PRACTICA N09: PROTEINAS La experimentacin se orienta hacia los procesos de las ciencias en general y, en general, se supone resolver problemas

con la participacin protagnica de alumno. La experimentacin resulta valiosa en la formacin de la actitud cientfica del alumno debido al uso sistmico de los procesos cientficos. I. OBJETIVO Reconocer protenas mediante reacciones de coloracin coagulacin y precipitacin. FUNDAMENTO TEORICO Las protenas son sustancias primordiales para la vida, ya que son instrumentos mediante lo que se expresa la informacin gentica. Son polmeros constituidos primordialmente por aminocidos. Segn su constitucin, las protenas se dividen en 2 clases protenas simples y protenas conjugadas. Los pesos moleculares de las protenas oscilan entre 6000 y 1 000 000, segn su configuracin, las protenas pueden clasificarse en fibrosas y globulares. Las materias albuminoides presentan gran importancia en algunas ramas de la industria. As, para la fabricacin de alimentos y preparados farmacuticos se emplea mucho la ovoalbmina de la clara de los huevos de la gallina, la seroalbumina, la caseria etc. Las protenas desnaturalizadas son qumicamente ms reactivas y ms fcilmente hidrolizadas por enzimas. Las protenas son macromolculas compuestas por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno. La mayora tambin contienen azufre y fsforo. Las mismas estn formadas por la unin de varios aminocidos, unidos mediante enlaces peptdicos. El orden y disposicin de los aminocidos en una protena depende del cdigo gentico, ADN, de la persona. Las protenas constituyen alrededor del 50% del peso seco de los tejidos y no existe proceso biolgico alguno que no dependa de la participacin de este tipo de sustancias. Funciones Las funciones principales de las protenas en el organismo son: Ser esenciales para el crecimiento. Las grasas y carbohidratos no las pueden sustituir, por no contener nitrgeno. Proporcionan los aminocidos esenciales fundamentales para la sntesis tisular. Son materia prima para la formacin de los jugos digestivos, hormonas, protenas plasmticas, hemoglobina, vitaminas y enzimas.

II.

Funcionan como amortiguadores, ayudando a mantener la reaccin de diversos medios como el plasma. Actan como catalizadores biolgicos acelerando la velocidad de las reacciones qumicas del metabolismo. Son las enzimas. Actan como transporte de gases como oxgeno y dixido de carbono en sangre. (hemoglobina). Actan como defensa, los anticuerpos son protenas de defensa natural contra infecciones o agentes extraos. Permiten el movimiento celular a travs de la miosina y actina (protenas contrctiles musculares). Resistencia. El colgeno es la principal protena integrante de los tejidos de sostn. Energticamente, las protenas aportan al organismo 4 Kilocaloras de energa por cada gramo que se ingiere. Las protenas estn mayormente presentes en alimentos de origen animal: carnes, huevos, leche y en menor proporcin en vegetales como la soja, legumbres, cereales y frutos secos.

Alimentos con mayor aporte proteico Calorias (Kcal) magra (desgrasada) sin desgrasar 200 Proteinas (gramos) Grasas (lpidos) (gramos) 13

cada 100 gramos

Carne vacuna Carne vacuna Carne cerdo Carne cerdo Pollo Pollo de

19

305

17

25

magra

275

17

23

de

Tocino, bacon, panceta con piel sin piel

850

3 28 23

85 10 2

170 115

Pavo Abadejo, Lenguado Salmon Huevos Lacteos

muslo sin piel

130 85

20 18 22 12 3

4 0.7 10 11 1.5

185 gallina Leche descremada Queso semiduro 160 40

Lacteos

400

30

28

Clasificacin Las protenas son clasificables segn su estructura qumica en: Protenas simples: Producen solo aminocidos al ser hidrolizados. Albminas y globulinas: Son solubles en agua y soluciones salinas diluidas (ej.: lactoalbumina de la leche). Glutelinas y prolaninas: Son solubles en cidos y lcalis, se encuentran en cereales fundamentalmente el trigo. El gluten se forma a partir de una mezcla de gluteninas y gliadinas con agua. Albuminoides: Son insolubles en agua, son fibrosas, incluyen la queratina del cabello, el colgeno del tejido conectivo y la fibrina del coagulo sanguneo. Protenas conjugadas: Son las que contienen partes no proteicas. Ej.: nucleoprotenas. Protenas derivadas: Son producto de la hidrlisis. En el metabolismo, el principal producto final de las protenas es el amonaco (NH3) que luego se convierte en urea (NH2)2CO2 en el hgado y se excreta a travs de la orina.

III.

MATERIALES Y REACTIVOS: 12 tubos de ensayo 02 gradillas 04 vaguetas 08 vasos de 100ml

IV.

02 probetas de 20ml 01mechero de alcohol 01 piseta 01 capsula 01 pinza para tubo 01 termmetro 04 Pipetas de 10ml Albumina NaOH, CuSO4, 5H2O, HCl, HNO3, CH3CH2OH, ferricianuro de potasio. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL: Reaccin de coloracin. Reaccin de biuret A 2ml de la solucin de albumina, aadir 2ml, de NaOH al 10% luego 1 gota de solucin de sulfato de cobre al 1%. Observa el color que se forma. Desnaturalizacin de la albumina en cada uno de los 05 tubos de ensayo colocar 2ml de solucin de albumina. Al 1er tubo calentar poco a poco observando la temperatura aproximada a la que tiene lugar la coagulacin. Al 2do tubo se adiciona 4ml de alcohol etlico. Al 3er tubo aadir unas gotas de HClcc. Al 4to tubo aadir gotas de HNO3 Al 5to tubo aadir solucin concentrada de NaOH. anotar en qu casos se produce la coagulacin. Precipitacin de protenas mediante cationes 1) A 06 tubos de ensayo adicionar las siguientes soluciones: a) 3ml de H2O destilada. b) 3ml de solucin de albumina. c) 3ml de H2O destilada ms 3 gotas de HCl al 10%. d) 3ml de solucin de albumina ms de 3 HCl al 10%. e) 3ml de agua destilada ms 3 gotas de solucin de NaOH al 10%. f) 3ml de solucin de albumina ms 3 gotas de solucin de NaOH al 10%.

Observe que los 06 tubos constituyen03 parejas. a con b, c con d y e con f, los miembros de cada pareja se diferencian nicamente en que mientras un tubo tiene solucin de protena en el otro esta se ha sustituido por agua destilada. Los tubos con agua destilada (a, c y e) constituyen el blanco o patrn de comparacin de aquello que tiene protena. Una de las parejas esta en medio neutro, la otra en medio alcalino y la otra en

medio acido. Los ensayos en blanco son necesarios para determinar si el efecto observado se debe realmente a la precipitacin de la protena o es el hidrxido metlico el que esta precipitado. A continuacin adicione a cada tubo 2ml de solucin de sulfato de cobre al 10%, agite los tubos y observe los resultados, haciendo comparaciones por parejas 2) Anote los tubos en los que cree ha habido precipitacin de protena.

Precipitacin de protenas mediante aniones En este ensayo no se necesita preparar o hacer prueba con blancos o patrones porque ac no hay las interferencias del caso anterior. 1) Por ello se prepara nicamente 03 tubos idnticos a los tubos b, d y f del ensayo anterior. 2) A cada uno se adiciona 2 gotas de las soluciones de ferricianuro de potasio. 3) Observa el tubo que presente precipitado de protenas. V. VI. VII. VIII. RESULTADOS. GRAFICOS REACCIONES. CONCLUSIONES. RECOMENDACIONES. BIBLIOGRAFIA http://www.zonadiet.com/nutricion/proteina.htm QUIMICA ORGANICA MORRISON Y BOYD. QUINTA EDICION. AO 2004. CUESTIONARIO. 1. Por qu el punto isoelctrico de la arginina (PH=10,7) es mayor que el de la lisina (PH= 9,6)? Por qu en la estructura de la arginina se encuentran el grupo de los aminos en mayor cantidad al de la lisina. 2. Cmo podr separarse la lisina de la glicina? Por medio de la cromatografa o por hidrlisis (en una solucin acida, puesto que el lcali produce racemizacion) 3. Cul aminocido puede actuar sobre cadenas peptdicas para formar unin cruzada? triptofano 4. Durante la electroforesis a PH=1.5 Cul es el pptido que emigrara con mayor rapidez al ctodo? por qu? I. Ala Glu Val Asp Gly Leu Ala

IX.

II.

III.

Val Lys Ala Leu Phe Lys Leu Porque en esta cadena peptidica se encuentran aminocidos Cargadas positivamente, las cuales emigraran al catado con mayor rapidez Gly Leu Val Phe Gly Val Val

5. cul es el grupo responsable de la reaccin positiva en la prueba de Hopkins cole? El grupo responsable para que la reaccin en la prueba de Hopkins - cole sea positiva es el acido carboxlico (cido glioxlico)

OBSERVACION. se debera cumplir durante el desarrollo de a presente practica las recomendaciones dadas en la primera prctica, as como tambin las recomendaciones impartidas antes de iniciada la practica y/o ensayo respectivo.