INTRODUCCIN En 1776, Volta descubri que los pantanos pueden generar "aire inflamable".

A pesar de que relaciona la generacin del gas inflamable a la degradacin de la materia orgnica, que podra no encontrar una explicacin para su formacin. En 1806, Henry identific el gas que se produce en forma de metano (CH4) y sesenta aos despus, Bechamp indica cmo el metano se podra crear microbiolgica de la materia orgnica. Desde 1875, cuando se qued Popoff investigacin en este campo, varios laboratorios investigan la formacin de metano amplio mundo de un gran nmero de sustratos orgnicos. Sin embargo, las tcnicas microbiolgicas en lugar primitivas no permitieron el aislamiento de un cultivo puro de un organismo productor de metano. En 1906, Sohngen logr obtener un cultivo mixto de tan slo dos variedades: una Sarcina y una bacteria en forma de vara. En 1947, schenellen fue el primero en aislar dos cultivos puros de bacterias metanognicas (MB), Methanosarcina barkeri y Methanobacterium formicicum, un gran avance en el desarrollo de la produccin de metano microbiologa. En 1967, Bryant descubri que la conversin de etanol en metano no se Interrupciones por un solo organismo (methanobacillus omelianskii), como se haba supuesto hasta entonces, sino por dos organismos que viven en simbiosis: uno que convierte el etanol en acetato e hidrgeno, y el otro que luego convierte el hidrgeno y dixido de carbono en metano. este descubrimiento revel que MB puede crecer slo en un pequeo nmero de sustratos; las ms importantes son el acetato, carbonato de hidrgeno ms, formiato y metanol. Recientemente, una serie de nuevas herramientas analticas ecolgicas molecular han aumentado nuestros conocimientos sobre la metanognesis. Bacterias metanognicas en realidad pertenecen a un grupo filogentico separado, el arqueobacterias. La caracterstica notable de MB para obtener su energa de la clula a partir de la produccin de metano es explotada en el tratamiento anaerobio de aguas residuales. BIOCONVERSIONES ANAEROBIAS La digestin anaerbica se produce en los ecosistemas naturales, por ejemplo, pantanos, lacustres y sedimentos del fondo del mar, as como en los rganos digestivos de los insectos y rumiantes. las caractersticas nicas de los metangenos tambin se explota con gratitud en los ecosistemas provocados por el hombre, por ejemplo, plantas de tratamiento de aguas residuales, sistemas de digestin anaerbica de estircol y lodos. La degradacin anaerobia de material complejo Las bacterias metanognicas se encuentran en la cadena alimentaria anaerbico extremo y, en parte gracias a su actividad, hay grandes cantidades de materia orgnica se acumulan en ambientes anaerbicos, donde esta cuestin es inaccesible para los organismos aerbicos. El proceso de digestin anaerobia implica una compleja cadena alimentaria, en el que la materia orgnica es degradada secuencialmente por una amplia variedad de microorganismos. Los consorcios microbianos implicados conjuntamente convertir la materia orgnica compleja y en

ltima instancia mineraliza en CH4, dixido de carbono CO2, de amonio (NH3), sulfuro de hidrgeno (H2S) y agua (H2O). El proceso de digestin se puede subdividir en las cuatro fases siguientes: 1. La hidrlisis, donde las enzimas excretadas por bacterias fermentativas (los llamados "exoenzimas") convierten el material complejo, sin disolver en compuestos menos complejos, disueltas que pueden pasar a travs de las paredes y membranas celulares si la bacteriuria fermentativo. 2. La Acidognesis, cuando los compuestos disueltos presentes en las clulas de las bacterias fermentativas se convierten en una serie de compuestos simples que a continuacin se excretan. Los compuestos producidos durante esta fase incluyen cidos graso voltiles (AGV), alcoholes, cido lctico, CO2, H2, NH3 y H2S, as como nueva clula de materia. 3. Acetognesis (intermediario cido-produccin), donde los productos de digestin se convierten en acetato, hidrgeno (H2) y CO2, as como la nueva clula-materia. 4. Methanogesis, donde de etilo, carbonato de hidrgeno ms, formiato o metanol se convierten en metano, CO2 y nueva clula-materia. En este esquema global, el siguiente sub-proceso se puede distinguir (figura 2.1): 1. La hidrlisis de biopolmeros La hidrlisis de las protenas La hidrlisis de polisacridos La hidrlisis de las grasas 2. Digestin La oxidacin anaerobia de aminocidos y azcares Oxidacin anaerobia de mayores graso-cidos y alcoholes 3. Acetogenesis Formacin de cido actico e H2 a partir de productos intermedios (particularmente cidos grasos voltiles) Homoacetogenesis: la formacin de cido actico a partir de H2 y CO2 4. Metanognesis Formacin de metano a partir de cido actico Formacin de metano a partir de hidrgeno y dixido de carbono

Figura 2.1. Da la degradacin unidireccional de materia orgnica para los productos finales de CH4 y CO2. El proceso de homoacetognica ilustra la interconversin de diferentes sustratos. en la prctica, puede ocurrir incluso reacciones de espalda, por ejemplo, la formacin de una mayor VFA o alcoholes a cabo acetato y propionato.

Estas reacciones de la espalda son de particular importancia en el caso de mal funcionamiento del reactor. En el caso de las aguas residuales que contiene sulfato, un proceso adicional puede proceder, a saber. 5. Reduccin de sulfato

ACIDOGNESIS
Digestin

ACETOGNESIS

METANOGNESIS
70% 30%

Reduccin de los sulfatos

Sulfuro de hidrgeno Dixido de carbono

Fig. 2.1 La degradacin de la materia orgnica metanognicas complejo (explicacin del nmero se da en el texto) Hidrlisis Hidrlisis se puede definir como un proceso en el que los sustratos polimricos complejos, partculas o disueltos se convierten en compuestos monomricos y dimricos que son fcilmente disponibles para las bacterias acidognicas. Durante la digestin anaerobia de sustratos complejo de hidrlisis es por lo general el primer paso. Aunque en algunos casos es necesaria una etapa preparatoria para hacer Hidrlisis posible. Con la digestin de los lodos biolgicos, tales como lodos activados de residuos, la hidrlisis de los lodos se procedi por la muerte y la lisis de la biomasa. la hidrlisis se lleva a cabo por el exo-enzyms que son producidos por las bacterias acidognicas. Los productos de la hidrlisis son los sustratos para las bacterias acidognicas. En la figura 2.2 se da una presentacin esquemtica de la hidrlisis de los compuestos ms abundantes en sustratos complejos:

Triacilglicerol

glicerol

cidos grasos de cadena larga

Figura 2.2 La hidrlisis de los lpidos Hidrlisis generalmente se considera que es el paso limitante de la velocidad durante la digestin anaerobia de sustratos complejos. Esto no es sin embargo por lo general debido a la falta de actividad de la enzima, sino a la disponibilidad y la estructura desde el Sustratos. Esto se ilustra en la figura 2.3, donde se puede comparar la estructura del almidn y la celulosa. la frmula molecular del almidn y la celulosa son los mismos, tanto consisten en molculas de glucosa. Sin embargo, cuando se observa la estructura

molecular se ve una clara diferencia es notable. La celulosa es un polmero ramificado de residuos de glucosa unidas por enlaces B-1.4. La configuracin-B permite celulosa a partir de cadenas lineales muy largos. El A 1.4 vnculos en almidn producen una arquitectura molecular muy diferente. Una hlice hueca se forma en lugar de una cadena lineal. La cadena lineal formada por enlaces B es ptima para la construccin de fibras que tienen una alta fuerza de traccin. Por el contrario, la hlice abierta formada por @ vnculos es muy adecuado para formar una instalacin de almacenamiento accesible de azcar. (Stryer 1988). En otras palabras almidn es ms fcilmente hidrolizado a continuacin, celulosa debido al hecho de que la molcula de almidn es ms accesible a las enzimas. Otro factor importante en la digestin de la celulosa es el contenido de lignina del sustrato. Celulosa menudo est obligado a la lignina en los llamados complejos lignocelulticos. Cuanto ms alto sea el contenido de lignina de un sustrato menos se llevar a cabo la hidrlisis de la celulosa.

Figura 2.3. La hidrlisis de hidratos de carbono (almidn y celulosa)

Figura 2.4. La hidrlisis enzimtica de protenas En la mayora de los casos, el sustrato es en partculas, esta tambin afecta a la disponibilidad del sustrato para los enzimas.

Factores que afectan a la hidrolisis Efecto de pH La hidrlisis se lleva a cabo por las enzimas. Las enzimas son protenas con la capacidad de catalizar diversas reacciones. Las protenas y por lo tanto tambin las enzimas son muy sensibles al pH. El pH determina la estructura terciaria de las enzimas y la forma terciaria determina en ltima instancia, el hecho de si una enzima es capaz para catalizar una reaccin o no Cada enzima tiene su propio pH ptimo para la actividad. e pH no tambin efectuar la solubilidad o la forma del tipo de sustrato y el crecimiento de acidificantes. Protena: Bmre y Van Andel (1984) digerido gelatina en un quimiostato anaerbica a 30% a pH 5.3, 6, 6,3 y 7. Encontraron una hidrlisis ptima para la gelatina a pH 7. Aunque el ptimo para la actividad de la proteasa era 7.5 independiente de la pH en el que se cultiva la cultura. Boon (1994) el lodo digerido a partir de un reactor de flujo ascendente acidognicos para la eliminacin de slidos en suspensin de domstico aguas residuales a diferentes pH. En los reactores de proceso por lotes en 30 C. Para la hidrlisis y acidificacin de nitrgeno orgnico un pH ptima de los 6.5 fue encontrado. Un efecto de pH sobre la solubilidad del sustrato se observ en la investigacin sobre el tratamiento anaerbico de productos lcteos

Aguas Residuales (Groeneveld 1996), Groeneveld aguas residuales lcteas tratada en un reactor de lecho de lodos upglow acidognica (T = 20, pH = 4,2, TRH = 4-6 horas). Aguas residuales Dairy consiste principalmente en lactosa, protenas y lpidos. Los lpidos se emulsionan y rodeado por una membrana de protena. En el reactor de acidognicos la lactosa se convierte en cidos grasos voltiles que causan una disminucin en el pH. A un pH 4,6 rodeando las protenas, los lpidos se van a precipitar causando una eliminacin de protenas y los lpidos de la solucin. El lodo producido se compone de una cantidad concentrada de protena y lpidos, que podra ser digerido a Temperaturas elevadas. Los fenmenos similares puede verse a partir de los resultados de Elefsiniotis y Oldham (1994). Elfsinitis y Oldham trataron diluyendo lodo primario (TS = 4 g / l) en un reactor UASB acidognicos a pH 4,5, 5,1 y 6,1 en la TER = 10 d y TRH = 12 h. la extraccin ms alta de protena se produjo a un pH de 4,5 (60%), la ms baja a pH 6,1 (37%). Todos los casos sin embargo, slo 10 - 16% del sustrato fue eliminado convirtiendose en VFA. Esto indica que a pH ms bajo de la eliminacin de protenas fsica / qumica es mayor.

Los hidratos de carbono

La celulosa es el hidrato de carbono ms abundante en la naturaleza. Es, como se indica en la seccin 1.1., A menudo presentes en los complejos lignocelulsicos que dificultan la digestin anaerbica. El protn hidratos de carbono de lignocelulosa se puede hacer ms biodegradables por el pretratamiento del sustrato con lcali a temperaturas moderadas. El tratamiento alcalino promueve reacciones varias tales como hinchazn de la fibra y algunos solubilizacin de hemi-celulosa (Pavlostathis y gossett, 1985). La gama optima de la fermentacin acidognica de compuestos fcilmente biodegradables fue encontrada entre 5.5 a 6.5 (Zoetemeye 1982). Lpidos Diversos autores tienen avisos que, en condiciones acidognicas (sin produccin de metano) no se produce la hidrlisis de lpidos (Leender 1995, Heuljelian 1967). A pH inferior bronceado 6 sin actividad metanognicas es Posible, y por lo tanto tampoco la hidrlisis de los lpidos se llevar a cabo. Efecto de la temperatura: As como tambin el pH de la Temperatura efecta la actividad de las enzimas. Cada enzima tiene su propia Temperatura optima. Temperatura tambin cambia la solubilidad de uno de los sustratos sobre todo cuando se trata de los lpidos. Los lpidos y sus productos de hidrlisis, los cidos grasos de cadena larga, son ms solubles en agua a altas temperaturas. Este hace los lpidos ms accesibles a las enzimas. Sin embargo, una mayor solubilidad de LCFA, que son txicos para las bacterias metanognicas, podra dar lugar a una inhibicin de la actividad metanognicas. Las protenas pueden desnaturalizar en condiciones de alta (por ejemplo, bicarbonato de Temperaturas de ebullicin o de un huevo). Sin embargo, dentro del rango de Temperaturas utilizadas en la digestin anaerobia (hasta 70 C) se trata por lo general no Problema. Efecto del tiempo de retencin de lodos: El tiempo de retencin de lodos (SRT) Efectos de la composicin de la biomasa en un reactor. En relativamente bajo de SRT (menos 3 das) slo acidognicas y otras bacterias de crecimiento rpido estarn presentes en el lodo. Sin bacterias metanognicas presentan los cidos grasos voltiles que son producidos por los acidogeneses no se convierten resultando en un pH relativamente bajo. Debido al hecho de que la hidrlisis es lento, la acumulacin de materia particulada no hidrolizada en los lodos se puede ocurrir a bajos tiempos de retencin de lodos. Esto disminuye la SRT lo que se agradece puede dar problemas con la actividad metanognicas de los lodos o capa flotante en el reactor. Inhibicin:

La actividad y la produccin de las enzimas hidroltica no se unicamente afectados por el pH y la temperatura, sino tambin forman y disminuyen la actividad de enzimas proteolticas, amonio, y LCFA (cidos grasos de cadena larga). Efecto de la forma de la partcula y distribucin de tamao de partculas: Muchos autores han reconocido la importancia del tamao y forma de partculas en el sustrato, pero slo unos pocos han evaluado la relacin con la tasa de hidrlisis (Hobson, 1987). Vase el captulo 3.

La hidrlisis de lodos biolgicos La hidrlisis biolgica de lodos por ejemplo. Residuos de lodos activa est precedida por la muerte y la lisis de la biomasa. Esto se ilustra en la figura 2.5. lodos activados de residuos consiste unicamente de protena (35-55% de materia seca) y ribosa nucleica cid (ARN, 10-15% de materia seca). Las protenas y ARN son compuestos que son intracelular. Los carbohidratos estn presentes en las paredes celulares, y como compuestos exo polimricos. Sander et. Al (1996) encontr durante la digestin anaerobia de los lotes finales de lodo activado a 30 C, 62% de protenas y la degradacin del ARN 60% en 25 das. Durante el periodo experimental se disuelve la cantidad de sustrato era baja. El indica que la hidrlisis de protenas y ARN se produce casi simultneamente con la muerte / lisis de la biomasa y puede no ser considerado como limitante de la velocidad. La protena es en su mayora intracelular, disminucin de 62% en la protena indica que el 62% de la biomasa est muerto y se lisaron despus de 25 das. Los carbohidratos son degradados slo el 8%. Los autores supusieron que los hidratos de carbono, donde se presentan principalmente como paredes celulares. Las paredes celulares estn diseados para proteger a la clula y son por lo tanto, resistan a la hidrlisis. Actualmente, la investigacin en el departamento se realiza para investigar los mecanismos de deterioro celular y la lisis celular de los lodos se activa durante la digestin anaerobia de residuos. Tambin investigaciones se hacen para desarrollar un proceso sostenible para mejorar la biodegradabilidad de los lodos activa residuos.

Living cell-matter Decay/lysis

Disolved substrate

hydrolysis

Subtrate which must be hydrilysed

acidification

Volatile fatty

figura 2.5 Modelo para la digestin anaerbica de los lodos biolgicos (Pavlotathis y Gossett 1986) Acidgenesis Acidognesis compone de los procesos de degradacin microbiolgicos en el que los compuestos orgnicos sirven tanto como donante de electrones y aceptor. En el proceso de fermentacion cido anaerobio, compuestos orgnicos disueltos, complejos se convierten principalmente en los cidos grasos voltiles y este paso por lo tanto con frecuencia se indica mediante "acidognesis". Acidognesis se lleva a cabo por un gran grupo muy diverso, de bacterias fermentativas (Tabla 2.1.). en el lodo anaerbico, forman una cultura miced de estrictos y facultativos anaerobios. Lodos digeridos Seage contiene 108-109 bacterias fermentativas por ml (Zeikus 1988). Ejemplos de bacterias fermentativas son los que pertenecen al gnero Clostridium y bacteroides. Clostridium es una formacin de esporas anaerbico gnero capaz de sobrevivir en condiciones muy duras. Algunas especies excretan toxicos y estos Clostridium pueden transmitir enfermedades peligrosas (por ejemplo, el botulismo y el ttanos). Bacteroides son presentes comnmente en los tractos digestivos de mamalians, donde se degradan los azcares y aminocidos y cidos orgnicos. La mayora de estas bacterias son obligatoriamenteanaerbico, por lo general aproximadamente 1% de un grupo de tales bacterias consiste en bacterias, por ejemplo, anaeroic, facultativas psedomonas los gneros Bacillus, Alcaligenes, Bifidobacterium o estafilococos. Como resultado, la bacteria anaerbica obligatoria (incluyendo metangenos) son proteger frente a la inhibicin de oxgeno).

Tabla 2.1. cantidades representativas de diferentes cateogries de bacterias en lodo anaerbico.

Category Total

Amount /ml 108-109

Proteolitic

107

Cellulolitic

105

Acetogenic

105-106

Methnogenic

106-108

Sulfidogenic

104

Organisms l es parte del rallador identificados Baciluforms gram negativas Eubacterium Closridium Bacteroides Clostridium Acetovibrio Bacteroides Clostridium Acetobacterium Butyribacterium Methanobacterium Methanosarcina Methanosaeta Desulfovibrio Deulfotomaculum

El producto final desde la fase cida puede variar ampliamente, dependiendo de las condiciones de la digestin, el material original y los micro-organimos activos. Los azcares son fermentados en cidos y los protones, los rendimientos whic ATP (adenosina tri fosfato, el "combustible" molecular universal en los sistemas biolgicos) a las bacterias fermentativas. Hay dos maneras en que las bacterias fermentativas puede deshacerse de la liberacin protones durante la fermentacin: pueden usar sus propios productos de reaccin como aceptores de protones (por ejemplo, etanol), o se pueden convertir en los protones de hidrgeno molecular, por ejemplo por medio de las enzimas hidrogenasa: 2e- + 2H+ = H2 En este ltimo caso, principalmente de etilo se crear como el producto final, en lugar de un "pool" de etanol, propionato, lactato o butirato como sumideros de electrones. La eliminacin de H2 por metanognicas, pero tambin posibles desnitrificantes y sulfato reduccin de las bacterias permite a las bacterias fermentativas para producir productos finales que estn ms oxidados, que por lo tanto producir ms energa (ATP) para las bacterias fermentativas. En efecto, los azcares se convierten en una mixtura de butirato, acetato, propionato, etanol, CO2 y H2 en un reactor de acidificacin (la primera etapa de un sistema en el que la acidificacin y el metano. Procution estn separados espacialmente). Mientras que durante el proceso de digestin de una sola fase estable (es decir, la acidificacin y el metano-procution en un reactor) acetato, H2 y CO2 son los principales productos del cido. Producir bacteria. En la prctica, slo acetato est presente como un producto intermedio en la mezcla de digestin de un reactor de ciervo sola, porque H2 se elimina de manera efectiva por las bacterias metanognicas. Tabla 2.2. muestra con ms detalle cmo las condiciones del proceso pueden influir en los productos de fermentacin.

Tabla 2.2. directrices para dirigir la fermentacin de hidratos de carbono en la digestin anaerbica (despus de Cohen 1985). PRODUCT Lactic acid and etanol PROCESS CONDITIONS - El cido lctico y etanol - Los altos niveles de glucosa o sacarosa (Major g / L) - El pH bajo (menos 4.5) - Mcro - areophilic - El cido butrico - los niveles de sustrato moderadas - pH 4.5 5.0 - Anaerobico El cido propinico - Altos niveles de lactato, succinato o H2 Tiempo de permanencia celular (15d Mayor) Un poco cido a condiciones neutras Anaerbico cidos mixtos - los niveles de sustrato moderadas Tiempo de residencia celular moderada (5-10 d) -PH neutro anaerbico

Butyric acid

Propionic acid

Mixed acids -

Los aminocidos son generalmente degradadas a travs de la denominada "reaccin stickland". Durante esta reaccin, un aminocido se oxiized a una graso saturado cido con un tomo de C y un grupo de NH3 menos. El hidrgeno liberado reduce otros dos aminocidos. Posteriormente, el NH3 grpuos unidos a los aminocidos ltimo se separ. Un ejemplo es la degradacin combinada de alanina y glicina a cido actico de acuerdo con las siguientes reacciones:

Ciertos aminocidos pueden actuar slo como H donantes, mientras que otros slo pueden actuar como H aceptor. Sin embargo, unos pocos aminocidos son capaces de ambos. Adems de la degradacin combinada de aminocidos. Ciertos

aminocidos se pueden degradaded directamente por ciertas especies bacterianas (por lo general Clostridium). Un aspecto importante de la degradacin de los aminocidos es la formacin de NH3, que afecta a la Capactity tampn de pH del medio, mientras que tambin es un nitrient esencial. Por otra parte, el NH3 es txico en mayor concentratiosn (vase el captulo 5). cidos grasos superiores se degradaded anaerbicamente a travs de la ruta de degradacin de b-oxidacin, donde los fragmentos de dos tomos de carbono se dividen repetidamente fuera desde el esqueleto de carbono del cido graso de cadena larga como acetilo CoA, que a continuacin es convertedinto de etilo. Por lo tanto, los cidos grasos con un incluso Nombre de tomos de carbono finalmente resultan en acetato, mientras que para los cidos grasos con un nmero impar de tomos de carbono del fragmento restante es propionato. Por ejemplo, el cido plamitic (C16) se convierte de acuerdo a.

Grasos insaturados - cidos primero necesitan ser hidrogenado antes de que puedan ser ms degradada. Es claer que el hidrgeno que consumen las bacterias sean suficientemente activos con el fin de mantener una presin de hidrgeno muy bajo. Por otra parte, estas reacciones tambin revelan que se puede producir una cada del pH agudo en la capacidad tampn de pH. Muchas bacterias fermentativas pueden aceptar valores bajos de PG. Procution Acid continuar hasta que los valores de pH tan bajos como 4. Esta caracterstica se utiliza en el ensilaje de alimentacin animal. En contraste, las bacterias de metano son bastante susceptibles para valores de pH cidos. Por lo tanto, una cada en el pH ser hijo resultar en una disminucin del consumo de hidrgeno. Como se mencion anteriormente, esto dar lugar a un cambio en los productos de fermentacin de las bacterias productoras de cido. Algunos productos (por ejemplo, propionato) a continuacin, se producen en quuantities grandes. En aquellos casos en los que la poblacin bacteriana acetognica (vase la seccin siguiente) presentes en el lodo no puede hacer frente a la cantidad de cidos producidos, el proceso se deteriora, el pH disminuir an ms debido a la acumulacin de cidos grasos y finalmente procution metano cesar. A continuacin, se trata de un digestor acidificado. Por lo tanto, siempre es una capacidad de reserva suficiente debe estar presente. Acetogenesis

Las bacterias acetognicas convertir los productos de las bacterias fermentativas en acetato, hidrgeno y dixido de carbono. Tabla 2.3. proporciona las principales reacciones acetognicas. La ltima columna de la tabla 2.3. da

the changes in free energy of these reactions under standard conditions, ie. at neutral pH, a temperature of 25 C and a pressure of 1 atm (101 kPa) Water is regardeed as a pure liquid and all compounds presentes in solution have an activitiy of 1 mol/kg Tabla 1- Estequiometra y el cambio de la energa libre para algunas reacciones acetognicas

De la tabla 1, se sigue que las reacciones de etanol, butirato y propionato no ocurrir bajo condiciones estndar, como el rendimiento energtico es negativo para la bacteria. En condiciones normales digestor sin embargo, las condiciones se desvan fuertemente con los valores estndar, especialmente las concentraciones de los productos de reaccin difieren de la normalidad. Se pueden hacer correcciones sobre la base de la definicin de para la reaccin general.

En caso de que el pH se desva de 7, se obtiene

Donde: n es el nmero de nido de protones en la reaccin En una instalacin de produccin de metano funciona correctamente, la presin parcial de hidrgeno no exceda de 104 atm y por lo general ser en torno a 106 atm. A una concentracin tan baja de hidrgeno, la degradacin de etanol, butirato y propionato convierte exergnica y producir energa para las acetgenos (Figura 2) Sin embargo, estas presiones parciales muy bajas de hidrgeno slo pueden mantenerse si el hidrgeno producido es eliminado rpidamente y con eficacia por hidrgeno-bacterias que consumen. Figura 2. Tambin muestra el cambio en la energa libre que se produce cuando el metano se produce a partir de H2 y CO2

Figura 2. Cambio en la energa libre como una funcin de la presin de hidrgeno Cabe sealar que la energa derivada de la conversin microbiano tiene que ser compartido entre los socios. Esto contrasta la pizca de biodegradacin aerbica, donde suele exhibir un sol micro-organismo metaboliza el sustrato, y por lo tanto consigue la plena

Las pequeas cantidades de energa disponible para las bacterias anaerobias pone una presin altamente selectiva en los organismos. Por otra parte, se puede calcular que-para la presin media de hidrgeno en reactores anaerobios - una molcula de hidrgeno "promedio" se consume dentro de 0,5 segundos de su formacin. Durante ese tiempo intervalo, la molcula H2 es capaz de moverse en la distancia de 0,1 mm. Por lo tanto, los acetgenos productoras de hidrgeno y de hidrgeno que consumen metangenos deben estar situados muy cerca uno del otro. El transporte de H2 a partir de una bacteria a otra se llama "la transferencia de hidrgeno". Granular lodo anaerbico menudo contiene micro-ecosistemas en el que las bacterias se encuentran cerca acetognicas toneladas de hidrgeno que consumen metangenos. Por lo tanto, el H2 producido puede ser utilizado correctamente, lo que resulta en una acetognesis suavemente progresin. La figura 3, muestra una confirmacin matemtico de los efectos favorables de la granulacin en la difusin de hidrgeno y la eliminacin.

Adems de H2, tambin formiato juega un papel importante en la transferencia entre especies formiato. El coefciente de difusin de forakte es mayor que la de H2, lo que significa que se difunde ms rpido a travs del agua. Por lo tanto, formiato viaja sobre una distancia ms larga por unidad de tiempo que el hidrgeno. El papel de formato en la transferencia entre especies equivalentes reductores todava no est claro. Hasta el momento, slo un nmero limitado de bacterias se ha encontrado capaz de crecer en productos de fermentacin como el etanol, propionato y butirato en asociacin directa con la eliminacin de H2 metangenos. Se les llama obligados acetgenos producen hidrgeno o bacterias acetognicas microbiano. El aislamiento de cultivos puros de bacterias acetognicas es extremadamente difcil debido a la bioqumica y la cooperacin espacial cercana entre acetgenos e hidrgeno (foramte-) bacterias consumen. Por otro lado, el nmero de sustratos que pueden ser degradados syntrophically est en continua expansin. Hasta la fecha, la degradacin microbiano de cidos grasos voltiles altos (caproato, valerato, heptanoato) benzoato de etilo e incluso se ha descrito (Stams, 1994). Lodo anaerbico por lo general contiene hidrgeno que consumen poblaciones de metangenos, bacterias reductoras de sulfato y bacterias posiblemente incluso desnitrificantes. Homoacetogenos son otro grupo de H2 que consumen acetgenos que son capaces de reducir el CO2 y metanol a cido actico por medio de H2. Por lo general, es una poblacin relativamente pequea en los digestores anaerbicos y comprende la especie Clostridium aceticum y Acetobacterium woodii. Metanognesis

Bacterias metanognicas (MB) de ganancia de energa de la produccin de metano, en contraste con algunas otras especies bacterianas capaces de producir metano, pero no se puede combinar con la generacin de energa metablica. Los metangenos pertenecen a la arqueobacterias, un grupo filogentico diferente de los eucariotas (organismos que tienen un ncleo en sus clulas, por ejemplo, plantas, animales y fungil) y procariotas (organismos sin un ncleo en sus clulas, por ejemplo bacterias). Arqueobacterias difieren de los procariotas en la composicin de ADN y su composicin de la pared celular. Bacterias metanognicas contienen cido murmico en sus paredes celulares, lo que los hace no susceptible a los antibiticos que afectan a las paredes de las clulas de procariotas, tales como la penicilina, D-cycloserin, vancomicina y cepholosporin.

Figura 3 El efecto de la distancia de difusin en el transporte entre acetognica H2 y H2-bacterias que consumen en un estado suspendido (a la izquierda) o agregada (a la derecha).

El espectro de sustrato de la MB es bastante limitado. Las principales reacciones metanognicas se presentan en la Tabla 4

Tabla 4 - Estequiometra y el cambio de la energa libre ( metanognicas

de algunas reacciones

Aproximadamente el 70% de todo el metano producido en un reactor de metano es el producto de escisin de metangenos. En esta va, el grupo metilo de acetato se incorpora en la molcula de metano mientras que el grupo carboxilo se separ y finalmente se convierte en CO2 (o HCO3). Esta reaccin produce 31,0 kJ de energa por mol de cido actico convertido. Esto es demasiado pequeo para la formacin directa de ATP, que requiere 31,8 KJ / mol. Por lo tanto, se supuso durante mucho tiempo que metangenos utilizando slo el cido actico no existen. Esto contrasta con el aislamiento de varios cultivos puros de metangenos capaz de vivir con el acetato como nico substrato. En estos aceticlstica MB, la energa se conserva probablemente por el almacenamiento temporal de la energa liberada durante una primera escisin de etilo en la forma de un campo de tensin sobre la membrana de la clula (la denominada "fuerza motriz de protones"). Posteriormente, esta energa aadida a la energa liberada durante una segunda escisin de etilo, lo que permite la formacin de ATP. Methanosaeta spp. (antes Methanothrix spp.) y Methanosarcina spp. tanto crecer en acetato Methanosaeta spp. se varillas sheated, a veces creciendo en forma de filamentos largos. Crecen lentamente con el tiempo mnimo de duplicacin de alrededor de 4 das a 35 C. Ellos sobreviven porque son muy buenos limpiadores con una alta afinidad para el acetato de (Km = 30 mg / l a pH 7,0) Methanosarcina spp. son bacterias cocoides que crecen juntos en grupos discretos. Ellos crecen ms rpido, con tiempos mnimos de duplicacin alrededor de 1,5 das a 35 C, pero son menos eficaces eliminadores (Km = 400 mg / l a pH 7,0) El segundo grupo fisiolgico importante de metangenos son los MB que forman metano de H2 y CO2. Este grupo es responsable de aproximadamente el 30% del metano producido en una planta de purificacin anaerbica funcionamiento normal. Alrededor de la mitad de las especies que consumen metangenas H2 tambin son capaces de crecer en cido frmico (formiato). En la actualidad, no est claro si esto sucede directamente:

La metanognesis de metanol, que presumiblemente es de gran importancia en los ecosistemas naturales como los pantanos, desempea un papel clave en la purificacin anaerbica de aguas residuales que contienen metanol. El metanol se puede convertir directamente en metano por Methanosarcina sp. Sin embargo, tambin puede ser degradado indirectamente, despus de metanol se convierte en acetato de (por ejemplo, por clostridios. Ver Tabla 2.3). El acetato es que posteriormente degradada a travs de la ruta aceticlstica en metano y CO2. La ocurrencia de la ruta directa o indirecta depende de la disponibilidad de HCO3 - CO2, elementos traza (especialmente cobalto) y la concentracin de metanol. Conversiones bacterianas en condiciones anxicas Digestor anaerbico contienen comunidades microbianas mixtas. Adems de la asociacin metanognicas descrito antes, otras bacterias estn presentes que pueden competir con el MB para metanognicas sustratos (Tabla 2.5). Estas bacterias tienen un sistema de respiracin microbiana y pueden utilizar diferentes receptores de electrones como (O2) bye oxgeno (facultativa) bacterias aerobias, nitrato (NO3) por denitrifyers, sulfato (SO4) o sulfito (SO3) sulfato adis reducir bacterias y hierro (Fe + 3) por los reductores de hierro. Anxico significa que el oxgeno en forma de gas de oxgeno (O2) no est disponible como un aceptor de electrones. Reduccin de los sulfatos En la presencia de sulfato, sulfito o tiosulfato, bacterias reductoras de sulfato (SRB) son capaces de utilizar varios productos intermedios F el proceso de mineralizacin anaerbica (Tabla 2.5). Estas bacterias convierten el sulfato a sulfuro de hidrgeno. Adems de que el hidrgeno molecular sustratos metanognicas directa (H2), formiato, acetato, piruvato y metanol, se puede tambin utilizar cidos grasos de propionato, butirato, superior y ramificada, lactato, etanol y alcoholes superiores, fumarato, succinato, malato y compuestos aromticos. Por lo tanto, los principales productos intermedios del proceso de degradacin anaerbica se pueden convertir por tanto SRB y MPB / OHPB. Debido a que estos tres grupos de bacterias operan en las mismas condiciones ambientales (pH, temperatura), que competirn para estos sustratos. El resultado de esta competencia depende de la cintica de conversin (vase el captulo 3). Si el material orgnico se oxida a travs de la reduccin del sulfato, 8 electrones pueden ser aceptados por molcula de sulfato. Dado que una molcula de oxgeno slo puede aceptar 4 electrones, la capacidad de aceptar electrones de 2 moles de = 2 es igual a 1 mol de SO4. Esta es 0,67 gr de O2 por g SO4. Esto significa que para los flujos de residuos de la pizca una relacin DQO / sulfato de 0,67, hay suficiente tericamente sulfato disponibles para eliminar por completo la materia orgnica (DQO) a travs de la reduccin del sulfato. Para DQO / sulfato de relaciones ms bajas de

0,67, la cantidad de materia orgnica es insuficiente para una reduccin completa del sustrato presente y extra sulfato a continuacin, debe aadirse si la eliminacin de sulfato es el objetivo del tratamiento. Por el contrario, para las aguas residuales con una relacin DQO / sulfato inferior o igual a 0,67, una eliminacin completa de la materia orgnica slo puede lograrse f, adems de la reduccin del sulfato, tambin se produce la metanognesis.

En la presencia de sulfato, la materia orgnica no es necesariamente degradada con menos facilidad, pero en comparacin con el metano, sulfuro de hidrgeno tiene la gran desventaja de que se disuelve mucho mejor en agua que el metano. Esto significa que, FO el mismo grado de degradacin de los residuos orgnicos, una menor cantidad de COD se reducir en aguas residuales que contienen sulfato. Sulfuro de produccin puede causar ms los siguientes problemas tcnicos de proceso durante la digestin anaerobia: - Es txico para las bacterias metanognicas (MB), bacterias acetognicas (AB) y SRB. - En caso de tratamiento metanognicas de la corriente de desechos, parte de los compuestos orgnicos en las aguas residuales ser utilizada por SRB en lugar de MB

y por lo tanto no se convierten en metano. Esto se traduce en un rendimiento ms bajo por unidad de metano de residuos orgnicos degradada y, por lo tanto, afecta negativamente al balance energtico global del proceso. Por otra parte, la calidad del biogs se reduce ya que una parte del sulfuro producido termina como H2S en el biogs. Por lo tanto, se requiere generalmente Remocin de H2S del biogs. - El sulfuro producido tiene un mal olor y puede causar problemas de corrosin de tuberas, motores y calderas. Por lo tanto, los costes de mantenimiento de la instalacin y el aumento de costes de inversin adicionales son necesarios para evitar estos problemas. - Parte del sulfuro estar en el efluente del sistema, como sulfuro contribuye a la DQO de aguas residuales (por mol de sulfuro se requieren dos moles de oxgeno para una oxidacin completa en sulfato). Por otra parte, el sulfuro puede alterar la eficacia del tratamiento del sistema de post-tratamiento aerbico, por ejemplo algas florece en lagunas o aumento de volumen de lodos activados. Por lo tanto, puede ser necesario un sistema de post-tratamiento adicional para eliminar el sulfuro de las aguas residuales. Con base en su consumo de sustrato, SRB se puede clasificar en los siguientes tres grupos: 1) hidrgeno-oxidante SRB (HSRB) 2) actico - cido oxidante SRB (ASRB) 3) SRB puede oxidar con mayor grasa - cidos (FASRB) En el ltimo grupo, dos patrones de oxidacin se pueden distinguir:

Algunos SRB son capaces de oxidar completamente VFA de CO2 y sulfuro como productos finales. Otros SRB carecen de l ciclo del cido tricarboxlico y llevar a cabo una oxidacin incompleta de VFA con acetato y sulfuro como productos finales. En este ltimo caso, el cido actico se excreta en el medio. Los representantes de los tres grupos han sido aislados. Cabe hacer notar, adems, que la oxidacin incompleta de cido propinico por un SRB produce los mismos productos de degradacin como la conversin por el OHPB y HSRB. Por lo tanto, no es posible deducir de los balances de masa que las bacterias llevan a cabo esta conversin. Adems de la reduccin de sulfato, la reduccin de sulfito y thosulfite tambin es muy comn entre los SRB. Desulfovibrio cepas se han notificado a ser capaz de reducir di-,

tri-y tetra-THIONATE. Una capacidad nica de algunas SRB, por ejemplo dismutans Desulfovivrio y Desulfobacter curvatus, es la dismutacin de sulfito o tiosulfato.

La ecologa microbiana de SRB ha sido estudiado por diversas tcnicas analticas nuevas, por ejemplo, sulfuro de microelectrodos, resonancia magntica nuclear 13C y 31P y 16S (rRNA) mtodos de deteccin basados en ARN ribosomal. Algunos SRB se han encontrado para ser capaz de respirar oxgeno, a pesar de ser clasificado como bacterias anaerobias estrictas. Hasta ahora, sin embargo, el crecimiento aerbico de cultivos puros de SRB no se ha demostrado. La capacidad de los SRB para llevar a cabo la reduccin del sulfato en condiciones aerbicas menos cierto interesante y podra ser significado de la ingeniera. En la ausencia de un electrn-aceptor, SRB son capaces de crecer a travs de una reaccin de fermentacin o acetognica. Piruvato, lactato y etanol son fcilmente fermentados por muchos SRB. Una caracterstica interesante del SRB es su capacidad para llevar a cabo la oxidacin acetognica en syntrophy con MB hidrogenotrficas (HMB), como se describe para co-cultivos de HMB con Desufovibrio sp. utilizando lactato y etanol o con bacterias Desulfobulbus-como el uso de propionato. La oxidacin de propionato de acetognicas por Desulfobulbus sp. Tambin se ha informado en UASB, lecho fluidizado y reactores de lecho fijo. En la presencia de sulfato, sin embargo, estas bacterias se comportan como verdaderas SRB y metabolizan propionato como donador de electrones para la reduccin de sulfato. La desnitrificacin En general, no hay denitrificationoccurs durante la purificacin y la digestin anaerbica. Nitrgeno ligado orgnicamente se convierte en amonio. La desnitrificacin slo se puede esperar si el afluente contiene nitrato. La desnitrificacin est mediada por microorganismos, es decir bacterias desnitrificantes chemoheterotrophic que son capaces de oxidar la materia orgnica con nitrato. nitrato es el convertir a travs de nitrito y xido de nitrgeno en gas N2. Generalmente, desnitrificantes microorganismos prefieren oxgeno como aceptor de electrones, como el ltimo compuesto se obtiene ms energa (Tabla 2.5). En los procesos de purificacin aerbica, que empiezan a utilizar nitrato como pronto como O2 est agotado para hacer frente a la carga orgnica. En tan activa - planta de lodos, desnitrificacin ocurrir normalmente slo a una concentracin de O2 disuelto de 1 mg / L o menos. La estequiometra de la oxidacin de metanol con nitrito se produce de acuerdo con la siguiente ecuacin de reaccin:

Estas ecuaciones muestran que la reaccin de desnitrificacin se traducir en un aumento del pH (de produccin de carbonato). 2.3. EFECTO DE LA TEMPERATURA EN LA MICROBIOLOGA DE LOS PROCESOS DE CONVERSIN ANAERBICO. La temperatura tiene un efecto considerable en el medio ambiente intracelular y extracelular de bacterias. Temperatura acta como un acelerador de procesos de conversin, y tambin determina si o no una reaccin puede llevarse a cabo por bacterias especficas. El entorno intercelular requiere varias adaptaciones para resistir altas temperaturas, que se discute en ms detalle a continuacin. Adems, tambin el medio ambiente extracelular, es decir, las propiedades fsico-qumicas de la solucin, se ven afectados por la temperatura. Este ltimo, a su vez, puede influir claramente la microbiologa de los procesos anaerbicos. Influencia de la temperatura sobre las propiedades fsico - qumicas aspectos de los procesos de conversin anaerbicas. Termodinmica A altas temperaturas, qumicos y biolgicos proceden mucho ms rpido que a bajas temperaturas. Reacciones biolgicas, sin embargo, dependen de la posible temperatura de crecimiento de los organismos que realizan la reaccin. Dentro del rango de temperatura de los organismos, la termodinmica de la reaccin de conversin de aA + bB --- cC + dD son acelerados por el aumento de las temperaturas. Energas libres de formacin, as como G cambiarn (ecuaciones 2.1 y 2.2)

Donde T = temperatura (K),? H = cambio en entalpa (kJ / mol), y los subndices 1 y 2 se refieren t dos temperaturas diferentes.

La mayora de las reacciones en la biodegradacin de la materia orgnica requieren menos energa para proceder a altas temperaturas (Tabla 2.7), lo que resulta en una digestin ms rpida. Las reacciones dependientes de la presin parcial de H2, tales como la oxidacin de propionato y butirato, son posibles a concentraciones ms altas

de H2 en el biogs.

Factor para determinar la temperatura ptima de crecimiento bacteriano La desnaturalizacin de las enzimas y los cidos nucleicos (ADN, ARN) son ejemplos de posibles limitaciones de las bacterias a temperaturas elevadas. Generalmente, los cidos nucleicos de organismos termfilos son mucho ms estables y contienen relativamente ms guanosina (G) - citidina (C) bonos con 3 puentes de hidrgeno en lugar de la adenosina (A) y (T) bonos timidina, con slo 2 puentes de hidrgeno, sin embargo , nunca se encontr una correlacin clara entre la temperatura ptima de crecimiento y el contenido de GC (Winter y Zeline, 1990). Los cidos nucleicos tambin pueden ser estabilizados por las protenas de unin a ADN, que generalmente termfilos parecen ser ms estables debido a una estructura terciaria ms estable debido a la presencia de ms de S-que contiene aminocidos como cistena, que conducen a interacciones de enlaces SS. Adems de las adaptaciones en el nivel molecular, diversos orgnulos celulares y / o estructuras celulares de las bacterias termfilas tambin necesitan disposiciones adicionales para aumentar la termoestabilidad de estos componentes vitales. Por ejemplo, las membranas de las bacterias termfilas ECA a ser mucho ms fuerte debido a la mayor fluidez y la posible prdida de la permeabilidad selectiva a altas temperaturas. El grado de termoestabilidad de los diversos componentes de la clula determina las temperaturas lapso od una bacteria especfica. En general, un rango de temperatura de 20-40 C es comn para (microorganismos, Sin embargo, algunas bacterias tienen una vida mucho ms amplio, como el termfila que consume hidrgeno metangeno

Methanobacterium thermoautotrophicum, que es capaz de crecer entre 22 y 78 C, es obvio que una bacteria tal indica que necesita una adaptacin de las bacterias mesfilas comunes para el intervalo de temperatura termfila es imposible.

Los microorganismos se clasifican en "clases de temperatura" en la base de la temperatura ptima y el rango de temperatura de las especies (tabla 3). A partir de la temperatura de superposicin en la tabla anterior es evidente que no hay lmites definidos entre los diversos grupos trmicos. Por otra parte, muchas bacterias no caben en la clasificacin propuesta. Respons Microbiolgicos a los cambios de temperatura Un aumento de temperatura superior a la temperatura mxima de crecimiento de las especies microbianas presentes, conducir a una rpida muerte de la poblacin existente y un crecimiento abundante de los organismos con mayor temperatura crecimiento ptimo. En ltima instancia, toda la poblacin microbiolgica ser reemplazada por uno nuevo. Un cambio en las poblaciones metanognicas, Afeter la temperatura se fij a partir de mesfilos a las condiciones termfilas, ha sido descrita por Visser et al. (1991) y Van Lier (1992). Los microbilogos describen slo muy rara vez una adaptacin de una sola especie a una temperatura de crecimiento ms alto. Por lo general, esto se aplica slo a unos pocos grados centgrados y est vinculado a la presencia de compuestos intracelulares especficos (Hensel y Konig, 1988: Zellner y Kneifel, 1993) o las condiciones ambientales (Pledger et al 1994.). Adems, muy pocas bacterias son capaces de adaptarse a las condiciones de mesfilos termfilas (Wiegel, 1990). Estos, as llamados, termfilos crpticos son capaces de estabilizar los componentes celulares y enzimas a temperaturas ms altas, pero no estn utilizando esta capacidad a temperaturas ms bajas. En contraste con un aumento de la temperatura, un descenso de la temperatura no afectar a las condiciones vitales de una clula bacteriana y, por lo tanto, no conducir a un cambio en las subpoblaciones metanognicas. Sin embargo, una temperatura ms baja tendr como resultado inmediato en las tasas de reaccin ms bajas. No obstante, los lodos de mesfila se puede utilizar afectivamente en condiciones

psicrfilas (vase ms arriba). Lo mismo es cierto para los lodos termfilo en condiciones mesfilas (Van Lier, 1995). El efecto de la temperatura sobre la tasa de crecimiento de las bacterias es un descrito en general mediante el uso de una ecuacin derivada Arrherius reconocer la ocurrencia de un proceso de biosntesis y un proceso de degradacin (Pavlostathis y Giraldo-Gmez, 1991):

En lo que a1 = energa para la biosntesis (K-1, a2 = constante degradacin de energa (K-1), Umax = tasa de crecimiento mxima (da 1), K1 = constante actividad (da -1), K2 = constante de desintegracin (da -1), T = temperatura absoluta (K), XT = factor de correccin de la temperatura (K). En el rango de temperatura por debajo de la temperatura de crecimiento mximo, la ecuacin (2.4) se describe un aumento exponencial de la tasa de conversin al aumentar la temperatura. Ms all de el ptimo temperatue, el crecimiento bacteriano se ve limitada por la alta tasa de deay en el segundo trmino de la ecuacin. La temperatura optima de los diversos grupos trmicos se listan en la Tabla 2.8. Equiation (2.4) se puede resolver analticamente con bastante facilidad. Para T> T opt, el segundo trmino de es insignificante y las constantes 1k y 1a se puede calcular mediante una regresin lineal de la trama semi / logartmica. Las constantes cinticas de la segunda plazo, K2 y a2, as como el factor de correccin de la temperatura (xT) en ambos trminos pueden fijarse utilizando los mtodos de regresin no lineal. Desde equiatiom (4), est claro que una disminucin de la temperatura nunca dar lugar a una prdida irreversible de las clulas bacterianas. Simular al crecimiento, equiation (2.4) tambin se puede utilizar para predecir la dependencia de la temperatura de las tasas mximas de conversiones de sustrato. Las constantes relacionados con la temperatura en la ecuacin (2.4) son intrnsecos a las especies de bacterias y / o, con respecto a las conversiones metanognicas, a la composicin del consorcio methanigenic. Dado que tales consorcio consta de varias especies bacterianas que pertenecen a diferentes grupos trficos, i, e., Metangenos, acetgenos, agentes acidgenos, el efecto real de la temperatura depende, entre otros, en la composicin del substrato, En general, los metangenos son ms susceptibes a los cambios de temperatura de agentes acidgenos .

Microbiologa de los procesos anaerobios termfilos La principal diferencia entre la conversin mesfilas y termfilas de la materia orgnica es la velocidad de reaccin, que es mucho ms alta a altas temperaturas. Para muchas bacterias mesfilas que participan en los procesos de conversin anaerbicas un homlogo thermphilic se puede encontrar. En general, un aumento en la tasa de

crecimiento por un factor de 2 a 3 en thermophilesand encontr entre sus homlogos mesfilas (Van Lier, 1995). Para metangenos hidrogenotrficas casi se alcanza un factor de 10. Por consiguiente, al aplicar el proceso a altas temperaturas el tiempo de digestin puede ser, en principio, sustancialmente reducido, y una degradacin ms completa puede ser logrado. Esto confirma los resultados de varios digestores a pequea y gran escala.

Figura 2.8.- Maximun etilo-la utilizacin de la actividad metanognicas a diversas temperaturas de lodos termoflicos. Una diferencia notable entre la metanognesis mesfilos y termfilos es el nore comnmente observada conversin de acetato no aceticlastic en condiciones de alta temperatura. El acetato es el precursor directo importante para la metanognesis en los sistemas de tratamiento de residuos tanto mesfilas y termfilas, que representa aproximadamente el 70-80% del total de CH4 producido. Basndose en experimentos de trazadores, se concluy que el acetato se divide en una denominada reaccin de aceticlastic en la que el grupo-metil de la molecue Cetate se reducted a CH4, mientras que el grupo carboxilo se oxida a HCO3:

Hasta ahora, slo dos gneros de bacterias metanognicas, es decir Methanosarcina y Methanosaeta (antes Methanothrix), son capaces de catabolismo de etilo para CH4, tanto en condiciones mesfilas y termfilas (Zinder, 1990). Adems de la reaccin anterior, una reaccin de dos etapas se describe en la que el acetato se oxida en primer lugar a H2/CO2, seguido por una conversin posterior a CH4. La reaccin se lleva a cabo por una bacteria homo-acetognica en co-cultivo con un metangeno, y se conoce como la oxidacin de etilo microbiano:

Aunque, la reaccin de dos etapas tambin se observa bajo condiciones mesoflicas, la va alternativa tiene una importancia cada vez mayor al aumentar la temperatura. La oxidacin de etilo microbiano contribuy hasta 15% de acetato total de la metanognesis consume en un termfilo (60 C) digestor. A concentraciones extremadamente bajas de sustrato de la reaccin de dos etapas incluso se convierte en predominante. Por otra parte, lodos cultiva en 55 C reactores UASB pueden consistir en una fraccin relativamente grande de tales microbiano acetato de consorcios oxidante. El papel de la conversin de acetato de no-aceticlastic se vuelve an ms dominante a temperatura superior a 65 C, la cual est ms all del rango de temperatura de los metangenos aceticlastic conocidos hasta el momento. Recientes investigaciones con 75 C lodos usando acetato de C-13 marcada como sustrato demostr que aproximadamente el 95% de la conversin total de etilo se lleva a cabo por la reaccin de oxidacin de etilo microbiano. Estos resultados indican que, en condiciones termfilas extremas, que consumen hidrgeno metangenos son principalmente responsables de la eliminacin de la DQO final a partir de residuos y aguas residuales. Curiosamente, se observ una disminucin de la mesoflico (37 C) a la (2 C) Rango de psychrophilic. Se plante la hiptesis de que la importancia de H2 en los ecosistemas metanognicas aumenta con el aumento de temperaturas desde por debajo de 0 C a ms alto que 100 C.