Universidade dos Aores Angra do Herosmo Ano letivo 2012/2013 Mestrado Integrado em Cincias Farmacuticas

Biologia Celular

Relatrio Cientfico-Experimental

Capacidade de regenerao do

Sphagnum Palustre quando

exposto a condies extremas

Docente: Rosalina Gabriel Discentes: - Amadeu Cmara - Filipe Alves - Joana Paquete Angra do Herosmo, 27 de Dezembro de 2012 1

NDICE

I Resumo ..............

pg. 3

II - Introduo .. pg. 4 III Metodologia pg. 9

IV - Resultados. pg. 12 V Discusso dos Resultados.. pg. 16 Concluses...... pg. 19

Bibliografia...... pg. 21 Anexos. pg. 22

I RESUMO

Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade de regenerao do esfagno (Sphagnum Palustre), quando exposto a ambientes extremfilos (baixas e altas temperaturas) e, em seguida colocalos num meio de cultura favorvel ao seu crescimento, sendo este igual para todos os ensaios, durante quatro semanas. Para o nosso estudo tnhamos trs ensaios: o primeiro ensaio foi mantido num ambiente favorvel para o seu crescimento, sendo este o de controlo; o segundo ensaio foi sujeito a um ambiente de calor, com uma temperatura de 36C; e o terceiro ensaio foi exposto a um ambiente de frio de -5C. O segundo e terceiro ensaios foram sujeitos a estes ambientes durante um perodo de 12 horas. A cada semana, os trs ensaios (o controlo, o exposta ao calor e o exposta ao frio), foram analisados ao microscpio ptico para a realizao da contagem dos seus cloroplastos. Tambm mediu-se o tamanho de quatro eixos de cada recipiente de cada ensaio, de modo a avaliar o seu crescimento ao longo do tempo.

Inferiu-se

que

ambos

os

tratamentos de frio e de calor causam danos na planta e que a regenerao da planta difcil nas condies em que ns realizamos o estudo. No entanto, de salientar que entre elas existiu algumas diferenas ao longo das semanas: o nmero de cloroplastos existentes nas plantas expostas ao frio era sempre maior que o nmero de cloroplastos das plantas

expostas ao calor. Verificou-se, tambm, que na segunda semana as amostras de esfagno sujeitas aos tratamentos de calor e de frio no cresceram, mas na terceira semana j se verificou um ligeiro

crescimento de cerca de 0,1/0,2 cm. Os eixos que sofreram o tratamento do frio mostraram, sensivelmente, um maior

crescimento do que os eixos que sofreram o tratamento do calor. Ao fim de quatro semanas, os ensaios que tinham sido sujeitos a tratamentos de frio e de calor encontravam-se mortos. Assim, a regenerao desta planta no foi bem sucedida.

Alves F. Cmara A. Paquete J., Capacidade de regenerao do Sphagnum Palustre quando exposto a condies extremas, Biologia Celular, Universidade dos Aores Plo de Angra do Herosmo 2012. Este um artigo de acesso aberto: a cpia e redistribuio deste artigo so permitidas em todos os meios para qualquer finalidade, desde que esta nota seja preservada, juntamente com a indicao original do artigo.

II - INTRODUO
O nosso planeta tem vindo a experimentar vrias alteraes climticas, que se tm agravado no ltimo sculo. O ritmo entre as alteraes climticas tem sofrido uma forte acelerao e a tendncia que tome propores ainda mais caticas, caso no sejam tomadas medidas. A ocorrncia de ondas de calor e secas so fenmenos cada vez mais frequentes, tal como vagas de frio, e as consequentes perdas agrcolas e biolgicas representam uma ameaa real para as economias e biossistemas As mundiais. turfeiras (WWF, 2012) um Vrios pases tm se dedicado a investigar as suas prprias turfeiras,

nomeadamente: Canad, Nova Zelndia, Portugal, Austrlia, Tasmnia e Chile (Mendes, 2012). Em Portugal, a riqueza em turfeiras predomina na Regio

Autnoma dos Aores. O desenvolvimento de estudos e a sua publicao contribuem para enriquecer o conhecimento acerca das espcies presentes nessas turfeiras,

principalmente sobre o Sphagnum. A Universidade dos Aores tem vindo a desenvolver estudos cientficos sobre

encontram-se

zonas hmidas e espcies associadas a decorrer sob a responsabilidade do GEVA. A Regio Autnoma dos Aores possui vastas extenses de rea natural com um elevado grau de pureza, que albergam a quase totalidade dos

pouco por todo o mundo, excepto na Antrctica. Segundo Mendes, cientistas estimaram que existem cerca de 386 a 409 milhes de hectares deste tipo de

comunidade espalhados por 5 continentes. A mesma fonte diz que a sua rea representa cerca de 5-8% da superfcie terrestre mas, estando a sua formao dependente de factores climticos a

ecossistemas insulares. Porm, notvel que a ocupao progressiva do territrio das ilhas pelo Homem e as suas aces tm reduzido drsticamente as reas naturais e, consequentemente, diminuem a

maioria destas comunidades limita-se zona temperada do Hemisfrio Norte, tal como ilustra a figura seguinte.

diversidade das espcies existentes. Estas razes levaram necessidade de

salvaguardar locais onde a natureza no apresenta ainda sinais de degradao irreversvel ou de tentar recuperar esses mesmos locais devido sua importncia.

Figura 1: Distribuio geogrfica do Sphagnum.

Na maior parte das ilhas dos Aores possvel observar turfeiras de Sphagnum, que so importantes no armazenamento superficial da gua das chuvas.

eroso dos solos e regulam o micro-clima insular, na medida em que proporcionam uma evapotranspirao muito elevada, contnua e com baixa variao anual. A remoo do tapete de esfagno conduz a alteraes bruscas nos ecossistemas onde ele se encontra, podendo dar origem, de acordo com AZEVEDO & FERREIRA: a um aumento brusco da escorrncia

Presentemente so conhecidas mais de 150 espcies de Sphagnum no mundo e nos Aores foi registada a presena de 16 espcies. Segundo Mendes, na Ilha Terceira existem turfeiras que so dominadas por Sphagnum spp. em que o grau de cobertura florestal inferior a 25%. A figura 2 ilustra a localizao geogrfica das turfeiras existentes na Ilha Terceira.

superficial, associado a grandes prejuzo; a acentuada remoo e eroso dos solos associadas a uma descaracterizao da paisagem; a alterao das caractersticas qumicas da gua, at ento de ptima qualidade, que poder evoluir para

situaes de contaminao; a alterao do micro-clima da ilha. Num estudo feito na ilha das Flores por AZEVEDO & FERREIRA , estes concluem que o tapete de esfagno importante na regulao do ciclo hdrico. Alm de sua importncia ecolgica,
Figura 2: Localizao geogrfica das turfeiras, na Ilha Terceira.

as brifitas so amplamente utilizadas pelo ser humano como indicadores ambientais,

Os (musgos)

Sphagnum que

so

brifitas

como absorventes em derramamentos de leo e tambm com finalidades

ecologicamente

desempenham um importante papel nos ecossistemas, pois abrigam uma vasta comunidade bitica e participam no

teraputicas. O uso de turfeiras para interesse do homem data de alguns milnios. Em relao ao uso comercial, destaca-se a utilizao do gnero Sphagnum para a produo de energia (turfa) principalmente em pases como a Finlndia, a Irlanda e todas as repblicas que formavam a antiga
5

processo de formao do solo, propiciando condies para o desenvolvimento de outras plantas, servindo como reservatrios de gua e nutrientes. Evitam, portanto, a

URSS

e,

no

mercado et

de al,

plantas 2012)

fotossntese e respirao) e clulas hialinas ou hialocistos (largas e incolores) com poros nas paredes, atravs dos quais a gua se move (WELLS & HIRVONEN, 1988). Segundo McQUEEN (1990) so os ramos pendentes dos eixos do esfagno que armazenam mais gua. Esta caracterstica de absoro e reteno importante para a planta, uma vez que esta no possui razes para absorver solutos do solo, ou tecidos condutores internos para o transporte de

ornamentais.

(Rancura

Actualmente, a extraco de turfa representa um ptimo substrato para actividades como a horticultura. Para isso, a turfa deve ser constituda,

essencialmente, base de Sphagnum. Nos Aores, o Sphagnum era utilizado para fazer almofadas e usado na cultura do Anans, como substrato. (Mendes & Dias, 2005) As plantas do gnero Sphagnum so constitudas, essencialmente, por

gua (DANIELS & EDDY, 1985). A gua absorvida directamente por via de uma rede de espaos capilares existentes na planta (RIELEY & PAGE, 1990). Na maioria dos ecossistemas, o pH encontra-se prximo da neutralidade, no entanto em zonas hmidas dominadas por esfagno, o pH do meio bastante cido, por vezes, atinge valores abaixo dos 3. O desenvolvimento de turfeiras de Sphagnum predomina em zonas altas, devido aos elevados valores de

polissacardeos formados por uma glucose e monmeros de cido galacturnico, acares e por um grupo de cido carboxlico que responsvel pela sua alta capacidade de troca de caties e pelo seu carcter cido. Os tecidos destas plantas apresentam um carcter lenhoso, embora no seja muito forte e so muito ricas em polissacardeos, mas apesar disso quase nenhum herbvoro consome estes musgos. O Sphagnum tem uma elevada capacidade de armazenar gua.Comportase, assim, como pequenas esponjas, muito leves quando secas, mas que podem suportar at 20 vezes o seu peso seco em gua. (Gabriel, 2012) Esta caracterstica deve-se estrutura peculiar da sua folha (RIELEY & PAGE, 1990). So

precipitao e humidade. Assim sendo, nestas zonas no s encontramos com facilidade Sphagnum como tambm outros tipos de vegetao hmida. Aos elevados valores que estes parmetros climticos possuem, acrescenta-se o facto de que os solos em altitude terem a tendncia de formar um horizonte impermeabilizante (horizonte ferro-magnesiano). Assim, com a entrada e reteno de gua num determinado local, esto criadas as
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constitudas por dois tipos de clulas: pequenas clulas clorofilinas ou clorocistos (fotossintticas, importantes para a

condies bsicas para a formao e desenvolvimento de turfeiras de Sphagnum spp. Este tipo de ecossistema, devido a um conjunto de propriedades que apresenta promove a formao de turfa, que se desenvolve em condies de

O Sphagnum palustre uma espcie que pertence ao:

REINO: Plantae
DIVISO: Bryophyta CLASSE: Sphagnopsida ORDEM: Sphagnales
FAMLIA: Sphagnaceae

Bryopsida

encharcamento e anxia (ausncia de oxignio). (Mendes, 2012) O Sphagnum palustre a espcie mais comum e a mais facilmente

reconhecida do gnero, na ilha Terceira. Normalmente, apresenta uma colorao verde, com o captulo acentuadamente mais colorido. Contudo, esta colorao pode alterar-se se as condies do meio no forem as melhores para o

GNERO: Esfagno

Os nomes mais comuns atribudos a esta espcie so: musgo acrocrpico, musgo e leiva. As vrias espcies de Sphagnum distinguem-se, essencialmente, pela forma das suas clulas fotossintticas, embora caractersticas como a forma das folhas, do caule e ramos, sejam tambm importantes para a sua identificao.

desenvolvimento desta espcie, da que muitos eixos podem apresentar uma cor verde plido ou amarelo alaranjado.

Este relatrio refere-se a um estudo cientfico, elaborado no Departamento de Cincias Agrrias, na Universidade dos Aores, no Plo de Angra do Herosmo,
Figura 3: Sphagnum palustre, da Ilha Terceira.

que tem como base a anlise de uma amostra de Sphagnum palustre recolhida de uma turfeira localizada no Pico da Bagacina, na Ilha Terceira.

O objectivo primordial do nosso estudo cientfico era estudar a capacidade de regenerao do Sphagnum palustre face a condies extremas: calor e frio. Para isso, tivemos que sujeitar as nossas amostras a altas e baixas temperaturas. Sabendo que o nosso planeta dia para dia est a sofrer as consequncias dos actos do Homem, sendo visvel pelas alteraes climticas, importante perceber se 2.

temperaturas negativas, visto que h relatos e documentos que comprovam que esta sobrevive a geadas intensas e que se mantm conservada temperaturas. Esta espcie devido seleo natural, que defenida como sendo um processo atravs do qual h uma mais seleco adaptados dos a devido s baixas

existem seres vivos capazes de resistir a estas alteraes. Assim, sendo utilizamos o Sphagnum palustre como objecto do nosso estudo e sujeit-mo-lo a ambientes

indivduos

determinada condio ecolgica, eliminando aqueles desvantajosos para essa mesma condio, ao se adaptar ao clima temperado dos Aores, que regista temperaturas mdias de 13C no Inverno e 24C no Vero, quando sujeita a uma alterao para temperaturas mais elevadas conseguiriam

extremfilos, de modo a replicar alteraes climticas, por exemplo, geadas intensas e vagas de seca e calor, que esta espcie pode sofrer e se esta perante tal condies capaz de regenerar. Tendo em conta o nosso objectivo elaboramos, desde logo, as nossas

suportar melhor essa alterao. Alm disso, h evidncias claras da presena desta espcie em pases quentes (prximos do

possveis hipteses: 1. A espcie estudada encontrada, predominantemente, em zonas

frias do planeta, tal como ilustra o mapa da figura 1. Atendo ao tipo de clima do hemisfrio norte, primeira vista esta espcie estaria melhor mudana preparada para uma de

equador).

Com a realizao deste estudo pretendemos, assim, dar o nosso contributo para enriquecer ainda mais todo o trabalho que j foi feito com estas plantas e tentar introduzir, se possvel novas concluses.

significativa

III MEDOTOLOGIA
A - Material Biolgico recolhido Sphagnum palustre Para realizar o nosso estudo cientfico utilizamos uma amostra da espcie Sphagnum palustre. Este foi a material biolgico escolhido para o nosso estudo por vrias razes. Tendo em conta o tempo que dispnhamos para a realizao deste estudo, esta espcie era a ideal, visto que seria possvel observar alteraes B - Local de recolha do material biolgico Como j foi referido

anteriormente, a amostra do nosso estudo o Sphagnum Palustre. Esta amostra foi recolhida no Pico da Bagacina, que se eleva a

638 metros de altitude acima

do nvel

do mar. Localiza-se no interior da Ilha Terceira, no Arquiplago dos Aores. Tem origem vulcnica, sendo formada por lavas e bagacinas mais ou menos recentes em

significativas em muito pouco tempo. Alm disso, trata-se de um material sem qualquer custo de aquisio e de fcil acesso, uma vez do que seu se recolhe

termos geolgicos que se estenderam por vrios pontos da ilha. uma das principais zonas de criao do gado bravo, usado nas to famosas touradas da Ilha Terceira. Esta formao

directamente

ecossistema

natural. Dada imensa quantidade de material seleccionar disponvel, os eixos conseguimos com as

geolgica originou uma turfeira de transio que caracterizada por se formar em vales endorreicos pouco pronunciados (qualquer chuva que caia permanece acumulada), o que tem por consequncia um movimento lateral de gua mais pronunciado, arrastando os nutrientes para o centro da turfeira, dando origem a um microrelevo. Para alm, de originar um microrelevo, esta turfeira irregular em termos de altura da gua. Devido ao microrelevo que apresenta, cria microhabitat propcio ao
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caractersticas desejadas para o nosso estudo: os eixos mais verdes e sem estes serem biforcados. A observao de cloroplastos neste tipo de material muito acessvel, desde que seja bem preparado para ser observado ao

microscpio ptico. Esta foi outra razo que nos levou a escolher este material.

desenvolvimento de um maior nmero de espcies.

A impermeabilizao deste tipo de turfeira ocorre devido existncia do plcico.

1. Figura 4: Pico da Bagacina, na Ilha Terceira Turfeira de transio, onde se evidencia o microrelevo da turfeira e movimentao da gua.

No grfico a seguir apresentado encontram-se vrias espcies de Sphagnum que podemos encontrar na turfeira do Pico da Bagacina, segundo estudos realizados pela Dr. Cndida Mendes.

Grfico 1: Frequncia das espcies na turfeira de transio.

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C - Material: Cmara de crescimento Congelador 9 Recipientes de plstico Lminas de vidro Lamelas Microscpio ptico Lminas de metal Esguicho de gua destilada Pina metlica Mquina fotogrfica Rgua de 15cm

5. Rotulamos os ensaios de acordo com o tratamento a adoptar: Primeiro ensaio: controlo.

Segundo ensaio: exposio a um ambiente quente. Terceiro ensaio: exposio a um ambiente frio. 6. O primeiro foi ensaio, o de no o

controlo, laboratrio

deixado todo

durante

estudo, junto a uma janela. Na primeira semana, colocamos o segundo ensaio numa cmara de crescimento a 36C, sendo a temperatura muito mais alta que

D - Procedimento: 1. Recolhemos uma amostra de Sphagnum palustre na turfeira de transio do Pico da

a temperatura ambiente na Ilha Terceira naquele dia e o terceiro ensaio foi colocado num

congelador a temperaturas muito baixas. O segundo e o terceiro

Bagacina. 2. Seleccionamos os eixos da

ensaios permaneceram nestes ambientes durante 12 horas. 7. Aps o perodo de exposio, observamos e contamos os

amostra do Sphagnum palustre com as mesmas caractersticas: tamanho, forma e cor. 3. Realizamos trs ensaios. Cada ensaio tinha 3 recipientes com oito eixos em cada um deles, sendo que no total tnhamos: 3 ensaios, 9 recipientes e 72 eixos de Sphagnum palustre. 4. Cortamos os eixos

cloroplastos de cinco clorocistos em dois fildeos, num dos eixos que apresentava estar em

melhores condies para cada recipiente, de cada ensaio. 8. Exposemos o segundo e o terceiro ensaios num ambiente favorvel (gua, luz e

seleccionados, de modo que todos medissem o mesmo: 5cm.

temperatura ambiente) igual ao

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do

ensaio

de

controlo:

no

NOTA: Importa referir que, aps os tratamentos aplicados, os ensaios foram colocados num ambiente favorvel

laboratrio, junto a uma janela. 9. Durante mais trs semanas de estudo, analisamos a cor, o tamanho e o nmero de

(laboratrio) ao seu crescimento, onde estes tinham acesso a luz, a uma temperatura amena e gua (como estas plantas tm uma enorme capacidade de absoro era necessrio todas as

cloroplastos nos trs ensaios. A contagem do nmero de

cloroplastos seguiu sempre o mesmo critrio: contar os

semanas introduzir mais gua nos recipientes).

cloroplastos de cinco clorocistos em dois fildeos de um eixo de cada recipiente, de cada ensaio.

IV - RESULTADOS
No presente estudo cientfico tivemos como variveis de resposta: o nmero de cloroplastos (varivel Neste estudo utilizamos dois mtodos estatsticos: a mdia e o desvio padro. A mdia o valor que indica onde se concentra mais os dados de um estudo. O desvio padro indica a varincia ou disperso existente em relao mdia. Desde modo, calculamos a

quantitativa discreta) e o tamanho dos eixos do esfagno ao longo das quatro semanas do estudo. O choque trmico foi, sem dvida, a nossa varivel explicadora, que est na base das variveis de resposta anteriormente referidas. A Estatstica descritiva A estatstica descritiva

mdia e o desvio padro referente ao nmero de cloroplastos contados e o tamanho dos eixos do esfagno, ao longo das quatro semanas de estudo.

corresponde ao conjunto de vrios mtodos estatsticos que tm como objectivos sintetizar e descrever as particularidades dos dados obtidos ao longo do estudo realizado.
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I. Anlise do nmero de cloroplastos no decorrer do tempo Em cada semana do estudo foram contados os cloroplastos existentes em cinco clorocistos em dois fildeos de um eixo de cada recipiente, de cada ensaio. Perante os dados obtidos, calculamos a mdia e o desvio padro. De modo a organizar os dados, elaboramos o grfico 2. Assim, torna-se mais fcil analisar estes dois mtodos estatsticos em relao a uma das nossas variveis de resposta.
35,0 30,0 25,0 20,0 15,0 10,0 5,0 0,0 Mdia (1 Mdia (2 Mdia (3 Mdia (4 semana) semana) semana) semana) Grfico 2: Mdia e desvio padro do nmero de cloroplastos contados em cada uma das semanas do estudo.
15,7 14,6 15,0 12,0 7,0 5,3 5,7 0 0 25,8 25,9 20,1

no ocorrido variao no nmero de cloroplastos aps a exposio aos ambientes de calor e de frio.

Verificamos, ento, que na primeira semana todos os ensaios apresentavam sensivelmente o mesmo nmero de cloroplastos, pois a mdia entre eles no era muito diferente. Segundo o grfico, o nmero de cloroplastos contados nos eixos do ensaio de controlo (T1) foi sempre superior queles contados nos outros ensaios. Alm disso, at terceira semana verificou-se um aumento do nmero de cloroplastos neste ensaio. Uma explicao para tal acontecimento

T1 T2 T3

ser o facto de o esfagno se ter adaptado muito bem ao ambiente do laboratrio. Porm, na quarta semana atesta-se que o nmero diminuiu. O segundo e terceiro ensaios foram aqueles que sofreram um choque trmico: o segundo com altas de cloroplastos contados

A partir do grfico 2 podemos concluir de imediato que houve

temperaturas e o terceiro com baixas temperaturas. Aps a exposio a ambientes com temperaturas to

variao no nmero de cloroplastos ao longo do estudo. Na primeira semana do estudo, contamos antes o de nmero submeter ensaios de o aos

diferentes daquelas que o esfagno da Ilha Terceira est habituado a sofrer, contou-se o nmero de cloroplastos e verificamos que o segundo ensaio (T2) tinha sido o mais danificado, uma vez que apresentava poucos cloroplastos em
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cloroplastos segundo e

terceiro

ambientes extremfilos. Deste modo, conseguiramos observar se tinha ou

relao ao ensaio de controlo e tambm em relao ao terceiro ensaio (T3). Entre a segunda e a terceira semanas h uma diminuio do nmero de

Tambm

se

verificou

um

crescimento nos eixos do segundo e terceiro ensaios. Contudo, este

crescimento no significativo, pois trata-se de valores muito pequenos, que podero ter resultado, por exemplo, de uma m medio logo no incio do estudo.
7,0 6,0 5,0 4,0 3,0 2,0 1,0 0,0
Mdia (2semana) Mdia (3semana)

cloroplastos nestes ensaios, o que mostra que estas plantas so sensveis a variaes bruscas de temperaturas. Na quarta semana, no foi possvel contar o nmero de cloroplastos presentes no segundo e terceiro ensaios, uma vez que os clorocistos estavam mortos, logo no existiam cloroplastos. Assim, conclui-se que estas plantas tentaram regenerar as suas clulas, visto que no morreram de imediato aps o choque trmico. Porm, no conseguiram por muito tempo, acabando por morrer.

5,4

5,7 5,0 5,0

5,9 5,1 5,2 T1 T2 T3 0,0 0,0

Mdia (4semana)

Grfico 3: Mdia e desvio padro do tamanho dos eixos

II. Anlise do tamanho dos eixos no decorrer do tempo Aps uma seleco

dos esfagnos medidos em cada uma das semanas do estudo.

No que toca ao desvio padro, este encontra-se representado nos

cuidada dos eixos do esfagno, procedeuse ao corte dos mesmos, de modo a que todos ficassem a medir 5cm. Deste modo, foi possvel avaliar o crescimento desta planta ao longo do estudo. Atendendo ao grfico 3, conclui-se claramente, que foram os eixos do ensaio de controlo (T1) que cresceram mais, o que era de esperar, pois este ensaio no foi submetido a nenhum tratamento e foi mantido durante too o estudo num ambiente favorvel ao seu desenvolvimento.

grficos 2 e 3 por um trao contnuo presente na parte superior de cada barra do grfico. Atravs da observao do grfico, podemos verificar que em algumas semanas o trao mais comprido do que noutras. Quando o trao mais curto significa que os dados tendem a estar mais prximos da mdia e quando este mais comprido indica que os dados esto espalhados por uma gama de valores e, por isso, esto mais afastados do valor mdio.
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B Testes estatsticos - Teste t de comparao de mdias Neste estudo, usamos como teste estatstico o teste t de comparao de mdias. Este teste, como o prprio nome indica, foi utilizado para ensaio. Estas hipteses so apenas expectativas, cujo objectivo testar a sua validade. Para o ensaio de controlo (T1), adoptamos a seguinte hiptese nula: entre a primeira e segunda semanas os esfagnos no apresentam diferenas significativas. Esta hiptese igual para a segunda e terceira semanas, tal como para a terceira e quarta semanas do ensaio de controlo. A mesma hiptese se colocou, desse mesmo modo, para o segundo (T2) e terceiro (T3) ensaios. A partir dos dados da tabela 1 podemos inferir a significncia das hipteses nulas, anteriormente referidas. Deste modo, que podemos no rejeitar as

comparar as mdias de dois tratamentos diferentes: T2 e T3. Neste tipo de teste so avaliados vrias variveis: os graus de liberdade (df), a variao da mdia (t start) e P(T<=t) two-tail. Grau de liberdade corresponde ao nmero de determinaes

independentes (dimenso da amostra) menos o nmero a de parmetros avaliados 2004) A

estatsticos na populao.

serem (Brod, J.

variao da mdia obtm-se, neste caso, por exemplo, pela diferena entre a mdia da primeira e segunda semanas do ensaio de controlo (T1). Se o valor for negativo, significa apenas que a mdia da segunda semana superior da primeira. O teste t de comparao de mdias pressupe a necessidade de formular hipteses nulas (H0) para cada

hipteses

tm

qualquer

significado, isto , os dados obtidos no apresentam diferenas significativas e, para isso o valor de p tem de ser inferior a 0,05. Caso contrrio, a hiptese vlida.

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Ensaio Semanas 1 e 2 T1 2 e 3 3 e 4 T2 1 e 2 2 e 3 3 e 4 1 e 2 2 e 3 3 e 4

df 58 58 58 58 58 58 58 58 58

t-Test: Two-Sample Assuming Equal Variances P(T<=t) two-tail t Start Significncia (P<0,05) -8,63 -0,10 5,90 13,84 2,50 8,35 2,73 9,76 15,71 0,00 0,92 0,00 0,00 0,02 0,00 0,01 0,00 0,00 Sem (a H0 rejeitada) Com (no h evidncias para rejeitar a H0, logo considera-se que esta vlida) Sem (a H0 rejeitada) Sem (a H0 rejeitada) Sem (a H0 rejeitada) Sem (a H0 rejeitada) Sem (a H0 rejeitada) Sem (a H0 rejeitada) Sem (a H0 rejeitada)

T3

Tabela 1: Teste t de comparao de mdias

Apenas existe uma hiptese nula que vlida, pois p superior a 0,05. Isto significa que entre a segunda e

terceira semanas do ensaio de controlo (T1) os esfagnos apresentam diferenas significativas.

V DISCUSSO RESULTADOS

DOS

que

aqueles

submetidos

altas

temperaturas, tendo em conta as nossas hipteses iniciais, uma vez que a espcie estudada predomina no

O Sphagnum palustre um musgo que se encontra com alguma facilidade na Ilha Terceira e, tendo em contas as caractersticas que apresenta, mostrou-se desde logo um material bastante interessante para se estudar. Assim sendo, o nosso objectivo para este estudo era investigar a capacidade de regenerao do Sphagnum palustre quando submetido a condies extremas de temperatura. Com a realizao deste estudo era de esperar que os eixos do esfagno sujeitos a baixas temperaturas

hemisfrio norte onde as temperaturas chegam a atingir valores muito baixos, aquando da ocorrncia de geadas

intensas. A partir da anlise dos resultados obtidos, verifica-se que os eixos que estiveram num ambiente com baixas temperaturas apresentavam um maior nmero de cloroplastos e

cresceram mais que os eixos que sofreram um ambiente de altas

temperaturas. Assim, os dados obtidos vm confirmar a nossa hiptese na medida em que o ensaio exposto ao frio revelou um maior desenvolvimento (no
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regenerassem mais fcil e rapidamente

muito significativo) em relao ao ensaio que esteve num ambiente quente. Porm, espervamos que ambos os ensaios, aps algum tempo, iriam conseguir regenerar a maior parte dos seus clorocistos, algo que no

aplicado o tratamento e isto s indica que, de certo modo, esta espcie capaz de resistir a choques trmicos, mesmo que seja por pouco tempo (quatro semanas). Isto j um indcio de que esta planta tem a capacidade de regenerao. Contudo, a regenerao no foi bem sucedida e este facto poder ter resultado de alguns erros cometidos ao longo do estudo. Por exemplo, o tratamento aplicado poder ter sido muito intenso ou no foram utilizados os aparelhos mais apropriados para tais tratamentos. Para medir o tamanho dos eixos do esfagno de todos os ensaios nas vrias semanas de estudo

aconteceu, pois as plantas destes ensaios morreram ao fim de quatro semanas, visto que ao microscpio ptico no era visvel nenhum cloroplasto, os eixos estavam completamente despedaados e apresentavam uma colorao amarelada muito clara que era um indicador de que realmente os cloroplastos estavam j ausentes. Apenas sobreviveu o ensaio de controlo, aquele que no sofreu nenhum tratamento. Tnhamos, tambm, outra

recorremos a uma rgua. A esta est associada um determinado erro. Alm disso, nunca foi a mesma pessoa a medir os comprimentos dos eixos dos esfagnos, o que poder tambm ter influenciado os dados obtidos. O

hiptese. Poderia acontecer que o ensaio submetido a altas temperaturas

suportasse melhor esta variao brusca de temperatura (apesar de no ser muito comum, de acordo com a nossa primeira hiptese), uma vez que esta espcie, tambm, encontra-se em regies com temperaturas muito amenas, como os Aores e em pases onde ocorre, frequentemente, vagas de calor, como por exemplo no Brasil. Apesar de os ensaios, que

mesmo se passou com a contagem do nmero de cloroplastos. Da primeira para a segunda semana notou-se um aumento do nmero de cloroplastos. Isto pode ser explicado pelo facto de na primeira semana se ter tratado da nossa primeira contagem de cloroplastos, algo que de imediato no foi fcil, assim como o manuseamento dos

sofreram tratamentos no apresentarem um grande desenvolvimento em relao ao do controlo, a verdade que estes no morreram de imediato quando foi

microscpios. Os melhoramentos foram significativos nas restantes semanas,

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pois as seguintes contagens deram resultados mais coesos em relao aos outros, visto que tnhamos aperfeioado a nossa tcnica de contagem. Os ensaios que foram expostos ao calor e ao frio ficaram extremamente sensveis ao tacto, ou seja, muito danificados, pelo que era muito difcil retirar cada um dos eixos do recipiente para efectuar a medio do seu

que

era

favorvel

ao

seu

desenvolvimento. Vrios foram os erros,

anteriormente referidos, que podiam ter sido evitados e a metodologia que podia ter sido melhorada. Porm, j um grande sbio dizia que so com erros que aprendemos a viver a vida. Atendendo a estas palavras, podamos ter sido muito mais rigorosos com as nossas medies e contagens, isto , usar sempre a mesma rgua, contar o nmero de cloroplastos sempre na mesma zona do fildeo. Ter sempre o cuidado de no deixar que nenhum eixo se sobreponha sobre os outros.

comprimento, pois facilmente estes fragmentavam-se ou perdiam inmeros fildeos. Isto, tambm, poder ter posto em causa a regenerao e o crescimento do esfagno, influenciando o sucesso do estudo. Ao longo das semanas

tambm

muito

importante

ter

um

verificamos algo de muito curioso: dentro do mesmo recipiente havia eixos que cresciam e outros que no.

conhecimento prvio dos aparelhos que dispomos para simular os ambientes desejados, o de calor e o de frio, pois podem no ser os mais adequados ou podemos arranjar maneira de melhorar as condies que de acordo queremos com o

Rapidamente percebemos que os eixos no podiam ficar sobrepostos uns sobre os outros, uma vez que os que ficavam mais no fundo do recipiente recebiam pouca luz, o que influenciou, sem dvida, o seu desenvolvimento. O facto de as amostras terem ficado dentro de um laboratrio, longe do seu habitat natural, isto , longe das condies ambientais a que esto habituadas, tambm, poder ter

tratamento

aplicar.

Aumentar o nmero de rplicas em cada ensaio iria, sem qualquer dvida, darnos resultados mais confiveis e mais precisos. E para isso era necessrio muito mais tempo de estudo, algo que muitas vezes no possvel.

condicionado o nosso estudo, apesar de aps a primeira semana todos os ensaios terem sido sujeitos ao mesmo ambiente,
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CONCLUSES
Com a realizao deste estudo cientfico concluiu-se, ento, que os esfagnos expostos ao frio e os esfagnos expostos ao calor no se regeneram com muita facilidade, pois estes passadas quatro semanas acabam por morrer. Sendo assim, tem-se presente um novo factor em apreciao,

ambiente onde o esfagno estava inserido no foi muito relevante, pelo facto de no ter prejudicado a nossa

investigao. Analisando os grficos obtidos, em relao ao nmero de cloroplastos, observamos que o nmero de

cloroplastos no ensaio de controlo foi sempre aumentando. Entre a primeira e segunda semanas verifica-se um maior aumento, podendo isto ser explicado pelo facto de ter sido a nossa primeira contagem, ou seja, podero ter ocorrido erros humanos e experimentais. Em relao comparao dos resultados obtidos nas restantes semanas, apenas obtm-se uma ligeira variao entre as mdias, mostrando, ento, o j referido facto de se tratar de um teste vivel para se efectuarem as devidas comparaes. No caso do esfagno exposto ao frio, tivemos uma pequena diminuio da mdia do nmero de cloroplastos entre a primeira e a segunda semanas, mas uma elevada diminuio entre a

nomeadamente a capacidade de o esfagno sobreviver. No que diz respeito a este factor, pode dizer-se que o esfagno exposto ao frio conseguiu sobreviver em melhores condies do que o esfagno exposto ao calor. A seu favor deve-se o facto de apresentar uma mdia de crescimento e do nmero de cloroplastos ligeiramente maior no decorrer das quatro semanas em comparao com os esfagnos que foram expostos ao calor. Contudo, e somente na ltima semana no foi possvel fazer esta comparao, pois os esfagnos sujeitos aos tratamentos j se encontravam mortos. Em relao ao ensaio de

segunda e a terceira semanas, o que revelava que o esfagno, pouco a pouco, estava a deixar de conseguir sobreviver. O esfagno exposto ao calor, desde a segunda sinais semana que seria que j

controlo, este tratou-se de um teste vivel, visto que este manteve o seu crescimento ao longo do tempo e mostrou-se saudvel de modo a que se pudessem fazer as comparaes

mostrava

muito

necessrias em relao aos outros dois ensaios. Isto, tambm, nos diz que o

complicado sobreviver durante muito mais tempo e como indicador disso teve-se a grande diminuio do nmero
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de cloroplastos entre a primeira e a segunda semana. Este teve uma

agressivo e no possvel que estes sobrevivam como foi revelado no nosso caso. A fim de melhores resultados, sugerimos que se exponha o ensaio do frio a uma temperatura ou meio que no seja suficientemente forte ao ponto de congelar o material em estudo. Assim, o esfagno estar exposto a condies adversas e suficientes para no o danificar totalmente, mas apenas

diminuio muito pequena entre a segunda e a terceira semanas, mas para contrariar esta suspeita de estabilidade dos esfagnos tivemos em conta o factor crescimento, comprovar crescimento o que que estes nos levou a um nulo,

tinham

aproximadamente

sentenciando-se, assim a sua morte na seguinte semana. Ento, tornou-se o factor para crescimento podermos

parcialmente, no quase totalmente como nos sucedeu. No caso do ambiente quente ocorreu o mesmo. Como j foi referido, os eixos

essencial

efectuar uma comparao mais precisa entre todos os esfagnos. Observou-se um crescimento

encontravam-se totalmente secos, o que no iria acontecer, pois sabemos que o esfagno encontra-se em zonas hmidas e devido presena de gua em seu redor. Logo, seria sempre possvel este conseguir absorver ou mesmo manter-se hmido. Ento, este deveria ter sido posto com gua na cmara de

contnuo do esfagno do ensaio de controlo ao longo das semanas, embora no tenha acontecido o mesmo com os restantes ensaios. No frio, ainda foi possvel ao esfagno crescer, mas um crescimento muito condicionado e no calor um crescimento ainda menos notrio. Estes valores e resultados

crescimento ou num lugar com as mesmas propriedades. Ressalta-se que a avaliao

obtidos coincidem com o esperado teoricamente. Para concluir o nosso trabalho, apresentamos uma sugesto para quem tenha interesse ou necessite de

sobre a regenerao est sujeita variabilidade microambiental

encontrada em cada ponto de colheita. Desta forma, estudos sobre o o

reproduzir este mesmo estudo. Esta sugesto segue-se em relao ao meio em que os esfagnos foram introduzidos, pois trata-se de um ambiente demasiado

crescimento

do Sphagnum e

acompanhamento da regenerao com o monitoramento de um maior nmero de variveis so necessrios para que os
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indcios levantados neste estudo sejam verificados. Conclui-se assim, que se

melhorado a metodologia utilizada, poderamos ter obtido um maior sucesso na realizao deste estudo cientfico.

tivssemos procedido com maior rigor e

BIBLIOGRAFIA Dias E. & Mendes C.(2005). Ecologia de algumas espcies de Sphagnum da ilha Terceira. www.angra.uac.pt\GEVA\ http://www.angra.uac.pt/geva/WEBGEVA/ sphagnos/ecologia%20dos%20Sphagnum.h tm Discover Life, Global Mapper. Sphagnum palustre. http://www.discoverlife.org/mp/20m?kind= Sphagnum+palustre Gabriel, R. Biloga na Universidade dos Aores. Brifitos. Turfeiras.

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http://www.angra.uac.pt/geva/WEBGEVA/ Publicacoes/TURFEIRAS%20Mendes&%2 0Dias%20%20baixo.pdf Mendes, C & Dias, E. Departamento de Cincias Agrrias da Universidade dos Aores. GEVA. Ecologia das Turfeiras de Sphagnum dos Aores. http://naturlink.sapo.pt/Natureza-eAmbiente/Fauna-e-Flora/content/Ecologiadas-Turfeiras-de-Sphagnum-dosAcores?bl=1 S Biologia. Seleco Natural. http://www.sobiologia.com.br/conteudos/E volucao/evolucao17.php Rancura, S; Ribeiro, M & Nordi, N. Consideraes sobre a coleta

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http://pt.wikipedia.org/wiki/Sphagnum

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ANEXOS

1 - Esquema dos elementos relativos morfologia S.palustre var. Palustre.

2 Imagem das folhas do ramo (B) do S.palustre var. Palustre. (x100).

3 Imagem das clulas das folhas do ramo (D) do S.palustre var. Palustre.

4 Processo de seleo do Esfagno.

5 Processo de seleo do Esfagno.

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6 Processo de corte do Esfagno.

7 Colocao do Esfagno nos recipientes antecipadamente numerados.

8Esfagno aps processos de tratamento. Primeiro ensaio- Controlo Segundo ensaio- Frio Intenso Terceiro ensaio Calor Intenso

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9Esfagno aps processos de tratamento e 1 semana. Primeiro ensaio- Controlo Segundo ensaio- Calor Intenso Terceiro ensaio Frio Intenso

10 Crescimento do Esfagno do controlo aps uma semana em condies ideais.

11 Tamanho do Esfagno do sujeito ao tratamento de frio aps uma semana em condies ideais. 24

12 Tamanho do Esfagno do sujeito ao tratamento do calor, aps uma semana em condies ideais.

13Aparncia do Esfagno submetido ao tratamento do frio aps 3 semanas em condies ideais.

14- Aparncia do Esfagno submetido ao tratamento do calor aps 3 semanas em condies ideais.

15- Ampliao dos clorocistos de uma folha do ramo do esfagno sujeito ao tratamento do frio aps 4 semanas. (x1000)

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16- Ampliao dos clorocistos de uma folha do ramo do esfagno sujeito ao tratamento do frio aps 4 semanas. (x900)

17- Visualizao do nvel da gua.

18- Aumento do tamanho na 4 semana. (este foi um dos mais pequenos)

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19-Resultado final do estudo.

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