1.

La intolerancia a la glucosa es una forma de prediabetes en la que el individuo tiene valores elevados de glucosa en sangre sin llegar a los valores de una diabetes mellitus tipo 2. El trmino comenz a emplearse en 1979 cuando la Organizacin Mundial de la Salud y otros grupos internacionales reemplazaron los trminos borderline, diabetes qumica o diabetes mellitus asintomtica.1 En 1997 un comit de expertos pertenecientes a la Asociacin Americana de Diabetes recomendaron los siguientes criterios para el diagnstico de una intolerancia a la glucosa:

Una glucosa en ayunas entre 100 y 125 mg/dl, y con niveles >140 mg/dl de glucosa posprandial (medidos a las 2 horas despus de una toma de 75 g de glucosa por va oral) pero sin llegar a

2.

Determinacin de glucosa: mtodos. De todo lo anterior se deduce que para el diagnstico de la diabetes es necesario determinar la glucemia, pero cmo se cuantifica el nivel de glucosa en una muestra? Los mtodos para determinar la concentracin de glucosa se clasifican en dos grandes grupos: a) Mtodos basados en el poder reductor de los hidratos de carbono (reaccin de Benedict, mtodo de la o-toluidina) b) Mtodos enzimticos: son los ms utilizados, utilizan enzimas como reactivos (ej. glucosa oxidasa, hexoquinasa) a fin de aumentar la especificidad. Los dos mtodos que vamos a citar se pueden utilizar para determinar la glucosa en muestras de suero, orina y lquido cefalorraqudeo b.1.) Mtodo de la hexoquinasa: Es el mtodo de referencia y consiste en dos reacciones acopladas.

En la primera reaccin (especfica), catalizada por la enzima hexoquinasa, se fosforila la glucosa formndose glucosa 6-fosfato. La glucosa 6-fosfato, en una reaccin posterior (reaccin indicadora), se transforma en 6-fosfogluconato producindose NADPH (1 mol por cada molcula de glucosa). La produccin de NADPH origina un aumento de absorbancia a 340nm. El incremento de absorbancia a esta longitud de onda ser directamente proporcional a la concentracin de glucosa.

b.2.) Mtodo de la glucosa oxidasa: Al igual que el anterior consiste en dos reacciones acopladas

En la primera reaccin (reaccin especfica), catalizada por la enzima glucosa oxidasa (GOD), se oxida la glucosa y se genera H2O2. En la segunda reaccin (reaccin indicadora), la enzima peroxidasa (POD) cataliza la descomposicin del H2O2 lo que provoca oxidacin de un cromgeno que pasa de su forma reducida (incolora) a su forma oxidada (coloreada). La aparicin del cromgeno oxidado se evala mediante un espectrofotmetro y ser directamente proporcional a la concentracin de glucosa en la muestra. Este mtodo (GOD/POD) presenta como desventaja que muchos compuestos presentes en el suero u orina (bilirrubina, cido ascrbico y cido rico) pueden ser oxidados por el H2O2 producido en la reaccin catalizada por la enzima GOD y por tanto interfieren en el resultado (se da un resultado superior al real). Tambin se puede cuantificar la concentracin de glucosa de la muestra utilizando slo la primera reaccin y evaluando la cantidad de oxgeno consumido mediante un electrodo de oxgeno (lo estudiaremos ms adelante). La cantidad de glucosa en la muestra es directamente proporcional a la cantidad de oxgeno consumido. Aspectos prcticos a considerar cuando se analiza la glucemia: 1. Centrifugar la sangre lo antes posible: los eritrocitos y leucocitos consumen glucosa, por tanto, si el contacto con las clulas es prolongado se pueden dar resultados falsamente bajos (a T ambiente puede incluso desaparecer al cabo de 6h). Actualmente, existen tubos con separador de suero que funciona como una interfase entre las clulas y el suero despus de la centrifugacin, haciendo que no sea necesario separar el suero en otro tubo. 2. Si no se van a analizar inmediatamente, se puede refrigerar la muestra o aadir un conservante ej. Fluoruro sdico. 3. La concentracin de glucosa en suero refrigerado es estable durante 3 das.

5. Otras pruebas: anlisis de protenas glicosiladas, pptido C, insulinemia y determinacin de cuerpos cetnicos, glucosuria. 5.1. Anlisis de protenas glicosiladas Las protenas que estn en contacto con concentraciones elevadas de glucosa durante un tiempo prolongado se glucosilan (unin covalente de glucosa a las protenas) generando protenas glicosiladas o glucosiladas. 6 La glucosilacin depende de la concentracin de glucosa y de la vida media de las protenas. Puesto que la hiperglucemia es caracterstica de la diabetes, la determinacin de protenas glucosiladas se utiliza como indicador restrospectivo del control de la diabetes. En el laboratorio clnico se suelen analizar la glucohemoglobina y fructosamina. 5.1.1. Glucohemoglobina La glucohemoglobina es una fraccin de hemoglobina A (principalmente A1C) unida, de forma irreversible a la glucosa, que representa, en condiciones fisiolgicas un 6-8% de la hemoglobina total. La vida media de la hemoglobina es de aproximadamente 2 meses, por tanto su cuantificacin nos puede indicar el cumplimiento del tratamiento o el grado de control de la diabetes durante ese perodo de tiempo (la elevacin de glucohemoglobina coincide con elevaciones de la glucemia en los dos meses anteriores). Es una prueba muy especfica pero que no se utiliza para el diagnstico puesto que es poco sensible. Los valores de personas sanas se solapan con los de aquellos que tienen intolerancia a la glucosa y los de stos con los de los pacientes diabticos. En general valores superiores al 12% indican un control deficiente de la diabetes. La determinacin se suele hacer con bemolizado de eritrocitos, para ello: 1. La sangre se recoge con EDTA como anticoagulante. 2. Se centrifuga (ej. 5 min a 3000 rpm) 3. El sedimento (pellet) se resuspende en solucin salina (ClNa 0.9%) y se vuelve a centrifugar. Este paso se repite varias veces (se lava el sedimento). 4. Se lisan los eritrocitos ej. se aade agua destilada y cloroformo se agita enrgicamente y se centrifuga de nuevo. El sobrenadante es el bemolizado de eritrocitos. Los mtodos de determinacin ms utilizados son: 1. Mtodos cromatogrficos (HPLC, cromatografa de intercambio inico, cromatografa de afinidad). Ver el apndice del tema 2. Mtodos inmunolgicos con lectura por turbidimetra (se estudiar en el tema siguiente). 3. Electroforesis (se estudiar en el tema siguiente).

5.1.2. Fructosamina Las protenas plasmticas tambin se glican y, puesto que la vida media de la albmina y protenas plasmticas oscila entre 17 y 30 das, su determinacin nos informa de la tasa de glucemia del paciente en las 23 semanas previas a la determinacin (perodo ms corto que la glucohemoglobina). Puesto que la albmina es, con diferencia, la protena srica ms abundante realmente se evala la albmina glucosilada. 7 Mtodo de determinacin: mtodo colorimtrico (espectrofotomtrico) basado en la reduccin del colorante nitroazul de tetrazolio (por accin de la fructosamina).

5.2. Pptido C El pptido C es el resto de cadena polipeptdica que se escinde de la proinsulina al convertirse en insulina. Su aparicin en sangre nos indica que las clulas secretoras de insulina son funcionales. Puesto que los preparados comerciales de insulina no llevan pptido C, permite conocer por ej. si una hiperinsulinemia es de origen exgeno o endgeno. Adems, es frecuente que los pacientes diabticos desarrollen anticuerpos antiinsulnicos que interfieren en los ensayos inmunolgicos para la cuantificacin de insulina, por tanto, se utiliza como alternativa al anlisis de insulina para valorar el funcionamiento de las clulas . Mtodo de determinacin: Inmunoanlisis (lo estudiaremos ms adelante en el tema) ej. RIA (radioinmunoanlisis). 5.3. Insulinemia La determinacin de insulina no suele hacerse de forma habitual puesto que su presencia no asegura que sta sea funcional. Sin embargo, s es til en las hipoglucemias (ej. insulinemia elevada cuando la glucemia es baja puede indicar la existencia de un tumor productor de insulina). Mtodo de determinacin: Inmunoanlisis (lo estudiaremos ms adelante en el tema) ej. RIA o EIA (enzimoinmunoanlisis).

5.4. Determinacin de cuerpos cetnicos En la diabetes, la deficiencia de glucosa en las clulas, activa el catabolismo de los cidos grasos generando mucha acetilCoA. El exceso de acetilCoA da lugar a la produccin de cuerpos cetnicos (cetognesis): acetoactico, y sus derivados acetona y -hidroxibutirato que aparecern en sangre (cetonemia) y orina (cetonuria).

Es una prueba complementaria que corrobora el diagnstico de la diabetes tipo I. Determinacin: Aunque existen otros mtodos (ej. enzimticos), el ms empleado es su determinacin colorimtrica mediante la prueba del nitrofrerricianuro de 8 sodio. Este procedimiento no detecta -hidroxibutirato y es mucho menos sensible para la acetona que para acetoactico. El fundamento de este mtodo consiste la aparicin de un color rosado o purpreo al reaccionar, fundamentalmente el acetoactico, con ferricianuro de sodio en medio alcalino. La prueba se puede llevar a cabo con una tira reactiva o una tableta slida. Muestra: suero, plasma u orina. Precauciones: Las orinas coloreadas o las muestras hemolizadas pueden dar falsos negativos. La contaminacin bacteriana de la orina aumenta la desaparicin. La acetona es voltil por tanto, la muestra debe refrigerarse. 5.5. Glucosuria La glucosa se filtra en el glomrulo pero es reabsorbida en los tmulos renales con lo que vuelve de nuevo a la sangre y no debe aparecer en orina. Sin embargo, si la glucemia es superior a 160mg/dL se supera el umbral renal para la glucosa y sta aparece en la orina (glucosuria). La glucosuria tiene escaso valor puesto que es poco especfica ej. tambin aparece en patologas cardiacas o renales Determinacin: se utiliza el mtodo GOD/POD en tiras reactivas.

3.

La glucosa es utilizable por todas las clulas, siendo algunas de ellas absolutamente dependientes de la misma para su correcto funcionamiento (caso de las clulas del sistema nervioso, clulas sanguneas, etc). La concentracin de glucosa en sangre debe mantenerse dentro de estrechos lmites que oscilan entre los 60 y los 100 mg/dL. Inmediatamente despus de una comida rica en hidratos de carbono, la glucosa absorbida a la sangre produce una secrecin rpida de insulina por el pncreas. Por su parte, la insulina ocasiona de inmediato la captacin, almacenamiento y consumo de la glucosa en casi todos los tejidos del cuerpo, pero sobre todo en msculos, tejido adiposo e hgado.

La insulina es la hormona producida por el pncreas, responsable de que la glucosa penetre en las clulas del cuerpo para que sea transformada en energa. La glucosa es incorporada al organismo cuando nos alimentamos y se almacena en el en hgado como glucagn o en los tejidos adiposos. Cuando las clulas no tienen suficiente energa para funcionar la solicitan al hgado o a los tejidos. Es en ese momento cuando se necesita a la insulina y se activa el metabolismo. La insulina debe acompaar a la glucosa por el torrente sanguneo para abrirle el paso a la clula que la necesita. Cuando la cantidad de insulina en la sangre no es suficiente para que se realice el metabolismo de la glucosa esta se acumula provocando graves problemas como la diabetes. La insulina interviene en el metabolismo con la glucosa cada vez que es necesario recargar la energa de las clulas. Esto puede ser cuando se est en ayunas, cuando se hace ejercicio o cuando se termina de comer. Es muy importante que la insulina y su metabolismo sean suficientes para recargar todas las clulas y ofrecerles toda la energa que necesitan as como tambin controlar la cantidad de glucosa que corre en el torrente sanguneo o se acumula en los sitios de reserva. Si la insulina no es suficiente o su metabolismo no se realiza de forma correcta seguramente se notar en la salud de la persona provocando diferentes sntomas que pueden ir desde el cansancio o las ganas de tomar mucha agua hasta el hormigueo en los pies y la dureza de las venas.

4. Hiperglucemia La hiperglucemia es el aumento de la concentracin de glucosa en sangre por encima de los valores mximos normales, y no siempre se acompaa de sntomas. Recordemos que la glucemia normales60 a 110 mg/dl y diabetes es cuando la glucemia en ayunas ,en dos oportunidades, es igual o mayor de 126 mg/dloglucemias en cualquier momento del da de200 oms. El objetivo del tratamiento es mantener la glucemia en valores tan cercanos a los normales. Pero puede existir diversos factores que interfieran con este objetivo.
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Causas que pueden producir Hiperglucemia: - Abusos en la dieta. - Insuficientes dosis de insulina o de hipoglucemiantes orales. - Enfermedades: infecciones (gripe, neumona, infeccin urinaria, dentarias, abcesos, etc.) Cirugas Accidentes (traumatismos, quemados, etc.) Otras enfermedades importantes como las cardacas. - Tensin Emocional. - Medicaciones, por ejemplo los corticoides. La hiperglucemia puede complicarse con la aparicin de cuerpos cetnicos en sangre. Esta complicacin metablica se denomina cetoacidosis diabtica.

Hipoglucemia
Es una afeccin que ocurre cuando el nivel de azcar en la sangre (glucosa) est demasiado bajo. El azcar en la sangre por debajo de 70 mg/dL se considera bajo. El azcar sanguneo a este nivel o por debajo puede causarle dao.

Causas
La hipoglucemia ocurre cuando:

El azcar (glucosa) del cuerpo se agota con demasiada rapidez. La glucosa es liberada en el torrente sanguneo con demasiada lentitud. Se libera demasiada insulina en el torrente sanguneo.

La insulina es una hormona que reduce el azcar en la sangre y es producida por el pncreas en respuesta al aumento de los niveles de glucosa sangunea. El azcar bajo en la sangre se observa ms comnmente en personas con diabetes que toman insulina u otros medicamentos para controlarla. Los bebs que nacen de madres con diabetes pueden tener cadas drsticas del nivel de azcar en la sangre.

La hipoglucemia en personas que no tienen diabetes puede ser causada por:

Consumo de alcohol Insulinoma, un raro tumor del pncreas, que produce demasiada insulina Falta o deficiencia de una hormona, como cortisol u hormona tiroidea Insuficiencia cardaca, renal o heptica grave o infeccin generalizada Algunos tipos de ciruga para bajar de peso