SEMINARIO SEMANA N 15 TERAPIA GENICA Y CELULAS MADRE 1.

Cules son las 2 caractersticas ms importantes para reconocer una clula madre? Explquelas. Las clulas madre son clulas con capacidad de diferenciarse (convertirse en muchos tipos distintos de clulas en el organismo). Puede producir clulas de uno o ms tejidos maduros, funcionales y plenamente diferenciados en funcin de su grado de multipotencialidad. Este tipo de clulas tienen dos caractersticas muy importantes que las distinguen de las dems. La primera es que son clulas no especializadas que se renuevan ilimitadamente. La segunda es que bajo ciertas condiciones fisiolgicas o experimentales, se puede inducir a que se conviertan en clulas con funciones especiales (por ejemplo, clulas musculares cardacas o clulas pancreticas que produzcan insulina). Se les puede clasificar en clulas madre embrionarias, aquellas que forman parte de la masa celular interna de un embrin de 4-5 das de edad, y clulas madre adultas, aquellas no diferenciadas que se encuentran en tejidos y rganos adultos y que poseen la capacidad de diferenciarse para dar lugar a clulas adultas del tejido en el que se encuentran. Hoy en da, se estn realizando muchos estudios acerca de las clulas madre ya que tienen mucho potencial en muchas reas de la salud y la investigacin mdica. El estudio de estas clulas puede ayudar a explicar cmo se producen algunos cuadros serios tales como los defectos congnitos y el cncer. Algn da, las clulas madre podrn utilizarse para producir clulas y tejidos para el tratamiento de muchas enfermedades, inclusive la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Alzheimer, los traumatismos en la mdula espinal, las enfermedades cardacas, la diabetes y la artritis. 2. Seale las caractersticas de las clulas madre totipotentes, pluripotentes, multipotentes, unipotentes?. Relacione los conceptos sealados con las caractersticas propias de clulas madres embrionarias, fetales y adultas. De acuerdo al tipo de tejido que originan, existen cuatro tipos de clulas madre: totipotentes, pluripotentes, multipotentes y unipotentes El trmino totipotencial (del latn totus, que significa completo) hace referencia al potencial que tienen estas clulas de generar un embrin completo (tejido embrionario y extraembrionario); es la que puede dar lugar a todo tipo de clulas del organismo, incluso a las clulas placentarias. Slo el zigoto u vulo fecundado y los primeros estadios del embrin (cuando se denomina mrula) son clulas madre totipotenciales. Pluri (del latn plures, que significa muchos o varios) es utilizado para describirlas clulas madre pluripotentes que pueden dar origen a

progenitores que forman cualquiera de las tres capas germinales embrionarias: mesodermo, endodermo y ectodermo. Es importante destacar que para que una clula madre pueda considerarse como pluripotente tiene que cumplir las siguientes condiciones: en primer lugar, una nica clula debe ser capaz de diferenciarse a progenitores especializados procedentes de cualquier capa embrionaria; en segundo lugar, demostrar la funcionalidad in vitro e in vivo de las clulas en las que se ha diferenciado, y, finalmente, que se produzca un asentamiento claro y persistente de stas en el tejido blanco, tanto en presencia como en ausencia de dao en los tejidos en los cuales se injerta. Las clulas madre multipotenciales son aquellas que pueden dar origen a precursores relacionados solamente con una de lastres capas embrionarias; por ejemplo, clulas madre que dan origen a tejidos derivados exclusivamente del endodermo como tejido pancretico o pulmonar las clulas madre unipotenciales, que corresponden a las clulas que solo pueden generar clulas hijas que se diferencian a lo largo de una sola lnea celular, tal como su nombre lo refiere (del latn unus: uno) La mayora de las clulas madre de un tejido especfico que no ha sufrido ningn tipo de agresin o dao son del tipo unipotencial y son las responsables de la fase fisiolgica de auto-renovacin tisular, donde la cantidad de clulas perdidas es igual al nmero de nuevas clulas. Las clulasmadre embrionarias pueden ser obtenidasa partir de las primeras etapas de formacin del embrin cuando el vulo fecundado es una esfera compacta o); stas son entonces precursores totipotenciales con capacidad de proliferar; Las clulas madre adultas hacen referencia a cualquier clula que se encuentre en un organismo desarrollado y que tiene dos propiedades: la capacidad de dividirse y crear otra clula igual a s misma y la de dividirse para crear una clula diferente de s misma. Tambin es conocida como clula somtica (del cuerpo). Las clulas madre pueden encontrarse en los nios, as como los adultos. 3. En la mdula sea existen una gran variedad de clulas madre. Describa las Hematopoyticas, Mesenquimales y VSEL. Hematopoyticas: Se definen como aqullas capaces de repoblar a largo plazo todos los linajes hematopoyticos cuando son trasplantadas a receptores sometidos a un tratamiento mieloablativo que permita su injerto. Las clulas madre hematopoyticas (CMH) son las precursoras de todas las clulas que componen nuestra sangre y nuestro sistema inmunitario. En los adultos, esas clulas progenitoras se hallan en la mdula sea, un complejo tejido blando que ocupa los espacios huecos del interior de los huesos, en particular de los huesos largos y planos. Durante toda nuestra vida, un gran nmero de CMH se diferencia continuamente para llenar los rganos hematopoyticos y linfticos con clulas maduras y reemplazar las clulas que llegan al final de su vida til o bien son eliminadas o se pierden por otros motivos. As, pues, las CMH son esenciales para nuestro crecimiento y supervivencia. La

capacidad de las CMH para repoblar la sangre y el sistema inmunitario es una propiedad extremadamente til para tratar algunos trastornos. De hecho, la infusin de CMH puede salvar al individuo de un fracaso medular derivado de un trastorno medular o de la exposicin a radioterapia o quimioterapia, generando una progenie de nuevas clulas sanas. En experimentos, una sola CMH logr repoblar la sangre de un ratn que recibi una dosis de radioactividad que le habra ocasionado la muerte. La primera evidencia de la existencia de clulas madre hematopoyticas en el ser humano surgi en 1945, cuando se observ que algunos individuos que haban sido expuestos a dosis letales de radiacin podan ser rescatados mediante un trasplante de mdula sea de un donador sano, el cual permita la regeneracin del tejido sanguneo. En 1960, McCulloch y Till notaron que ratones radiados letalmente, a los que se haba inyectado clulas extradas de la mdula sea de ratones no radiados, podan sobrevivir y comenzaron a analizar los tejidos hematopoyticos de estos animales con la finalidad de encontrar los componentes causales de la regeneracin sangunea. De esta manera, hallaron masas tumorales en el bazo de los ratones que, una vez examinadas, resultaron ser colonias de hematopoyesis, capaces de generar las tres estirpes celulares, de donde naci el concepto y definicin de la clula madre como aquella capaz de autorrenovarse, diferenciarse y proliferar extensamente. Mesenquimales: Las clulas madre mesenquimales son clulas pluripotentes y adultas con morfologa fibroblastoide y plasticidad hacia diversos linajes celulares como condrocitos, osteocitos y adipocitos entre otros. Estas clulas pueden ser aisladas principalmente de mdula sea, sangre de cordn umbilical y tejido adiposo de donde se han logrado establecer cultivos que han permitido estudiar sus propiedades funcionales y fenotpicas. Las diferencias entre los trminos de clulas madre mesenquimales y clulas mesenquimales para que estos no sean utilizados indistintamente: El tejido mesenquimal o mesnquima es el tejido conectivo embrionario que procede del mesodermo y tiene una gran variedad de tipos celulares. A partir de este tejido, por diferenciacin celular y regulacin diferencial, se originan patrones de desarrollo diferentes que provocan la aparicin de tejidos ms especializados. Desde un punto de vista estricto, las clulas que se encuentran en el mesnquima son las denominadas clulas mesenquimales, pero este trmino no es lo suficientemente descriptivo, ya que se utiliza sin ningn rigor para tambin hacer referencia a las clulas madre mesenquimales (CMMs), que son un tipo de clulas pluripotenciales a partir de las cuales pueden originarse los diferentes tipos de tejidos conectivos. As, mientras que las clulas del mesnquima no se diferencian en clulas hematopoyticas, las CMMs s que pueden hacerlo. Esto implica

que las CMMs son clulas mesenquimales, pero no todas las clulas mesenquimales son CMMs. Caractersticas Las CMM son un blanco prometedor como teraputico biolgico para un amplio rango de necesidades mdicas no resultas. Las razones para esto son muchas e incluyen: fcil aislamiento y expansin en cultivo, multipotencia, efectos paracrinos, propiedades inmunomoduladoras, conducta migratoria y consideraciones ticas. VSEL: VSEL, que puede movilizarse internamente y se pueden recoger de la sangre perifrica para luego diferenciarse en clulas de las tres capas germinales. Aunque los beneficios de la tecnologa VSEL son an tericos, se piensa que podra haber aplicaciones clnicas para la regeneracin cardaca, la degeneracin macular, los accidentes cerebro vasculares y la enfermedad vascular perifrica en un periodo de tan slo tres a cinco aos. Las clulas VSEL, como su propio nombre indica, tienen un tamao pequeo de entre 3 y 5 micras. Lo interesante de estas clulas es que expresan antgenos embrionarios y ciertos marcadores de clula germinal primordial. Estas clulas VSEL se encuentran presentes tambin en la sangre del cordn umbilical, lo cual aade un inters adicional a su conservacin privada. El gran inters de este subtipo celular radica en que conserva la pluripotencialidad propia de las clulas embrionarias, mientras que al estar presentes en la sangre del cordn y en la sangre perifrica, su obtencin no requiere la manipulacin ni destruccin de embriones. Slo la sangre completa almacena las VSELs Un importante avance ha descubierto las VSELs (Very Small Embryonic-Like Stem Cells o clulas madre muy pequeas que se comportan como embrionarias). Se cree que estas VSELs se liberan a la sangre si hay una lesin de tejido u rgano. Las VSELs contienen varias caractersticas tpicas de las clulas madre embrionarias. Estas propiedades indican que las VSELs son herramientas poderosas del cuerpo para reparar daos. Con el mtodo de reduccin de volumen se pierden las VSELs Las VSELs se encuentran en el mismo gradiente de densidad que los glbulos rojos y se pierden al centrifugar las clulas madre antes de su almacenamiento, es decir, se desechan como son las hormonas y los factores de crecimiento. Las VSELs tambin se pueden encontrar en otros tipos de tejidos como ocurre con las clulas madre adultas. Este hallazgo fue descubierto durante la investigacin llevada a cabo por la Universidad de Louisville. En sta tambin se afirm que el 50% de estas VSELs se pierde con el mtodo de volumen reducido debido a su morfologa nica. 4. Qu es un marcador celular? Explicar brevemente la Protena verde fluorescente (GFP).

Los marcadores celulares se encuentran en todas las celulas somaticas ,son antigenos (proteinas) de superficie de todas las celulas, algunas de estas proteinas se encuentran solo en ciertos tipos de celulas, por ejemplo el CD16 es la proteina que se expresa especficamente en neutrfilos, clulas NK y macrfagos. Proteina verde fluorescente

La protena verde fluorescente (o GFP, por sus siglas en ingls, Green Fluorescent Protein) es una protena producida por la medusa Aequorea victoria, que emite bioluminiscencia en la zona verde del espectro visible. El gen que codifica esta protena, que ya ha sido clonado, se utiliza habitualmente en biologa molecular como marcador1. El descubrimiento y estudio de GFP represent un enorme avance para los investigadores, ampla la capacidad del microscopio ptico, y otorga una nueva dimensin visible al ojo humano. Los descubrimientos relacionados a la GFP de Osamu Shimomura, Martin Chalfie, y Roger Y. Tsien merecieron el Premio Nobel de Qumica 2008, otorgado en partes iguales a los tres, "por el descubrimiento y desarrollo de la protena verde fluorescente. A pesar que la llamada qumica "verde" est de moda en la comunidad de qumicos, ningn esfuerzo de los mismos ha podido igualar las reacciones que coordina un solo gen de esta medusa. Las protenas fluorescentes, entre las cuales se encuentra la GFP, son muy verstiles y se utilizan en diversos campos como la microbiologa, ingeniera gentica y fisiologa. Permiten ver procesos previamente invisibles, como el desarrollo de neuronas, cmo se diseminan las clulas cancerosas, el desarrollo de la enfermedad de Alzheimer, el crecimiento de bacterias patognicas, la proliferacin del virus del SIDA, entre otros. Por ejemplo, clulas cancerosas permite seguir la evolucin comparativa de las metstasis en presencia o ausencia de distintos frmacos. La GFP tambin tiene una importancia especial en la biologa del desarrollo: si se introduce en un estadio temprano de un embrin, se puede seguir la evolucin de las primeras clulas, estructuras y rganos. 5. Cules son las diferencias entre: a. Terapia Regenerativa. b. Ingeniera de Tejidos c. Terapia Gnica 6. TERAPIA REGENERATIVA
La terapia celular o terapia de regeneracin celular, es un tratamiento mdico especializado en regenerar las clulas daadas, disfuncionales, desvitalizadas ya sea por enfermedad o por el proceso de envejecimiento. Es un tratamiento que se basa en la utilizacin de clulas madre fetales de origen bovino, con la funcin de reparar todos las afecciones microcelulares del organismo, as dando como resultado bienestar, aumento de la energa fsica,

mental y sexual, adems de corregir la gran mayora de los padecimientos, al igual que brindar un efecto como tratamiento anti-envejecimiento.

7. INGENIERIA DE TEJIDOS La Ingeniera de tejidos, es considerada como un campo de la medicina regenerativa , es la rama de la bioingeniera que se sirve de la combinacin de clulas, mtodos de ingeniera de materiales, bioqumica y fisicoqumica para mejorar o reemplazar funciones biolgicas. Mientras la mayora de definiciones de la ingeniera de tejidos cubre un amplio rango de aplicaciones, en la prctica el trmino esta ntimamente relacionado con las aplicaciones de reparar o reemplazar parcial o totalmente tejidos . A menudo, los tejidos implicados requieren ciertas propiedades mecnicas y estructuras para su propia funcin. Esta ingeniera es una especialidad que aplica los principios de la ingeniera y las ciencias de la vida a la fabricacin de sustitutos biolgicos que mantengan, mejoren o restauren la funcin de rganos y tejidos en el cuerpo humano. De naturaleza eminentemente interdisciplinaria, la ingeniera de tejidos incluye conceptos de ramas tan diversas como la biologa celular, la microfabricacin, la robtica y la ciencia de los materiales para disear partes de reemplazo del cuerpo humano. 8. TERAPIA GENICA
Terapia gnica implica la transferencia de material gentico a una clula, un tejido o un rgano con el fin de curar una enfermedad o al menos mejorar el estado clnico de un paciente, asimismo trata de curar enfermedades hereditarias, debidas a genes defectuosos, insertando genes sanos en las clulas. Es una terapia an en desarrollo y experimentacin, pero con un futuro prometedor, sobre todo para tratar enfermedades que actualmente se consideran incurables. Los componentes esenciales de la terapia son: un vector capaz de introducirse eficiente y selectivamente en las clulas que constituyan el foco de la enfermedad, y un gen teraputico que represente un remedio gentico para la patologa.

La finalidad principal de los estudios sobre terapia gnica en el mbito de la medicina es conseguir los mejores resultados tanto en prevencin como en investigacin, diagnstico y terapia de las enfermedades hereditarias; sin embargo, esta manipulacin del material gentico puede ser utilizada en ingeniera gentica, con el fin de mejorar determinadas caractersticas de los seres vivos.

Conclusiones: La terapia gnica se erige en la actualidad mdica como una de las

formas ms promisorias de teraputica pero todava hace falta encontrar la respuesta a muchos interrogantes conceptuales y tcnicos para que esta sea un arma til contra la amplia gama de patologas que

enfrentamos los seres humanos. Los avances en genoma humano y en regulacin gnica seguramente van a traer los elementos necesarios para hacer de la terapia gnica la nueva forma de manejar la salud en el mundo.

Conclusion: Las Celulas Madre, junto con la manipulacion genetica, van a constituir dos pilares basicos de la Medicina de los proximos aos. La tecnologia genetica impedira la aparicion de muchas enfermedades inscriptas en nuestros genes. La Celula Madre, por su parte, proveera de tejidos y organos de repuesto a medida que los nuestros se vayan deteriorando. Por supuesto que esto no es tan simple....se debe tratar de conseguir el beneficio sin necesidad de sacrificar vidas humanas.