NEUROLOGIA TITULO : Tratamiento con Clulas Madre para la Distrofia Muscular AUTOR : Meregalli M, Farini A, Torrente Y y colaboradores TITULO

ORIGINAL : Stem Cell Therapies to Treat Muscular Dystrophy: Progress to Date CITA : Biodrugs 24(4):237-247, 2010 MICRO : En las ltimas dcadas, diversos estudios han evaluado el potencial de las terapias con clulas madre para el tratamiento de las distrofias musculares. Estas terapias se basan en la introduccin de clulas capaces de restaurar la estructura y funcionalidad muscular. Si bien se han logrado importantes avances en este terreno, diversos interrogantes deben ser respondidos antes de que cualquiera de estas tcnicas pueda ser utilizada en ensayos clnicos. Introduccin Las distrofias musculares son trastornos neuromusculares heterogneos de origen hereditario que incluyen la distrofia muscular de Duchenne (DMD), recesiva y ligada al cromosoma X, y la distrofia muscular de Becker (DMB). Las mutaciones que alteran el marco de lectura del gen de la distrofina dan como resultado una disminucin importante o la ausencia de esta protena en el msculo, lo cual genera el fenotipo de la DMD. Por otra parte, mutaciones dentro del marco de lectura llevan a la expresin de una protena parcialmente funcional, lo cual da como resultado una distrofia ms leve: la DMB. La DMD es la ms comn de las dos distrofias mencionadas y afecta a uno de cada 3 500 varones nacidos vivos. En la fase temprana de la enfermedad, los msculos esquelticos sufren un proceso

de degeneracin y regeneracin, el cual es seguido del agotamiento en la capacidad regenerativa, con posterior fibrosis y desorganizacin de la arquitectura muscular. Clnicamente, se caracteriza por debilidad y atrofia muscular progresiva que lleva a los pacientes a estar confinados a una silla de ruedas antes de los 12 aos de edad y, finalmente, a la muerte por insuficiencia respiratoria. Hasta el momento no existe un tratamiento efectivo para esta enfermedad. El espectro y la presentacin clnica de la DMB es ms amplio que el de la DMD. En general, la mayora de los pacientes con DMB presentan sntomas musculoesquelticos con una evolucin ms lenta y muchos mantienen su condicin de ambulatorios hasta la tercera o cuarta dcadas de la vida. Varios estudios en los ltimos 20 aos han analizado el potencial de las terapias que utilizan clulas para promover la regeneracin muscular. En un principio se intent el trasplante de mioblastos adultos, pero esta tcnica present serias limitaciones, como la mala supervivencia y la habilidad migratoria limitada de los mioblastos inyectados. Como alternativa a los mioblastos, las clulas madre han resultado de mayor inters para las aplicaciones teraputicas debido a su capacidad de autorregeneracin y a su potencial diferenciacin. En los ltimos aos, las clulas madre han recibido particular atencin dado su uso potencial en terapias celulares para afecciones como la leucemia, la enfermedad de Parkinson, el accidente cerebrovascular y las distrofias musculares. Las clulas madre embrionarias (CME) derivan de embriones en estadio de blastocisto y, dado que pueden diferenciarse en una amplia variedad de clulas especializadas, tendran un uso potencial para el

tratamiento de casi todas las enfermedades del ser humano. La principal limitacin en el uso de estas clulas tiene relacin con consideraciones ticas, ya que para su produccin se requiere la destruccin de embriones humanos. Por su parte, las clulas madre del adulto (CMA) son capaces de mantener, generar y reemplazar clulas diferenciadas en un tejido especfico para cubrir las necesidades de recambio celular o lesin tisular. Estas clulas se encuentran en la mdula sea, el sistema nervioso central, la piel, y los msculos cardaco y esqueltico. Recientemente se ha demostrado que pueden participar en la regeneracin de otros tejidos diferentes a sus tejidos de origen. En esta revisin se describen los mltiples tipos de clulas madre miognicas, su caracterizacin y su posible uso en el tratamiento de las distrofias musculares, adems de enfatizar que la posibilidad ms promisoria en el tratamiento de estas enfermedades es una combinacin de los diferentes enfoques, tanto gentico como de las terapias con clulas madre. Clulas madre pluripotenciales Las clulas madre pluripotenciales (embrionarias) derivan del interior de la masa celular del blastocisto y se caracterizan por la autorregeneracin ilimitada y la pluripotencialidad, es decir, la habilidad de poder diferenciarse en cualquier tipo de clula adulta. Estas dos caractersticas confieren a estas clulas un enorme potencial, dado que podran reparar rganos daados y reemplazar clulas que no funcionan adecuadamente. Un paso importante para establecer el potencial uso clnico de las CME es la generacin de tcnicas para su conversin en precursores de tejidos especficos que sean aptos para ser trasplantados. Se han elaborado

numerosos modelos con el fin de lograr la diferenciacin muscular a partir de CME y varios de ellos lo han logrado. Normalmente, las CME humanas se obtienen por microciruga de la masa celular del embrin en estadio de blastocisto. Para sortear los cuestionamientos ticos relacionados con la destruccin de embriones, las CME pueden obtenerse de un blastmero, aunque no est claro si estas clulas pueden considerarse para ensayos clnicos. Otro mtodo utilizado para obtener clulas embrionarias es la transferencia nuclear, o clonacin, que consiste en la introduccin del ncleo de una clula de donante adulto dentro de un ovocito enucleado para generar un embrin clonado. Desafortunadamente, la clonacin es un proceso bastante poco eficiente y suele fallar en la mayora de los intentos. Por otra parte, investigaciones recientes han logrado producir clulas madre pluripotenciales inducidas a partir de clulas adultas, mediante la introduccin de grupos especficos de genes que codifican factores de transcripcin expresados por las CME indiferenciadas, a fin de reprogramar a las clulas adultas. De todos modos, se requieren ms estudios para determinar si estas clulas inducidas son capaces de comportarse como las CME reales. Adems, las clulas madre pluripotenciales inducidas tienen potencial oncognico que surge de la reintroduccin de genes a la clula, por lo que la seguridad de estas clulas debe ser estudiada cuidadosamente antes de intentar cualquier tipo de terapia. Clulas madre del adulto El cuerpo humano tiene un nmero relativamente pequeo de CMA, las cuales pueden diferenciarse en una determinada variedad de tipos celulares. En los ltimos

aos, distintos tipos de CMA han sido evaluadas para el tratamiento de la distrofia muscular. Sin embargo, el uso de estas clulas tiene sus restricciones: en primer lugar, son limitadas en relacin con el tipo de clulas en las que se pueden diferenciar; en segundo lugar, slo algunas de estas clulas son capaces de migrar a travs de los vasos sanguneos, y, por ltimo, a diferencia de las CME, las CMA no tendran la misma capacidad de crecer y dividirse indefinidamente, adems de que no son fciles de aislar y reproducir en el laboratorio. Los mesoangioblastos son capaces de diferenciarse en varios fenotipos mesodrmicos. Estas clulas han sido estudiadas extensamente en modelos experimentales, con resultados positivos. La administracin intraarterial de mesoangioblastos podra ser una terapia celular promisoria para la distrofia muscular dado que podra restaurar, al menos parcialmente, la estructura y funcin muscular. De todos modos, antes de poder realizar ensayos clnicos con estas clulas deben resolverse numerosos problemas, que incluyen la llegada eficiente al tejido blanco. Por su parte, las clulas CD133+ pueden ser aisladas tanto del msculo como de la sangre y pueden utilizarse como vehculos para la terapia gnica. Estas clulas tendran la capacidad de restaurar la expresin de distrofina luego de su administracin intramuscular o intraarterial. Lamentablemente, varios factores deben mejorarse antes de que estas clulas puedan ser utilizadas en la terapia celular. Por ltimo, las clulas satlites son pequeas clulas que residen entre la membrana basal y el sarcolema de las fibras musculares. Normalmente, se encuentran en un estado quiescente, pero se activan y comienzan a

dividirse luego de ser sometidas a estrs oxidativo o frente a determinados estmulos. Dado que estas clulas presentan la habilidad de diferenciarse a mioblastos, son buenas candidatas para la terapia celular. Sin embargo, su crecimiento en cultivos reduce su potencial miognico, por lo que no es posible obtener suficiente cantidad de clulas como para ser aplicadas teraputicamente. Progresos en la terapia celular Si bien se han logrado grandes avances en la generacin de poblaciones celulares, varios interrogantes deben ser respondidos antes de que cualquiera de las preparaciones celulares descriptas anteriormente pueda ser utilizadas en ensayos clnicos. Por su potencial de regeneracin muscular, las CMA son excelentes candidatas para la terapia celular. Los mesoangioblastos pueden distribuirse ampliamente y, luego del tratamiento con factores de crecimiento, son capaces de corregir eficientemente el fenotipo distrfico. La inyeccin intraarterial de estas clulas representa una posibilidad esperanzadora para los pacientes con distrofia muscular. Por su parte, los progenitores derivados de las CME tienen un excelente potencial regenerativo, pero la investigacin de estas clulas se encuentra en sus etapas iniciales. El uso y las aplicaciones prcticas de las CME en la terapia de reemplazo celular an requieren de ms investigaciones. Sin embargo, el incremento rpido de los hallazgos experimentales refuerza la idea de que estas clulas pueden llegar a ser una fuente importante de clulas renovables para ser aplicadas en la terapia de reemplazo celular. El potencial teraputico de las CMA parecera ser menor que el de las CME. Las CMA tienen un potencial de

diferenciacin restringido y, adems, pueden ser manipuladas genticamente slo mediante la introduccin de transgenes retrovirales, lo cual puede causar una sobreexpresin de genes a distintos niveles e, incluso, cncer. Las CME pueden convertirse en cualquier tipo de clula mediante determinadas condiciones de cultivo o de manipulacin gentica. A fin de evitar las limitaciones ticas, podra ser til reprogramar clulas somticas directamente a CME sin necesidad de utilizar ovocitos. Conclusiones Numerosos estudios han evaluado el potencial de las terapias celulares para promover la regeneracin muscular con la esperanza de que las clulas introducidas puedan repoblar el msculo y as mejorar la funcin muscular. Sin embargo, han aparecido muchos obstculos en el curso de estas investigaciones. De acuerdo con hallazgos recientes, la posibilidad ms promisoria para el tratamiento de la DMD es una combinacin de diferentes enfoques a fin de obtener efectos benficos de mltiples estrategias combinadas, como ser la terapia celular asociada con la terapia gnica y los tratamientos farmacolgicos. En ltima instancia, el xito de la aplicacin clnica de las CME y de las CMA requerir, entre otras cosas, de la capacidad para producir a gran escala el tipo de clula deseado sin alterar su funcionalidad y de identificar el nmero ptimo de clulas a trasplantar. Ref: NEURO.

El futuro de las aplicaciones de las clulas madre est plagado de esperanzas para todas aquellas personas que esperan una cura a la diabetis tipo 1, el Parkinsn o una lesin de rodilla a travs de la medicina regnerativa, para las personas que tras un accidente necesiten un trasplante de un rgano bioartificial e incluso para aquellos que recurren a los tratamientos de esttica para evitar la caida del cabello, borrar las arrugas o moldear su figura. Pero las clulas madre no son slo ricas en aplicaciones mdicas en el futuro, en la actualidad existen numerosos tratamientos para enfermedades de tipo hematolgico, para determinados tipos de cncer com la leucemia y para algunas patologas genticas o imnunolgicas. En este blog tienes informacin contrastada de las diferentes aplicaciones de las clulas madre en la actualidad, tanto en humanos como en animales y de las investigaciones que se estn haciendo para otras: infartos de corazn, curacin de fracturas, aumentos pecho, la alopecia, regeneracin de la piel, de venas, arterias, msculos y articulaciones, la construccin de un corazn o un pulmn bioartificial... y son proyectos que ya estn en vas de desarrollo. Adems de la medicina regnerativa en las aplicaciones clnicas tambin tenemos en cuenta las terapias gnicas y los tratamientos de inmunologa, ya que por ejemplo el trasplante de riones de otra persona es ms eficaz si se administran clulas madre al mismo tiempo. Te gustara conocer mejor que tipos de clulas madre existen? Adultas, mesenquimticas, hematopoyticas, embrionarias, de la placenta, de la sangre del cordn umbilical... Conoces que premios Nobel se llevaron el galardn por investigar con stem cells? Tambin tenemos una seccin dedicada a este tipo de preguntas explicando conceptos base y las ltimas noticias sobre clulas madre. En los diferentes artculos encontrars referencias y links a algunos estudios, y si te interesa el tema quizs quieras conocer que son los Bancos de Clulas Madre, una opcin muy interesante para aquellos que quieren guardar las clulas madre del cordn umbilical de sus hijos al nacer.

Regeneracin de tejido muscular esqueltico

La posibilidad de regenerar el tejido muscular esqueltico a travs de clulas madre es una aplicacin con un gran potencial ya que adems del uso teraputico para enfermos tiene una gran salida en lo que se refiere a la medicina deportiva y el tratamiento de las lesiones de atletas, futbolistas, jugadores de baloncesto, corredores profesionales o amateur, etc... 2013, enero. Un estudio cientfico con ratones demuestra que las llamadas "clulas satlite" son esenciales para la regeneracin muscular. Esto puede ser vital para el reemplazo de miofibrillas en enfermedades como la distrofia muscular. 2013, febrero. Estudio cientfico muestra que las clulas madre musculares llamadas "clulas progenitoras" intersticiales (PIC) son claves para la regeneracin del tejido muscular. Ests clulas madre pueden aislarse de los msculos de ratones jvenes y generar tejidos musculares in vitro.

Bases celulares de la hipertrofia muscular

Las clulas satlites estn fuertemente correlacionadas con el crecimiento, regeneracin e hipertrofia muscular

El msculo esqueltico posee una notable habilidad de regeneracin tras lesiones de diversas naturalezas. Los ejercicios de alta intensidad o con cargas elevadas,

causan microlesiones en la arquitectura celular en la fase de degeneracin. Este estrs inicial puede ser compensado posteriormente en la fase de regeneracin, a travs del descanso y alimentacin adecuados, donde hay una mayor sntesis proteica. La capacidad de regeneracin del msculo esqueltico es en parte dependiente de la activacin de las clulas satlites (CS). Las CS estn fuertemente correlacionadas con el crecimiento, regeneracin e hipertrofia muscular. Para eso, son primeramente activadas, dejando su estado inicial de latencia, se proliferan y se funden entre s o con las fibras esquelticas preexistentes regenerando la fibra lesionada, resultando en una hipertrofia compensatoria.

Las clulas satlites y la hipertrofia

La clula satlite se encuentra en la adyacencia de la fibra muscular, ms especficamente entre el msculo y el tejido fibroso que reviste ese msculo. Durante el proceso de regeneracin, las clulas satlites contribuyen como donantes de ncleos adicionales para la fibra muscular damnificada, a fin de aumentar la sntesis proteica, una especie de reconstruccin del rea lesionada, proveyendo al tejido muscular una increble capacidad de adaptacin en condiciones de crecimiento (hipertrofia) y regeneracin (lesin).

El proceso de microlesin es benfico, pues tras este, la musculatura se recupera ms fuertemente que antes, as, est preparada para nuevos estmulos y con

mayor resistencia. De ah la importancia de un descanso adecuado tras el entrenamiento de musculacin, ya que este proceso regenerativo puede durar de 24 horas hasta 72 horas, dependiendo del grado de la microlesin o el apoyo nutricional de suplementacin para recuperacin. La ganancia de masa muscular auxilia en la ejecucin de las actividades cotidianas, protege las articulaciones, ocasionando un menor riesgo de lesiones, proporciona mayor estabilidad y equilibrio corporal, aumenta la autoestima por los beneficios estticos proporcionados, aumenta el gasto calrico, y mejora la postura, de entre otros beneficios. Independiente del protocolo de entrenamiento, el ejercicio de fuerza provoca un dao en la microestructura de la fibra, por ello se debe buscar una orientacin profesional para dosificar ese estmulo, prevenir lesin y alcanzar la ganancia de masa muscular con mayor intensidad y en menor tiempo.

Las hormonas, las clulas y la hipertrofia

De entre los procesos que gobiernan el mecanismo de hipertrofia muscular debemos resaltar la accin de las hormonas. El perfil hormonal durante la fase anablica evoluciona con una mayor relacin insulina/glucagon, testosterona/cortisol, concentraciones elevadas de IGF (factor de crecimiento semejante la insulina) y MGF (factor de crecimiento inducido por estrs mecnico) y concentraciones reducidas de miostatina. Estas hormonas actan en las clulas a travs de sus receptores especficos, induciendo varias adaptaciones celulares causando la hipertrofia muscular. Es poco conocido, como las respuestas adaptativas al ejercicio son iniciadas y mantenidas al nivel molecular. Actualmente, los cientficos creen que son puntos de control intracelular para la sntesis proteica de algunas protenas. Es por ello que cuando se conozcan los reales mecanismos por los cuales el msculo esqueltico se adapta en el nivel molecular tendremos en el futuro una gran herramienta para la prctica clnica, visando el tratamiento de enfermedades y mejora de la calidad de vida. Adems, el uso de la terapia gentica en el mundo deportivo podr traer mejores resultados a los atletas, cuando la manipulacin de los diversos factores que modulan la ganancia de masa muscular podrn ser

utilizados por estos profesionales. De hecho, a travs de la ingeniera gentica los atletas podrn volverse ms fuertes, giles, rpidos, flexibles, es decir, ms competitivos. Obviamente, los supuestos efectos que adviene con esa tecnologa generan muchas polmicas sobre cuestiones ticas que van desde la salud del atleta hasta los principios deportivos, debiendo ser exhaustivamente discutidos por la sociedad, pero en la realidad las empresas ms grandes del mundo que trabajan con las organizaciones sanitarias internacionales y esto permite recepcionar permanentemente nuevos productos que adems de seguros, mejoran la performance en el entrenamiento, y la capacidad gentica del practicante de ejercicios.