ESPECTROFOTOMETRA Resumen: Se realiz el espectro de absorcin de luz de algunas sustancias mediante el uso de un espectrofotmetro con el fin de determinar la absorbancia

de la sustancia a diferentes longitudes de onda y, con ello, determinar la relacin existente entre absorbancia y concentracin. En este caso se registr la longitud de onda que indica la mxima absorbancia de cada sustancia y de acuerdo a la ley de Beer Lambert se determin la concentracin de las sustancias. Las sustancias empleadas con sus respectivas longitudes de onda ptimas, fueron: Azul de bromotimol a pH 7.5 (610nm) y otro en medio cido (430nm), rojo congo (490nm), permanganato de potasio (550nm) y dos mezclas con volmenes distintos de azul de bromotimol pH 7.5 y rojo congo. INTRODUCCIN: Las dos propiedades ms obvias de la luz se describen fcilmente en trminos de la teora ondulatoria de la luz: intensidad (o brillantez) y color. La intensidad de la luz es la energa que porta por unidad de rea por unidad de tiempo, y est relacionada con el cuadrado de la amplitud de la onda, tal como para cualquier onda. El color de la luz est relacionado con la longitud de onda de la luz. La luz visible aquella a la que los ojos son sensibles consta de frecuencias que van desde 4x1014 Hz, que corresponden a las longitudes de onda en el aire de aproximadamente 400 a 750nm. A esto se le conoce como espectro visible y dentro de l se encuentran los diferentes colores desde el violeta hasta el rojo, como se observa en la figura 1. La luz con longitud de onda ms corta que 400 nm se llama ultravioleta y la luz con longitud de onda ms larga que 750nm se llama infrarroja (Giancoli, 2006).

Figura 1. El espectro electromagntico y el espectro visible (Kotz, Treichell & Weaver, 2005). Los espectros de luz ocurren debido a la distribucin de los electrones en el tomo. Cuando los tomos estn a temperatura ambiente sus electrones estn situados en el nivel de energa ms bajo y se considera este como estado fundamental. Si posteriormente un tomo absorbe energa, sus electrones son empujados a niveles ms elevados llamados estados de excitacin los cuales son niveles inestables. Para que los electrones vuelvan a su estado de estabilidad, el exceso de energa absorbido se debe liberar en forma de fotones o un haz de luz. Los diversos colores de la luz corresponden a fotones de diferentes energas y se organizan en una serie precisa o espectro (Contreras,2011; Johll,2008).

La espectrofotometra de absorcin molecular es un mtodo de anlisis qumico ampliamente usado ya que permite la determinacin de la absorbancia, concentracin y otras propiedades de todos los elementos con gran exactitud. Para esta tcnica se utilizan espectrofotmetros de absorcin atmica instrumentos que tienen la capacidad de proyectar un haz de luz a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida, tambin se puede identificar la naturaleza y la cantidad de sustancia que existe (Pino y Perez,1983). Por medio de un espectro de absorcin, se determina la longitud de onda ptima de absorcin de una sustancia dada. El espectro de absorcin de una sustancia se obtiene midiendo la absorbancia de la muestra a diferentes longitudes de onda; si se trabaja en el espectro visible, el rango de medicin desde 400nm hasta 700. Luego, se grafica la absorbancia vs la longitud de onda, y se encuentra la longitud de onda que corresponde con el punto mximo de absorcin de la muestra. El espectro de absorcin es caracterstico para cada sustancia y la forma de la curva es igual para una misma sustancia a diferentes concentraciones (Quesada, 2007). Todas las molculas son capaces de absorber radiaciones electromagnticas de una frecuencia o de un intervalo de frecuencias caractersticos de cada molcula. La ley de Beer-Lambert estableces que la absorbancia est directamente proporcional con las propiedades intrnsecas del analto, con su concentracin y con la longitud de trayectoria del haz de radiacin al atravesar la muestra. Es una combinacin de leyes, la ley de Lambert que predice el efecto del recorrido de la radiacin sobre la fraccin de una radiacin absorbida. Lambert lleg a a la conclusin de que cada de igual grosor, absorbe una fraccin idntica de la radiacin que la atraviesa. Por otro lado la ley de Beer predice el efecto de la concentracin en un sistema sobre la fraccin de radiacin que este absorbe. Beer us radiaciones monocromticas y paralelas. Observ que un aumento lineal de la concentracin se reflejaba en la disminucin exponencial de la transmitancia. Pero as como esto se presenta a soluciones de un solo tipo de molculas, la ley de Beer-Lambert se puede aplicar a mezclas de diferentes tipos de molculas absorbentes, siempre que su absorcin se produzca de manera independiente. En estas condiciones, la absorbancia es aditiva y es la sumatoria de cada una de las absorbancias por el tipo de molculas que se presenta (Castieiras & Queralt, 1998). En esta prctica se pretende determinar experimentalmente el espectro de absorcin de diferentes soluciones, as identificar la absorcin mxima de cada una de ellas y con la ayuda de esta comprobar la ley de beer -lambert mediante la relacin que ocurre entre la absorbancia con la concentracin de una sustancia. MATERIALES Y METODOS: La prctica se realiz siguiendo los mismos pasos y utilizando los mismos materiales segn la gua de Laboratorio de biologa celular y bioqumica I. Los nicos cambios que se hicieron fueron el uso de la solucin indicadora rojo congo

a una concentracin de 50mg/L y como punto 1.6 se realiz una mezcla con 1mL de Azul de Bromotimol + 1mL de amortiguador de fosfato de pH7.5 +2mL de Rojo Congo + 6mL de agua destilada. RESULTADOS: 1. Determinacin de los espectros de absorcin. Tabla 1. Datos experimentales obtenidos tras la medicin de la absorbancia en diferentes sustancias en un espectro de luz visible desde 400 hasta 700nm.
LONGITUD DE ONDA (nm) 400 430 460 490 520 550 580 610 640 670 700 Azul de bromotimol (pH 7,5) 0,105 0,108 0,122 0,079 0,069 0,075 0,134 0,172 0,136 0,038 0,005 Azul de bromotimol en KMnO4 0,109 0,121 0,098 0,064 0,034 0,020 0,010 0,000 0,003 0,005 0,004 Rojo congo 0,056 0,086 0,131 0,151 0,130 0,078 0,020 0,006 0,008 0,001 0,017 Permanganato de potasio 0,010 0,007 0,023 0,069 0,136 0,148 0,048 0,011 0,010 0,012 0,020 Mezcla 1. (2 ml Azul de bromotimol + 1 ml rojo congo) 0,184 0,215 0,229 0,242 0,209 0,182 0,167 0,210 0,156 0,036 0,004 Mezcla 2. (1 ml Azul de bromotimol + 2 ml rojo congo) 0,743 0,950 1,194 1,407 1,219 0,704 0,284 0,190 0,119 0,035 0,007 Azul de bromotimol (ph7,5) Azul de bromotimol (ph5) Rojo congo KMnO4 Mezcla 1 Mezcla 2

1.350 1.200 1.050 0.900 0.750 0.600 0.450 0.300 0.150 0.000 400 430 460 490 520 550 580 610 Longitud de onda (nm) 640 670 700

Figura 2. Absorbancia vs Longitud de onda (nm) de las sustancias estudiadas. Datos adicionales: Mezcla 1 (2 ml Azul de bromotimol + 1 ml rojo congo), Mezcla 2 (1 ml Azul de bromotimol + 2 ml rojo congo) Los datos de la tabla 1, demostrados en la figura 2, indican el espectro de absorcin con respecto a la longitud de onda para cada una de las soluciones utilizadas, as se logran observar los cambios que ocurren a medida que se aumenta la longitud de onda, en algunos casos ocurre una elevacin muy grande del espectro de absorcin, en otros casos disminuye, pero segn la figura 2 se puede observar claramente el espectro de absorcin ptima que, en este caso, corresponde al valor mximo, o pico, observado en el grfico. Cada espectro de

Absorbancia

absorcin es caracterstico en cada sustancia y la forma de la curva depende de cada dato analizado. Se observa que la mezcla 2 es la que presenta un pico, es decir en ese punto se presenta la mayor absorbancia de todas con respecto a las otras muestras.

Figura 3. Observacin de coloracin en las diferentes soluciones usadas para la determinacin de los espectros de absorcin.

En la figura 3 se observan las distintas coloraciones tomadas por las soluciones que se emplearon para la determinacin de los espectros de absorcin a diferentes longitudes de onda. Todas las soluciones son homogneas y lquidas. En la figura 3A se observa una sustancia de color gris, esta corresponde a una mezcla de 2mL de Azul de Bromotimol + 1mL de amortiguador de fosfato a pH7.5 + 1mL de Rojo Congo + 6mL de agua destilada. La figura 3B es de una coloracin azul clara y corresponde a la mezcla de 1mL de Azul de Bromotimol + 1mL de amortiguador de fosfato a pH7.5 + 8mL de agua destilada. La figura 3C corresponde a la mezcla de 1mL de Azul de Bromotimol + 1 gota de cido actico al 5% + 9mL de agua destilada cuya coloracin se torno de un tono amarillo. La figura 3D muestra una solucin de color Magenta esta corresponde a la mezcla de 1mL de KMnO4 + 9mL de agua destilada. La figura 3E corresponde a la solucin de 1mL de Rojo Congo + 9mL de agua destilada, esta sustancia tom una coloracin roja oscura. La figura 3F se torn de color rojo claro, esta sustancia era la de la mezcla de 1mL de Azul de Bromotimol + 1mL de amortiguador de fosfato de pH7.5 +2mL de Rojo Congo + 6mL de agua destilada. 2. Comprobacin de la ley de Beer-Lambert:

Figura 4. Cambios de coloracin con respecto al aumento de la concentracin de Azul de Bromotimol a pH7.5 en agua destilada.

En la figura 4 se observa el cambio de coloracin que ocurre en una solucin de agua destilada con azul de Bromotimol a pH7.5 a medida que se aumenta de la cantidad del indicador mientras se disminuye la cantidad de agua destilada en la solucin. La principal caracterstica que se observa es que a medida que aumenta la concentracin de Azul de Bromotimol a pH7.5 la tonalidad incrementa, tornndose en cada tubo de un solo amarillo cada vez ms oscuro. El ltimo tubo corresponde a la solucin blanco o simplemente el agua destilada.

Tabla 2. Determinacin de los espectros de absorcin de 7 soluciones de Azul de Bromotimol a pH7.5, en diferentes concentraciones, y de una solucin problema de azul de bromotimol a una longitud de onda de 610nm. Concentracin Tubo N en mg/l %T Absorbancia
1 2 3 4 5 6 7 Problema 0.012 0.01 0.008 0.006 0.004 0.002 0 0 20 40 2,5 5 10 15 20 30 40 97,5 98,8 100,5 97,8 99,5 99,7 98,4 56,1 0,001 0,002 0,003 0,004 0,006 0,008 0,011 0,110

Absorbancia

y = 0.0003x + 0.0004 R = 0.9947 Absorbancia Linear (Absorbancia) 60 Concentracin (mg/L)

Figura 5. Grfica de Absorbancia vs Concentracin (mg/L) de Azul de bromotimol ph7.5 a una longitud de onda de 610nm.

Tomando como punto de partida la tabla 1 y el la figura 2, se identific en cul longitud de onda era mayor el espectro de absorbancia de la solucin de azul de bromtimol. En 610nm la absorbancia fue mxima y se present el pico ms alto visto en la figura 2. Esta longitud de onda se utiliz para determinar el espectro de absorbancia de 7 soluciones de Azul de bromotimol a diferentes concentraciones como se expresa en la tabla 2, y de una solucin problema de concentracin desconocida, y as se identific que la absorbancia con respecto a la concentracin se comporta de una manera casi lineal, la cual se hizo la recta que mejor se ajustaba a la curva. Segn esta recta, la absorbancia vara con respecto a la concentracin, y se determina mediante la siguiente funcin para la solucin de Azul de Bromotimol pH7.5:
y = 0,0003x + 0,0004 R = 0,9947 Ecuacin 1.

Donde 0.0003 corresponde a la pendiente de la recta, 0,0004 al intersecto con el eje Y, y R2=0,9947 es el coeficiente de correlacin de la recta (Watson et al., 2001).

Utilizando la ecuacin 1, se puede calcular experimentalmente la concentracin de la solucin problema, esto se hace reemplazando el valor de y por 0,110 que corresponde a la absorbancia, y as se despeja la variable X que corresponde a la concentracin de la sustancia:

DISCUSIN: Cuando una molcula absorbe un fotn, aumenta la energa de la molcula. Se dice que la molcula ha pasado a un estado excitado, es decir, las molculas en este estado emiten radiacin de longitud de onda mayor que la radiacin absorbida. Si una molcula emite un fotn, disminuye la energa de la molcula, fenmeno conocido como estado fundamental (Harris, 2007). La Figura6 muestra que la energa de la emisin es menor que la de absorcin, y explica por qu el espectro de emisin es, aproximadamente, la imagen especular del espectro de absorcin (Harris, 2007). Para ello, los mximos de absorcin de mayor energa corresponden a la transicin () de S0 a S1, acompaada de absorcin de uno o ms cuantos de energa, pero la emisin en la misma transicin () indica que entre mayor sea la absorcin de energa, menor es la emisin del color caracterstico de ese punto.

Figura 6. Diagrama de niveles energticos que indica la estructura de los espectros de absorcin y de emisin (Harris, 2007).

Esto implica que el color propio de cada sustancia se presenta en una energa menor que la de absorcin, es decir, la longitud de onda con menor disipacin indica una energa de excitacin nula (Harris, 2007), lo que traduce a la expresin cromatogrfica, o color, propia de la materia. 1. Determinacin de los espectros de absorcin.

1.1 Azul de bromotimol a pH 7.5 y azul de bromotimol en medio cido. La densidad de la absorcin de una transicin, a cualquier longitud de onda, est determinada por la probabilidad de que ocurra la transicin y el tamao de la molcula absorbente (Prez, 1983). Para las sustancias: azul de bromotimol a pH neutro y azul de bromotimol en medio cido, la absorcin mxima de una sustancia corresponde a la transicin ms probable en la regin de absorcin (Prez, 1983), traducido a los valores mximos de longitud de onda registrados en el grfico, 610nm y 430nm respectivamente. Para la disociacin del azul de bromotimol con otras sustancias existe una variacin de la absorbancia del compuesto o mezcla formada, con ello la forma absorbente permuta en relacin a la concentracin total de la forma disuelta (Prez, 1983). El azul de bromotimol es usado para determinar la naturaleza cida o bsica de un material sobre un rango, y ese rango es identificado con el cambio de un color indicador. (Stamell, 2001) Este indicador, molecularmente, existe como un par conjugado tanto de cido como de base (dbiles o conjugados), que por medio de inconversiones estructurales otorga el cambio de la coloracin con un cambio de pH; si es cido, el indicador acepta protones del medio y la sustancia obtiene un color amarillo, de lo contrario si es base, se dona un protn al medio y el color indicador es el azul (Stamell, 2001). El pico de absorcin para el azul de bromotimol en medio cido se registr alrededor de los 430nm, por lo tanto, el color azul es el que presenta mayor absorcin aunque el color transmitido es el amarillo. Esto se da como consecuencia de que el color de mayor transmitancia corresponde al color que es complemento al tono que presenta menor absorbancia (Harris, 2007). Por otro lado, el azul de bromotimol a pH 7,5 present una longitud de onda de 610 nm que corresponde al color naranja, de acuerdo al espectro de luz, lo que permite inferir que la luz transmitida por la sustancia es azul. De acuerdo a (Sundaram, Spearing & Vienna, 2012), los resultados obtenidos en la experimentacin indican que algunas longitudes de onda trabajadas para cada transmisin son similares. No se obtuvo el punto isobstico en 500nm de acuerdo al grfico referencial; tales puntos, comunes y dados para las caracterizaciones de pH a lo largo de espectro, indican el equilibrio entre las distintas muestras coloreadas donde la absorbancia es considerablemente independiente del pH (Braun, 1982). 1.2 Rojo congo Es un colorante sustantivo para la celulosa, directo, que se une a las fibras celulsicas por fuerzas de adsorcin o enlaces de hidrgeno (Fieser & Fieser, 1964). Se comporta como una molcula simtrica con dos sulfatos cargados

negativamente, su estructura molecular y la manera como interacciona con las ondas electromagnticas, le confieren a este colorante su absorbancia y caractersticas nicas (Steensma, 2001). La absorcin mxima del rojo congo diluido se registr a los 490nm lo que representa que el Azul- verde es el color que present mayor absorcin. As el rojo, siendo el color complementario del azul- verde, es el color que present mayor transmitancia por la sustancia, tincin que indica la presencia de una sustancia bsica (Fieser & Fieser, 1964). Por su color rojo intenso, el rojo congo tiene propiedades espectrofotomtricas, de hecho, su espectro UV- visible de absorcin presenta un pico caracterstico alrededor de 490nm (Figura 7) (Macy, 1976), lo que describe que no hubo diferencia de acuerdo a la longitud de onda registrada.

Figura7. Espectro de absorcin rojo congo a pH neutro (Macy, 1976).

Permanganato de Potasio: El pico de absorcin del permanganato de potasio hallado experimentalmente corresponde aproximadamente a 550 nm,y su color en el espectro visible es magenta. La razn por la cual esta solucin posee una coloracin magenta es debido a que hay una absorcin de fotones con longitudes de onda en la regin visible del espectro, esto es lo que produce la sensacin de color al observador. Si la solucin en cuestin tiene su pico en 550 nanmetros, corresponder una absorcin de verde-amarrillo, y se reflejar el resto del espectro visible, por tanto se observa el color violeta que es el color complementario o la suma de los colores correspondientes al resto de las longitudes de onda de la regin visible del espectro (Contreras,2011).

Mezcla 1 y 2: En una mezcla, es decir un sistema con mas de un componente de radiacin, la absorbancia total esta dada por sus componentes. Si entre ellos no hay interaccin y la presencia de uno no afecta las propiedades del otro, la absorcin de luz es la suma de absorbancias de todas las especies que hay en la disolucin. Es decir, la absorcin de luz es aditiva y ser la suma de las absorbancias individuales que tendra cada sustancia si estuvieran en soluciones separadas (Harris,2007).

En la mezcla de 2 ml de azul de bromotimol y 1 ml de rojo congo se observan dos picos, el primero en 490 nm y el segundo en 610 nm los cuales corresponden a los picos de mxima absorbancia de cada componente de la mezcla. Este fenmeno solo ocurre ya que no hay cambios en las propiedades fsicas y qumicas de cada, permitiendo as que no exista cambio en la absorbancia. La suma de estos dos picos interviene en la coloracin final de la mezcla pues la regin visible del espectro ser la suma de los colores correspondientes al resto de las longitudes de onda de los dos picos de las sustancias, en este caso gris (Harris, 2007). En la mezcla de 1 ml de azul de Bromotimol y 2 ml de rojo congo se observa por el contrario un solo pico de absorbancia en 490 nm el cual corresponde al pico de absorbancia en la solucin de rojo congo, no se observa el pico de absorbancia de la solucin de azul de Bromotimol, este hecho pudo haber sido causado por errores experimentales en el manejo del instrumento o en la toma de datos. 2. Comprobacin de la ley de Beer-Lambert. Las medidas que se hicieron en la prctica se tomaron desde un punto de referencia el cual fue la longitud de onda donde se presentaba el mayor pico, es decir la absorbancia mxima, aqu es donde ocurre una mayor sensibilidad. La absorbancia es casi constante con longitud de onda a una absorcin mxima, con lo cual puede esperarse un buen cumplimiento de la ley (Skoog, 2008).Cuando se observan los datos de la figura 2, puede interpretarse que la absorcin se comporta de manera lineal con respecto a la concentracin y tienen a ser una lnea recta. La relacin entre la absorcin de luz por una solucin diluida o por un gas y la concentracin de la fase absorbente viene dada por la ley de BeerLambert. Primero que todo, cada cuanto de luz que penetra en la solucin tiene igual oportunidad de ser absorbido. Esto implica que la luz es monocromtica. Cada molcula de la sustancia que absorbe tiene igual oportunidad de absorber y de interceptar un cuanto de luz (Walton & Reyes, 1983). La atenuacin de la radiacin a medida que este pasa a travs de un medio absorbente se puede describir cuantitativamente mediante dos trminos distintos, relacionados entre s, la transmitancia y la absorbancia. En la tabla 2 se observa la %T para cada una de las concentraciones. A la fraccin de la radiacin incidente que pasa a travs de la muestra se le denomina Transmitancia y toma valores entre 0 y 1, esta suele expresarme en % segn la siguiente ecuacin (Sierra et al., 2010):
%T=(I/Io)x100 Ecuacin 2.

Esta ley es un resultado emprico, sin embargo se puede determinar mediante ciertas variables y circunstancias. La intensidad transmitida vara con la longitud de la trayectoria de la luz y con la concentracin molar de la especie absorbente, en este caso, azul de bromotimol a pH7.5. Esta ley est dada por la expresin:
A=LC Ecuacin 3.

Donde A corresponde a la Absorbancia, L a la longitud de la luz que tiene que pasar, C es la concentracin en este caso se da en mg/L, y se denomina como el coeficiente de absorcin molar. Este depende de la frecuencia de radiacin incidente y es mayor donde la absorcin sea ms intensa (Castieiras & Queralt, 1998). Sin embargo esta ley tiene ciertas limitaciones que hacen que en ciertos casos la absorbancia no se comporte de manera proporcional a la concentracin y deje de ser lineal. En la prctica se logr encontrar una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin debido a que se cumplen ciertas condiciones que solo ocurren cuando se cumple esta ley, Segn Sierra (2010) estas condiciones son: -La concentracin de la especie absorbente debe ser baja. -La radiacin utilizada debe ser monocromtica (de un solo color). -El nico mecanismo de interaccin entre la radiacin electromagntica y la especie absorbente es el de la absorcin. -La especie absorbente no deben interaccionar entre s ni con el disolvente. -Las especies absorbentes no deben sufrir transformaciones fotoqumicas. -La absorcin estudiada corresponde a un volumen de seccin transversal uniforme. Ya teniendo en cuenta todos estos datos, se comprob que la ley se presenta en esta sustancia, pues se observa que la longitud de onda permanece en un crecimiento lineal positivo constante, la lectura de salida de absorbancia, a medida que hay una ms molcula ser mayor en la solucin, ser mayor la absorbancia, la relacin es directamente proporcional, por lo tanto, si la concentracin de la solucin aumenta, tambin lo har la absorbancia (Bonner, 2011). Se observ que la concentracin de la solucin problema fue muy alta, estas son anomalas o errores que se presentaron en los resultados y pueden llegar a tener diversas causas, entre ellas las limitaciones de la ley de Lambert, las cuales se presentaron anteriormente, o simplemente errores personales de mala manipulacin de material. SECCIN DE PREGUNTAS: Cules son los fundamentos en los que se basan las tcnicas de espectrofotometra? La espectrofotometra de absorcin consiste en la medida de la radiacin que llega a un detector tras producirse un fenmeno de absorcin de luz por parte de una sustancia absorbente. Es decir, esta tcnica se basa en la capacidad de absorcin de radiacin electromagntica que tiene cada sustancia, esta propiedad va ligada a la longitud de onda de cada radiacin y la concentracin de la solucin en la muestra. (Silvia y Garca 2006;Dick, 1979).Cuando un haz de luz de intensidad incide sobre una solucin coloreada que absorbe luz a una determinada longitud de onda, se produce en la solucin un proceso de absorcin y el haz de luz sale

con una intensidad menor,esta relacin entre la luz incidente y transmitida se llama trasmitancia. (Silvia y Garcia 2006) Qu aplicaciones tienen las tcnicas espectrofotomtricas? Las tcnicas espectrofotomtricas tienen varias aplicaciones,por ejemplo la medicin de la absorcin de radiacin electromagntica de una sustancia o la medicin de la trasmitancia de una muestra determinada,tambin la cuantificacin de la concentracin de sustancias qumicas y la identificacin de ellas. Otra aplicacin de las tcnicas de espectrofotometra es la medida del color de solidos y lquidos por reflexin, medicin de puntos lejanos mediante fibra ptica o la implantacin de mtodos rpidos y no invasivos para la determinacin de diferentes parmetros de forma fiable.(Pino y Prez,1983) BIBLIOGRAFA Bonner, P. 2011. Bioscience Laboratory Techniques: A Pocket guide. WileyBlackwell. Teheran. Pp 61-62. Braun, R. 1982. Introduction to Chemical Analysis. McGraw-Hill. New York. Pp 197. Castieras, M; Queralt, J. 1998. Bioqumica clnica y Patologa Molecular. Revert. Barcelona. Pp 193-196. Contreras,R.2011.El origen del color en la vicerrectorado acadmico CODEPRE. Mrida.Pp 30. naturaleza. Publicaciones

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