ESCUELA DE VETERINARIA

MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO PARA LA MATERIA DE METABOLISMO ANIMAL

PROFESORES:

Q.F.B. LAURA JULIETA PICHARDO GMEZ Q.F.B. LETICIA ZIGA OROZCO Dr. FROYLN ALBARRN TAMAYO

Febrero de 2013

Prctica No.

PRUEBAS DE IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTENAS

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA COMPOSICIN QUIMICA DE CARBOHIDRATOS LIPIDOS Y PROTEINAS PRUEBAS DE IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS LIPIDOS Y PROTEINAS INTRODUCCIN Las pruebas de Fehling y Benedict se basan en la accin reductora que tienen los monosacridos sobre los iones cpricos en medio alcalino El iodo identifica a la amilosa del polisacrido almidn. Las grasas son insolubles en agua y solubles en solventes orgnicos y se pueden colorear con Sudan III Los protenas se identifican con la reaccin de Biuret la producen los pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia del enlace peptdico (-CO-NH-) el que se destruye al liberarse los aminocidos. Cuando una protena se pone en contacto con un lcali concentrado, se forma una sustancia compleja llamada Biuret.

OBJETIVO Poner de manifiesto algunas propiedades de los carbohidratos, lpidos y protenas que puedan servir para su identificacin

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Soluciones de glucosa, arabinosa, maltosa, sacarosa, fructuosa, almidn al 2% (ste precalentado) Solucin de glucosa al 0.3, 1%, 1.5% y 2%

Aceite vegetal Solucin de albmina al 1% Reactivo de Fehling o Benedict Lugol ter Solucin de Sudan III en gotero Tinta roja en gotero Solucin de sulfato cprico al 1% Solucin de hidrxido de sodio al 20% y al 5% Acido clorhdrico concentrado 15Tubos de ensaye de 15x150 mm 1 Pipeta de 5 ml Mechero Gradilla Pinzas para tubo de ensaye Vaso de precipitado para bao mara Marcador indeleble Sharpie de preferencia negro Soporte universal PUNTOS CRITICOS DE CONTROL Leer cuidadosamente la prctica para saber lo que va a hacer. Leer la etiqueta antes de tomar la sustancia de su envase. Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no est dirigido hacia s mismo o algn compaero para evitar accidentes por proyecciones. No utilizar la misma pipeta (en caso de lquidos), o esptula (slidos) para tomar sustancias diferentes a fin de evitar contaminaciones. Utilizar perilla de seguridad para pipetear (nunca con la boca). Medir o pesar las sustancias con la mayor precisin posible. Al final de la prctica asear el rea de trabajo, material y equipo. Lavar muy bien las manos al terminar.

TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

PROCEDIMIENTO A.- Propiedades de Carbohidratos Identificacin con lugol Colocar en diferentes tubos 1ml de las soluciones al 2% de los carbohidratos que se le proporcionen. 1. Agregar 1 gota de solucin de lugol y observar

Identificacin de azcares reductores 1.- En 1 tubo de ensaye pipetear 5 ml de la solucin de sacarosa al 2%, agregar 6 gotas de HCl concentrado y mezclar. 2.- Calentar durante 10 min en bao de agua hirviente. 3.- Enfriar y agregar aprox. 15 gotas de NaOH al 5%, para neutralizar. 4.- Realizar al hidrolizado la prueba de Fehling Reaccin de Fehling: a 1 ml de la solucin problema agregar 0.5 ml de la solucin A y 0.5 ml de la solucin B. Calentar en bao de agua durante 5 min. Observar el sedimento. Soluciones de glucosa a diferentes concentraciones 1.- Pipetee 0.5 ml de las soluciones problema en diferentes tubos de ensaye. 2.- Realizar prueba de Fehling. Utilice la tabla siguiente para determinar la cantidad aproximada de glucosa presente en las soluciones color Azul Azul verdoso Verde oliva Azul caf Rojo ladrillo Concentracin aprox. de glucosa g/100 ml 0 g/100 ml (negativa) 0.3 g/100 ml 1.0 g/l00 ml 1.5 g/100 ml 2.0 g/100 ml

Observe los cambios que sufre el contenido de cada uno de los tubos y anote los resultados.

B.- Propiedades de Lpidos Solubilidad. 1.- Tomar 2 tubos de ensaye y poner en uno 3 ml de agua y en otro 3 ml de ter 2.- Agregar 1 ml de aceite. Agitar fuertemente y observar la formacin de micelas, al dejar en reposo se ver que el aceite es menos denso que el agua y se desplaza a la superficie, as como la solubilidad en el ter Determinacin de grasas por coloracin 1.- Colocar en 2 tubos de ensayo 2ml de aceite. 2.- Aadir a uno de los tubos 2 gotas de solucin de Sudan III y al otro tubo 2 gotas de tinta roja.

3.- Agitar ambos tubos y dejar reposar. Observar y anotar que ocurre en cada uno de los tubos. C.- Propiedades de protenas Prueba de Biuret 1.- En un tubo de ensayo colocar 3 ml de solucin de albmina de huevo. 2.- Agregar 2ml de solucin de hidrxido de sodio al 20% 3.- Aadir 3 o 4 gotas de solucin de sulfato cprico. 4.- Observar y anotar coloracin Reaccin de los aminocidos azufrados. 1.- Colocar en un tubo de ensaye 3 ml de solucin de albmina. 2.- Aadir 2 ml de solucin de hidrxido de sodio al 20% 3.- Agregar 10 gotas de acetato de plomo al 5% 4.- Calentar el tubo hasta ebullicin. Se forma un precipitado negro, evidenciando los aminocidos que contienen azufre.

Desnaturalizacin de protenas Las protenas por su gran tamao, forman con el agua soluciones coloidales, que pueden precipitar al ser calentadas o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos, alcohol, etc. 1.- En un tubo de ensaye pipetear 5 ml de la solucin de albmina. 2.- Aadir 5 gotas de cido actico. Observar 3.- Calentar el tubo a la llama del mechero y observar lo que ocurre

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: 1. Explique qu ocurre en cada uno de sus experimentos? Fundamente sus respuestas

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

ACTIVIDAD DE LA PANCREATINA.

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA I TRANSFORMACIONES QUMICAS DE CARBOHIDRATOS, LPIDOS Y PROTENAS A NIVEL DE DIGESTIN Y ABSORCIN.

INTRODUCCIN La mayor parte de los alimentos que son ingeridos se encuentran en forma inadecuada para ser utilizados por el organismo y no pueden ser absorbidos por el aparato digestivo hasta que son reducidos a molculas ms pequeas. Los cambios que ocurren durante la digestin se llevan a cabo con la ayuda de las enzimas producidas en el aparato digestivo. El pncreas produce la pancreatina; que contiene un grupo de enzimas entre las que destacan: la amilasa, la lipasa y las proteasas. En esta prctica se evidenciar la presencia de la amilasa.

FUNDAMENTO: La amilasa cataliza la ruptura hidroltica de enlaces alternados glucosdicos produciendo as unidades diferentes. Estos productos finales son los que sirven para verificar la actividad de la enzima. La deteccin de estos se hacen aprovechando su capacidad reductora y para comprobar que la hidrlisis del almidn llega hasta maltosa se realizar la prueba de Benedict. OBJETIVO Comprobar la actividad enzimtica de la pancreatina, variando la concentracin de la enzima y el tiempo de reaccin de la misma.

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS 5 Tubos de ensaye de 15x150 mm 2 Pipetas de 10 ml Bao de agua a 40C Gradilla Vaso de precipitado de 250 ml Termmetro Mechero Almidn al 1% (precalentado) Solucin de maltosa al 1% Pancreatina Reactivo de Benedict PUNTOS CRITICOS DE CONTROL Leer cuidadosamente la prctica para saber lo que va a hacer. Leer la etiqueta antes de tomar la sustancia de su envase. Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no este dirigido hacia s mismo o algn compaero para evitar accidentes por proyecciones. No utilizar la misma pipeta (en caso de lquidos), o esptula (slidos) para tomar sustancias diferentes a fin de evitar contaminaciones. Utilizar perilla de seguridad para pipetear (nunca con la boca). Medir o pesar las sustancias con la mayor precisin posible. Al final de la prctica asear el rea de trabajo, material y equipo. Lavar muy bien las manos al terminar. TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1. Los alumnos trabajarn con un volumen diferente de pancreatina (0,1, 2, 3, 4, 5 ml). Para mantener el volumen igual y como control aquellos que tengan el volumen 0, agregarn 5 ml de agua. 2. Coloque 10 ml de almidn en un tubo de ensaye. Agregue la cantidad de pancreatina o de agua segn se le indique. 3. Incube el tubo de almidn-pancreatina en el bao de agua a 40C y tome el tiempo. 4. Cuando hayan transcurrido 15 minutos tome con la pipeta 1 ml de muestra y transfiralo a otro tubo de ensaye. 5. Agregue 2 ml de Reactivo de Benedict, mezcle perfectamente y colquelo en un bao de agua hirviendo durante 5 minutos. Conserve el tubo.

6. Repita los procedimientos 4 y 5 a los 30 y 45 minutos a partir de la adicin de pancreatina o agua. 7. En otro tubo de ensaye ponga 0.5 ml de solucin de maltosa y repita el paso 5.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Compare los resultados obtenidos con los de sus compaeros. Concluya. Reporte de resultados. Bibliografa consultada.

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10%

BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

DIGESTIN DE PROTENA CON PEPSINA

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA II TRANSFORMACIONES QUIMICAS DE CARBOHIDRATOS, LIPIDOS Y PROTENAS A NIVEL DE DIGESTIN Y ABSORCIN INTRODUCCIN El jugo gstrico, elaborado por las glndulas de la mucosa del estmago contiene HCl libre y dos enzimas: la quimosina y la pepsina. Ambas son secretadas como proenzimas inactivas, y en presencia del cido clorhdrico se transforman espontneamente en enzimas activas.

OBJETIVO Demostrar la actividad de la pepsina simulando lo que ocurre a nivel de digestin en el estmago

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Bao de agua a 40C Termmetro Vaso de precipitado de 1000 ml Embudo Probeta de l00 ml Gradilla para tubos de ensaye Tubos en ensaye de 15x125 mm Papel filtro Pipetas de 5 y 10 ml Gasas cido clorhdrico 0.1N Solucin de sulfato cprico al 1% Solucin de hidrxido de sodio al 20% Solucin de pepsina al 1% TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA 30 MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1.-Batir al clara de huevo cruda en un litro de agua fra, y llevarla a ebullicin sin dejar de batir. 2.- Filtrarla sobre gasa (el lquido que se obtiene es una fina suspensin, muy estable, de albmina desnaturalizada. 2.- Preparar 4 tubos con las siguientes mezclas Tubo Albmina Agua HCl Pepsina 1 6ml 6ml 0 0 2 6ml 1.5 4.5 0 3 6ml 4.5 0 1.5 4 6ml 0 4.5 1.5

4.- Colocar los tubos en bao Mara a 40C durante 15 min. Observar. 5.- Realizar la prueba de Biuret a los 4 tubos y anotar resultados.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones y conclusiones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: Sobre qu tipo de uniones de aminocidos acta la pepsina? Por qu se produce como Proenzima? Analice los resultados de su experimento y concluya. En donde se produce la digestin total de las protenas?

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

HIDROLSIS DE LAS PROTENAS Y TITULACIN CON FORMOL.

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA I COMPOSICIN QUMICA, PROPIEDADES Y FUNCIONES DE PROTENAS COMPOSICIN QUMICA, PROPIEDADES Y FUNCIONES DE LAS ENZIMAS. TRANSFORMACIONES QUMICAS DE PROTENAS A NIVEL DE DIGESTIN Y ABSORCIN.

INTRODUCCIN La hidrlisis de las protenas consiste en romper las uniones peptdicas con introduccin de molculas de agua, con lo cual los grupos amino y carboxilo que constituyen el enlace amdico son liberados, por lo que la cuantificacin da idea del grado de hidrlisis ocurrida, La tripsina (PM 24000) constituye una parte de la secrecin excrina del pncreas, esta es sintetizada en los acini glandulares de dicho rgano en forma inactiva o sea como tripsingeno, el cual es convertido a tripsina activa por remocin de un hexapptido del N terminal de la cadena a travs de la enzima enterocinasa la cual es sintetizada en intestino delgado.

OBJETIVO Comprobar la accin hidroltica de una enzima (tripsina) al ponerse en contacto con una protena (gelatina), valorar la liberacin de cidos alfa aminados por medio de la titulacin de uno de sus componentes y demostrar que la titulacin es la valoracin de una solucin desconocida, con relacin a otra cuya concentracin es conocida.

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Bao mara Mechero

4 matraces erlenmeyer Bureta y pinzas para bureta Solucin de gelatina al 5% (precalentada) Solucin de tripsina Solucin de formaldehdo Solucin de NaOH al 0.02 N Solucin indicadora de fenolftalena

PUNTOS CRITICOS DE CONTROL Leer cuidadosamente la prctica para saber lo que va a hacer. Leer la etiqueta antes de tomar la sustancia de su envase. Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no est dirigido hacia s mismo o algn compaero para evitar accidentes por proyecciones. No utilizar la misma pipeta (en caso de lquidos), o esptula (slidos) para tomar sustancias diferentes a fin de evitar contaminaciones. Utilizar perilla de seguridad para pipetear (nunca con la boca). Medir o pesar las sustancias con la mayor precisin posible. Al final de la prctica asear el rea de trabajo, material y equipo. Lavar muy bien las manos al terminar. TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA CUARENTA Y CINCO MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1. Coloque 50 ml de la solucin de gelatina en un matraz. 2. Agregue 10 ml de la solucin de tripsina y mezcle perfectamente. 3. En el momento en que agregue la tripsina tome el tiempo, que va a corresponder al tiempo cero de la reaccin. 4. De la mezcla hecha en el paso anterior tome 10 ml y transfiralo a otro matraz, la mezcla restante colquela en un bao de agua a 37C. 5. Ponga a hervir los 10 ml de la mezcla en la flama directa del mechero durante 1 minuto y enseguida enfre el matraz. PRECAUCIN: ENFRIAR ANTES DE AGREGAR EL FORMALDEHDO 6. Agregue 10 ml de la solucin de formaldehdo y despus deposite 2 gotas de fenolftalena y mezcle por rotacin. 7. Titule esta mezcla con solucin de NaOH al 0.02N hasta llegar a la neutralidad (anotar los mililitros utilizados para la titulacin). 8. A partir del tiempo cero cuente 15, 30, 45 y 60 minutos tomando en cada uno de estos intervalos una muestra de 10 ml de la muestra original (tripsinagelatina) y siga el mismo procedimiento mencionado en los puntos 5 a 7.

9. Los resultados deben ser presentados en forma grfica colocando en las ordenadas el volumen del lcali utilizado y en las abscisas el tiempo transcurrido. 10. En la misma grfica elabore otra curva de tiempo contra nitrgeno de aminocidos tomando en cuenta que 1 ml de NaOH al 0.02N es equivalente a 1.4 mg de N amdico.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Resolver el siguiente cuestionario: 1. Sobre que sitios de las protenas actan las exopeptidasas y las endopeptidasas y como se encuentra clasificada la tripsina dentro de estas?. 2. Diga sobre qu sitios acta la tripsina y mencione otras tres enzimas proteolticas. 3. Qu es un indicador y mencione otros dos?. 4. Cul es el objetivo de haber hecho la titulacin en sta prctica? 5. Sobre qu lmites de pH acta la tripsina?

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10%

BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

ACCION DE LOS INHIBIDORES ENZIMATICOS

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA COMPOSICIN QUIMICA, PROPIEDADES Y FUNCIONES DE LAS ENZIMAS. METABOLISMO DE LAS PROTENAS.

INTRODUCCIN Las enzimas son protenas que desempean la funcin de catalizadores permitiendo que las reacciones qumicas se efecten en un tiempo relativamente corto dentro del organismo a una temperatura y pH compatibles con la vida celular. Las enzimas pueden ser simples o complejas dependiendo de que estn formadas exclusivamente por protenas o que contengan adems grupos prostticos. La catalasa es una enzima compleja, puesto que contiene como grupo prosttico una ferriprotoporfirina, resulta ser, por tanto una cromoprotena. Es una enzima muy importante que se encuentra ampliamente distribuida en los tejidos; una de sus funciones esta relacionada con la destruccin del perxido de hidrgeno que se forma en varias reacciones de oxidacin, como en el catabolismo de las bases pricas y de los cidos aminados. El oxigeno liberado en la reaccin es utilizado entonces para oxidar molculas pequeas. Esta enzima es una de las que actan con mayor velocidad. OBJETIVO Comprobar la accin de la catalasa sobre el sustrato adecuado y el efecto que sobre esta actividad tienen algunos inhibidores.

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Sangre diluida 1:50 Perxido de hidrgeno al 3% Cianuro de sodio al 5% Nitrato de plomo al 5% 4 Tubos de ensaye de 15x125 mm 1 Pipeta de 10 ml Mechero Gradilla Pinzas para tubo de ensaye PUNTOS CRITICOS DE CONTROL Leer cuidadosamente la prctica para saber lo que va a hacer. Leer la etiqueta antes de tomar la sustancia de su envase. Al calentar sustancias en tubos cuidar que la boca de los mismos no este dirigido hacia s mismo o algn compaero para evitar accidentes por proyecciones. No utilizar la misma pipeta (en caso de lquidos), o esptula (slidos) para tomar sustancias diferentes a fin de evitar contaminaciones. Utilizar perilla de seguridad para pipetear (nunca con la boca). Medir o pesar las sustancias con la mayor precisin posible. El tubo con cianuro de sodio ser inactivado con sulfato ferroso antes de ser descartado para formar un compuesto menos txico. Al final de la prctica asear el rea de trabajo, material y equipo. Lavar muy bien las manos al terminar.

TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1. Numere los 4 tubos de ensaye. 2. En el tubo nmero 1 coloque 3 ml de sangre diluida y pngalo en un bao de agua hirviente durante 10 min. 3. Saque el tubo del bao y enfrelo bajo el chorro de agua, hasta que alcance una temperatura aprox. de unos 37C. 4. Agregue ahora a los 4 tubos 2 ml de perxido de hidrgeno. 5. Agregue al tubo 3, 3 gotas de solucin de Cianuro de sodio. 6. Agregue al tubo 4, 3 gotas de solucin de Nitrato de plomo.

7. Agregue a los tubos 2, 3 y 4 muy lentamente y escurriendo por la pared 3 ml de sangre diluida. Precaucin: No agite los tubos ni trate de mezclar el contenido 8. Coloque los 4 tubos en bao mara a 37C para su incubacin durante 10 minutos. 9. Observe los cambios que sufre el contenido de cada uno de los tubos y anote los resultados.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Resolver el siguiente cuestionario: 2. Explique por qu razn el tubo 1 produce resultados diferentes a los dems. 3. Qu efecto tiene el cianuro sobre la actividad de la catalasa?. Explique y fundamente su explicacin. 4. A qu se deben las diferencias que obtuvo entre los tubos 2 y 4?.

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

FERMENTACION DE GLUCOSA POR LEVADURAS (Sacharomyces cereviceae)

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA I METABOLISMO

IV METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS

INTRODUCCIN La glucosa es un carbohidrato fermentable por las levaduras siguiendo la ruta de la gluclisis (Va de Emden Meyerhof)

OBJETIVO Comprobar la fermentacin de la glucosa por las levaduras Sacharomyces cereviceae

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Reactivos: Solucin de glucosa al 1% Reactivo de Benedict o Fehling Levadura de panadero seca activa Vaso de precipitado de 50 ml Tubos de ensayo de 15x150 mm Pipetas de 10 ml y 5 ml Esptula Incubadora a 37C Vaso de precipitado para bao de agua hirviente

TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1.- En un tubo de ensaye grande. Pipetear 10 ml de solucin de glucosa, 2.- Agregar aproximadamente 0.3 g (la punta de una esptula de levadura). Mezclar perfectamente hasta que la mezcla sea homognea. 3.- Incubar 30 min. A 37C y realizar la prueba de Benedict o Fehling 4.- Una hora despus volver a realizar prueba de Benedict o Fehling y observar Blancos de comparacin 5.- En un tubo de ensayo pipetear 1ml de la solucin de glucosa y realizar prueba de Fehling 6.- En otro tubo de ensaye pipetear 10 ml de agua y agregar 0.3 g (la punta de una esptula de levadura). Y realizar prueba de Fehling 7 Anotar resultados, observaciones y conclusiones Nota: Prueba de Fehling: a 0.5 ml de la solucin problema agregar 0.5 ml de la solucin A y 0.5 ml de la solucin B. Calentar en bao de agua durante 5 min. Observar el sedimento. Prueba de Benedict: a 0.5 de solucin problema agregar 1 ml de reactivo y calentar en bao de agua durante 5 min. Observar el sedimento. PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: Haga un diagrama de la ruta metablica que utilizaron las levaduras Sacharomyces cereviceae para la fermentacin de la glucosa

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

PRUEBA DE FERMENTACIN DE GLUCOSA CON ROJO DE METILO

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA II LAS TRANSFORMACIONES QUIMICAS DE LOS CARBOHIDRATOS

INTRODUCCIN Esta prueba sirve para probar la habilidad de algunos microorganismos para producir cantidades estables de productos cidos durante la fermentacin de la glucosa. La prueba est basada en el uso de un indicador de pH, el rojo de metilo . La concentracin de ion hidronio depende de la proporcin de gas (CO 2 e H 2 ) que se forma lo cual es un ndice de las diferentes vas utilizadas durante el metabolismo de los microorganismos. Todos los miembros de la enterobacterias son por definicin fermentadores de glucosa. Pero pueden tomar diferentes rutas. Una es: Glucosa+H2O 2 ac.lctico+ac.actico+etanol+2CO 2 +2H 2. La prueba ser rojo de metilo positivo. Otra es: Glucosa+ 1/2O metilo negativo

2,3-butanediol+H 2 O+ 2 CO 2. La prueba ser rojo de

OBJETIVO Comprobar la fermentacin de la glucosa por microorganismos que al efectuar gluclisis producen cidos o 2,3-butanediol

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Cultivo de Escherichia coli Cultivo de Enterobacter aerogenes Caja de Agar EMB Tubos con caldo Rojo de Metilo-Voges Proskauer (RM-VP) Mechero Asas de inoculacin

Reactivo de Rojo de metilo (Para preparar pesar rojo de metilo 0.04g disolver en 40 ml de etanol y diluir a 100ml con agua destilada) Solucin de alfa naftol al 5% Solucin de NaOH al 40% Marcador indeleble Pipetas Pasteur Bulbos para pipeta

TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

Nota: Atender las indicaciones del maestro para sembrar los tubos PROCEDIMIENTO Tomar 4 tubos con caldo RM-VP Marcar 2 tubos para E. coli y 2 para E. aerogenes De los cultivos proporcionados tomar con asa en punta una pequea cantidad del cultivo e inocular los tubos con el microorganismo correspondiente. Incubar todos a 37C por un tiempo de 24 a 48h. Prueba de Rojo de metilo. Despus de la incubacin, tomar un tubo con E. coli y otro con E. aerogenes y agregar a cada uno, una o dos gotas de solucin de rojo de metilo, y leer de inmediato: POSITIVA.- En la superficie del tubo, se observa un anillo de color rojo (pH 4.4) NEGATIVA.- En la superficie del tubo se observa un color amarillo. Prueba de Voges Proskauer Al otro par de tubos agregar 0.6 ml de solucin de alfa naftol al 5% y 0.2 ml de solucin acuosa de NaOH al 40%, agitar, inclinar el tubo (para aumentar el tamao de la interface aire/lquido) examinar despus de 15min y 1 h. POSITIVA.- Color rojo. NEGATIVA.- Sin cambio.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario:

Haga un diagrama de la ruta metablica que utilizaron las levaduras Sacharomyces cereviceae para la fermentacin de la glucosa

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

LECITINA

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA VI METABOLISMO DE LOS LPIDOS INTRODUCCIN Los fosfolpidos forman parte de los lpidos compuestos, y se encuentran ampliamente distribuidos en los tejidos de los animales. Entre los fosfolpidos encontramos a las fosfatidilcolinas (lecitinas) y las fosfodietanolaminas (cefalinas). Estos lpidos junto con las protenas son los componentes principales de las membranas c elulares y las de los organelos. Tambin intervienen en el metabolismo. Los fosfolpidos de forraje aumentan el aprovechamiento de las sustancias nitrogenadas y el fsforo.

OBJETIVO Obtener la lecitina de la yema de huevo e hidrolizarla y detectar alguno de sus componentes

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS 2Vaso de precipitado de 100 ml 4Tubos de ensaye de 15x150 Gradilla para tubos de ensaye Mechero Agitador de vidrio Embudo Placa caliente Papel filtro Pipetas de 10 y 5 ml Probeta de100 ml 1Vaso de precipitado para Bao Mara Etanol Acetona NaOH al 10% Fenolftalena en gotero

HCl al 50% en agua TIEMPO ESTIMADO

UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1.- Aislamiento de lecitina de la yema de huevo En un vaso de precipitado colocar la mitad de una yema de huevo. Aadir 20 ml de alcohol caliente (calentado en la placa caliente) Mezclar con una varilla de vidrio. La mezcla de enfra y se filtra en un tubo de ensayo seco.

2.- Deteccin de la lecitina En un tubo de ensaye seco verter 5 ml de acetona y se le aade gota a gota 1ml del filtrado del procedimiento 1. Esperar 20 min y la aparicin de turbidez indica la precipitacin de lecitina. 3.- Reconocimiento de lecitina. En un tubo de ensaye seco pipetear 2 ml del filtrado del procedimiento 1 Aadir 1 ml de solucin saturada de cloruro de cadmio. Esperar 20 min para observar un precipitado blanco en forma de copos de un compuesto de cadmio con lecitina. 4.- Hidrlisis de la lecitina. En un tubo de ensaye seco pipetee 5 ml del filtrado del procedimiento 1 Aadir 3 ml de NaOH al 10%. Hervir la mezcla durante 5 min en bao Mara. NO AGITAR. La colina que se desprende como resultado de la hidrlisis se descompone con formacin de trimetilamina. Esta ltima posee un olor caracterstico de salmuera de arenques y se reconoce fcilmente por este indicio.

5.- Deteccin de cidos grasos. Diluir el hidrolizado alcalino del punto 4 con 2 ml de agua. Aadir 2 gotas de fenolftalena y agregar gota a gota HCl al 50% hasta que vire el indicador, separe los cidos grasos que suben a la superficie por filtracin

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones y conclusiones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: Por qu precipitan las lecitinas en presencia de acetona? Por qu el cadmio precipita las fosfatidilcolinas? Escribir la frmula de la trimetilamina de la colina y de la fosfatidilcolina. Por qu se separan los cidos grasos? En qu organelos encontramos los lpidos compuestos

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

DETECCIN DE COLESTEROL EN CEREBRO

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA VI METABOLISMO DE LOS LPIDOS VII DIGESTIN Y ABSORCIN DE GRASAS VIII BIOSNTESIS DEL ISOPRENO INTRODUCCIN El colesterol se encuentra ampliamente distribuido en todas las clulas del organismo animal, pero especialmente en las de tejido nervioso como cerebro y mdula espinal. Es el precursor de las sales biliares, el cual se produce en el hgado y se almacena en la vescula biliar. Tambin es el precursor de la vitamina D y de la pregnenolona, sustancia vital en la produccin de todas las hormonas sexuales humanas (andrgenos, estrgenos y progestgenos) y otras igualmente importantes (glucocorticoides y mineralocorticoides)

OBJETIVO Detectar la presencia de colesterol en clulas del Sistema Nervioso Central por la reaccin de SALKOVSKY.

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Sesos de res Gradilla Balanza granataria Mortero con pistilo Papel filtro Embudo Estufa a 40C Tubos de ensaye Pipetas de 5 y 2 ml

Bistur o navaja Placa de vidrio grande Abate lenguas o esptula metlica Yeso H 2 SO 4 concentrado Acido actico glacial Cloroformo

TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA Y TREINTA MINUTOS

PROCEDIMIENTO 1.- Pesar 2 g de sesos y desmenuzar lo ms posible con la navaja en el mortero. 2.- Aadir 4 g de yeso y triturar con el pistilo. 3.- La masa obtenida se aplica con el abate lenguas o esptula sobre la placa de vidrio formando una capa fina. Luego se seca en la estufa a 40C por 30 minutos o hasta secado completo (masa totalmente blanca). 4.- Una vez seca la masa se desprende de la placa con ayuda del bistur y se coloca en el mortero limpio y completamente seco para triturarla y obtener polvo. 5.- El polvo se vaca en un tubo de ensaye y se le agregan 4 ml de cloroformo. 6.- Se agita cuidadosamente por 5 min. 7.- Se filtra la mezcla anterior a otro tubo de ensaye. 8.- Del filtrado anterior se toma 1 ml y se coloca en 1 tubo de ensaye limpio y seco 9.- Al tubo anterior se agrega 1 ml de cido sulfrico concentrado deslizndolo lentamente por las paredes. Observar la aparicin de un anillo coloreado. 10.- La mezcla anterior se agita cuidadosamente. Al separarse la capa superior es roja y la inferior es roja amarillenta y con fluorescencia verde. Dichos colores se aprecian mejor con luz solar. 11.- A la capa inferior aadirle 1 ml de cido actico glacial y observar el cambio de color mientras que la fluorescencia contina. Si no se observa al sol slo se ver un color verde seco y opaco, por lo que se prefiere la luz solar.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: Cul es el fundamento de la coloracin obtenida por el colesterol? En qu paso ya se tiene separado el colesterol? Cul es la funcin del yeso Cmo puede observarse la fluorescencia?

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

10

INFLUENCIA DE LAS SALES BILIARES SOBRE LA TENSIN SUPERFICIAL DEL AGUA

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA VI METABOLISMO DE LPIDOS INTRODUCCIN Existen en la naturaleza sustancias capaces de disminuir la tensin superficial de los lquidos y se denominan sustancias tenso activas. Estas sustancias presentan molculas con carcter dipolar, es decir una parte de la molcula es hidrfila y la otra es hidrofbica. Estas molculas estn en interaccin molecular con el disolvente por su extremo hidrfilo, mientras que el otro extremo tiende a alejarse del lquido. Como resultado, las sustancias tenso activas se acumulan en la capa superficial de la disolucin. Su extremo hidrfobo estar dirigido hacia afuera de la fase. Todo esto conduce a la disminucin de la tensin superficial de la solucin. Las sustancias tenso activas son de gran importancia ayudando a mezclar mejor los lquidos que generalmente no se mezclan. Por ejemplo agua y grasa. Son algunos ejemplos de sustancias tenso activas: los jabones, los cidos grasos, aminocidos, sales biliares.

OBJETIVO Demostrar la capacidad que tienen las sales biliares para disminuir la tensin superficial del agua

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS 1 Vaso de precipitado de 400 ml 2 Tubos de ensaye de 15x125 2 varillas de vidrio Alcanfor Bilis Flor de azufre Agua destilada

TIEMPO ESTIMADO
UNA HORA

PROCEDIMIENTO 1.- Prueba del alcanfor En un vaso de precipitados colocar 250 ml de agua. Con mucho cuidado se ponen en ella varios pedacitos de alcanfor. Los pedacitos de alcanfor se mueven rpidamente en la superficie del agua. Esto se explica por el hecho de que los diferentes lados del pedazo de alcanfor se disuelven en el agua con diferente velocidad y por lo tanto alrededor del pedacito de alcanfor se crea una tensin superficial desigual, de manera que el pedacito se traslada hacia donde la tensin superficial es ms alta Introduzca la varilla en la bilis y despus en el vaso donde est el alcanfor. El movimiento de los pedacitos de alcanfor, cesa ya que la bilis disminuye, la tensin superficial. 2.- Prueba de la flor de azufre Pipetear en dos tubos de ensaye 3 o 4 ml de agua destilada, a uno de los tubos agregar de 6 a 8 gotas de bilis. Sobre la superficie de ambos tubos colocar una pequea cantidad de flor de azufre. Observar la distribucin de azufre en ambos tubos.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones y conclusiones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: Cmo se explica la diferencia entre los dos tubos con azufre? Qu es tensin superficial? Escriba los nombres y frmulas de las sales biliares. Explique la funcin de las sales biliares.

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

11

HIDRLISIS ENZIMTICA DE LOS LPIDOS

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA VI METABOLISMO DE LPIDOS VII DIGESTIN Y ABSORCIN DE GRASAS INTRODUCCIN Los triglicridos son los constituyentes principales de los aceites vegetales y las grasas animales. Los triglicridos tienen densidades ms bajas que el agua (flotan sobre el agua). Un triglicrido, tambin llamado triacilglicrido, es un compuesto qumico que consiste de una molcula de glicerol y tres cidos grasos. Las lipasas y las esterasas catalizan la hidrlisis de los enlaces ster que se encuentran en gran nmero de los lpidos saponificables. Estas enzimas se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza y son especialmente importantes en el tracto gastrointestinal donde funcionan en la digestin y absorcin de grasas. Debido a que las grasas no son solubles en agua, las enzimas deben actuar en la interface lpido-agua, lo cual trae como consecuencia una disminucin de la actividad enzimtica. Por lo tanto, es necesario el empleo de agentes emulsificantes tales como las sales biliares que producen a menudo una estimulacin marcada de la hidrlisis enzimtica de los lpidos.

OBJETIVO Demostrar la accin de la lipasa pancretica en presencia y ausencia de la bilis

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS 8 Matraces erlenmeyer de 125 ml Bureta Pinzas para bureta Pipetas de 1, 5 y 10 ml Soporte universal

Bao Mara a 37C Termmetro Pancreatina al 1% en agua Hidrxido de potasio (KOH) 0.05 N Etanol al 95% Fenolftalena en gotero Leche homogeneizada Bilis 5%

TIEMPO ESTIMADO Una hora treinta minutos

PROCEDIMIENTO
Preparar una serie de 8 matraces de la siguiente manera NMERO DE MATRAZ T1 1 2 3 REACTIVOS (ml) 5 5 5 5 LECHE HOMOGENEIZADA EXTRACTO NEUTRO DE 0 1.5 1.5 1.5 PANCREATINA AL 1% EXTRACTO DE PANCREATINA 1.5 0 0 0 CALIENTE A EBULLICIN POR 3' BILIS TIEMPO DE INCUBACIN A 37C 0 0 45' 15' 0 0 30' 45'

T2 5 0

4 5

5 5

6 5

1.5 1.5 1.5 0 0

1.5 0

1 1 1 1 45' 15' 30' 45'

Despus de que cada matraz ha cumplido su tiempo de incubacin, retirarlos del bao, adicionar 12.5 ml de alcohol etlico al 95% y 2 gotas de fenolftalena y titular con solucin de KOH 0.05N. Agitar el matraz durante la titulacin tan rigurosamente como sea posible, ya que la protena puede enmascarar los cidos grasos. Titular sobre fondo blanco, tan pronto como sea posible, debido a que la digestin por la lipasa contina durante la titulacin. RESULTADOS: 1.- Cuando se tengan los datos.- Restar del gasto de KOH de cada uno de los matraces el gasto de KOH del testigo 2.- Hacer dos grficas

Gasto de KOH Corregido 1, 2, 3 Tiempo de hidrlisis Gasto de KOH Corregido 4, 5, 6 Tiempo de hidrlisis

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones y conclusiones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario: Cul es la interpretacin de las grficas obtenidas Cul es el objeto de agregar bilis en el experimento De la clasificacin de los lpidos Qu significa cidos grasos esenciales, y cules son los importantes en los mamferos? Cul es la importancia clnica de la lipasa en un diagnstico? Cul es la composicin y el funcionamiento del tejido adiposo

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

Prctica No.

12

PRUEBAS BIOQUMICAS DEMOSTRATIVAS DE UTILIZACIN DE SUSTRATOS

TEMAS O SUBTEMAS A QUE SE REFIERE LA PRCTICA INTRODUCCIN Todos los microorganismos necesitan una fuente de C,H,O,N y S para poder crecer y multiplicarse, y por medio de sustratos y las enzimas que actan sobre ellos se han podido demostrar muchas rutas metablicas . . OBJETIVO Demostrar: Por medio de microorganismos La fermentacin de carbohidratos como glucosa y lactosa. Descarboxilacin de aminocidos Utilizacin de citrato como nica fuente de carbono

MATERIAL, EQUIPO, INSTRUMENTOS, SUSTANCIAS Los siguientes agares en tubo de ensaye de 13x100 mm Agar TSI Agar LIA Agar Citrato de Simmons Medio MIO Asas de inoculacin en punta Microorganismos: Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Klebsiella sp. TIEMPO ESTIMADO UNA HORA 30 MINUTOS

Nota: Atender las indicaciones del maestro para sembrar los tubos PROCEDIMIENTO MEDIO MOVILIDAD INDOL ORNITINA (MIO): Inocular con asa en punta hasta el fondo. Incubar a 37C por 24 h. Es un medio semislido, que contiene ornitina, y un indicador de pH, y se usa para

determinar la movilidad de la bacteria, su capacidad de descarboxilar la ornitina, y la de producir indol.

Movilidad MOVILIDAD POSITIVA.- Medio turbio, crecimiento en todo el medio. MOVILIDAD NEGATIVA.- El crecimiento, es slo a lo largo de la picadura. Descarboxilacin de la ornitina, se efecta en anaerobiosis, y por eso la prueba se lee en el fondo del tubo. ORNITINA POSITIVA.- El fondo del tubo presenta un color prpura, morado. ORNITINA NEGATIVA.- El fondo del tubo se torna amarillo. Indol Agregar 2-3, gotas de reactivo de Ehrlich de Kovac, al medio. INDOL POSITIVO.- Formacin de un anillo color rojo en la superficie. INDOL NEGATIVO.- Formacin de un anillo color amarillo en la superficie.

CITRATO DE SIMMONS: Es un medio inclinado. Inocular por estra en la superficie. Incubar a 37C por 24 h POSITIVA.- El medio se torna color azul intenso. NEGATIVA.- No hay crecimiento, el medio permanece verde.

DESCARBOXILACIN DE LISINA Agar LIA contiene Lisina y/o Base de descarboxilasa con el aminocido correspondiente. LIA es un medio inclinado. Inocular por picadura y estra en la superficie. POSITIVA.- Fondo del tubo color prpura. NEGATIVA.- Fondo del tubo color amarillo.

AGAR TSI Determina la fermentacin de glucosa, sacarosa y lactosa; la produccin de gas a partir de glucosa, y produccin de ac.sulfhdrico Medio inclinado. Inocular por picadura y estra en la superficie. Incubar a 37 por 24 h. La fermentacin de la glucosa se efecta en anaerobiosis, por lo cual, la prueba se lee, en el fondo del tubo. GLUCOSA POSITIVA.- Fondo amarillo. GLUCOSA NEGATIVA.- Fondo sin cambio.

LACTOSA POSITIVA.- Todo el medio amarillo. LACTOSA NEGATIVA.- Pico rojo. PRODUCCION DE GAS DE GLUCOSA POSITIVO.- Burbujas en el medio. PRODUCCION DE ACIDO SULFHIDRICO POSITIVO.- Precipitado negro en el fondo, en el sitio de la picadura.

PRODUCTOS DE APRENDIZAJE Elaborar reporte que debe constar de: Nmero y nombre de la prctica. Hacer investigacin bibliogrfica para profundizar la introduccin. Objetivos alcanzados. Observaciones y conclusiones. Reporte de resultados. Bibliografa consultada. Cuestionario:

CRITERIOS DE EVALUACIN Investigacin bibliogrfica 30% Objetivos alcanzados 30% Observaciones, Reporte de Resultados y Cuestionario 20% Bibliografa consultada para su investigacin 10% BIBLIOGRAFIA: CONSULTAR LA PROPUESTA AL FINAL DEL MANUAL DE PRCTICAS

BIBLIOGRAFIA 1.- BIOQUMICA DE HARPER Murray Robert K. Y col. Ed. El Manual Moderno S.A. de C.V. 18 Ed. Mxico, 2001 2.- CONCEPTOS DE BIOQUMICA. Boyer Rodney International Thomson Editores Mxico, 2000. 3.- BIOQUMICA.

Lehninger A. L. Editora Interamericana Omega, Segunda edicin, Reimpresin 1993 Barcelona, Espaa.