MINISTRIO DA EDUCAO

UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAU UNIVERSIDADE ABERTA DO BRASIL/CAPES CENTRO DE EDUCAO ABERTA E A DISTNCIA COORDENAO DO CURSO DE LICENCIATURA EM QUMICA NA MODALIDADE A DISTNCIA

DISCIPLINA: QUMICA ORGNICA III PROFESSORA COORDENADORA: DRA. MNICA REGINA SILVA DE ARAJO PROFESSOR(A) TUTOR(A): MARIA DO CARMO GOMES LUSTOSA ACADMICO: SEBASTIO MAIA DA SILVA MATRICULA: 10L10181 ATIVIDADE II

1) Defina os seguintes termos em cromatografia: a) suporte O suporte cromatogrfico pode ser apresentado como camada plana, para a cromatografia de camada plana e enchimento de uma coluna, na cromatografia em coluna. b) fase estacionria Pode ser um slido (adsorvente na cromatografia de adsoro, permutador de ions na cromatografia de permuta inica) ou uma pelcula lquida depositada entre as partculas deste slido (cromatografia de partio). c) fase mvel ou eluente Contm as substncias que se pretendem investigar, deve ser um lquido no miscvel com a fase estacionria, em outras palavras, o material que se desloca pela fase estacionria, arrastando os componentes da amostra. E com isso, aps transitar pela fase estacionria, por um percurso de distncia adequadamente escolhida, os componentes da amostra se separam. d) revelador ou agente criognico So as substancias responsveis pelo aparecimento e/ou modificao de cor quando interagem com alguns grupos funcionais de determinadas espcies qumica; com intuito de facilitar a sua identificao e posterior classificao e so bastante usados em CCD. e) frente da fase mvel o material que se desloca pela fase estacionria, arrastando os componentes da mistura. como se fosse a frente em si do eluente, para depois fizemos a diferena da distncia percorrida. f) cmara ou cuba cromatogrfica

Recipiente de vidro com tampa fechada hermeticamente, no deixando escapar vapores da FM (lquido ou mistura que fluem atravs do papel arrastando os solutos) e onde se coloca o papel cromatogrfico. g) cromatograma o registro (visualizao) grfico de uma anlise por um mtodo cromatogrfico. Neste registro grfico possvel visualizar a separao dos componentes da mistura, e pelos tempos de reteno e pelas reas dos picos podemos determinar a concentrao de cada substncia na mistura termos sua formula molecular. h) saturao da cuba Distribuio uniforme no interior da cuba da fase vapor da FM (lquido ou mistura que fluem atravs do papel arrastando os solutos), depois de alcanado o equilbrio. i) fase normal Basicamente a fase estacionria mais polar que a fase mvel. j) fase reversa Como o prprio nome sugere, na fase reversa a fase mvel mais polar. l) eluio isocrtica Neste tipo de eluio, a composio da fase mvel permanece inalterada durante toda a anlise. A polaridade da fase mvel no se altera ao longo do tempo. m) gradiente de eluio Neste tipo a composio da fase mvel se altera ao longo do tempo. No caso da fase reversa, a polaridade da fase mvel diminui ao longo do tempo, para aumentar a afinidade entre as fases estacionria e mvel. n) fator de reteno a razo entre a distncia percorrida pela substncia em questo e a distncia percorrida pela fase mvel (solvente). Comparaes do valor de Rf da amostra com o de um padro um mtodo qualitativo usado na identificao de um composto, sendo muito importante em CCD. 2) Qual o tipo de mecanismo de separao envolvido na cromatografia em camada delgada e em coluna de gel de slica? Explique o mecanismo de separao da cromatografia por excluso, de troca inica e por bioafinidade. Em CDD tem-se o Mecanismo de Cromatografia Planar. Neste mecanismo a fase estacionria suportada sobre uma placa plana ou nos poros de um papel. Nesse caso, a fase mvel desloca-se atravs da fase estacionria por ao da capilaridade ou sob a influncia da gravidade. til em separao de compostos polares. Em coluna de gel slica tem-se o Mecanismo de Cromatografia em Coluna. uma tcnica de partio entre duas fases, slida e lquida, baseada na capacidade de

adsoro e solubilidade. O slido deve ser um material insolvel na fase lquida associada, sendo que os mais utilizados so a slica gel (SiO2) e alumina (Al2O3), geralmente na forma de p. A cromatografia de excluso molecular separa os componentes segundo o tamanho efetivo (raio hidrodinmico) das molculas, isto , molculas grandes no penetram no interior do suporte (partculas porosas de gel) e movem-se mais rapidamente ao longo da coluna de onde emergem primeiro, enquanto as molculas pequenas apresentam velocidade de deslocamento retardada porque penetram no gel, portanto, emergem da coluna mais tardiamente. Na cromatografia de troca inica a separao ocorre devido a diferentes tendncias dos componentes inicos ou ionizados permutarem com ons da fase estacionria, que, assim, so deslocados para a fase mvel. A afinidade entre os ons da fase mvel e o suporte pode ser controlada por alterao do pH e da fora inica do eluente. Na cromatografia de bioafinidade ocorre uma ligao molecular especfica e reversvel entre o soluto e um ligante imobilizado na fase estacionria. Utiliza-se esta tcnica especificamente para separar produtos biolgicos como, por exemplo, ligaes enzimas-substratos e anticorpos-substratos. 3) Ordene as seguintes substncias conforme a atividade cromatogrfica em gel de slica: R-CH=CH-R; R-CO2H; R-NH2; R-OH; R-SH; R-COR, R-CO2R; R-CHO; R-OCH3 R-CO2H > R-CO2R > R-OH > R-NH2 > R-CHO > R-OCH3 > R-COR > R-SH > RCH=CH-R 4) O que CLAE? Esquematize um cromatgrafo para CLAE. Comente sobre algumas aplicaes da CLAE. CLAE Cromatografia Lquida de Alta Eficincia. uma tcnica analtica usada para separar e quantificar componentes numa mistura lquida. A utilizao de suportes com partculas diminutas so os responsveis pela alta eficincia desse mtodo de cromatografia. A fase mvel (lquida) movimenta-se continuamente atravs da coluna contendo a fase estacionria (slido). O soluto interage com as fases estacionria e mvel por adsoro, partio, excluso molecular, troca inica. As separaes em CLAE podem se dar por adsoro (separao slido-lquido), partio (separao lquido- lquido) ou ambos. O detector mais utilizado para separaes por CLAE

 o detector de ultravioleta (Absoro da luz na faixa UV visvel), sendo tambm empregados detectores de fluorescncia, de indce de refrao, e eletroqumicos, entre outros. ESQUEMA BSICO PARA A CLAE:

5) Uma amostra de leo essencial foi analisada por CG/EM e o cromatograma de ons totais apresentou 10 picos referentes a 6 monoterpenos e 4 sesquitepenos. Os picos com maior tempo de reteno eram referentes aos sesquiterpenos, entre eles dois ficaram com tempo de reteno muito prximos. A programao de T temperatura usada foi a seguinte: Temp. da coluna (DB-1): 750C (8 min); 60C min-1; 2000C (4 min). A temperatura do injetor foi de 1500C e a temperatura da interface: 2800C. a) O que significa a sigla CG/EM? Cromatografia gasosa-espectroscopia de massa b) Por que os leos essenciais podem ser analisados por cromatografia gasosa? porque na CG/EM, alm da separao dos componentes (identificao dos compostos individuais atravs do tempo de reteno relativo da amostra), obtm-se espectros de massas da cada pico, que tambm podem ser comparados com espectros de massas de padres ou com espectros constantes na literatura ou na biblioteca do equipamento, indicando a massa molecular e o padro de fragmentao. c) Por que os monoterpenos eluram primeiro na coluna? porque todos os monoterpenos apresentam o mximo de absorbncia a 200nm. d) Qual o tempo de durao da anlise?

6) As seguintes substncias foram isoladas do extrato diclorometnico de uma alga denominada Lyngbya majuscula atravs de cromatografia em coluna de Sephadex LH-

20-(Cromatografia por excluso), usando como elunete CH2Cl2-CH3COCH3 como eluente. Qual dever ser a ordem de eluio das substncias da coluna?

Como as Pontes de hidrognio (fazem-se ligaes com O, F e N) intramoleculares aumentam as interaes com o composto dado como eluente (intermolecular), temos que a ordem de eluio do maior para o menor : I>III>II. 7) Considere as substncias relacionadas abaixo, as quais so usadas como solventes em separaes de compostos orgnicos e/ou realizaes de medidas: clorofrmio, diclorometano, tetracloreto de carbono, ter etlico, acetato de etila, hexano, butanol, acetona, metanol e etanol. a) Escreva a estrutura destas substncias

clorofrmio

diclorometano

tetracloreto de carbono

ter etlico

acetato de etila

hexano

butanol

etanol

metanol

acetona

b) Coloque em ordem crescente de polaridade Eis abaixo: hexano; ter etlico; diclorometano; clorofrmio; tetracloreto de carbono; acetato de etila; acetona; metanol; etanol e butanol. c) Quais destes solventes formam duas fases quando misturados com gua? ter etlico; hexano; clorofrmio; tetracloreto de carbono; diclorometano; acetato de etila; 8) Calcule o Rf de uma mancha que se desloca 5,7 cm com uma frente de solvente igual a 13 cm. Logo o fator de reteno :

9) Como feita a revelao das placas em CCD? Quais os principais reveladores utilizados? Na cromatografia de camada delgada a fase lquida ascende por uma camada fina do adsorvente estendida sobre um suporte. O suporte mais tpico uma placa de vidro (outros materiais podem ser usados). Sobre a placa espalha-se uma camada fina de adsorvente suspenso em gua (ou outro solvente) e deixa-se secar. A placa coberta e seca chama-se "placa de camada fina". Quando a placa de camada fina colocada verticalmente em um recipiente fechado (cuba cromatogrfica) que contm uma pequena quantidade de solvente, este eluir pela camada do adsorvente por ao capilar. Portanto, A revelao feita em uma srie de placas em sistemas de diferentes polaridades com a mistura a ser separada, sendo que o melhor sistema aquele que d um valor de Rf na faixa de 0,25-0,35 para o componente mais rpido na placa. Eis os principais reveladores e suas classes, na tabela baixo: CLASSE Triterpenos e esterides REVELADOR Reagente de Liebermann-Burchard

Flavonides Alcalides Compostos insaturados

Soluo de cloreto de alumnio Reagente de Dragendorff Vapores de iodo

10) Quais as vantagens e desvantagens da cromatografia gs-slido? E da Cromatografia Lquida de Alta Eficincia? Caractersticas gs-slido (de forma geral): Ampla faixa de temperaturas de uso maior garantindo uma flexibilidade na otimizao da separao. Boa estabilidade qumica e trmica levando a uma maior durabilidade da coluna, no reage com componentes da amostra. Pouco viscosa, tendo colunas mais eficientes (menor resistncia transferncia do analito entre fases). Disponvel em elevado grau de pureza com colunas reprodutveis; ausncia de picos fantasma nos cromatogramas. Facilidade de registrar dados Separao de vrias classes de compostos em uma anlise Compostos termicamente estveis Tcnicas auxiliares para identificao dos compostos. usada em substncias que possam ser volatilizadas sem sofrer decomposio e no volteis que possam ser convertidas em derivados volteis.

Caractersticas cromatografia liquida de alta eficincia: Alto poder de resoluo; Separaes rpidas; Monitoramento contnuo do eluente; Medidas quantitativas acuradas; Anlises repetitivas e reprodutveis com a mesma coluna; Automao do procedimento analtico e do manuseio dos dados Alto custo; Desta forma, a cromatografia lquida de alta eficincia mais verstil que a cromatografia com fase gasosa porque ela no est limitada a amostras volteis e termicamente estveis e porque a escolha de fases estacionrias e mveis mais ampla.