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Microbiologia Aula 5
08/04/2013
Neisseria spp.
Diplococo Gram negativo
As espcies de Neisseria so
No hemolitico (GAMA)
Aerbio ou facultativamente anaerobio MO exigentes!!! Habita o trato respiratrio superior do Homem
N. gonorhoeae N. meningitidis
Neisseria gonorrhoeae
A gonorria uma Doena Sexualmente Transmissvel (DST), definida como: um processo infeccioso causado pela Neisseria gonorrhoeae. A descrio do agente etiolgico da gonorria foi feita por Albert Neisser em1879 e sua transmisso d-se por meio do contato sexual (DST). A transmisso vertical causa a oftalmia gonoccia do recm-nascido.
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Gonorreia
O risco de contgio para o sexo masculino, aps contato sexual com parceira infectada, de 20% e, no caso de reexposio, este ndice poder elevarse a 90%. Para o sexo feminino, o risco de infeco em torno de 80%. Nos homens, e em cerca de 20% das mulheres, os sintomas surgem cerca de 2 a 8 dias aps o contgio. Dentre as mulheres infectadas, cerca de 60% a 80% no apresentam sintomas.
Gonorreia
Gonorria : em uretrites masculinas sintomticas a presena de numerosos polimorfonucleares e de diplococos intra e extracelulares indicativo de gonococo. Em mulheres sintomticas ou assintomticas o diagnstico de gonorria deve ser dado pela cultura, podem contribuir para a persistncia da infeco e da transmisso. A transmisso para o recm- nascido se d na hora do nascimento, pela passagem da criana pelas mucosas contaminadas.
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Gonorreia
Esta espcie adere nas superfcies de clulas epiteliais do hospedeiro, por meio de uma estrutura chamada pili, um apndice filamentoso de origem protica, da superfcie bacteriana.
Gonorreia
A Organizao Mundial da Sade (OMS) indica a bacterioscopia como mtodo de escolha para o diagnsticoda gonorria no homem, em funo de sua sensibilidade e especialidade.
Para as mulheres, em funo do nmero de casos assintomticos e da presena de um ecossistema vaginal, indicada a cultura de amostras do canal endocervical.
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Neisseria gonorrhoeae
STIOS DE COLETA: Trato genital (uretra e canal cervical). Urina, regio anal, orofaringe, sangue, lqido sinovial, leses de pele, secreo conjuntival. O importante semear imediatamente adequados, colocar os espcimes em ANAEROBIOSE, 35 C. A atm. enriquecida com CO2 o fator mais importante para o isolamento que a temperatura. nos meios
Neisseria gonorrhoeae
Meios de isolamento
Meios de cultura: Agar Chocolate Em casos onde o material clnico contaminado deve-se utilizar meios seletivos,como THAYER MARTIN modificado Esse meio inibem a flora comensal, inclusive espcies saprfitas de Neisserias.
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Neisseria gonorrhoeae
Identificao Os principais mtodos de diagnstico da gonorria so: 1- PRESUNTIVO = Bacterioscopia 2- CONFIRMATRIO = Cultura. A (OMS) indica a bacterioscopia como mtodo de escolha para o diagnstico da gonorria no homem;
J para as mulheres, em funo do nmero de casos assintomticos e da MICROBIOTA, indicada a cultura de amostras do canal endocervical.
Sintomatologia
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Neisseria gonorrhoeae
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IDENTIFICAO DA ESPCIE
Fermentao de acares: glicose, maltose, sacarose e lactose CystineTripticase Agar (CTA) com 1% de cada acar
Positivo: Aparecimento cor amarela total ou parcial no tubo. Negativo: O meio no altera a cor.
Neisseria gonohroeae: apenas GLICOSE fermenta
N. meningitidis
("meningococos")
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N. meningitidis
Reside apenas em humanos Normalmente a meningite ocorre em casos espordicos em crianas pequenas Epidemias adultos aglomerados Humanos Ex. Barracas de acampamentos militares.
As Meninges e o LCR
Figure 22.2
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MENINGITE BACTERIANA
Figure 22.3
Curso da infeco
Crebro
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Fatores de virulncia
Cpsula Adeso inicial: Fmbrias Resistncia destruio intracelular: POR Endotoxina LOS
N. meningitidis
Diagnstico Laboratorial
Fluido Espinhal
- Presena de diplococos Gram negativos dentro de PMN - Antgenos meningococais
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N. meningitidis
Diagnstico Laboratorial
Haemophilus influenza
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Prova de satelitismo
Satelitismo: mais uma vez usamos Staphylococcus aureus (-Hemo) na placa de cultura; em torno destas bactrias crescer Haemophilus influenzae, devido a hemlise do S. aureus.
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X-hematina V-NAD
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1) Descreva a diferena na identificao da gonorria masculina e feminina. 2) Qual o diagnstico presuntivo e confirmativo das infeces por Neisseria gonorrhoeae. 3) Descreva o diagnstico e as patologias causadas por N. meningitidis. 4) Como feita e diferenciao da N. meningitidis e Neisseria gonorrhoeae. 5) O que o gar CTA? Quando ele utilizado? 6) Qual o quadro clnico desencadeado pela Haemophylus influenzae. Qual o subtipo mais importante?. 7) Qual o material biolgico utilizado para diagnstico de meningite. 8) Descreva a prova do satelitismo. 9) Descreva a prova do crescimento utilizando fatores V e X. 10)Qual o meio de cultura utilizado nesses agentes etiolgicos fastidiosos? Qual a caracterstica desse meio?
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Bacillus
A familia Bacillae uma familia diversificada..... Aerbios estritos / anaerbios estritos
Cocos / Bacilos Gram positivos / Gram Negativos
muito
Bacillus Clostridium
Bacillus
Bacilos Gram positivos Catalase positivos Caracterizam-se pela capacidade de formar esporos em condies aerbicas
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Bacillus
(Aerbios e anaerbios facultativos formadores de endosporos)
Espcies de Bacillus e suas doenas B. antrhracis Antraz (ou carvo) referente cor escura das feridas necrosadas associadas ao antraz cutnea; Gastroenterites (emtica, diarria), infeces oculares, sepses relacionada a cateter, infeces oportunistas. Gastroenterites, infeces oportunistas Gastroenterites, infeces oportunistas Infeces oportunistas
B. cereus
B. antrhracis B. cereus
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Bacillus
B. cereus
Bacilos gram positivos formadores de esporos. Anaerbios facultativos; Mveis Organismos no fastidiosos;
Bacillus
B. cereus
EPIDEMIOLOGIA
Ubquos no solo de todo o mundo. A Populao de risco incluem: 1. Pessoas que consumiram alimentos contaminados com o bacilo (arroz, carne, vegetais e molhos) 2. Pessoas que sofreram traumatismos (OLHOS) 3. Pacientes com acesso intravenoso (injees/cateteres) 4. Imunodeprimidos expostos ao B. cereus
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Bacillus
VIRULNCIA
A
B. cereus
forma emtica forma diarrica
toxina termolbel estimula o sistema adenilato nas clulas epiteliais intestinais ocasionando uma prfunda diarria aquosa
B. cereus
DIAGNSTICO LABORATORIAL Doena transmitida pelo alimentos:
Isolamento do contaminados; microorganismo nos
Bacillus
alimentos
OBS. O isolamento de B. cereus das fezes, pouco utilizvel, pois a colonizao fecal comum.
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B. cereus
CEROLISINA
B. cereus
Forma emtica
Alimento Perodo de incubao (horas) Sintomas Durao (horas) Vmitos Arroz Mdia 9 dias
Forma diarreica
Enterotoxina
Termoestvel
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B. antrhracis B. cereus
B. anthracis
Bacillus
Colorao de PAS
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B. anthracis
EPIDEMIOLOGIA Infecta
Bacillus
principalmente herbvoros e o homem um hospedeiro acidental. isolado em pases desenvolvidos, sendo comum em pases pobres sem vacinao de animais; de reas endmicas em contato com animais infectados, solo, ou produtos animais); desenvolvidos risco de bioterrorismo (EUA,
Raramente Pop.
2001)
Pases
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B. anthracis
EPIDEMIOLOGIA
Trs formas de antraz so conhecidas :
Bacillus
B. anthracis
Fatores de Virulncia
Bacillus
- presente em amostras
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B. anthracis
Bacillus
Toxina de edema
Fator de edema (EF) + Fator letal (LF)
Toxina letal
B. anthracis
Bacillus
DIAGNSTICO LABORATORIAL
Isolamento do microorganismo de amostras clnicas (ppula, lcera ou sangue); Baciloscopia tpica : - Bacilos Gram positivos imveis - Observao da cpsula. - Cultura tpica - Identificao Molecular (DNA) Tratamento / Preveno / Controle Ciprofloxacina droga de escolha - Doxiciclina alternativa Vacinao do rebanho e pessoas
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B. anthracis
Identifique as amostras A e C
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Clostridium spp.
Clostridium spp.
Clostridium
Anaerbios estritos**
Exceto C. tertium, C. histlyticum aerotolerantes
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Clostrdios patognicos
Espcies C. difficile C. perfringens Doena Humana Diarria associada a antibitico Infec. Tecidos moles (mionecrose, celulite) Freqncia Comum Comum
C. septicum
C. tertium C. botulinium C. tetani C. barati C. butyricum C. histolyticum C. novyi C. sordellii
Incomum
Incomum Incomum Incomum Rara Rara Rara Rara Rara
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Clostridium
C. perfringens
Quebrando, atravessando refere-se a necrose tecidual altamente invasiva A espcie mais isoladas, pode causar uma simples colonizao ou uma doena grave e fatal. Imveis; Crescimento rpido - colnias grandes em cultura; Esporos raramente presentes em amostras clnicas ou cultura;
C. perfringens
Hemlise em gar-sangue (toxina alfa uma fosfolipase-C que provoca hemlise massiva, plaquetas, leuccitos e as clulas endoteliais
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C. perfringens
Clostridium
DIAGNSTICO Formas
caractersticas observadas pela colorao de Gram e crescimento rpido em cultura; Agar sangue em anaerobiose
Clostridium
C. perfringens
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C. botulinum
Do latim botulus salsicha
O botulismo foi primeiramente descrito na Alemanha, no seculo XVIII, apos um surto associado a ingesto de salsicha de produo domestica, de onde se originou o nome (botulus em latim significa salsicha).
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Clostridium
C. botulinum
Bacilo gram-positivo, formador de esporos Anaerbios estritos (cls. extremamente sensveis ao fastidiosos CO2 Ubquos : esporos de C. encontrados em todo o mundo. vegetativas oxignio)so
botulinum
Sete tipos de toxinas botulnicas (A-G), as mais comuns nas infeces humanas so A - B
C. botulinum
BOTULISMO
O botulismo e uma doena no contagiosa, resultante da ao de uma potente neurotoxina. Apresenta-se sob trs formas:
- Botulismo alimentar - Botulismo por ferimentos
CID A 05.1
- Botulismo intestinal
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C. botulinum
Botulismo alimentar Ocorre por ingesto de toxinas presentes em alimentos previamente contaminados e que foram produzidos ou conservados de maneira inadequada.
Os alimentos mais comumente envolvidos so:
Conservas vegetais, principalmente as artesanais (palmito, picles); Produtos crneos cozidos, curados e defumados de forma artesanal (salsicha, presunto, carne frita conservada em gordura carne de lata) Pescados defumados, salgados e fermentados; queijos e pasta de queijos e, raramente, em alimentos enlatados industrializados.
C. botulinum
Botulismo intestinal Resulta da ingesto de esporos presentes no alimento, seguida da fixao e multiplicao do agente no ambiente intestinal, onde ocorre a produo e absoro de toxina. A ausncia da microbiota de proteo permite a germinao de esporos e a produo de toxina na luz intestinal. Ocorre com maior frequncia em crianas com idade entre 3 e 26 semanas, e por isso foi inicialmente denominado de botulismo infantil. Em adultos, so descritos alguns fatores predisponentes como cirurgias intestinais, doena de Crohn e/ou uso de antibiticos por tempo prolongado, que levaria a alteracao da flora intestinal.
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C. botulinum
Botulismo por ferimentos
Ocasionado pela contaminao de ferimentos com Clostridium botulinum, que em condies de anaerobiose, assume a forma vegetativa e produz toxina in vivo. As principais portas de entrada para os esporos so ulceras crnicas com tecido necrtico, fissuras, esmagamento de membros, ferimentos em reas profundas mal vascularizadas, ou ainda, aqueles produzidos por agulhas em usurios de drogas injetveis e leses nasais ou sinusais em usurios de drogas inalatrias. uma das formas mais raras de botulismo.
Clostridium
Botulismo
Perodo de incubao - 12-36h (2h a 6 dias)
SINTOMAS
nuseas vomitos sintomas neurolgicos: enfraquecimento visual; perda das funes normais da boca e fadiga, falta de coordenao motora; impedimento respiratrio;
garganta;
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Clostridium
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Botulismo
DIAGNSTICO
C. botulinum
Clostridium
Botulismo alimentar:
confirmado pela atividade da toxina demonstrada no alimento suspeito, fezes ou soros dos pacientes;
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Tratamento do Botulismo
Posio de Trendelemburg
A posio de Trendelemburg reversa a 20-25 tem sido utilizada com sucesso na preveno da obstruo das vias areas.
Utiliza a gravidade para ajudar no preenchimento e distenso das veias centrais superiores ao colocar uma linha central nas veias subclvia ou jugular interna.
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C. tetani
Clostridium
Bacilo Gram positivos com esporos terminais proeminentes (aparncia de baqueta de tambor) Bacilos mveis Muito sensveis ao O2 e com requerimento de crescimento fastidiosos; Dificilmente isolado de amostras clnicas; Crescimento lento.....
Clostridium
C. tetani
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Clostridium
EPIDEMIOLOGIA
C. tetani
Ubquos : esporos de C. tetani so encontrados em todo o mundo e extremamente resistentes. Em objetos, principalmente metlicos e enferrujados;
A exposio aos esporos comum, mas a infeco rara, exceto em pases com vacinao precria;
VIRULNCIA
C. tetani
Clostridium
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Clostridium
C. tetani
DIAGNSTICO (manifestaes clnicas...) As
culturas so positivas apenas em 30% dos pacientes com ttano (a doena pode ser causada por poucos bacilos);
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MICOBACTRIAS
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Gnero Mycobacterium
M. abscessus M. africanum M. asiaticum M. avium M. bovis M. chelonae M. fortuitum M. gordonae M. haemophilum M. intracellulare M. kansasii M. lentiflavum
M. leprae
M. malmoense M. marinum M. microti M. phlei M. scrofulaceum M. smegmatis M. triplex
M. tuberculosis
M. ulcerans M. uvium M. xenopi
So, de maneira geral, bacilos imveis; No esporulados, aerbios ou microaerfilos, Sendo, sua principal caracterstica, a capacidade de resistir descolorao quando tratadas com lcool-cido.
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Micobactrias
Lipdios da parede (Ag): Responsveis pela lcool-cido-resistncia. Os cidos miclicos so responsveis tambm pela formao de granuloma Os fosfolipdios induzem necrose caseosa.
Colorao de Zielh-Neelsen
1. Cobrir a lmina com fucsina fenicada (cido fnico); 2. Aquecer a lmina at emisso de vapores (no deixar ferver); 3. Aguardar 5 a 8 minutos; 4. Lavar com gua corrente; 5. Cobrir a lmina com lcool-cido 3% at descorar totalmente o esfregao; 6. Lavar com gua corrente; 7. Cobrir a lmina com azul de metileno durante 1 minuto; 8. Lavar com gua corrente; 9. Secar; 10. Observar.
BAAR POSITIVO
BAAR negativo
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BAAR (POSITIVO)
INTERPRETAO
(Zielh-Neelsen - BAAR)
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Tuberculose no Mundo
Um tero da populao est infectada 6,2 milhes de caso notificados em 2010 82% dos casos em 22 pases 1,1 milhes de mortes por ano (HIV negativo) 350 mil bitos de pessoas coinfectadaspelo TB/HIV 500 mil casos de MDR 10 milhes de crianas rfs como resultado da morte dos pais por TB
Micobactria BAAR (bactria lcool cido resistente), aerbia obrigatria que se divide a cada 16-20 horas.
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Tuberculose no Brasil
69 mil casos novos de TB notificados em 2011 4,6 mil mortes em 2010 17 pas em nmero de casos entre os 22 pases de alta carga 22 pas em taxa de incidncia, prevalncia e mortalidade entre os 22 pases de alta infeco; 4 causa de mortes por doenas infecciosas 1 causa de mortes dos pacientes com aids
Tuberculose no Brasil
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Tuberculose
Antigamente chamada de "peste branca", e conhecida tambm como tsica pulmonar ou "doena do peito" Sintomas mais comuns
Leses Primrias Tuberculose pulmonar. Leses Secundrias Tuberculose ssea Tuberculose renal Tuberculose intestinal Meningite tuberculosa
TRANSMISSO
Tuberculose infecciosa ativa Tosse, espirro, fala ou canto
INFECO
PATOGENIA
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TRANSMISSO
Tuberculose infecciosa ativa Tosse, espirro, fala ou canto
INFECO
Exposio ao RESPOSTA bacilo Virulncia do IMUNE bacilo
GRANULOMA
TRANSMISSO
Tuberculose infecciosa ativa Tosse, espirro, fala ou canto PROTEO Disseminao por gotculas no ar
INFECO
Exposio ao RESPOSTA bacilo Virulncia do IMUNE bacilo
GRANULOMA
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Diagrama de um Granuloma
Um GRANULOMA a formao de uma estrutura microscpica especfica que se assemelha a um grnulo. Seu achado facilitador do diagnstico por ser especfico de certas doenas crnicas, sendo caracterstico apenas da tuberculose.
Pulmo Saudvel
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Exame fsico, Baciloscopia, Teste subcutneo de Mantoux, Radiografia do trax Culturas microbiolgicas
Baciloscopia
Diagnstico
Exame realizado com o escarro do paciente colhido em pote estril. Deve ser feito pela manh, ainda em jejum e com higienizao oral, APENAS COM GUA. importante orientar a no cuspir, mas sim escarrar. O material biolgico deve ser tratado pelo mtodo de Petroff mtodo bsico, empregando a soluo de hidrxido de sdio (NaOH)- 4%
Diagnstico
Exame Microscpico A baciloscopia considerada o procedimento mais rpido e fcil permitindo ao laboratrio detectar a presena de bacilos lcool- cido resistentes (BAAR). menos sensvel que a cultura, pois para que haja visualizao de BAAR nos esfregaos realizados a partir de espcimes de origem pulmonar necessrio que se tenha de 5.000 a 10.000 bacilos/ml da amostra.
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BACILOSCOPIA
Colorao de Zielh-Neelsen positiva (Bacilo alcool-cido resistente - BAAR)
1. Morfologia e Identificao
Confeccionar o esfregao;
1. Cobrir a lmina com fucsina fenicada (cido fnico); 2. Aquecer a lmina at emisso de vapores (no deixar ferver); 3. Aguardar 5 a 8 minutos; 4. Lavar com gua corrente; 5. Cobrir a lmina com lcool-cido 3% at descorar totalmente o esfregao; 6. Lavar com gua corrente; 7. Cobrir a lmina com azul de metileno durante 1 minuto; 8. Lavar com gua corrente; 9. Secar; 10. Observar.
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Cultura de M. tuberculosis
O diagnstico laboratorial da tuberculose pulmonar e outras micobacterioses depende da deteco e isolamento de BAAR a partir de espcimes clnicos de origem pulmonar e extrapulmonar, podendo ser contaminados (escarro, lavado gstrico, urina) ou estreis (liquor, sangue, lquido pleural, medula ssea). O meio mais utilizado para o isolamento de micobactrias o LOWENSTEIN-JENSEN, que um meio solidificado base de ovo que contm glicerol e asparagina como fontes de carbono e nitrognio. Outros meios solidificados base de gar, como o Middlebrook, tambm podem ser utilizados. Inculo crescem em 3-6 semanas.
Cultura de M. tuberculosis
Lowenstein-Jensen
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Cultura de M. tuberculosis
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Tx Incidncia 100.000
Suspenso 2 dose
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90
91
92
93
94
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Anos
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Mycobacterium leprae
Hansenase
HANSENASE
Fontes de Infeco
O Homem o nico reservatrio conhecido da infeco. A transmisso de homem a homem. O tatu o reservatrio natural do bacilo, porm no causa doena no animal.
Pases de clima quente e tropical No mundo 10 a 12 milhes de doentes No Brasil prevalncia de 1 caso/10.000hab.
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HANSENASE
Histria
A hansenase
afeta a humanidade desde tempos bblicos. Ocorre em todos os continentes. Est associada a uma imagem terrvel na memria da humanidade. ESTIGMA relacionado LEPRA: mutilao, rejeio e excluso social.
Mc 1,40-45
Hansenase
A lepra (ou hansenase ou mal de Hansen, do nome de Gerhard Hansen, uma doena infecciosa causada pelo Mycobacterium leprae que afeta os nervos e a pele e que provoca danos severos.
- Dormncia;
- Formigamento; - Mancha com queda de plos; - Queimar-se ou cortar-se sem sentir
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Caractersticas Gerais
Mycobacterium leprae
So lcool-cido-resistentes. No so cultivados em meios bacteriolgicos artificiais. Freqentemente encontrados no interior de clulas endoteliais e em clulas mononucleares.
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Manifestaes clnicas
Incio insidioso.....
As leses afetam os tecidos mais frios do corpo: pele, nervos superficiais, nariz, faringe, laringe, olhos e testculos.
Os distrbios neurolgicos se caracterizam por anestesias, e encurtamento dos dedos devido a infiltrao e espessamento dos nervos.
Patogenia
Hansenase Lepromatosa
Leses cutneas nodulares, acometimento simtrico dos nervos, BAAR abundantes, bacteremia contnua e teste cutneo negativo, evoluo maligna e progressiva
Tuberculide
Evoluo benigna e no progressiva, leses cutneas maculares, BAAR em pequeno nmero, acometimento assimtrico dos nervos e teste cutneo positivo.
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Diagnstico
Amostras: Raspado da pele ou mucosa nasal, bipsias de pele e linfa do lbulo da orelha. Bacterioscopia: Colorao de Ziehl-Neelsen Cultura: M. leprae no cultivvel.
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Leses desfigurantes
Mycobacterium leprae
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Transmisso
Transmisso atravs de secreo nasal.
Diagnstico
Diagnstico: Baciloscopia
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HANSENASE
Tratamento Poliquimioterapia . Rifampicina PQT . Sulfona . Clofazimina . Etionamida . Prednisona estados reacionais . Talidomida eritema nodoso
QUESTES MICOBACTRIAS 1) Descreva as caractersticas gerais das Micobactrias. 2) O que o cido miclico? Quais caractersticas so decorrentes do cido miclico? 3) Quais os meiso de cultura utilizados para o isolamento das micobactrias? 4) O que so bactrias BAAR? Qual a colorao especfica para esse grupo de bactrias? 5) O que o granuloma? Sua proteo efetiva? 6) O que o mtodo de Petroff? Para que ele utilizado? 7) Descreva a situao atual da tuberculose no Brasil e no Mundo. 8) Quais as principais leses causadas por M. tuberculosis? Quais os tipos de tuberculose? 9) Qual a vacina utilizada para imunoproteo contra tuberculose? 10) Como feito o diagnstico laboratorial da Hansenase? 11) O que o teste de PPD ou Mantoux? 12) Descreva a situao atual da hansenase no Brasil e no Mundo. 13) Quais as complicaes so decorrentes da infeco por M. leprae? Porque os pacientes tem perda de sensibilidade? Como feito o diagnstico laboratorial da Hansenase? 14) Quais os dois tipos de hansenase? Quais as suas diferenas? 15) Como feito o diagnstico laboratorial da Hansenase?
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