11/2/2013

FACULTAD DE QUMICA

Identificacin de las clulas del Sistema Inmune en Sangre Perifrica

Equipo 6: Casas Ventura RocioAlejandra Gutirrez Murillo Amira Karen Lorenzo Gonzlez Cynthia Karina

Prctica #1 Identificacin de las clulas del Sistema Inmune en Sangre Perifrica

Introduccin Todas las clulas que componen al sistema inmune, provienen de una clula madre hematopoytica pluripotencial, la cual se diferencia para originar dos tipos de clulas: las de la serie linfoide y las de la serie mieloide. La serie linfoide se compone de las clulas centrales del sistema inmune, responsables de la inmunidad adaptativa, mientras que algunas clulas de la serie mieolide son parte importante de la inmunidad innata. A continuacin se presenta una tabla con las funciones principales de estas clulas. Tipo de Clula Neutrfilo* Funcin Clula fagoctica con mecanismos de destruccin de microorganismos oxidativos y no oxidativos. Morfologa Ncleo: 2-5 lbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina visible. Cromatina: Grumos gruesos Citoplasma: Azul plido a rosa Ncleo: 2 a 3 lbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina visible. Cromatina: Grumos gruesos Citoplasma: Rosa, puede presentar bordes irregulares Ncleo: En general 2 lbulos conectados por filamentos delgados sin cromatina visible. Cromatina: Grumos gruesos Citoplasma: Color lavanda a incoloro Ncleo: Variable; puede ser redondo, en herradura en forma de rin. A menudo tiene pliegues que producen circunvoluciones similares a la del cerebro. Citoplasma: Gris azulado; puede tener seudpodos. Presenta grnulos finos, con frecuencia den un aspecto esmerilado.

Eosinfilo*

Clula relacionada con los procesos alrgicos y las infecciones por parsitos.

Basfilos*

Clulas relacionadas con procesos alrgicos donde secretan aminas vasoactivas. Funcin similar a los basfilos Macrfago inmaduro en circulacin que tiene poco poder destructivo y produce citocinas. Clula fagoctica que puede destruir bacterias y presentar sus antgenos a las clulas T.

Mastocitos* Monocito*

Macrfago*

Clulas dendrticas**

Clula fagoctica, que presenta de forma ms activa la presentacin de antgenos a las clulas T. Destruyen clulas infectadas Ncleo: oval. Citoplasma: Abundante

Clulas NK*

Linfocitos T CD8*

Linfocito T CD4*

Linfocito B*

Ncleo: oval; puede ser ligeramente dentado; en ocasiones se observa el nuclolo. Cromatina: Condensada a Acta como clula ayudadora intensamente condensada. de los linfocitos B y activa Citoplasma: Escaso a moderado; macrfagos. celeste cielo; puede presentar vacuolas. Clula que al ser activada produce anticuerpos

Clulas T citotxicas que destruyen clulas infectadas por bacterias en su citosol.

*Clulas de la serie mieloide, * Clulas de la serie linfoide Obtencin de la muestra y preparacin del extendido de sangre perifrica Las muestras se recolectan en tubos que contienen cido etilendiaminotetraactico (EDTA) disdico o tripotsico, que anticoagula la sangre por quelacin del calcio, que es esencial en la coagulacin. Suele preferirse el K2EDTA lquido porque se mezcla con facilidad con la sangre. Para teir los extendidos de sangre perifrica se usa la tincin de Wright considerada como policromtica porque contiene eosina y azul de metileno disueltos en metanol (que acta como fijador) y un buffer de fosfatos a pH= 6,4 que es fundamental para las reacciones de tincin. El azul de metileno oxidado y la eosina forman un complejo tiazina-eosinato, que tie los componentes neutros. El buffer que se agrega a la tincin debe ser fosfato de sodio 0.05 M (pH 6.4) o agua destilada vieja. Las reacciones de tincin dependen del Ph. El azul de metileno libre es bsico y tie los componentes celulares cidos (o basfilos) como el RNA. La eosina libre es cida y tie los componentes bsicos (o eosinfilos), como la hemoglobina o los grnulos eosinfilos. Los neutrfilos se denominan as porque tienen grnulos citoplasmticos con pH neutro y toman algunas caractersticas de tincin de ambas coloraciones. Un frotis teido de manera adecuada tiene las siguientes caractersticas: 1.- Los eritrocitos deben de ser color rosa salmn. 2.- Los ncleos son de color azul oscuro a violeta. 3.- Los grnulos citoplasmticos de los neutrfilos son de color lila.

4.- Los grnulos citoplasmticos de los basfilos son de color azul oscuro a negro. 5.- Los grnulos citoplasmticos de los eosinfilos son de color rojo a anaranjado. 6.- El rea entre las clulas debe estar limpia y libre de precipitados de colorante.

Objetivo Identificar a travs de sus caractersticas morfolgicas y de su afinidad por colorantes, los diferentes tipos de clulas que forman parte del sistema inmunolgico y estn presentes en sangre perifrica humana.

Materiales y mtodos Agujas para vacutainer Tubos vacutainer con anticoagulante Ligadura Guantes Torundas con alcohol Charola para tincin Puente de vidrio para tincin Gradilla para tubos 13x100 6 portaobjetos de vidrio Colorante de Wright Microscopio con filtro Aceite de inmersin Muestra de sangre de un voluntario

Resultados En la muestra sangunea se observaron linfocitos, monocitos y neutrfilos en menor cantidad.

Conclusiones

Es posible identificar algunos tipos de clulas que son parte del sistema inmunolgico y estn presentes en sangre perifrica, todo esto gracias a la tcnica de tincin policromtica, pues sta pone de manifiesto algunas de las caractersticas morfolgicas de las clulas. En sangre es ms probable observar neutrfilos, linfocitos y monocitos.

Bibliografa Antonio Arnaiz Villena, Jos Ramn Regueiro y Carlos Lpez Larrea. Inmunologa. Editorial Complutense S.A. Madrid. 1995. Pag 22-24. http://www.ctv.es/USERS/fpardo/vihsi.htm Conceptos bsicos sobre el sistema inmunitario pgina en internet consultada el 2013-02-17 Bernadette F. Rodak. Hematologa: fundamentos y aplicaciones clnicas. 2 edicin. Editorial Mdica Panamericana, 2005. Pag 174-179. Carr J. H. Rodak F.B. Atlas de hematologa clnica. Mdica Panamericana, 3 edicin. Buenos aires, 2003. Pginas consultadas: 5-10 Kindt J. T., Goldsby R. A. Osborne B. A. Inmunologa de Kuby. Mc GrawHill, 6 edicin. 2007. Pginas consultadas: 25-27