DOSAJE DE GLUCOSA EN SANGRE TOTAL

INTRODUCCIN:

DETERMINACIN DE GLUCOSA EN SANGRE: La glucosa se determina habitualmente en un anlisis de sangre (glucemia) o en un anlisis de orina (glucosuria).La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el pncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que tambin la provocan. Por tanto, la determinacin de glucosa en sangre (glucemia) es til para el diagnstico de numerosas enfermedades metablicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. Tambin es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se debe administrar para tratarla. Muchas formas de estrs (traumatismos, infartos, anestesia general,..) pueden aumentar los niveles de glucosa en sangre de forma pasajera. La cafena tambin puede aumentar los frmacos: algunos pueden aumentar los niveles de glucosa en sangre u orina, otros pueden disminuir los niveles en sangre y otros pueden interferir en los resultados obtenidos con las tiras reactivas para medir la glucosa

Mtodo de Folin Wu:

Objetivo: Detectar y cuantificar glucosa en una muestra biolgica.Utiliza un filtrado de cido tngstico de sangre total, que se calienta con una solucin de cobre, con reduccin de los iones cpricos a cuprosos.Los iones cuprosos son entonces medidos fotomtricamente (colorimtricamente) por la adicin de un exceso de cido fosfomolbdico para formar azul de molibdeno

Material y equipos: Tubos de ensayo Papel filtro Whatman n1 Klett Summerson Pipetas, agua destilada.

Reactivos: Solucin de H2SO4 2/3 N Solucin de Tungstato de sodio al 10% Solucin Cprico alcalina Solucin fosfomolibdica

Procedimiento: Paso A: Obtencin del filtrado libre de protenas: En la flexura del codo, elegir la vena ceflica, limpiar la zona con algodn empapado con alcohol yodado. Hacer torniquete y hacer puncin venosa y extraer 1ml de sangre. Colocarlo en un tubo de ensayo y agregarle 7ml de agua destilada; mezclar por inversin. Siguientemente aadir 1 ml de solucin de H2SO4 2/3 N; mezclar y dejar en reposo por 5 minutos. Luego agregar 1 ml de solucin solucin de Tungstato de sodio al 10%. Tapar la boca del tubo con el dedo pulgar y agitar enrgicamente el contenido del tubo, hasta tener un precipitado achocolatado . dejar en reposo unos 2 minutos y luego filtar el contenido empleando papel de filtro whatman n1.

Paso B Cuantificacin de glucosa en el filtrado libre de protenas: Ahora se trabajar con dos tubos de ensayo. Al primero le agregamos 1ml de agua destilada, luego 1ml de solucin cprico alcalina. Al segundo tubo se le agrega 1ml de filtrado libre de protenas, 1 ml de solucin cprico alcalina. Colocar los tubos en agua hirviendo por 8 minutos, al trmino del tiempo enfriar en agua corriente. Finalmente agregar a ambos tubos 1ml de solucin fosfomolibdica. Mezclar enrgicamente los contenidos de cada tubo, dejar en reposo por tres minutos y completar a 10 ml con agua destilada. Mezclar los contenidos por inversin; para esto tapar la boca del tubo con el dedo pulgar. Dejar en reposo por 1 minuto. Realizar las lecturas fotocolorimtricas empleando Klett Sumerson; ambos con filtro azul 420 nanmetros (nm). Anotar las lecturas. Al primer tubo le llamaremos blanco y al segn do problema.

Resultados: 3 de absorbancia en blanco 374 de absorbancia en el problema.

Dela lectura del problema restar la del blanco Problema blanco= 371