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Capacidad Antioxidante de Polifenoles en Higo (Ficus carica) Variedad Mission Aguilera Ortiz Miguel1, Reza Vargas Maria del

Carmen1, Barre Bichir Karol Andree Yulianna.1 y Ramrez Baca Patricia.1


1

Facultad de Ciencias Qumicas-UJED. Av. Artculo 123 s/n, Fracc. Filadelfia. Gmez Palacio, Dgo. maguilerao@hotmail.com

Resumen Los polifenoles son antioxidantes que se encuentran presentes en productos de origen vegetal y su concentracin puede verse influenciada por diferentes factores como el tiempo de cosecha y el grado de madurez entre otros. Se determin la capacidad antioxidante en Ficus carica variedad Mission durante el tiempo de cosecha en dos grados de madurez. Las muestras de higo fueron tomadas y se les midi el color con un colormetro Minolta modelo DP-301 posteriormente fueron lavadas y cortadas para ser congeladas y liofilizadas, los polifenoles fueron extrados a reflujo, finalmente se determin la capacidad antioxidante por medio del ensayo 1,1-difenil-2-picrilhidracil (DPPH), y la absorbancia de la solucin fue determinada con el espectrofotmetro a 515 nm; los resultados fueron obtenidos a partir de una curva estndar empleando Trlox como referencia. Los datos fueron analizados por STATISTIC versin 6.0. Los resultados obtenidos muestran que el color del higo tierno (rayado) presenta un color rojizo mientras que el higo sazn (oscuro) un color violceo por la combinacin de azul con rojo, tendiendo a ser menos luminoso. La capacidad antioxidante muestra diferencia significativa respecto al ndice de madurez y al tiempo de cosecha presentando mayor capacidad antioxidante en el higo sazn (oscuro) la cual va de 0.001468 mM/10 g de peso fresco a 0.096014 equivalente al Trlox mientras que para el higo tierno (rayado) es de 0.002970 a 0.04296 mM/10 g de peso fresco equivalente al Trlox. Palabras clave: capacidad antioxidante, polifenoles, higo.

Abstract Polyphenols are antioxidants that they are founded in products of vegetal origin and their concentration can be influenced by different factor such as season time and level maturity, etc. The antioxidant capacity in Ficus carica variety mission was measured, during season time in two stages of maturity. The samples of fig were recollected and the color was measured with a Minolta CR-300, washed, cut, frozen and freeze-drying; polyphenols were extracted and antioxidant capacity was measured by 1,1-diphenil-2-pichrildidracyl (DOOPH) assay. The results were obtained of standard plot employing Trolox as reference. The dates were analyzed by Statistic 6.0. The results show that color of immature fig is red while mature fig is violet by combination of blue color with red. The antioxidant capacity shows significative difference respect to maturity index and season time, where highest antioxidant capacity in mature fig (0.001468 a 0.096014 Trolox equivalent). Key words: antioxidant capacity, polyphenols, fig.

Introduccin En los ltimos

aos

se

ha

acentuado

el

consumo

de

frutas

y hortalizas

considerablemente (Weisburger et al, 2002; Gliszczynska-Swiglo et al, 2003), esto debido

a que este tipo de productos muestran poder antioxidante, dado principalmente por su composicin fenlica (Scalvert et al, 2005). El aumento en el consumo de frutas y

hortalizas ha sido asociado con una menor incidencia de enfermedades crnicodegenerativas como la obesidad, el cncer y enfermedades cardiovasculares que generalmente son asociadas con el envejecimiento (Pineda et al, 1999). La accin benfica de frutas y hortalizas ha sido asociada principalmente al potencial antioxidante que contienen generalmente compuestos como el cido ascrbico, la vitamina E, el -caroteno y compuestos polifenlicos presentes en frutas y hortalizas, estos compuestos se encuentran en forma nativa en una gran variedad de estructuras (Matsingou et al, 2000). La dieta mediterrnea rica en frutas y vegetales frescos ha sido asociada con una baja incidencia de enfermedades cardiovasculares y cncer particularmente, debido a que estos productos contienen altas proporciones de compuestos bioactivos como vitaminas, flavonoides y polifenoles (Grizis et al, 2003). Se cree que la salud puede ser mejorada por el incremento en el consumo de antioxidantes en la dieta. Se ha demostrado que el consumo de quercetina, la cual contiene propiedades antioxidantes y quelantes contra el glicerol generado por el estrs oxidativo tiene un potencial rinoprotector, lo anterior fue observado al estudiar su efecto en ratas experimentales con dao renal agudo, y los resultados obtenidos muestran que el dao renal disminuye significativamente (Chander et al, 2005), adems el poder antioxidante de los polifenoles puede inhibir los radicales libres generados por el metabolismo regular del oxgeno dentro del cuerpo (Yu et al, 2002). Por lo que es necesario el incremento de investigacin para identificar alimentos y sus componentes como los polifenoles que tienen especial beneficio en la salud humana (Hwang et.al, 2005). Materiales y Mtodos Se tomaron muestras de higo tierno (rayado) y sazn (oscuro) de una poblacin de 4 hectreas de higo sembrado en Carlos Real Municipio de Lerdo, Dgo. Se midi el color para identificar los parmetros que presentaron los higos obteniendo los parmetros L (luminosidad), a rojo(+) a verde (-), b amarillo (+) y azul (-), se determin el Croma (C) y el ngulo Hue (H). Enseguida se cortaron las muestras para luego ser congeladas y posteriormente liofilizadas a una presin de 221x10-3 Mbar y a una temperatura de -44C. Enseguida se extrajeron los polifenoles a 2 g de higo liofilizado a reflujo con metanol al 80%, enseguida se filtr el extracto y se afor a 50 ml con metanol al 80%. Para la determinacin de capacidad antioxidante equivalente al trlox (TEAC) se emple el ensayo de 2,2,-difenil-1-picrilhidrasil (DPPH) de acuerdo a Sun et al (2005), se

adicionaron alcuotas (1 mL) del extracto polifenlico a 3.9 mL de solucin de DPPH (4.8 mg de DPPH en 200 mL de MeOH) y la absorbancia de la solucin fue determinada a 515 nm despus de 30 minutos de incubacin a temperatura ambiente. El Trolox fue usado como referencia para comparar la actividad antioxidante del extracto. El porcentaje de inhibicin de absorbancia de la solucin de DPPH adicionada con muestra fue calculada usando la siguiente ecuacin: % de inhibicin = (Abst=0-Abst=30 min) x 100 Abst=0 Donde: Abst=0 Es la absorbancia de DPPH a tiempo 0. Abst=30 min Es la absorbancia de DPPH despus de 30 minutos de incubacin. La relacin entre la muestra y el Trolox fue calculada con una regresin lineal y expresada como la actividad antioxidante equivalente a Trolox (TEAC).

Resultados y discusin Los resultados obtenidos en la medicin del color se muestran a continuacin en el Cuadro 1, en parmetros L (luminosidad), a (rojo/verde), b (amarillo/azul), H(matiz o tono), C (pureza del color).

Cuadro 1. Valores de color en muestras de higo tierno (rayado) y sazn (oscuro). Tipo de higo Higo tierno (rayado) Tiempo de recoleccin 1 8 15 22 29 36 43 50 57 1 8 15 22 29 36 43 50 57 L 38.01 38.33 41.94 36.65 38.57 42.28 36.31 43.01 41.74 28.86 27.90 30.56 29.15 29.28 27.46 29.33 30.90 30.18 A 11.08 4.96 7.09 6.20 5.05 6.48 2.15 0.63 9.74 3.98 4.28 4.68 3.24 3.36 2.32 2.75 4.36 4.25 Parmetros de color b H 9.08 27.03 14.49 34.79 13.45 24.94 8.41 22.21 10.67 24.34 14.67 23.32 9.92 18.19 13.25 23.18 14.16 13.82 -0.34 314.49 1.07 306.52 0.37 316.68 -0.42 322.40 -0.20 329.23 0.36 306.47 0.16 335.52 0.06 339.85 -0.48 345.45 C 15.22 17.22 17.30 13.28 14.59 17.75 13.91 16.45 17.18 4.30 4.80 5.24 3.42 3.38 2.58 3.35 4.67 4.35

Higo sazn (oscuro)

En fruto tierno (rayado) los resultados del anlisis del color muestran una mayor luminosidad en el fruto a los 50 das de haber iniciado la cosecha, mientras que la menor luminosidad se presenta al da 43. En el parmetro a se presenta la tendencia al color rojo con un valor mayor de 11.08 el primer da que da inicio la cosecha mientras que el menor valor en este parmetro se presenta a los 50 das. El parmetro b muestra su mayor valor al da 36 de 14.67 el cual tiende a amarillo. El matiz de los higos tiernos (rayados) es mayor a los 8 das de iniciada la cosecha con un valor de 34.79, mientras que el valor menor se presenta al da 57 con un valor de 13.82. El color ms vivo para el parmetro C lo muestran las muestras a los 36 das con un valor de 17.75. En fruto sazn (oscuro) los resultados del anlisis del color muestran una mayor luminosidad en el fruto a los 50 das de haber iniciado la cosecha, mientras que la menor luminosidad se presenta al da 36. En el parmetro a se presenta la tendencia al color rojo con un valor mayor de 4.68 a los 15 das de iniciada la cosecha mientras que el menor valor en este parmetro se presenta a los 36 das. El parmetro b muestra su mayor valor al da 8 de 1.07. El matiz de los higos tiernos (rayados) es mayor a los 57 das de iniciada la cosecha con un valor de 345.45, mientras que el valor menor se presenta al da 36 con un valor de 306.47. El color ms vivo para el parmetro C lo muestran las muestras a los 15 das con un valor de 5.24. La capacidad antioxidante equivalente al Trlox en higo Ficus carica variedad mission medida por el mtodo DPPH es mayor en las primeras cinco semanas de recoleccin para el higo sazn (oscuro) disminuyendo en las 4 ltimas semanas de recoleccin, en el higo tierno (rayado) la capacidad antioxidante equivalente al Trlox se mantiene baja al inicio de la recoleccin y hasta la quinta semana de iniciada la recoleccin aumenta mantenindose este aumento durante las prximas cuatro semanas hasta terminar la cosecha (Grfica 1). El fruto del higo tiene capacidad antioxidante elevada y puede estar relacionada con el color del fruto y con el tiempo de la cosecha, por lo que es posible sugerir que el higo variedad Missin por ser un fruto al igual que los productos de origen vegetal desarrolla esta propiedad como consecuencia de la produccin de polifenoles como sistema de defensa contra los herbvoros (Darren et al, 2002), los polifenoles adems de contener mltiples actividades biolgicas (Ehala et al, 2004), tienen la propiedad de dar pigmentacin a muchos de los productos de origen vegetal, mostrando actividades fotoprotectoras en trminos de absorcin de radiacin UV, con lo que puede prevenirse del dao provocado por los rayos del sol a las estructuras moleculares, por lo que actan como agentes protectores hacia los productos de origen vegetal contra medio ambiental (Kitamura et al, 2004; Hinneburg et al, 2005).

Mission maduro 0.12

Mission inmaduro

0.1

0.08 Trlox 0.06


[[]

0.04

0.02

0 1 7 14 21 28 Tiempo (das) 35 42 48 56

Grfica 1. Capacidad antioxidante equivalente al Trlox en higo Ficus carica variedad Misin durante el tiempo de la cosecha en mM/10g peso fresco.

Por otro lado, Salomn et al (2006), sugieren que la capacidad antioxidante es debida a la pigmentacin del higo. La variedad Mission se caracteriza por ser una fruta prpura oscura, conteniendo altas concentraciones de polifenoles, en este trabajo, la variedad Misin estudiada se presenta en dos ndices de madurez lo cual tiene que ver con las diferentes concentraciones de polifenoles como lo son las antocianinas que producen el color de los frutos, en el higo tierno (rayado) se presenta menor concentracin de pigmentos que en el higo sazn y esto puede deberse a la presencia de diferentes concentraciones de antocianinas lo cual se ve reflejado en la capacidad antioxidante de las muestras analizadas. Es necesario tener presente que la presencia de pigmentos como las antocianinas que son un tipo de compuestos fenlicos flavonoides y son los pigmentos hidrosolubles presentes en el lquido vacuolar de las clulas responsables de la mayora de las coloraciones rojas, azules y violetas de productos de origen vegetal; muestran actividades fotoprotectoras en trminos de absorcin de radiacin UV, con lo que los mismos productos de origen vegetal pueden prevenir el dao provocado por los rayos del sol a las estructuras moleculares, por lo que actan como agentes protectores contra los efectos del medio ambiental (Kitamura et al, 2004; Alasalvar et al, 2004). Por lo que es posible sugerir que el higo variedad Mission presenta mayor capacidad antioxidante en higo sazn que en rayado debido a que presenta mayor concentracin de antocianinas impartiendo un color oscuro en el fruto.

Bibliografa Alasalvar C, Al-Farsi M, Shahidi F. Compositional Characteristics and Antioxidant Components of Cherry Laurel Varieties and Pekmez. Journal of Food Science. 2005; 70:547-552. Gliszczynska-Swiglo A, Tyrakowska B. Quality of Commercial Apple Juices Evaluated on the Basis of the Polyphenol Content and the TEAC Antioxidant Activity. Journal of Food Science. 2003; 68(5):1844-1849. Grizis C, Atta-Poliyou J, Koupparis M. Simultaneous Determination of Oleuropein and Tyrosol in Plasma Using High Performance Liquid Chromatography with UV Detection. Journal of Liquid Chromatography-Related Technologies. 2003; 26:599-616. Chander V, Singh D, Chopra K. Reversal of Experimental Myoglobinuric Acute Renal Failure in Rats by Quercetin, a Bioflavonoid. Pharmacology. 2005; 73:49-56. Darren J, Constabel P. Molecular Analisis of Herbivore-induced Condensed Tannin Synthesis: Cloning and Expression of Dihydroflavonol Reductase from Trembling Aspen (Populus tremuloides). The Plant Journal. 2002; 32:701-12. Ehala S, Vaher M, Kaljurand M. Separation of Polyphenols and L-ascorbic Acid and Investigation of their Antioxidant Activity by Capillary Electrophoresis. Proc Estonian Acad Sci Chem. 2004; 53:21-35. Hwang E, Bowen P. Effects of Tomato Paste Extracts on Cell Proliferation, Cell-Cycle Arrest and Apoptosis in LNCaP Human Prostate Cancer Cell. Bio Factor. 2005; 22:241-3. Hinneburg I, Neubert R. Influence of Extraction Parameters on the Phytochemical Chracteristics of Extracts from Buckwheat (Fagopyrum esculentum) Herb. J Agric Food Chem. 2005; 53:3-7. Kitamura S, Shikazono N, Tanaka A. Transparent Testa 19is Involved in the Accumulation of Both Anthocyanins and Proanthocyanidins in Arabidopsis. The Plant Journal. 2004; 37:104-14. Matsingou T, Kapsokefalou M, Salifoglou A. In vitro Antioxidant Activity of Black Tea and Mediterranean Herb Infusion Toward Iron Under Simulated Gastrointestinal Condition. Journal of Food Science. 2000; 65:1060-5. Pineda D, Salucci M, Lzaro, R., Maiani G, Ferru-Luzzi A. Capacidad Antioxidante y Potencial de Sinergismo Entre los Principales Constituyentes Antioxidantes de Algunos Alimento. Rev Cubana Plant Med. 1999; 13:104-11. Scalver A, Manach C, Morand C. Dietery Polyphenols and the Prevention of Diseases. Critical Review in Food Science and Nutrition. 2005; 45:287-306.

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