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ESPECIACION DEL CROMO EN LAS AGUAS

1. INTRODUCCION
Debido a la actividad antropica en la actualidad los metales pesados son considerados como un problema ambiental, As lo demuestran numerosos estudios que le dan a estos metales el carcter toxico para los seres vivos, cuando se encuentran en determinadas concentraciones en el medio (Bewer y Yeats, 1978). Tambin afectan las cadenas alimenticias, provocando una bioacumulacion entre los organismos de las cadenas trficas, donde son incorporados a travs de los organismos filtradores que se alimentan de las partculas sedimentables o de los propios sedimentos (Martnez y Senior, 2001). Los ros son el principal medio de transporte de los constituyentes qumicos hacia los lagos o el mar, especialmente de los metales pesados. As mismo, numerosos trabajos muestran que los procesos fsicos, qumicos y biolgicos, que se dan en los ros, cumplen un papel importante y variable relacionado al flujo de los metales desde su lugar de origen hasta su destino final que puede ser otro rio, lago o el mar (Len, 1995). Por otra parte los ros contribuyen con aportes de materiales de diferente origen (orgnico o inorgnico), donde los metales asociados a estos son liberados ya sea por la degradacin del material orgnico o por el cambio inico de sus componentes inorgnicos (Valette y Silver, 1993) En los ltimos aos, se ha producido un gran cambio en cuento a nuestro entendimiento acerca de la biogeoquimica de los metales pesados en las aguas. La especiacin de los metales gobierna las interacciones con la materia particulada en suspensin y de los sedimentos, determinando la disponibilidad o la toxicidad de los metales para los organismos acuticos, a mas de tener influencia en el ciclo de los metales pesados a travs de las aguas de los ros, al igual que en la interface agua-sedimentos en ambientes con diferentes condiciones redox (Lewis y Landing, 1992). En otras palabras, un mismo elemento puede tener diferente comportamiento desde el punto de vista toxicolgico, segn sea la forma qumica en que se el encuentre. Por esos motivos los estudios recientes demuestran que es mas importante conocer la forma qumica y la cantidad en que se encuentra el metal que su concentracin total en la muestra (Valiente, et al. 2004) Por lo tanto, la forma fsico- qumica particular en que se encuentra un elemento, dado en una muestra, va a ser la que determinar la toxicidad, la actividad biolgica, la biodisponibilidad y el impacto ambiental verdadero del metal toxico. Por eso la especiacin, en los ltimos aos ha despertado un gran inters tanto en la toxicologa como en la nutricin, ciencias agrarias y medioambientales, entre otras (Martnez y Senior; 2001). En consecuencia, la especiacin requiere de un procedimiento denominado anlisis de especiacin que implica la separacin previa de los compuestos de inters, empleando normalmente tcnicas de separacin como: la cromatografa, que permite separar compuestos que difieren poco en sus propiedades fsico-qumicas o la espectrofotometra, que puede llevar a cabo separaciones de especies neutras, inicas, orgnicas e inorgnicas, por cualquier de sus mecanismos de separacin, sea por absorcin, reparto (normal e inversa), intercambio inico, exclusin, afinidad, etc. (Valiente, et al. 2004). De otro lado, el cromo es un elemento natural presente en las rocas, animales, plantas, suelo, agua, etc., y puede estar en la formas: Cr (0), (III) y (VI). El Cr (III) se le encuentra en el medio ambiente y es un nutriente para los organismos, no casusa problemas a la salud; pero los Cr (0) y (VI) suelen ser producto de los procesos industriales y en concentraciones muy bajas son nocivos, especialmente el Cr (VI), que es considerado como cancergeno y mutagnico, que cuando se le ingiere en grandes cantidades puede

causar la muerte, lesiones renales, hepticas y ulceras; en pequeas cantidades produce, perdida del conocimiento, convulsiones, vomito, diarrea, entre otras y en contacto con la piel causa ulceras o alergias. Por lo tanto, las descargas de los afluentes industriales es la causa ms importante de la presencia de este elemento en las aguas y su acumulacin en los sedimentos y organismo que lo ingieren (ATSDR, 2000). En el presente documento nos evocaremos a detallar el proceso de especiacin del cromo (Cr), en las aguas; para lo cual se evaluara las metodologas relacionadas con la especiacin de metales pesados, como son: anlisis qumicos estndar de aguas, cromatografa, espectrofotometra, etc., y finalmente trataremos de la espectrofotometra de absorcin atmica, ventajas y desventajas de su uso en la especiacin del Cr (VI). Para finalizar con la tarea encomendada se evala un caso de estudio de especiacin del Cr (VI).

2.- Aspectos generales

2.1. El Cromo
El cromo (Cr) es el sptimo elemento qumico natural mas abundante en la naturaleza, se le encuentra en las rocas, rocas volcnicas, los animales, las plantas, el suelo, el polvo y en los gases volcnicos ( ATSDR, 2004; Valiente et al. 2004). Su nmero atmico es 24, esta en el grupo 6 de la tabla peridica de los elementos y su smbolo es Cr, su valencia de 3, 4, 5 y 6 y tiene una masa atmica de 51,996 g/mol, tiene una estructura cristalina cubica centrada en el cuerpo. Dentro de sus propiedades fsicas resalta su estado solido con un punto de fusin y ebullicin de 2130 K y 2945 K, respectivamente (Lenntech, 2008 Y Ciencia net, 2004). Es un metal que se le emplea mayormente en la industria metalrgica.

2.2. Caractersticas
El cromo es un elemento qumico de transicin, de color gris lustroso acerado (plateado), brillante; de textura dura, pero frgil, en polvo es gris metlico. No se conocen sabor ni olor con los compuestos de cromo. Muy resistente a la corrosin y con diferentes usos (Ciencia net. 2004 y Lenntech, 2008). Se ubica en el grupo de sustancias peligrosas (adems del plomo y mercurio) por sus efectos en la salud. Tienen diferentes usos. Su estado de oxidacin es el +6, aunque los otros estados de oxidacin son +4, +5, los mismos que son poco frecuentes; mientras que los estados ms estables son el+2 y +3. Tambin se pueden obtener estados de oxidacin ms bajo, pero son bastante raros. (Ciencia net. 2004 y Kohon, 2004). El cromo elemental no se encuentra en la naturaleza, slo se encuentra en forma de mineral, como la cromita (Cr2O3.FeO), material usado en la fabricacin de materiales refractarios (ATSDR, 2004; Ciencia net. 2004 y Quiminet, 2004) Se ubica en el grupo de las sustancias peligrosas o toxicas (adems del plomo y mercurio) por sus efectos en la salud, y su principal uso es en la produccin de aleaciones anticorrosivas. (ATSDR, 2004)

2.3. Formas
El cromo esta presente en la naturaleza en varias formas, siendo las ms comunes: el cromo metlico (O), el Cr (III) y el Cr (VI). El Cr (III) o forma inica del cromo, es poco soluble, y muy estable; es un elemento traza esencial para los

seres vivos. Mientras que el Cr (VI), menos estable y mas soluble, y el Cr (O), son producto de ciertos procesos industriales y a su vez el Cr (VI) es considerado altamente txico, cancergeno y teratgeno (Rocchetta, 2001 y ATSDR, 2000). Adems de estas tres especies del cromo, se conocen tres istopos del Cromo estables en la naturaleza, y son: 52 Cr, el ms abundante, 53 Cr y 54 Cr. Se han obtenido 19 istopos, abundando el 50 Cr, con una vida media de ms de 1,8 x 10 17 aos. El 51 Cr, con 27, 702 das de vida media, y los restantes con vida media de menos de 24 horas; de estos, la mayora tienen una vida media de menos de un minuto (Ciencia net, 2004 y Lennteh, 2008). El cromo, tambin, puede formar compuestos con otros elementos. Los compuestos formados corresponden a los xidos de cromo: CrO (xido cromoso), xido de cromo o crmico (Cr 2 O 3 ), y el anhdrido crmico (CrO 3 ) (ATSDR, 2000 y Quiminet, 2004).

2.4. Aplicaciones
En cuanto a sus aplicaciones, el cromo se emplea principalmente en metalurgia para proporcionar resistencia a la corrosin y para dar un acabado brillante a los utensilios. Se le utiliza en las aleaciones, por ejemplo en el acero inoxidable (con un 8% de cromo), para procesos de cromado, en la anodizacin del aluminio, como mordiente; As mismo los cromatos y xidos de cromo son usados como colorantes y pinturas debido a sus variados colores, como el dicromato de potasio (K 2 Cr 2 O 7 ).que muestra un color rojo y sirve para limpiar material de vidrio de laboratorio, es muy oxidante. El verde de cromo (Cr (III); Cr2O3) se emplea en las pinturas, esmaltes y en la coloracin de vidrios; el cromato d e plomo (PbCrO 4 ) como pigmento (Ciencia net. 2004, Quiminet.com, 2004). Tambin es utilizado como catalizador y en la sntesis de amonaco, en el curtido del cuero (Cr (VI ) y CrO 3 ). Por otro lado, el mineral cromita (Cr 2 O 3 .FeO), se halla en la naturaleza y contiene la forma de Cr (III), sirve para la fabricacin de ladrillo y otros materiales refractarios. Una buena parte de la cromita se usa para obtener cromo o en sus aleaciones. Sustituye a los iones de aluminio para obtener el rub. Se usa en fabricacin de las cintas magnticas de los cassettes (CrO 2 ) y el tner de las maquinas impresin. (Ciencia net. 2004, Quiminet.com, 2004). En la naturaleza no se encuentran los cidos, crmico y dicrmico; pero el trixido de cromo (CrO 3 ) se vende industrialmente como cido crmico. Adems se tiene el cromato de calcio (CaCrO 4 ) (Ciencia net. 2004, Quiminet.com, 2004).

2.5. Fuentes
El cromo se obtiene a partir del calentamiento de la cromita (FeCr 2 O 4 ) en presencia de aluminio o silicio (proceso de reduccin).Aproximadamente el 50% de la cromita se extrae de Sudfrica, Kazajistn, India y Turqua (ATSDR. 2000, Quiminet.com, 2004 y Ciencia net. 2004).Todava abundan depsitos sin explotar, pero geogrficamente estn concentrados de Kazajistn y el sur de frica. El mayor porcentaje de cromita extrada (70%) se emplea en aleaciones, el aproximadamente 15% directamente como material refractario, y el resto en industrias qumica para obtener diferentes compuestos de cromo. Escasamente existen depsitos de cromo metal, por ejemplo en la mina rusa de Udachnaya. (ATSDR, 2000, Quiminet.com, 2004 y Ciencia net, 2004)

El cromo se halla en concentraciones que van desde 0,1ug/m 3 en el aire hasta 4 g/kg en el suelo. Tambin se le encuentra en el material producido en las erupciones volcnicas, en las rocas, en las plantas y en el agua, donde su presencia es muy baja, excepto en las aguas efluentes de las industrias (IPCHS, 2002). Actualmente, se consideran como las mayores fuentes de Cr (VI) a las industria relacionadas con este, como son: Curtiembres, galvanoplastias, metalrgicas, produccin de pigmentos, fertilizantes y la incineracin de productos industriales como son los aceites y cueros (Rocchetta, 2001; ATSDR, 2000)

2.6. Papel biolgico del cromo y suToxicidad

El cromo pertenece al grupo de los oligoelementos y generalmente se le considera como un elemento esencial para los seres vivos , cuando se encuentra oxidado (Cromo (III)); pero puede ser considerado toxico cuando se encuentra en altas concentraciones; esta toxicidad no es muy comn debido a su baja absorcin y alta tasa de excrecin (Medline Plus, 2008; Ciencia net, 2004 y Kohon, 2004) El Cromo (III) participa en el metabolismo de los lpidos (grasas y colesterol) , carbohidratos y protenas para que puedan ser usados por el organismo (Ciencia net. 2004 y ATSDR, 2000); por lo que se recomienda una ingesta de 50 a 200 g de Cromo (III). Parece que algunos de sus complejos, del Cromo (III) participa en la potenciacin de la accin de la insulina, y su ausencia provoca intolerancia a la glucosa y aparicin de diversos problemas de salud (ATSDR, 2000; Medline Plus, 2008 y Kohon, 2004). La falta de cromo III) en la dieta adems origina prdida de peso, retardo en el crecimiento, mal funcionamiento en el sistema nervioso y una condicin similar a la diabetes. Sus compuestos se usan como complementos dietticos , se les considera activadores de ciertas enzimas que impiden la formacin de cogulos en la sangre; pero, los compuestos de cromo resultan txicos cuando son ingeridos en altas concentraciones, aunque la dosis letal sea de algunos gramos. En niveles no letales, el cromo (VI) es considerado cancergeno. (ATSDR), 2000; Medline Plus, 2008 y Kohon, 2004). La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) recomienda, desde 1958, que la concentracin mnima de cromo (VI) en el agua para el consumo es de 0.05 mg/litro, valor que se halla en revisin continua. Igual criterio asumen diversas Organizaciones de salud, como el Departamento de Salud y Servicios Humanos (DHHS), la Agencia Internacional par la Investigacin del Cncer (IARC) ,quien agrega que ciertos compuestos del cromo son cancergenos en humanos ; pero contrariamente la EPA indica que no hay suficiente informacin, acerca del Cromo (VI) en agua y alimentos, como para sealar que este cause cncer; es decir, se necesitan estudios adicionales en humanos y animales para conocer la accin del Cromo (III) y Cromo (VI) (Ciencia net, 2004 y ATSDR, 2000). En general el Cromo (VI) es ms txico que el Cromo (III). Altos niveles de Cromo (VI) en el aire: 2 g/m3, por ejemplo de cido crmico, causa irritacin de la nariz, estornudo, comezn, hemorragias nasales, lceras, perforaciones en el tabique nasal, al igual que en el caso de exposiciones continas. Tambin se asocia su exposicin con el cncer pulmonar (niveles de 100 1000 veces de cromo en el aire respirado causa cncer, ataque de asma). Tragar cantidades ms altas de

Cromo (VI) produce malestar estomacal, dao heptico y renal y muerte. Ingerir mucho Cromo (III) causa problemas de salud, sarpullido (ATSDR, 2000).

3.- Especiacin del Cromo (III) y Cromo (VI) en el agua

Frecuentemente, se introducen metales en el ciclo del agua procedentes de desechos industriales. Muchos de esos iones son txicos para el hombre y su vertido debe ser monitorizado y controlado de forma cuidadosa. El cromo puede encontrarse como Cr (III) y Cr (VI). El Cr (III) es menos txico, en ciertas dosis es esencial para la vida del ser humano. Se ha demostrado la toxicidad del Cr (VI) presente en aerosoles al daar la piel y el sistema respiratorio, causando cncer de pulmn, sin embargo los efectos txicos del Cr (VI) en agua de consumo no estn bien documentados. Ambas formas pueden coexistir en aguas naturales y efluentes, dependiendo de las caractersticas redox y pH del medio. La dificultad de su determinacin analtica radica en que la manipulacin y tratamiento previo de las muestras pueden producir intercambios entre ambas especies qumicas, y en las bajas concentraciones en que deben determinarse ambas; por ello no son muchos los mtodos que permitan su cuantificacin con la calidad analtica necesaria. La determinacin de cromo (VI) se hace particularmente necesaria en aguas procedentes de industrias de electroplateado qumico, pinturas, pigmentos, fungicidas, agentes para curtir, tintes, etc. y adems su concentracin pueda ser usada como medida alternativa de la demanda qumica de oxgeno. Un problema aadido en la determinacin de Cr (VI) es la presencia de diferentes formas qumicas del Cr (VI) en agua cuya concentracin depende del pH y tambin de la concentracin total. Este problema puede resolverse por un cambio en el pH para que predomine una nica forma o en base a la determinacin de las diferentes formas qumicas. El sistema de cromo (VI) se puede describir por los siguientes equilibrios segn Kolthoff at el. (AO). H2CrO4 HCrO4 - + H+ HCrO4 - CrO4 2- + H+ Cr2O7 2- 2 HCrO4 - + H+ pK1 = -0.75 pK2 = 6.5 pK3 = -1.7

Las curvas de distribucin de las distintas especies de cromo (VI) son funcin de la concentracin total del mineral y del pH del medio. Por lo que en el presente se hablara sobre los mtodos para determinar el Cromo (VI), para finalmente escoger uno que se ajuste a las necesidades de un medio donde se supone existe cromo pero en minsculas concentraciones

3.1. Especiacin
La especiacin puede definirse como el proceso de identificar y cuantificar las diferentes especies definidas, formas o fases presentes en un material o la descripcin de la cantidad y clase presente de estas especies, las cuales se definen funcionalmente, operacionalmente o como un compuesto qumico especfico.

La especiacin funcionalmente definida est ejemplificada por las especies disponibles a las plantas o como biolgicamente activas o formas mviles. En la especiacin definida operacionalmente, los procesos de fraccionamiento fsico o qumico aplicados a las muestras definen la fraccin obtenida. La tercera forma de especiacin, en la cual se mide o se define la forma qumica precisa de un elemento es la ms difcil de lograr debido a que se requiere de metodologa analtica de gran selectividad y generalmente sensibilidad. El trmino de especiacin (operacionalmente definido) se ha aplicado a los resultados obtenidos por procedimientos de extraccin secuencial (Martnez y Rivero, 2005) Segn Valiente (2000), cualquier elemento qumico puede tener comportamiento diferente desde un punto de vista toxicolgico y de la actividad farmacolgica, esto depender de la forma qumica en que se encuentre. Es decir, depender de su estado de oxidacin o si esta unido a un determinado radical orgnico. Por lo tanto, es ms importante conocer en que forma qumica y en que cantidad de la misma se encuentra el elemento, que su concentracin total. Por lo tanto, a esta clase de anlisis o de la determinacin de la forma en que se encuentra el metal en la muestra, para nuestro caso el cromo, se denomina especiacin.

3.2. Mtodos de evaluacin del Cromo (VI)

Inicialmente es necesaria sealar que los compuestos del cromo pueden presentarse en el agua en forma trivalente como iones cromo (III) y en forma hexavalente como iones cromato o dicromato y existen varios mtodos analticos para la determinacin de cromo (VI) en aguas residuales o naturales, como la Espectrofotometra (utilizando diferentes tipos de reactivos, como la difenilcarbazida), la Voltampiremetria de resolucin catdica, la Espectroscopia de absorcin atmica, la cromatografa de par inico y de intercambio inico con diferentes sistemas de deteccin y la electroforesis capilar. Tambin se han propuesto determinaciones basadas en sistemas en flujo. Sin embargo, algunos mtodos descritos necesitan separaciones fsicas, tratamientos preliminares o instrumentacin no universal. Respecto al tipo de medida o determinacin que se quiera hacer, la espectrofotometra directa parece ser una buena eleccin para monitorizar la calidad del agua, dado su carcter general. Pero para muestras de origen medioambiental (aguas residuales, industriales, o con materiales en suspensin), no es fcil la determinacin directa, debido a la presencia de turbidez, especies en suspensin o materia orgnica. Los mtodos propuestos para cancelar las interferencias son la separacin qumica y/o fsica y mtodos matemticos de cancelacin o compensacin del interferente.

3.3. Ventajas y desventajas de los mtodos

3.3.1. Determinacin fotometra del cromo total con difenilcarbazida Este mtodo es adecuado para la determinacin del cromo total en concentraciones que van de 1 a 20 mg/l Interfieren el mtodo las sustancias orgnicas, iones de metales pesados y colorantes; por lo tanto es necesario eliminar estos elementos, lo que requiere de un tratamiento previo de la muestra. 3.3.2. Determinacin fotomtrica del cromo total con difenilcarbazicida trasfusin oxidante Mtodo adecuado para determinar cromo total en concentraciones mayores a 1 mg/l de cromo en presencia de grandes cantidades de sustancias acompaantes que difcilmente se oxidan en la muestra de agua.

Es necesario hacer un tratamiento previo a la muestra para evitar las interferencias 3.3.3. Determinacin fotomtrica de los iones cromato con difenilcarbazida Adecuado para la determinacin de iones cromato en concentraciones que van de 1 a 20 mg/l de cromo Es necesario realizar tratamientos previos a la muestra a fin de eliminar las interferencias, debido a la presencia de sustancias orgnicas en gran cantidad, colorantes, metales pesados como el hierro (III); sustancias oxidantes y reductoras como el cloro libre o los iones sulfito. 3.3.4. Determinacin del Cromo (VI) por el mtodo Voltamperimetrico Voltametra andica de redisolucin es una de las tcnicas ms sensibles para el anlisis de metales, en algunos casos llega a tener de 10 a 100 veces ms sensibilidad que la Espectrofotometra de absorcin atmica con atomizacin electrotrmica (Castro, 1992). No requiere la extraccin ni concentracin previa de la muestra y puede utilizarse para la determinacin de cuatro a seis elementos con la condicin y en este caso limitacin, de que deben ser formadores de amalgama. Se realiza en dos pasos, durante el primero, llamado de preconcentracin, se reducen los iones metlicos de la muestra, mediante la aplicacin de un potencial negativo y se concentran en el electrodo de mercurio de 100 a 1000 veces su valor en la disolucin. Durante el segundo paso, el metal amalgamado se oxida rpidamente, por la aplicacin de un potencial positivo, producindose su redisolucin. El equipo bsico utiliza tres electrodos, uno de trabajo, otro de referencia y un auxiliar de platino, contraelectrodo, incluidos en una celda nica. o El electrodo de trabajo, un electrodo de gota pendiente o de pelcula de mercurio, proporciona la superficie sobre la que se depositan inicialmente los metales y desde donde son posteriormente redisueltos. Durante este ltimo proceso se liberan electrones fluyendo la corriente elctrica entre este electrodo de trabajo y el electrodo auxiliar de platino. El valor de esta corriente es proporcional a la concentracin del metal. o El electrodo de referencia acta como fuente de potencial estable, puede ser un electrodo de calomelanos o un electrodo Ag/AgCl. Los Standard Methods proponen que esta tcnica es mas apropiada para el anlisis de los metales plomo, cadmio y cinc, no considerndose as para el cromo; aadiendo que el lmite de deteccin de este procedimiento depende del metal analizado, del tiempo de deposicin, de la agitacin, del pH, del tipo de electrodo y del tipo del potencial de barrido utilizado en la redisolucin, para los metales citados est en el orden de a 1 ppb. 3.3.5. Determinacin por espectrofotometra de absorcin atmica Tomado en consideracin que de los mtodos analizados, la espectrofotometra es el mas recomendado por varios autores (Valiente et al., 2004; Len, 1995; De Andrade et al., 1985; Chen et al., 2007; Tuncelli y Turker, 2002; entre otros), es que se le tratara en un tem aparte. 3.3.6. Determinacin por cromatografa (Inica), de par inico e intercambio inico La Cromatografa es una tcnica fsica de separacin basada en la distribucin de solutos entre una fase mvil y una fase estacionaria. Los diferentes tipos de cromatografa estn basados en la naturaleza de las dos fases involucradas (Snchez y Floriano, 1992) Este mtodo es una aplicacin de la cromatografa inica para determinar cromo hexavalente en aguas potables, aguas terrestres e incluso efluentes industriales,

donde se le encuentra en dos estados de oxidacin, como cromo trivalente (III) y como cromo hexavalente (VI). De esta diferencia de comportamiento se desprende la importancia de poder cuantificar por separado estas especies y el nuevo mtodo propuesto por Standard Mtodos del APHA & AWWA (Greenberg et al., 1998), consiste en la separacin mediante una columna cromatogrfica de intercambio aninico de alta capacidad (Ion Pac AS7) de ambas especies, reaccionando posteriormente el cromo hexavalente con azida para dar lugar a un cromforo que puede detectarse y medirse en un espectrofotmetro a 530 nm. La mnima concentracin detectable con los equipos de laboratorio, utilizando un volumen de muestra de 250 L es de 0,3 g/L:

3.3.7. Determinacin del Cromo por Electroforesis capilar inica Esta tcnica combina aspectos de la electroforesis tradicional, la cromatografa y la tecnologa capilar. El sistema es tan sencillo como una fuente de alto voltaje conectada a dos recipientes que contienen un tampn unidos mediante un capilar de cuarzo (Olechno, et al. 1991) Una seccin de la poliamida que recubre el capilar se retira y esta ventana se emplea para permitir el paso de la radiacin que utiliza el detector. Los detectores mas utilizados son los de espectroscopia de ultravioleta visible, fluorescencia, radioactividad, conductividad entre otros. Son muchos los parmetros que se pueden analizar; para lo cual el analista debe de crear el mtodo de trabajo adecuado por electroforesis capilar; pero lo ms importante determinar las dimensiones del capilar, el voltaje aplicable a los recipientes de tampn, la viscosidad, la fuerza inica, la temperatura, el pH, los modificadores y los aditivos. En la revisin de la bibliografa se muestra que la electroforesis capilar se utiliza en el anlisis de una amplia gama de sustancias, aniones orgnicos e inorgnicos, cationes incluyendo metales (pero no especifico para estos), carbohidratos, purinas, nuclesidos, oligonucletidos, medicamentos, colorantes, protenas, pptidos, catecolaminas, aminocidos, vitaminas Los Standard Methods (Greenberg et al., 1998) proponen la utilizacin de la electroforesis capilar inica con deteccin por UV para el anlisis de los aniones ms usuales en las aguas ya que es un mtodo rpido, realiza un anlisis en unos cinco minutos y proporciona informacin adicional de los aniones orgnicos, lo que no hace la Cromatografa inica Habiendo evaluado cada uno de los mtodos de posible uso en la determinacin de la especiacin del Cromo en las aguas, se conviene con lo propuesto por Green erg et al., 1998, en el manual de Standard Methods for Water and WasteWater Annalysis de la APHA & AWWA, por ser organismos regentes de los mtodos de anlisis de aguas de los Estados Unidos de Amrica, los mismos que son aceptados por todos los organismos involucrados en los estudios de calidad de agua, que el mtodo mas adecuado es el de espectrofotometra de absorcin atmica y sus variantes segn el caso de estudio.

4.- Espectrofotometra
4.1. Espectrometra de absorcin atmica
La espectroscopia de absorcin atmica, como su nombre lo indica, usa la absorcin de la luz para medir la concentracin de la fase gaseosa de tomos. Ya que la mayora de las muestras son slidas o lquidas, los tomos o iones de los analitos deben ser

vaporizados a la flama o en un horno de grafito. Los tomos absorben luz visible o ultravioleta y hacen transiciones a niveles de energa ms altos. La concentracin del analito es determinada por la cantidad de absorcin. Aplicando la ley de Beer-Lambert directamente en la espectroscopia AA es difcil debido a la eficiencia de la atomizacin de la muestra de la matriz, a la no-uniformidad de la concentracin, y a la longitud de la trayectoria de los tomos del analito (en el horno de grafito AA).

Figura 1.- Espectrofotmetro de absorcin atmica

Las mediciones de concentracin son generalmente determinadas de una curva de calibracin, despus de haber calibrado el aparato con los estndares de concentracin conocida.

4.2. Instrumentacin
4.2.1. Fuente de Luz La fuente de luz usualmente es una lmpara de ctodo con vaco de los elementos a ser medidos. Los lseres son tambin usados en estos instrumentos. Los lseres son suficientemente intensos para excitar los tomos a mayores niveles de energa, esto permite a las mediciones de AA y fluorescencia atmica en un solo instrumento. La desventaja de estas angostas bandas de luz es que solo se puede medir un elemento a la vez. Los espectrmetros de AA usan monocromadores y detectores de luz visible y UV. El principal propsito de un monocromador es separar la lnea de absorcin del fondo de la luz debido a las interferencias. Los instrumentos de AA reemplazan a los monocromadores con filtro de interferencia band pass. Los tubos fotomultiplicador son comnmente usados como detectores de espectroscopia AA.

4.2.2. Atomizador
La espectroscopia de AA necesita que los tomos se encuentren en fase gaseosa. Los tomos y iones de la muestra deben sufrir disolvacin y vaporizacin a altas temperaturas como en el horno de grafito o la flama. La flama de AA solo puede ionizar soluciones analticas, mientras que el horno de granito puede aceptar soluciones, mezclas o muestras slidas. La flama de AA usa una

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hendidura de tipo mechero para incrementar la longitud de la trayectoria y as incrementar la absorbancia total. Las muestras lquidas son aspiradas por un flujo de gas hacia una cmara de nebulacin/combinacin para formar gotas pequeas antes de entrar a la flama. El horno de grafito tiene varias ventajas sobre la flama. Es mucho ms eficiente y puede aceptar directamente muestras muy pequeas para usarse directamente. Adems produce un ambiente de reduccin para as oxidar fcilmente los elementos. Las muestras son puestas directamente el horno y el horno es calentado elctricamente en varios pasos para secar la muestra, en cenizas de materia orgnica y vaporizar los tomos de analito. La diferencia ms importante entre un espectrofotmetro de absorcin atmica y uno de absorcin molecular es la necesidad de convertir el analito en tomos libres. El proceso de convertir el analito en slido, lquido o solucin a un tomo gaseoso libre se llama atomizacin. En la mayora de los casos la muestra contiene el analito sufre una preparacin para dejar el analito en solucin orgnica o acuosa. Dos mtodos generales de atomizacin son usados: atomizacin a la flama y atomizacin electrotrmica. Pocos elementos son atomizados usando otras tcnicas.

4.2.2.1. Atomizador a la flama

En la atomizacin a la flama la muestra es primero convertida en una suspensin de gotitas de la solucin. Esto se logra usando un ensamble nebulizador. La muestra es aspirada en una cmara de spray pasando un vapor a alta presin que consiste de uno o ms gases de combustin, pasa al final de un tubo capilar sumergido en la muestra. El impacto de la muestra con el vidrio produce gotas en una solucin en aerosol. La suspensin en aerosol se combina con los gases de combustin en la cmara de spray antes de pasar al quemador donde la energa trmica de la flama desolvata la suspensin de aerosol para secar el aerosol a pequeas partculas slidas. Despus, la energa trmica volatiliza las partculas, produciendo vapor de las especies moleculares, especie inica y los tomos libres. La energa trmica en la atomizacin a la flama es suministrada por la combinacin de una mezcla combustible oxidante. Los combustibles comnmente usados son aireacetileno y xido de nitrgeno-acetileno. Normalmente, el combustible y el oxidante son mezclados en proporciones estequiomtricas; sin embargo, una mezcla rica puede ser aceptable para que los tomos sean fcilmente oxidables. El diseo ms comn para el quemador es con una ranura. Este quemador provee una longitud de la trayectoria para monitorear la absorbancia y una flama estable. El quemador es montado en una fase ajustable que permite al quemador ensamblarse para moverse vertical y horizontalmente. El ajuste horizontal es necesario para asegurarse que la flama est alineada con la trayectoria de los instrumentos pticos. El ajuste vertical es necesario para ajustar la altura dentro de la flama en el que la absorbancia es monitoreada. Esto es importante porque dos procesos que compiten, Afectan la concentracin de los tomos libres. Un incremento en la residencia del tiempo resulta en una mejor eficiencia de la atomizacin; entonces la produccin de tomos libres se incrementa con la altura. Por otro lado, una residencia muy larga de tiempo, puede conducir a la formacin de xidos metlicos, como Cr, la concentracin de los tomos libres es ms grande en la cabeza del quemador. Para metales como Ag, que son difciles de oxidar, la concentracin de los tomos libres se incrementa firmemente con la altura. Otros tomos muestran perfiles de concentracin que se maximizan a las caractersticas de la altura.

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La manera ms comn de introducir la muestra en el atomizador de flama es por continua aspiracin, en el cual la muestra es pasada continuamente a travs del quemador mientras se monitora la absorbancia. La continua aspiracin de la muestra, requiere de 25 ml de muestra. Se puede tambin alimentar micro-muestras que es til cuando el volumen es limitado o cuando la matriz de la muestra no es compatible con el atomizador de flama. Por ejemplo, la continua aspiracin de muestra que contiene altas concentraciones de slidos disueltos, como agua de mar, puede resultar en la acumulacin de depsitos de slidos en la cabeza del quemador. Estos depsitos generalmente obstruyen la flama, bajando la absorbancia. La inmersin de la muestra se logra con un muestreador automtico. La alimentacin de la micro-muestra a la flama se logra usando una micro-pipeta para poner 50-250 l de muestra en un embudo de tefln conectado al nebulizador, o sumergiendo el tubo nebulizador en la muestra por corto tiempo. La sumersin de la muestra se logra con un muestreador automtico. La seal para micro-muestras es un pico transitorio en el que su altura o rea es proporcional a la cantidad de analito que es inyectado. La principal ventaja de la flama por atomizacin es la reproducibilidad con que la muestra es inyectada en el espectrofotmetro. Una desventaja significante que la eficiencia de la atomizacin puede ser muy pobre. Esto puede ocurrir por dos razones. Primero, la mayora del aerosol producido durante la nebulizacin consiste de gotas que son muy grandes para ser acarreadas hacia la flama por los gases de combustin. Consecuentemente, casi el 95% de la muestra nunca llega a la flama. La segunda razn es que un volumen grande de gases de combustin significativamente diluye la muestra. Juntas, estas contribuciones a la eficiencia de atomizacin pueden reducir la sensibilidad, si la concentracin del analito en la flama, es de 2.5x10-6 en esa solucin. 4.2.2.2. Atomizadores electrotrmicos Una significativa mejora en la sensibilidad se logr con el calentamiento por resistividad en lugar de la flama. Un atomizador electrotrmico muy comn, es conocido como horno de grafito, que consiste de un tubo cilndrico de grafito de aproximadamente 1-3 cm de longitud, y 3-8 mm de dimetro. El tubo de grafito es alojado en un ensamble que sella las salidas del tubo con ventanas ptimamente transparentes. El ensamble tambin permite el paso de corrientes de gas inerte, protegiendo el grafito de la oxidacin, y removiendo los productos gaseosos producidos durante la atomizacin. Una fuente de poder es usada para pasar la corriente a travs del tubo de grafito, resultando en un calentamiento por la resistencia.

Figura 2.- Diagrama de un atomizador de flama (Tomado de.)

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Las muestras entre 5 y 50 l, son inyectadas al tubo de grafito a travs de un hoyo de dimetro pequeo localizado en la parte superior del tubo. La atomizacin se logra en tres fases. Primero, la mezcla es secada usando una corriente que eleva la temperatura del tubo de grafito a 110C. En la segunda etapa, que se llama calcinado, la temperatura es incrementada a 350-1200C, a estas temperaturas cualquier material orgnico es convertido en CO2 y H2O, y materiales inorgnicos son volatilizados. Estos gases son removidos por una corriente de gas inerte. En la etapa final, la muestra es atomizada rpidamente incrementando la temperatura a 2000-3000C. El resultado es un pico perecedero cuya altura o rea es proporcional a la cantidad de analito inyectado en el tubo. Estas tres etapas se llevan a cabo en 45-90 segundos, la mayor parte del tiempo es usada para secar y calcinar la muestra. La atomizacin electrotrmica provee una significativa mejora en la sensibilidad atrapando el analito gaseoso en un pequeo volumen en el tubo de grafito. La concentracin del analito resultante en el vapor puede ser 1000 veces ms grande que la producida en la atomizacin a la flama. El avance en sensibilidad y en la deteccin de lmites, es compensado por una significativa prdida en la precisin. La eficiencia de la atomizacin est fuertemente influenciada por el contacto de la muestra con el tubo de grafito, en el que es difcil controlar la reproducibilidad. 4.3. Mtodos de atomizacin miscelneos Pocos elementos pueden ser atomizados por una reaccin qumica que produce un producto voltil. Elementos como As, Se, Sb, Bi, Ge, Sn, Te y Pb forman hidruros voltiles tanto a la flama como en una observacin de un tubo de cuarzo calentado en la trayectoria ptica. El Hg es determinado por un mtodo de vapor fro en el que es reducido a mercurio elemental con SnCl2. El mercurio voltil es acarreado por un gas inerte a un tubo de observacin situado en la trayectoria ptica del instrumento.

4.4. Fundamento terico de la tcnica

La ley de Lambert-Beer (tambin llamada ley de Beer-Lambert-Bouguer) es una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin de la absorcin de la radiacin electromagntica. La frmula general de la ley es:

A = a x b x c
Donde A es la absorbancia transmitida, a una longitud de onda que depende del coeficiente de absorcin, b es la longitud de la trayectoria, y c es la concentracin del analito. Cuando la concentracin se maneja en molaridad, la ley de Lambert-Beer se escribe:

A = x b x c
Donde es la longitud que depende de la coeficiente de absorcin molar en unidades M-1cm-1. La de subndice se sobreentiende como un valor especfico de para una longitud de onda dada. Si varias especies absorben luz a una longitud de onda en una muestra, la absorbancia total a la longitud de onda dada es:

A = ( x b x c1) + ( x b x c2)+....

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Donde los subndices se refieren a absortividad y la concentracin de las diferentes sustancias que estn presentes. Mediciones experimentales son generalmente hechas en trminos de transmitancia (T) que es definida por: Donde P es la potencia de la luz a travs de la muestra y Po es la potencia inicial de la luz, la relacin entre A y T es:

Figura 3.- Diagrama de la Ley de Lambert-Beer (Tomado de)

En aplicaciones analticas se quiere medir la concentracin de analito independiente de los efectos de la reflexin, absorcin del solvente, y otras interferencias. La figura muestra las dos mediciones de transmitancia que son necesarias para usar la absorcin y as calcular la concentracin del analito en solucin. El diagrama de arriba es solo para el solvente y el de abajo es para la absorcin y solvente de la muestra. En este ejemplo, Ps es la potencia de la luz que incide en la muestra, P es la potencia de la luz medida despus de que pasa el analito, el solvente y el contenedor de la muestra (celda) y Po es la potencia de la luz medida despus que atraviesa el analito solamente y la celda. La medida de la transmitancia en este caso se le atribuye al analito nicamente. Dependiendo del tipo de instrumento, la medida de referencia puede ser hecha simultneamente con la medicin de la muestra o con la referencia gravada en la computadora para generar el espectro completo. Los modernos aparatos de absorcin pueden mostrar los datos en transmitancia, % de transmitancia, o absorbancia. Una concentracin desconocida de analito puede ser determinada con la medicin de la cantidad de luz que absorbe la muestra aplicando la ley de Beer. Si el coeficiente de absortividad no se conoce, la concentracin se puede determinar usando una curva de calibracin de la absorbancia contra la concentracin derivada de los estndares.

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4.5. Limitaciones de la Ley de LAMBERT-BEER La linealidad de la ley de Lambert-Beer es limitada por los factores qumicos o instrumentales. Las causas de la no-linearidad son: Desviaciones de los coeficientes de absorbancia a altas concentraciones (>0.01M) debido a las interacciones electrostticas entre las molculas por la proximidad. . bios en la ndice de refraccin debido a las altas concentraciones parte uniforme del espectro de absorcin como el mximo de absorcin de banda

4.6. Determinacin de Cromo en muestras ambientales (Ejemplo) 4.6.1. Estudio comparativo de diferentes medios para la separacin y concentracin de Cromo
El cromo se encuentra en la naturaleza principalmente en dos minerales: la cromita y la crocoita, pero la contaminacin ambiental con cromo debida principalmente a la actividad antropognica, como resultado de ciertas actividades industriales, entre las que se puede citar: industria de galvanizados, pinturas, tratamiento para la preservacin de postes de madera, curtiembres, catalizadores, cermicos, inhibidores de corrosin electrnica, fungicidas, bateras de alta temperatura, acabado de metales, pirotcnica, preservadores de telas, tintas, colorantes para telas, etc. Es la mayor fuente de cromo en el medio ambiente Por otro lado, es ampliamente conocido que las especies de cromo (VI) y cromo (III) tienen diferente biodisponibilidad y toxicidad en los seres humanos, y es por esta razn, que para preservar la salud de la poblacin, se requiere de un estricto control de sus contenidos en muestras ambientales. Tanto es as que, mientras el cromo (III) es esencial para el ser humano puesto que participa en el metabolismo de la glucosa, los efectos nocivos del cromo (VI) estn bien documentados y est demostrado que es un potente agente carcingeno para el tracto respiratorio, segn la clasificacin de la IARC (International Agency for Research on Cncer). Ambas especies de cromo (III) y (VI) pueden coexistir en aguas naturales, efluentes y suelos dependiendo del pH del medio y de sus caractersticas redox. En Argentina est reglamentada la cantidad mxima de Cr (VI) tolerada en el vertido a colectora cloacal, conducto pluvial y a curso de agua en 0,2 mg/L, mientras que para Cr (III) se tolera 2 mg/L. Muchos pases tambin controlan las cantidades de metales en barros residuales los cuales sern dispuestos en suelos (rellenos sanitarios).

4.6.2. Tcnica para la medicin de Cromo (VI)

Para poder realizar estos controles es indispensable contar con una metodologa analtica confiable y con la sensibilidad apropiada para cuantificar los bajos niveles tolerados por las regulaciones. No son abundantes los mtodos para realizar este tipo de anlisis, llamados anlisis de especiacin, pues son muchos los inconvenientes que se presentan, entre ellos podemos mencionar: la interconversin de una especie a otra al manipular la muestra, incluso en el momento del muestreo, siendo de vital importancia el tipo de tratamiento previo a la determinacin y la determinacin en s debido a las bajas concentraciones que deben medirse. Esto limita en gran medida los mtodos que pueden llegar a emplearse, pues deben cumplir con varios requisitos: no ocasionar el intercambio

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entre especies, ser sensibles, tener bajos lmites de deteccin, ser exactos, precisos, reproducibles, robustos. El objetivo de nuestro trabajo es desarrollar una metodologa, a travs del estudio de las variables implicadas, que permita cumplir con los requerimientos tcnicos y de la legislacin de nuestro pas, que pueda ser aplicado en anlisis de rutina, para lo cual se pueda emplear equipamiento de costo bajo a medio y que los tiempos de anlisis sean cortos. La tcnica de medicin empleada es espectrometra de absorcin atmica, y la separacin de las dos especies de cromo se realiza empleando microcolumnas rellenas con diferentes intercambiadores inicos: almina y una resina de intercambio inico. El intercambiador no slo deber separar eficientemente el cromo (III) del cromo (VI), sino que adems es conveniente que preconcentre el cromo (VI) de manera de disminuir los lmites de deteccin para esta especie que es la ms txica. Por ello se estudi el comportamiento de la almina y la resina de intercambio inico en funcin de las caractersticas qumicas, por ejemplo: el pH y la posible presencia de otros compuestos concomitantes en las muestras a analizar. Para la separacin se emplea un sistema de inyeccin en flujo compuesto por dos bombas peristlticas y una vlvula multifuncin. Para la deteccin se emplea un equipo de absorcin atmica equipado con llama y horno de grafito. Con este acoplamiento de una tcnica separativa con una tcnica de deteccin, se determinan las concentraciones de cromo (VI) en aguas, efluentes lquidos y slidos y en suelos. El cromo total se determina por absorcin atmica con llama u horno de grafito, segn se requiera; con posterioridad al tratamiento de muestra que se realiza empleando un sistema de digestin asistido por microondas en vaso cerrado. La tcnica de medicin empleada es espectrometra de absorcin atmica, y la separacin de las dos especies de cromo se realiza empleando microcolumnas rellenas con diferentes intercambiadores inicos: almina y una resina de intercambio inico. El intercambiador no slo deber separar eficientemente el cromo (III) del cromo (VI), sino que adems es conveniente que preconcentre el cromo (VI) de manera de disminuir los lmites de deteccin para esta especie que es la ms txica. Por ello se estudi el comportamiento de la almina y la resina de intercambio inico en funcin de las caractersticas qumicas, por ejemplo: el pH y la posible presencia de otros compuestos concomitantes en las muestras a analizar. Figura 4.Espectrofotmetro de absorcin atmica (FAAS), empelado en a determinacin de Cromo (VI)

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Para la separacin se emplea un sistema de inyeccin en flujo compuesto por dos bombas peristlticas y una vlvula multifuncin. Para la deteccin se emplea un equipo de absorcin atmica equipado con llama y horno de grafito (Ver figura 1). Con este acoplamiento de una tcnica separativa con una tcnica de deteccin, se determinan las concentraciones de cromo (VI) en aguas, efluentes lquidos y slidos y en suelos. El cromo total se determina por absorcin atmica con llama u horno de grafito, segn se requiera; con posterioridad al tratamiento de muestra que se realiza empleando un sistema de digestin asistido por microondas en vaso cerrado. La obtencin de una metodologa analtica adecuada permitir un mayor control sanitario, en cuanto a tratamiento de efluentes, su disposicin, seguridad laboral de trabajadores que manipulan compuestos de cromo, y regulaciones ms estrictas que permitan una mayor preservacin del medio ambiente con la consiguiente disminucin de los riesgos para la poblacin. Este servicio es de utilidad para diferentes industrias que quieran y/o necesiten controlar la cantidad de cromo (VI) en sus efluentes, fundamentalmente aquellas que emplean cromo en sus procesos, como las mencionadas al principio del artculo. Tambin puede aplicarse en aguas de red o de pozo con un lmite de 0,05 mg/L de Cr (VI).

(Tomado Valiente et al. 2004)

5. Conclusiones
Habiendo evaluado cada uno de los mtodos de posible uso en la determinacin de la especiacin del Cromo en las aguas, se conviene con lo propuesto por Green erg et al., 1998, en el manual de Standard Methods for Water and WasteWater Annalysis de la APHA & AWWA, por ser organismos regentes de los mtodos de anlisis de aguas de los Estados Unidos de Amrica, los mismos que son aceptados por todos los organismos involucrados en los estudios de calidad de agua, que el mtodo mas adecuado es el de espectrofotometra de absorcin atmica y sus variantes segn sea el caso de estudio 6. Estudio de caso 6.1. Determinacin de Cromo (VI) en muestras de agua procedentes del Rio Chili, sector entre Puente Grau bajo y Puente de Tingo. 6.1.1. El cromo como toxico en las aguas

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El cromo es el sptimo elemento ms abundante en la tierra y se le encuentra generalmente en las rocas volcnicas; pero la principal fuente de la contaminacin de las aguas es la antropognica (Valiente et al., 2000). La contaminacin de sistemas acuticos, por lo general es una consecuencia de la rpida expansin del rea urbana, a veces sin planificacin, y el asentamiento de industrias. A partir de estas se vierten las aguas residuales; siendo la descarga de los efluentes industriales la causa ms importante de la acumulacin del cromo. El cromo es un elemento importante en los cuerpos de agua, y se le encuentra tanto en su forma inica Cr (III), poco soluble y muy estable por ser elemento traza, y como Cr (VI), que es menos estable pero mucho mas soluble, en su forma aninica; adems de ser un elemento contaminante toxico, mutagnico y cancergeno (Cervantes, et al., 2001). Estas caractersticas fsicas y qumicas del cromo son la causa de la diferente biodisponibilidad y toxicidad entre los compuesto del cromo. El cromo, para mantener en niveles correctos el metabolismo de la glucosa, lpidos y protenas es necesario que se encuentre en el agua en una concentracin que vaya de 50 a 200 g de Cromo (III)/da (Rocchetta, 2001 y Licata, 2007); mientras que los problemas medioambientales causados por el Cr (VI), estn vinculados, como se dijo anteriormente, con el desarrollo industrial en general y con la industria del cromo en particular, esta forma del cromo causa serios problemas txicos en plantas y organismos, debido a que es absorbido fcil y rpidamente a partir del agua o del suelo a travs de las membranas (Licata, 2007). Las industrias relacionadas con el Cr (VI) son, las curtiembres, galvanoplastias, metalrgicas, produccin de pigmentos, fertilizantes y la incineracin de los productos industriales como aceites y cueros (Rocchetta, 2001). El problema de la contaminacin de las aguas por cromo ha conllevado a la realizacin de proyectos de investigacin, principalmente en pases de Latinoamrica, donde las plantas industriales no tienen tratamiento de aguas residuales, para evaluar y tratar las aguas de los recursos hdricos deteriorados, y de esta manera proponer polticas de recuperacin a travs de la implementacin de sistemas de control y tratamiento de las emisiones industriales a fin de disminuir la contaminacin debido a este y otros metales pesados. Pero siempre se ha tenido la dificultad de su determinacin analtica, debido a que en la manipulacin y tratamiento previo de la muestra se produjeron intercambios, entre sus especies qumicas y a las bajas concentraciones en que deben de determinarse ambas (Cr III y VI). Este hecho debido bsicamente a que no existan muchos mtodos que permitan su cuantificacin con una buena calidad analtica. 6.2. Determinacin del Cromo en aguas superficiales En relacin a la determinacin del Cromo, en sus dos formas, existen varios trabajos realizados como los de Licata, 2007; Romero et al. , 2006; Valiente et al., 2004; Martnez y Senior, 2001; Valiente, et al., 2000; Rocchetta, 2001; Valiente, 2000; Len, 1995, Moore y Ramammorthy, 1984, entre otros; los mismos que se han ejecutado en diferentes pases del mundo, donde existe el problema de contaminacin de aguas por el cromo, y han utilizado diferentes metodologas para ello; tratando de superar, en cada caso, las deficiencias que pudieran presentar estas metodologas. Por lo tanto en el presente documento se hace un recuento y anlisis de estas investigaciones, para finalmente proponer una posible metodologa que permita eliminar los problemas que se generen a partir de la manipulacin y tratamiento previo de las muestras de agua a ser analizadas, para determinar el Cromo (VI).

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Valiente et al. (2004) propone una metodologa para separar y pre concentrar la muestra para determinar el Cr (VI). En este caso compara dos sistemas de intercambio inico, la almina y la resina Dowex 1 X8 con el objeto de separar a las dos especies de Cr (III y VI) y a su vez concentrar el Cr (VI), en aguas de consumo, efluentes lquidos y semislidos (barro). Adems utiliza un sistema de inyeccin de flujo (FI) equipado con dos bombas peristlticas y una vlvula multifuncin acoplada a una micro columna llena con el intercambiador de iones. El sistema FI esta en relacin con la llama de un espectrofotmetro de absorcin atmica. Los resultados indican que la almina muestra un mejor resultado en la separacin del Cr (VI) que la resina, as mismo, la almina tiene un mayor efecto en la disminucin de las interferencias y un mayor efecto en el factor de enriquecimiento (EF). Por lo tanto, recomienda a la almina a efecto de separar y pre concentrar las muestras de agua para un anlisis de (Cr VI) en aguas. Aos antes, el 2000, Valiente et al. al probar dos tcnicas: en batch y on line, para pre concentrar el Cromo (VI) en almina activada en la determinacin del Cr (III) y Cr (VI) por espectrometra de absorcin atmica con llama, llegaron a las siguientes conclusiones: (1) El mtodo on line tiene una mayor performance analtica, tanto en simplicidad como en rapidez; mientras que (2) la ventaja del mtodo en batch es que solo requiere del espectrofotmetro de absorcin atmica de llama. Concluyen, sealando que ambos mtodos tienen una buena sensibilidad para el anlisis de Cromo en los efluentes, acorde a las regulaciones establecidas, Cr (III): 2 g/L y Cr (VI): 0.2 g/L. Para la pre concentracin del Cr (VI), se utiliza a la almina activada, con buenos resultados. Por otro lado, Martnez y Senior (2001) realizaron un estudio de especiacin de metales pesados (Cd, Zn, Cu y Cr) en el material en suspensin de la pluma del rio Manzanares, Venezuela, a efecto de tener un mayor conocimiento acerca de la distribucin, especiacin y comportamiento de los metales pesados, antes citados, en el material en suspensin de las aguas superficiales de la cuenca baja y pluma del rio Manzanares. Una vez filtrada la muestra, utilizando membrana Millipore HAWP0047 de 0.45 m. se procedi a la extraccin secuencial de tres pasos para la determinacin de los metales pesados, segn a lo recomendado por Landing y Lewis (1991) y Lewis y Landing (1992), citados por Martnez y Senior (2001). La precisin del mtodo fue evaluada utilizando una muestra estndar certificada de sedimento de Environmental Resource Associates (Cat. N1-800-372-0122). Los resultados para el Cromo (VI), en cuanto a su concentracin, fueron los siguientes: Las mayores concentraciones fueron determinadas en los periodos de lluvia (cromo de origen litognico), con valores de 0.049 mol/l contenido en F1; o.179 mol/l en F2 y 1.86 mol/l en F3, con una concentracin total mxima de 2,075 mol/l. concluyendo que la metodologa utilizada tambin es adecuada para la determinacin de los metales pesados en el agua. Es necesario mencionar que en los ltimos aos, se han ejecutado otros procedimientos para la especiacin del cromo (III y VI), que no dejan de ser importantes como los anteriormente citados. Tuceli y Turker (2002) utilizaron un mtodo sensible para la especiacin, separacin y pre concentracin del Cr (III y VI). En la pre concentracin del Cr (VI), se utilizo el complejo formado por 1,5-diphenilcarbazone y la resina amberlite XAD-16 y se le determino a travs del FAAS. Los resultados tuvieron un error relativo de <3%, resultados corroborados por De Andrade et al. (1985). Por otro lado, Chen et al. (2007) aplico para la separacin y pre concentracin de Cr (III y VI) en una muestra de

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agua el TiO2, un material nanometer-sized de mucho inters por sus caractersticas fsico qumicas, que hace que tenga una alta absorbencia de los tomos de los metales. Los resultados observados son considerados muy satisfactorios para la determinacin simultanea de Cr (III) y (VI) y fueron corroborados por Liang et al. (2007) con su trabajo sobre especiacin del cromo por una separacin selectiva y pre concentracin utilizando como un nanmetro inmovilizador una columna de dixido de titanio (TiO2). De los resultados obtenidos, a travs de los aos en el afn de realizar una mejor separacin y pre concentracin de las muestras en la determinacin del Cr (III y VI) en muestras de agua, se puede concluir en lo siguiente: 1. La espectrofotometra de absorcin atmica (FAAS), bajo las condiciones dinmicas del FIA (Inyeccin de Flujo), es el mtodo mas adecuado para la determinacin del cromo (III) y (VI) en las aguas, en relacin a la espectrofotometra estndar. 2. En cuanto a las tcnicas de separacin y pre concentracin se pueden utilizar a las que incluyan 1). La filtracin de la muestra, utilizando membrana Millipore HAWP0047 de 0.45 m., 2). la almina activada, 3). La 1,5-diphenilcarbazone y la resina amberlite XAD-16 y 4). La utilizacin de un nanmetro inmovilizador de columna conteniendo dixido de titanio (TiO2). 3. Siempre que sea posible se aplicar la tcnica On line en la deteccin del cromo y sus especies. 6.2. rea de estudio El rio Chili, en su cuenca media, atraviesa la ciudad de Arequipa; por lo tanto recibe las descargas de un gran numero de efluentes contaminantes, ya sean domsticos o industriales, provenientes de los desechos de las curtiembres instaladas en su margen derecha, entre los Puentes bajo Grau y Bolognesi, y los efluentes domsticos de la poblacin Arequipea, a todo lo largo de la ciudad y del colector de de aguas servidas, que desemboca en Alata; as mismo, entre el puente de la variante de Uchumayo y el puente de Tingo recibe los desechos contaminantes del Parque Industrial y de la actividad agrcola de la zona. Por lo tanto, toda sta seccin del rio, desde el puente Bajo Grau hasta el puente de tingo, contiene en sus aguas el elemento Cromo, proveniente de la actividad antrpica, el mismo que puede estar disuelto en el agua, como material en suspensin o depositado en los sedimento, a mas del contenido en los organismos que lo asimilaron. Para nuestro inters el ms importante es el disuelto en las aguas. 6.3. Propuesta Tomando en consideracin, que el cromo es uno de los siete principales elementos qumicos en la naturaleza, y que de acuerdo a la forma que se presente, sea como Cr (III) o Cr (VI), puede o no ser toxico para los organismos acuticos y aquellos que los consumen. As mismo, el cromo no se encuentra en la naturaleza en estado libre sino que se halla como constituyente de numerosos minerales, y como cromo metlico no es toxico; de ah su uso en la fabricacin de utensilios de cocina, medicina (instrumental de ciruga); pero las especies de Cr (III) y (VI) tienen diferente biodisponibilidad y toxicidad en los seres humanos. Razn por la que se requiere de un estricto control de sus contenidos en muestras ambientales en general y en el agua en particular.

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Por esta razn es que se propone evaluar metodologas para la determinacin de Cromo (VI) en las aguas del rio Chili de una manera rpida, con alta sensibilidad, que sea precisa, de bajo costo y que su rango de determinacin sea al nivel vestigial. La concentracin mxima permitida de cromo (VI) en agua potable es de 0.05 mg/l, establecida por la Organizacin mundial de la Salud (OMS, 1986). La evaluacin propuesta se ejecutara bajo la estandarizacin de las condiciones preliminares, separacin y pre concentracin, para la determinacin de cromo en muestras de agua provenientes del rio Chili. Para lo cual se utilizara el siguiente instrumental: Espectrofotmetro de absorcin atmica (FAAS), para leer entre 300 y 800 nm., utilizando inyeccin de flujo (FIA) y la tcnica en bacth Cubetas de 1 mm de paso optimo y volumen til de 0.240 ml pH-metro de electrodo combinado, vidrio-electrodo calomel saturado Centrifuga de 3000 rpm Agitador mecnico rotatorio de 100rpm

Adems los siguientes reactivos: Disolucin madre de Cromo (VI) Disolucin de difenilcarbazida, elaborada a partir de 1-5 difenilcarbazida Almina activada Agua destilada de alta pureza (conductividad mxima 2 s/cm) Acido sulfrico diluido Hidrxido de sodio diluido La descripcin de los mtodos no se incluyen en el presente por no considerarlo adecuado por el tipo de trabajo que se presenta; adems, los fundamentos de estos ya fueron expuestos en su oportunidad.

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