Ordem para a realizao do Hemograma Completo:

- Hematcrito - Dosagem de Hemoglobina - Contagem de glbulos brancos e vermelhos - Clculo dos ndices Hematimtricos (VCM, HCM, CHCM) - Contagem e diferencial dos leuccitos com observao da srie vermelha - Contagem de plaquetas e reticulcitos quando solicitados -Velocidade de Hemossedimentao (VHS) quando solicitado

Hematcrito:
Preencher do volume do tubo capilar, vedar uma das extremidades ( com massa de modelar ou queimando). Em seguida colocar o tubo na microcentrfuga (colocando a parte vedada para fora), centrifugar a 10.000 RPM por 5 minutos. Realizar a leitura em tabela apropriada.

Valores de referncia: Homens: 40% a 50% Mulheres: 35% a 45% Crianas at um ano: 34% a 40% Recm-nascidos : 50% a 60% Interpretao: Valores abaixo indicam anemia ou hidratao excessiva (gravidez), e valores acima indicam desidratao ou policitemia.

Dosagem de hemoglobina
Mtodo da cianometahemoglobina: oxidao do tomo de Ferro (ferro II) da molcula de hemoglobina pelo Ferricianeto de potssio. Formao da metahemoglobina que reage com Cianeto de potssio produzindo cianometahemoglobina A colorao avermelhada proporcional concentrao de Hemoglobina presente na amostra.

Realizao do exame: Em tubo de ensaio: 0,02 mL de sangue 5 mL de Drabkin Colocar a amostra e o sangue em tubo de ensaio e aguardar 10 minutos Analisar a DO em espectrofotometria em comprimento de onda de 540nm Avaliar a DO do padro para clculo do fator Portanto: F = [ P ] / [ DO ] P= 5,10 ou 15 mg/dL

Para calculo da amostra: [ Hb amostra] = do amostra x F

Tubo Branco

Tubo A amostra 0,02 mL ou 20 L _______

Tubo B padro ______

Amostra
________

Padro

________

0,02 mL ou 20 L 5,0 mL

Reagente Drabkin

5,0 mL

5,0 mL

Valores de referncia: Valores normais: - 14 a 18 : 12 a 16 g/dL Crianas de at um ano: 11 a 12 g/dl Recm- Nascido: de 14 a 19 g/dl

Contagem de Hemcias

Em tubo de ensaio pipetar 4,0 ml de soluo de Hayen e 20l de sangue total (diluio 1:200). Fixar a lamnula sobre a cmara de Neubauer e preencher-la com o sangue diludo e contar os cinco quadrados indicados na imagem acima. Multiplicar o nmero de hemcias encontradas nos cinco quadrados por 10.000. Resultado em mm. Valores de referncia: - 4,5 a 5,5 milhes/mm3 - 4,0 a 5,0 milhes/mm3 Recm nascidos 5,5 a 7,0 milhes / mm3

CLCULO DOS NDICES HEMATIMTRICOS VCM= Ht x10 / GV HCM= Hb x 10/GV (pg) CHCM= Hb x 100 Ht Valores normais: 82 a 92 fL Valores normais 27 a 32 pg Valores normais 32 a36%

Contagem de Leuccitos
Em tubo de ensaio pipetar 0,4 ml (ou 400 l) de soluo de Turk e 20l de sangue total (diluio 1:20). Fixar a lamnula sobre a cmara de Neubauer e preencher-la com o sangue diludo e contar os quatro quadrados indicados na imagem abaixo.

GB

GB

GB

GB

Multiplicar o nmero de leuccitos encontradas nos quatro quadrados por 50. Resultado em mm. Valores de referncia: e - 5,0 a 10.000/mm3 Crianas at 7 anos 5,0 a 15.000/mm3 Recm nascidos 10,0 a 25.000/mm3

EXTENSO SANGUNEA Preparar duas lminas limpas Em uma das lminas, colocar uma gota de sangue total Com a outra lmina, realizar deslizamento para obteno de esfregao delgado

Fixao e colorao da lmina depois de seca com corante pantico. Observar em microscopia ptica em objetiva de imerso para anlise da morfologia celular Realizar a contagem diferencial de 100 leuccitos em objetiva de imerso. Realizar a contagem pela regio mdia do esfregao para a cauda. Calcular o valor relativo e o valor absoluto Relativo % Bastonete Neutrfilos Linfcitos Eosinfilo Basfilo Moncito 0 a 5% 40 a 75% 20 a 40% 1a4% 0 a 1% 2 a 8% Absoluto 0-350 2800-5250 1400-2800 70-280 0-70 140-560

RETICULCITOS Procedimento: Pipetar em tubo de ensaio 100 L de sangue total para 50 L de azul cresil brilhante Incubar a 37oC por 15 a 30 minutos Realizar extenso sangunea Contar 10 campos com 2.000 hemcias ou 5 campos com 1.000 hemcias 10 reticulcitos (exemplo) X reticulcitos

1000 hemcias -----4.500.000 hemcias ------X = 45.000

4.500.000 - 100% 45.000 - X % X=1%

Valor de referncia: 0,5 a 2.0 %

VHS Utilizao da pipeta de Westergreen ou tubo de Wintrobe Preencher a pipeta de Westergreen com o sangue total Avaliar o resultado de sedimentao em uma hora. Valor de referncia: Homens: 3 a 8 mm em 1 hora Mulheres: 3 a 11 mm em 1 hora