Sunteți pe pagina 1din 29

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

UNIVERSIDAD ALAS PERUANAS


FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE ESTOMATOLOGA

AUTORES: Dr. Juan Luis RODRGUEZ VEGA Lic. Wilmer Leoncio CALDERN MUNDACA DIRECTOR DE ESCUELA: Dr. Antonio Vctor DURAND PICHO UAP - 2011

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

INSTRUCCIONES PARA EL USO DE LA GUA DE PRCTICAS Las prcticas de laboratorio de Histologa y Embriologa estn concebidas como un adecuado complemento a las clases tericas y se recomienda al estudiante de la UAP que emplee este material fundamentalmente leer previamente la parte de INTRODUCCIN y los OBJETIVOS indicados en cada una de ellas. Igualmente debe proveer la atencin requerida para cada prctica y desarrollar los trabajos que el docente considere conveniente. Se debe ceir estrictamente a lo programado en PROCEDIMIENTOS realizando cada una de las experiencias o aquellas que el docente seale previamente. El estudiante en el numeral RESULTADOS registrar en las hojas en blanco los resultados de cada una de las experiencias realizadas y expresados en esquemas, grficos, tablas, cuadros. etc. Luego elaborar la DISCUSIN de los resultados obtenidos en la prctica con las aseveraciones que sobre el particular obtenga de la revisin de la bibliografa especializada. En funcin de los objetivos fijados y de los resultados obtenidos el estudiante elaborar las CONCLUSIONES preferentemente en forma de generalizaciones aplicando el mtodo inductivo. En el numeral REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS se indicarn las fuentes de informacin que sobre el particular se han consultado. El nmero y tipo de trabajos citados en la lista de referencias bibliogrficas, en ocasiones, es una indicacin de la calidad del trabajo; se acostumbra colocarlos en orden alfabtico de apellidos y en forma de lista con las principales notas tipogrficas siguiendo las pautas que se indicaron en la asignatura referente a Metodologa del Trabajo Universitario o su equivalente; de preferencia bajo las normas de la APA 2010.

Autores de la Gua de Prcticas de Histologa y Embriologa UAP FCCSS

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

PRESENTACIN La Bioqumica tiene su base en la observacin y experimentacin, de ah la gran importancia del trabajo en el Laboratorio, que es el lugar donde se adquiere seguridad y experiencia para resolver en forma satisfactoria los problemas relacionados a dicho curso, adems permite el desarrollo de aptitudes hacia la ciencia familiarizando al estudiante con los diversos materiales y equipos. La manipulacin correcta y el empleo de tcnicas adecuadas que lo iniciara en la investigacin, por tal motivo el alumno debe ejecutarlas teniendo la actitud de como si se fuesen a realizar por primera vez. La presente Gua ha sido elaborada de acuerdo con la teora, para que el estudiante de Ciencias Biomdicas razone y participe activamente en la realizacin de experiencias que lo ayudarn a fijar un determinado conocimiento, de forma tal que pueda comprobar su aprendizaje y le sirva como un auxiliar valioso dentro de su Formacin Profesional, la misma que puede ser utilizada en forma total o parcial por alumnos de otras especialidades y de otros Centros de educacin Superior diferentes a UAP. Cada prctica consta de ttulo, objetivos a lograr y una serie de experiencias a ejecutar con su respectiva lista de materiales a usar, los procedimientos a seguir y una vez realizados debern anotarse los resultados, sacar conclusiones individuales y grupales, para poder indicar los fundamentos de cada experiencia. La secuencia de experiencias estn diseadas para usos de reactivos y muestras fciles de adquirir, consiente de limitaciones existentes , sin que esto signifique un impedimento del normal aprendizaje de la bioqumica o peor aun que influya en el rendimiento del alumno. La presente Gua esta diseada con la finalidad que el estudiante revise o conozca el tema con anticipacin y colabore responsablemente con el material que se le solicite, y ejecutando lo programado de tal forma que se logre las Habilidades y Destrezas que su Especialidad amerita y la Sociedad lo reconocer y/o Agradecer. Se expresa un sincero agradecimiento a todos los Profesionales que de alguna forma ayudaron en la elaboracin de la presente Manual , la misma que esta sujeta a correcciones y modificaciones , para lo cual se estar a la espera de sugerencias y poder actualizar o corregir ediciones venideras.
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

El Autor EL LABORATORIO Es un ambiente fsico que debe tener ciertas caractersticas en su diseo, aunque puede ser algo verstil teniendo en cuenta las actividades que en el se realizan, en este caso la enseanza aprendizaje e investigacin. El Laboratorio debe tener una localizacin determinada con amplios ventanales y con ventilacin adecuada, de tal forma no existan corrientes de aire, iluminacin en concordancia con la amplitud evitando la incidencia directa de los rayos solares, para la noche instalaciones de luz blanca, la cual proporcione una iluminacin optima, puede obtenerse oscuridad en el da mediante cortinas de color negro que se adaptaran. Posee diversos materiales y reactivos, en este caso los alumnos aprendern como manipularlos y las precauciones que se deben tener; adems debe contar con mesas impermeabilizadas, lo mismo las paredes hasta cierta altura lo que impedir que absorban sustancias lquidas puedan caerles en forma accidental; pisos adecuados de fcil limpieza, instalaciones de agua, desage, gas, ambientes anexos; debe contar tambin con botiqun i/u extintores en caso de incendios, adems de personal entrenado. RECOMENDACIONES GENERALES Al calentar lquidos en tubos de ensayo oriente el extremo abierto a un lugar vaco, los lquidos pueden proyectarse y causar quemaduras. No deje tubos de ensayo calientes sobre la mesa de trabajos, un tubo caliente tiene la misma apariencia que uno fro. Evite exponer los productos qumicos en contacto con el cuerpo si desea percibir el olor no lo acerque directamente sobre las fosas nasales, oriente el olor abanicando con la mano. Vierta cidos al agua cuando prepare disoluciones, sobre todo al cido sulfrico, y bajo bao de agua fra. Lave con abundante agua la parte afectada en caso de caer sobre alguna zona de la piel cidos o bases. Evite derramar sobre la mesa u otro material de laboratorio reactivos si esto sucede limpiar con tela mojada.
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

No devolver a los frascos originarios lo sobrante de la sustancia empleada. No colocar cerca de fluentes de calor sustancias inflamables como cloroformo, bencina, alcohol etlico, Xilol, etc. No abra totalmente la llave del gas y mantenga retirado el rostro del mechero al encenderlo. No deje abiertos los frascos de reactivos, y especialmente los higroscpicos (NaOH, HCl, fenol, etc.), medios de cultivo que al estar en contacto con el aire pierden sus propiedades. Informe oportunamente el material deteriorado y de cualquier accidente. BlOSEGURIDAD La bioseguridad es un conjunto de medidas preventivas de sentido comn para proteger la salud y la seguridad del personal que trabaja en el laboratorio frente a diferentes riesgos producidos por agentes biolgicos. Complementariamente, se incluyen normas contra los riesgos producidos por agentes fsicos. Qumicos y mecnicos. La seguridad es producto de un trabajo en conjunto, de: El personal que debe cumplir con las normas de bioseguridad. Los directivos que deben hacer cumplir las normas. La administracin que debe dar las facilidades para que estas normas se cumplan. AGENTES DE RIESGO El personal de laboratorio diariamente realiza muchas actividades que pueden causar enfermedad o dao en l o en las personas que trabajan en ambientes cercanos e incluso en sus familiares y la comunidad. Estas enfermedades pueden ser causadas por: 1. Agentes Biolgicos.- son transmitidos por ingestin. inhalacin. inoculacin o por contacto directo a travs de la piel y mucosas. 2. Agentes Fsicos y Mecnicos.-como las temperaturas extremas. radiaciones ionizantes, contactos elctricos o conexiones defectuosas. 3. Agentes Qumicos.- Que pueden ser sustancias corrosivas, toxicas carcinognicas, inflamables y explosivas. PRINCIPIOS DE BIOSEGURIDAD El trmino utilizado para describir los mtodos para el manejo de agentes infecciosos en el laboratorio es el de CONTENCIN, donde intervienen: Las tcnicas de procesamiento de las muestras de laboratorio.
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Los equipos de seguridad diseados para la proteccin de personal. el diseo del edificio Se considera dos mtodos de contencin: 1. Contencin Primaria.- Es la proteccin del personal y del medio ambiente inmediato contra la exposicin a agentes infecciosos y/o productos qumicos de riesgo. Es provista por una buena tcnica microbiolgica y el uso apropiado del equipo de seguridad. El uso de vacunas aumenta el nivel de proteccin personal. 2. Contencin Secundaria.-Es la proteccin del medio ambiente externo contra la exposicin del material infeccioso Se logra por una combinacin de las caractersticas de la edificacin y practicas operacionales. El propsito de la contencin es reducir la exposicin del personal de los laboratorios y de otras personas a agentes potencialmente peligrosos y prevenir el escape de stos al exterior. Los modos de transmisin en el laboratorio pueden ser insidiosos y complicados debido a que los vehculos y rutas de transmisin difieren de los modos clsicos, Los laboratoristas estn frecuentemente expuestos a niveles muy altos de agentes infectantes por lo que los perodos de incubacin puede ser ms cortos que los del mismo tipo de infeccin provocada por una exposicin corriente. FACTORES ASOCIAIDOS CON LA TRANSMISIN DE INFECCIONES O ACCIDENTES EN EL LABORATORO. 1.-RUTAS DE INFECCION: INGESTION Pipeteo con la boca. Salpicadura de material infeccioso en la boca Dedos o artculos contaminados colocados en la boca. consumo de alimentos en el lugar de trabajo. INOCULACION Accidentes por pinchazos. Cortes con objetos cortantes Picaduras de insectos, mordeduras de animales y rascado o araazos. INHALACION DE AEROSOLES Numerosos procedimientos que producen aerosoles (Ejemplo: Manipulacin de las asas de inoculacin, pipeteo, manipulacin de agujas y jeringas, transvasado o decantado de lquidos). Los ncleos de gotitas menores de 5 um de dimetro son capaces de alcanzar los alvolos del pulmn. mientras que las
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

partculas mayores de 5 um de dimetro Son atrapadas en las mucosas de las vas areas. Los mayores brotes de infecciones adquiridas en el laboratorio por aerosoles estn asociados con Brucella sp, Chlamydia sp, y Mycobacterium tuberculosis. PIEL Y MUCOSAS: Derramamientos o salpicaduras en los ojos. boca y nariz.. Derramamiento o salpicaduras en la piel intacta o no intacta. Superficies, equipos y artculos contaminados.

2.-FORMAS DE TRANSMISIN DE LA ENFERMEDAD: Contacto directo, contacto indirecto, vehculo comn, vector. 3.-TIPOS DE LESIONES O DAOS: cortaduras, quemaduras, micro traumas, envenenamiento, intoxicaciones 4. FACTORES AMBIENTALES Ventilacin, tipo de equipo, procedimientos riesgosos, control ambiental, hacinamientos 5. FACTORES BIOLGICOS: Patogenicidad del microorganismo, dosis infectante, rutas de infeccin. Susceptibilidad del husped (Estado inmune, edad, embarazo, raza y sexo). reacciones alrgicas FUNDAMENTO TEORICO: MTODO DEL TRABAJO DE LABORATORIO.Los experimentos realizados durante (el desarrollo de una "Prctica de Laboratorio", haciendo uso de los materiales, instrumentos) equipos de laboratorio, constituyen una oportunidad nica para familiarizase con la observacin personal, o grupal de gran parte de hechos y leyes que rigen el desarrollo de las ciencias quimia: y biolgicas. Es as como cientficos partiendo de estos hechos u observaciones desarrollaran todos los principios y fundamentos tericos que se conocen hasta hoy en estos campos, y este mtodo d, trabajo constituye en s el "Mtodo Cientfico", y el cual tiene las siguientes fases o etapas: 1. Observacin de un fenmeno 2. Clasificacin de los hechos concernientes al fenmeno. 3. Establecimiento de una hiptesis para explicarlo. 4. Prueba de la hiptesis. 5. Modificacin, aceptacin o exclusin de la hiptesis.
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Por todo lo indicado, es que los trabajos en el laboratorio se deben realizar con la mayor responsabilidad posible y haciendo uso de los conocimientos previos, si no lo hubiese hay que preguntar cuantas veces sea necesario. Antes de cometer algn accidente. MATERIALES INSTRUMENTOS Y EQUIPOS CLASIFICACION.- Para clasificar la gran variedad de materiales instrumentos y equipos, s eligen criterios generales para su mejor estudio, y son los siguientes: 1) Segn la Clase de Material empleado en su Fabricacin A. Material de Madera.- Su empleo no es muy comn debido a su fcil destruccin al ponerse en contacto con agentes qumicos de naturaleza acida o corrosivos. Ejem. Gradilla para tubos, Soporte de Embudos. Etc. B. Material de Vidrio.- Es muy comn su uso y encontramos aquellos que pueden ser expuestos al calor directo, como Matraces, Beackers, balones, tubos de ensayo y otros. Entre los materiales que no se exponen al calor , encontramos las Probetas buretas, fiolas, micas de reloj , etc. El vidrio es el material mas importante y el mas usado en la fabricacin de materiales de laboratorio, debido a su resistencia a los agentes qumicos (cidos, bases, sales , etc.) y permiten evidenciar los fenmenos que suceden al momento de la experimentacin sin mayor dificultad C. Material de Arcilla: se emplea en la fabricacin de materiales que sean resistentes a eleva das temperaturas. Ejemplo: cpsulas, crisoles, etc. , D.Materiales de Acero: es un material con elevada resistencia fsica, debido a su naturaleza de ser una mezcla de hierro, cromo, nquel, bronce, carbn, etc. Ejemplo: soporte universal, pinzas, etc. E. Material Plstico: Es muy poco empleado en relacin a los otros materiales, por que son atacados fcilmente por sustancias corrosivas. Ejemplo: Pizetas. 2) Segn el uso especifico : De los materiales, instrumentos y equipos .. A. Materiales Para Medicin: 1. Metro 2. Probetas graduadas 3. Buretas 4. Pipetas: a) Volumtricas b) Con mbolo enrase c) Graduadas y de aspiracin d) Micropipetas 5. Picnmetro
26

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

6. Cuenta gotas 7. Vaso de precipitacin 8. Matraces de Erlenmeyer 9. Tubos neumtricos 10.Cinta pHmetro. B. Equipos o Instrumentos de Medicin: 1. Balanza: a) De Barras b) De platillo (uno o dos) c) Digital d) Analtica 2. Manmetro 3. Densmetro o aermetro 4. Barmetro 5. Voltmetro 6. Ampermetro 7. Potencimetro 8. Cronmetro o reloj 9. Termmetro C. Materiales para separacin: 1. Embudos: a) Simple de vstago corto y largo b) De Buchner c) De separacin o decantacin 2. Matraces de filtracin 3. Papel de filtro 4. Tamices metlicos D. Equipos de Separacin 1. De absorcin: a).-Columnas de absorcin b).- Tubos de desecado 2. De secado 3. Centrfugas 4. De extraccin 5. Decantadores 6. De destilacin o Refrigerantes E.Materiales para Mezclas y Combinaciones 1. Tubos de prueba: a).- Tubos de Ignicin b).- Tubos de ensayo
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

c).- Tubos con salida lateral d).- Tubos graduados 2. Vasos de precipitacin 3. Matraz de erlenmeyer 4. Balones: a). Con fondo plano b). Con fondo esfrico 5. Crisoles 6. Cpsulas de evaporacin 7. Fiolas o matraces aforados 8. Cristalizadores 9. Lunas de Reloj 10.Retortas F.Materiales para Calentamiento 1. Mecheros de Bunsen y de alcohol 2. Hornos elctricos 3. Mufla elctrica 4. Planchas elctricas G. Materiales de Soporte

1. Soporte universal 2. Pinzas: a).- Para crisol b).- Para vasos de precipitacin c).- Para tubos de prueba d).- Para pesas e).- De Mohr f).- De Hoffman g).- Para buretas Trpode Gradillas para tubos de prueba Nueces Rejillas: a).- Metlica b).- Con asbesto 7. Tringulo de porcelana 8. Anillo de extensin H. Materiales Para Conservacin 1. Frascos para reactivos: a).- De vidrio: - Transparentes - Acaramelados b).- De Plstico 2. Frascos desecadores
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

3. 4. 5. 6.

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Campana de vidrio Pizetas Frascos goteros Envases: a).- Metlicos b).- De cartn c).- Otros I. Materiales para Homogenizacin y Pulverizacin 1. Morteros: a).- De acero b).- De porcelana c).- De vidrio d).- De gata 2. Cuchillas 3. Tijeras 4. Limas J. Materiales para usos Diversos 1. 2. 3. 4. Varillas de vidrio Tubos de vidrio Mangueras Esptulas

3. 4. 5. 6.

SOLUCIONES. PREPARACION y SUS APLICACIONES. Toda clula est formada por bioelementos y biomolculas las cuales se encuentra disueltas en un medio lquido como el agua lo que constituye las "soluciones", las que podemos definirlas como una dispersin homognea de dos o ms tipos de especies inicos o moleculares. As, el vinagre es una solucin de cido actico yagua, el aire es una solucin compuesta de nitrgeno, oxido, bixido de carbono y pequeas cantidades de otras sustancias o especies moleculares; el agua de mar; la leche; la sangre; orina y otros lquidos biolgicos son ejemplo de soluciones. Estos compuestos, estn formados por la combinacin de 3 estados de la materia: gaseoso, lquido y slido. En las ciencias dinmicas como la Bioqumica, interesa el estudio de stos fenmenos qumicos sobretodo en los organismos vivos. Las soluciones que constituyen las "Sustancias Nutritivas" son tomadas por la planta, en los fluidos corporales de los animales o de las personas, las cuales se denominan bioelementos como calcio, fierro, magnesio; biomolculas como: glucosa, colesterol, triglicrido, protenas, glcidos; Lpidos, vitamina "C", hemoglobina, etc. En general cuando una ecuacin presenta una reaccin qumica entre electrolitos, se supone siempre que la reaccin se lleva acabo en soluciones acuosa a menos que se indique lo contrario. Las ecuaciones
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

siguientes designan reacciones que tienen lugar en el agua aunque no se exprese esto: NaOH + HCI Na Cl + H2O NaCl Ba Cl2 + Na2So4 BaS04 + 2

En una solucin, la sustancia disuelta se llama SOLUTO y la sustancia donde se disuelve el soluto se llama SOLVENTE. La relacin que existe entre el soluto y el solvente se llama "CONCENTRACION", de acuerdo con esta definicin, las soluciones pueden ser: diluidas, concentradas, saturadas y sobresaturadas. Tipos de Soluciones: Como la materia se presenta en 3 estados, entonces existen 3 tipos de soluciones: gaseosas, lquidas y slidas si mezclamos el azcar en agua deja de encontrarse en estado slido, las molculas de azcar pueden moverse libremente al igual que las molculas del agua. Esta solucin se denomina: solucin lquida. La Solucin puede clasificarse de acuerdo con el estado final de la solucin y el estado normal del soluto puro. Para las Soluciones Slidas y Lquidas existen 6 combinaciones posibles: 1.La Solucin es un Lquido. a) EI soluto era slido: azcar en agua. b) El soluto era lquido: alcohol (octanol) disuelto en agua; aceite lubricante disuelto en gasolina. c) El soluto era un gas. oxgeno disuelto en agua; dixido de carbono disuelto en agua. 2.La solucin es un Slido a) El soluto era slido: latn (Cobre y Zinc); oro amarillo (Cobre y Oro). b) El soluto era lquido: mercurio disuelto en plata (esta solucin es una "amalgama" y se emplea para rellenar los dientes). c) El soluto era gas.- Este tipo de solucin no es frecuente. Ejm: El ms conocido es el hidrgeno disuelto en paladio metlico. La estructura cristalina del paladio presenta agujeros lo suficientemente grandes para que puedan entrar tomos de hidrgeno. El nmero de estos agujeros es aproximadamente igual a la mitad del nmero de tomos de paladio. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SOLUBILIDAD Se denomina solubilidad a la cantidad de soluto que se disuelve en una cantidad dada de solvente para dar lugar a una solucin que puede ser saturada, si se disuelve ste en grandes cantidades, se dice que la sustancia es muy soluble.
26

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Si se disuelve tan slo una pequea cantidades, la sustancia no se disuelve una cantidad apreciable, la sustancia se denomina "Insoluble" poco soluble. Factores que determinan la solubilidad: 1. La naturaleza del sustrato o ms conocida con el trmino de soluto y del solvente respectivamente. 2. La Temperatura y 3. La Presin. 1.- NATURALEZA DEL SOLUTO y SOLVENTE. El agua acta como un disolvente para los compuestos electrovalentes debido a una fuerte atraccin que existe entre los iones y las molculas polares del agua , los solventes no polares , como el benceno y el ter son buenos disolventes de stas sustancias. La naturaleza del soluto y del solvente desempea un papel importante en la solubilidad de un compuesto. 2.- EFECTO DE LA TEMPERATURA.a) Slido en Lquido.La mayora de los slidos se vuelven solubles en un lquido a medida que aumenta la temperatura. Hay unos cuntos slidos que se vuelven menos solubles a medida que aumenta la temperatura. Puede ocurrir que un slido sea soluble en agua porque sus molculas reaccionan con ella para formar partculas que son fuertemente atradas por las dems molculas de agua. Si estas partculas se descomponen cuando se calienta, la solubilidad de la sustancia disminuir a medida que aumente la temperatura. b.- Gases en Lquidos.La solubilidad de un gas en lquido disminuye generalmente a medida que aumente la temperatura. Debido a esto, las burbujas de dixido de carbono salen vigorosamente de una bebida carbnica al calentar el lquido. Por idntico motivo, al calentar el agua corriente empiezan aparecer burbujas de aire cuando el agua se encuentra templada solamente. 3.- EFECTOS DE LA PRESION.Las variaciones de la presin influyen poco en la solubilidad cuando el so luto es un lquido o un slido. sin embargo, al formarse una solucin saturada de un gas en un lquido la presin de un gas desempea un importante papel, puesto que determina la cantidad de gas que puede disolver.
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

PRCTICA N01 RECONOCIMIENTO, DESCRIPCIN Y USO DE LOS MATERIALES Y EQUIPOS DE USO FRECUENTE EN EL LABORATORIO OBJETIVOS: Reconocer los materiales y equipos mas comunes en un laboratorio Manipular correctamente dichos materiales, evitando accidentes y resultados errneos. FUNDAMENTO TEORICO: MTODO DEL TRABAJO DE LABORATORIO.Los experimentos realizados durante (el desarrollo de una "Prctica de Laboratorio", haciendo uso de los materiales, instrumentos) equipos de laboratorio, constituyen una oportunidad nica para familiarizase con la observacin personal, o grupal de gran parte de hechos y leyes que rigen el desarrollo de las ciencias quimia: y biolgicas. Es as como cientficos partiendo de estos hechos u observaciones desarrollaran todos los principios y fundamentos tericos que se conocen hasta hoy en estos campos, y este mtodo d, trabajo constituye en s el "Mtodo Cientfico", y el cual tiene las siguientes fases o etapas: 6. Observacin de un fenmeno 7. Clasificacin de los hechos concernientes al fenmeno. 8. Establecimiento de una hiptesis para explicarlo. 9. Prueba de la hiptesis. 10. Modificacin, aceptacin o exclusin de la hiptesis. Por todo lo indicado, es que los trabajos en el laboratorio se deben realizar con la mayor responsabilidad posible y haciendo uso de los conocimientos previos, si no lo hubiese hay que preguntar cuantas veces sea necesario. Antes de cometer algn accidente. MATERIALES INSTRUMENTOS Y EQUIPOS CLASIFICACION.- Para clasificar la gran variedad de materiales instrumentos y equipos, s eligen criterios generales para su mejor estudio, y son los siguientes: 3) Segun la Clase de Material empleado en su Fabricacin F. Material de Madera.- Su empleo no es muy comn debido a su fcil destruccin al ponerse en contacto con agentes qumicos de naturaleza acida o corrosivos. Ejem. Gradilla para tubos, Soporte de Embudos. Etc. G. Material de Vidrio.- Es muy comn su uso y encontramos aquellos que pueden ser expuestos al calor
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

directo, como Matraces, Beackers, balones, tubos de ensayo y otros. Entre los materiales que no se exponen al calor , encontramos las Probetas buretas, fiolas, micas de reloj , etc. El vidrio es el material mas importante y el mas usado en la fabricacin de materiales de laboratorio, debido a su resistencia a los agentes qumicos (cidos, bases, sales , etc.) y permiten evidenciar los fenmenos que suceden al momento de la experimentacin sin mayor dificultad H.Material de Arcilla: se emplea en la fabricacin de materiales que sean resistentes a eleva das temperaturas. Ejemplo: cpsulas, crisoles, etc. , I. Materiales de Acero: es un material con elevada resistencia fsica, debido a su naturaleza de ser una mezcla de hierro, cromo, nquel, bronce, carbn, etc. Ejemplo: soporte universal, pinzas, etc. J. Material Plstico: Es muy poco empleado en relacin a los otros materiales, por que son atacados fcilmente por sustancias corrosivas. Ejemplo: Pizetas. 4) Segn el uso especifico : De los materiales, instrumentos y equipos .. K. Materiales Para Medicin: 11.Metro 12.Probetas graduadas 13. Buretas 14. Pipetas: a) Volumtricas b) Con mbolo enrase c) Graduadas y de aspiracin d) Micropipetas 15.Picnmetro 16.Cuenta gotas 17.Vaso de precipitacin 18.Matraces de Erlenmeyer 19.Tubos neumtricos 20.Cinta pHmetro. L.Equipos o Instrumentos de Medicin: 10.Balanza: a) De Barras b) De platillo (uno o dos) c) Digital d) Analtica 11. Manmetro 12. Densmetro o aermetro 13.Barmetro 14.Voltmetro 15.Ampermetro
26

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

16.Potencimetro 17.Cronmetro o reloj 18.Termmetro M. Materiales para separacin: 5. Embudos: a) Simple de vstago corto y largo b) De Buchner c) De separacin o decantacin 6. Matraces de filtracin 7. Papel de filtro 8. Tamices metlicos N. Equipos de Separacin 7. De absorcin: a).-Columnas de absorcin b).- Tubos de desecado 8. De secado 9. Centrfugas 10.De extraccin 11.Decantadores 12.De destilacin o Refrigerantes O. Materiales para Mezclas y Combinaciones 11.Tubos de prueba: a).- Tubos de Ignicin b).- Tubos de ensayo c).- Tubos con salida lateral d).- Tubos graduados 12.Vasos de precipitacin 13. Matraz de erlenmeyer 14.Balones: a). Con fondo plano b). Con fondo esfrico 15.Crisoles 16.Cpsulas de evaporacin 17.Fiolas o matraces aforados 18.Cristalizadores 19.Lunas de Reloj
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

20.Retortas P. Materiales para Calentamiento 5. Mecheros de Bunsen y de alcohol 6. Hornos elctricos 7. Mufla elctrica 8. Planchas elctricas

Q.

Materiales de Soporte

9. Soporte universal 10.Pinzas: a).- Para crisol b).- Para vasos de precipitacin c).- Para tubos de prueba d).- Para pesas e).-De Mohr f).- De Hoffman g).- Para buretas

11.Trpode 12.Gradillas para tubos de prueba 13.Nueces 14.Rejillas: a).- Metlica b).- Con asbesto 15.Tringulo de porcelana 16.Anillo de extensin R. Materiales Para Conservacin 7. Frascos para reactivos: a).- De vidrio: - Transparentes - Acaramelados b).- De Plstico 8. Frascos desecadores 9. Campana de vidrio 10.Pizetas 11.Frascos goteros
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

12.Envases: a).- Metlicos b).- De cartn c).- Otros

S. Materiales para

Homogenizacin y Pulverizacin

5. Morteros: a).- De acero b).- De porcelana c).- De vidrio d).- De gata 6. Cuchillas 7. Tijeras 8. Limas

T. Materiales para usos Diversos 5. Varillas de vidrio 6. Tubos de vidrio 7. Mangueras 8. Esptulas

SOLUCIONES. PREPARACION y SUS APLICACIONES. Toda clula est formada por bioelementos y biomolculas las cuales se encuentra disueltas en un medio lquido como el agua lo que constituye las "soluciones", las que podemos definirlas como una dispersin homognea de dos o ms tipos de especies inicos o moleculares. As, el vinagre es una solucin de cido actico yagua, el aire es una solucin compuesta de nitrgeno, oxido, bixido de carbono y pequeas cantidades de otras sustancias o especies
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

moleculares; el agua de mar; la leche; la sangre; orina y otros lquidos biolgicos son ejemplo de soluciones. Estos compuestos, estn formados por la combinacin de 3 estados de la materia: gaseoso, lquido y slido. En las ciencias dinmicas como la Bioqumica, interesa el estudio de stos fenmenos qumicos sobretodo en los organismos vivos. Las soluciones que constituyen las "Sustancias Nutritivas" son tomadas por la planta, en los fluidos corporales de los animales o de las personas, las cuales se denominan bioelementos como calcio, fierro, magnesio; biomolculas como: glucosa, colesterol, triglicrido, protenas, glcidos; Lpidos, vitamina "C", hemoglobina, etc. En general cuando una ecuacin presenta una reaccin qumica entre electrolitos, se supone siempre que la reaccin se lleva acabo en soluciones acuosa a menos que se indique lo contrario. Las ecuaciones siguientes designan reacciones que tienen lugar en el agua aunque no se exprese esto: NaOH NaCl En una solucin, la sustancia disuelta se llama SOLUTO y la sustancia donde se disuelve el soluto se llama SOLVENTE. La relacin que existe entre el soluto y el solvente se llama "CONCENTRACION", de acuerdo con esta definicin, las soluciones pueden ser: diluidas, concentradas, saturadas y sobresaturadas. Tipos de Soluciones: Como la materia se presenta en 3 estados, entonces existen 3 tipos de soluciones: gaseosas, lquidas y slidas si mezclamos el azcar en agua deja de encontrarse en estado slido, las molculas de azcar pueden moverse libremente al igual que las molculas del agua. Esta solucin se denomina: solucin lquida. La Solucin puede clasificarse de acuerdo con el estado final de la solucin y el estado normal del soluto puro. Para las Soluciones Slidas y Lquidas existen 6 combinaciones posibles: 3.La Solucin es un Lquido. d) EI soluto era slido: azcar en agua. e) El soluto era lquido: alcohol (octanol) disuelto en agua; aceite lubricante disuelto en gasolina.
26

HCI + Na2So4

Na Cl + H2O BaS04 + 2

Ba Cl2

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

f) El soluto era un gas. oxgeno disuelto en agua; dixido de carbono disuelto en agua. 4.La solucin es un Slido d) El soluto era slido: latn (Cobre y Zinc); oro amarillo (Cobre y Oro). e) El soluto era lquido: mercurio disuelto en plata (esta solucin es una "amalgama" y se emplea para rellenar los dientes). f) El soluto era gas.- Este tipo de solucin no es frecuente. Ejm: El ms conocido es el hidrgeno disuelto en paladio metlico. La estructura cristalina del paladio presenta agujeros lo suficientemente grandes para que puedan entrar tomos de hidrgeno. El nmero de estos agujeros es aproximadamente igual a la mitad del nmero de tomos de paladio. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SOLUBILIDAD Se denomina solubilidad a la cantidad de soluto que se disuelve en una cantidad dada de solvente para dar lugar a una solucin que puede ser saturada, si se disuelve ste en grandes cantidades, se dice que la sustancia es muy soluble. Si se disuelve tan slo una pequea cantidades, la sustancia no se disuelve una cantidad apreciable, la sustancia se denomina "Insoluble" poco soluble. Factores que determinan la solubilidad: 4. La naturaleza del sustrato o ms conocida con el trmino de soluto y del solvente respectivamente. 5. La Temperatura y 6. La Presin. 1.- NATURALEZA DEL SOLUTO y SOLVENTE . El agua acta como un disolvente para los compuestos electrovalentes debido a una fuerte atraccin que existe entre los iones y las molculas polares del agua , los solventes no polares , como el benceno y el ter son buenos disolventes de stas sustancias. La naturaleza del soluto y del solvente desempea un papel importante en la solubilidad de un compuesto.

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

2.- EFECTO DE LA TEMPERATURA.-

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

a) Slido en Lquido.La mayora de los slidos se vuelven solubles en un lquido a medida que aumenta la temperatura. Hay unos cuntos slidos que se vuelven menos solubles a medida que aumenta la temperatura. Puede ocurrir que un slido sea soluble en agua porque sus molculas reaccionan con ella para formar partculas que son fuertemente atradas por las dems molculas de agua. Si estas partculas se descomponen cuando se calienta, la solubilidad de la sustancia disminuir a medida que aumente la temperatura. b.- Gases en Lquidos.La solubilidad de un gas en lquido disminuye generalmente a medida que aumente la temperatura. Debido a esto, las burbujas de dixido de carbono salen vigorosamente de una bebida carbnica al calentar el lquido. Por idntico motivo, al calentar el agua corriente empiezan aparecer burbujas de aire cuando el agua se encuentra templada solamente. 3.- EFECTOS DE LA PRESION.Las variaciones de la presin influyen poco en la solubilidad cuando el so luto es un lquido o un slido. sin embargo, al formarse una solucin saturada de un gas en un lquido la presin de un gas desempea un importante papel, puesto que determina la cantidad de gas que puede disolver.

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

METODOS PARA EXPRESAR

CONCENTRACIONES.
26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

1.- CONCENTRACIONES EXPRESADAS EN UNIDADES FISICAS A.- Concentracin de la solucin: Cd Cs Se expresa masa del soluto por volumen de solucin.

Cd = Concentracin de la solucin Ms = Masa del soluto V.sol = Volumen de la solucin Ejm: N 1. Si se disuelven 20 g. de sacarosa en 250 ml de agua Cul ser la concentracin de la sacarosa por litro de solucin? C.d. =: ? Ms =: 20 g. Cd. =: 20g./0.250 1. V. sol. =: 250 mI. =: 0.250l Cd = 80 g./l de sacarosa

Ejm: N 2. Cuntos gramos de cloruro de sodio (NaCl), se necesitan para preparar 40 mI. de una solucin que contenga 20 g. por litro? Datos Ms =Masa del soluto? V. sol. =: 40 mI. =: 0.040 litro ecuacin Cd = 20 g./l. 0.040 l. Ms =: 0.8 g. de NaCl B.- Concentracin porcentual o Porcentaje en peso C % = Concentracin porcentual C% =: (Ms/Mt) x 100 M sol = Masa del so luto Mt = Masa total de la solucin
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

Reemplazando en la Ms =: Cd x V. sol. Ms =: 20 g. /l. x

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Ejm: N 1. Cul es el peso por ciento del cloruro de potasio (KCl), en una solucin que contiene 0.3 g. de KCl; 0.8 g. de cloruro de calcio (CaCI2) y 80 g. de agua? Datos C%=? 100 Ms = 0.03 g. x 100 Mt = 0.3 + 0.8 + 80 = 81.1 g. C % = Ms / Mt) x C % = (03/81.1)

C = 0.369 % de KCl

Ejm: N 2 Una solucin acuosa contiene 8.00 % en peso de azcar y tiene una densidad de 1,03 g. / mI. Cuntos gramos de azcar hay en 400 mi. de solucin? Datos Ms =? C % = 8.00 d = 1.03 g.lml. Vol. = 400 mI. 400 mI. Mt.=? Se obtiene "d" x "vol" ecuacin C % = (Ms / Mt) x 100 M. sol =? Ms = Mt x C % / 100 Ms = 412 x 8/ 100 Ms = 32.96 g. Sacarosa Mt. = 412 g. Reemplazando en la d = Mt/Vol. Mt = d x vol Mt = 1.03 g/mI. x

c.- PARTES POR MILLN (ppm)


Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Significa diluir una parte del soluto en un milln de partes del solvente, en este tipo de soluciones se establecen las siguientes relaciones. RELACIN EN PESO 1 ppm. = 1 g. de soluto en 1 ppm. = 1 g. de soluto en 1 ppm. = 1 g. de soluto en RELACIN EN VOLUMEN 1 ppm. = 1 g. de soluto en de solucin. 1 ppm. = 1 g. de soluto en de solucin. 1 ppm. = 1 mg. de soluto en solucin. 1 litro de

1000 000 g. de solucin. 1 000 kg. de solucin. 1 Tm. de solucin. 1000 000 ml. 1 000 l.

Ejm: N 1. En un anlisis de agua, se encontr que contena 2.5 x 10 - 4 g. de fierro ( Fe ). En 50 ml. de agua expresar la concentracin en ppm.? Datos ppm =? Soluto = 2.5 x 10 -4 g. de Fe. = 0.00025 g. = 0.25 mg de Fierro. Solvente = 50 mI ppm. = mg / litro.( reemplazando ). ppm = 0.25 mg. / 0.05 l. = 5 mg / l
Fierro = 5 ppm

Ejm. N 2 Dos litros de agua de mar contiene 0.5 g. de cloruros Cul ser su concentracin en ppm? Datos ppm =? Soluto = 0.5 g. = 500 mg. ( reemplazando
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

ppm. = mg / litro. ppm = 500 mg. / 2 l


26

Solvente = 2 l

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Cloruros = 250 ppm

Em. N 3. Preparar una solucin que contenga 120 ppm. de Fsforo, tomados a partir del Na3P04. Datos Peso molecular de Fsforo(P) del Na3P04 = 164 g se debe tomar; Pm del fsforo = 31 g. g /L x = 0.6348 g 164 g.------31 g x------- 120 ppm = 0.120 entonces para 120 de fsforo En un mol de Na3P04 hay un mol

(se debe tomar O.6348 g. de Na3P04 y diluir a un litro de agua, se obtendr una concentracin de 120 ppm de fsforo). CONCENTRACION EXPRESADAS EN UNIDADES QUIMICAS. MOLARIDAD (M).- Indica la relacin = M = Ns / Vol. Sol; Ns = Ws / Pm. Donde: Ns = n moles del soluto ( Ws / Pm ) Ws = peso del soluto en gramos Pm = peso molecular del soluto Vol. sol.= vol. de la solucin, en litros.

La MOLARIDAD (M), Ese define como: " El nmero de moles del soluto ,disueltos en en litro de solucin ". Ejm. N 1. Se disuelven 5.845 g. de NaCI en 250 mI. de agua Cul ser su Molaridad?
26

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Datos: M=? Ws = 5.845 g. anterior tenemos: Pm NaCI = 58.45 Vol. Sol. = 250 mi = 0,25 I. M = 0,4 Molar de NaCl M = 5.845/58 . .45/ 0.25 1. Reemplazando en la ecuacin

Ejm. N 2 Se desea preparar 05 litros de AgN03 al 0.2 M. Qu cantidad de este soluto se necesitar? Datos: Ws=? Reemplazando en la ecuacin anterior y despejando Ws. Tenemos: Pm AgN03 = 171 M = 0.2 Vol. Sol. = 0,5 L, Ws = M x Pm x Vol. sol. Ws = 0.2 x 171 x 0.5 Ws= 17.1 g.deAgN03. Ws=17.1 g.deAgN03.

NOTA: Para encontrar el Ws. de un reactivo que viene en lquido se usa la siguiente formula:

Ejem. N 3 Cul ser la molaridad del HNO3 que tiene las siguientes caractersticas? M HNO3 = ? Concentracin = 65 % Densidad = 1,4 g / mI. 1,4 g. / mI. X 65 100
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

Ws HNO3 = 1,000 mI. X

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

Vol. Sol. = 1,000 mI. Peso molecular HNO= 63 Ws HNO3 = 910 g. M HNO3 = 910 / 63 1 litro HNO3 = 14.4 M

2.- NORMALIDAD (N).- Indica la relacin:

Donde: P. eq. cido (H+) P. eq. bse (OH-) P. eq. sal PM/N (H+)sustituible PM/N (OH-) sustituible P/N total de valencias positivas

Peso equivalente - gramo: cidos, bases y sales


Sustancia HCL 98.0 H2SO4 98.0 H3PO4 40.0 Na(OH) 74.0 Ca(OH)2 106.87 Fe(OH)3 169.89 Ag(NO3) 126.0 Na2SO3 162.22 FeCL3 3 54.07 2 63.0 1 169.89 3 35.62 2 37.0 1 40.0 3 32.67 2 49.0 PM 36.3 N(H+) 1 N(OH-) T.Val.(+) g/p.eq.g 36.5

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

LA NORMALIDAD.- Se defina como: "El nmero de equivalente gramo de soluto diluido en un litro de solucin". NOT A.- Existe una relacin entre la Normalidad y Molaridad. N=CM (sales). donde:

peso

C = n (H+) C = n (OH-) C = n de valencias positivas

Ejem. N 1 Cual ser N la Normalidad del H2S04, que contiene volumen de 1 litro, concentracin 98%, densidad 1,8 g./ mI. y su peso molecular 98% Primero debemos encontrar su Moralidad y aplicar la frmula. M. H2SO4 = ? Iml x 98 Concentracin = 98% Vol. Sol. = 1000 ml Densidad = 1.8 g/mI Peso molecular = 98 WsH2SO4 = 1,000 mI x 1.8 g 100 Ws H2S04 = 1764 g M H2SO = Ws/PM Vol( l) M H2SO4 = 1764 /98 1I H2SO4 = 18 M (NOTA: Si revisamos el ejemplo anterior encontramos que la molaridad es 18) Entonces N =CM C= del H2 S04 es 2 N =2(18) por lo tanto H2SO4 = 36 N EJERCICIOS. l. Una solucin de cido sulfrico, contiene 33.33% y una densidad de 1.25 g/mI. exprese su concentracin en trminos de moralidad? 2. Cuntos gramos de soluto se requiere para preparar cada una de las siguientes soluciones acuosas?
Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

a. 1 litro de urea CO (NH2)2

al 0.5 M

26

GUIA DE PRACTICAS BIOQUIMICA - UAP

b. 500 mI de H3 P04 C. 500 mI de Ca (OH)2

al 1.5 M al 0.05N

3. Cuntos gramos soluto se requieren para una de las siguientes soluciones? a) 1 litro de H2S04 b) 50 mI. de H3P04 c) 250 mI. De BaCl2 al 2M al 2N al 0.4 N

Wilmer L. CALDERON MUNDACA Microbilogo- Parasitlogo Pedagogo

26

S-ar putea să vă placă și