PRACTICA DE BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

RECONOCIMIENTO DEL GENERO Rhizobium en NODULOS DE LEGUMINOSAS GENERO: Rhizobium: Son bacterias que habitan con las leguminosas y causan la formacin de NODULOS y participa en la adquisicin simbitica del nitrgeno (N2). Presentan una variedad como: forma de BACTEROIDES y formas irregulares en X y Y. Juegan un papel importante en la agricultura, porque enriquecen los suelos con el N2 que fija, haciendo posible que siga funcionando el ciclo del nitrgeno. MATERIALES: Muestra: Ndulos de races de leguminosas. Agua destilada. Alcohol de 95%. Placas de Petri. Ansa bacteriolgica. Guantes, Gorro, Mascarilla, Guardapolvo. Reactivo: Coloracin de GRAM

PROCEDIMIENTO: OBTENCION DE NODULOS: Escoger plantas de leguminosas de mayor desarrollo, de color verde intenso; extraerlas con cuidado, observando si los ndulos presentes tienen caractersticas (grandes, rojizas). En el laboratorio, escoger los mejores ndulos de las races y cortarlos de manera tal que quede adherida una parte de la raz, con el objetivo de facilitar su manipulacin.

TRATAMIENTO DE LOS NDULOS: Los ndulos seleccionados, deben colocarse dentro de tubos con tapa rosca para ser lavados enrgicamente, primero con agua corriente y luego con agua destilada, con la finalidad de eliminar toda la tierra. Luego los ndulos deben ser, luego, desinfectados en placas estriles: o Sumergidos en alcohol de 95% por algunos segundos. o Luego dejar un periodo de 3 4 minutos con agua corriente estril o agua destilada. o Con el ndulo desinfectado, aplastar sobre el portaobjeto con una pinza desinfectada, y extender el lquido lechoso, secar con el mechero de alcohol y luego colorear con coloracin gram. PROCEDIMIENTO PARA LA COLORACION GRAM: Primero: Violeta de Genciana: 1 minuto Segundo: Lugol: 1 minuto Tercero: Alcohol Acetona: 20 segundos Cuarto: Safranina: 3 minutos.

PRACTICA DE BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL

OBSERVACION DEL GENERO Streptomyces GENERO: Streptomyces: Son bacterias gram positivas. Habitan en ambientes acuticos y terrestres. Son importantes porque de ellas se extraen muchos antibiticos: tetraciclina, eritromicina, kanamicina, etc. Son Filamentosos, tienen una longitud indefinida y muy ramificada. La GEOSMINA Aroma de la tierra; son metabolitos producidos por la bacteria Streptomyces coelicolor y algunas cianobacterias. La GEOSMINA es producida tambin por hongos filamentosos: Penicillium. Estos Streptomyces se encuentran en tubrculos de papa. Son de mucho inters para ser utilizados en la BIORREMEDIACIN, por ser productoras de enzimas hidroliticas. Streptomyces scabies es una bacteria causante de problemas en la mayora de las zonas paperas. PROCEDIMIENTO: En una lmina portaobjeto colocar una porcin de la cepa bacteriana con una gota de agua estril, secar al medio ambiente y luego realizar la coloracin GRAM. PROCEDIMIENTO PARA LA COLORACION GRAM: Primero: Violeta de Genciana: 1 minuto Segundo: Lugol: 1 minuto Tercero: Alcohol Acetona: 20 segundos Cuarto: Safranina: 1 minutos.