en nuestro laboratorio a .... C y .... % de HR y ....:.... hs luz: oscuridad. Metodologa: a) Determinar de la lnea de base de susceptibilidasd: A partir de los datos de mortalidad a distintas concentraciones de activos, se obtendrn los parmetros DL50 y DL95 ( concentraciones de activos que topicados sobre los insectos, matan el 50 % y el 95 % de los insectos tratados, respectivamente) y DD (dosis discriminate, equivalente a 2 x DL50, que eleimina a los individuos susceptibles pero no los resistentes). Para el calculo de estos parmetros estadsticos se usar un software ad hoc (EPA probit analysis program 1.4). b) Determinacin y estudio de la resistencia: Los valores de DL50 sern determinados en las distintas muestras de campo y para cada principio activo. En base a estos valores y a los establecidos para la cepa de referencia (CIPEIN), se calcularn los niveles de resistencia segn: Grado de resistencia: DL50 cepa resistente DL50 cepa referencia El parmetro Grado de Resistencia (GR) indica para cada insecticida, cuantas veces ms producto se debe aplicar a la cepa resistente para obtener el mismo resultado de mortalidad que en la cepa susceptible.

Introducci n

Objetiv os

Materiales y Mtodos

Resultados y Discusin

Conclusio nes

Bibliograf a

Resumen La cucaracha Blattella germanica (L.) es una de las plagas domsticas ms importantes a nivel mundial. El control qumico con insecticidas neurotxicos est actualmente limitado por el desarrollo de resistencia, hacia un amplio rango de insecticidas. El objetivo de este trabajo fue estudiar la susceptibilidad de una cepa de laboratorio (CIPEIN) hacia los insecticidas ms usados en el control de esta plaga, y detectar resistencia a estos insecticidas en poblaciones de cucarachas recolectadas en establecimientos alimenticios de Buenos Aires. Se encontr resistencia a cipermetrina, deltametrina, clorprifos y fenitrotion, en todas las muestras estudiadas. El insecticida cipermetrina aplicado de acuerdo a la DL99 fue el que produjo menor mortalidad indicando la mayor resistencia. Se detecto resistencia a fenitrotion a pesar de no haber sido utilizado en los establecimientos, indicando posible resistencia cruzada. Los niveles de resistencia determinados para deltametrina, variaron entre 7,3 x para la muestra Uriburu, hasta 75,4 x en la muestra El Horno. La resistencia generalizada demostrada a insecticidas organofosforados y piretroides sugiere la necesidad de rotar a compuestos con distinto modo de accin, con distintos caminos degradativos. Palabras claves: Blattella germanica, resistencia a insecticidas , Buenos Aires. Abstract The cockroach Blattella germanica (L.) is an important cosmopolitan urban pest. The use of neurotoxic insecticides is actually limited by resistance development. In this work, the susceptibility baseline to the major insecticides used for cockroach control, was established and resistance to these compounds was studied in field populations from Buenos Aires. Resistance to cypermethrin, deltamethrin, chlorpyrifos and fenitrothion was detected in all field samples evaluated. The highest supervivence after DL 99 topical application, was found for cypermethrin. fenitrothion resistance was found in cockroach coming from places where this insecticide has not been used, suggesting cross-resistance. Resistant ratios for deltamethrin ranged from 7,3 x in Uriburu sample to 75,4 x in El Horno sample. The widespread resistance demonstrated to organophosphate and pyrethroid insecticides suggests the necessity of rotating with insecticides with different mode of action, or different degradative mechanisms. Key words: Blattella germanica, resistance to insecticides, Buenos Aires.