PARASITOLOGA

Muestra: a) Materia fecal- Escobillado anal Ver indicaciones para la toma de muestra de parasitologico nios y adultos y test de Graham b) Orina c) Sangre d) Raspados de piel e) Lquido cefalorraqudeo f) Especmenes respiratorios g) Otros (lentes de contacto, estuches, soluciones de lavado) Mtodo: Observacin macro y microscpica de la muestra previo enriquecimiento: en fresco y utilizando tinciones. Utilidad clnica: El diagnstico y el monitoreo del tratamiento de las enfermedades producidas por parsitos se establece por el hallazgo de huevos, quistes, larvas o parsitos adultos y/o por la respuesta inmune a ellos.

El tipo de muestra recogida depender de la especie y forma del parsito buscado. En infecciones intestinales por helmintos debern buscarse los huevos en la materia fecal. Las infecciones por protozoos se diagnostican hallando trofozotos o quistes en las heces. Hay helmintos que eliminan huevos en forma intermitente. Debido a esto se realiza una recoleccin seriada de la muestra. A veces algunos protozoarios pueden pasar inadvertidos si no se realiza una tincin permanente.

Parsitos hallados en sangre: Plasmodium spp: Este gnero causa Malaria (Paludismo). Est formado por 4 especies que infectan al hombre: P. vivax, P. falciparum; P.ovale y P. malariae. Ingresan en el hombre por la picadura del mosquito Anofeles hembra. Debido al aumento de los viajes hacia distintas regiones del mundo, debe tenerse en cuenta su investigacin en pacientes que presenten fiebre de orgen desconocido y hayan viajado recientemente. Debe buscarse en drogadictos y transfundidos. Diagnstico: obtener muestras de sangre tomadas cada 6-8 horas durante tres das, para realizar el examen directo, previa coloracin con Giemsa. Tambin hay pruebas serolgicas que se utilizan en estudios epidemiolgicos: IFI y Hemaglutinacin indirecta. Actualmente hay tcnicas de ELISA, hibridizacin y amplificacin del DNA utilizando la tcnica de PCR. Datos de laboratorio: generalmente hay una anemia debida a la hemlisis, P. falciparum causa disminucin importante del hematocrito, la hemoglobina y la haptoglobina, aumentado la LDH y los reticulocitos. Frecuentemente hay trombocitopenia. Pueden ocurrir tambin trastornos renales con hemoglobinuria y proteinuria. Toxoplasma gondii: La toxoplasmosis se contrae comiendo carne mal cocida o por contacto con elementos contaminados con deyecciones de gatos. Puede atravesar la barrera placentaria produciendo infecciones congnitas graves, por eso es importante el control en la mujer embarazada. La toxoplasmosis congnita es causa de ceguera, retraso psicomotor y trastornos convulsivos. Los pacientes inmunosuprimidos pueden tener Toxoplasmosis grave, la cual se presenta con manifestaciones del sistema nervioso central, miocarditis, o neumonitis. El diagnstico: Se realiza generalmente por reacciones serolgicas. Ver Toxoplasma Anticuerpos y Antigeno. Trypanosoma cruzi: Este flagelado causa la Tripanosomiasis Americana o Enfermedad de Chagas. Es transmitida por un vectorTriatoma infestan (vinchuca), en cuyas deyecciones se encuentra el parsito que penetra por inoculacin en el hombre (al rascarse la piel). El Chagas puede ser agudo o crnico. El primero es ms frecuente en los recin nacidos, que adquieren la infeccin intrauterinamente. Tambin se transmite esta enfermedad por medio de transfusiones de sangre, a travs de accidentes de laboratorio, por va congnita producindose una alta mortalidad fetal y severos trastornos en los bebs que sobreviven. El diagnstico en la etapa aguda se puede realizar por la demostracin del parsito en muestras de sangre observando la movilidad de los mismos o tambin visualizndolo en frotis teidos con Giemsa, utilizando

mtodos directos como gota gruesa, gota fresca, microhematocrito o mtodo de Strout. Tambin se puede determinar Ig M en suero.

El estudio serolgico se usa principalmente en la etapa crnica. Trypanosoma brucei: Es causante de la Tripanosomiasis Africana que puede afectar tanto a los animales como al hombre. Es transmitida por un vector la mosca tse-tse. Una de las enfermedades es la del sueo que afecta al sistema nervioso central. El diagnstico: se realiza buscando los parsitos en las muestras de sangre. Tambin se detecta un aumento de IgM en suero y en LCR donde se observa pleocitosis. Leishmania donovani y L. chagasi: Causan la Leishmaniasis visceral o Kala-azar. Puede afectar el sistema reticuloendotelial del bazo, hgado, mdula sea y ganglios linfticos. Clnicamente la Leishmaniasis se divide en sndromes viscerales y cutneos. La Leishmaniasis visceral es una infeccin oportunista en pacientes HIV positivos, en trasplantados y en pacientes con compromiso de la inmunidad mediada por clulas. En Latinoamrica la L. chagasi produce enfermedad principalmente en los nios. Diagnstico: se realiza por biopsia de los tejidos afectados, en los cuales se visualiza el flagelado. La muestra debe tomarse del borde de la lesin porque all se encuentra el parsito. Se realizan coloraciones, inmunomarcacin y tcnica de PCR. Otras muestras que se utilizan son: la aspiracin de mdula sea (la positividad 54 al 83%), la puncin esplnica (96 a 98% positividad). En casos de adenopatas la aspiracin o la biopsia del ganglio linftico son tiles. Tambin puede identificarse al parsito en frotis de la capa leucocitaria teidos con Wright-Giemsa o en biopsia de diferentes rganos, siendo esto til en pacientes HIV positivos en los cuales se ha hallado el parsito en diferentes sitios como: lquido del lavado broncoalveolar, derrames pleurales, biopsias de orofaringe, estmago o intestino. Tambin puede cultivarse mdula sea, hgado, bazo, ganglios linfticos y sangre. L.braziliensis: es productora de la Leishmaniasis mucocutnea. Diagnstico se realiza mediante el hallazgo del parsito en cortes histolgicos o en biopsias obtenidas del borde de la lesin. En estudios epidemiolgicos o algunas veces para colaborar con el diagnstico se utiliza serologa: ELISA aglutinacin directa y anlisis de inmunoblot. Puede haber reacciones cruzadas en pacientes con Chagas, paludismo, esquistosomiasis, leishmaniasis cutnea y lepra. Amebas del sistema nervioso central Naegleria fowleri: Es la causa de la meningoencefalitis amebiana primaria. Afecta a nios y a adultos jvenes que han estado nadando en el agua de ros, lagos o en piletas donde la cloracin del agua no es adecuada. La puerta de entrada es por va nasal, pasando luego al encfalo. El diagnstico se realiza en el LCR en el cual se hallan: trofozotos (no se hallan quistes en los tejidos), pleocitosis, aumento de protenas y disminucin de la glucosa. Acantamoeba spp: Se encuentra en el suelo, en el agua y en el aire. Causa la encefalitis amebiana granulomatosa que afecta con ms frecuencia a los pacientes inmunosuprimidos (SIDA, enfermedad heptica, diabetes mellitus, transplantados renales). Tambin pueden producir infecciones oculares y pulmonares. Ver bioqumica oftalmolgica En usuarios de lentes de contacto blandas y con pequeos traumatismos puede producir queratitis subaguda o crnica. Contamina soluciones salinas de lavado y los estuches de las lentes de contacto.

El diagnstico se realiza buscando el parsito en los diferentes especmenes. En el LCR se pueden hallar quistes y trofozotos. Protozoos intestinales: AMEBAS Entamoeba histolytica Entamoeba coli Endolimax nana Iodamoeba butsihilii Amebas: Los tres gneros de amebas intestinales son: Entamoeba, Iodamoeba y Endolimax. Dentro del gnero Entamoeba se encuentran: E. histolytica (agente etiolgico de la amebiasis), E. dispar, E. coli, E. hartmanni, E. polencki (personas que estn en contacto con ganado porcino), E. gingivalis (en la boca de personas con inadecuada higiene bucal). Los quistes y trofozotos se eliminan por la materia fecal. E. histolytica: Es causante de disentera amebiana, colitis amebiana y abscesos hepticos. Se puede presentar con diarrea sanguinolenta aunque tambin puede haber una infeccin asintomtica. Es de distribucin cosmopolita y se encuentra principalmente en regiones tropicales y subtropicales, en aguas contaminadas y donde hay condiciones sanitarias pobres. Puede hallarse en los viajeros a pases poco desarrollados, en homosexuales varones y en pacientes con inmunocompromiso. El diagnstico se realiza hallando los quistes, los trofozotos (que muchas veces pueden contener eritrocitos) en muestra seriada de heces. En el aspirado de abscesos hepticos se pueden encontrar trofozotos. Se puede recolectar como muestra aspirado de lquido heptico, biopsia o material de proctoscopa. El EIA para la demostracin directa de antgenos de E. histolytica en materia fecal tiene una sensibilidad del 82% y una especificidad del 98%. Tambin se pueden realizar pruebas serolgicas. Los tests serolgicos se utilizan en laboratorios especializados de parasitologa. Debe obtenerse suero en la etapa aguda y convalesciente. Se utiliza para los pacientes que presentan amebiasis sistmica, el 99% con abscesos hepticos amebianos presentan anticuerpos. El test es poco sensible para detectar portadores asintomticos. Los ttulos persisten varios aos y pueden ser utilizados en reas endmicas para el seguimiento de la enfermedad. Se utilizan diferentes tcnicas: inhibicin de la hemoaglutinacin IHA, EIA, IFA. FLAGELADOS Giardia lamblia Dientamoeba fragilis Chilomastix mesnili CILIADOS Balantidium coli COCCIDIOS Isospora belli Cryptosporidium spp

Blastocystis hominis: Si bien su taxonoma es an discutida se lo clasifica dentro del grupo de los protozoarios. Puede causar cuadros de diarrea crnica, siendo su va de infeccin probablemente la va fecaloral. Muestra: La bsqueda de los quistes se realiza en materia fecal seriada. Flagelados: Dientamoeba fragilis: Se sita en colon, no forma quistes y es causante de diarreas. La cantidad de parsitos eliminado vara de un da a otro.

Diagnstico: En muestras frescas de materia fecal se realizan tinciones para visualizar los trofozotos. Giardia lamblia (actualmente Giardia intestinalis): Es causante de infecciones en la poblacin infantil, especialmente en guarderas, jardines de infantes, salas de recin nacidos. Tambin puede causar brotes importantes debido a la contaminacin del agua, dado que el clorado habitual no los mata. Puede transmitirse por alimentos contaminados y por va sexual. Suele producir un sndrome de malabsorcin. En la materia fecal el nmero de leucocitos es normal y generalmente no hay eosinofilia. El diagnstico de G. lamblia deber realizarse en todo paciente con diarrea prolongada especialmente asociada con malabsorcin o con prdida de peso, nios que van a guardera, viaje a reas endmicas y estilo de vida homosexual. Muestra: debido a que la eliminacin de parsitos no es constante se sugiere tomar muestra seriada de materia fecal. Algunas veces es necesario recurrir al sondeo duodenal, ya que el examen de las heces puede resultar negativo. El hallazgo de trofozotos o quistes en materia fecal constituye el diagnstico de giardiasis. Los tests para deteccin de antgenos de G. lamblia son: inmunofluorescencia (IFA) o ELISA. Tienen una sensibilidad del 85 al 98% y una especificidad del 90 al 100%. Ciliados: Balantidium coli: Las personas adquieren la infeccin ingiriendo carne de cerdo. La infeccin intestinal puede llegar a ser muy grave con ulceraciones del colon. Puede hallarse en las heces trofozotos y la forma enquistada. Coccidios: Los ms importantes son los gneros: Toxoplasma, Isospora, Sarcocystis, Cryptosporidium y Cyclospora Isospora belli: Es causante de diarreas en el inmunocompetente. En los individuos inmunocomprometidos se produce una diarrea crnica y recurrente, especialmente en los pacientes con HIV en los cuales se disemina hacia ndulos linfticos, hgado y bazo. Produce a veces cuadros de malabsorcin. El diagnstico se realiza identificando los quistes en materia fecal o en biopsia, realizando un examen en fresco o con coloraciones cido-resistentes.

Sarcocystis: La infeccin se adquiere al comer carne mal cocida o cruda. El diagnstico se realiza encontrando los oocitos esporulados en la materia fecal. Cyclospora cayetanensis: Es causante de diarrea en pacientes con inmunocompromiso. Diagnstico: se realiza encontrando los quistes del parsito en las heces con coloraciones cido-resistentes. Cryptosporidium parvum: Es causante de diarrea acuosa en pacientes inmunocomprometidos que persiste durante meses, presentando un cuadro de mal estado general. Afecta principalmente el intestino delgado y el colon. Ocasionalmente se disemina al tracto respiratorio. La criptosporidiosis extraintestinal puede verse en los pacientes con severo inmunocompromiso. En la criptosporidiosis diseminada se encuentra el microorganismo en especmenes pulmonares. En las personas inmunocompetentes el cuadro se autolimita. Cryptosporidium spp ha sido encontrado recientemente como causa de diarreas en nios que concurren a piletas de natacin, ya que el clorado del agua no lo mata.

El diagnstico se basa en hallar los organismos en muestra seriada de heces, en biopsias de intestino delgado o colon, en aspirados duodenales. Se realiza una coloracin cido-resistente (Kinyoun, Ziehl Neelsen modificado) o inmunofluorescencia directa con anticuerpos monoclonales. Actualmente existen tests de ELISA y equipos de fluorescencia con anticuerpos monoclonales o tcnicas combinadas de anticuerpos fluorescentes para la deteccin de Giardia y Cryptosporidium.

Cryptosporidium spp. en muestras de heces Mycrosporidias : Su forma de transmisin es aparentemente a travs de la ingestin de esporos. Pertenecen a este grupo de protozoarios el Enterocytozoon bieneusi (80-90% de los casos) y E. intestinalis. Causan infeccin intestinal ms frecuentemente en pacientes con SIDA, pero se han descripto casos en personas con otro tipo de inmunocompromiso. En adultos y nios inmunocompetentes ocasiona una diarrea autolimitada. El cuadro clnico se caracteriza por diarreas acuosas, acompaadas de dolor abdominal, nuseas, vmitos y prdida de peso. El diagnstico se realiza encontrando la microsporidia en materia fecal preferentemente seriada, aspirado duodenal o en biopsia de intestino delgado. En enfermedad diseminada se lo halla en orina, LCR, lavado bronqueoalveolar (BAL), esputo, secrecin conjuntival y nasal. Tambin se pueden aislar en el rbol biliar, tracto respiratorio, en msculo y en infecciones de la crnea. Se realizan coloraciones para su visualizacin (Tricrmicas modificada por Weber y col, con calco flor, Ziehl Neelsen).

Helmintos intestinales: 1. Nematodes (gusanos cilndricos) 2. Platelmintos (gusanos planos): Estos se dividen en Trematodes y Cestodes. Es frecuente la presencia de eosinofilia cuando el parsito entra en contacto con los tejidos del husped especialmente al principio de la infestacin. Es necesario para poder diagnosticar una parasitosis saber con certeza el ciclo vital, los tejidos que puedan estar involucrados, la distribucin geogrfica del parsito. El diagnstico definitivo se realiza por el hallazgo de una fase del parsito (huevo, larva- embrin o adulto). Algunas veces slo puede obtenerse el diagnstico definitivo por pruebas serolgicas o por los datos clnicos del paciente. NEMATODES TREMATODES Enterobius vermicularis Trichuris trichura Ascaris lumbricoides Ancylostoma duodenale Necator americanus Strongyloides stercoralis Trichostrongylus spp 1. Nematodes: Son los helmintos que ms comnmente parasitan al hombre. Se diagnostican por el hallazgo de huevos, larvas o gusanos adultos en la materia fecal. Fasciola spp Schistosoma spp PLATELMINTOS CESTODES Taenia saginata Taenia solium Diphylidium caninum Hymenolepis nana Hymenolepis diminuta Diphylobothrium spp

Enterobius vermicularis: llamado habitualmente Oxyurus es el parsito ms comnmente hallado en los nios. La infestacin se produce por la contaminacin fecal-oral, ingestin de alimentos contaminados. La hembra grvida emigra del ciego a la mucosa perianal, donde deposita los huevos durante la noche. Pueden hallarse reacciones granulomatosas en lugares infrecuentes debido a la migracin de las hembras, encontrndose huevos o parsitos muertos en tero, trompas de Falopio, cavidad peritoneal, en vagina o en orina. El diagnstico se realiza con el test de Graham por el hallazgo de huevos en la regin perianal o vulvar.

Trichuris trichiura: Se transmite por la tierra consumiendo verduras de hoja mal lavadas, alimentos contaminados o debido a una inadecuada higiene de manos. El elemento infectante es el huevo embrionado. Una vez ingerido, en el intestino se liberan las larvas y se transforman en gusanos adultos, de cuya cantidad depende las manifestaciones clnicas de la enfermedad. Cuando el nmero de gusanos es grande (300) puede haber diarrea y llegar hasta parecer una disentera con moco, pus y sangre en la materia fecal. En los nios puede producirse prolapso rectal. El diagnstico se establece mediante el hallazgo de huevos en las heces. La recoleccin se hace en forma seriada. Ascaris lumbricoides: Se presenta especialmente en lugares donde las condiciones sanitarias son inapropiadas. Afecta principalmente a los nios, en los cuales puede producir obstruccin intestinal. Se transmite por la ingesta de verduras y alimentos contaminados con tierra. Los parsitos adultos (macho y hembra) viven en el duodeno y en el yeyuno proximal. Los parsitos pueden migrar al hgado y producir abscesos y obstrucciones. La migracin hacia el apndice puede dar apendicitis. El diagnstico se realiza encontrando los huevos en las heces o por el gusano adulto, los cuales pueden salir con las deposiciones o ser vomitados. Foto 725 Uncinarias: Las dos especies causantes de enfermedad en el hombre son Ancylostoma duodenale y Necator americanus; Las larvas filariformes pueden penetrar a travs de la piel desde el suelo. Las manifestaciones clnicas son variadas: escozor y enrojecimiento de la piel, sntomas gastrointestinales como diarrea. Se produce una anemia debido a que el parsito produce laceracin de la mucosa intestinal por lo tanto hay una prdida de sangre constante. El diagnstico: se produce por el hallazgo de huevos en las heces. En muestras conservadas que no se miran rpidamente pueden encontrarse larvas libres. Strongyloides stercolaris: Las larvas infestivas penetran por la piel. Se ubican en la mucosa del duodeno y yeyuno. Las manifestaciones clnicas de esta parasitosis son variadas produciendo prurito en la piel y eosinofilia. En los inmunosuprimidos la autoinfeccin interna se hace muy intensa (hiperinfeccin) siendo a menudo fatal. Diagnstico: En la materia fecal se encuentran larvas y no huevos.

2. CESTODES: Diphyllobotrium latum (tenia de los peces): El hombre contrae la infeccin a travs de la ingestin de pescado de agua dulce crudo, consumiendo peces secos o ahumados. El auge de consumo de pescado crudo natural (ceviche, sushi) aument la infeccin por este parsito. En un mismo paciente pueden coexistir mltiples tenias. Generalmente la infeccin es asintomtica, a veces se presentan sntomas abdominales, necesidad de ingerir sal, diarrea, o infeccin crnica que puede producir anemia perniciosa por deficiencia de vitamina B12 El diagnstico se realiza hallando los huevos o los progltides en la materia fecal. Hymenolepis nana (tenia enana): La infeccin se produce por la ingestin de alimentos contaminados con materia fecal o fomites. Puede transmitirse de una persona a otra. Las condiciones sanitarias inadecuadas favorecen la infeccin por la va fecal-oral. En los nios es comn la infeccin severa acompaada de clicos abdominales, anorexia, vrtigo y diarrea. El diagnstico se realiza encontrando los huevos del parsito en la materia fecal.

Taenia saginata (tenia de la vaca): Se contrae la infeccin comiendo carne de ganado vacuno mal cocida o cruda que contenga quistes del parsito. El diagnstico se hace por la aparicin del parsito o los progltides que pasan a las heces o migran activamente hacia el ano. Tambin pueden hallarse los huevos. Una de las tcnicas para la recoleccin de la muestra es el escobillado anal o test de Graham. Taenia solium: El hombre puede ingerir huevos de T. solium y desarrollar una infeccin tisular con quistes parasitarios que se conoce como cisticercosis. Las personas que consumen carne de cerdo mal cocida o cruda que contenga quistes larvados infecciosos adquieren la T. soliumen forma adulta. La infeccin es generalmente asintomtica, puede haber fatiga, decaimiento y malestar intestinal. El diagnstico se realiza por un examen parasitolgico de las heces, encontrndose los huevos del parsito. Fasciola heptica: Es una zoonosis que se encuentra en las regiones donde se cra el ganado ovino Los parsitos depositan los huevos en el rbol biliar. Los huevos pasan al intestino, luego se eliminan con las heces y finalizan su desarrollo en el agua. La infeccin se contrae por la ingesta de vegetales acuticos (berro). En la fase inicial de la infeccin hay hepatomegalia, eosinofilia, fiebre. En la fase tarda puede haber colitis recurrente, obstruccin biliar. El diagnstico de laboratorio se basa en el hallazgo de huevos en la materia fecal o en la bilis.

Bibliografa: 1- Oscar Csar Mndez. Lecciones prcticas sobre enteroparasitosis humanas. Editado por la Federacin Bioqumica de la Provincia de Buenos Aires. Acta Bioqumica Clnica Latinoamericana, Ao 1998, suplemento 1. 2- Microbiologa Clnica. Diagnstico parasitolgico. Asoaciacin Argentina de Microbiologa. Colegio de Bioqumicos de la Provincia de Entre Ros. Facultad de Bioqumica y Ciencias Biolgicas Universidad Nacional del Litoral. 3- Mandell, Douglas, Bennet. Editorial Panamericana. Enfermedades Infecciones 4 Edicin, 1997. 4- Tietz N. W. Clinical Guide to Laboratory test, edited by W.B. Saunders Company, third edition, United States of America ,1995. 5- Lehmann C. A. Saunders Manual of Clinical Laboratory Science, W.B.Saunders Company, Philadelphia, first edition 1998. 6- Isenberg Henry. Essential Procedures for Clinical Microbiology. American Society for Microbiology.1998