Cromatografa

CROMATOGRAFIA: Mtodo fsico de separacin en el que los componentes a separar se distribuyen en dos fases, una de las cuales constituye un lecho estacionario de gran desarrollo superficial (fase estacionaria) y la otra un fluido que pasa a travs o a lo largo del lecho estacionario (fase mvil) Disolvente puro (eluyente) Extracto de hojas verdes en ter de petrleo

pigmentos separados

Cromatograma
R

volumen o tiempo

Cromatograma

Clasificacin

Columnas capilares
fase estacionaria slida
soporte slido recubierto fase estacionaria lquida con fase estacionaria lqui

pared de la columna

a
capa porosa

b
pared recubierta

c
soporte recubierto

Mecanismos
interfase fase mvil
fase estacionaria slida
fase mvil fase estacionaria lquida
soluto

.
centros activos

a) adsorcin

b) reparto

fase mvil

grupo funcional

fase estacionaria slida

fase mvil

fase estacionaria slida

+
contrain

c) intercambio inico

d) exclusin

Separacin cromatogrfica
Amovil Aestacionaria KA = [As]/[Am] K A > KB > KC

A BC

ABC

. A+B+C

COLUMNA

DETECTOR

Parmetros cromatogrficos
A
Respuesta del detector

w 1/2 h B
1/2

9/10

h w 0,1 w

tM VM

tR VR

tiempo volumen

tM: tiempo muerto (tiempo requerido para que una especie no retenida alcance el detector) VM: volumen muerto (volumen de fase mvil que se requiere para eluir una especie no retenida. tR: tiempo de retencin (tiempo transcurrido desde la introduccin de la muestra hasta que el componente alcance el detector) VR: volumen de retencin (volumen de fase mvil que se requiere para eluir un soluto de la columna cromatogrfica) h: altura de pico. w: anchura de pico. w1/2: anchura de pico a la semialtura. w0.1: anchura de pico a un dcimo de la altura.

Teora de platos 1

Teora de platos 2

Difusin por turbulencia

A = dp

= cte. (dimensiones, geometra, etc.) dp = dimetro medio de las partculas

Difusin longitudinal
perfil de concentraciones

fase mvil

B = 2 DM

= cte. (caractersticas del relleno) DM = coeficiente de difusin en la fase mvil

Resistencia a la transferencia de masa

Fase mvil

Equilibrio
Fase estacionaria

Fase mvil

No equilibrio
Fase estacionaria

Ecuacin de Van Deemter

Resolucin

Factores extra-columna
Introduccin de la muestra:

Rpida y capa de pequeo espesor (papel y capa fina: gota pequea)

Volumen muerto:

el existente entre el punto de inyeccin y de deteccin, excepto el volumen ocupado por la fase estacionaria.

Resumen: Deben minimizarse los espacios muertos y las dimensiones de los tubos. La muestra deber aplicarse en una zona estrecha y deber procurarse que penetre en la columna antes de mezclarse con el eluyente.

Cromatografa y anlisis qumico

ANALISIS CUALITATIVO: tR o VR Aplicaciones limitadas (Presencia o ausencia de componentes en mezclas que contengan un nmero limitado de especies de los que se conozca su identidad) ANALISIS CUANTITATIVO altura de pico: necesidad de controlar rigurosamente la temperatura, caudal de eluyente y velocidad de inyeccin de la muestra. rea de pico: muy utilizado integradores electrnicos picos simtricos: altura x anchura a al semialtura planimetra gravimetra