Se recomienda consultar con el laboratorio la interpretacin de los ttulos de I.F.I. para las diferentes enfermedades infecciosas.

SEROLOGA
Tcnica
IFI

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO Refrig. 3-6 C

Vol.
0,5 ml Negativo: Dudoso: Positivo:

Rango de Normalidad / Interpretacin

Ttulo IgG <1/40 Ttulo IgG 1/ 40 Ttulo IgG 1/ 80

ANTINUCLEARES, ANTICUERPOS (ANAS)

Los ANAs miden los anticuerpos circulantes contra el material nuclear de las clulas. Es una prueba muy sensible pero poco especfica: LES, otras patologas autoinmunes, enfermedades que cursan con estimulacin antignica crnica (procesos neoplsicos, degenerativos e inflamatorios crnicos). Algunos animales sanos (principalmente viejos) tienen ttulos bajos de ANAs (1/2 a 1/8). Existen diferentes patrones de fluorescencia nuclear pero su significado en los animales es incierto, a diferencia de la especie humana donde cada patrn guarda una relacin con una enfermedad o grupo determinado de enfermedades. En el LES, un ttulo positivo ( 90% de los casos) debe ser considerado conjuntamente con los sntomas clnicos de la enfermedad (lesiones cutneas, poliartritis, anemia, trombocitopenia, miositis), mientras que un ttulo negativo no descarta la presencia de LES (lupus seronegativo).

ANTITEJIDOS, ANTICUERPOS

SUERO Refrig. 3-6 C

0,5 ml

Negativo: Dudoso: Positivo:

Ttulo IgG <1/40 Ttulo IgG 1/ 40 Ttulo IgG > 1/40

IFI

Mismo significado que los ANAs pero hacindose extensible a otros componentes celulares a parte del ncleo. Normalmente se utilizan cortes histolgicos de rin, hgado y estmago de ratn.

BABESIOSIS (Babesia sp.) OBSERVACIN

FROTIS DE SANGRE PERIFRICA (Fijar con metanol) Refrig. 3-6 C

2 ml

Ausencia de parsitos. Recomendaciones: - Realizar la extraccin durante el perodo febril (en fases agudas de la enfermedad es ms fcil la observacin que en fases crnicas). - Realizar citologa de sangre perifrica (oreja, rabo, uas) ya que la concentracin parasitaria es mayor. - El resultado negativo no descarta la enfermedad.

Microscopa ptica

38

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO Refrg. 3-6 C

Vol.
1 ml PERRO:

Rango de Normalidad / Interpretacin

Negativo: Ttulo IgG < 1/40 Dudoso: Ttulo IgG 1/40 Positivo: Ttulo IgG > 1/80

Tcnica
IFI

BABESIOSIS CANINA (Babesia canis), ANTICUERPOS

Falsos positivos: en zonas endmicas podemos encontrar animales con ttulos altos e incluso en cachorros (por los anticuerpos maternales). Falsos negativos: casos hiperagudos, cachorros e inmunodeprimidos. Dudosos: elevada tasa de anticuerpos inespecficos en sangre circulante: otros procesos infecciosos. Para descartar infeccin se recomienda repetir la determinacin en el plazo de 3-4 semanas (incrementos de 3 a 4 diluciones de IgG son significativos) y/o confirmar por citologa de sangre capilar o P.C.R. SUERO Refrig.. 3-6 C 1 ml EQUIDOS: Negativo: Ttulo IgG < 1/40 Dudoso: Ttulo IgG 1/40-1/80 Positivo: Ttulo IgG > 1/80 IFI

BABESIOSIS EQUINA (Babesia caballi) ANTICUERPOS

Se observan reacciones cruzadas con Theileria equi, pero rara vez >1/80. Para confirmar infeccin se recomienda repetir la determinacin en el plazo de 2 a 3 semanas (un incremento en el ttulo de 3 a 4 diluciones de IgG es significativo) o bien confirmar por PCR. SUERO Refrig 3-6 C 0,5 ml Anticuerpos IgG PERRO: Negativo: Ttulo < 1/40 Dudoso: Ttulo 1/40-1/80 Positivo: Ttulo > 1/80 IFI

BORRELIOSIS CANINA (ENF. LYME)(Borrelia burgdorferi), ANTICUERPOS

Un ttulo positivo no es diagnstico, ya que no diferencia entre infeccin activa y exposicin anterior a B.burgdorferi (los ttulos de IgG permanecen altos hasta 8 meses post-infeccin), aunque puede sugerirla en presencia de sntomas clnicos. Para descartar la infeccin se recomienda repetir la determinacin en el plazo de 2 a 3 semanas o bien determinar anticuerpos IgM (un incremento en el ttulo de 3 a 4 diluciones de IgG es indicativo de enfermedad). Anticuerpos IgM PERRO: Negativo: Ttulo < 1/40 Positivo: Ttulo > 1/80

Los ttulos IgM alcanzan valores mximos a los 14 das postinfeccin y se mantienen elevados aproximadamente 3 meses. La presencia de un ttulo positivo de anticuerpos IgM es compatible con infeccin activa. El seguimiento de los niveles de anticuerpos en un enfermo en tratamiento es muy variable y puede no existir correlacin entre stos y el xito o fracaso del tratamiento: - Si con el tratamiento desaparecen los signos clnicos y los niveles de anticuerpos bajan, se mantienen o suben ligeramente, es indicativo de que la enfermedad est siendo controlada (al morir las borrelias, se produce la liberacin de antgeno que induce una ligera produccin de anticuerpos). - Si los niveles de anticuerpos aumentan y el cuadro clnico no mejora, no estamos controlando la enfermedad. - Por otro lado, si el cuadro clnico no mejora y los anticuerpos desaparecen, probablemente no estemos ante un caso de Lyme.

39

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO Refrig. 3-6 C

Vol.
2 ml Negativo

Rango de Normalidad / Interpretacin

Diagnstico: - Sintomatologa: La mayor parte de los animales son asintomticos, pero dentro de los que presentan clnica, las alteraciones reproductivas son las ms frecuentes: Hembras: abortos entre los das 45-55 de gestacin seguidos de flujo vaginal pardo y alteraciones de la fertilidad. Machos: infertilidad y orquitis, epididimitis, dermatitis escrotal, atrofia testicular - Laboratorio: La aglutinacin rpida es una prueba de cribaje que determina la presencia de anticuerpos frente a B.canis: Falsos negativos: - Fases precoces (primeras 4 semanas post-infeccin). - Antibioterapia reciente (durante las 4 semanas anteriores). Falsos positivos: - Reacciones cruzadas con otras bacterias (Pseudomonas, Bordetella bronchiseptica y Actinobacillus). - Hemlisis. * Los resultados positivos deben evaluarse en relacin con los datos clnicos y confirmarse por hemocultivo.

Tcnica
AGL

BRUCELOSIS CANINA (Brucella canis), ANTICUERPOS

CLAMIDIASIS (Chlamydia psittaci), ANTICUERPOS IgG

SUERO Refrig. 3-6 C

1 ml

Determinacin semicuantitativa de anticuerpos frente a Chlamidia psittaci en aves (Immunocomb) - Un ttulo positivo indica que el animal ha sufrido una infeccin y que ha desarrollado una respuesta inmune, pero no diferencia entre infeccin actual o exposicin anteror. - Un ttulo negativo no significa que el animal no est infectado por Chlamydia psittaci (animales jvenes, inmunosuprimidos o en fases iniciales de la infeccin).

IFI

DIROFILARIOSIS CANINA (Dirofilaria immitis), ANTIGENO

SANGRE TOTAL, SUERO, PLASMA Refrig. 3-6 C

1 ml

No se detecta. Ciclo biolgico DE Dirofilaria immitis: 1.-El mosquito vector () ingiere sangre con microfilarias en estadio L1 de un perro parasitado. Dentro del mosquito, las microfilarias sufren 2 mudas (L1 L2 L3). 2.- A travs de la herida producida por la picadura del mosquito, la L3 es inoculada al nuevo husped migracin tisular y transformacin de L3L4L5 (50-70 das p.i.) 3.- La L5 alcanza el torrente circulatorio (70-110 das p.i.) maduracin y transformacin en adultos. 4.- Liberacin de microfilarias por los adultos (5-6- meses p.i.). Los mtodos de ELISA utilizados, detectan de forma semicuantitativa antgenos de D.immitis (adultos) en sangre del hospedador, de forma que un resultado positivo indica infeccin en curso, siendo la intensidad de la reaccin de la prueba, proporcional al nmero de adultos maduros. Falsos negativos: - Estadios iniciales de la parasitacin. - Infecciones ligeras (<5 gusanos). - Parasitaciones por individuos de un solo sexo. En caso de duda o resultados positivos dbiles inesperados, repetir el anlisis 2 o 3 meses ms tarde o utilizar otros mtodos diagnsticos (observacin de microfilarias en frotis, ecocardiografa, radiografa torcica)

ELISA

40

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO Refrig 3-6 C

Vol.
0,5 ml

Rango de Normalidad / Interpretacin

Anticuerpos IgG: Negativo: Ttulo < 1/40 Dudoso: Ttulo 1/40-1/80 Positivo: Ttulo 1/80 La deteccin de Anticuerpos (IgG) diagnsticos frente a Ehrlichia, tiene lugar de 2-4 semanas postinfeccin. Estos continan aumentando hasta 80 das post-infeccin y pueden mantenerse altos de 9-12 meses o incluso aos despus de superada la enfermedad: o Falsos negativos/dudosos: Estados agudos de la enfermedad (aparicin de sntomas antes de que el sistema inmune sea capaz de producir anticuerpos). Animales inmunodeprimidos (fases terminales de la enfermedad) o bajo terapia corticoide. Presencia de anticuerpos inespecficos en sangre circulante: otros procesos infecciosos (1/40). Especie de Ehrlichia infectante distinta a la testada.

Tcnica
IFI

EHRLICHIOSIS CANINA (Ehrlichia canis) ANTICUERPOS

* En caso de obtener un resultado negativo o dudoso bajo sospecha de ehrlichiosis, se recomienda realizar: 1.- Seroconversin en 3-4 S (aunque se haya instaurado un tratamiento especfico). Es recomendable tambin descartar otras enfermedades infecciosas endmicas en la zona (leishmaniosis, babesiosis) 2.- Detectar Anticuerpos IgM (inmunoglobulinas de aparicin ms temprana que las IgG). 3.- Si el resultado siguiera siendo negativo, se recomienda la realizacin de otras pruebas diagnsticas: visualizacin directa del parsito dentro de las clulas mononucleares (baja sensibilidad) o bien PCR. o Falsos positivos/dudosos: Elevada tasa de anticuerpos inespecficos en sangre circulante: otros procesos infecciosos (1/80). Animales que hayan padecido la enfermedad de forma subclnica (dado que los niveles de anticuerpos pueden permanecer elevados durante meses).

Seguimiento de pacientes en tratamiento: Los ttulos de IgG frente a Ehrlichia no son apropiados para una correcta evaluacin de la respuesta al tratamiento, sin embargo, s son tiles para detectar recidivas o nuevas reinfecciones (aumento significativo del ttulo de anticuerpos). Se debe realizar el seguimiento en base a la normalizacin del proteinograma y la desaparicin de los signos clnicos.

Formatos de I.F.I. frente a Ehrlichia: Ehrlichiosis POSITIVO-NEGATIVO: - Anlisis recomendado para chequeo de poblaciones (campaa anual de ehrlichiosis) o para casos en que se desee descartar la enfermedad (y no hay evidencia clnica clara de la misma). - Se monta una nica dilucin a 1/80 (lmite de positividad). El resultado se informa como ttulo < 1/80 (negativo); ttulo 1/80 (dudoso) ttulo > 1/80 (positivo). Ehrlichiosis CUATRO TTULOS: - Anlisis recomendado cuando se desea descartar la enfermedad ya que hay evidencia clnica de la misma. - Se montan las diluciones 1/40, 1/80,1/160 y 1/320. Ehrlichiosis TTULO FINAL: - Indicado si se desea conocer el ttulo mximo de positividad. - Se montan diluciones de anticuerpos hasta que la prueba deja de ser positiva.

41

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO, PLASMA, LIQUIDO SINOVIAL Refrig. 3-6 C

Vol.
1 ml No se detecta.

Rango de Normalidad / Interpretacin

El factor reumatoide son autoanticuerpos IgM que se producen en respuesta a IgG del individuo enfermo que se vuelven antignicas. Indicaciones: - Diagnstico de la artritis reumatoide (del 20-70% de los perros afectados son positivos, si bien este porcentaje aumenta con la magnitud y cronicidad de la enfermedad). - Para un diagnstico certero, debemos apoyarnos en el cuadro clnico, caractersticas radiolgicas, datos del lquido sinovial, y si es posible en los patrones de la biopsia sinovial. - Pueden darse falsos positivos dbiles en enfermedades que cursen con la produccin y depsito a nivel sistmico de grandes cantidades de inmunocomplejos.

Tcnica
AGL

FACTOR REUMATOIDE CANINO

FILARIOSIS, (Dirofilaria sp., Dipetalonema sp., Angiostrongylus sp.), OBSERVACIN

HEMOBARTONELA OBSERVACIN

SANGRE TOTAL Refrig. 3-6 C

3 ml

Ausencia Observacin de microfilarias en un frotis directo de sangre: - El resultado positivo confirma el diagnstico se recomienda estudio para identificar la especie. - El resultado negativo no descarta la enfermedad (baja sensibilidad de la tcnica) se recomienda realizar pruebas de concentracin.

Microcopa ptica

FROTIS DE SANGRE PERIFRICA (fijar con metanol) Refrig. 3-6 C

Ausencia. Identificacin de las formas anulares del parsito (actualmente se utilizan los nombres de Mycoplasma haemofelis para la Hemobartonella felis y Mycoplasma haemocanis para la Hemobartonella canis) a nivel epicelular en los eritrocitos infectados. Perros: Enfermedad poco frecuente y asintomtica, salvo en inmunodeprimidos o esplenectomizados, donde puede cursar con anemia hemoltica. Gatos: Mayor importancia clnica ya que es una de las causas ms frecuentes de anemia hemoltica grave en gatos: - El resultado positivo confirma el diagnstico, pero el negativo no descarta la enfermedad. - Se recomienda el envo de extensiones de sangre capilar auricular donde la concentracin de eritrocitos parasitados es mayor. - Falsos negativos: El EDTA hace que el parsito se suelte de los hemates (por lo que no se debe valorar sangre recogida en este anticoagulante). Baja sensibiliad de la prueba: ya que las parasitemias son cclicas y de corta duracin, se recomienda evaluar frotis durante varios das consecutivos para mejorar la probabilidad del diagnstico y durante la fase aguda de la enfermedad. - Falsos positivos: Confusin con precipitados de colorantes en muestras mal teidas. Gatos portadores subclnicos y recuperados tras el tratamiento permanecern como potadores de por vida (pueden sufrir episodios Recurrentes).

Microscpa ptica

HEPATOZOONOSIS

(Hepatozoon canis), CITOLOGIA

FROTIS DE SANGRE PERIFRICA (fijar con metanol) Refrig. 3-6 C

Ausencia. Identificacin de los gamontes de Hepatozoon en neutrfilos o monocitos sanguneos: - El resultado positivo confirma el diagnstico. - El resultado negativo no descarta la enfermedad.

Microscopa ptica

42

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO, PLASMA SANGRE TOTAL Refrig. 3-6 C

Vol.
1 ml

Rango de Normalidad / Interpretacin

Ausencia de anticuerpos. Fases de la enfermedad: - Estadio I (Fase aguda primaria): Se observa de 4-6 S post-infeccin: fiebre, malestar general, neutropenia, linfadenopata generalizada (100% de los gatos, de 2-9 meses de duracin).En muchos casos son transitorios y pasan inadvertidos. - Estadio II (Fase latente asintomtica): La duracin de este periodo es variable (desde meses hasta aos dependiendo de factores nutricionales, genticos, inmunolgicos y ambientales). Por lo general no hay sntomas salvo algunas adenopatas. - Estadio III (Fase terminal crnica): Aparece el sndrome de inmunodeficiencia adquirida con infecciones crnicas oportunistas recurrentes. Resultados e interpretacin del ELISA: La presencia de anticuerpos frente a FIV indica exposicin e infeccin previa y dado que la infeccin por FIV es de por vida, ser sinnimo de infeccin persistente. Falsos negativos: - Estadios tempranos de la infeccin aguda (FIV se puede detectar de 3-8 semanas post-infeccin). - Estadios terminales por inmunodepresin. Falsos positivos: - Presencia de anticuerpos maternos en gatitos menores de 4-5 meses. - Reacciones no especficas. * En gatos asintomticos, con bajo riesgo de infeccin o cuando se considere la eutanasia, se recomienda repetir el test en 6-8 semanas o bien realizar otras pruebas como la PCR para confirmar el positivo.

Tcnica
ELISA

Inmunodeficiencia Felina (FIV), ANTICUERPOS

LEISHMANIOSIS CANINA (Leishmania donovani), ANTICUERPOS

SUERO Refrig. 3-6 C

1 ml

Anticuerpos IgG: Negativo: Ttulo < 1/50 Dudoso: Ttulo 1/50-1/100 Positivo: Ttulo >1/100 La deteccin de Anticuerpos (IgG) diagnsticos frente a Leishmania, tiene lugar de 2-4 semanas postinfeccin, con valores mximos entre 45-80 das que disminuyen a los 60-90 despus de instaurar un tratamiento efectivo: o Falsos negativos/dudosos: - Animales inmunodeprimidos (fases terminales de la enfermedad) o bajo terapia corticoide. - Presencia de anticuerpos inespecficos en sangre circulante: otros procesos infecciosos (1/100). - Granulomas de leishmaniosis en piel. *En caso de obtener un resultado negativo o dudoso bajo sospecha de leishmaniosis, se recomienda realizar: 1.- Seroconversin en 1 mes. Es recomendable tambin descartar otras enfermedades infecciosas endmicas en la zona (ehrlichiosis). 2.- Pruebas directas que detecten el microorganismo: Observacin directa ( ) a partir de muestras (ganglio, mdula sea) obtenidas por PAF, impronta o biopsia. P.C.R. (): mejor tcnica para el diagnstico de portadores asintomticos o infectados seronegativos por su mayor sensibilidad. Un perro con ttulos negativos o dudosos frente a lesishmania pero PCR positivo, sugiere qe la respuesta inmunitaria frente al parsito es muy buena (ya que la inmunidad humoral o por anticuerpos que es la que tiende a desarrollar la sintomatologa por la formacin de inmunocomplejos, est controlada),mientras que la inmunidad celular o por citoquinas y linfocitos CD4+/CD8+ es capaz de mantener controlado el parsito.

IFI

43

Prueba

Tipo de Muestra

Vol.

Rango de Normalidad / Interpretacin

*En caso de obtener un resultado dudoso sin ningn tipo de sintomatologa, se recomienda chequear de nuevo el ttulo de leishmania en 6 meses y mantener en observacin al animal por la posible aparicin de cualquier sintomatologa relacionada. Seguimiento de pacientes en tratamiento: - Se debe realizar el seguimiento en base a la normalizacin del proteinograma, ttulo de anticuerpos y la desaparicin de los signos clnicos ( Perfil leishmania seguimiento). - Se recomienda controles peridicos trimestrales (primer ao) y si la evolucin es favorable, cada 6 meses (aos siguientes) con el fin de controlar posibles recidivas (elevacin de la tasa de anticuerpos y alteraciones en el proteinograma). Formatos de I.F.I. frente a Leishmania: Leishmaniosis POSITIVO-NEGATIVO: - Anlisis recomendado para chequeo de poblaciones (campaa anual de leishmaniosis) o para casos en que se desee descartar la enfermedad (y no hay evidencia clnica clara de la misma). - Se monta una nica dilucin a 1/100 (lmite de positividad). El resultado se informa como ttulo < 1/100 (negativo); ttulo 1/100 (dudoso) ttulo > 1/100 (positivo). Leishmaniosis CUATRO TITULOS: - Anlisis recomendado cuando se desea descartar la enfermedad ya que hay evidencia clnica de la misma. - Se montan las diluciones 1/50, 1/100,1/200 y 1/400. Leishmaniosis TITULO FINAL: - Indicado si se desea conocer el ttulo mximo de positividad (importante de cara a la evolucin de la enfermedad despus de iniciado el tratamiento). - Se montan diluciones de anticuerpos hasta que la prueba deja de ser positiva.. (VER PERFILES LEISHMANIA PRONSTICO y LEISHMANIA SEGUIMIENTO)

Tcnica

LEISHMANIOSIS CANINA (Leishmania donovani), OBSERVACIN

- BIOPSIA (formol 10%) - CITOLOGA - IMPRONTA (fijar con metanol)

Ausencia de amastigotes. Identificacin de los amastigotes de Leishmania en el interior de macrfagos de aspirados de ganglios linfticos, mdula sea, impresiones cutneas - El resultado positivo confirma el diagnstico. - El resultado negativo no descarta la enfermedad.

Microscpa ptica

44

Prueba

Tipo de Muestra
SUERO Refrig.. 3-6 C

Vol.
1 ml Anticuerpos IgG:

Rango de Normalidad / Interpretacin

PERRO: Negativo: Ttulo < 1/40 Dudoso: Ttulo 1/40-1/80 Positivo: Ttulo > 1/80

Tcnica
IFI

LEPTOSPIROSIS CANINA (Leptospira sp.),ANTICUERPOS

- Aparecen de 2-3 semanas post-infeccin., son mximos entre 3-4 semanas y se mantienen positivos durante meses o aos. - Por tanto, un ttulo positivo, no diferencia entre infeccin activa, infeccin previa o vacunacin (de 3-4 semanas post-vacunacin, los ttulos Pueden elevarse hasta 1/320 pero despus de 1-3 meses, estos ttulos caen hasta niveles de proteccin en torno a 1/80). - Para descartar infeccin se recomienda repetir la determinacin en el plazo de 2 a 3 semanas y ver seroconversin (un incremento en el ttulo de 3 a 4 diluciones de IgG es significativo).

LEUCEMIA FELINA, ANTIGENO (FeLV)

SUERO, SANGRE EDTA/heparina Refrig. 3-6 C

1 ml

Ausencia de antgeno P27 (protena estructural del FeLV) Resultados de la exposicin al FeLV: - GRUPO 1 (No infectados): Gatos expuestos que no se infectan (por resistencia a la infeccin o por exposicin insuficiente). - GRUPO 2 (Infeccin persistente): Gatos expuestos que desarrollan infeccin progresiva con viremia persistente y sntomas despus de un intervalo variable de tiempo. - GRUPO 3 (Infeccin transitoria): Gatos expuestos que desarrollan infeccin replicativa transitoria que es rechazada por el sistema inmunitario del gato: La viremia suele desaparecer de 4-6 semanas post-infeccin quedando entonces como portadores latentes (FeLV queda integrado en el ADN de clulas linfoides) por un periodo variable (6-9 meses o incluso aos) hasta que es eliminado. Resultados e interpretacin del ELISA : Positivo: - Viremia persistente (grupo 2). - Viremia transitoria (grupo 3): Si el gato se presenta sano, repetir la prueba cada mes durante 3 meses para determinar si la infeccin es transitoria o persistente. Negativo: - No expuesto o expuesto pero no infectado (Grupo 1). - Infeccin subclnica muy temprana (FeLV se puede detectar de 2-8S post-infeccin). - Infeccin transitoria ahora recuperado. - Infeccin transitoria latente. *Si hay sospecha de exposicin al virus se recomienda repetir el anlisis peridicamente.

ELISA

MOQUILLO CANINO, ANTICUERPOS EN L.C.R. MOQUILLO CANINO, ANTICUERPOS

ASPIRADO DE L.C.R. Refrig. 3-6 C

0,5 ml

Negativo:

Ttulo IgG < 1/20

IFI

Un ttulo positivo de IgG ( 1/20) en LCR se considera positivo. Sin embargo, si es negativo no debe descartarse la enfermedad aun en presencia de sintomatologa nerviosa. Hay riesgo de falsos positivos por contaminacin del LCR con sangre perifrica durante la extraccin o bien por dao de la barrera hematoenceflica (se excluyen los falsos positivos si los ttulos son x2 veces superiores a los del suero). SUERO Refrig . 3-6C 0,5 ml Para interpretar correctamente un ttulo de inmunoglobulinas en el diagnstico del moquillo, es importante conocer la edad y la procedencia del animal (criadero, pajarera, particular), la cartilla de vacunacin y la fecha de presentacin de los sntomas. De forma general, podemos afirmar que las IgG consideradas independientemente, tienen poco valor diagnstico pues no diferencian una infeccin activa actual, de una exposicin anterior al virus o de la proteccin vacunal. Es aconsejable realizar conjuntamente la valoracin de los ttulos de IgM, ya que un ttulo positivo s sugiere infeccin activa actual (aunque no la confirma). IFI

45

Prueba

Tipo de Muestra

Vol.

Rango de Normalidad / Interpretacin

Interpretacin de los niveles de Ig en la primovacunacin: - La inmunidad se compone fundamentalmente de IgM, se alcanza el ttulo mximo a las 2-3 semanas postvacunacin y rara vez tienen ttulos>1/80 Progresivamente, conforme pasan los das, las IgM van disminuyendo al mismo tiempo que se incrementan las IgG. - Los cachorros procedentes de criaderos, pajareras, perreras, etc., pueden presentar ttulos de Ig diferentes a los que cabra esperar para una primovacunacin como consecuencia de una mayor circulacin del virus en estos ambientes (poblacin animal relativamente alta, contactos entre animales enfermos o en estado subclnico y sanos son frecuentes, diseminacin por aerosoles, va orina hasta meses despus postinfeccin, estados de estrs e inmunosupresin son habituales) lo que conlleva a un mayor grado de exposicin bajo un estado inmunitario en desarrollo: TTULO DE INMUNGLOBULINAS Pico max.Ig (2-3 semanas postvac.) IgG <1/20-1/20 IgM 1/80 IgG 1/20-1/160 IgM 1/20-1/40 Depender de:

Tcnica

Perro sano

>3 semanas postvacunacin IgG 1/40-1/80 IgM 1/20-1/40 1.- Grado de exposicin. 2.- Estado inmunitario previo y actual. 3.- Circulacin del virus.

Perro procedente de criadero, pajarera...

Interpretacin de los niveles de Ig en la revacunacin posterior a la primovacunacin: - La respuesta inmune se compone bsicamente de IgG (que pueden alcanzar ttulos de hasta 1/160 de 2-3 S post-vacunacin) y en menor medida de IgM (no son frecuentes los ttulos prximos a 1/80).Progresivamente las IgG van disminuyendo pero se estabilizan (salvo interferencias vacunales) en ttulos que proporcionan una proteccin vacunal bastante prolongada, fundamentalmente si se contina con una revacunacin anual correcta. TTULO DE INMUNOGLOBULINAS Pico max.Ig (2-3 semanas postvac.) >3 semanas postvac. Perro sano IgG 1/80-1/160 IgM 1/20-1/40 IgG >1/160 IgM >1/40 IgG 1/40-1/80 IgM 1/20

Ttulo dudoso

Cuanto ms se aleje del pico de Ig. ms dudoso ser.

Interpretacin de los niveles de Ig en la revacunacin anual: - La evolucin e interpretacin de los ttulos de Ig es similar a la realizada para la revacunacin posterior a la primovacunacin. - Ttulos de IgG e IgM compatibles con moquillo: TTULO DE INMUNOGLOBULINAS Ttulo positivo IgG > 1/320 IgM > 1/80 Ttulo dudoso - Vacunados

IgG 1/160 IgM 1/40

- No vacunados: IgG 1/80 IgM 1/40

46

Prueba

Tipo de Muestra

Vol.

Rango de Normalidad / Interpretacin

- Consideramos com ndice de proteccin vacunal, los siguientes ttulos: TTULO <1/20 1/20-1/40 1/40-1/80 1/80-1/160 >1/160 GRADO DE PROTECCIN VACUNAL BAJA (Posible interferencia vacunal) MODERADA ADECUADA ALTA-POSIBLE INFECCIN COMPATIBLE CON INFECCIN (Incluso en perros vacunados)

Tcnica

Ante la presencia de un ttulo dudoso, podemos realizar: a) Seroconversin: Obtener un nuevo ttulo de Ig mediante IFI tras 3-4 semanas de la primera determinacin. Se considera una seroconversin positiva: a.1.- Incrementos de 3-4 diluciones de las IgM independientemente de la evolucin de las IgG. a.2.- Incrementos de 3-4 diluciones de las IgG acompaado de una disminucin del ttulo de las IgM. b) Inmunofluorescencia directa (IFD) en cualquier secrecin o excrecin corporal (). c) IFI en lquido cefalorraqudeo (LCR) (). d) PCR No se detecta. Tipo de muestra: - In vivo: cualquier secrecin o excrecin corporal (orina, exudado conjuntival, impronta vaginal, traqueal, frotis de aspirados de ganglios linfticos, L.C.R....). - Post-mortem: cualquier rgano afectado: cerebro, pulmn, vejiga, estmago, hgado Interpretacin: Un resultado positivo es diagnstico (entre los das 2-5 post-exposicin se produce la infeccin del tejido linfoide sistmico y a partir del 6al 9 da se produce viremia y diseminacin hacia tejidos epiteliales y S.N.C.). Se recomienda la toma de muestras en funcin de la sintomatologa y el tiempo pasado desde la posible exposicin al virus. Falsos positivos: Periodo post-vacunal (recomendado esperar 10 das). Animales infectados pueden estar eliminando virus (fundamentalmente por orina) durante meses o incluso aos. Si es negativo, no se descarta la enfermedad. Pueden presentarse falsos negativos por baja celularidad en la muestra remitida, eliminacin intermitente del virus o por neutralizacin del antgeno por un ttulo alto de anticuerpos.

MOQUILLO CANINO, ANTGENO

Ver comentario tipo de muestra Refrig. 3-6 C

IFD

NEOSPOROSIS CANINA (Neospora caninum), ANTICUERPOS

SUERO Refrig.. 3-6 C

1 ml

PERRO:

Negativo: Ttulo < 1/40 Dudoso: Ttulo 1/40-1/80 Positivo: Ttulo > 1/80

IFI

Se puede establecer un diagnstico de neosporosis a partir de sntomas tpicos (patologa multifocal del SNC, miocarditis,coriorretinitis, iridociclitis, dermatitis ulcerativa o nodular, neumona, hepatitis, parlisis ascendente), serologa positiva para Neospora caninum (IgG>1/80) y serologa negativa para Toxoplasma gondii. Tambin son tiles los anlisis del LCR (observacin de taquizoitos o determinacin de un ttulo de IgG siempre que no se produzca contaminacin con sangre ni dao de la barrera hematoenceflica). Ante ttulos dudosos, se recomienda repetir la determinacin en el plazo de 2-3 semanas y ver seroconversin.

47

Prueba

Tipo de Muestra
HECES, Refrig. 3-6 C

Vol.
Ausencia.

Rango de Normalidad / Interpretacin

Los mtodos de ELISA utilizados, detectan antgeno viral en las heces (basta con un pequeo hisopo impregnado en matera fecal): - La enfermedad clnica (diarrea hemorrgica) se asocia con la eliminacin de grandes cantidades de virus (3-12 das), por lo que este es el momento ideal para realizar el estudio. - Los resultados positivos indican excrecin fecal activa de parvovirus, si bien no se recomienda realizar el test en individuos recin vacunados por posibles falsos positivos. - Pueden aparecer falsos negativos de 4 a 7 das del final de la enfermedad clnica.

Tcnica
ELISA

PARVOVIROSIS CANINA, ANTIGENO

PERITONITIS INFECCIOSA FELINA, ANTICUERPOS

SUERO/ LIQUIDO DE DERRAMES Refrig.3-6C

0,5 ml

La deteccin de anticuerpos diagnsticos frente a PIF por IFI es una prueba muy poco especfica y de baja utilidad pues no diferencia infeccin por vPIF de otras infecciones por otros coronavirus (al ser virus antignicamente similares) ni distingue entre portador e infeccin activa. Por ello, interpretar un ttulo ya sea negativo o muy positivo frente a PIF es complicado: Causas de ttulos negativos an teniendo PIF: - Infeccin hiperaguda. - Bajo nivel de anticuerpos: estadios finales de la enfermedad (por inmunodepresin) o bien consumo de anticuerpos en la formacin de inmunocomplejos (vasculitis). Causas de ttulos positivos sin tener PIF: - Exposiciones recientes a cualquier tipo de coronavirus no PIF va a originar ttulos elevados . - Vacunaciones recientes. - Portadores asintomticos. - Recuperacin de una exposicin previa. La evaluacin de la seropositividad debe hacerse junto con la sintomatologa clnica, anlisis de sangre y lquido libre (peritonitis exudativa). Recientemente se ha diseado una PCR capaz de detectar estirpes de coronavirus que se sabe que son causantes de PIF.

IFI

THEILERIOSIS EQUINA (Theileria equi) ANTICUERPOS

SUERO Refrig.. 3-6 C

1 ml

EQUIDOS:

Negativo: Ttulo IgG < 1/40 Dudoso: Ttulo IgG 1/40-1/80 Positivo: Ttulo IgG > 1/80

IFI

Se observan reacciones cruzadas con Babesia caballi, pero rara vez >1/80. Para confirmar infeccin se recomienda repetir la determinacin en el plazo de 2 a 3 semanas (un incremento en el ttulo de 3 a 4 diluciones de IgG es significativo) o bien confirmar por PCR. SUERO Refrig. 3-6C 1 ml Ciclo vital de Toxoplasma gondii: Ciclo enteroepitelial: Slo ocurre en el gato (husped definitivo) reproduccin en el intestino del gato y eliminacin de ooquistes sin esporular (no infectivos) con las heces. La esporulacin se produce tras 1-5 das convirtindose entonces en infectivos. Fase extraintestinal: Exposicin del hospedador intermediario (gato, perro, hombre, animales de abasto) a Toxoplasma vas de transmisin: a) Ingesta de ooquistes esporulados contenidos en alimentos mal lavados, agua, suelo intestino diseminacin por sangre y linfa en forma de taquizotos (forma de divisin rpida) hacia cualquier clula donde se multiplican hasta destruirla. Si la respuesta inmune es eficaz la replicacin se frena y se forman quistes titulares de divisin lenta o bradizotos (SNC, msculo esqueltico y rganos viscerales) que pueden permanecer de por vida en fase latente. IFI

TOXOPLASMOSIS (Toxoplasma gondii), ANTICUERPOS

48

Prueba

Tipo de Muestra

Vol.

Rango de Normalidad / Interpretacin

b) Ingesta de quistes titulares: La ingesta de carne (cruda, mal cocinada) que contiene bradizotos es una fuente de infeccin importante en gatos, perros y humanos. c) Transmisin transplacentaria cuando la exposicin primaria tiene lugar durante la gestacin abortos, mortalidad neonatal, alteraciones congnitas

Tcnica

Error!
La toxoplasmosis clnica es ms frecuente en gatos que en perros (aunque la mayor parte de los animales son asintomticos y slo tienen manifestaciones serolgicas de la infeccin): Gatos: - Abortos y muerte fetal. - Adultos: uvetis, fiebre, hiperestesia muscular, anorexia, signos respiratorios y del SNC, ictericia

Perros: - Signos respiratorios, digestivos, fiebre, trastornos neuromusculares (marcha anormal y rigidez, ataxia, convulsiones, dficit nervios craneales) Diagnstico laboratorial por IFI: Indicaciones: 1.- Diagnstico de toxoplasmosis clnica en el perro y el gato. 2.- Salud pblica en humanos de cara a una posible gestacin y riesgos de posibles alteraciones congnitas para el feto.

49

Prueba

Tipo de Muestra

Vol.

Rango de Normalidad / Interpretacin

Anticuerpos IgM: - Las IgM aparecen a las 2 semanas post-infeccin coincidiendo con la eliminacin de ooquistes infectantes y dejan de detectarse hacia las 16 semanas (gatos con toxoplasmosis crnica y FIV concomitante, los ttulos de IgM persisten >16s). - Un ttulo positivo de IgM es indicativo de infeccin reciente o activa ( 1/80) o bien de reinfeccin, terapia con corticoides o de reactivacin de un proceso crnico (1/40-1/80). - Un gato con IgM positivas es un riesgo para la mujer embarazada se recomienda extremar medidas higinico-sanitarias. Anticuerpos IgG: - Las IgG aparecen a partir de las 3-4 semanas posinfeccin y persisten ms de un ao o incluso durante toda la vida del gato. - Un ttulo positivo nodiferencia una infeccin activa o reciente de una infeccin previa (aunque cuanto mayor sea este, posiblemente habr estado ms cercana la exposicin o bien la reinfeccin/reactivacin ). Interpretacin de ttulos en el gato de una mujer embarazada: - Ig M 1/80, independientemente del ttulo de IgG Riesgo evidente por coincidir con la eliminacin de ooquistes infectantes extremar medidas higinico-sanitarias. - IgM 1/40: - Ig G 1/40: No ha habido contacto con toxoplasma No riesgo actual, pero posible riesgo en un futuro si el gato entrara en contacto con toxoplasma tomar medidas higinico-sanitarias. - Ig G 1/320: Ha habido contacto con toxoplasma No riesgo actual, pero si ha habido posible riesgo recientemente valorar situacin. - Ig G 1/80: Ha habido contacto con toxoplasma pero posiblemente hace muchos meses por lo general, no hay ningn tipo de riesgo y confiere proteccin frente a posibles infestaciones.

Tcnica

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