Sunteți pe pagina 1din 25

Vitamine liposolubile vitamina C vitamina D

Curs 4

Vitamina C

Vitamina C
Este cea mai rspndit vitamin natural Producia mondial de vitamin C este pe primul loc n ierarhia vitaminelor produse pe cale biotehnologic Comercializat sub forma unui amestec de acid ascorbic, ascorbat de sodiu i/sau ali ascorbai Foarte instabil la modificri de temperatur, pH, oxigen dizolvat i atmosferic, enzime, sruri, glucide, ionii metalelor grele

Vitamina C
Prezent n toate celulele animale i vegetale Majoritatea organismelor animale sunt capabile de sinteza vitaminei C - excepii: organismul uman, unele primate, porcii de guineea, microorganisme Surse: plante verzi (ardei gras rou i verde, roii, varz de Bruxelles) i fructe (citrice, kiwi, cpune, pepene galben) Ctina- coninut de 10x mai mare dect portocalele

Funciile vitaminei C n organism


cofactor pentru diverse reacii metabolice:
catabolismul tirozinei biosinteza epinefrinei catabolismul acizilor biliari biosinteza catecholaminelor hidroxilarea prolinei steroidogeneza

esenial pentru sinteza colagenului agent de reducere n reacii de hidroxilare faciliteaz absorbia fierului n organism antioxidant

Procedee industriale de obinere a vitaminei C


Se bazeaz pe semisintez: etape fermentative cuplate cu transformri biochimice i cu reacii chimice Etapa biotehnologic de bioconversie a L-sorbitolului n L-sorboz este realizat de Gluconobacter oxydans subsp. suboxydans i

Acetobacter suboxydans

Etapele producerii industriale a vitaminei C


1. 1. 2. 2. 3. 3. 4. 4. 5. 5. 6. 6. 7. 7. Reducerea chimic D-Glucoz L-sorbitol Reducerea chimic D-Glucoz L-sorbitol Bioconversie L-sorbitol L- sorboz L- sorboz Bioconversie L-sorbitol Acetonare L-sorboz diacetonsorboz Acetonare L-sorboz diacetonsorboz Oxidarea diacetonsorboz acid diaceton acid diaceton Oxidarea diacetonsorboz 2 cetoL-gulonic 2 cetoL-gulonic Hidroliza acid 2 cetogulonic acid 2 cetogulonic Hidroliza Enoliza acid 2 cetogulonic Enoliza acid 2 cetogulonic Formarea acidului L- ascorbic Formarea acidului L- ascorbic

Sinteza vitaminei C

Procedee industriale de obinere a vitaminei C


1. Cultivare n sistem submers, discontinuu, cu aerare i agitare randament L-sorboz 98% dup 20 40ore - Activitatea metabolic a bacteriei Gluconobacter oxydans este inhibat de ionii de nichel.

2. Cultivare n sistem continuu, sistem format din mai multe bioreactoare legate n serie sau dintr-un singur bioreactor care prezint curgere laminar, dispus pe vertical. + Asigur obinerea unor randamente superioare de bioconversie, ntruct iniial este stimulat formarea de biomas, care particip ulterior la bioconversie, ca surs de enzime. Pentru mbuntirea productivitii de L-sorboz se adaug exogen L-sorbitol, astfel nct n etapa de bioconversie concentraia de substrat s fie de 33-50%.

3. Utilizarea tulpinilor modificate genetic

de Gluconobacter oxydans capabile s produc un nou complex de enzime implicate n bioconversia direct (ntr-o singur etap) a D-sorbitolului n acid 2-ceto L-gulonic: sorboz-dehidrogeneza (SDH) i sorbozon-dehidrogenaza (SNDH).

Mecanismul de bioconversie a D-sorbitolului n acid 2 ceto L- gulonic


D- sorbitol L- sorboz L- sorbozon Spaiul periplasmic Membrana Citoplasma SLDH SDH SNDH D sorbitol dehidrogeneza D sorboz dehidrogeneza D sorbozon dehidrogeneza SNDH SLDH SDH L- sorbozon Acid 2 ceto L-gulonic

4. Conversia direct a glucozei n acid 2,5diceto D gulonic cu Erwinia mutant (70%) Conversia acidului 2,5 diceto D gulonic n acid 2 ceto L gulonic se face de ctre mutani de Corynebacterium sau Brevibacterium 4. Tulpin de Erwinia modificat genetic cu genele ce codific biosinteza enzimelor implicate n formarea acidului 2 ceto L- gulonic.

Vitaminele D
vitamina D1 (combinaie a vitaminei D2 cu lumisterol) vitamina D2 (colecalciferol, ergocalciferol) vitamina D3 (colecalciferol, 7dehidrocolesterol activat) vitamina D4 (22,23 dihidroergocalciferol) calcitriolul (1,25-dihidrocolecalciferol)

Principalele provitamine D
Ergosterolul i 7dehidrocolesterolul iradiere cu UV vitamina D2 (ergocalciferol) vitamina D3 (colecalciferol)
1,25dihidroxivitamina D2 (plante) 1,25dixidroxivitamina D3 (piele)

25-OHase

24-Ohase (CYP24A1)

1-OHase

Deeb et al (2007) Nature

Osteoporoza

Surse de vitamina D
Cea mai important pentru oameni: radiaii solare UVB (1000 UI/ min) Lmpi cu UV Surse alimentare naturale: pete gras (somon, ton, macrou), ficat de vit, ciuperci, glbenu de ou Produse alimentare fortifiate: lapte, iaurt, unt, margarin, cereale, produse din soia Suplimente de vitamin D

DRZ: 5g/ zi sau 400UI/zi

Raze ultraviolete de tip B

Particularitile biotehnologice ale obinerii ergosterolului i vitaminei D2

Surse industriale pentru obinerea ergosterolului: fungi, alge verzi i brune Drojdii: Saccharomyces ellipsoideus, S. cerevisiae Rhodotorula glutinis Mucegaiuri: Penicillium weslingii, Aspergillus sp. Bacterii: Mycobacterium rubrum

Biotehnologia obinerii ergosterolului cu tulpini fungice


Productori industriali: Saccharomyces carlsbergensis, S. cerevisiae (>10g ergosterol/100g s.u.biomasa) Aspergillus sp., Penicillium sp. Factori limitativi la cultivarea drojdiilor * Acumulare intracelular de scualen (precursorul ergosterolului) are loc n anaerobioz, dar transformarea lui n ergosterol are loc n prezena a 0,03-2% oxigen * Compoziia mediului de cultur:carbon n exces i azot n concentraii minime (substrat: N-alcanii)

Metode de stimulare a procesului de biosintez a ergosterolului


adaos de acid pantotenic, derivat structural al coenzimei A iradierea biomasei cu raze Roentgen (inhibarea aminrii, implicate n biosinteza lipidelor) adaos de antibiotice (nistatina i filipina) la S. cerevisiae concentraia ridicat de inocul folosit la amorsarea procesului fermentativ

Biotehnologia obinerii ergosterolului cu tulpini fungice


Biosinteza sterolilor nu este n corelaie direct cu creterea celulelor i acumularea de biomas. La drojdii acumularea maxim de steroli ncepe la sfritul fazei exponeniale i continu pe parcursul fazei staionare. Dup obinerea biomasei i separarea de lichidul cultural urmeaz prelucrarea pentru conversia ergosterolului n vitamina D2, urmat fie de extracia i purificarea vitaminei, fie de prelucrarea biomasei brute, pentru obinerea concentratelor furajere (preparate comerciale de drojdii furajere bogate n vitamina D2)

Resurse video suplimentare


Understanding Vitamin D http://www.youtube.com/watch?v=onSPZ0aBUKM Dr. Oz on The Importance of Vitamin D http://www.youtube.com/watch?v=6D9aANoN0-Y Vitamin D: UV The Original Source - How to Use It 43 min http://www.youtube.com/watch?v=uMiswBTjNls Vitamin D Synthesis (extras din filmul anterior) http://www.youtube.com/watch?v=xwNhd2pQL0k

Produs comercial Ap fortifiat