ORTHOMIXOVIRUSURI-V.

GRIPALE A, B, C

GRIPA
FEBRA ASTENIE CEFALEE MIALGII TUSE NEPRODUCTIVA FARINGITA SEMNE OCULARE RINITA

Diagnostic virusologic obligatoriu cu identificarea subtipului viral (hemaglutinoinhibare)!

OMS- infectii gripale-anual pe glob: 5-15% din totalul populatiei 3-5 milioane cazuri de infectii severe, 250.000 - 500.000 decese

ORTHOMYXOVIRIDAE
ARNss(-) segmentat -8minigene+ transcriptaza

tip A, B, C : NP, M subtipuri: HA si NA 16 tipuri HA si 9 NA tip/subtip/ loc, an izolare/nr. pasaje- A/H5N1/Guangdong/1996/1

HEMAGLUTININA

Virusul gripal tip A

Receptorul

Uman
Aviar; ecvin Suin

SA-2-6-beta Gal
SA-2-3-beta Gal SA-2-3- beta Gal si SA-2-6-beta Gal REASORTANTI

determinanti antigenici implicati in virus neutralizare- evidentierea izolarii virale- hemaglutinare/ hemadsorbtie si identificarea subtipului viral- hemaglutinoinhibare cu antiseruri specifice

hemadsorbtie

hemaglutinare

hemaglutinoinhibare

Proteaze celulare - clivarea HA si activarea infectivittii -schimbari conformationale expunere peptid N-terminal HA2

endocitoza mediata de receptor complex ribonucleoproteic transportat in nucleu

complex ribonucleoproteic transportat in nucleu

Decapsidare- Proteina virala M- rol de canal ionic

INHIBITORII DECAPSIDARII- AMANTADINA SI RIMANTADINA

blocarea canalul ionic al proteinei virale M2, reducerea efectul acesteia asupra decapsidrii si modificrii pH-ului din celulele infectate

Neuraminidaza- faciliteaza eliberarea virionilor progeni si previne agregarea acestora la nivelul membranei celulare, favorizeaza diseminarea infectiei

INHIBITORII DE NEURAMINIDAZA -analogi de acid N-acetil neuraminic (receptorul pentru virusurile gripale), blocheaz situl activ al neuraminidazei OSELTAMIVIR (Tamiflu) administrat pr os, 75 mg x 2/zi ZANAMIVIR(Relenza) -10 mg (2 inhalatii de 5 mg/zi)

V. GRIPALE A: VARIABILITATE
DRIFT (alunecare) ANTIGENIC- mutatii punctiforme la nivelul genelor pt HA si NA- EPIDEMII

VARIABILITATEA VIRUSURILOR GRIPALE tip A

SHIFT ANTIGENIC (comutare)-aparitia unor noi subtipuri virale- PANDEMII
1. reasortarea genic ntre tulpini gripale de la specii diferite 2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificri conformationale in
structura hemaglutininei pentru traversarea barierei de specie: Toate virusurile gripale umane au singur reziduu bazic de arginin la nivelul sitului de clivare a hemaglutininei. Achizitia unor aminoacizi bazici suplimentari (situri de clivare multiple) - permite si altor proteaze s cliveze hemaglutinina - alterarea tropismului tisular (afectarea tesutului cerebral, miocardic si vaselor de snge) si cresterea virulentei

3.re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

La psrile domestice gripa poate evolua n dou forme: -minor (LPAI) sau asimptomatic, - afecteaz productia ou in cresctorii - majora (HPAI), nalt contagioas, mortalitate 50-100% (aa bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

Psri acvatice slbatice (rate, gste, pescrusi)rezervorul natural al virusurilor gripale A

SHIFT ANTIGENIC
reasortarea genic ntre tulpini gripale de la specii diferite

Epiteliul traheal al suinelor are ambele tipuri de receptori SA-2,3Gal beta si SA-2,6Gal
beta

Porcii sunt infectati in vivo si in vitro cu virusuri aviare Replicarea continua a unui virus aviar la suine duce la selectia unor tulpini ce recunosc preferential receptorii umani Reasortanti virusuri suine si aviare pot infecta omul si determina infectii severe Transferul interspecii si reasortarea - stabilirea a 2 noi linii de tulpini suine din 1979

A/H1N1/ 2009 pandemic

414,000 cazuri confirmate de laborator
cca 5000 decese raportate OMS

Influenza A H1N1/2009 6 Minigene de la tulpinile porcine Nord America (reasortant 1998 suin/aviar/uman) si 2 de la tulpinile porcine izolate in Europa/Asia
Aceste tulpini au coexistat pentru mai mult de 10 ani Reasortarea actuala probabil la porc- gazda ramane totusi necunoscuta (supraveghere insuficienta; infectie asimptomatica la porc, reasortare recenta?)

Pandemii gripale
1918-H1N1 gripa spaniola -20-50 milioane decese Virus aviar 1957- H2N2 gripa asiatica-1-2 milioane decese reasortant 1968- H3N2 gripa Hong Kong -700,000 decesereasortant 1977- H1N1 gripa ruseasca-re-emergenta

SHIFT ANTIGENIC V GRIPALE A

transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om

La psrile domestice gripa poate evolua n dou forme: -minor (LPAI) sau asimptomatic, - afecteaz productia ou in cresctorii - majora (HPAI), foarte sever, nalt contagioas, cu mortalitate 50-100% (aminoacizi bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

Psri acvatice slbatice (rate, gste, pescrusi)rezervorul natural al virusurilor gripale A

SHIFT ANTIGENICPandemii gripale

1918-H1N1 gripa spaniola -20-50 milioane decese Virus aviar 1957- H2N2 gripa asiatica-1-2 milioane decese reasortant 1968- H3N2 gripa Hong Kong -700,000 decesereasortant 1977- H1N1 gripa ruseasca-re-emergenta

Conditii necesare izbucnirii unor pandemii

noutatea antigenica a virusului
1. reasortarea genic ntre tulpini gripale de la specii diferite 2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificri conformationale in structura hemaglutininei. 3. Re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

lipsa imunittii n populatia uman

facilitatea transmiterii interumane a noilor tulpini.

VACCINURI ANTIGRIPALE
VACCIN INACTIVAT CU VIRUS INTREG SAU SUBUNITAR -HA(1931-izolare in OGE, 1940- vaccin inactivat)
- Virus izolat in OGE- lichid alantoidian imbogatit, particule virale centrifugate in gradient de densitate pentru concentrare si purificare- inactivare cu formaldehida sau -propiolactona +/_ tratare cu detergent si purificare HA si NA- vaccin trivalent (3 subtipuri circulante prevalente) - Petrescu si colab., 1980 - NIVGRIP- administrarea intranazal a vaccinului inactivat preparat cu virusul ntreg prioritate romneasc.
Fiecare doz de vaccin contine hemaglutinina corespunztoare a 10 miliarde de virioni n cazul cultivrii virusului pe OGE (15 ug per 0.5 ml) . Cantitatea de neuraminidaz nu este standardizat -protein labil n cursul procesului de preparare si stocare a vaccinului.

VACCIN VIU ATENUAT CU TULPINI RECI

-Tulpina master atenuata, adaptata pentru crestere la 250 C (A /H2N2 /Ann Arbor/6/60 si B/Ann Arbor/1/66) in care se insera genele pentru HA/NAmutatii stabile in genele complexului polimerazic PA, PB1, and PB2, propagate n pasaje seriate la temperaturi din ce n ce mai sczute pe celule renale de pui de gin SPF (specific pathogen free)

VACCINURI ANTIGRIPALE REACTUALIZATE ANUAL

PB2 PB1 PA HA NA NP M NS

X
PB2 PB1 PA HA NA NP M NS

PB2 PB1 PA HA NA NP M NS

TULPINA MATCA
PR8 (H1N1 A/PR/8/34) atenuata, nonpatogena, incapabila de replicare la om

TULPINA NOUA ANTIGENIC

REASORTANT
virus cu 6 gene PR8, dar HA si NA tulpinii circulante

Criteriu
Cale de administrare Vrsta recomandat Replicarea virusului la vaccinati Imunizarea contactilor Risc aparitie recombinanti Administrarea altor vaccinuri simultan* Administrare la imunosupresati**

Vaccinuri vii
Intra-nazal, bucal 5-49 ani Da Da Da Da Nu

Vaccinuri inactivate
Intra-muscular Peste 6 luni Nu Nu Nu Da Da

GRUPE DE RISC pentru care se recomanda vaccinare anuala

Persoane cu risc nalt de complicatii copii < 2 ani (rate de spitalizare de 2.3 ori > ca cei 2- 4 ani, complicatii mai frecvente) adulti > 65 ani femeile gravide n trimestrele II si III de sarcin, 2 saptamani postpartum, inclusiv dupa pierdere sarcina pacienti institutionalizati adulti si copii cu boli cardiace (cu exceptia HTA) si pulmonare cronice (inclusiv astm), boli metabolice (inclusiv diabet zaharat), disfunctii hepatice, renale, hematologice imunosupresie (inclusiv cei HIV pozitivi) Obezitate (BMI 30-35), mai ales obezitate morbida (BMI )>40- virusul A/H1N1 2009
Persoane care pot transmite infectia gripal celor cu risc de complicatii personalul medico-sanitar angajatii institutiilor psihiatrice si cei ce ngrijesc bolnavi cronici membrii familiilor persoanelor la risc

Persoane la care vaccinarea poate fi recomandat persoane care cltoresc n zone cu epidemii de grip persoane implicate n servicii comunitare esentiale copiii din gradinite si scoli, studentii, militarii

GENETICA INVERSA

Vaccin impotriva H5N1 (virus aviar ce a fost transmis la om, doar prin contact direct cu pasarie bolnave, fara cazuri secundare interumane) - reasortant H5N1/PR8- in plasmide cu cDNA pentru 6 gene din tulpina de referinta H1N1 se insera cDNA al genelor HA, NA din izolate din Asia, dupa deletie sit de clivare polibazic pentru generare tulpina nonvirulenta

UP TO DATE
http://ec.europa.eu/health/ph_threats/com/Influenza/h1n1_en.htm http://ec.europa.eu/health-eu/newsletter/influenza/m http://www.emea.europa.eu/influenza/vaccines/home.htm http://www.euro.who.int/surveillance http:// www.cdc.gov/flu/weekly http://www.ecdc.eu.int/ http://www.oie.int Organizatia Mondiala Pentru Sanatatea Animala www.who.int/csr/disease/avian-influenza http://www.efsa.eu.int/science/- The European Food Safety Authority http://europa.eu.int/comm/food/animal/diseases/controlmeasures/avian/ avain_influenza_22092005.pdf

Taubenberger et al in Nature ( VOL. 437 October 6th 2005 ) http://www.nature.com/news/2005/051003/full/437794a.html http://www.nature.com/news/2005/051003/full/nature04230.html Tumpey et al in Science (2005; 310: 77-80).