ESCOLA SECUNDRIA DO MONTE DE CAPARICA

CURSO PROFISSIONAL DE TCNICO DE ANLISE LABORATORIAL NVEL IV

Aluna: Luana Aires Data: 28/09/11 Lab-202 Discipina : Qumica Aplicada

Ttulo : Identificao de Protenas Objetivos do trabalho

Identificar a presena de protenas em certas substncias, atravs de vrios processos como Reaes de precipitao, Reao de coagulao pela ao do calor e Reao do biureto . Identificar algumas propriedades das protenas

Introduo Terica
As protenas so biomolcolas que, por alteraes do meio na qual esto inseridas, podem sofrer desnaturao. A desnaturao das protenas d-se devido quebra de ligaes qumicas fundamentais, fazendo com que esta perca a sua conformao espacial e, consequentemente, a sua atividade biolgica. Essas alteraes podem ser irreversveis (como o caso da desnaturao causada por aco do calor), mas tambm podem ser reversveis, se, por exemplo, voltarem a existir reaes qumicas, e a protena volte a formar-se, retomando a sua configurao espacial original. Os principais agentes desnaturantes so a temperatura e o pH, sendo que, nas experincias, as substncias utilizadas foram sujeitas a estes factores; existem outros agentes desnaturantes, como por exemplo, a radioatividade, a radiao UV e a presena de ies metlicos.

Reaes de precipitao
Processo irreversvel de desnaturao da protena com formao de precipitados visveis vista desarmada (flculos brancos de tamanho varivel). A precipitao provocada por agentes desnaturantes, como cidos e bases fortes.

Coagulao pela ao do calor

Processo irreversvel de desnaturao da protena, que se pode apresentar sob a forma de flocos ou cogulos brancos

Reao de Biureto
Consiste em adicionar a uma amostra, igual volume de hidrxido de sdio e, de seguida algumas gotas de sulfato de cobre. A ocorrncia de formao de flocos azuis de hidrxido de cobre que precipitam, ficando a soluo com um anel violeta, indicadora da presena de protenas.

A importncia biolgica das protenas enorme. O quadro seguinte apresenta alguns exemplos das funes destas molculas.
Funes Funo enzimtica Funo estrutural Funo de defesa Funo de transporte Funo reguladora Funo contrctil Protenas Pepsina queratina anticorpos hemoglobina insulina miosina Localizao Suco gstrico Cabelo,unhas, garras Plasma, tecidos e secrees sangue pncreas Tecido muscular

Materiais/ Reagentes Tubos de ensaio (5) Suporte de tubos de ensaio Lamparina Fsforos Pina de madeira Pipeta 2 ml Propipeta Conta-gotas Etiquetas Papel de limpeza esguicho de gua destilada Reagentes gua destilada Hidrxido de sdio a 10% cido clordrico 10% Sulfato de cobre Soluo de clara de ovo (1:4) ou soluo de gelatina Pocedimento experimental A- Reaes de precipitao e coagulao pela ao do calor 1. Colocar as estiquetas nos tubos de ensaio (A1,A2,A3) 2. Fazer a slouo de clara de ovo (1:4) 3. Colocar nos tubos de ensaio a soluo de clara de ovo at a uma altura de 2cm. 4. Levar o tubo A1, com auxilio da pina de madeira, chama de uma lamparina. Observar e registar o resultado. 5. Pipetar 2 ml da soluo cida para o tubo A2. Observar e registar o resultado. 6. Pipetar 2 ml da soluo bsica para o tubo A3. Observar e registar o resultado 2

B - Reao do biureto 1. Colocar as etiquetas nos tubos de ensaio (C1 e C2) 2. Pipetar 2 ml de soluo de clara de ovo para um tubo de ensaio (C1) e 2 ml de gua destilada para outro tubo (C2) 3. Pipetar 2 ml de hidxido de sdio para ambos os tubos 4. Adicionar, de seguida , 3 gotas de Sulfato de cobre (CuSO4) aos tubos C1 e C2.

Observaes / Registo de resultados Tubo

A1

Contedo
gua + clara de ovo

Agente desnaturante
Calor (chama)

Resultados
Formao de flocos da cor branca,mas muito pouco e apresentou uma textura espessa Formou-se coagulos de cor branca Formao de flocos e coagulos (no muitos).

A2 A3

gua + clara de ovo + HCl (cido clordrico)10% gua + clara de ovo + Base (Hidrxido de sdio 10%)

HCl 10% (cido)

NaOH 10 % ( Base)

Tubo C1 C2 (tubo de controlo)

Contedo Clara de ovo + NaOH + CuSO4 gua + CuSO4

Resultados Formao de flocos azuis com um anel violeta Ficou com um anel azul e sais de CuSO4 ( precipitou)

Discuso
Com esta experincia pude constatar existncia de protenas nomeadamente na clara de ovo. As protenas nas solues foram desnaturadas pelas reaes que os agentes desnaturantes causaram levando a uma desnaturao irreversvel perdendo a sua conformao e funcionalidade. Alguns resultados no foram de acordo com o que estavamos a espera conclui que alguns fatores podem ter condicionado o sucesso da experincia, principalmente nos primeiros tubos de ensaio que estava a espera da formao de mais cogulos e da espessura ser um puco mais gelatinosa como em alguns resultados da mesma experincia realizada por outros operadores. O que pode ter acontecido os reagentes no terem a concentrao correta ou no estavam em bom estado. Realizamos a experincia com sucesso e os resultados apesar de no terem sido todos como o esperado permitiu tirar concluses sobre a existncia e identificao de protenas.

Concluso
Com esta experincia consegui identificar as protenas com o Processo de Reao de precipitao e coagulao pela ao do calor e pela Reao de Biureto. A Reao de precipitao e cogulao pela ao do calor so processos irreversveis de desnaturalizao de protenas que formam coagulos que se podem ver a vista desarmada. Com a aplicao do cido, da base e pela ao do calor vimos a formao de cogulos brancos o que significa a presena de protenas. O Biureto tem uma ligao pptidica e quando adicionado sulfato de cobre em uma soluo de NaOH tem uma cor violeta e forma-se flocos azuis sendo assim, podemos comprovar a existncia de protenas.

Bibliografia
Matias, Osrio; Martins,Pedro; (2008). Biologia 10. Areal Editores. Lisboa http://relatorios123.com.sapo.pt/BG/22/0.htm http://relatorios123.com.sapo.pt/BG/22/1.htm