MECANISMOS DE TRANSDUO DE SINAL PARA OS RECEPTORES DE MEMBRANA PLASMTICA A ligao de um dado mensageiro (primeiro mensageiro) a um determinado receptor especfico

provoca uma alterao na conformao deste ltimo. Este fenmeno, conhecido por ativao do receptor, sempre o passo inicial de uma resposta celular posterior ligao desse mensageiro, a qual pode ser uma alterao na permeabilidade, nas propriedades de transporte ou no potencial eltrico da membrana plasmtica da clula; uma alterao no seu metabolismo; uma alterao na sua atividade secretria ou ainda uma alterao na atividade contrctil se for uma clula muscular. Quando um determinado ligando se liga ao domnio extracelular do receptor induz uma alterao da estrutura tridimensional deste, ativando-o. Ocorre assim a transduo de sinal que ir permitir a amplificao do sinal original, isto porque o receptor ativado estimula uma atividade cataltica que produz sinais citoplasmticos de maior amplitude que o original. Estes sinais conduzem muitas vezes ao aparecimento de molculas no interior da clula (segundos mensageiros) que sero responsveis pela transduo do sinal inicial. As sequncias de acontecimentos entre a ativao do receptor e a resposta celular podem, no entanto, ser mais complexas, sendo designadas por mecanismos de transduo de sinal. O sinal a ativao do receptor e a transduo o processo pelo qual um estmulo transformado numa resposta. Os mecanismos de transduo de sinal diferem consoante se trata de mensageiros lipossolveis ou mensageiros hidrossolveis, uma vez que os correspondentes receptores, como anteriormente foi referido, apresentam localizaes distintas.Os receptores para mensageiros lipossolveis so intracelulares e, quando ativados, atuam no ncleo como moduladores da transcrio gentica. Os receptores para mensageiros hidrossolveis localizam-se na membrana plasmtica, sendo classificados de acordo com os mecanismos de transduo de sinal em: 1. Receptores que eles prprios funcionam como canais inicos 2. Receptores que eles prprios funcionam como protena quinases, especificamente tirosina quinases 3. Receptores que activam Protenas G que, por sua vez, ativam protenas efectoras na membrana plasmtica, podendo estas ser: - Adenilciclase que leva formao de AMP cclico - Guanilciclase que leva formao de GMP cclico - Fosfolipase C que leva formao de diacilglicerol e inositol trifosfato - Fosfolipase A2 que leva formao de cido araquidnico - Canais inicos Os receptores que funcionam como canais inicos so activados por mensageiros que induzem a abertura (ou fecho) dos canais, da qual resulta um aumento (ou diminuio) da difuso de ies atravs da membrana plasmtica, estando assim associada a alteraes no potencial de membrana e gerao de sinais elctricos.Os receptores que funcionam como protena quinases (enzimas) tm a capacidade de fosforilar uma protena atravs da transferncia de um grupo fosfato do ATP para esta, o que origina uma alterao da actividade da protena fosforilada que muitas vezes tambm uma enzima. Desta forma, um mensageiro liga-se face extracelular do receptor originando uma alterao da conformao deste, de tal modo que a parte enzimtica do receptor (localizada na face intracelular) activada, fosforilando ento protenas especficas do citosol e da membrana plasmtica, incluindo ela prpria. A fosforilao destas protenas origina ento alteraes das suas actividades das quais resultam as mais variadas respostas celulares. Os receptores que funcionam especificamente como tirosina quinases tm a capacidade de fosforilar a poro tirosina das protenas, estando os mensageiros destes receptores muitas vezes envolvidos no crescimento e desenvolvimento.

RECEPTORES Os locais em que um frmaco atua e a intensidade desta atuao, so determinados pela localizao e capacidade funcional dos receptores especficos com os quais o frmaco interage e pela concentrao do frmaco ao qual o receptor exposto. O frmaco ser de emprego muito difcil ou perigoso se a funo do receptor for comum a muitas clulas e for vital. Ex: os digitlicos so inibidores potentes de um processo de transporte inico vital a muitas clulas. Assim, sua margem de segurana para uso muito pequena. O receptor pode ser definido como qualquer macromolcula presente nas membranas celulares, que sob ao das substncias modificam a permeabilidade das membranas, desencadeando efeitos farmacolgicos / fisiolgicos na clula alvo, como: diferena do potencial de membrana, efeitos eletrnicos ou ativao de enzimas. No sistema nervoso, conforme suas caractersticas estruturais e funcionais, os receptores podem ser divididos em duas categorias: metabotrpicos e ionotrpicos. Os metabotrpicos no formam um canal ionico - so conectados indiretamente a canais inicos pelo plasma celular, atravs de mecanismos de transduo (geralmente proteinas G). Ambos os tipos de receptores so ativados por neurotransmissores especficos. Quando um receptor ionotrpico ativado, abre-se um canal que permite a enrada, na clula, dos ions Na+, K+, ou Cl- . Quando um receptor metabotrpico ativado, desencadeia-se uma srie de eventos intracelulares, que tambm recultam na abertura de canais inicos, mas a partir do comando de um segundo mensageiro. Como a maioria dos neurotransmissores hidrossolvel, no h possibilidade de transposio direta da membrana fosfolipdica de uma clula-alvo. Os neurotransmissores ligam-se, ento, a receptores especficos de superfcie. Os hormnios tireoideano e os esterides so exceo, pois so hidrofbicos e atuam ligando-se a receptores especficos no citoplasma celular. A ativao dos receptores inicia respostas intracelulares que mudam a funo celular, desde a modulao da excitabilidade at a regulao da expresso do genoma. Funes do receptor: acoplamento a um ligante (domnio de ligao) e propagao da mensagem (domnio efetor). As aes reguladoras de um receptor podem se dar na protena efetora ou ser transmitidas a alvos celulares por molculas (transdutores). A protena efetora pode no ser o componente celular final afetado, mas pode sintetizar ou liberar outra molcula, o segundo mensageiro. Mecanismos de ao dos receptores: Molculas extracelulares (geralmente hormnios, neurotransmissores, citocinas, fatores de crescimento ou molculas reconhecidas pelas clulas) ligam-se aos receptores desencadeando alteraes na funo celular. Este processo chamado transduo de sinal: quando a ligao induz a uma alterao qumica intracelular. Os receptores atuam como: a) como integrantes da informao extracelular, j que coordenam os sinais de vrios ligantes entre si com as outras atividades metablicas da clula. b) atuam de maneira cataltica, sendo amplificadores do sinal bioqumico, tornando-se alvos fceis para ao das drogas. Ex: Uma nica molcula de hormnio esteride liga-se a seu receptor e d incio transcrio de muitas cpias de RNAm especficos, que por sua vez do origem a muitas cpias de uma nica protena.

c) Receptores como enzimas; protenas cinases como receptores: Os receptores de hormnios peptdicos que regulam o crescimento, a diferenciao e o desenvolvimento (e em alguns casos atividade metablica aguda) so protenas cinases ligadas membrana plasmtica, que atuam fosforilando protenas-alvo, que podem ser enzimas ou protenas reguladoras ou ainda, estruturais. A fosforilao pode alterar suas atividades individuais ou suas interaes com outras protenas reguladoras ou efetoras. Alguns membros das famlias de cinases receptoras so monmeros e outros so reunidos a partir de subunidades desiguais. Alguns receptores associados a protenas cinases no possuem domnios enzimticos intracelulares, mas ligam-se e/ou ativam protenas cinases da membrana ou do citoplasma independentes, em resposta a agonistas. d) Receptores com outra atividade enzimtica: O domnio intracelular no uma protena cinase, mas uma guanilil ciclase, que sintetiza um segundo mensageiro, o GMP cclico.

Interao droga-receptor: Os medicamentos podem agir sobre os receptores aumentando o trabalho das clulas, aumentando parte do trabalho das clulas ou as funes de determinadas organelas ou, ainda, inibindo totalmente o trabalho das clulas ou a ao de outras substncias. Por isso, so chamados agonistas totais, agonistas parciais ou antagonistas (bloqueadores). Agonista: uma droga que se liga ao receptor de uma clula para induzir a uma resposta celular. Um agonista frequentemente imita a ao da substncia fisiolgica natural (neurotransmissor). Os agonistas podem estimular totalmente ou parcialmente o receptor. Agonistas totais - atividade e afinidade especficas: Ex: diazepan x GABAa-Cl Agonistas parciais ou inter-relacionamento de sistemas: Ex: Nalorfina ou metoclopramida x bloqueio dopaminrgico e serotoninrgico Antagonista: o antagonista liga-se ao receptor para bloquear a ao do neurotransmissor ou da droga agonista. Tambm podem ligar-se sem produzir efeito ou impedir a ao do agonista Ex: Flumazenil, naloxona - afinidade com eficcia zero Regulao dos receptores: Os receptores no s do incio regulao da funo fisiolgica e bioqumica, como esto sujeitos a controles reguladores. Durante perodos prolongados de exposio ao frmaco, os reais mecanismos que fundamentam o efeito teraputico so acentuadamente diferentes daqueles que operam quando o frmaco introduzido pela primeira vez no sistema. A estimulao contnua das clulas com agonistas geralmente resulta em um estado de dessensibilizao, que pode ser homloga ou heterloga. Ex: enfraquecimento da resposta ao uso repetido de agonistas -adrenrgicos como broncodilatadores no tratamento da asma brnquica. A dessensibilizao homloga pode envolver a modificao covalente do receptor, a destruio destes ou sua relocalizao no interior da clula. A dessensibilizao heterloga pode ocorrer da modificao de um receptor no mecanismo de feed-back comum ou dos efeitos exercidos em um mesmo ponto comum na via efetora distal ao prprio receptor. Ocorrncia dos efeitos na relao receptor x tempo: Conforme o tipo de receptor e a ao do neurotransmissor (ou da droga), os efeitos fisiolgicos se manifestam em diferentes tempos, como por exemplo:

Nicotnico - controle ionfero - milissegundos - hiperpolarizao / despolarizao Muscarnico - Ptn G + fosforilao + Ca - segundos - gerao de segundo mensageiro Insulina - Tirosina cinase - minutos - fosforilao Estrognio - transcrio (DNA) - horas - RNAm (nuclear) Estruturas dos receptores As membranas dos receptores, tambm conhecidas como transmembranas, so proteinas integrais especializadas que participam da comunicao entre a clula e seu exterior.Muitos receptores transmembrana so compostos de duas ou mais subunidades proteicas que operam coletivamente e podem dissociar-se na ligao de molculas, na dissociao das mesmas ou em outro estgio de seus ciclos de ativao.So geralmente classificados de acordo com sua estrutura molecular ou sua tipologia de membrana. As cadeias polipeptdicas (glicoproteinas ou lipoproteinas) dos receptores mais simples atravessam a dupla camada lipdica de membrana somente uma vez, enquanto que outros a cruzam pelo menos sete vezes (metabotrpicos). Determinada membrana celular pode ter vrios receptores acoplados em sua superfcie, do mesmo modo que um receptor pode ter diferentes concentraes em diferentes superfcies de membrana, dependendo da membrana e da funo celular. Os receptores geralmente formam aglomerados na membrana. No entanto, a sua distribuio, na maioria dos casos, heterognea. Domnio extracelular: parte do receptor que ultrapassa a membrana celular, na parte exterior da clula. Se a cadeia polipeptdica ultrapassa a membrana vrias vezes, o dimnio extracelular pode apresentar vrias alas, no stio de ligao com o neurotransmissor. Domnio intracelular (ou citoplasmtico): parte do receptor que interage com o interior da clula ou organela, comunicando-se com proteinas efetoras ou estimulando atividade enzimtica. FAMLIAS DE RECEPTORES: 1) Receptores ligados a Canais inicos (ionotrpicos): Regulados por ligantes, alteram o potencial de ao ou a composio inica da membrana da clula.

Receptores ionotrpicos

So protenas pentamricas, estruturadas de forma cilndrica, conectando exterior e interior do neurnio, formando um complexo receptor/canal. So cinco subunidades (1, 2, , e ). Cada subunidade contm quatro hlices hidrfobas (M1, M2, M3, M4), que ocupam a extenso transversal da membrana, com domnio externo de ligao (NH3+) e interno (carboxlico- COO-) de fosforilao. O poro formado por duas sub-unidades M2 das unidades alfa. Cada complexo apresenta diferente cintica e afinidade. Esses receptores tm, em geral, quatro supostos domnios transmembranosos, constitudos de 20 a 25 aminocidos hidrofbicos. O receptor contm um canal de ction integral, que aberto ou fechado, em resposta ao acoplamento de um mensageiro qumico. Deste modo, h o controle da entrada de sdio, potssio, clcio ou cloro.Estes receptores controlam os eventos mais rpidos do Sist. Nervoso. Localizados nas sinapses, convertem o sinal qumico liberado pelo neurotransmissor na pr-sinapse direta e rapidamente para a pssinapse, em sinal eltrico. So operados por neurotransmissores ou voltagem-dependentes e contm locais para fosforilao reversvel atravs de protenas cinases, fosfoprotenas fosfatases e para controle de voltagem. Quando ativados, geram oscilaes rpidas no potencial de membrana, sob forma de despolarizao (PPSE) ou hiperpolarizao (PPSI).

Estes receptores so diferentes dos canais voltagem-dependentes (que se abrem ou fecham conforme o potencial de menbrana) e dos canais inicos que se abrem ou fecham em resposta a uma deformao da membrana celular (stretchactivated ion channels). Classificao: Os receptores ionotrpicos so heteromricos ou homomricos. So receptores que respondem a uma ligao de mensageiros extracelulares ou intracelulares. a) Receptores que respondem ao de transmissores extracelulares: RECEPTOR Acetilcolina (AchR) LIGANTE Acetilcolina Nicotina Glicina (GlyR) Glicina Estricnina GABA (GABAa; GABAc) GABA Receptores Glutamato: NMDA; AMPA e Glutamato Kainato Receptor 5-HT3 Serotonina Receptores P2X ATP b) Receptores que respondem ao de transmissores intracelulares: RECEPTOR LIGANTE Canais de ligao a nucleotdeos GMPc; AMPc; GTPc cclicos Receptor IP3 IP3 Receptores intracelulares para ATP ATP (fechamento de canal) ION ENVOLVIDO Na+; K+ Ca2+ K+ ION ENVOLVIDO Na ; K+; Ca2+
+

Cl- > HCO-3 Cl > HCO3 Na+, K+, Ca2+ Na+, K+ Ca2+, Na+, Mg2+

Os receptores ionotrpicos podem ser classificados em trs superfamlias, conforme seu critrio funcional Receptores cis-loop contm uma ala caracterstica formada por pontes bissulfeto entre dois resduos de cisteina e so subdivididos, dentro da famlia, conforme o tipo de ion do canal correspondente (anion ou cation), definidos pelo ligante. So geralmente pentamricos. As subunidades dos receptores da superfamlia cis-loop esto distribudas em dois grupos: o primeiro contm as unidades formadoras de canais aninicos inibitrios (receptores GABAA e GABAC, Glicina, GLUCl, Histamina e 5HTmod1), e o segundo, as unidades formadoras de canais catinicos excitatrios (receptores 5-HT3, nicotnicos e zinco-ativados). Receptores da famlia glutamato : - NMDA - (NR1, NR2A-D) - AMPA - (GluR1-4) - Kainato - (GluR5-7, KA1, KA2) Receptores de ATP: Os canais de ligao ao ATP abrem-se em resposta ligao do nucleotdeo ATP. So trmeros de formao. RECEPTORES DE ACETILCOLINA (NICOTNICOS) - GERADORES DE POTENCIAIS PSSINPTICOS EXCITATRIOS (PPSE): Os receptores de Ach apresentam disposio pentamrica, e dividem-se em subtipos e , em localizao pr e pssinptica. No SNC, foram isolados 8 subtipos (2 a 9) e 4 subtipos (2 a 5). Os receptores apresentam dois stios de ligao para a acetilcolina. Na clula em repouso, os canais esto fechados, mas por ao da Acetilcolina (Ach) ligada nos stios , abre-se o porto do cilindro central, permitindo a passagem de ons, de acordo com o gradiente de concentrao, gerando o potencial de ao. A Ach abre um nico tipo de canal, permevel ao Na+ e K+. Esses receptores encontram-se na juno mioneural em msculos esquelticos (despolarizao de fibras psganglionares, para abrir os canais inicos do complexo receptor-canal), nos gnglios autnomos e medula supra-renal (despolarizao da fibra ps-sinptica ou liberao de catecolaminas). Os receptores nicotnicos esto presentes em vrios tecidos: os receptores neuronais so encontrados no SNC e no SN perifrico. Os receptores neuromusculares so encontrados nas junes neuromusculares dos msculos somticos. O receptor neuronal no um canal seletivo para os

ons. preferencialmente permevel ao Na+ e K+, mas algumas subunidades so tambm permeveis ao Ca2+. A entrada do Ca2+ pode desencadear cascatas intracelulares, com alterao na regulao de alguns gens, alm de afetar a liberao de alguns neurotransmissores.

Caractersticas dos subtipos de receptores nicotnicos: RECEPTOR Msculo (Nm) TECIDO juno neuromuscular RESPOSTAS despolarizao placa terminal, contrao musc. esqueltico despolarizao e estimulao neurnio psganglionar secreo catecolaminas Heteromricos homomricos MECANISMOS MOLECULARES abertura canal ctions do receptor Nm. Composies 1, 1, , ou abertura canal ctions receptor Nn Composies do 2 ao 9 e 2 ao 4

Gnglios autnomos Neuronal (Nn)

Medula supra-renal SNC

Ao dos receptores nicotnicos: Os subtipos de receptores nicotnicos pertencem a uma famlia multignica e as combinaes destas subunidades resultam em uma variedade de receptores com propriedades cinticas, eletrofisiolgicas e farmacolgicas distintas. Por isso, respondem de modo diferente s concentraes dos neurotransmissores, ou seja: 1) a transmisso sinptica clssica envolve a liberao de grandes quantidades de neurotransmissor, atuando imediatamente nos receptores vizinhos; 2) o neurotransmissor, aps a liberao somtica, difunde-se no espao extracelular, distante alguns milmetros do seu local de liberao, at alcanar o receptor. RECEPTORES GABARGICOS DO TIPO A (GABAa) GERADORES DE POTENCIAIS PS-SINPTICOS INIBITRIOS (PPSI): Responsvel por 30% de inibio central, o c. Gama Amino Butrico (GABA) medeia as aes inibitrias dos neurnios locais no crebro, a inibio pr-sinptica na medula espinhal, a inibio no crtex cerebral e entre o ncleo caudado e a substncia negra. Sua sntese ocorre a partir do c. glutmico. O GABA removido pela recaptao, mas tambm pela desaminao e catalisado pela GABA-transaminase. O receptor GABAa o canal de on Cl- operado por ligante, aberto aps a liberao de GABA pelos neurnios pr-sinpticos. O receptor GABAa faz parte da superfamlia Cys-loop, que possui uma ala de ligao entre duas pontes de sulfeto, em dois resduos de cisteina. O receptor tambm atua como local de ao de muitos agentes neuroativos. Apresenta quinze subunidades j clonadas. Como uma protena pentamrica, onde as subunidades so aglomeradas ao redor de um poro central, cr-se que haja mltiplos subtipos de receptores GABAa no crebro: Existem 14 subunidades diferentes, classificadas em 4 famlias. Foram identificadas 6 variantes , 3 variantes , 3 variantes e 2 variantes . O complexo receptor GABAa / canal de Cl-

abundante no neocrtex, hipocampo e outras regies, exceto no cerebelo. O acmulo de cargas positivas em torno do poro torna o canal seletivo ao cloro. A ao pr-sinptica do receptor facilita liberao de GABA, cuja maior ao central a ativao do complexo GABAa - canal de Cl-, deprimindo as respostas excitatrias (hiperpolarizao). A ao se encerra quando o GABA removido da fenda sinptica para o neurnio pr-sinptico e para clula da glia. Frmacos que interagem com os receptores GABA: benzodiazepnicos, barbitricos, baclofeno, estricnina. 2) RECEPTORES ACOPLADOS PROTENA G (METABOTRPICOS): Os Receptores acoplados s protenas G (GPCRs) so uma grande famlia proteica de receptores transmembranares que captam sinais extracelulares e ativam vias de transduo de sinal no interior da clula. Entre estes receptores, incluemse: receptor metabotrpico de glutamato, receptores muscarnicos de acetilcolina, receptores GABAb, a maioria dos receptores de serotonina, assim como os receptores de norepinefrina, epinefrina, histamina, dopamina, neuropeptdeos e endocanabinoides. Os ligantes que se fixam e ativam estes receptores, incluem compostos sensveis luz, odores, feromnios, hormnios e neurotransmissores e variam em tamanho, desde pequenas molculas at peptdeos, podendo mesmo ser grandes protenas. Estes receptores esto envolvidos em uma variedade de doenas, mas tambm so o alvo de cerca de metade das drogas medicinais humanas. So classificados em mais de 100 subfamlias, de acordo com a homologia de seqncia, a estrutura dos ligantes e a funo do receptor. Estrutura: Esses receptores atravessam a membrana em sete segmentos transmembranosos hidrofbicos, alfa-helicoidais. O local de ligao pode ser um bolso do feixe de hlices que atravessa a membrana, mas h um domnio extracelular extenso, para a ligao de neurotransmissores com carga negativa, como o Glutamato ou de hormnios peptdicos.

Domnios transmembranosos dos receptores ptn G

Estruturalmente falando, todos os GPCRs apresentam um domnio intracelular amino-terminal (COO-) - que pode variar de apenas sete aminocidos a mais de 600 aminocidos - sete domnios transmembranosos, trs alas extracelulares, trs alas intracelulares e um domnio intracelular carboxi-terminal. Os receptores interagem com as protenas G na sua face citoplasmtica e apresentam regies especficas nas estruturas, responsveis pela regulao e seletividade das diferentes protenas G. Estas diferenas estruturais interferem no reconhecimento de um ligante e no acoplamento a uma protena G especfica, evidenciando a diversidade de receptores e permitindo mltiplas abordagens no que diz respeito a aplicaes clnicas e voltadas para a indstria farmacutica. Protenas G: As protenas Gs (nucleotdeo guanina) intermediam a transmisso do sinal entre os receptores acoplados s protenas Gs (GPCRs) e efetores mltiplos, tais como enzimas e canais inicos. Os genes que codificam as protenas Gs, so membros de uma superfamlia de genes que codificam as protenas que se ligam a nucleotdeos guanina, com alta afinidade e especificidade. As ptns G participam de duas famlias distintas: so molculas heterotrimricas, algumas vezes referenciadas como grandes (com subunidades , e ), ativadas por receptores. Existem, tambm proteinas G pequenas, semelhantes s subunidades alfa e que so, na realidade, monomricas. O GDP encontra-se ligado subunidade , quando o sistema est inativo, enquanto as subunidades e formam um dmero, atravs de uma ligao no covalente (mas suficientemente forte para funcionar como uma unidade). A ligao do GTP ativa a subunidade , dissociando-a das subunidades e interage com um efetor ligado membrana. As subunidades tambm podem interagir e influenciar a atividade efetora, independente ou em conjunto com os efeitos da subunidade -GTP. O trmino da transmisso do sinal se d quando h hidrlise do GTP em GDP por uma GTPase intrnseca da subunidade , e com a ligao das subunidades e . Mecanismo de ao:

1) Em repouso, as ptns G (subunidades , e ) esto ligadas ao receptor pela subunidade alfa ao GDP e no tem contato com receptores. 2) Quando um primeiro mensageiro (neurotransmissor, p. ex) liga-se ao receptor, o mesmo liga-se ptn G, que se separa da molcula de GDP. O GTP, por sua vez, mais abundante no citoplasma das clulas, liga-se ao stio do GDP, ativando a subunidade da ptn G. Uma vez ativada, a protena G intermedia o processo de sinalizao, iniciado com a ativao do respectivo receptor e encerrado com a resposta mediada pela ao de molculas efetoras, que incluem canais inicos, especficos para Ca2+, K+ ou Na+ e enzimas que geram segundos mensageiros, como, por exemplo, a adenilil ciclase (enzima que gera o AMP cclico), assim como as fosfolipases A2, C e D (todas as enzimas agem na poro COO- terminal do receptor), alm de certas protenas de transporte. Como o mecanismo de ao envolve a ativao de vrias molculas, os canais associados a estes receptores tm um processo de abertura mais demorado do que os canais dos receptores ionotrpicos e no esto envolvidos em mecanismos que requerem respostas rpidas (no entanto, estes canais tambm permanecem abertos mais tempo do que os milisegundos dos canais ionotrpicos) e seus efeitos se propagam pela clula. Os receptores metabotrpcos podem abrir ou fechar os canais. Quando situados nos neurnios pr-sinpticos, podem inibir (ou mais raramente) facilitar a liberao do neurotransmissor para a fenda sinptica. 2.1) H, ento, dissociao das subunidades de ptn G (, do complexo ) onde o complexo -GTP difunde-se pela membrana, ativando o efetor. 3) Aps alguns segundos, a subunidade hidrolisa o GTP em GDP, inativando-se e religando-se a . A subunidade diferente em todos os tipos de ptn G. H 5 tipos de subunidades e 10 tipos de .

A intensidade do sinal de um receptor metabotrpico depende de: a) A vida do complexo receptor-ligante. Se o acoplamento da molcula indutora do receptor estvel, o tempo para a dissociao da mesma mais longo e o receptor ativar mais proteinas efetoras; b) A concentrao e vida do complexo receptor-efetor. Depende da quantidade de proteinas efetoras presentes e da ligao/desligamento das mesmas ao receptor, aps sua ativao c) Desativao do receptor. Um receptor que participa do complexo hormnio-receptor pode ser desativado por modificao covalente (p. ex: fosforilao) ou por internalizao. d) Desativao de efetores pela atividade enzimtica. possvel ao receptor a ativao de outras proteinas, em lugar das que foram inibidas pela atividade enzimtica. Segundos mensageiros citoplasmticos: A sntese ou liberao dos segundos mensageiros reflete as atividades de muitas vias. Estes influenciam uns aos outros, diretamente, por alterar o metabolismo do outro e indiretamente, por compartilhar alvos intracelulares. Adenilil ciclase:

Adenilil ciclase: A enzima possui doze segmentos transmembrana, formando um tnel, como se fosse um canal de troca inica. H dois domnios intracelulares hidroflicos onde h sntese de AMPc.

A resposta especfica mostrada na clula depende da combinao precisa dos sinais que a afetam, assim como da mistura de seus receptores, ptn G e efetores e do repertrio de outras protenas especializadas que so produzidas. Outras isoenzimas so estimuladas pelas subunidades G , mas so dependentes da estimulao concomitante da subunidade da Gs. H isoenzimas que so estimuladas pelo Ca2+ ou pelo complexo Ca2+-calmodulina. Como no incomum que vrios receptores de uma clula ativem uma nica ptn G, inmeros agonistas podem estimular a adenilil ciclase atravs de uma nica ptn G, conhecida como Gs. AMP cclico: O AMP cclico (AMPc) sintetizado pela adenilil ciclase, em resposta ativao de muitos receptores. A estimulao mediada pela Gs e a inibio por uma ou mais protenas de parentesco prximo, chamadas Gi. Existem pelo menos dez isoenzimas nos tecidos, cada uma com respostas especficas. Vrias delas so inibidas por subunidades da ptn G, permitindo a ativao de ptn G diferentes de Gs para inibir a ciclase. Em muitos casos, o AMP cclico atua ativando protenas cinases dependentes, que regulam protenas intracelulares por catalisarem sua fosforilao. Clcio: Outro segundo mensageiro, o Ca2+, tem sua concentrao controlada pela regulao de vrios canais de Ca2+ especficos diferentes na membrana, ou por sua liberao de locais intracelulares de armazenamento (retculo endoplasmtico e mitocndria).O clcio participa de vrios processos fisiolgicos e bioqumicos, como a contrao muscular, a liberao de neurotransmissor nas terminaes nervosas, nas clulas da retina e viso, no controle do citoesqueleto (proliferao, secreo), na migrao celular, na expresso gentica e no metabolismo. Os trs maiores processos de liberao de clcio, seja em reconhecimento direto pela proteina ou pela ligao enzimtica, incluem: 1. vias metablicas reguladas pela proteina G 2. vias metablicas reguladas pelos receptores proteina kinases 3. canais de clcio Os canais podem ser abertos por despolarizao eltrica, fosforilao (por proteina cinase dependente de AMPc), pela Gs, pelo K+ ou pelo prprio Ca2+. A abertura pode ser inibida por outras protenas G (Gi e Go). Via metablica IP3/DAG: A liberao do Ca2+ pelos canais especficos do retculo endoplasmtico, pode ser, tambm, mediada por outro segundo mensageiro, o 1,4,5-trifosfato de inositol (IP3), um produto da hidrlise do lipdio da membrana fosfatidil inositol 4,5bifosfato (PIP2), reao esta catalisada pela fosfolipase C. O Ca2+ ativa a ptn cinase C e a calmodulina. Segundos mensageiros lipoflicos: Estas molculas so derivadas de lipdios normalmente presentes nas membranas celulares. Algumas enzimas (Ptn kinase C), quando ativadas por receptores, modificam estes lipdios, convertendo-os em segundos mensageiros, como: diacilglicerol (DAG); ceramidas; eicosanoides a cido lisofosfatdico A ativao da ptn cinase pelo Ca2+ potencializada pelo diacilglicerol (DAG), outro segundo mensageiro, produto da reao catalisada pela fosfolipase C, que libera IP3. Via metablica MAPK/ERK: Esta via induz a respostas intracelulares na ligao de fatores de crescimento a receptores de superfcie celular. Esta via envolve vrios componentes proteicos e sua ativao promove a diviso celular. xido Ntrico: O gs xido Ntrico (NO) pode agir como um segundo mensageiro. um radical livre que difunde-se pela menbrana e pode agir no espao intracelular. Formado a partir de arginina e O2 pela ao da NO sintase, o NO ativa a guanilato cliclase, que produz o segundo-mensageiro o GMPc. O NO tambm pode induzir a modificao de proteinas e seus metais (co-fatores). As reaes so reversveis.

O NO est envolvido em uma srie de alteraes fisiolgicas, como o relaxamento de vasos sanguneos, na regulao as exocitose de neurotransmissores, na resposta imune celular, na produo e manuteno da ereo peniana e na ativao da apoptose nos sinais iniciais que induzem fosforilao do H2AX

Segundos mensageiros

RECEPTORES ADRENRGICOS: Os receptores e adrenrgicos, localizam-se nas terminaes pr e ps-sinpticas. Os receptores 2 e 2 podem estar localizados em locais relativamente distantes das terminaes nervosas que liberam nor-epinefrina (cls. musculares lisas vasculares e elementos sanguneos), sendo ativados pelas catecolaminas circulantes. J os receptores 1 e 1 encontram-se nas proximidades imediatas das terminaes nervosas dos rgos-alvos perifricos.Estrutura:So uma famlia de protenas intimamente relacionadas. Receptores - adrenrgicos: 3 genes alfa 1 (1a, 1b e 1d) e 3 genes alfa 2 (2a, 2b e 2c) Dentro dos domnios transmembrana, os 3 receptores 1 tem homologia de cerca de 75% dos aminocidos, assim como os 3 receptores 2 adrenrgicos. Receptores alfa-2 adrenrgicos (geradores de PPSI): Os receptores 2 ativam os canais de K+ controlados pelas ptns G. resultando na hiperpolarizao da membrana. Em alguns casos, esse sistema dependente do Ca2+ e quando no, resulta do acoplamento direto mediado pelas proteinas entre os receptores e os canais. Tambm so capazes de inibir os canais de Ca2+ controlados pela voltagem, efeito mediado pela ptn Go. Promovem tambm a acelerao da troca de Na+ por H+, estimulao da atividade 2 da fosfolipase C, aumento da disponibilidade intracelular do Ca2+. A inibio da adenilil ciclase diminui a concentrao de AMCc e de tirosina cinase. Receptores alfa-1 adrenrgicos (geradores de PPSE): Utiliza a ptn Gs, agindo com suas 3 subunidades (, e ). Resulta na regulao de pelo menos 4 sistemas efetores. O mecanismo principal envolve a mobilizao do clcio intracelular, devido ativao das isoformas da fosfolipase C. A ao da enzima resulta na produo de: DAG _ ativador potente da ptn cinase C IP3 _ liberao do clcio das reservas intracelulares subtipo farmacolgico Alfa-1A Alfa-1B Alfa-1D Alfa-2A Alfa-2B Alfa-2C Receptores - adrenrgicos localizao tecidual Corao, fgado, cerebelo, crtex cerebral, prstata, pulmo, canal deferente Rim, bao, aorta, pulmo, crtex cerebral Aorta, crtex cerebral, prstata, hipocampo Plaquetas, crtex cerebral, medula vertebral, locus ceruleus Fgado, rim Crtex cerebral

Tem em comum aproximadamente 60% da seqncia de aminocidos dentro dos domnios transmembrana provveis, onde se encontra a bolsa de acoplamento do ligante para nor-epinefrina e epinefrina. O grupo NH3+ do ligante forma ligao salina com o aspartato (presente nos receptores adrenrgicos, dopaminrgicos, serotoninrgicos e colinrgicos muscarnicos) Todos os receptores beta estimulam a adenilil ciclase interagindo com Gs (aumenta ativao dos canais de Clcio) acumulao do AMPc, ativao ptn cinase alterao funo de ptns celulares. CARACTERSTICAS DOS SUBTIPOS DOS RECEPTORES ADRENRGICOS RECEPTO PROTEN EFETORES TECIDO RESPOSTAS R AG Musc.liso vascular, contrao Gq, ou fosfolipases musc genitourinrio contrao Alfa-1 Gi/Go musc intestinal relaxam/hiperpolarizao A, C e D fgado glicogenlise/neognese corao fora contrtil/arritmias PLC, PLA2 ilhotas pancreticas () regulao insulina Alfa-2 Gi agregao Plaquetas adelilil ou Go liberao NE Termin. nervosas ciclase musc liso vascular contrao canais K canais Ca Beta-1 Gs canais de Ca corao e adenilil cls justaglomerulares ciclase musc. lisos: vascular brnquico gastrointestinal adenilil genitourinrio ciclase musc esqueltico fgado adenilil tecido adiposo ciclase fora, freqncia velocidade ndulo AV secreo renina e

Beta-2 Gs

relaxamento captao K (glicogenlise) glicogenlise / gliconeognese liplise

Beta-3

Gs