SNTESE E CARACTERIZAO ESTRUTURAL DE DIBENZALACETONAS E CHALCONAS COM PROPRIEDADES FOTOPROTETORAS

Dbora Figueiredo Uhdre [Bolsista PIBIC-AF/Fundao Araucria], Maykon Rodrigues Alves [Colaborador], Rafaelle Bonzanini Romero [Orientadora], Adriano Lopes Romero [Colaborador]
Coordenao de Licenciatura em Qumica Cmpus Campo Mouro Universidade Tecnolgica Federal do Paran - UTFPR BR 369 - km 0,5, CEP 87301-006 - Caixa Postal: 271 - Campo Mouro - PR figueiredo_uhdre@hotmail.com, maykonchess@windowslive.com, adrianoromero@utfpr.edu.br, rbromero@utfpr.edu.br

Resumo Os raios UVA e UVB podem causar vrias disfunes estruturais e funcionais nas biomolculas de DNA, protenas e lipdeos, assim como desencadear estresse oxidativo s clulas. Neste cenrio, nas ltimas dcadas os efeitos nocivos do sol que possui cerca de 7% de raios ultravioletas foram amplamente estudados, permitindo a conscientizao da populao sobre a necessidade da utilizao de fotoprotetores. Entre os principais problemas ocasionados pelos raios ultravioletas destacam-se as leses oculares, tais como a fotoceratite, o ptergio, a catarata, a degenerao macular e a ulcerao da crnea. Neste contexto, nosso grupo de pesquisa vem estudando a obteno de filmes polimricos dopados com fotoprotetores de radiao ultravioleta para aplicao em lentes oftlmicas. Desta forma, este trabalho teve como objetivo sintetizar e caracterizar estruturalmente dibenzalacetonas e chalconas com potencial para absoro de raios UVA e UVB. Foram sintetizadas trs dibenzalacetonas e trs chalconas utilizando reaes de condensao aldlica com bons rendimentos (54-94%). Os dados fsicos e espectroscpicos dos compostos sintetizados foram concordantes com dados da literatura. Alm de propriedades fotoprotetoras, chalconas derivadas do cido saliclico tem sido recentemente descritas na literatura por sua atividade inibidora de HIV-1 integrase. Palavras-chave: Fotoprotetores; raios ultravioletas; condensao aldlica; chalconas. Abstract - UVA and UVB rays can cause various disorders in structural and functional biomolecules DNA, proteins and lipids, as well as trigger oxidative stress to the cells. In recent decades the harmful effects of the sun - which has about 7% of ultraviolet rays - have been widely studied, allowing the public awareness of the need to use sunscreen. Among the main problems caused by ultraviolet rays stand out eye injuries, such as photokeratitis, pterygium, cataracts, macular degeneration and corneal ulceration. In this context, our research group has studied obtaining polymer films doped with UV sunscreen for application to ophthalmic lenses. Therefore, this study aimed to synthesize and characterize structurally dibenzalacetones and chalcones with potential for UVA and UVB absorption. We synthesized three dibenzalacetones and three chalcones using aldol condensation reactions with good yields (54-94%). The physical and spectroscopic data of the synthesized compounds were in agreement with literature data. Besides photoprotection properties, chalcones derived from salicylic acid has recently been described in the literature for their HIV-1 integrase inhibitory activity. Keywords: Sunscreens; ultraviolet rays; aldol condensation; chalcones.

INTRODUO Entende-se por radiao ultravioleta a regio do espectro eletromagntico compreendido entre comprimentos de ondas de 200 a 400 nm, que por sua vez, subdividem-se em trs: ultravioleta C ou UVC (200-280 nm), que no chega superfcie terrestre; ultravioleta B ou UVB (280-320 nm); ultravioleta A ou UVA (320-400 nm) [1]. Estas radiaes podem causar, no ser humano, vrias disfunes estruturais e funcionais das biomolculas DNA, protenas e lipdeos, assim como desencadear estresse oxidativo s clulas. Neste cenrio, nas ltimas dcadas os efeitos nocivos do sol que possui cerca de 7% de raios ultravioletas foram amplamente estudados, permitindo a conscientizao da populao sobre a necessidade da utilizao de fotoprotetores. Entre os principais problemas ocasionados pelos raios ultravioletas destacam-se as leses oculares. O comprometimento da viso pode decorrer no somente de uma exposio crnica ao sol, mas tambm dos efeitos acumulativos de uma exposio normal aos raios UV sem proteo adequada. Entre essas complicaes associadas exposio desprotegida dos olhos aos raios solares esto a fotoceratite (inflamao da crnea); o ptergio (espessamento do tecido da conjuntiva, que pode invadir a crnea); a catarata (opacificao do cristalino); a degenerao macular (leso da regio central da retina); e at mesmo, em casos mais graves, a ulcerao da crnea [1]. Fotoprotetores qumicos Os fotoprotetores podem ser divididos em duas categorias principais: os fsicos que refletem a luz solar, atuando como uma barreira mecnica (de que so exemplo o dixido de titnio ou o xido de zinco) e os qumicos que absorvem seletivamente a radiao ultravioleta e permitem a transmisso da luz visvel. Os fotoprotetores qumicos so compostos aromticos conjugados com um grupo carbonila. Em muitos exemplos, h um grupo doador de eltrons (amina ou metoxila) nas posies orto ou para do anel aromtico. A seguir so apresentadas as principais classes de fotoprotetores sintticos e naturais que absorvem radiaes ultravioletas [3]. O cido p-aminobenzico (PABA) uma das molculas mais antigas utilizadas como fotoprotetor de raios UVB. Os fotoprotetores da classe dos cinamatos possuem absoro mxima prximo a 308 nm. Quando utilizados sozinhos no permitem que seja atingido um coeficiente de proteo elevado porque so pouco estveis fotoquimicamente. O p-metxicinamato de octila, sob efeito da radiao UV, transforma-se no ismero cis, cujo pico de absoro mais baixo (265 nm), diminuindo sua eficcia. Os fotoprotetores da classe dos salicilatos possuem absoro mxima prximo a 300 nm. Os compostos pertencentes a esta classe foram os primeiros filtros UV usados em protetores solares por serem muito estveis, no interagem com solventes e serem bem tolerados pelo organismo humano. O salicilato de octila, por exemplo, absorve eficientemente raios UVB e absorve pouco na regio do UVA. Os fotoprotetores da classe benzimidazis so utilizados amplamente em produtos aquosos devido sua hidrossolubilidade e eficcia na absoro de raios UVB. O representante mais importante deste grupo o cido 2-fenil-benzimidazol-5-sulfnico. Os fotoprotetores derivados de benzilideno cnfora possuem uma unidade monoterpnica bicclica e so excelentes filtros para raios UVB cujo mximo de absoro situa-se em torno de 300 nm.

Os fotoprotetores da classe benzofenas absorvem em toda regio dos raios UVB e em grande parte dos raios UVA. No entanto, so responsveis por inmeras reaes alrgicas ou dermatite de contato. Dentre as classes de produtos naturais com propriedades fotoprotetores destaca-se as chalconas. Os compostos pertencentes a esta classe possuem vrias atividades biolgicas, tais como citotoxidade, anticancergena, antiviral, inseticida, antiinflamatria, alm de aturarem como fotoprotetores. Quimicamente as chalconas so definidas como 1,3-diaril-2-propen-1onas. Na Figura 1 apresentada a frmula estrutural genrica para todas as chalconas, onde R e R1 representam radicais que variam para cada chalcona.
COOH O O CH3O NH2 p-aminobenzico p-metxicinamato de octila CH3 O N NH H3C CH3 R1 Chalcona salicilato de octila benzofenona-3 H3C OCH3 OH O O 6 O 6 OH

HO3S

cido 2-fenil-benzimidadol 5-sulfnico

metil benzilideno cnfora

Figura 1. Principais fotoprotetores de radiaes UVA e UVB. Neste contexto, nosso grupo de pesquisa vem estudando a obteno de filmes polimricos dopados com fotoprotetores de radiaes UVA e UVB para aplicao em lentes oftlmicas. Desta forma, este trabalho teve como objetivo sintetizar e caracterizar estruturalmente dibenzalacetonas e chalconas com potencial para absoro de raios UVA e UVB. METODOLOGIA Materiais. Os aldedos utilizados, benzaldedo e anisaldedo (Merck), apresentavam um grau de pureza > 97%. A acetona, cido saliclico, anidrido actico e o cido actico glacial utilizados so P.A. (Fluka). Mtodos gerais. Os espectros de RMN de 1H e 13C foram obtidos em espectrmetros Gemini 300P-Varian Instrumentos (300,06 MHz para 1H e 75,45 MHz para 13C). Os deslocamentos qumicos foram registrados em , tomando-se como padres de referncia interna o tetrametilsilano ou o CDCl3. Sntese da (1E,4E)-1,5-bis(4-metxifenil)penta-1,4-dien-3-ona (pmetxidibenzalacetona). Adicionou-se 8,0 mL (0,16 mol) de anisaldedo e 2,0 mL (0,06 mol) de acetona em 40,0 mL de etanol num bquer de 250 mL. A esta soluo adicionou-se 30,0 mL (3,20 mol) de hidrxido de sdio aquoso 2 mol.L-1. Em seguida, a soluo foi agitada vigorosamente por 10 min. em temperatura controlada de 30-40C. Aps o aque-cimento, a mistura ficou em repouso durante 30 min., sob agitao ocasional. Aps o tempo indicado, adicionou-se a soluo 80,0 mL de gua fria e em seguida filtrou-se o slido obtido.

Sntese da (1E,4E)-1,5-difenilpenta-1,4-dien-3-ona (dibenzalacetona). Adicionou-se 4,0 mL (0,04 mol) de benzaldedo e 1,0 mL (0,011 mol) de acetona em 20,0 mL de etanol num bquer de 250 mL. A esta soluo adicionou-se 15,0 mL (0,80 mol) de hidrxido de sdio aquoso 2 mol.L-1. Em seguida, a soluo foi agitada vigorosamente por 10 min. em temperatura controlada de 30-40C. Aps o aque-cimento, a mistura ficou em repouso durante 30 min., sob agitao ocasional. Aps o tempo indicado, adicionou-se a soluo 40,0 mL de gua fria e em seguida filtrou-se o slido obtido. Sntese da (2E)-3-(4-metxifenil)-1-fenilprop-2-en-1-ona (anisalacetofenona). Adicionouse 5,0 mL (0,08 mol) de anisaldedo e 6,0 mL (0,10 mol) de acetofenona em 15,0 mL de etanol num bquer de 250 mL. A esta soluo adicionou-se 25,0 mL (2,70 mol) de hidrxido de sdio aquoso 2 mol.L-1. Em seguida, a soluo foi agitada vigorosamente por 2 horas em temperatura controlada de 25-30C. Aps o aque-cimento, a mistura ficou em repouso durante 30 min., sob agitao ocasional. Aps o tempo indicado, adicionou-se a soluo 60,0 mL de gua fria. Em seguida, recristalizou-se com 50,0 mL de etanol 95% a quente e filtrou-se o slido obtido. Sntese da (2E)-1,3-difenilprop-2-en-1-ona (benzalacetofenona). Adicionou-se 10,0 mL (0,10 mol) de benzaldedo e 12,0 mL (0,10 mol) de acetofenona em 30,0 mL de etanol num bquer de 250 mL. A esta soluo adicionou-se 50,0 mL (2,70 mol) de hidrxido de sdio aquoso 2 mol.L-1. Em seguida, a soluo foi agitada vigorosamente por 2 horas em temperatura controlada de 25-30C. Aps o aque-cimento, a mistura ficou em repouso durante 30 min., sob agitao ocasional. Aps o tempo indicado, adicionou-se a soluo 100,0 mL de gua fria e com o auxlio de um funil de separao, isolou-se o leo obtido. Em seguida, adicionou-se gua fria ao leo e filtrou-se o slido obtido. Sntese do cido 3-formil-2-hidrxibenzico (3-FSA). Preparou-se uma soluo com 45 mL de clorofrmio, 5,00 g de cido saliclico, 5,56 g de hidrxido de sdio e 1 mL de gua. Deixou-se em refluxo por 48 h em manta aquecedora. Aps o tempo indicado, adicionou-se gua e filtrou-se. Ao filtrado, adicionou-se soluo de HCl 1 mol.L-1 at a precipitao do produto desejado. Filtrou-se o precipitado e lavou-se com gua destilada. Ponto de fuso: 180-181oC; literatura [4]: 180-183oC. RMN de 1H (300,06 MHz, CDCl3): 12,10 (sl, 1H, COOH); 10,51 (s, 1H, CHO); 8,13 (dd, J = 2 e 7 Hz, 1H, H-6); 7,99 (dd, J = 2 e 7 Hz, 1H, H-4); 6,97 (t, J = 7 Hz, 1H, H-5); 5,69 (sl, 1H, OH fenlico). RMN de 13C (75,45 MHz, CDCl3): 189,1 (CHO); 172,2 (COOH); 164,4 (C-2); 137,1 (C-6); 134,2 (C-4); 124,2 (C-3); 118,8 (C-5); 114,6 (C-1). Sntese do cido 2-hidrxi-3-[(1E)-3-oxo-3-fenilprop-1-en-1-il]benzico. Preparou-se uma soluo com 0,66 g de 3-FSA, 0,5 mL de acetofenona e 5 mL de NaOH 25%. A soluo permaneceu sob agitao magntica por 48 h a temperatura ambiente. Aps o tempo indicado, precipitou-se o produto desejado com soluo aquosa de HCl 20%. Filtrou-se o precipitado, lavou-se com gua destilada e recristalizou-se utilizando 20 mL de etanol e uma esptula de carvo ativo. Sntese do 3,3'-[(1E,4E)-3-oxopenta-1,4-dieno-1,5-diil]bis(cido 2-hidrxibenzico). Preparou-se uma soluo de 0,66 g de 3-FSA, 0,133 mL de acetona, 10 mL de etanol e 5 mL de NaOH 25%. A soluo permaneceu sob agitao magntica por 4 h a temperatura ambiente. Aps o tempo indicado, acidificou-se o meio reacional com soluo aquosa de HCl

20% e submeteu-se uma extrao com acetato de etila (3 x 30 mL). As fases orgnicas foram reunidas e secadas. RESULTADOS E DISCUSSO Neste trabalho, foram obtidos seis fotoprotetores via reaes de condensao aldlica cruzada, utilizando uma cetona (acetona ou acetofenona) e um aldedo (benzaldedo ou anisaldedo ou cido 3-formilsaliclico). Os rendimentos das reaes foram acima de 80% (Tabela 1), com exceo do anisalacetofenona que foi obtido com rendimento de 54%. Os rendimentos mdios obtidos neste trabalho foram similares aos obtidos por Murtinho et al. (2010) [2]. Os fotoprotetores foram caracterizados pela determinao do ponto de fuso e anlises dos espectros de RMN. Os valores de ponto de fuso obtidos experimentalmente foram similares aos tericos (Tabela 1). Tabela 1. Rendimentos e pontos de fuso dos fotoprotetores obtidos via condensao aldlica. Rendimento Ponto de Fuso Ponto de Fuso Fotoprotetores (%) Experimental (C) Terico (C)* Dibenzalacetona (1) p-metxidibenzalacetona (2) Anisalacetofenona (3) Benzalacetofenona (4) 2-hidrxi-3-[(1E)-3-oxo-3fenilprop-1-en-1-il]benzico (7) 3,3'-[(1E,4E)-3-oxopenta-1,4dieno-1,5-diil]bis(cido hidrxibenzico) (8)
*Referncia [2] e informaes do SciFinder (www.scifinder.cas.org).

94 85 54 81 20

102-108 127-129 72-74 51-54 -

113 129-130 77-78 56-57 -

2-

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O mecanismo da reao de condensao aldlica genrico apresentado na Figura 2.

Figura 2. Mecanismo genrico para reaes de condensao aldlica.

A condensao aldlica consiste na reao de um on enolato de um composto carbonlico, aldedo ou cetona, com outra molcula de composto carbonlico, que pode ou no ser igual primeira. Se utilizar mais do que um composto com tomos de hidrognio enolizveis (H) pode formar-se uma mistura de produtos de condensao. Assim, para favorecer a formao de um nico produto, utiliza-se um composto carbonlico que no possui hidrognios enolizveis e outro composto carbonlico que os possui. Nestas condies o produto de condensao uma -hidroxicetona ou um -hidroxialdedo, que sofre desidratao, dando origem a uma cetona ou aldedo ,-insaturado. Se este produto ainda possuir H pode ocorrer nova condensao com outra molcula de composto carbonlico [2]. Aps as realizaes das reaes de condensao aldlica, as estruturas dos fotoprotetores sintetizados foram confirmadas a partir das anlises dos espectros de RMN de 1 H e de 13C e por comparao com dados da literatura (Tabela 2). Tabela 2. Dados de RMN de 1H e de 13C de alguns fotoprotetores sintetizados neste trabalho. Fotoprotetor Dados de RMN de 1H e de 13C 7,74 (d, J = 15,8 Hz, 2H); 7,64-7,61 (m, 4H); 7,43-7,41 (m, 6H); 7,09 (d, J = 15,8 Hz, 2H).
O

Dibenzalacetona
188,8 125,4

143,2 134,8

128,4 128,9 130,4

7,70 (d, J = 15,6 Hz, 2H); 7,57 (d, J = 8,8 Hz, 4H); 6,96 (d, J = 15,6 Hz, 2H); 6,93 (d, J = 8,8 Hz, 4H); 3,86 (s, 6H).
O

p-metxidibenzalacetona
CH3O

OCH3

7,38 (m, 3H); 7,47 (m, 2H); 7,54 (d, J = 15 Hz, 1H); 7,61 (m, 2H); 7,81 (d, J = 15 Hz, 1H); 8,02 (m, 2H).
O

Benzalacetofenona
128,9 132,7

128,6 138,1 190,4 122,1

144,7 134,8

128,49 128,45

130,4

8,01 (q, 2H); 7,78 (d, J = 15 Hz, 1H); 7,60 (m, 2H); 7,57 (m, 1H); 7,50 (m, 2H); 7,42 (d, J = 15 Hz, 1H); 6,94 (m, 2H); 3,85 (s, 3H).
O

Anisalacetofenona
128,6 132,5

128,4 138,6 190,6 119,9

144,7 127,7

130,2 114,5 161,7

OCH3
55,7

O cido 3-formilsaliclico (6) foi obtido, pela reao de formilao do cido saliclico (5) utilizando a metodologia de Reimer-Tiemann, em % de rendimento. Na sequncia, este composto foi submetido condensao aldlica com acetona e com acetofenona (Figura 3). O sucesso da sntese foi determinado por cromatografia em camada delgada e por identificao do grupo carbonila utilizando 2,4-dinitrofenilhidrazina. A determinao estrutural dos compostos 7 e 8 est sendo realizada a partir das anlises dos espectros de RMN de 1H e de 13 C/DEPT.
OH CO2H CHCl3, NaOH, H2O refluxo, 48 h 5 acetona, NaOH t.a., 4 h 6 acetofenona, NaOH t.a., 48 h OHC OH CO2H

OH HO2C

OH CO2H

OH CO2H

Figura 3. Rota sinttica utilizada para obteno de fotoprotetores derivados do cido saliclico. Recentemente, um estudo mostrou que chalconas derivadas do cido 3-formilsaliclico possuem atividade inibidora da enzima HIV-1 integrase. Segundo reviso realizada no SciFinder, as substncias 7 e 8 seriam inditas na literatura. Desta forma, estes compostos tero suas atividades antirretroviral avaliada utilizando como modelo o Vrus da Imundeficincia Smia (SIV). CONCLUSES Conclui-se que as reaes de condensao aldlica uma metodologia eficiente para a obteno de dibenzalacetonas e chalconas, cujas condies reacionais podem ser realizadas em condies brandas e com bom rendimento. Aps reviso de literatura, observou-se que substncias anlogas a 7 e 8 possuem potencial atividade antirretroviral. AGRADECIMENTOS Dbora Figueiredo Uhdre agrade Fundao Araucria pela bolsa de PIBIC - Aes Afirmativas. REFERNCIAS [1] BROGNA, F.M.S.; RAVAGNANI, S.P. Modelagem e Simulao da Polimerizao Termo e Foto-Iniciada de Resinas di-Carbonato di-Alila do Etileno Glicol para a Produo de Lentes Oftlmicas. Polmeros, v.12, p.265-272, 2002. MURTINHO, D.M.B.; SERRA, M.E.S.; PINEIRO, M. Sntese de Fotoprotetores e sua Imobilizao em Poli(Metacrilato de Metila): Um Projeto Integrado de Qumica

[2]

Orgnica, Qumica de Polmeros e Fotoqumica. Qumica Nova, v. 33, p. 1805-1808, 2010. [3] CABRAL, L.D.S.; PEREIRA, S.O.; PARTATA, A.K. Filtros solares e fotoprotetores mais utilizados nas formulaes no brasil. Revista Cientfica do ITPAC, v.4, n.3, Pub.4, 2011. [4] Sites: http://www.chemcas.org/drug/analytical/cas/610-04-8.asp, http://www.advtechind.com/DetailPage.asp?ProductCode=1082763, 14h45min, 23/09/2012.