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XXII CONGRESO NACIONAL DE HIDRULICA

ACAPULCO, GUERRERO, MXICO, NOVIEMBRE 2012

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ANLISIS MICROBIOLGICO EN EL ARRANQUE DE UNA PLANTA DE LODOS

ACTIVADOS

Colorado Guevara Sandra Luz1 Leal Ascencio Mara Teresa1 Castillo Gonzlez Eduardo1 Gonzlez Medina Adriana Carolina1
(1)Facultad

de Ingeniera Qumica, UV

Circuito Gonzalo Aguirre Beltrn s/n, Zona Universitaria, Xalapa, Veracruz, CP. 91000. sandy_colorado@hotmail.com, tleal@uv.mx, ecaspol@hotmail.com, lipscherry_ady@hotmail.com Palabras clave
Lodos activados, microbiologa, protozoarios. dinmica y fundamental para el tratamiento pues cada especie tiene su importancia para el buen funcionamiento del proceso (Davies, 2005; Santos, 2009). Las bacterias son las que llevan a cabo la mayora de las transformaciones de la materia orgnica contenida en los efluentes. Sin embargo, los componentes de la microfauna consistentes en protozoarios y micrometazoarios (nemtodos y rotferos), tambin juegan un papel importante debido a que mantienen el equilibrio bacteriano de una comunidad, adems de la eliminacin de E.coli, reduccin de DBO5, floculacin y remocin de slidos suspendidos (Pellizzaro et al., 2005). Entre la puesta en marcha y la estabilizacin de una planta de tratamiento de aguas residuales se producen sucesiones en las poblaciones de microorganismos. En la fase inicial dominan las bacterias dispersas y los protozoos que entran con el influente. Luego aumenta el nmero de bacterias y aparecen los ciliados nadadores libres. Los flculos se van formando y disminuye el nmero de bacterias libres y de protozoos flagelados. Se desarrollan los ciliados fijos y reptantes con estructuras bucales eficaces para la captura de alimento, estos acaban por desplazar a los ciliados nadadores. Ms tarde, aparecen los metazoos por encontrarse en el final de la cadena (Vilaseca, 2001). Cada tipo de planta de tratamiento requiere un arranque y operacin especficos para obtener el efluente de diseo. La eficacia en los procesos de lodos activados depende de la interaccin de las variables de diseo, el tipo de microorganismos y las condiciones ambientales. El operador de una planta de tratamiento de aguas residuales debe controlar estas variables, pues la presencia de ciertos microorganismos durante la etapa de arranque es un indicador relevante para la estabilizacin y el adecuado funcionamiento de la misma (Romero, 2004). Por lo anterior, el objetivo de este trabajo es realizar un anlisis microbiolgico para determinar el proceso de arranque en una planta de tratamiento de descargas hospitalarias. La planta de tratamiento funciona a base de lodos activados, es de tipo convencional y est diseada para un gasto de operacin de 0.34 lps. Las operaciones unitarias incluyen crcamo de bombeo, pretratamiento, sedimentador primario, tanque de aireacin, sedimentador secundario y tanque de cloracin. La planta de tratamiento fue inoculada quince das previos al inicio del muestreo, con lodos procedentes de una planta de tratamiento de descargas de una industria lctea.

Resumen
El arranque de un tratamiento biolgico es un periodo para que los microorganismos inoculados o existentes en el reactor se aclimaten, acostumbren, desenvuelvan y se multipliquen. En una planta de tratamiento de aguas residuales, la presencia de ciertos microorganismos es un indicador relevante para el adecuado funcionamiento de la misma. Por lo anterior, el objetivo del presente trabajo es realizar un anlisis microbiolgico para determinar el proceso de arranque en una planta de tratamiento de descargas hospitalarias, a base de lodos activados, ubicada en la ciudad de Xalapa, Veracruz. Para ello, se tomaron muestras simples semanalmente en el lodo activado, el retorno de lodos y el efluente de la planta. Se utilizaron los mtodos de observacin directa en fresco y tincin de Gramm para la identificacin de microorganismos. Los resultados mostraron que durante las primeras tres semanas, la concentracin de microorganismos deseables en el sistema fue baja predominando la presencia de aquellos no deseables (protozoarios flagelados). De la semana cuatro a la siete se increment la densidad de microorganismos deseables: bacterias gramm negativas, protozoarios ciliados y rotferos, as como la disminucin de los no deseables. Finalmente, a partir de la semana ocho, aument considerablemente la densidad de microorganismos deseables presentndose las mejores condiciones de operacin del sistema de tratamiento. El anlisis microbiolgico result ser un bioindicador eficiente para establecer la duracin de la etapa de arranque en la planta de tratamiento la cual concluy en la semana siete, as como para diagnosticar ciertas condiciones de operacin de la misma.

Introduccin
El sistema de lodos activados es uno de los tratamientos biolgicos ms empleado (Da Motta et al., 2003) debido a la alta eficiencia alcanzada, asociada con una pequea rea de despliegue requerida, en comparacin con otros sistemas (Pellizzaro et al., 2005). El lodo activado consiste en una compleja asociacin de microorganismos compuesta por bacterias, protozoarios, hongos y micrometazoarios que oxidan y mineralizan la materia orgnica contenida en los efluentes. La comunidad establecida en este sistema es

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Materiales y mtodos
Para el anlisis microbiolgico, se tomaron 12 muestras simples en el lodo activado (tanque de aireacin), 10 en los lodos de retorno y 5 en el efluente de la planta de tratamiento de aguas residuales durante los meses de marzo a julio de 2011. Las muestras simples fueron tomadas semanalmente a las 8 de la maana en frascos de 250 mL previamente esterilizados en autoclave durante 20 minutos. stas se preservaron a 4C para su transporte y posterior anlisis en el laboratorio. Para la identificacin de microorganismos se utilizaron los mtodos de observacin directa en fresco (10x y 40x) y tincin de Gramm (APHA, 1995) en un microscopio marca Nikon. Los grupos de microorganismos a identificar fueron bacterias, protozoarios, rotferos, nemtodos y algas.

media de la semana dos a la cuatro y posteriormente, esta concentracin decreci alcanzando una densidad baja a partir de la semana cinco.
Densidad relativa de protozoarios identificados en el lodo activado Alta
Protozoarios ciliados

Media Baja
Protozoarios flagelados

Resultados
En la Figura 1 se muestra la densidad relativa de bacterias y algas presentes en el lodo activado durante el periodo de monitoreo. En ella se observa que el comportamiento de las bacterias gramm positivas present una alta densidad en la semana uno, para disminuir a una baja densidad de la semana dos a la seis y ausencia a partir de la semana siete, con formas de cocos y bacilos. Las bacterias gramm negativas tuvieron una baja densidad de la semana uno a la tres, posteriormente, esta densidad fue media de la semana cuatro a la seis, aumentando a una alta densidad a partir de la semana siete, presentndose formas de cocos y bacilos. Las algas mostraron ausencia en la semana uno y no fueron determinadas en la semana dos, sin embargo de la semana tres a la siete la densidad de estos microorganismos fue baja, aumentando a partir de la semana ocho hasta alcanzar una densidad media.
Densidad relativa de bacterias y algas identificados en el lodo activado Alta Bacterias gramm positivas Media Baja Bacterias gramm negativas Algas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Muestreo

Figura 2. Densidad relativa de protozoarios en el lodo activado.

En la Figura 3 se muestra la densidad de rotferos y nemtodos en el mismo punto de evaluacin. En esta figura se puede observar que los rotferos presentaron ausencia en la semana uno, la densidad fue baja de la semana dos a la siete, aumentando a una densidad media en la semana ocho, para incrementar a una alta densidad a partir de la semana nueve. Los nemtodos presentaron ausencia en la semana uno y no se determinaron en la semana dos, a partir de la semana tres su densidad fue baja y se mantuvo constante.
Densidad relativa de rotferos y nemtodos identificados en el lodo activado

100 80 60

Alta

Rotferos Nemtodos

Media

40
Baja

20 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Muestreo Figura 3. Densidad relativa de rotferos y nemtodos en el lodo activado.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Muestreo Figura 1. Densidad relativa de bacterias y algas en el lodo activado.

En la Figura 2 se muestra el comportamiento de la densidad relativa de protozoarios en el lodo activado durante el periodo de muestreo; en ella, los protozoarios ciliados presentaron ausencia en la semana uno y una baja densidad de la semana dos a la cuatro; de la semana cinco a la siete su presencia aument a una densidad media y, a partir de la semana ocho, la densidad fue alta. Los protozoarios flagelados mostraron ausencia en la semana uno y tuvieron una concentracin

En la Figura 4 se muestra la densidad de bacterias y algas en el retorno de lodos durante el periodo de evaluacin. Se observ que las bacterias gramm positivas tuvieron una concentracin baja de la semana uno a la seis, decreciendo hasta llegar a su ausencia a partir de la semana siete. Las bacterias gramm negativas mostraron una densidad baja de la semana uno a la cuatro, media de la cinco a la siete y alta a partir de la semana ocho. Las algas mostraron ausencia en la

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semana uno y no se determinaron en las semanas dos y tres; de la cuatro a la siete tuvieron una densidad baja, aumentando hasta llegar a una densidad media en las ltimas tres semanas.
Densidad relativa de bacterias y algas identificadas en lodos de retorno Alta 100

determinaron en las semanas dos, tres y diez, presentando una concentracin baja de la semana cuatro a la nueve.
Densidad relativa de rotferos y nemtodos identificados en lodos de retorno Alta 100

80 60
Media

40
Baja

20 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Muestreo

Bacterias gramm positivas Bacterias gramm negativas Algas

80
Media Baja

60 40 20 0

Rotferos Nemtodos

9 10

Muestreo Figura 6. Densidad relativa de rotferos y nemtodos en el lodo de retorno.

Figura 4. Densidad relativa de bacterias y algas en el lodo de retorno.

En la Figura 5 se muestra el comportamiento de la densidad de protozoarios en el lodo de retorno durante el periodo de monitoreo, en sta los protozoarios ciliados presentaron ausencia en la semana uno y no se determinaron en la semana dos; mostraron una densidad baja en las semanas tres y cuatro, aumentando a una concentracin media a partir de la semana cinco. Los protozoarios flagelados mostraron ausencia en la semana uno y no se determinaron en la semana dos, a partir de la semana tres, su densidad se mantuvo baja en el periodo de anlisis.
Densidad relativa de protozoarios identificados en lodos de retorno Alta 100

En las Figuras 7 y 8 se muestra la densidad relativa de los microorganismos identificados en el efluente de la planta durante las semanas de evaluacin. Se puede observar que la presencia de la mayora de los microorganismos identificados en el efluente de la planta, bacterias gramm positivas y protozoarios ciliados y flagelados, fue baja excepto de rotferos y bacterias gramm negativas, los cuales alcanzaron una densidad alta y media respectivamente. Los nemtodos y algas estuvieron ausentes en algunas muestras realizadas. Cabe mencionar que a diferencia de los otros puntos de muestreo, en el efluente de la planta se incluy determinar amebas, que presentaron una densidad media.
Densidad relativa de bacterias y algas identificadas en el elfuente de la planta

80 60
Media Protozoarios ciliados Protozoarios flagelados

Alta 100

80 60
Media

Bacterias gramm positivas Bacterias gramm negativas Algas 8 9 10 Muestreo 11 12

40
Baja

20 0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Muestreo Figura 5. Densidad relativa de protozoarios en el lodo de retorno.

40
Baja

20 0

En la Figura 6 se observa la densidad relativa de rotferos y nemtodos en el retorno de lodos durante el periodo de anlisis. Los rotferos presentaron ausencia en la semana uno y no se determinaron en las semanas dos y tres, de la semana cuatro a la siete su densidad fue baja, aumentando hasta llegar a una densidad alta en las ltimas dos semanas. Los nemtodos mostraron ausencia en la semana uno y no se

Figura 7. Densidad relativa de bacterias y algas en el efluente de la planta de tratamiento.

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Densidad retaliva de protozoarios, rotferos, nemtodos y amebas identificados en el elfuente de la planta Alta 100

80
Media

60 40

Protozoarios ciliados Protozoarios flagelados Rotferos Nematodos Amebas

Baja

20 0
8 9 10 Muestreo Figura 8. Densidad relativa de protozoarios, rotferos, nemtodos y amebas en el efluente de la planta de tratamiento. 11 12

En la Figura 9 se muestran los nombres de algunas de las especies de los grupos de microorganismos identificados.

presencia de protozoarios ciliados libres o fragmentos de los mismos (Vilaseca, 2001). Lo anterior confirmaba que la planta se encontraba en etapa de arranque pues el proceso no presentaba las mejores condiciones para su desarrollo, ocasionado por bajos niveles de carga orgnica y de relacin alimento- microorganismo (Rojas, 2011) adems de una aireacin deficiente (Peralta, 2011). La segunda fase se present en las semanas 4, 5, 6 y 7 y se caracteriz por el incremento en la densidad de bacterias gramm negativas, caractersticas del proceso de lodos activados (Macas, 2005), as como de protozoarios ciliados y rotferos, adems de la disminucin de la densidad de los microorganismos no deseables, como en el caso de protozoarios flagelados. En estas semanas se presentaron condiciones ms favorables para el sistema ya que hubo necesidad de ajustar la carga orgnica y una aireacin suficiente. Adems, la densidad de protozoarios ciliados aument, y especies como Paramecium caudatum y Litonotu spp indicaron la an baja oxigenacin, sin embargo, estos organismos tambin aparecen cuando el lodo se empieza a estabilizar (Santos et al., 2009). La presencia de protozoarios ciliados pendulados como Vorticella convallaria, Opercularia sp se utilizan como indicadores de tiempos de retencin media de la planta, pues al formarse colonias de estos microorganismos, se determina que el tiempo de retencin media es alto (Vilaseca, 2001). En esta primera etapa, tambin se encontr que la eficiencia de remocin de DBO alcanzaba niveles de hasta un 56 % as como la de DQO en un 51%, ambos valores se encontraban bajos de acuerdo con la literatura (Rojas, 20011). En la segunda etapa, la cual inici a partir de la octava semana, se present un increment mayor de la densidad de microorganismos deseables, para pasar de una densidad media a una densidad alta, por lo que esta etapa se caracteriz por presentar las mejores condiciones de operacin del sistema de lodos activados, lo que permiti identificar que prcticamente la etapa de arranque haba concluido, para dar inicio a la estabilizacin del sistema, lo cual se confirm al observarse un efluente ms clarificado. Adems, parmetros como la carga orgnica volumtrica, oxgeno disuelto y la relacin alimentomicroorganismo se encontraban en los rangos ptimos establecidos por la bibliografa (Peralta, 2011; Rojas, 2011). Los valores de remocin de DBO y DQO alcanzaron niveles de 71% y 86% respectivamente (Rojas, 2011). En las ltimas semanas, el desarrollo sustancial de rotferos, indic una sobreoxigenacin en el tanque de aireacin, un alto tiempo de retencin media de la planta y la necesidad de realizar una purga de lodos (Pellizzaro et al., 2005). En esta etapa, los nemtodos presentaron una baja densidad, siendo la cima de la cadena trfica y al igual que los rotferos, son depuradores de efluentes y tambin indican un alto tiempo de retencin de la planta (Ferrer y Seco, 2008). Finalmente, la densidad de amebas fue media y slo fue determinada en el efluente de la planta de tratamiento. De acuerdo a los resultados obtenidos del anlisis microbiolgico se pudo determinar que la etapa de arranque finaliz en la semana 7 para dar inicio a la estabilizacin del sistema a partir de la octava semana.

b) Paramecium caudatum

a) Philodina sp.

c) Arcella

d) Opercularia sp.

Figura 9. Especies identificadas durante el periodo de monitoreo.

Discusin
Durante el periodo de monitoreo, para el anlisis microbiolgico de la planta de tratamiento de aguas residuales hospitalarias, se observaron dos etapas claramente diferenciadas: la primera, se present de la semana 1 a la semana 7 y la segunda, a partir de la semana 8. En la primera etapa se presentaron dos fases, la primera se distingui por la ausencia y baja densidad de microorganismos requeridos para el adecuado funcionamiento del sistema, mientras que se detect una densidad media de microorganismos no deseables, especialmente de protozoarios flagelados. La baja presencia de protozoarios ciliados y rotferos, pareca indicar la existencia de sustancias txicas como metales pesados y cianuros, ya que son los ms afectados por este tipo de compuestos, por lo que son excelentes bioindicadores. La formacin indeseable de espuma al inicio del periodo de estudio, coincidi con la

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Conclusiones
El anlisis microbiolgico del proceso de lodos activados en la etapa de arranque result ser un bioindicador eficiente para un diagnstico inmediato de las condiciones de depuracin de la planta. La sucesin de microorganismos identificados en la planta de tratamiento ayud a establecer el fin de la etapa de arranque as como el punto de estabilizacin de la misma. La oxigenacin proporcionada al tanque de aireacin pudo ser modificada de acuerdo a la identificacin de ciertas especies microbianas. La presencia de protozoarios ciliados fue el mejor indicador de la calidad del efluente tratado ya que este grupo indica una favorable depuracin. El haber encontrado microorganismos indicadores de alto tiempo de retencin fue quizs inesperado. La alta concentracin de rotferos en las ltimas semanas mostr la necesidad de realizar una purga a los lodos de la planta. Los resultados obtenidos en este anlisis deben ser adoptados como una forma segura de establecer la duracin de la etapa de arranque de la planta de tratamiento as como una forma de controlar los parmetros de diseo para los sistemas de lodos activados. El buen funcionamiento de un sistema de depuracin, puede definirse por la presencia o ausencia de los tipos de microorganismos que intervienen, reafirmando la importancia que tiene la caracterizacin biolgica en los procesos de tratamiento de aguas residuales.

10. Santos, G., Vencius, C., Santos, J. G. (2009). Microbiologia de sistema de lodos ativados e sua relao com o tratamento de efluentes industriais: a experincia da Cetrel; Eng Sanit Ambient. Vol.14, No. 2, Abril/Junio 2009, pp.183-192. 11. Vilaseca, M. M. (2001). Observacin microscpica de fangos activados en los tratamientos de depuracin biolgica. Boletn Intexter (U.P.C.). No. 119 2001, pp. 67-72.

Referencias
1. APHA, AWWA, WEF 1995. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 19th ed. American Public Health Association, Washington, DC. 2. Da Motta, M. et al. (2003). Estudo do funcionamento de estaes de tratamento de esgotos por anlise de imagem: validaes e estudo de caso". Eng. Sanit. Ambient. Vol. 8, No. 3, Julio/Septiembre 2003, pp. 170-181. 3. Davies, P.S. (2005). The biological basis of wastewater treatment. Glasgow, UK: Strathkelvin Instrument Ltd. 4. Ferrer, J. y Seco, A. (2008). Tratamientos biolgicos de aguas residuales. Alfaomega, 184 pp. Valencia, Espaa. 5. Macas, R. I. (2005). Tratamiento de aguas residuales mediante el proceso de lodos activados. Tesis profesional. UV, Facultad de Ingeniera Qumica. Xalapa. Mxico. 6. Pellizzaro, A., Sezerino, P. H., Philippi, L. S., Reginatto, V., Lapolli, F. R. (2005). Caracterizao da microfauna em estao de tratamento de esgotos do tipo lodos ativados: um instrumento de avaliao e controle do proceso. Eng. Sanit. Ambient. Vol.10, No. 4, Octubre/Diciembre 2005, pp. 329-338. 7. Peralta, C. (2011). Estudio de oxgeno disuelto en el tanque de aireacin de una planta de tratamiento de aguas residuales hospitalarias en Xalapa, Veracruz. Tesis de licenciatura. Facultad de Ingeniera Qumica. Xalapa. Mxico. 8. Rojas, L., Castillo, E., Leal, M. T., Galicia M. A. (2011). Evaluacin de una planta de tratamiento de aguas residuales hospitalarias en Xalapa, Ver. Memorias X Congreso Internacional y XVI Congreso Nacional de Ciencias Ambientales, Quertaro, Qro. 9. Romero, J. A. (2004) Tratamiento de aguas residuales. Escuela Colombiana de Ingeniera, 3 edicin, 1248 pp. Colombia.