UNIVERSIDAD NACIONAL DE RO CUARTO FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS, FISICOQUMICAS Y NATURALES DEPARTAMENTOS DE BIOLOGA MOLECULAR, CIENCIAS NATURALES Y MICROBIOLOGA ____________________________________________________________________________________

CARRERA/S: Microbiologa y Lic. en Ciencias Biolgicas ASIGNATURA: Biologa Molecular y Celular (Microbiologa) Biologa Molecular y Celular B (Lic. en Biologa) CDIGO: 2160 CDIGO: 2179

DOCENTE RESPONSABLES: Dra Mara Ins Medina y Dra. Gloria Lucchesi (Departamento de Biologa Molecular) EQUIPO DOCENTE: Dra Adriana Fabra (Departamento de Ciencias Naturales) Dra Stella Castro (Departamento de Ciencias Naturales) Dra. Estela E. Machado (Departamento de Biologa Molecular) Dra.Mirta Lasagno (Departamento de Microbiologa e Inmunologa) Auxiliares y /o becarios asignados anualmente por cada Departamento AO ACADMICO: 2012 RGIMEN DE LA ASIGNATURA: Cuatrimestral REGIMEN DE CORRELATIVIDADES Fisicoqumica B (2033) - Qumica Biolgica (2110) para Microbiologa Fisicoqumica B (2033) - Qumica Biolgica (2057) para Lic en Biologa CARGA HORARIA TOTAL: 112 h TERICAS- PRCTICAS (seminarios y problemas): 20 h LABORATORIO: 24 h

CARACTER DE LA ASIGNATURA: Obligatoria (Microbiologa) Optativa (Lic. En Cs. Biolgicas) A.CONTEXTUALIZACIN DE LA ASIGNATURA: 2do. ao de Microbiologa 5to. ao de Lic en Cs. Biolgicas, B. OBJETIVOS PROPUESTOS -Lograr una comprensin bsica de los conocimientos en biologa molecular y celular, proporcionando una explicacin comparativa de los aspectos funcionales involucrados en la clula procariota y eucariota. -Adquirir destreza en el manejo de tcnicas de laboratorio bsicas en Biologa Molecular y Celular -Lograr la resolucin de situaciones problemticas vinculadas con temticas de la asignatura. 1

C. CONTENIDOS BSICOS DEL PROGRAMA A DESARROLLAR: Sistemas y mtodos en Biologa Molecular. Biologa celular. Transporte de pequeas molculas a travs de la membrana. Compartimentalizacin de la clula eucariota. Conceptos bsicos de fsico-qumica de cidos nucleicos. Cromosoma bacteriano. Transcripcin y RNA. Regulacin de la transcripcin en procariotas y eucariotas. Traduccin en procariotas y eucariotas. Sistemas de transduccion de seales en eucariotas. D. FUNDAMENTOS DE LOS CONTENIDOS: E. ACTIVIDADES A DESARROLLAR: CLASES TERICAS CLASES DE PROBLEMAS: 1.-Resolucin de situaciones problemticas referidas a estructura y funcin celular 2.-Acidos Nucleicos 3.- Replicacin 4.-Transcripcin SEMINARIOS: Estructura y funcin celular TEORICO-PRCTICOS: Sistemas de transduccin F. NMINA DE TRABAJOS PRCTICOS 1.-Extraccin y electroforesis de protenas. 2.-Extraccin de DNA plasmdico y corrida electrofortica en gel de agarosa 3.-Induccin y represin enzimtica en microorganismos

G. HORARIOS DE CLASES: Miercoles y viernes CLASES DE CONSULTAS. Una vez por semana. H. MODALIDAD DE EVALUACIN: Exmenes Parciales: Se tomarn 3 exmenes parciales escritos. Laboratorios y Terico-Prcticos: Se tomar un cuestionario en dichas actividades. El trabajo prctico Nro. 3 se evaluar mediante la presentacin de un informe de las tareas realizadas. Clases de problemas: Resolucin de situaciones problemticas. Seminarios: Exposicin de temas contenidos en el programa. Esta tarea ser calificada. Examen final: escrito CONDICIONES DE REGULARIDAD: Para lograr la regularidad los alumnos debern cumplir los siguientes requisitos mnimos: Cumplimentar con asistencia del 80% las actividades de clases tericas, tericos-prcticas y seminarios y con asistencia del 80% a los trabajos prcticos. Alcanzar una calificacin mnima de 5, en las evaluaciones tericos-prcticas, prcticos, seminarios y parciales. En el caso de no alcanzarse dicho puntaje, cada actividad podr ser recuperada una vez. 2

Aprobar los 3 parciales. Cada parcial se podr recuperar una vez. Para aprobar el examen parcial se deber tener el 50% del examen que equivale a una calificacin de 5 puntos.

PROGRAMA ANALTICO A) CONTENIDOS: UNIDAD 1: Sistemas y mtodos en Biologa Molecular. Mtodos de estudio fsicos. Ultracentrifugacin: zonal y en gradientes equilibrados. Cromatografa. Electroforesis: conceptos generales, electroforesis de DNA y de protenas. Hibridacin a soportes slidos: Southern blot, Northern blot, Westernblot y Colony blot. Microscopa electrnica. Concepto de clonado, organismo recombinante, transgnico y clon. UNIDAD 2: Biologa celular. Diferencias entre clulas eucariota y procariota: repaso de conceptos. Estructura y funcin del citoesqueleto en eucariotas: Microfilamentos de actina. Microtbulos de tubulina y Filamentos intermedios. Cilios, flagelos, cuerpos basales y centrolos. Uniones intercelulares: unin estrecha, cinto de adhesin, desmosomas, hemidesmosomas, contacto focal, uniones comunicantes: unin de hendidura (gap junction) sinapsis qumica, plasmodesmo de la clula vegetal. Matriz extracelular: estructura. Citoesqueleto en procariotas. Membrana Plasmtica: Fosfolpidos, Glicolpidos y Colesterol. Protenas integrales y perifricas. Fluidez y asimetra de la bicapa. UNIDAD 3: Transporte de pequeas molculas a travs de la membrana. Transporte pasivo. Difusin simple y facilitada. Canales de agua. Regulacin del transporte de glucosa. Estructura de protenas transportadoras y de protenas canales. Canales dependientes de voltaje y ligando dependientes. Transporte activo. Translocacin de grupo. Translocacin de solutos unido a enzimas. P-ATPasas, V-ATPasas, F-ATPasas, ABC transportadores. Estructura y funcin. Transporte secundario. Cotransporte y contratransporte. UNIDAD 4: Compartimentalizacin de la clula eucariota. Distribucin de protenas codificadas por el ncleo. Secuencias seal. Rol de las chaperonas. Transporte regulado. Transporte de transmembranas. Transporte vesicular. Funciones del Retculo endoplsmico rugoso, Aparato de Golgi y lisosomas. Secrecin constitutiva y regulada. Exocitosis. Tipo de Endocitosis: Fagocitosis, Pinocitosis, Endocitosis mediada por receptores. Mecanismos moleculares del transporte vesicular. UNIDAD 5: Conceptos bsicos de fsico-qumica de cidos nucleicos. Estructura de RNA y DNA. Interacciones que estabilizan el DNA: Uniones puente Hidrgeno, interacciones hidrofbicas, apilamiento de bases, fuerza inica, respiracin (breathing). Extraccin y anlisis de cidos nucleicos por electroforesis y ultracentrifugacin.Desnaturalizacin trmica, qumica, biolgica y alcalina. Hibridacin. Hidrlisis qumica y biolgica de cidos nucleicos. Nucleasas. Marcado radioactivo de cidos nucleicos. Secuenciamiento de cidos nucleicos por el mtodo de Sanger. PCR. UNIDAD 6: Cromosoma bacteriano: composicin qumica, estructura, tamao y organizacin del cromosoma. Estructura topolgica del ADN: lineal, circular y superenrollado. Topoisomerasas. Modelo de inversin de signo. Replicacin de DNA. Regla bsica para la replicacin de todos los cidos nucleicos. Enzimologa de la replicacin: reaccin de polimerizacin y polimerasas. Etapas en la sntesis del ADN: , elongacin y terminacin de la replicacin del ADN. Primosoma. DNA girasa. DNA ligasa. Concepto de replisoma. Genes involucrados en la

replicacin. Regulacin de la iniciacin de replicacin. Conexin entre la replicacin bacteriana y la divisin celular. La regla C+D. Divisin celular y segregacin cromosmica. UNIDAD 7: Transcripcin y RNA. Concepto de promotor, sitio de iniciacin, terminador, unidad de transcripcin. Sntesis enzimtica de ARN en procariotas: transcripto primario, ARN mensajero. Estructura y vida media del ARN mensajero. Regin de Shine-Dalgarno. ARN mensajero mono y policistrnico. Etapas de la reaccin de transcripcin: reconocimiento del molde, iniciacin elongacin y terminacin. Secuencias consenso: regin 10 y 35. ARN polimerasa, caracterizacin: enzima completa u holoenzima core y factor sigma. Factores sigma implicados en el inicio de la transcripcin. Terminacin de la transcripcin rho dependiente y rho independiente. Diferencias en el ARN mensajero entre procariotas y eucariotas. UNIDAD 8: Regulacin de la transcripcin. Conceptos de regulacin en procariotas. Opern Lac. Concepto de induccin y represin enzimtica versus activacin enzimtica. Concepto de opern, gen regulador, protena represora. Operador. Inductores gratuitos. Sntesis de escape. Regulacin positiva:Cap-AMPcclico. Represin catablica. Regulacin de la transcripcin en eucariotas. Control pretranscripcional. Elementos cis-trans como reguladores de la transcripcin. Promotores. Promotores de los genes de clase II. Secuencias o elementos basales, proximales y distales del promotor. Aparato basal de transcripcin: TFIID, IIB, IIA, IIF, IIG, IIH. TATA binding protein. TAFs. Factores de transcripcin proximales e inducibles. Interaccin de los factores de transcripcin con la polimerasa. Iniciacin de la transcripcin a partir de diferentes promotores. Motivos de secuencia aminoacdica: cierre de leucina, dedos de zinc, hlice-bucle-hlice, hlice-giro-hlice, homeodominios. Dominios de dimerizacin, unin al DNA. Terminacin. Regulacin de la transcripcin y diferenciacin celular.: factores de transcripcin que activan genes en tejidos especficos. Marcaje de sondas con 32P. Ej. Northern blot UNIDAD 9: Traduccin en procariotas y eucariotas. Cdigo gentico: experimentos que llevaron a su elucidacin. Carcter universal y degenerado. Cdigo gentico de mitocondrias y cloroplastos: evidencias morfolgicas, bioqumicas, genticas y de biologa molecular. Concepto de wobbling. TRNAs supresores. Modificaciones postransduccionales de protenas. Chaperonas moleculares euca y procariotas. Canales de difusin especficos e inespecficos. Porinas bacteriana: caractersticas estructurales y regulacin de su expresin. Mecanismos de adaptacin en microorganismos y su relacin con fosforilacin de protenas. Conceptos de vas de seal en sistemas de fosforilacin de dos componentes en microorganismos. UNIDAD 10: Sistemas de transduccion de seales en eucariotas. Seales externas: hormonas, factores de crecimiento, neurotrasmisores. Receptores de membrana. Actividad tirosina quinasa y acoplados a proteinas unidoras de GTP. Proteinas G heterotrimricas y monomricas. Ciclo de activacin y factores que intervienen. Adenilato ciclasa y AMPc. Mecanismo de activacin y funcin. Fosfolipasas. Diferentes tipos y reacciones que catalizan. Ciclo del inocitol fosfato. Segundos mensajeros. Protena quinasas: diferentes tipos, reacciones que catalizan. Sistema de las guanilciclasa, GMPc. Protena quinasas A, C, G y activadas por mitgenos (MAPKs). Esquema de la Cascada de las MAP quinasas

B. CRONOGRAMA DE CLASES Y PARCIALES

FECHA Miercoles 1 semana De 8 a 10 De 14 a 16 hs (15/08) Viernes 1 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (17/08) Miercoles 2 semana De 8 a 10 hs. De 14 a 16 hs (22/08) Viernes 2 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (24/08) Miercoles 3 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (29/08) Viernes 3 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (31/08) Miercoles 4 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (05/09) viernes 4 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (07/09) ACTIVIDAD/TEMA TERICO: U=1 TERICO: U=1 TERICO: U=2 TERICO: U=2 SEMINARIO TERICO: U=3 TERICO: U=3 TERICO: U=3 SEMINARIO TERICO: U=4 TEORICO: U=4 TEORICO: U=4 SEMINARIO/PROBLEMAS SEMINARIO/PROBLEMAS T. PRACTICOS/PROBLEMAS T. PRACTICOS/PROBLEMAS PRACTICOS/PROBLEMAS T. PRACTICOS/PROBLEMAS TEORICO: U=5 TERICO: U=5 PRIMER PARCIAL U 1-4 PROBLEMAS: U=5 TEORICO: U=6 TEORICO: U=6 PROBLEMAS: U=6 TEORICO: U=7 De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (03/10) Viernes 8 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (05/10) Mircoles 8 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (10/10) Mircoles 9 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs. (17/10) Viernes 10 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (19/10) TEORICO: U=7 PROBLEMAS: U=7

TRABAJO PRACTICO PROBLEMAS: U=7 SEGUNDO PARCIAL U 5-7 TEORICO: U= 8

TEORICO: U=9 TEORICO: U=9 TEORICO: U=10 TEORICO: U=10

Mircoles 10 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (24/10) Viernes 11 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (26/10) Mircoles 11 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (31/10) Viernes 12 semana De 8-10 hs De 14-16 hs (02/11) Mircoles 12 semana De 8 a 10 hs De 14-16 hs (07/11) Viernes 13 De 8-10 hs (09/11) 14-16 hs Mircoles 13 semana De 8 a 10 hs (14/11) De 14 a 16 hs Viernes 14 semana De 8 a 10 hs (16/11) Lunes 19/11

TEORICO: U=10 TEORICO: U=10 TEORICO: U= 10 TEORICO: U= 8

Miercoles 5 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (12/09) Viernes 5 semana De 8 a 10hs De 14 a 16 hs (14/09) Miercoles 6 semana De 8 a 10hs De 14 a 16 hs (19/09) Miercoles 6 semana de 8 a 10 De 14 a 16 hs (26/09) Viernes 7 semana De 8 a 10 hs De 14 a 16 hs (28/09) Mircoles 7 semana

T. PRACTICO T. PRACTICO T. PRACTICO T. PRACTICO

TERCER PARCIAL

Recuperatorio TERCER PARCIAL

C) BIBLIOGRAFA 5

Alberts et al. Introduccin a la Biologa Celular. 2006.2a Edicin. Editorial Mdica Panamericana. Alberts et al. Molecular Biology of the Cell. 1994. 3ra. Edicin. Garland Publishing. Glover-Hames, DNA cloning. Core techniques. IRL Press ,1994. Griffith. Introduccin a la gentica. McGraw-Hill. Keller G., Manak M. 1993. 2 Ed DNA Probes. Mac Millan Inc. Lenhninger, A.L. Principios de Bioqumica.2006 2nd Edition Ed. Omega. Barcelona Lewin, Benjamin. 2004. Genes VIII . Pearson - Mexico Lodish H, Berk A, Matsudira P, Kaiser CA, Krieger M, Scott M, Zipursky S, Darnell J. 2005. Biologa Celular y Molecular. 5ta. Ed. Mdica Panamericana Luque, J. Herrez, A. 2002 Biologa Molecular e Ingeniera Gentica. Ed. Harcourt. Madrid. Miller J. 1992. A short course in molecular genetics. CSHL Press. Robertis (h), Hib, Ponzio. 1998. Biologa Celular y Molecular. 12. Edicin. Editorial El Ateneo. Sambrook J and Russell.Sambrook J. 2001. 3rd. Ed. Molecular Cloning A laboratory Manual. Ed. CSHL Press. N Y. Snyder L. and W. Champness Molecular Genetics of Bacteria. 1997.ASM Press, Washingto,D.C. Stryer, L. 2004. 5ta. Edicin . Bioqumica. Ed.Revert . Barcelona Watson JD. , Baker TA, Bell SP, Gann A, Levine M, Losick R. 2005. 5ta. Edicin. Biologa Molecular del gen. Editorial Mdica Panamericana. Buenos Aires. Madrid