BIOSEGURIDAD.

1. MEDIDAS GENERALES

Las siguientes medidas son de obligado cumplimiento en cualquier rea del laboratorio: El acceso al laboratorio estar limitado al personal autorizado. No deben entrar en el mismo familiares ni amigos. El personal del laboratorio debe implicarse en el cumplimiento de las normas de seguridad. Todas las reas estarn debidamente marcadas con la seal de riesgo biolgico y su nivel de contencin. Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas para mantener la adecuada contencin biolgica. Todas las superficies de trabajo se limpiarn y desinfectarn diariamente y siempre que se produzca un derrame. Los residuos y muestras peligrosas que van a ser incinerados fuera del laboratorio deben ser transportados en contenedores cerrados, resistentes e impermeables siguiendo las normas especficas para cada tipo de residuo. El laboratorio debe permanecer limpio y ordenado y no es aconsejable utilizar los pasillos como almacn. Siempre debe quedar un espacio libre no inferior a 120 cm para poder evacuar el laboratorio en caso de emergencia. El transporte de las muestras dentro o entre laboratorios se realizar de tal manera que, en caso de cada, no se produzcan salpicaduras. Lo recomendable es hacerlo en cajas hermticas o neveras transportables. Estas cajas o neveras debern ser rgidas y resistentes a los golpes, contar con materiales absorbentes en su interior y de fcil desinfeccin. Se etiquetarn o identificarn de forma oportuna y no podrn ser utilizadas para otros fines. Bajo ningn concepto se deben transportar las muestras a mano. La ropa protectora, fcilmente ajustable y confortable, as como guantes, gafas, etc. debe estar disponible en todo momento. La ropa protectora de las reas con nivel de contencin 3 (batas) nunca debe ser usada fuera del rea de trabajo y si se quita debe de ser desechada automticamente en una bolsa de material contaminado. Jams debe volver a ser usada. Todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes cuando se manipulen muestras o cultivos que contengan posibles patgenos. Los guantes siempre sern desechados antes de salir del rea de trabajo. Jams se saldr de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se coger el telfono, se tocarn las hojas de examen, maniguetas de las puertas, etc. Tras quitarse los guantes, se realizar un lavado de manos. Se usarn gafas protectoras y mascarillas faciales si existe riesgo de salpicaduras y/o aerosoles. Se pondr extremo cuidado en minimizar el riesgo de autoinoculacin y de generacin de aerosoles. 1

Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al Supervisor y al Jefe del Laboratorio y hacerse constar por escrito. Nadie podr trabajar en el rea de tuberculosis con una prueba de Tuberculina negativa. Est rigurosamente prohibido pipetear con la boca. Se realizar pipeteo automtico con material adecuado y cada trabajador ser instruido para manejarlo debidamente. En la zona de trabajo no debe colocarse material de escritorio ni libros ya que el papel contaminado es de muy difcil esterilizacin. No debern usarse lentes de contacto. El personal con el cabello largo debe llevarlo recogido. Comer, beber, fumar y aplicarse cosmticos esta formalmente prohibido en el rea de trabajo del laboratorio, as como el almacenamiento de comida o bebida. El personal debe lavarse las manos frecuentemente durante las actividades rutinarias, tras acabar la jornada laboral y siempre antes de abandonar el laboratorio (almorzar). Se usar un jabn antisptico y el secado se realizar con papel. Las heridas y cortes en las manos, si se han producido en el Laboratorio, sern comunicados al responsable de la Seccin correspondiente, as como al Supervisor de Bioseguridad que lo registrar haciendo constar todas las circunstancias. Las heridas y cortes deben ser convenientemente vendados y despus es imprescindible ponerse guantes.

NIVELES DE BIOSEGURIDAD (OMS)

Nivel I: Incluye a los laboratorios que efectan tcnicas bsicas y que tienen un riesgo personal y comunitario escaso. Nivel II: Incluye a los laboratorios situados en servicios primarios de salud, laboratorios de diagnostico o enseanza universitaria, representan riesgo personal y comunitario limitado. Nivel III: Incluye a los laboratorios encargados de diagnostico especializado con un riesgo personal elevado y comunitario escaso. Nivel IV: Incluye a los laboratorios altamente especializados que manipulan microorganismos patgenos peligrosos y cuyo riesgo personal y comunitario es elevado.

MEDIDAS TCNICAS DE CARCTER PREVENTIVO.

OBJETIVO: Evitar la contaminacin del ambiente y de las personas con el material
biolgico que se maneja y as reducir la posibilidad o riesgo de enfermedades. Generalmente se refiere a infecciones accidentales producidas en los lugares en donde se manipulan agentes biolgicos y que afectan a un solo individuo, a una comunidad o al ambiente. Infeccin= riesgo de trabajo 1994 Meyer y Eddie

INFECCIONES ASOCIADAS AL LABORATORIO Mas de 5000 laboratorios, 3,921 casos citados (reconsider a la exposicin con aerosoles como fuente probable de infeccin). LAS INFECCIONES MAS COMNMENTE REPORTADAS: Hepatitis Tuberculosis Tifoidea Encefalitis equina venezolana Brucelosis Tularemia

NIVEL DE RIESGO BIOLOGICO

IDENTIFICA LA PELIGROSIDAD DE UN MICROORGANISMO DE ACUERDO A: Patogenicidad, forma de transmisin y hospedero Medidas preventivas vacunacin o antisueros Medidas sanitarias o control de vectores, reservorios Tratamiento eficaces: inmunizacin pasiva, vacunacin post-exposicin, agentes antimicrobianos Resistencia (cepas resistentes). CLASIFICACION DE LOS NIVELES DE RIESGO GRUPO 1: Microorganismos sin riesgo o de riesgo muy bajo para el personal y para la comunidad. Acanthamoeba Protozoarios Plasmodium

GRUPO 2: Microorganismos que representan un riesgo individual moderado y un riesgo de transmisin a la comunidad; existe tratamiento efectivo o medidas preventivas disponibles. El riesgo de exposicin para la comunidad es bajo. * Virus de hepatitis * Bordetella * Yersinia * Haemophilus * Corynebacterium * Leishmania * Treponema pallidum * Salmonella thyphi * E. coli patgena * Neisseria * Pseudomonas * Entamoeba histolytica * Vibrio * Clostridium * Staphylococcus * Shigella * Campylobacter

GRUPO 3: Microorganismos que representan un riesgo individual alto, pero el riesgo comunitario es bajo; se cuenta con tratamiento y/o medidas preventivas. * Brucella * M. bovis * T. solium adulta * Paracoccidioides * Yersinia pestis * M. tuberculosis * T. cruzi

GRUPO 4: Microorganismos con alto riesgo individual y comunitario, se transmite fcilmente de un individuo a otro ya sea directa o indirectamente. virus de fiebre hemorrgica del BOLA Virus del SARS

No existe tratamiento ni medidas preventivas efectivas

SE ESTABLECEN DEPENDIENDO DE DIVERSOS FACTORES:

Virulencia y patogenicidad del microorganismo. Estabilidad biolgica. Transmisibilidad y vas de diseminacin del microorganismo. Tipo de procedimiento que involucre el manejo del microorganismo. Tipo de laboratorio. Disponibilidad de vacunas efectivas y prevenciones. Medidas teraputicas efectivas.

LA PREVENCIN DE ACCIDENTES SE LOGRA POR:

El cumplimiento de normas Entrenamiento del personal Uso del equipo adecuado Barreras de contencin en laboratorios.

NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Conjunto de reglas destinadas a proteger la salud del personal y del publico; as como al ambiente, de la exposicin accidental a microorganismos y materiales biolgicos experimentales. Lavarse las manos antes de iniciar el trabajo en el laboratorio y despus de manipular material infeccioso. Mantener las puertas cerradas cuando se este manipulando material infeccioso. Descontaminar las reas de trabajo por lo menos una vez al da y despus de derramar material contaminado. Descontaminar todo material contaminado liquido o slido antes de manipularlo o desecharlo. No pipetear con la boca, usar pipetas, bulbos o pipeteador automtico (pipeteo mecnico). Usar el equipo de seguridad (gabinetes de bioseg) y la ropa adecuada (bata, goggles, guantes, mascarilla) para el trabajo con agentes infecciosos. Llevar acabo cuidadosamente todos los procedimientos para disminuir los riesgos. Colocar en recipientes con tapa los materiales contaminados y esterilizados. Limitar el acceso al laboratorio cuando est trabajando con material infeccioso. Colocar el smbolo universal de riesgo biolgico en la entrada del laboratorio. Colocar en la entrada un letrero que indique, el agente infeccioso, nombre de la persona responsable y cualquier requisito especial. Establecer medidas especiales para el envo o manipulacin materiales peligrosos. Descontaminar todo material contaminado en autoclave o por desinfeccin qumica antes de reutilizarse, lavarse o desecharse. Antes deber colocarse en recipientes de material resistente, sin fugas y bien tapados. Descontaminar todo el equipo antes de mandarlo a reparar. Manipular con cuidado jeringas y agujas. Conocer la localizacin de regaderas de seguridad y extinguidores. Insistir sobre la limpieza en el laboratorio.

Informar al jefe inmediato sobre cualquier accidente presentado en el laboratorio y sobre exposicin potencial o real al material infeccioso. Destinadas a prevenir lesiones o enfermedades directamente relacionadas con el trabajo .

RECOMENDACIONES Y OBSERVACIONES BSICAS QUE DEBEN SEGUIRSE EN EL LABORATORIO PARA DISMINUIR EL RIESGO DE ACCIDENTES.
Guardar o consumir alimentos y bebidas fuera del laboratorio. No fumar o maquillarse, peinarse o lavarse los dientes en el laboratorio. No llevarse las manos a la boca, nariz, cara, ojo o pelo. No usar las batas de trabajo fuera del laboratorio. Lavarse las manos antes de salir del laboratorio.

LA BIOSEGURIDAD DEBE MANTENERSE MEDIANTE PROGRAMAS QUE COMPRENDEN: Elaboracin de reglamentos. Cursos de capacitacin. Inspecciones. Investigacin de accidentes. Programas de vacunacin.

NIVEL DE BIOSEGURIDAD
Se define segn la combinacin de las funciones y actividades del laboratorio, as como de las buenas practicas de laboratorio, tcnicas y equipo de seguridad para perfeccionar las operaciones y prevenir accidentes en el manejo de agentes infecciosos. BIOSEGURIDAD NIVEL 1 Uso de dispositivos mecnicos de pipeteo. Lavado de las manos. Acceso limitado o restringido mientras se trabaja. Prohibido comer, fumar o beber. Minimizar salpicaduras y aerosoles. Descontaminar superficies de trabajo diariamente. Descontaminar desechos. Mantener un programa de control de insectos y roedores. Instalaciones de laboratorio (barreras secundarias) Lavamanos. Superficies de trabajo de fcil limpieza. Mesas de trabajo. Muebles resistentes. Ventanas selladas con malla. Localizacin del laboratorio. Estructura del laboratorio. Ventilacin del laboratorio. 6

BIOSEGURIDAD NIVEL 2 Adecuado para el trabajo que involucra agentes de peligro potencial moderado, tanto para el personal como para el ambiente. Inmunizacin o tratamiento antibitico disponibles. Ejemplos: Virus del sarampin. Salmonella Toxoplasma spp. Virus de la hepatitis B Virus respiratorios Practicas Estndar: Como en BSL 1 y con nfasis en: Guantes. Pipeteo Mecnico. Precauciones extremas con agujas o instrumentos punzo cortantes.

Ejemplos: Patgenos en Sangre. Fluidos corporales humanos particularmente cuando estn visiblemente contaminados con sangre. PRCTICAS ESPECIALES: Uso de contenedores rgidos e impermeables para el transporte de las muestras. Inmunizaciones. Muestras de suero base. Descontaminacin de superficies de trabajo. Reporte de derramamientos y accidentes. No entrada de animales al laboratorio.

NORMAS DE SEGURIDAD EN LA UTILIZACIN DE EQUIPOS 1. NORMAS GENERALES Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso, en particular en los pasillos del laboratorio. Todos los aparatos con toma elctrica debern cumplir las normativas de seguridad correspondientes. Nunca deben utilizarse en zonas mal aisladas y expuestas a la humedad. Las fuentes de calor (calentadores, termobloques, etc.), sobre todo si se alcanzan temperaturas elevadas, debern estar debidamente sealizadas para evitar quemaduras accidentales. Todos los procedimientos de utilizacin de aparatos deberan contar obligatoriamente con apartados relativos a su utilizacin segura. 2. NEVERAS Un adecuado mantenimiento, limpieza y desinfeccin sistemticos de los aparatos reduce considerablemente los riesgos asociados a su utilizacin. Sin embargo, aun en estas condiciones, hay que tener en cuenta lo siguiente: No deben almacenarse cultivos de microorganismos patgenos por inhalacin en recipientes que no estn convenientemente cerrados, especialmente si la cmara tiene un sistema de circulacin de aire. No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos voltiles inflamables (ter etlico, por ejemplo) en neveras que no posean un sistema de proteccin antideflagracin. En los aparatos de tipo domstico que se utilizan en el laboratorio debe anularse la lmpara de la luz.

3. CONGELADORES La congelacin es un proceso que mantiene la viabilidad de muchos agentes infecciosos, de ah un potencial riesgo y las siguientes recomendaciones: Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo almacenado y sus riesgos potenciales. El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos, recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarn completamente, para evitar que rebosen por efecto del aumento de volumen tras la congelacin. Descongelar peridicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente. Utilizar guantes para manipular el contenido. Si la temperatura es baja (por ejemplo -70C o inferior), los guantes representan una proteccin adicional.

4. INCUBADORAS La limpieza y la desinfeccin, peridicas y sistemticas, son el mtodo recomendable para reducir los riesgos derivados de la contaminacin accidental del personal del laboratorio. 5. MICROONDAS Los microondas cada vez son ms populares en el Laboratorio de Microbiologa y constituyen una nueva fuente de accidentes, entre los ms frecuentes las explosiones cuando se usan para calentar medios con agar, ya que la diferencia de velocidad de calentamiento produce burbujas que pueden estallar. Las botellas o matraces deben tener el tapn aflojado, ya que si est cerrado estallan fcilmente. Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y controlar la intensidad del aparato, que slo puede ser la mxima con agua y la mnima si se usa con agar. Deber existir una tabla bien visible de los tiempos en cada posicin del potencimetro y de las cantidades a emplear. Los microondas interfieren con los marcapasos. No deben ser colocados a una distancia inferior a 2 m de las personas que sean portadoras de uno de estos dispositivos.

6. AUTOCLAVES Los autoclaves deben poseer manmetro y termostato, as como vlvula de seguridad, sistema de desconexin rpido y la purga del vapor ha de realizarse a un recipiente estanco y con agua, jams directamente al exterior. No deben usarse si no se conocen perfectamente todos los mandos y su fundamento. Usar guantes especiales para protegerse del calor. No abrir jams si el manmetro no est a "0" y la purga no ha sido abierta. Controlar una vez al mes su capacidad de desinfeccin mediante esporas, no siendo suficiente el mtodo qumico. El uso de registros de presin y temperatura de cada proceso y la instauracin de un programa de mantenimiento tambin puede ser una alternativa vlida al control mediante esporas. El agua debe ser cambiada regularmente.

7. CENTRFUGAS Los mayores riesgos derivan, sobre todo, de la contaminacin por los aerosoles generados durante la centrifugacin de materiales biolgicos y, en menor medida, de los traumatismos accidentales. Se recomienda: Cuando se centrifugue material biolgico potencialmente infeccioso deben utilizarse tubos cerrados; la centrfuga debe disponer de rotores o cestillos de seguridad que protejan al operador de los posibles aerosoles.

La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al Supervisor o responsable, de forma que se proceda a la desinfeccin segura del aparato No se deben utilizar centrfugas antiguas que no posean sistema de cierre de seguridad, del que disponen todos los aparatos actuales, ni manipular stas de forma que permitan su apertura mientras estn en funcionamiento. Si el laboratorio dispone de ultracentrfugas, el equilibrado cuidadoso del rotor es fundamental.

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BIBLIOGRAFA DE REFERENCIA
1. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. CDC/NIH. U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Service (4 ed.). Washington, 1999. 2. Prevencin de riesgos biolgicos en el laboratorio. M.C. Mart y cols. Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo. Madrid, 1997. 3. Laboratory Biosafety Guidelines. M.E. Kennedy (ed.). Laboratory Center for Disease Control, Health (2 ed.). Ottawa, 1996. 4. Primary Containment For Biohazards. Selection, Installation and Use of Biological Safety Cabinets. CDC/NIH. U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Service. Washington, 1995. 5. Seguridad y condiciones de trabajo en el laboratorio. M. Bult y cols. Instituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo. Madrid, 1992. 6. Gua para el transporte seguro de substancias infecciosas y especmenes diagnsticos. Organizacin Mundial de la Salud. 1997. 7. NCCLS General Laboratory Safety (2 ed.). 1991. 8. Biosafety Guidelines for Diagnostic and Research Laboratories working with HIV. WHO AIDS series (9). 1991. 9. The United Nations Committee of Experts on the Transport of Dangerous Goods (UN ECOSOC). Recommendations on the Transport of Dangerous Goods (10 ed.). 1997. 10. UN European Agreement concerning the international carriage of dangerous goods by road (ADR Agreement, Geneva, 1957). Edition: 1999. Convention concerning the International Carriage by Rail (COTIF). 11. The International Air Transport Association (IATA). "Dangerous Goods Regulations" (40 ed.). 1999. 12. The International Civil Aviation Organization (ICAO). "ICAO Technical Instructions", made legally binding by Annex 18 to the Convention on International Civil Aviation (the "Chicago Convention") of which Annex 18 is Safe Transport of Dangerous Goods by Air, amplified by Technical Instructions on the Safe Transport of Dangerous Goods, 1984. ltima ed.: 1999. 13. The International Maritime Organization (IMO, London). "International Maritime Dangerous Goods Code", made legally binding through Regulation VII/1.4 of SOLAS Convention (International Convention for the Safety of Life at Sea), 1974. ed.: 1995. 14 The World Health Organization (WHO). "Guidelines for the Safe Transport of Infectious Substances and Diagnostic Specimens". 1997. 15. The World Health Organization (WHO). "Laboratory Biosafety Manual". 1993.

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