PRCTICA N 6 Extraccin y Separacin Cromatogrfica De Pigmentos Fotosintticos 1.

1 Marco terico La clorofila es el pigmento verde que est presente en las especies vegetales fotosintticas. No se encuentra difundida en el citoplasma, sino en los cloroplastos. Estos que son de formas variadas, estn constituidos por una trama de estructura proteica sobre la cual estn fijados los pigmentos fotosintticos, clorofila y pigmentos accesorios. Estos pigmentos presentan un grado diferente de solubilidad en los disolventes lo que permite su separacin cuando una solucin de las mismas asciende por capilaridad a travs de una tira de papel poroso (papel de cromatografa o de filtro) dispuesta verticalmente sobre una pelcula de disolventes orgnicos (por ejemplo etanol-bencina), ya que las ms solubles se desplazarn a mayor velocidad, pues acompaarn fcilmente al disolvente a medida que ste asciende. Las menos solubles avanzarn menos en la tira de papel de filtro. Aparecern, por tanto, varias bandas de diferentes colores que estarn ms o menos alejados de la disolucin alcohlica segn la mayor o menor solubilidad de los pigmentos. Estas bandas poseern diferente grosor, dependiendo de la abundancia del pigmento en la disolucin. 1.2 Competencias Extraer los pigmentos fotosintticos y separarlos mediante la tcnica de cromatografa en papel. 1.3 Materiales y equipos Mortero Embudo Matraz Papel de filtro Placa Petri Tubo de ensayo Gradillas Alcohol 96 Bencina Hojas de espinaca

1.4 Procedimiento a. Lavar las hojas de espinacas, retirar los nervios y ponerlas en un mortero, junto con el alcohol. b. Triturar la mezcla hasta que las hojas se decoloren y el disolvente adquiera un color verde intenso. Filtrar con un embudo y papel de filtro. c. Colocar el filtrado en una placa Petri y sobre ella colocar un rectngulo de unos 15 centmetros de ancho por 10 centmetros de alto doblado en V (papel filtro) para que se mantenga en pie sobre la placa de Petri. d. Dejar as el montaje y esperar un tiempo breve. Los pigmentos se irn separando segn su adsorcin. 1.5 Resultados Observar en el papel donde se ha efectuado la cromatografa hasta cuatro bandas o zonas (figura A), que corresponden a los distintos pigmentos fotosintticos presentes en las hojas. Segn su grado de solubilidad con los solventes se reconocen estas bandas y en este orden: a) clorofila b b) clorofila a c) xantofila d) carotenos Dibujar en cada caso la placa con los resultados obtenidos. 1.6 Cuestionario a. b. Qu es el Rf y como se aplica para la cromatografa en capa fina? Qu otras variantes de esta tcnica pueden emplearse para la separacin de sustancias?

Figura A