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DNA e RNA Dogma Central da Biologia Molecular Profa. Dra.

Vivian Alonso Goulart Curso de Biotecnologia Universidade Federal de Uberlndia 1 PARTE 1. cidos nuclicos DNA: cido desoxirribonuclico; RNA: cido ribonuclico. 1

2. Composio qumica dos cidos nuclicos Composio qumica do cido Fosfrico Composio qumica da Desoxirribose e Ribose 2

3. Base nitrogenada Existem 5 tipos; Divididas em: a.Pricas (dois anis benzenos); b.Pirimidnicas (um an el benzeno). a. Bases pricas: Adenina (A) e Guanina (G); b.Bases pirimidnicas: Citosina (C); Timina (T) e Uracila (U). No DNA esto presentes: No RNA esto presentes: Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) e; Timina (T). Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) e; Uracila (U). 3

Composio qumica das Bases nitrogenadas Representao da unio entre as 3 substncias que formam 1 nucleotdeo 3. Estrutura molecular dos cidos nuclicos 1.DNA Proposta por James Watson e Francis Crick (1953); 4

Principais Funes do DNA DIVISO CELULAR DUPLICAO (replicao) do DNA. EXPRESSO GNICA - Produto Gnico - TRANSCRIO E TRADUO DNA o material gentico de quase todos os seres vivos. Hlice Dupla Figura 1 5

Existem regras para a unio entre dois nucleotdeos de uma mesma fita de DNA? Resposta: Sim. 6

E quando duas fitas se unem para formar a Hlice dupla de DNA? Regras a serem seguidas 1a regra: Base Prica se une a Base Pirimidnica e vice-versa. 2a regra: A T (2 pontes H) e C G ( 3 pontes H) 7

Obs.: As duas fitas so complementares. Elas no so idnticas, mas se complementam perf eitamente. Representao da unio entre dois nucleotdeos de duas fitas de DNA Obs.: As 2 fitas so antiparalelas. Isso significa que correm em sentidos opostos. Uma fita comea com 5' e termina com 3' enquanto a outra comea com 3' e termina co m 5'. 8

3. Estrutura molecular dos cidos nuclicos 2.RNA O RNA uma fita simples. menor que o DNA. relacionado com a sntese protica. gentico de alguns vrus. Material Estrutura do RNA RNA mensageiro BASES (RNAm) Tipos de RNA RIBOSE RNA ribossomal (RNAr) RNA transportador (RNAt) 9

Diferena entre o DNA e o RNA cidos nuclicos Componentes Bases nitrogenadas Pentose Fitas Localizao DNA A, G, C e T desoxirribose RNA A, G, C e U ribose Duas (hlise dupla) uma Cromatina (DNA), Mitocndrias e cloroplastos Nuclolo,suco nuc lear, ribossomos, mitocndrias e cloroplasto 2 PARTE DOGMA CENTRAL DA BIOLOGIA MOLECULAR 10

DOGMA CENTRAL DNA RNA Protena (Produto gnico) (todas as clulas) Procarioto X Eucarioto EUCARIOTOS Citoplasma Ncleo Introns Exons PROCARIOTOS DNA

DNA TRANSCRIO SPLICING capa 5 RNAm poli-adenilao 3 AAAA EXPORTAO RNAm TRADUO Prote Pr-RNAm TRANSCRIO RNAm TRADUO Protena DUPLICAO OU REPLICAO Objetivo: Gerar cpias das molculas de DNA. Se faz necessria para que ocorram a Mitose e/ou a meiose. Ocorre no ncleo. um processo Semiconservativo. 11

REPLICAO DO DNA Semi-conservativa; assincrnica Enzimas que participam da Replicao 12

REPLICAO DO DNA Bidirecional Semidescontnua 13

Reparo do DNA 1erro em cada 1.000.000.000 bases adicionadas durante a replicao Vdeo Replicao do DNA 14

Transcrio Objetivo: formar as molculas de RNA tendo como molde segmentos de uma das fitas d o DNA. Se faz necessria para que haja produo de protena. Ocorre no ncleo. Enzima envo lvida: RNApolimerase - Encaixe de novos nucleotdeos obedecendo a correspondncia: AU e CG. Eucarioto X Procarioto 15

TIPOS DE RNAs 1. RNA mensageiro Funo: carrega as informaes do ncleo at o citoplasma. O nmero de otdeos diretamente proporcional ao tamanho da protena que codifica. 16

2. RNA ribossmico Funo: constitui os ribossomos junto com as protenas. a maior molcula de RNA. o mais abundante (80% do RNA celular). Ribossomos de procariotos e eucariotos EUCARIOTOS PROCARIOTOS 49 PROTENAS 33 PROTENAS 34 PROTENAS 21 PROTENAS Ribossomo -Tamanho: de 20 a 30 nm de dimetro. - 50% da estrutura dos ribossomos so de rRNA. Em eucariotos: * rRNA (sintetizado no nuclolo) * Exceo rRNA 5S * Associao n o ncleo com protenas importadas do citoplasma

- Possuem funes catalticas (Ribozimas). -Localizao: Ncleo Citoplasma, mitocndrias e cl roplastos. -A maior parte das protenas ribossmicas so protenas bsicas de pequeno tamanho. A sua carga positiva lhes permite interagir com as cargas negativas do RNAr. 17

3. RNA de transferncia carregam os aminocidos, essenciais para a sntese de uma protena existe um RNAt para cada um dos 20 tipos de aa 3. RNA de transferncia 18

Vdeo Transcrio do DNA TRADUO Objetivo: Sintetizar molculas de Protenas. Se faz necessria para que o fentipo de uma caracterstica seja expresso ou se manifeste em um indivduo. Ocorre no citoplasma. TRADUO Molculas envolvidas: RNAm RNAr Aminocidos RNAt Enzimas e ATP 19

Como a informao do RNAm decodificada?? RNAm so polinucleotdeos formados a partir de 4 nucleotdeos X X Relao 1:1 4 aminocidos Relao 2:1 16 aminocidos (42) Protenas so polmeros formados a partir de 20 aminocidos RNAm lido pelo complexo Ribossomo e RNAt por blocos de 3 nucleotdeos (CDON) Relao 3:1 64 aminoc idos (43) Cdon Aminocido CDIGO GENTICO

Propriedades do Cdigo Gentico 1 A unidade do cdigo gentico constituda de trs letras a partir da combinao de A, C, e U. 3 letras no RNAm 1 cdon 1 aminocido na protena Cdigo gentico Degenerado os aminocidos podem ser codificados por mais de um cdon No ambguo cada cdo n corresponde a um nico aminocido Universal todos os organismos possuem o mesmo si stema 20

Cdigo gentico

Propriedades do Cdigo Gentico 2 O cdigo gentico tem ponto inicial A leitura da fita de mRNA sempre comea por um p onto determinado: cdon 5AUG 3. O incio da traduo sempre no local correto se d graas a a seqncia anterior ao cdon 5AUG 3, que complementar ao rRNA da subunidade menor do ri bossomo, de modo que quando o mRNA se associa com o ribossomo, o cdon se posicion a no local de incio da traduo. Sntese de Protenas 21

Processamento do RNAr e seu transporte para o citoplasma EUCARIOTOS Ncleo DNAr Nuclolo RNAr 5S Pr-RNAr Protenas ribossomais 18S 28S 5.8S 5S 18S Citoplasma SUB-UNIDADE 40S SUB-UNIDADE 60S 28S 5.8S 5S Estrutura dos Ribossomos SUB-UNIDADE MAIOR SITIO E SITIO P SITIO A SUB-UNIDADE MENOR SUB-UNIDADE MAIOR SUB-UNIDADE MENOR SITIO DE LIGAO DO RNAm Localizao dos Ribossomos 22

RNAm RNAt 23

RNAt AMINOCIDO 3 5 ALA T ALA D DIFRAO DE RAIO X 1 RNAt (anti-cdon) ALA DO ANTI-CDON ANTI-CDON 64 RNAt?? ~30 RNAt!! 1 aa (cdon) Sntese protica 3 Etapas Iniciao Elongao Terminao Fatores de Iniciao (IF, eIF) Fatores de Elongao (EF, eEF) Fatores de Terminao (RF, eRF ) INICIAO Procarioto: Procarioto formil-metionina (AUG AUG) Eucarioto: Eucarioto met ionina (AUG AUG) Como reconhecido o AUG iniciador certo????? 24

INICIAO Procarioto: Procarioto formil-metionina (AUG AUG) Como reconhecido o AUG iniciador certo????? Seqncia Shine-Dalgarno Shine(SUB-UNIDADE MENOR) INICIAO Eucarioto: Eucarioto metionina (AUG AUG) Como reconhecido o AUG iniciador certo????? Capa 5 (7-metil-guanosina) (7-metilINICIAO 1 RNAT INICIADOR SUB-UNIDADE MENOR 2 FATORES DE INICIAO RNAm 25

INICIAO 2 3 INICIAO 3 + FATORES DE INICIAO 4 INICIAO 4 5 AMINOACIL RNAt 26

INICIAO 5 PRIMEIRA LIGAO PEPTDICA 6 PEPTIDIL TRANSFERASE ELONGAO 1 SITIO E SITIO P SITIO A RNAm 2 E ELONGAO 3 E 4 E 27

ELONGAO 4 E 5 ELONGAO 5 6 TERMINAO 1 FATOR DE TERMINAO 2 28

TERMINAO 2 3 TERMINAO 3 4 POLISSOMOS RNAm Cdon stop Protena de ligao a cauda poli-A Cdon de iniciao PROTENA 29

Resumo da Sntese 1) Ativao do aa e ligao ao tRNA especfico. 2) Associao do RNAm a subunidade menor do r bossomo. (IFs) 3) Associao das duas subunidades (maior e menor) ribossomais. * No caso de procariotos a subunidade maior somente se associar depois da ligao do tRNA trazendo a f-Met. 4) Cdon iniciador: eucariotos (AUG ou GUG) Met (AUG), procariot os f-Met 5) Alongamento da cadeia polipeptdica (EFs) 6) Terminao da cadeia (Stop cdons, RFs) e liberao da protena. Tamanho das protenas O nmero de aminocidos nos polipeptdios varia de cerca de 200 a 5.000; Com mdia em to rno de 330; O que significa que o mRNA maduro varia em torno de 600 a 15.000 bas es.

O corpo humano processa cerca de 60.000 tipos de protenas, tendo cada uma diferen te e especfica funo; Esta funo pode ser fisiolgica ou estrutural; A protena hemoglobin , por exemplo, carrega oxignio no sangue; 30

O colgeno uma protena estrutural encontrada em diversas partes do nosso organismo incluindo nariz e os lobos das orelhas; Actina e miosina interagem para dar os movimentos musculares; A insulina controla o teor de acar no sangue e no interior das clulas; Algumas aind a so hormnios (por exemplo, o hormnio de crescimento); Outras controlam a passagem de hormnios (por exemplo, o receptor de estrognio); BLOQUEADORES DE SNTESE PROTICA 31

Vdeo Traduo do DNA Referncias Bibliogrficas Junqueira e Carneiro. Biologia Celular e Molecular. 8a ed. 2005. Editora Guanaba ra Koogan. De Robertis. Bases da Biologia Celular e Molecular. 4a ed. 2006. Edit ora Guanabara Koogan. 32