Las Mitocondrias

Estructura.Las mitocondrias poseen dos membranas una externa y otra interior que dan lugar a dos compartimientos, el espacio intermembranoso y la matriz mitocondrial. Membrana externa: esta es permeable a los solutos presentes en el citosol, pero no a las micromolculas. Esto se debe a que su bicapa lipdica presenta, entre otros componentes, unas protenas transmembranosas llamadas porinas, las cuales forman canales acuosos de regular tamao por los que pasan libremente iones y molculas de hasta 5 kDa. Adems posee enzimas capaces de modificar a los cidos grasos, para estos puedan atravesar la membrana interna e ingresar a la matriz mitocondrial, donde son degradados a grupos acetilo. Espacio intermembranoso. Dada la presencia de las protenas en la membrana externa, su contenido de solutos es similar al del citosol. Membrana interna. La membrana interna desarrolla plegamientos hacia la matriz que dan lugar a las llamadas crestas mitocondriales, formadas con el objeto de aumentar la superficie membranosa. La forma y el nmero de las crestas varan en los distintos tipos celulares. La membrana interna de las mitocondrias presenta un alto grado de especializacin, y ambas caras de su bicapa lipdica exhiben una marcada asimetra. En ella se localizan, entre otras, las siguientes molculas:

FIG.1.- Esquema tridimensional de una mitocondria cortada longitudinalmente. Las crestas aparecen tapizadas con molculas de ATP sintetasa.

1. Un fosfolpido doble el difosfatidilglicerol o cardiolipina -- que impide el pasaje de la mayora de los solutos en cualquier direccin. 2. Diversas protenas transportadoras que permiten el pasaje selectivo de iones y molculas, algunas desde el espacio intermembranoso a la matriz mitocondrial y otras desde la matriz al espacio intermembranoso. 3. Las molculas involucradas en las oxidaciones de la fosforilacin oxidativa, que en conjunto componen la cadena transportadora de electrones (o cadena respiratoria). Existen innumerables copias de estos conjuntos en el plano de la bicapa lipdica, cada uno integrado por tres grandes complejos enzimticos llamados NADH deshidrogenasa, b-c1 y citocromo oxidasa entre los cuales se encuentran dos transportadores de electrones mas pequeos, la ubiquinona y el citocromo c. 4. La ATP sintetasa, que es un complejo proteico ubicado en las inmediaciones de la cadena transportadora de electrones. Presenta dos sectores, uno transmembranoso (porcin F 0), por el que ingresan los H+ desde el espacio intermembranoso a la matriz mitocondrial, y otro orientado hacia dicha matriz (porcin F1). Este ultimo es el que cataliza la informacin del ATP a partir del ADP y fosfato, o sea, es el responsable de las fosforilaciones a que hace referencia el termino fosforilacin oxidativa. El origen de la energa que utiliza el ATP sintetasa para concretar tales fosforilaciones se describir ms a delante.

FIG2: Representacin grfica de la mitocondria, en la que se muestran las reacciones correspondientes a la descarboxilacin oxidativa, el ciclo de Krebs y la fosforilacin oxidativa. Puede tambin observarse la degradacin de los cidos grasos.

Matriz mitocondrial. La matriz mitocondrial contiene diversas molculas, entre ellas: 1. El complejo enzimtico piruvato deshidrogeno-nasa, involucrado en la descarboxilacin oxidativa que contiene al Piruvato en Acetil CoA. 2. Las enzimas del ciclo de Krebs, excepto la succinato deshidrogenasa. 3. O2, ADP, fosfato. 4. Las coenzimas A (CoA) y NAD+. 5. Las enzimas que escinden a los acidos grasos. 6. Grnulos de distinto tamao, compuestos probablemente por calcio. 7. Varias copias de una molecula de ADN circular. 8. Trece tipos de ARNm, codificados por otros tantos genes del ADN mitocondrial. 9. Dos tipos de ARNr, los cuales, asociados a protenas, forman autnticos ribosomas, parecidos a los citoslicos. 10. Veintids tipos de ARNt para los distintos aminocidos, a partir de los cuales se construyen, dentro de la misma mitocondria, trece de sus protenas.

FUNCIONES DE LAS MITOCONDRIAS La funcin principal de las mitocondrias es generar ATP. Como se mencion antes, en presencia de O2, mediante la descarboxilacin oxidativa, el ciclo de krebs y la fosforilacin oxidativa, la mitocondria traslada al ADP para formar ATP la energa depositada en las uniones qumicas de las molculas de los alimentos. Analizaremos estos procesos en el escenario biolgico en que tienen lugar, es decir, cada uno en su respectivo sector dentro del andamiaje estructural de la mitocondria. La descarboxilacin oxidativa se produce en la matriz mitocondrial. Proveniente del citosol, el piruvato ingresa en la matriz mitocondrial, donde por accin de la piruvato deshidrogenasa pierde un C y se convierte en el grupo acetilo de la acetil CoA. Recordemos que en esa conversin, adems de CO2, se genera, energa suficiente para formar un NADH, de modo que por cada molecula de glucosa se originan dos de estos dinucletidos. A los grupos acetilo generados a partir de los pirubatos deben sumarse los derivados de la encisin de los cidos grasos y del metabolismo de algunos aminocidos. Cualquiera que sea su origen en la matriz mitocondrial, el grupo acetilo de cada acetil CoA se incorpora al ciclo de krebs. Para ello se combina con una molcula de 4 carbonos el cido oxalactico para formas otra de 6 carbonos llamado cido ctrico, con la que se inicia el ciclo.

FIG3. El ciclo de Krebs (o el ciclo del cido ctrico) en las mitocondrias. Estn representadas las sucesivas reacciones, las enzimas intervinientes y los productos del ciclo.

Tambin las reacciones del ciclo de Krebs se producen en la matriz mitocondrial. Como puede apreciarse en la Fig3., el ciclo de Krebs consiste en una serie de 9 reacciones qumicas mediadas por otras tantas enzimas especficas. Estas actan secuencialmente, y lo hacen del modo tal que el ltimo de sus productos vuelve a ser un cido oxalactico, el cual, al combinarse con el grupo acetilo de otro Acetil CoA, genera otro cido ctrico, lo que inicia un nuevo ciclo, y as sucesivamente mientras haya O2 y grupos acetilo disponibles.

Al cumplirse cada vuelta del ciclo de Krebs, dos de los 6 carbonos del cido ctrico se oxidan a CO2. Ello genera energa suficiente para forman un ATP, tres NADH y un FADH2. Puesto que son necesarias dos vueltas del ciclo para metabolizar las dos acetil CoA delicada de la gluclisis de una molcula de glucosa, cada uno de estos monosacridos da lugar a 2 ATP, 6NADH y 2FADH2. Debe advertirse que el ATP se genera a partir de la GTP, que es el trifosfato surgido del ciclo. Las molculas de CO2, tanto las formadas en la descarboxilacin oxidativa como en el ciclo de Krebs, pasan al citosol, de este al espacio extracelular y finalmente a los eritrocitos, que las transportan hacia los pulmones para su eliminacin. Las oxidaciones de la fosforilacin oxidativa tienen lugar en la membrana interna de la mitocondria. La energa contenida en el NADH y FADH2 provenientes de la descarboxilacin oxidativa y el ciclo de Krebs se transfiere al ATP luego de una serie de reacciones qumicas que comienzan con ionizacin de ambos dinucleotidos. Luego los tomos de hidrogeno liberados como consecuencia de las ionizaciones se disocian en H+ y e-, ambas reacciones pueden expresarme mediante las siguientes ecuaciones: NADH NAD+ + 2 e- + H+ y FADH2 FAD + 2 e- + 2 H+

Es importante sealar que los e- surgidos de estos procesos, proceden de un elevado potencial de transferencia, es decir, una elevada carga de energa. En esas condiciones ingresan en la cadena transportadora de electrones, cuyos componentes fueron enumerados cuando se describi la membrana interna de la mitocondria. Dado que cada componente de la cadena posee por los e - una afinidad mayor que su predecesor, los e- ricos en energa al ingresar a la cadena fluyen por ella en el siguiente orden: Para los e- cedidos por los tomos de H del NADH, el punto de entrada es el NADH deshidrogenasa. Desde sta pasa a la ubiquinona, que los transfiere al complejo b-c1. Los e- dejan este complejo e ingresan al Citocromo C, desde el cual pasan al quinto y ltimo eslabn de la cadena. La citocromo oxidasa. Finalmente, luego de haber gastado la mayor parte de su energa, los e- pasan a la matriz mitocondrial. Por su lado los e- cedidos por los H del FADH2 tienen como punto de entrada la ubiquinona, a partir de la cual fluyen por los restantes eslabones de la cadena en el mismo orden en que lo hacen los e cedidos por lo H del NADH.

FIG4. El sector de la mitocondria que muestra los complejos moleculares integrantes de la cadena transportadora de electrones (o cadena respiratoria) y la ATP sintetasa.

FIG5. Transferencia de protones de la matriz mitocondrial al espacio membranoso.

Como vemos en el curso de oxidorreduccin que tienen lugar a lo largo de la cadena respiratoria, el potencial de transferencia de los electrones va disminuyendo, de modo que en cada etapa pasan a un estado de menor energa, que termina considerablemente reducida cuando abandonan el ltimo eslabn de la cadena. A continuacin analizaremos en que se gasta esa energa. Es utilizada para transferir lo H+ disueltos en la matriz mitocondrial al espacio intermembranoso. Ello requiere energa, ya que los H+ deben ser transportados desde un medio en el que se hallan menos concentrados a otro en el que su concentracin es mayor (transporte activo). El mecanismo que hace posible el bombeo de los H+ no ha podido ser determinado. No obstante, se sabe que los H + salen al espacio intermembranoso a travs de algunas protenas de los complejos enzimticos que integran la cadena respiratoria, las cuales actuaran como verdaderas bombas de H+. Al existir un gradiente de concentracin de H+ entre ambos lados de la membrana mitocondrial interna, se establece un gradiente de pH (ms alto en la matriz mitocondrial) y se afirma el potencial de membrana, que se hace mas positivo en el espacio intermembranoso. Ambos el gradiente de pH y el potencial de membrana componen un gradiente electroqumico que se traduce en una energa potencial singular, llamada protomotriz o protn motora, que impulsa a los pH ingresar a matriz mitocondrial, ahora por transporte pasivo. En sntesis, conforme la energa suministrada por etransfiere los H+ al espacio intermembranoso, es absorbida por los propios H+, que la retienen como acabamos de sealar, como energa protomotriz.

FIG6. Representacin grfica de la ATP sintetasa en la membrana mitocondrial interna.

La fosforilacin de ADP es mediada por la ATP sintetasa. La ATP sintetasa est integrada por dos unidades que poseen localizaciones y funciones diferentes. Una atraviesa la bicapa lipdica (porcin transmembranosa o Fo) y la otra da hacia la matriz mitocondrial (porcin F1). La porcin transmembranosa es la que permite el ingreso de los H+ a la matriz mitocondrial mientras que la porcin F1 tiene por funcin catalizar la sntesis de ATP a partir de ADP y P (fosforilacin); as el ingreso de los H+ y la sntesis de los ATP si bien son procesos acoplados, se cumplen en lugares diferentes de la ATP sintetasa. La energa necesaria de esta sntesis es tomada de la energa protomotriz de lo H+, que la van perdiendo durante su regreso a la matriz mitocondrial. Por cada uno de los NADH procesado se genera un ATP y dos por cada FADH2. La ATP sintetasa puede tambin llamarse ATPasa, ya que es capaz de hidrolizar moleculas de ATP a ADP y fosfato. La energa liberada durante la hidrlisis puede servir para bombear H + al espacio intermembranoso a travs de la porcin F0. No obstante, recibe el nombre de ATP sintetasa porque en la matriz mitocondrial el cociente ATP/ADP normalmente es inferior a la unidad, lo cul a la sntesis y no a la hidrlisis de ATP. Como puede apreciarse el ATP sintetasa funciona como una turbina que convierte una clase de energa, la protomotriz, derivada del gradiente de concentracin de los H+, en otra ms provechosa para la clula, la energa qumica depositada en las molculas de ATP. El ATP sale al citosol a travs de una protena transmembranosa localizada en la membrana mitocondrial interna, la ATP-ADP translocasa. Como su nombre lo sugiere por cada ATP que la travieza debe pasar un ADP en direccin contraria, es decir, desde el citosol a la matriz mitocondrial. Los H+ y los e- se combinan con el oxigeno atmosfrico para formar agua. Cabe ahora indagar sobre el destino de lo e-, los cuales, luego de perder una parte sustancial de su energa, han abandonado la cadena respiratoria y regresado a la matriz mitocondrial. Se combinan tanto con el O2 que procede de la atmsfera como con lo H+ provenientes del espacio intermembranoso, lo que da lugar a la formacin de H2O. La atraccin de los e- por los O2 se debe a que poseen una gran afinidad por este, mayor de la que tienen por un citocromo oxidasa, lugar por donde salen de la cadena transportadora. Con la formacin de H2O culmina la fosforilacin oxidativa; se necesitan 4 e- y 4 H+ por O2 para que se produzcan dos molculas acuosas. El H2O es uno de los productos finales del metabolismo (el otro es el ciclo CO2); pasa el citosol, desde donde pasa el espacio extracelular para ingresar en la sangre y eliminarse con la orina. Los NADH generados durante la gluclisis no ingresan en las mitocondrias. Hasta ahora hemos soslayado el destino de los NADH generados durante la gluclisis. A diferencia de los NADH formados en las mitocondrias, que como vimos rinden tres ATP cada uno, los de la

gluclisis dan lugar a dos ATP. Este menor rendimiento energtico se debe a que el NADH citoslico no puede ingresar en la mitocondria debido a que sus membranas son impermeables a aquel. Para que el NADH pueda ceder su energa, ingresan en la mitocondria solo sus e-, ya que no el propio NADH. Ello es posible porque ciertas molculas citoslicas actan como lanzaderas. Estas, luego de captar a los e- del NADH (las lanzaderas se reducen), los conducen a las mitocondrias donde los transfieren a otra molcula (las lanzaderas se oxidan); retornan sin ellos al citosol para poder repetir la operacin. Una de las lanzaderas mas conocidas es el glicerol 3-fosfato, que entra en el espacio intermembranoso y se pone en contacto con la cara exterior de la membrana mitocondrial interna y, por intermedio de esa, con la FAD, al que le cede los e-, se forma por lo tanto la FADH2, que como sabemos se vincula con la cadena respiratoria a travs de la ubiquinona(vimos que cuando los eingresan por este dan lugar a dos ATP en lugar de tres). En presencia de oxgeno por cada molcula de glucosa se generan 36 ATP. Para generar un clculo de energa ganada en unidades de ATP al cabo de la oxidacin de una molcula de glucosa es necesario sumar la energa producida en el citosol durante la gluclisis a la gestada en las mitocondrias, en estas ltimas tanto al formarse la acetil CoA a partir del piruvato como durante el ciclo de Krebs y la fosforilacin oxidativa. Durante la glucolisis se generan 4 moleculas de ATP. Debido a que se gastan 2, en esta etapa hay una ganancia neta de 2 ATP. Pero adems se generan 2 NADH, que por ser citoslico producen 2 ATP cada uno, 4 en total. As, el aporte de la gluclisis es de 6 ATP, 2 generados directamente en el propio citosol y 4 en las mitocondrias a partir de los e- suministrados por los 2 NADH a que da lugar la glucolisis. Los dos piruvatos que se forman a partir de la gluclisis entran en la mitocondria, donde por descarboxilacin oxidativa se convierten en otras tantas molculas de acetil CoA. El proceso genera 2 NADH, uno por cada piruvato. Dado que la fosforilacin oxidativa de cada NADH de lugar a 3 ATP, esta etapa rinde a 6 ATP. Cada una de las acetil CoA, en el ciclo de krebs, genera 1 ATP, 3 NADH y 1 FADH 2, de modo que al cabo de las 2 vueltas que se necesitan para metabolizar las 2 acetil CoA surgen 2 ATP, 6 NADH y 2 FADH2. Dado que la fosforilacin oxidativa de cada NADH genera 3 ATP, y la de cada FADH 2, 2 ATP, a los 2 ATP surgidos de las dos vueltas del ciclo de krebs deben sumrseles 18 ATP aportados por los 6 NADH mas 4 ATP aportados por los 2 FADH2, lo que hace un total de 24 ATP. Sumados a los 6 ATP de la glucisis mas los 6 ATP de la descarboxilacin oxidativa, la ganancia neta por molcula de glucosa es de 36 ATP. Comparese esta produccin con los exiguos 2 ATP generados en el citosol y se tendr una idea de la importancia de las mitocondrias para aportar energa para el funcionamiento de las clulas consumidoras de oxgeno.

En las clulas musculares el piruvato puede convertirse en lactato. Las clulas musculares, cuando sobrepasan un determinado nivel de actividad, agotan el O2 atmosfrico que les llega por medio de los glbulos rojos, situacin por mas normal. Ante la falta de O2, el piruvato, en vez de convertirse en el grupo de acetilo de acetil CoA, se transforma en lactato. Este proceso metablico se conoce con el nombre fermentacin lctica. Como es obvio, el ciclo de krebs, y en consecuencia la fosforilacin oxidativa, se omiten. El lactato acumulado en las clulas musculares pasa a la sangre, y por esta al hgado. En los hepatosito va piruvato- el lactato vuelve a convertirse en glucosa, que nuevamente utilizara la clula, si la demanda de energa lo exigiere. En las mitocondrias de la grasa parda la energa generada por las oxidaciones se disipa en forma de calor. Si la energa protomotriz de los H+ presentes en el espacio intermembranoso no se rescatara para formar ATP, los H+al volver a la matriz mitocondrial, igual se uniran a los e- y al O2 para formar H2O, pero la energa protomotriz, al cabo de la reaccin se convertira en energa trmica, es decir, se disipara como calor. Esto es lo que ocurre en la clulas adiposas de la llamada grasa parda, cuyas mitocondrias son incapaces de transferir la energa protomotriz al ATP. Ello se debe a que en la membrana interna de dichas mitocondrias existe una protena transportadora de H + - denominada termogenina que, al no poseer la funcin enzimtica de la ATP sintetasa (porcin F1), permite el ingreso de los H+ a la matriz mitocondrial sin que su energa sea utilizada para formar ATP. En consecuencia, la energa protomotriz, al reaccionar los H+ con lo e- y el O2 atmosfrico durante la formacin de H2O, se disipa como calor. La grasa parda es un tejido que se encuentra en los recin nacidos, particularmente en la regin interescapular. Si el nio nace un medio ambiente muy frio, los triglicridos depositados en las clulas de dicha grasa se degradan y generan calor en lugar de ATP. Como vemos, la grasa parda puede ser vital en el momento del nacimiento al permitir una rpida adaptacin de los recin nacidos a las bajas temperaturas.

Las mitocondrias poseen tras funciones. Remocin de Ca2+ del citosol. Normalmente esta funcin esta a cargo del retculo endoplasmtico. No obstante, cuando la concentracin de Ca2+ aumenta el citosol a niveles que pueden ser peligrosos para la clula, se pone en accin una Ca2+ ATPasa localiza en la membrana interna de las mitocondrias, que al bombear Ca2+ hacia la matriz mitocondrial lo retira del citosol. Sntesis de aminocido. A partir de determinadas molculas intermediarias del ciclo de Krebs, las mitocondrias de los hepatocitos intervienen en la sntesis de algunos tipos de aminocidos presentes en el organismo.

Sntesis de esteroides. En algunas clulas de la corteza suprarrenal, los ovarios y los testculos, las mitocondrias participan en la sntesis de diversos esteroides (funcin esteroidognica). Para ello, el colesterol captado por las clulas debe ser transportado hacia las mitocondrias, donde, por accin de una enzima localizada en la membrana mitocondrial interna, se convierte en pregnenolona. La pregnenolona sale de la mitocondria e ingresa al retculo endoplasmtico. All contina su metabolismo mediante otras enzimas que actan secuencialmente. En el caso de la corteza suprarrenal, dan lugar a desoxicortecosterona, desoxicortisol y al andrgeno androstenodiona. Los dos primeros esteroides, luego de abandonar el retculo endoplasmtico, regresan a las mitocondrias, donde, por accin de las 11B-hidroxilasa, la desoxicortecosterona y el desoxicortisol en cortisol. Estos glucocorticoides son producidos en las clulas de la zona fasciculada de la corteza suprarrenal. Posteriormente, en las clulas de la zona glomurelosa, por accin de la 18 hidroxilasa y la 18 hidroxiesteroide oxidasa, la corticosterona se convierte en el mineralocorticoide aldosterona. La mayor parte de los pasos metablicos mencionados son oxidaciones, en cuyo transcurso una familia de citocromos presentes en la mitocondria los citocromos P450 actan como aceptores de electrones.