Les techniques de linformation gntique :

La culture de la bactrie qui porte le plasmide ou se trouve clon le gne dintrt agronomique (la culture se fait sur milieu liquide une temprature de 28C avec agitation pendant 48 heures. 30 ml de milieu froid sont inocul par lancienne culture et plac dans les mme conditions pendant 24 heures. Linfection des ex-plants. Les explants utiliss peuvent tre constitu de diffrentes parties dune

plante : on peut utiliser des disques de tubercules ou de micro-tubercule. Le milieu liquide de bactrie est centrifug et la suspension bactrienne est solubilise dans un milieu MS liquide. les explants sont tromps dans la solution pendant une heure lobscurit temprature ambiante. Aprs linfection en passe la co-culture cest--dire la culture de de bactrie et lexplant La rgnration : (calognes rgnration de posse enracinement) laddition dantibiotiques ensemble dans un milieu solide et lobscurit pendant une heure 20C (pas dantibiotiques slectifs).

slectifs est obligatoire pour distinguer les pousses transformes de celle non transformes.

PCR
La technique de PCR : cest une technique dont le champ dutilisation est trs vaste : technique de marqueur molculaire, technique de clonage des gnes, lappareil utilis pour faire cette manipulation sappelle thermocycleurs. La PCR comporte diffrentes phases : o Phase de pr-dnaturation 94C pendant 2 minutes. o Phase dnaturation de lADN 94C pendant 1 minutes. o Phase dhybridation des amorces (temprature gnralement 55C, 1min) o Phase dlongation une temprature de 70C (T optimale de la polymrase). o Phase darrt dlongation 70C, 2 3 min. rpts 3 fois

La transgnse
La biotechnologie agricole est un ensemble de techniques scientiques qui permettent damliorer les plantes, les animaux et les microorganismes. Grce leur comprhension de lADN, les scientiques ont labor des solutions permettant daugmenter la productivit agricole entre autre la transformation gntique qui constitue un outil puissant damlioration. En effet, ce processus permet de transfrer les caractristiques utiles (par exemple, la rsistance une maladie) dans une plante en y insrant des gnes (ADN) prlevs dans un autre organisme. Presque toutes les cultures amliores jusqu aujourdhui par transfert dADN (souvent appeles cultures gntiquement modies ou OGM) lont t pour aider les agriculteurs augmenter la productivit en rduisant les dommages causs aux cultures par les mauvaises herbes, les maladies ou les insectes. Par exemple des tudes ont t faites pour amliorer la rsistance de pomme de terre contre la Rzoctonia solani par introduction de deux gnes rip 30 et chi A qui codent la

synthse de deux enzymes chitinase et glyconase. Cest deux enzyme dgradent la chitine et le glucane qui se trouvent en abondance sur la paroi de la cellule de Rzoctonia solani. Donc par laction combine des deux gnes les tubercules ont une rsistance accrue au Rzoctonia solani. De mme des expriences ont montrs que linhibition de la catalase acclre la leve de dormance et la germination des tubercules de pomme de terre, Ces expriences consistent introduire les gnes Cat2 de Nicotiana plumbaginifolia et SU2 de Gossypium hirsutum codant lisoforme CAT2 de catalase et cette transformation gntique faite via Agrobacterium tumefaciens. Les deux constructions pCat2AS (Cat2, orientation anti-sens) et pCatGH (SU2, orientation sens) sont efficacement rprimer l'activit CAT et donc acclre la germination des tubercules. La biotechnologie accrot la capacit des phytognticiens damliorer les cultures et le btail. Elle ouvre la porte des amliorations qui seraient impossibles en utilisant seulement le croisement traditionnel despces apparentes.